JPH03135994A - グリコシドビオフラボノイドの水溶性誘導体、その製造方法および関連する医薬品組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明はグリコシドビオフラボノイ ド（ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ　ｂｉｏ自ａｖｏｎｏｉｄｓ）
の水溶性誘導体に関し、特に３．３’、４°、５．７−
ペンタヒドロキシフラボンのルチンおよび５，７，３°
−トリヒドロキシ−４°メトキシフラボンのルチノシド
類の水溶性誘導体に関する。

［従来の技術］ 天然のグリコシドビオフラボノイド（Ｑ）には、血管の
脆性が異常に増大する特徴的な病理学的症状に対する治
療（ビタミンＰ作用）薬として広く用いられているもの
がある。このようなビオフラボノイド配糖類の中のルチ
ンおよびジオスミン（ｄｉｏｓｍｉｎｅ）が属するフラ
ボニツクルナノイド類は、薬剤および化粧品の各分野に
おいて好適に使用される市販の化合物である。

以下に、ルチン、ジオスミンおよびこれらの一部に結合
するルチノースの各構造式を示す。

ジオスミン （ＤＩＯ５ＭＩＮＥ） このような４４造を有するルチンおよびジオスミンにつ
いて簡単に説明する。

（１）ルチン（３，３°、４°、５．７−ペンタヒドロ
キシフラボンの３−ルチノシド）は血管の脆性化を抑制
する特性を有することから治療目的で用いられている。

例えば、皮膚出血、気管内出血および消化器系内出血な
どの症状が顕ねれた血管の脆性化が進行した患者への集
中的な治療に用いると、満足な結果が得られる。

ルチンの適応症としては、増大した血管の脆性および浸
透性によって引き起こされた全ての症状、特にヒ素剤、
サリチル酸塩剤およびＸ線での治療を受けている高血圧
患者の出血症、糖尿病患者の網膜炎、出血性の毛細管拡
張症、出血箇所を特定できない気管内出血症および外科
的措置前の抗出血予防を挙げることができる。

（２）半合成されたジオスミン（５，７，３°−トリヒ
ドロキシ−４°−メトキシフラボンの７−ラムノグリコ
シド）は静脈炎、および静脈瘤、静脈炎の合併症、内外
の痔核、斑状皮下出血症、血腫、紫斑病などの血管の脆
性化状態に対する治療に凝結（ｃｏａｄｊｕｖａｎｔ　
ａｇｅｎｒ）として好適に用いられている。

上述の両物質はさらに解毒剤としてとらえることができ
る。ルチンおよびジオスミンなどのへテロサイドビオフ
ラボノイド類の大半は、通常用いられるアルコール、ア
セトン、酢酸エチル、エーテル、クロロホルム、硫化炭
素、ベンゼンなどの有機溶媒に難溶または実用上不溶で
あり、室温下で水にも難溶であるが、熱エタノール、ピ
リジン、ジメチルホルムアミドおよびアルカリ溶液には
可溶である。

両物質の対水および対脂不溶性は、両物質が生体内で局
所的および全身的に吸収されるのを制限することになる
。この意味で、両物質の経口投与後の生体内での有効性
を改善するための、数種の誘導体がイタリア国において
特許されている。

この特許はフラボン残基（フェノールエーテル類）のフ
ェノール性ヒドロキシル基を含むものであり、これらの
数種の誘導体は現在治療学的に注目されている。

［発明が解決しようとする課題］ 本発明の目的は、ヘテロサイドのグリコシド残基を含む
生物分解性の誘導体を提供することにある。

［課題を解決するための手段］ このような目的を達成するために、本発明の第１の形態
は下記−紋穴を有するグリコシドビオフラボノイドの誘
導体である。

ここでＰはフェノールヒドロキシルを含むフラボン残基
を表し、Ｒｏは水素原子、（ ＣＯ−Ｒ−ＣＯ−０−Ｘ）　、、ただしＸはＨ１薬学的
に受容される塩基のカチオンおよびポリオキシエチレン
グリコール、ポリオキシプロピレングリコールおよびそ
れらの０−モノメチルエーテルのラジカルのうちから選
ばれ、Ｒはジカルボキシル酸のアルキル基またはアリー
ル基である。

本発明の第２の形態は下記工程： ａ）有機塩基の存在下、制御された温度で、かつ反応の
間反応環境を無水に保ち、原料グリコシドへのいかなる
光化学作用をも防ぎながら、グリコシドを脂肪族また芳
香族ジカルボキシル酸の無水物と反応させる工程、 ｂ）得られたエステル−カルボキシル誘導体のフリーカ
ルボキシルを、医薬的に許容される塩基、ポリオキシエ
チレングリコール、ポリオキシプロピレングリコールお
よびそれらの０−モノメチルエーテルめうちから選ばれ
た反応剤と反応させる工程を有することを特徴とする誘
導体の製造方法である。

さらに本発明の第３の形態は活性成分として請求項１な
いし６のいずれかに記載の水溶性誘導体を標準賦型剤と
共に含むことを特徴とする医薬品組成物である。

［作用］ 本発明に係るグリコシドビオフラボノイドの水溶性誘導
体は、生物学的作用を有する反応基としてのへテロサイ
ドのグリコシド残基により、生体中において、数個の生
理学的障壁を介しての吸収および輸送が促進され、かつ
構造が維持され、たとえ構造が変化してもただちに復元
される。生体への取り込み量が多くなるから、ビタミン
Ｐ作用を示す治療薬として好適に使用可能となる。

（以下、余白） ［実施例］ 以下、本発明の実施例を詳細に説明する。

本発明に係わるグリコシドビオフラボノイドの誘導体は
、 一紋穴工 （式中、Ｐはフェノール性ヒドロキシル基を含むフラボ
ン残基を表し、Ｒｏは水素原子、または（Ｃｏ−Ｒ−Ｃ
ｏ−Ｘ）、（ここでＸは水素原子、薬学的に受容可能な
塩基のカチオン、およびポリオキシエチレングリコール
基、ポリオキシプロピレングリコール基およびこれらの
モノメチルエーテル類からなる群から選ばれ、かつＲは
アルキル基またはアリール基である。）で表される。

