JPH03165833A - 新規懸濁化方法及びこの方法によって得られる組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 童還三Ｊｌシ■公夏一 本発明は、哺乳類乳汁中の脂肪球皮膜を用いた新規懸濁
化方法およびこの方法によって得られる物質を含む組或
物に関する。更に詳しくは本発明は、 ■　水に難溶ないし不溶で有機溶媒に可溶な脂溶性物質
、並びに水及び有機溶媒のいずれにも溶け難いが、物質
の分配係数が水と比べて有機溶媒側に大きく傾いている
物質（以下、これらの両物質を「脂溶性物質等」と総称
する。〉、特に好ましくは、脂溶性薬物、並びにある種
のステロイドのように水及び有機溶媒のいずれにも溶け
難いが薬物の分配係数が水と比べて有機溶媒側に大きく
傾いている薬物（以下、これらの両薬物を「脂溶性薬物
等」と総称する。〉、の新規な懸濁化方法、および■　
生理活性ペプチドの経口投与に適した新規製剤化方法に
関する。

の　術・発明が解決しようとする　題 ４ 以前から水に不溶ないし難溶の化合物を経口投与し、薬
効を再現性よく発現させることは、かなり難しいことは
経験的に知られていた。しかし最近になって、水に難溶
ないし不溶の脂溶性化ｂ物等を経口投与する場合におけ
るの　消化管吸収、■　血流ないしリンパ液を経由する
各臓器内へ分布、■　臓器内での薬物の代謝、および■
　尿ないし胆汁中へのその化合物および代謝産物の排泄
などの研究が著しく進歩した。また、特定の臓器ないし
癌組織に薬物を集中的に分布させることを狙いとするド
ラッグ・デリバリー・システムの研究も非常に盛んにな
っている。

一方、薬理学の進展にともない、薬効評価技術も著しく
進歩し、水に難溶性或いは不溶性の脂溶性化合物等であ
っても、極めて精度よく薬効を測定できるようになった
。しかし脂溶性薬理活性物質等を医薬品として開発する
場合、薬効を再現性よく発現させるために製剤化する必
要がある。水に不溶ないし難溶の化合物を経口投与し薬
効を再現性よく発現させることは、非常に難しいことは
５ 以前から知られていた。そこで脂溶性薬物等を経口投与
した場合、なぜ再現性に乏しいかが活発な研究の対象に
なり、脂溶性薬物等の「消化管吸収」「臓器内分布」「
排泄」「代謝」などについて、水溶性化合物とは異なる
知見がいくつか明らかにされている。これらの研究を通
じ脂溶性薬物等の吸収、排泄、臓器内分布および代謝に
ついて明らかになった事柄は下記のように要約すること
ができる。

■　水に難溶ないし不溶の脂溶性薬物等が経口投与され
た場き、その消化管吸収速度は薬物粒子の表面積に比例
する。すなわち脂溶性薬物等の消化管吸収を支配する因
子の一つは、薬物粒子の表面積である。つまり同じ量の
脂溶性薬物等を与えた場合でも、表面積が大きいほど、
言い換えれば薬物粒子の直径が小さいほど吸収速度は大
きい。

■　脂溶性薬物等は、小腸粘膜から受動拡散によって吸
収される。脂溶性薬物等はどれほど水に難溶であっても
、一旦ごく微量の単分子が水に溶解して始めて体内に吸
収される。すなわち水溶性の薬物と比べ殆どの脂溶性薬
物等は、消化管から吸収６ されて体内に取り込まれる速度は遅いが、小腸粘膜から
薬物が吸収される過程は律速段階になっていない。脂溶
性薬物等がごく微量にしか水に溶解しないのに対し、小
腸粘膜の表面積は非常に大きいので受動゛拡散の過程は
律速段階にはならないからである。

■　水に対する溶解度が非常に低い薬物であっても、薬
物粒子から単分子が水中へ放出される速度が早いほど、
消化管から速やかに吸収される。すなわち、脂溶性薬物
等の消化管吸収を支配するもう一つの因子は、水に対す
る薬物の溶解速度であって溶解度の大きさではない。

■　脂溶性薬物等が消化管から吸収される場合、体内に
とり込まれる経路は２つ存在する。一つは門脈から肝臓
を通って大循環に流入し、薬物が体内に分配された経路
である。別の経路としては腸のリンパ管内に吸収され、
胸管リンバから大動脈に注ぐ場合とがある。後者のルー
トから吸収される場合には、薬物は原型を保ったまま血
中に出現することが多い。一方、薬物が門脈から肝臓を
通７一 遇する吸収経路は、薬物分子が初回通過効果（ｆｉｒｓ
ｔ　　ｐａｓｓ　　ｅｆｆｅｃｔ）を受けて化学的に修
飾されることが多い。水に難溶ないし不溶の脂溶性薬物
等は、製剤化の方法いかんによっては経口投与しても殆
ど吸収されない場合からほぼ定量的に吸収される場合ま
で、吸収率と吸収速度が大きく変動する。従来、脂溶性
薬物等の吸収速度を高め、吸収率を向上させるために二
つの方向から検討が加えられてきた。

