JPH03143381A - 電気的細胞操作用電極 - Google Patents
電気的細胞操作用電極Info
- Publication number
- JPH03143381A JPH03143381A JP1280607A JP28060789A JPH03143381A JP H03143381 A JPH03143381 A JP H03143381A JP 1280607 A JP1280607 A JP 1280607A JP 28060789 A JP28060789 A JP 28060789A JP H03143381 A JPH03143381 A JP H03143381A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- electrode
- electrodes
- cell
- electrical
- aforementioned
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 claims abstract description 15
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 abstract description 2
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 abstract description 2
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 18
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 4
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 4
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 229910001369 Brass Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010951 brass Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 2
- 239000004925 Acrylic resin Substances 0.000 description 1
- 229920000178 Acrylic resin Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 238000005452 bending Methods 0.000 description 1
- 238000005336 cracking Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
- C12M35/02—Electrical or electromagnetic means, e.g. for electroporation or for cell fusion
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Electromagnetism (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
この発明は、電気的に細胞を融合させたり、細胞内へ遺
伝子を導入するのに有用な電気的細胞操作用電極に関す
る。
伝子を導入するのに有用な電気的細胞操作用電極に関す
る。
従来の技術
従来から、電気的細胞操作装置としては、被処理細胞懸
濁液を収容する容器と電極とか−・体化した構造を有す
る装置か一般的に使用されている。
濁液を収容する容器と電極とか−・体化した構造を有す
る装置か一般的に使用されている。
しかしながら、この種の装置に４３いては、細胞懸濁液
の処理量に限界があるＪ２ｊ）でなく、細胞懸濁液の出
入を煩雑なピペット操作によっておこなわなければなら
ず、また、ピペット操作に上って細胞を損傷させるとい
う問題がある。
の処理量に限界があるＪ２ｊ）でなく、細胞懸濁液の出
入を煩雑なピペット操作によっておこなわなければなら
ず、また、ピペット操作に上って細胞を損傷させるとい
う問題がある。
このような問題を解決する方法として、被処理細胞懸濁
液を収容した容器内へ複数の薄板電極の集合体を浸漬す
る方法か知られているが（例えば、特開昭６３−１４．
１５７５号公報参１！！（）、該容器壁部と電極との間
隙に存在する細胞懸濁液が無駄になるという難点がある
。
液を収容した容器内へ複数の薄板電極の集合体を浸漬す
る方法か知られているが（例えば、特開昭６３−１４．
１５７５号公報参１！！（）、該容器壁部と電極との間