脂肪族または芳香族ジカルボン酸との間で考えられる上
述の溝造のヒドロキシル基のヘミエステル化は、実際の
ところ遊離カルボン酸官能基が存在する誘導体の生成を
可能にする。

グリコシド分子に導入されるエステル化されたカルボン
酸残基の数はエステル化反応の条件および反応因子（例
えばルチンの場合には１個と１０個の間で変わる）間の
化学量論的な割合に依存して変化することができる。

このようにして得られる生成物は、適当な溶媒中での浸
透圧測定によって決定され得る平均分子量（藷）に対応
した数段階の作用を示す化合物の混合体である。最も都
合のよい反応条件（実施例参照）下における上述のエス
テル化反応は、このエステル化されて得られる誘導体に
おいて、フェノール類塩化第二鉄との反応が塩基性のま
まであるという事実によって立証されるように、グリコ
シド残基の脂肪族ヒドロキシル基を必要とする。

また、上述のエステル化反応による生成物の紫外線吸収
スペクトルは、ビオフラボノイドＱの発色団の特性を維
持している。これは、薬理学的見地から有益である。フ
ラボン残基は、このフラボン残基が結合した受容体との
中間反応における反応性、その中間反応後の生物学的活
性としての反応性をそれぞれ有している。実際のところ
、本発明に係わる誘導体による数段階の作用は主にビオ
フラボノイドの生物に対する有効性を阻害せず、かつそ
の生物に対する有効性に薬学的解答を示す形での影響を
及ぼす。

このように導入されたエステル残基における遊離カルボ
キシル基の存在により、本発明に係る新規誘導体の一方
のサイドにおいて、水溶性塩（例えば、ナトリウム塩類
）が可能となり、かつその新規誘導体の他方のサイドに
おいて適当なキャリアである同じカルボキシル類に化学
的に結合することが可能となる。このキャリアは全身お
よび局所的に働く毒を解毒することで知られているポリ
オキシエチレングリコール類、ポリオキシプロピレング
リコール類またはこれらのＯ−モノメチルエーテル類（
以下、ＰＥＧと略す）の中から選ばれる。

ジカルボン酸が活性物質のヒドロキシル基とＰＥＧ自体
の末端ヒドロキシル基との間で形成された非対称形のビ
スエステル架橋体の機能を有する、Ｉ’ＥＧとエステル
化した誘導体については、工業的製造方法の利点を除い
て特に生物に対する有効性の利点が得られる。

ここで、本発明に係わる誘導体の機能を説明する。

（１）得られた生成物は水溶性と脂溶性を同時に発揮す
る。

（２）エステル化されたポリエーテル（ＰＥＧ）は、皮
膚を含む生理学的障壁を通しての吸収過程においてキャ
リアとして機能する。

（３）生体内において、ジカルボン酸とビスエステルの
一方の側に位置する活性元素のヒドロキシル基との非対
称形のビスエステル結合、およびジカルボン酸とビスエ
ステルの他方の側に位置する１個のＰＥＧの末端ヒドロ
キシル基との非対称形のビスエステル結合はそれぞれ酵
素により切断される。これにより、本来的に薬理作用を
示す部位がゆるやかにかつ徐々に露出してその薬理作用
を示すようになる（薬理作用の遅延効果）。生理学的障
壁の大半を通して活性元素の輸送を容易ならしめること
によって、キャリア（ＰＥＧ）は、通常はビオフラボノ
イド類の影響を受けない器官の一部に到達できる。

本発明に従う誘導体は、例えば次の工程により製造され
る。

ａ）有機塩基の存在下であって、反応温度および反応時
間が制御された条件下で、グリコシドと、脂肪族または
芳香族ジカルボン酸とを反応させる。

このとき、反応環境は無水状態とされ、出発物質のグリ
コシドに対するいかなる光化学的反応は妨げられる。

ｂ）　　　ａ）で得られたエステル−カルボキシル誘導
体の遊離カルボキシル基と薬学的に受容可能な塩基類、
ポリオキシエチレングリコール類、ボリオキシプロピレ
ングリコール類およびこれらのモノメチルエーテル類の
中から選択された反応因子とを反応させる。

薬学的に受容可能な塩基との反応の場合、カルボキシル
誘導体からこれに対応する水溶性塩への変換は水溶液中
で行うことができる。水溶性塩が無機塩の場合は、重炭
酸塩、炭酸塩、水酸塩（例えばナトリウム塩が好ましい
）から選択される。続いて、濃縮後に、溶媒または添加
物としてのアセトンまたはアルコール類の蒸留を行う。

有機塩の場合は、適当な溶媒中でアルコールを直接添加
することによって反応を起こさせる。

上述のエステル−カルボキシル誘導体の遊離カルボキシ
ル基とポリエステル類（ＰＥＧ）とのエステル化反応の
結果は、その反応が通常よく知られた大半の方法で行わ
れるならば、好ましいものとはならない。反対に、上述
のエステル化反応は、変換試薬として作用するカルボキ
シル誘導体の活性アミド類（イミダゾリド、ペンシトリ
アゾリドなど）を使用することによって良い結果が得ら
れる。

本発明に係る誘導体の合成経路を説明する。

（１）　　ビオフラボノイド配糖体（Ｑ）のアルコール
性ヒドロキシル基のヘミエステル化反応（ｈｅｍｉｅｓ
ｓｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　）または市販のポリオキシ
エチレングリコール類およびポリオキシプロピレングリ
コール類またはこれらのモノー〇−メチルエーテル類の
アルコール性末端ヒドロキシル基のモノヘミエステル化
反応（ ｍｏｎｏ−ｈｅｍｉｅｓｔｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ）　
　（反応ＡおよびＢ）。

（２）　　ビオフラボノイド配糖体のポリヘミエステル
類の対応水溶性塩への変換（反応Ａの第２工程）。

（３）　　ＰＥＧのヘミエステル類の対応無水物への変
換（反応Ｂの第２工程）。

（４）　　ビオフラボノイド配糖体のポリヘミエステル
類の、対応活性アミド（この例ではイミダゾリド）の中
間体形成を通じてなされたＰＥＧとの非対称形のビスエ
ステル類への変換（反応Ｃ）。