隙に存在する細胞懸濁液が無駄になるという難点がある
。
発明か解決しようとする課題
この発明は、電気的細胞操作後の細胞懸濁液をピペット
操作により採取する手間を省くことに、１、って、操作
された細胞が（負傷を受ける危険性を極力減少させ−ろ
と共に、被処理細胞懸濁液の１−１スをなくずことを可
能にずろ電気的細胞操作用電極を提供するためになされ
たものである。
操作により採取する手間を省くことに、１、って、操作
された細胞が（負傷を受ける危険性を極力減少させ−ろ
と共に、被処理細胞懸濁液の１−１スをなくずことを可
能にずろ電気的細胞操作用電極を提供するためになされ
たものである。
課題を解決するための手段
即ちこの発明は、
（ｉ）少なくとも一対の対向平板電極、（目）該対向平
板電極を相互に間隔を設（）て平行に保持し、被処理細
胞懸濁液を収容する間隙部の側壁部を該対向平板電極と
共に限定する絶縁性部材、 および （ｉｉｉ ）該対向平板電極に接続された電気端子から
接続され、該対向平板電極と絶縁性部材が液密性平坦底
部面を有する電気的細胞操作用電極に関する。
板電極を相互に間隔を設（）て平行に保持し、被処理細
胞懸濁液を収容する間隙部の側壁部を該対向平板電極と
共に限定する絶縁性部材、 および （ｉｉｉ ）該対向平板電極に接続された電気端子から
接続され、該対向平板電極と絶縁性部材が液密性平坦底
部面を有する電気的細胞操作用電極に関する。
以ｆ、本発明を添付図に基づいて説明する。
第１図は本発明による電気的細胞操作用電極の態様を示
す模式的斜視図である。
す模式的斜視図である。
第２図は、第１図に示す電極をシャーレ内に設置した状
態を示す模式的平面図である。
態を示す模式的平面図である。
第１図に示す電極は２文・］の対向平板電極（１）〜（
１”°）を有ケる。対向平板電極としては厚さ１〜１０
ｍｍのステンレス板、真鍮板および白金板等が例示され
る。
１”°）を有ケる。対向平板電極としては厚さ１〜１０
ｍｍのステンレス板、真鍮板および白金板等が例示され
る。
対向平板電極（＋）〜（Ｉ”°）のうちの同極、即ら、
（１）と（１”）および（Ｉ゛）と（ｉｉ）はそれぞれ
電気的接続部材（２）および（２゛）によって接続され
る。
（１）と（１”）および（Ｉ゛）と（ｉｉ）はそれぞれ
電気的接続部材（２）および（２゛）によって接続され
る。
電気的接続部材どしては、厚さ１〜１０ｍｍのステンレ
ス板、真鍮板および白金板等が例示されろ。
ス板、真鍮板および白金板等が例示されろ。
電気的接続部材（２）および（２′）に（」電気端子（
４）および（４゛）が接続される。
４）および（４゛）が接続される。
対向平板電極（１）〜（１”′）は絶縁性部材（３）お
よび（３′）によって相互に間隔を設（Ｊて平行に保持
される。対向平板電極（１）〜（１”′）および絶縁性
部材（３）および（３°）を側壁部とずろ間隙部（５）
〜（５”）には被処理細胞懸濁液が収容される。
よび（３′）によって相互に間隔を設（Ｊて平行に保持
される。対向平板電極（１）〜（１”′）および絶縁性
部材（３）および（３°）を側壁部とずろ間隙部（５）
〜（５”）には被処理細胞懸濁液が収容される。
これらの間隙部の間隔は全て等しくてもよく、また異な
っていてもよい。
っていてもよい。
絶縁性部材の材質としてはアクリル樹脂およびフッ素樹
脂箋が例示される。
脂箋が例示される。
絶縁性部材（３）および（３°）は接着剤を用いて対向
平板電極（１）〜（１”°）に接着させればよい。
平板電極（１）〜（１”°）に接着させればよい。
接着剤としては、耐熱性があり、変質や接着割れがなく
、被処理細胞に対して毒性のないンリコン系の接着剤が
好適である。
、被処理細胞に対して毒性のないンリコン系の接着剤が
好適である。
本発明による電気的細胞操作用電極は、従来の容器と電
極が一体化したこの種の装置とは異なり、被処理細胞懸
濁液を収容４−べき容器の底部面を有さないので、使用
に際しては、別の容器を必要とケる。このような容器の
材質や形態等は特に限定的ではないが、実用」二はガラ
ス製またはプラスデック製のシャーレが簡便で好適であ
る。
極が一体化したこの種の装置とは異なり、被処理細胞懸
濁液を収容４−べき容器の底部面を有さないので、使用
に際しては、別の容器を必要とケる。このような容器の
材質や形態等は特に限定的ではないが、実用」二はガラ
ス製またはプラスデック製のシャーレが簡便で好適であ
る。
即ち、本発明による電極は、例えば、第２図に示すよう
に、シャーレ（６）の内部に設置して使用に供される。
に、シャーレ（６）の内部に設置して使用に供される。
従って、上記の対向平板電極（１）〜（ｌ”）および絶
縁性部材（３密性よび（３゛）並びに第１図に示ず態様
の場合には電気的接続部材（２）および（２°）の底面
部は平坦な形態を有していな（］ればならず、これらの