（５）　　ＰＥＧのヘミエステルの活性アミド（この例
ではイミダゾリド）の形成工程を経由したＰＥＧおよび
ビオフラボノイド配糖体のアルコール性ヒドロキシル基
と、ジカルボン酸の上述の同様の非対称形のビスエステ
ル類の製造（反応Ｄ）。

ＰＥＧヘミエステルが１モル回収されたビオフラボノイ
ドＱとＰＥＧヘミエステルとの反応工程を経たＰＥＧお
よびビオフラボノイド配糖体のアルコール性ヒドロキシ
ル基と、ジカルボン酸の上述の同様の非対称形のビスエ
ステル類の製造（反応Ｅ）。

（以下、余白） （合成経路） 反応Ａ Ｑ−（Ｃｏ−Ｒ−ＣＯＯＨ）。

Ｑ−（ＣＯ−Ｒ−ＣＯＯＭ）１１ 反反応 ＰＥＧ−０−Ｃｏ−Ｒ−Ｃｏｏｌ ＣＣＩ （ＰＥＧ−０−Ｃｏ−Ｒ−Ｃｏ）　、０反応Ｃ Ｑ−（Ｃｏ−Ｒ−ＣＯＯＨＩｌｌ （１−（ＣＯ−Ｒ−ＣＯ−１ａ＋ｉｄ、）。

Ｑ−（ＣＯ−Ｒ−ＣＯ−０−ＰＥＧＩｌ１反応Ｄ ｎ　ＰＥＧ−０−Ｃｏ−Ｒ−ＣＯＯ）ｌ　＋　ｎ　ＣＤ
ｌ−ｍ−ｎ　ＰＥＧ−Ｑ−ＣＯ−Ｒ−Ｇｏ（＋ａｉｄ。

Ｑ−（Ｃｏ−Ｒ−Ｇｏ−０−ＰＥＧ）ｌｌここで、 ＰＥＧは、ポリオキシエチレングリコール類またはポリ
オキシプロピレングリコール類およびこれらのモノー〇
−メチルエステル類であり、Ｑはルチン（Ｒ）、ジオス
ミン（Ｄ）または他のグリコシドフラボノイドであり、
Ｒ−は、ジカルボン酸無水物のアルキルビラジカルまた
はアリ−ルビラジカルであり、ＤＣＣＩは、ジシクロへ
キシルカルボジイミドまたは脱水作用を有する対応化合
物であり、ＣＤＩは活性アミドの形成に適したカルボニ
ルジイミダゾールまたはその関連化合物であり、Ｍ−は
、薬学的に受容可能な塩のカチオンまたはラジカルまた
は有機塩基であり、およびＸは、水酸基、適当な有機溶
媒中でのイオン交換反応に適したカルボン酸の７ニオン
である。

反応Ｅ ｎ（ＰＥＧ−０−ＣＯ−Ｒ−ＧＯ）＊０　　＋　Ｑ−ｍ
−Ｑ−（Ｃｏ−Ｒ−Ｃｏ−０−ＰＥＧ）ｎ反応Ａ ざらざらした、もしくは艶消しの首部を有し、還流冷却
器と遮光処理されたフラスコで、適量のへテロサイドＱ
　（０，０５モル）をＣａ５Ｏ，により無水物としたジ
メチルホルムアミド（ＤＭＦ　；　２００ｍｇ）中にマ
グネチックスターラーを用いて溶解し、これを選択され
たジカルボン酸（ＧまたはＳ）の内部無水物の１０倍モ
ル量（０，５モル）で処理し、さらにＣａＳＯ４により
無水物としたピリジン（Ｐｙ）の１０００倍モル量（０
，５２５モル）で処理した。還流冷却器を備え、外部の
湿気から小型の５ｉｋｋｏｎｐｉｐｅを有する閉包手段
によって隔離した前記反応フラスコを、５５〜６０℃に
加熱されたシリコーン浴中に浸す。

前記混合物の反応を、前記温度で３６〜４０時間一定の
撹拌下に維持し、最後の４〜６時間室温下で徐々に放冷
する。冷却した溶液は、一定の撹拌下でゆっくりと氷塊
の入ったビーカー中に注ぎ、濃ＨＣｅ　Ｏｋ−１８００
ｍｅ＋　ＺＯＯｍｅｆ）３１％　ＨＣｅ　：　最終的に
ＩＮ溶液となる）により酸性化した。タール状の全黄色
生成物が分離きれ、この生成物は蒸留水の分液（３Ｘ　
３００ｍｇ）で分離、上溝除去を行って洗浄し、水（３
００ｍｇ）で処理し、さらに撹拌下で重炭酸ナトリウム
（３０ｇ　：　０．３５モル）でガス発生が止まるまで
処理し、完全に溶解する。その結果得られた溶液を、室
温で３０分間撹拌して脱ガスシ、濾過Ｌ、３７％ＨＣｅ
　Ｃ３５ｍｅ、　０．３５モＡｙ）を用い（発泡もしく
は泡立てによって）、注意して酸性とする。このような
ｐＨ（１以下）において、再びタール状生成物が沈澱す
る。この生成物は再び蒸留水の分液（３ｘ　２００ｍｇ
）によって洗浄し、メタノール（２００ｍｆｆ）中に溶
解し、Ｎａ、ＳＯｌにより無水物とした。このメタノー
ル溶液は、艶消しの首部を有するフラスコ中に濾別し、
５５℃±３℃の湯浴に置いて真空（Ｒｏｃｔａｖａｐｏ
ｒ）下で乾燥する。そして、生成物を、アセトンに溶解
し所定の温度で真空下に蒸発乾燥させる数多くのａｎｉ
ｄｒｙｆｙｉｎｇ工程に処する。そして、石油エーテル
下で加温条件（５５℃）で消化し、Ｒｏｃｔａｖａｐｏ
ｒ（１５６０℃）中で溶媒の除去することによって、生
成物が半結晶体形態となるまで、上清み除去（２〜３回
石油エーテルのｔｓｏｍＪで）により溶媒を除去し、分
離する。同様の温度で高真空（ｏ、　１ｍｍ／Ｈｇ）下
で一定の重量になるまで乾燥することにより、黄色の半
結晶体で低融点な生成物を得る。収率；理論値の７０〜
８５％。

前記生成物を、定性的かつ半定量的に、ＤＭＳＯ−ｄ、
を用いた核磁気共鳴のスペクトルにより特定し、ＦｅＣ
ｌ！、　（フリーフェノール性ＯＨ）との正反応により
特定し、９５％エタノール溶液中で、ビオフラボノイド
Ｑ中に存在する同じ発色団の存在により規定されるＵＶ
および可視領域における分光光度曲線のパターンとによ
り特定する。

本発明の付加生成物とビオフラボノイドとの０、ｌＮａ
ＯＨ中におけるＵＶスペクトルの比較をすると、両方と
も２８０〜４００　ｎ　ｍのスペクトル領域における同
一のスペクトル変形を示す。これらのスペクトル変形は
フラボンのへテロ環のアルカリ開環（カルコン誘導体の
生成）の特性である。これは、誘導体化工程中、発色お
よび ｐｈλｒｍａｃｏｐｈｏｒｉｃ活性の反応を有する分子
残基の変性が生じないことを示してνする。

前記反応生成物の定量的特定は、フリーカルボキシル官
能基の滴定（エタノール溶液：滴定試薬　０．１ＮａＯ
Ｈ；指示薬　フェノールフタレイン）から行い、ＵＶお
よび可視光範囲での吸収ピークの分光光度線量とから行
い、そして、９５°エタノール溶液と０．ｌＮａＯＨ溶
液の両方において、３０分間、浸透圧法による平均重量
（ＰＭ）の決定によって行う。

前記ポリカルボキシル誘導体の適量（０，０２モル）を
、フラスコ中の無水エタノール（ｔｇｏｍ／）中に溶解
し、室温で充分に撹拌した状態で漏斗を用いて滴下する
ことにより、水（２ｏｍｇ）に溶解した化学量論的に当
量なＮａＯＨ（タブレット）に加える。

撹拌を一定に維持することにより、また、漏斗により滴
下することにより、適量のア七トン（４００ｍＪ）をゆ
っくり（２０分間）加える。前記ナトリウム塩を分離し
、ブフナー上に濾別し、アセトン／無水エタノールの２
／１溶液によって洗浄し、強制空気循環の加熱装置中で
９０℃、８時間乾燥し、乳鉢中で粉化した。その結果、
得られた生成物は、黄色の粉状物で、水に易溶で、実際
上はとんどの公知の有機溶媒に不溶である。収率は実際
上、理論的収率である。

また、塩化は脂肪族の酸のナトリウム塩とカチオン交換
反応によって実行することができ、それによって生成物
は無水物型有機溶媒（ヘキサン酸ナトリウム）に可溶と
なる。提示の実施例によれば、ナトリウム塩Ｄ−３−Ｃ
ＯＯＮａ　（表１の組成物１０参照）は、メタノール（
３０ｍｆｆ）中に溶解（０，００２モル）することによ
り、過剰（０，０５モル）なカプロン酸ナトリウムをメ
タノール溶媒（３０ｍｅ）に溶かした溶液で５０℃で処
理する−ことにより得ることができる。加温状態で約２
０分間撹拌後、混合物は真空（Ｒｏｃｔａｖａｐｏｒ）
下で乾燥して無水エタノールにより収集し、この混合物
を撹拌しながら沸騰し、１５分間還流する。加温状態で
、ブフナー上に濾別し、加熱無水エタノールの分液（３
Ｘ１５ｍｆｆ）で洗浄して、生成物を高純度で得る。

塩化収率は理論値の９５％以上である。

エタノールの濾過、真空による蒸発、乾燥、ＮＨＣｅに
よる補集、エチルアセテートによる抽出が、抽出溶媒の
蒸発により、カプロン酸の理論的回収率を実際的に許容
する。

前述のグルタル酸ポリヘミエステルおよび／またはコハ
ク酸ポリヘミエステルのナトリウム塩の溝造は、Ｄ、０
を用いた核磁気共鳴測定から明らかになり、Ｆｃｃｅ、
を用いた正反応により、ＣとＨの百分性分析法（ｃｅｎ
ｔｅｓｍａｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ）により、Ｎａ骨格を
用いた分光光度的分析により、０．ｌＮＮａＯＨ溶液の
ＵＶスペクトルパターンにより、そして活性物質Ｑのパ
ーセンテージのＵＶおよび可視範囲における分光光度線
量のより明らかになる。

反応Ｂ すりガラス状の栓を有する２０００ｍｅフラスコに、０
．２モルのＰＥＧがクロロホルムを全く含まないＥｔＯ
Ｈ８００ｍＪ中に溶解し、ＣａＨ，により無水物とし、
グルタル酸無水物（Ｇ）またはコハク酸無水物（Ｓ）の
０．４モルにより処理し、さらにＮａ、ＳＯ２により無
水物としたピリジン（Ｐｙ）の０．４モルにより処理す
る。同じガラスピーズを加えた後、反応混合物を、外部
流路の温度が６０℃以上にならないように注意しながら
、２４時間還流する。それで、溶媒は真空中で乾燥する
まで蒸発（外部浴温度二６５℃±３℃）することにより
回収され、残渣は脱イオン水の６００ｍｅにより収集さ
れる。室温で一定に撹拌しながら、この水溶液を炭酸ナ
トリウムの＋２．２ｇ　（０，４モル）に加え、３０分
間撹拌し、５℃に冷却した後、１００ｍｅの３７％ＭＣ
Ｉ（１，０モル）に加える。この酸性溶液をクロロホル
ム１５０ｍＪにより３回抽出する。このクロロホルム抽
出液を２００ｍ　ｅの水により３回洗浄し、Ｎａ、ＳＯ
２上で無水物とする。真空引きにより溶媒を除去するこ
とによって、油状の無色もしくは若干黄色味を帯びた残
渣が得られる。これを石油エーテルまたはりグロインの
１００ｍｇにより３回上清除去によっで加温状態で洗浄
し、一定の重量になるまで高真空（０，１ｍ　ｍ　／　
Ｈｇ　）下で乾燥し、所望のヘミエステルであるか（Ｃ
ＤＣｇを用いた核磁気共鳴スペクトル法により）同定す
る。