部材の平坦な底部面はシャーレ（６）の内部底面と液密
的に接触する。
縁性部材（３密性よび（３゛）並びに第１図に示ず態様
の場合には電気的接続部材（２）および（２°）の底面
部は平坦な形態を有していな（］ればならず、これらの
部材の平坦な底部面はシャーレ（６）の内部底面と液密
的に接触する。
本発明による電極を第２図に示ケような態様でシャーレ
（６）の内部に設置した後、間隙部（５）〜（５”）に
被処理細胞懸濁液を、例えばピベッテインクによって注
入し、電気操作をおこなった後、該電極をンヤーレ（６
）から取り去ると、電気的処理に付された細胞懸濁液は
ソヤーレ（６）の内部に残留するので、そのまま、その
後の培養処理等に付ずことかでき、ピテッティング等に
よる該ｕＥ液の移し変えは不要である。
（６）の内部に設置した後、間隙部（５）〜（５”）に
被処理細胞懸濁液を、例えばピベッテインクによって注
入し、電気操作をおこなった後、該電極をンヤーレ（６
）から取り去ると、電気的処理に付された細胞懸濁液は
ソヤーレ（６）の内部に残留するので、そのまま、その
後の培養処理等に付ずことかでき、ピテッティング等に
よる該ｕＥ液の移し変えは不要である。
電気的細胞操作は通常、クリーンベンチ内において無菌
的に行なわれるので、電気端子（４）お」；び（４°）
はシャーレの外部まで突出させるのが好ましい。この場
合、電気端子（４）および（４゛）の一部をシャーレ（
６）の外部側面に沿って屈曲さＵることに、にって蓋体
をノヤーレ（６）に被せることが可能となり、この態様
に上れば、電気的細胞操作はクリーンベンチの外部にお
いて実施できる。
的に行なわれるので、電気端子（４）お」；び（４°）
はシャーレの外部まで突出させるのが好ましい。この場
合、電気端子（４）および（４゛）の一部をシャーレ（
６）の外部側面に沿って屈曲さＵることに、にって蓋体
をノヤーレ（６）に被せることが可能となり、この態様
に上れば、電気的細胞操作はクリーンベンチの外部にお
いて実施できる。
以下、本発明を実施例によってさらに説明する。
失集真工
第１図に示す構造を有する電極をシャーレと組合已て成
る電気的細胞操作装置を用い、Ｆ記の条件および手順に
従って細胞融合をお５−なつノ、−，。
る電気的細胞操作装置を用い、Ｆ記の条件および手順に
従って細胞融合をお５−なつノ、−，。
供試原料
太（ｊの莱から調製したブし川・プラストを、０４５Ｍ
マンニトール水溶液に３ＸＩＯ’個になるように懸濁し
た。
マンニトール水溶液に３ＸＩＯ’個になるように懸濁し
た。
細」血融−合法
間隔２ ｍｍ、高さ２ｍｍおよび長さ５ｃｍのチＹンバ
ーに上記のブＣ１）プラス１−懸濁液を＋ＪＩＩえムー
後、交流電圧（０、５ＭＨｚ＋ Ｉ ５ Ｖ）を印加し
てバールチＪ−ンを形成さ１１、次いで、直流パルス（
８０Ｖ、パルス幅２００μＳ）を１回か（ｊたところ、
融合効率は顕微鏡視野内の全プロトプラストに対して約
５〜ｌＯ％であった。
ーに上記のブＣ１）プラス１−懸濁液を＋ＪＩＩえムー
後、交流電圧（０、５ＭＨｚ＋ Ｉ ５ Ｖ）を印加し
てバールチＪ−ンを形成さ１１、次いで、直流パルス（
８０Ｖ、パルス幅２００μＳ）を１回か（ｊたところ、
融合効率は顕微鏡視野内の全プロトプラストに対して約
５〜ｌＯ％であった。
象叫些勢朱
本発明による電極を使用することによって、電気的細胞
操作後に細胞懸濁液をピペツティグ等によって移しかえ
る操作は不要どなり、該操作に起因する細胞損傷の危険
性がノイくなると共に、被処理細胞懸濁液の無用のｌ：
ｌスがなくなる。
操作後に細胞懸濁液をピペツティグ等によって移しかえ
る操作は不要どなり、該操作に起因する細胞損傷の危険
性がノイくなると共に、被処理細胞懸濁液の無用のｌ：
ｌスがなくなる。
第１図は本発明による電気的細胞操作用電極の一態様を
示す模式的斜視図である。 第２図は、第１図に示す電極をノヤーレ内に設置した状
態を示す模式的平面図である。
示す模式的斜視図である。 第２図は、第１図に示す電極をノヤーレ内に設置した状
態を示す模式的平面図である。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、（ｉ）少なくとも一対の対向平板電極、（ｉｉ）該
対向平板電極を相互に間隔を設けて平行に保持し、被処
理細胞懸濁液を収容する間隙部の側壁部を該対向平板電
極と共に限定する絶縁性部材、 および （ｉｉｉ）該対向平板電極に接続された電気端子から構
成され、該対向平板電極と絶縁性部材が液密性平坦底部
面を有する電気的細胞操作用電極。 ２、請求項１記載の電極をシャーレと組合せて成る電気