浸透圧法による平均ｉａ量（ＰＭ）の決定と、エタノー
ル／水＝１／ｌ中で、ｌＮａＯＨとフェノールフタレイ
ン（指示薬）による滴定とによりヘミエステルの最大純
度（純度：　９９．２〜１００．５％）を決定する。

０．０８４モルのヘミエステルｌまたは３をアセトンの
１６０ｍ１中に溶解し、ＣａＳＯ４により無水物とし、
撹拌しながら４０ｍｇ無水アセトン中に溶解した８、２
　（０，００４モル）のジシクロへキシルカルボジイミ
ド（ＤＣＣＩ）で処理した。反応フラスコを５ｉｋｋｏ
ｎパルプにより外湿気から隔離して、この混合物を室温
で１２時間撹拌しつづけ、その後、沸騰が始まる温度（
約５５℃）まで昇温し、２４時間以上加熱して、混合物
を最後の４〜５時間室温にて放冷する。分離されたジシ
クロヘキシル尿素をプラナ−上に濾別することにより除
去し、アセトンにより洗浄し、加熱装置により８０℃で
乾燥し、その重量は半定量法により反応の完了度合を示
す（指示された実験条件下では、ヘミエステルの９２〜
９６％が無水物中に回収される）。このアセトンの濾過
物は、真空下６０℃で乾燥され（溶媒回収）、残渣は加
温条件で１００ｍｊ？の石油エーテルで２回上清除去に
より洗浄し、その後、重量一定となるまで高真空（０，
１ｍ　ｍ　／　Ｈｇ　）下で乾燥する。この無色または
わずかに黄色を帯びた残渣油は、ＰＥＧヘミエステルの
技術的無水物であり、実用上充分な純度（９２〜９６％
）を有しており、これ以上の精製を必要とせず、反応式
１に記載したアシル化において、主な純度は本発明で開
示された合成工程の妨害をしない。この生成物の核磁気
共鳴測定と、浸透圧法によるそれらのＰＭの決定により
、それら生成物の構造を決定し、半定量法によりそれら
の純度を決定する。

ヘテロサイドビオフラボノイドのグルタル酸遮光され、
還流冷却器を有するとともに、ＣａＳＯ４バルブ手段に
よって外湿気がら隔離されたフラスコ中で、反応Ａから
得られた０、０２モルのポリヘミエステルをＣａＨ，に
よって無水物としたジメチルホルムアミド（ＤＭＦ　：
　１２０〜２００ｍｅ）に溶解し、室温で０．０１２モ
ル（１９，５ｇ　）のカルボキシジイミダゾール（ＣＤ
Ｉ）で分液処理する。アミド生成反応物の添加が完了し
た後、溶液を室温で撹拌しながらガス発生が止まるまで
維持し、それによって脱ガスしく約３０分間）、その後
、ＣａＨ。

またはＣａ５４により無水物とした０、２モル（７０ｇ
）のポリオキシエチレングリコール　３５０−０−メチ
ルエーテル（ＰＥＧ）を添加する。そして、この反応フ
ラスコを５５℃±３℃に加熱したシリコーン浴に浸し、
撹拌しながら前記温度に２４〜３６時間維持し、最後の
４〜５時間は加熱を中止する。この冷却した反応混合物
を８００ｍ１の氷塊に注ぎ、２００ｍｅの３７％ＨＣｌ
！を加えて酸性とする（最終溶液は約２Ｎとなる）。こ
の酸性溶液は２００＋　１５０ｍｅのクロロホルムまた
はメチレンクロライドにより２回抽出し、有機層はｚｘ
ｔｏｏｍｇの飽和ＮａＣｅ溶液によって洗浄し、ＣａＳ
Ｏ４により無水物とする。すりガラス状の栓を有するフ
ラスコに濾別した後、塩素化溶媒を除去し、真空下で回
収し、５５℃で乾燥する。その結果、赤茶色油が得られ
、２００ｍｅのＥ【、０で加熱撹拌、上溝除去により３
回洗浄し、各回ごとに混合液を真空下５５℃で乾燥する
。同じようにして、石油エーテル１５０ｍＪの２分液に
て行う。

最後に高真空（ｏ、ｘｍｍ７Ｈｇ）下５５℃で重量一定
となるまで処理して、粘稠な赤茶色油を得る。または、
前記塩素化有機溶媒の除去後に得られた赤茶色油を次の
ようにして精製してもよい。赤茶色油を３００ｍｆｆの
脱イオン水に溶解し、クロロホルムまたはメチレンクロ
ライド（２Ｘ　ｔｓｏｍｅ）のよる水層からビス−エス
テルを抽出し、ＮａＣｅ飽和溶液（２Ｘ１００ｍｌりに
より塩素化有機層を洗浄し、Ｎａ、ＳＯ２により無水物
として塩素化溶媒を除去し、最終生成物を前述のＥｔ２
０および石油エーテルにより洗浄する。この第２の精製
法は、ＰＥＧのヘミエステルまたは無水物により著しく
濃縮した反応精製物の場合において、より一層有効であ
る。

ビス−エステルの収率は理論値の７０〜８５％である。

得られた非対称ビス−エステルの構造は、次の手段によ
り確認する。ｃｏｃｆｆ、および／またはＤＭＳＯ−Ｄ
、を用いたＮＭＲスペクトルにより、ＥｔＯＨ溶液を用
いたＵＶおよび可視範囲における分光光度曲線のパター
ンと０．　Ｉ　Ｎ　ＮａＯＨの溶解後の最初の２０分間
における２ｇＯ〜４００　ｎ　ｍ範囲でのスペクトル変
形により、Ｆｅｃｅ、　（フリーフェノール性ＯＨ）を
用いた正反応により、可能なフリーカルボキシル残渣の
アルコール性環境での滴定（滴定試薬：０．ｌＮＮａＯ
Ｈ：指示薬：チモールブルー）により確認する。平均分
子ｆｆｉ（ＰＭ）を決定し、ＵＶおよび可視範囲におけ
る吸収ピークに対応する波長λａｎａｌでの分光光度測
定により活性主成分含量（Ｑ％）を決定することによっ
て、反応生成物の構造を定量的に特定する。

反応り 成 反応Ｃで説明した操作に従い、溶媒および反応物のプロ
ポーショナルな分量を用い、０．１１モルのＣＤＩによ
り処理し、その後、０．０１モルのグリコキシドビオフ
ラボノイドＱにより処理する（ＲまたはＤ）。

得られた生成物の構造は反応Ｃで説明したと同様に特定
する。ＰＭを決定し、前記２つの組成物の異なった組成
の混合物におけるＱ％を決定することによって構造を特
定し、さらにアセトン／クロロホルム／酢酸を４．５／
４．５／１に混合した溶媒を用いて、シリカゲル平面に
よりなされるＴＬＣクロマトグラム測定によって特定す
る。

反応Ｅ 反応Ｃで説明した操作に従い、０．０２モルのＰＥＧヘ
ミエステル無水物をＤＭＦに溶解し、０．０２モルのへ
テロサイドビオフラボノイドによって処理する（Ｒまた
はＤ）。

反応生成物の特性は反応Ｃで説明したと同様にして得ら
れ、３つの異なった合成経路により得られた非対称なビ
ス−エステルの同定は、ＰＭを決定し、前記３つの組成
物の異なった比率の混合物におけるＱ％を決定すること
によって行い、さらに反応りに示された実験方法により
なされるＴＬＣクロマ）ダラム測定によって行う。非限
定的な例〈表１参照）において、主要化学−物理特性と
一般的合成反応は、次の調製用に採用したものである。

すなわち、ゲルタン酸およびコハク酸を有するポリオキ
シエチレングリコール　３５０−０−メチルエーテルの
ヘミエステル（組成物ｌおよび３）とその無水物（組成
物２および４）の調製と、ルチンおよびジオスミンのア
シル化により得られるグルタル酸ポリヘミエステルおよ
びコハク酸ポリヘミエステル（組成物５．６および７）
の調製と、ポリオキシエチレングリコール　３５０−０
−メチルエーテルを有するとともにルチンまたはジオス
ミンを有し、反応経路図に示された３つの合成経路Ｃ−
Ｄ−Ｈに従って操作することにより得られるグルタル酸
およびコハク酸の非対称ポリ−ビス−エステル（組成物
１１．１２．１３および１４）の調製。

（以下、余白） 表１（ル ングリコール３５０＋メチルエーテル（ＰＥＧ）’との
反応によりて得られたｆ氏１合誘導体の主要化合物 ＰＨ１ｒ−Ｇ−Ｑ）０１１ （ＰＥＧ−Ｇ−ＣＯ）４ ＰＥＧ−Ｓ−Ｑ）ＯＨ （ＰＥＧ−３−Ｑ））　ｔ。

Ｒ棒べ方Ｔ −５４ｎ４ Ｄ−Ｓ−Ｃｘｎ４ Ｒ−５−Ｑ）ＯＮａ −３ａ 恥。

構造式 動シ匠※昏りＦ（αよ）「■ｌ ［ＩＡｅＯ−陀Ｒｘ）（ＧＩＮ）　ｍ−■１８０動か田
ｎ（αＪ　ｍ−■ｌ ［蘭Ｈ追ｘｘ）（ＧＩＪ　ｒ（Ｉ）ｌ　ｇ。

Ｒ−［Ｑ）　（Ｑ（Ｊ　ａ−■１１゜ １）　（）（ＯＩＪ　５（Ｘ）０１４１　ｍト（αＨ１
オーａ（ｒ■Ｏｔ＋）Ｓ Ｒ−［（Ｘ）−（ＣＨａ）　ａ鴫１゜ Ｄ−［ＣＤ−（Ｇ１．）、−（）η魁ｌ。

イし１とテ（ （平均分子ｌ 計算値麹１値１ （グ針ン） Ｃ電・ＨｓＪｈ＋ Ｃ，Ｊｌ、、Ｏ□ Ｃ１ＪＩ−ｓＯ１＋ Ｃ婁−ｔａ＊Ｉ Ｇ＠重Ｈ，、Ｏ，鳳 ｃ４ａＨｓ＠Ｏｓｓ ＣｗＪｓ４ｓｓ ＣｉＪｓｓＯｓＩＮａ＠ Ｃ５ａ）ｌａＪｓｓＮａａ ５４ ９０ ４０ ２ １．１ｇ０ １．２９３ １．２０９ １、３１０ １．４２５ ５３ １ ２６ ５３ １．１？９ １．２フ０ １．２１９ Ｑ％（紫外Ｗの　　　　　　外観および溶解性　　　　
　　　合成反応計算値製置１ 無色粘稠油：＆Ｏと一般の有機溶媒に可溶無色粘鶴油：
Ｈ−に難治、一般の有機溶媒に可溶無色粘鶴油：Ｈ−と
（の有口η頴■こ可溶無色粘稠部；Ｈ８０に難溶、有様
溶媒に可溶水に可溶、一般の用見官Ｉこ不溶 本発明の化合物について、−面ではその毒性を、他面で
はその活性を評価するために医薬的な試験を行った。活
性（ａｃｔｉｖｉｔｙ）は、以下の関連する特別な試験
によって原料ビオフラボノ、イドと比較して決定した。

毒性に対しては、等分子量の投与でＬＤ５０を計算した
。すなわち、１０００ｍｇのルチン約５０００ｍｇのエ
ステルに相当することを考慮して計算した。

（以下、余白） ７　　ｓｏｌｏｌ　Ｃ１ｔ　−ｍｔ　　：Ｉ　　”：ｌ
　　：＋　　：＋　　＝＋１）ジャルロニダーゼ（ｊａ
ｌｕｎｒｏｎｉｄａｓｅ）によるエバンスブルー（Ｅｖ
ａｎｓ　Ｂｌｕｅ）の拡散方法 試験は体重２００〜２５０ｇの４群のスプラーグーダウ
レイラット（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ　ｒａｔ）
について行われた。