的細胞操作装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1280607A JPH03143381A (ja) | 1989-10-27 | 1989-10-27 | 電気的細胞操作用電極 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1280607A JPH03143381A (ja) | 1989-10-27 | 1989-10-27 | 電気的細胞操作用電極 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03143381A true JPH03143381A (ja) | 1991-06-18 |
Family
ID=17627393
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1280607A Pending JPH03143381A (ja) | 1989-10-27 | 1989-10-27 | 電気的細胞操作用電極 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH03143381A (ja) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63141575A (ja) * | 1986-12-04 | 1988-06-14 | Shimadzu Corp | 細胞電気刺激装置の電極 |
-
1989
- 1989-10-27 JP JP1280607A patent/JPH03143381A/ja active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63141575A (ja) * | 1986-12-04 | 1988-06-14 | Shimadzu Corp | 細胞電気刺激装置の電極 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0225636B1 (en) | Apparatus for fusing cells | |
| GB2157443A (en) | Apparatus for vertical gel electrophoresis | |
| CA1243467A (en) | Electrophoretic cleaner and sterilizer | |
| US4622124A (en) | Device for horizontal electroblotting | |
| US4589965A (en) | Method for electroblotting | |
| CN102711904A (zh) | 在多个盒子中独立电转移的装置 | |
| EP1093515B1 (en) | Electrofusion chamber | |
| US8357278B2 (en) | Electrotransfer cassette with integrated electrical contacts and locking mechanism | |
| EP2270130B1 (en) | Cell fusion device, and method for cell fusion using the same | |
| JPH03143381A (ja) | 電気的細胞操作用電極 | |
| WO2005098408A1 (en) | Multi function gel electrophoresis and apparatus | |
| JPWO2014092164A1 (ja) | 外来物質導入装置および外来物質導入細胞の製造方法 | |
| JPS61219386A (ja) | 分極性微粒体の集合方法および装置 | |
| JP2012073078A (ja) | 電気泳動用ゲルカセット及びその製造方法 | |
| JP2550801Y2 (ja) | 電気泳動装置 | |
| JP2621394B2 (ja) | 細胞電気処理チャンバ | |
| JPS63141575A (ja) | 細胞電気刺激装置の電極 | |
| JPH02242664A (ja) | 細胞電気処理チャンバ | |
| JP2006197872A (ja) | 電気穿孔法および電気穿孔用キュベット | |
| JPS57613A (en) | Liquid crystal display element | |
| JPH0134114Y2 (ja) | ||
| JPH0130079Y2 (ja) | ||
| JP4918811B2 (ja) | 細胞融合用チャンバーおよび細胞融合装置、並びにそれらを用いた細胞融合方法 | |
| WO2004071628A1 (en) | Electrofusion chamber | |
| CN209296643U (zh) | 一种高通量垂直电泳仪 |