投与１時間後、動物はエチルウレタン（１，２６ｇ／ｋ
ｇ　ｉ、ｐ、）で麻酔された。ついで、１％エバンスブ
ラウン０．１ｍ１ｓその中には７５国際単位のジャルノ
ニダーゼが含まれている、を予め定められた対称な２箇
所に接種するために腹部が脱毛された。

接種の１時間後にジャルロニダーゼによってもたらされ
た着色化合物の拡散面積が決定された。着色された部分
の輪郭が透明な紙に写され、その面積から定量的な計算
が行われた。

結果 接種の１時間後、平方ミリメータで表された拡散面績の
値は、前４置された動物では減少していることが発見さ
れた。特に試験化合物で前処置された動物は対称動物に
比べて減少した。

２）ラットにおけるヒスタミンによる浮腫方法 毛管内皮に対して活性で水および血漿蛋白質をより多く
透過させることが良く知られているヒスタミンの溶液（
１ｍｇ／ｍｇ）をラットの足の裏に投与したために生じ
る浮腫に対する試験化合物の減少能力を評価する試験を
行った。

体重２００〜２５０ｇのスプラーグーダウレイラットの
４群が試験に用いられた。

投与の３０分後に、ラット１回当たり０．１ｍ／’のヒ
スタミン溶液が接種された。

脚の体積の変化が血管内血量計（ ｐｌｅｔｉｓ　ｍｏｍｅｔｅｒ）によって測定された。

動物の各界について脚の初期体積が測定され、（ＶＯ）
　、ついで試験化合物が上にしめされた様に投与された
。ヒスタミン接種の１時間後に脚の体積が再び測定され
た（Ｖｌ　−ＶＯ＝Δ■）。

３）兎の目の炎症 ＮａＯＨの０．ＩＮ溶液の点滴によって生じた兎の目の
炎症について、本発明による化合物のいくつかを１４日
間１００ｍｇ／ｋＨの原料ビオフラボノイド（ルチンま
たはジオスミン）に相当する投与量で前処置して予防効
果を調べた。

評価は眼房水中の血漿蛋白質および白血球の数を調べる
ことによって行われた。表３および４に実験結果を示す
。

表３ 眼房水中の蛋白質濃度（ｍｇ／ｍｌ２）処置された動物 右眼　　左眼 Ｒ−Ｇ−ＣＯＯＮａ　　３．９５　　２．８４Ｄ−Ｇ−
ＣＯＯＮａ　　４．３　　３．０Ｒ−Ｇ−ＰＥＧ　　　
４．２７　　２．９３Ｄ−Ｇ−ＰＥＧ　　　４．３４　
　２．８８（平均値） 対照動物 右眼　　左眼 ６．４２　　３．０ｇ ６．３　　２．９５ ６．６　　３．１５ ６．４５　　２．８７ （以下、余白） 表４ 眼房水中の白血球（平均値） 処置された動物　　対照動物 右眼　　左眼　　右眼　　左眼 ２９９５　　１６４８　　６１３９　　１６８３３２４
８　　１６３５　　６１１５　　１６１５３２２４　　
１６２９　　６０９３　　１７１２３４７６　　１６８
９　　６０４５　　１７５４Ｒ−Ｇ−ＣＯＯＮａ Ｄ−Ｇ−ＣＯＯＮａ Ｒ−Ｇ−ＰＥＧ Ｄ−Ｇ−ＰＥＧ ４）静脈趨向活性（Ｐｈｌｅｂｏｔｒｏｐｈｉｃ　ａｃ
Ｉｉｖｉｔｙ）化合物Ｒ−Ｇ−ＣＯＯＮａ、Ｄ−Ｇ−Ｃ
ｏｏ−Ｎａ１Ｒ−Ｇ−ＰＥＧおよびＤ−Ｇ−ＰＥＧが、
４％の原料ビオフラボノイドに相当する活性成分の量を
含むゲルの形で、また原料２００ｍｇのビオフラボノイ
ドに相当する活性成分の量を含むカプセルの形で作られ
た。試験は年令４７オから７６オまでの１０人の自発的
な患者、およびブリバリコシス（ｐｒｅｖａｒｉｃｏｓ
ｉｓ　５ｔａｔｅｓ）および静脈瘤症（ｖａｒｉｃｏｓ
ｉｓ　５ｔａｔｅｓ）に侵された患者、の４群について
行われた。症状は次の尺度によって評価された。

尺度 なし 軽度 中度 重度 セルの投与および局所的に１日３回のゲル塗布によって
行われた。

全ての症状は中度または重度と分類された。

処置が終った時、全ての症状は”なし°°または”軽度
“と分類された。

５）婦人科の対炎症活性（Ｇｙｎａｅｃｏｌｏｇｉｃａ
ｌａｎｔｉｆｌｏｇｉｓｔｉｃ　ａｃｔｉｖｉｒｙ）生
殖器官の炎症および／または異常（ ｄｉｓｔｉｆｌｏｇｉｓｔｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ）に
かかっている６人の自発的は患者（年令２２才から５８
才）について、以下の組成のローション（１５０ｍ１）
で１０日間処置を行なった。

組成 Ｒ−０−ＰＨ０４ｇ 塩化ベンザルコニウム　　０．０２５　ｇ香料　　　　
０．０５　ｇ 脱塩水　　　ｔｏｏｇ 処置は３週間または６週間の間、毎日２カブ処置が終っ
た時、炎症はなくなっていた。

従って、本発明による化合物は婦人の生殖器官の炎症お
よび異常、膣炎（ｖｕｌｖｏ　ｖａｇｉｎｉｔｅｓ）お
よび子宮顎管炎（ｅｘｓｏｃｅｒｖｉｃｉｔｅｓ　）、
出産時の内部衛生（ｉｎｔｉｍａｔｅ　ｈｙｇｉｅｎｅ
）および外科的婦人科の介入の前後の予防に対して活性
である。

６）微少血行（ｍｉｃｒｏｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ）に
対する活性 フエルチゴ（ｆｅｒｔｉｇｏ）　ｓ知能障害（ｍｅｎｔ
ａｌｄｅｔｅｒｉｏｒａｔｉｏｎ）　、記憶および集中
力の欠如の様な脳血管性不全（ｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃ
ｕｌａｒｉｎｓｕｆｆｉｃｉｅｎｃｙ）脚の痛みを伴う
けいれん、冷却感の様な抹消の微少血行障害にかかって
いる４人の自発的な患者（男性２人、女性２人、６６オ
から７９才まで）に対して、ルチン２００ｍｇに相当す
る量の活性成分Ｒ−Ｇ−ＰＥＧを含むカプセルを６０日
間、毎日２カプセル投与して試験した。

治療は脳血管性不全の症状が減少史、関連する機能が改
善されることを示した。同時に皮膚および脚の栄養状態
が改善され、痛いけいれんもなくなった。

本発明による医薬品組成物は経口使用（カプセル、錠剤
、溶液）　Ｂの口うつし使用（ｐａｒｅｎｔｏｒａｌ　
ｕｓｅ）および局所的な使用の形態が考えられる。

それらは通常の医薬技術によってまた標準的な賦形剤（
ｅｘｃｉｐｉｔｅｎｔｓ　ａｎｄ　ｖｅｈｉｃｌｅｓ）
を用いて作ることができる。

単位の投与量および薬量および原料ビオフラボノイドに
ついて知られており、かつ使われている数量に相当する
。

［発明の効果］ 以上説明したように、本発明に係るグリコシドビオフラ
ボノイドの水溶性誘導体は、生物学的作用を有する反応
基としてのへテロサイドのグリコシド残基により、生体
中において、数個の生理学的障壁を介しての吸収および
輸送が促進され、かつ構造が維持され、たとえ構造が変
化してもただちに復元される。また、生体への取り込み
量が多くなるから、ビタミンＰ作用を示す治療薬として
好適に使用可能となる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）下記一般式を有するグリコシドビオフラボノイドの
   誘導体： ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｐはフェノールヒドロキシ ルを含むフラボン残基を表し、Ｒ′は水素原子、（ＣＯ
   −Ｒ−ＣＯ−Ｏ−Ｘ）＿ａ、ただしＸはＨ、薬学的に受
   容される塩基のカチオンおよびポリオキシエチレングリ
   コール、ポリオキシプロピレングリコールおよびそれら
   のＯ−モノメチルエーテルのラジカルのうちから選ばれ
   、Ｒはジカルボキシル酸のアルキル基またはアリール基
   である。 ２）前記グリコシドビオフラボノイドがルチンおよびジ
   オスミンのうちから選ばれることを特徴とする請求項１
   に記載の誘導体。 ３）Ｒがコハク酸またはグルタル酸のラジカルであるこ
   とを特徴とする請求項１に記載の誘導体。 ４）Ｘがアルカリ金属であることを特徴とする請求項１
   に記載の誘導体。 ５）前記アルカリ金属がナトリウムであることを特徴と
   する請求項４に記載の誘導体。 ６）Ｘがポリオキシエチレングリコール３５０−Ｏ−メ
   チルエーテルであることを特徴とする請求項１に記載の
   誘導体。 ７）下記工程： ａ）有機塩基の存在下、制御された温度で、かつ反応の
   間反応環境を無水に保ち、原料グリコシドへのいかなる
   光化学作用をも防ぎながら、グリコシドを脂肪族また芳
   香族ジカルボキシル酸の無水物と反応させる工程、 ｂ）得られたエステル−カルボキシル誘導体のフリーカ
   ルボキシルを、医薬的に許容される塩基、ポリオキシエ
   チレングリコール、ポリオキシプロピレングリコールお
   よびそれらのＯ−モノメチルエーテルのうちから選ばれ
   た反応剤と反応させる工程を有することを特徴とする請
   求項１の誘導体の製造方法。 ８）前記ジカルボキシル酸がコハク酸またはグルタル酸
   であり、前記原料グリコシドがルチンまたはジオスミン
   であることを特徴とする請求項７に記載の方法。 ９）前記工程（ａ）が６０℃以下で行われることを特徴
   とする請求項７に記載の方法。 １０）前記工程（ａ）が注意深く無水化された有機溶媒
   中で行われることを特徴とする請求項７に記載の方法。 １１）前記工程（ｂ）において、前記塩基が無機塩基の
   時、反応が水溶液中で行われ、前記無機塩基が所望のカ
   チオンの炭酸塩、重炭酸塩もしくは水酸塩であることを
   特徴とする請求項７に記載の方法。 １２）前記無機塩基が重炭酸ナトリウム、炭酸ナトリウ
   ムもしくは水酸化ナトリウムであることを特徴とする請
   求項７に記載の方法。 １３）前記工程（ｂ）において、前記塩基が有機塩基で
   あるとき、該塩基が有機溶媒中の溶液の形で前記工程（
   ａ）で得られたエステルカルボキシル誘導体に直接添加
   されることを特徴とする請求項７に記載の方法。 １４）前記工程（ａ）で得られたエステル−カルボキシ
   ル誘導体をポリエーテルでエステル化する場合、反応が
   前記グリコシドビオフラボノイドのエステル−カルボキ
   シル誘導体の活性アミドおよび／またはポリオキシエチ
   レングリコール、ポリオキシプロピレングリコールまた
   はそれらのＯ−モノメチルエーテルのカルボキシルヘミ
   エステルの活性アミドを介して行われることを特徴とす
   る請求項７に記載の方法。 １５）前記活性アミドがカルボキシル酸のイミダゾリド
   およびベンゾトリアゾリドから選ばれることを特徴とす
   る請求項１４に記載の方法。 １６）活性成分として請求項１ないし６のいずれかに記
   載の水溶性誘導体を標準賦型剤と共に含むことを特徴と
   する医薬品組成物。 １７）前記水溶性誘導体がルチンまたはジオスミンの誘
   導体であることを特徴とする請求項１６に記載の医薬品
   組成物。