その一つは薬物を微粒子化する技術である。例えば、薬
物粒子の平均直径は、従来の研磨法では１５０−２００
μｍまでの粉砕が限度だったが、新しい機器および新し
い方法の導入によって現在では工業的に薬物粒子の平均
直径を２μｍまで微粒子化することは容易である。また
、薬物を水に懸濁して製剤化する技術についても、直径
数μ楡の油滴を室温で安定な懸濁液として長期保存でき
る技術も開発されている。一方、脂溶性薬物等と界面活
性剤とを混合し、透明なミセル状として消化管からの吸
収を高める方法も実用化される８ ようになった。

今一つの方向は薬物ないし薬物を含む粒子、油滴などか
ら薬物分子が水に放出される速度を高める研究である。

例えば、抗生物質、ノボビオシン〈商品名〉は結晶形の
違いにより溶解速度及び吸収率に大差を生ずることはよ
く知られている。また、水に対する脂溶性薬物等の分子
の溶解速度の研究から、薬物を結晶として投与するより
無定形粉末ないし固溶体などの形で投与したほうが溶解
速度が高まり、薬物の吸収速度と吸収量が上昇すること
もわかってきた。

このように最近における製剤の技術的な進歩は目覚まし
いものがあるが、脂溶性薬物等の製剤化技術は、生体に
経口投与した際における吸収速度及び吸収量の面からみ
て、再現性および効率性のいずれの点においても充分と
は言えないのが現状である。

また生理活性ペブチドにあっては、従来からその投与経
路は経口以外、具体的には注射に限定されていた。これ
は、生理活性ペプチドの場合、９ 般的には高分子量のものが多く、この高分子量のものを
経口投与したとしても高い割合で腸管から吸収されるこ
とは常識的には考えられないためである。更に経口投与
された生理活性ペプチドは、消化管内に分泌される蛋白
分解酵素によって容易に加水分解されるので、吸収部位
に到達する頃には加水分解されかなり減少しているとい
う問題点も有している。このために生理活性ペプチドは
注射剤として投与されるのであるが、異種動物の生理活
性ペプチドを注射剤として投与すると異種蛋白の非自己
抗原に対応した抗体が産生され、抗原抗体反応によるシ
ョックの懸念があるという問題点もある。このため経口
投与に適した生理活性ペプチドの製剤化方法が数多く試
みられてきた。

この試みは次の３つに分類することができる。一つの流
れは生理活性ペプチドと同時に蛋白分解酵素の阻害剤を
与え、消化管内における生理活性ペプチドの加水分解を
できるだけ防ぎつつ腸管がら吸収させようとするもので
ある。今一つは生理活性ペプチドの腸管吸収を促進する
作用を示す化な１０ 物を同時に与えて、体内への吸収率を増大させようとす
るものである。さらに第３の方向としては、界面活性剤
と同時に与えて腸粘膜細胞に一時的な障害を与え、生理
活性ペプチドの細胞膜透過を昂進させようとする試みで
ある。またこれらの方法を組合せた方法も試みられてい
る。

しかしながらこれらの試みには、共通して次のような欠
点があった。

■　生理作用を完全に保持したままで吸収される生理活
性ペプチドの量が極めて僅かであること。

■　吸収に再現性がないことが多いこと。

■　個体間で生理活性ペプチドの腸管吸収の差が大きく
、同じ量を与えてもある個体では、ほとんど吸収されな
いが、別の個体では過量に吸収される昏睡が起こるほど
吸収にバラッキが認められること。

本発明者等は長年にわたり噛乳動物の乳汁中に存在する
脂肪球の研究を続けてきた。その結果、脂肪球から脂肪
を除去した脂肪球皮膜部分が、水に難溶ないし不溶の脂
溶性薬物等および生理活性ペプチドを製剤化するための
素材として好適であることを見出し、本発明を完成する
に至った。

を　゛　るための 本発明は： １．９濁化剤として哺乳類乳汁中の脂肪球皮膜を用いる
ことを特徴とする新規懸濁化方法、２．　水に難溶ない
し不溶で有機溶媒に可溶な脂溶性物質の微細な水懸濁液
を調製ずるため、脂溶性物質を哺乳類乳汁中の脂肪球皮
膜によって被覆することを特徴とする脂溶性物質の新規
懸濁化方法、 ３．　水及び有機溶媒のいずれにも難溶であるが、両溶
媒間の分配係数が有機溶媒に傾いている物質の微細な水
懸濁液を調製するため、この物質を哺乳類乳汁中の脂肪
球皮膜によって被覆することを特徴とずる水及び有機溶
媒のいずれにも難溶であるが、両溶媒間の分配係数が有
機溶媒に傾いている物質の新規懸濁化方法、 ４．　水に難溶ないし不溶で有機溶媒に可溶な脂溶性物
質を微細な水懸濁液とするため、哺乳類乳汁中の脂肪球
皮膜と脂溶性物質とを、水中において物理的な手段によ
り乳化することを特徴とする脂溶性物質の新規懸濁化方
法、 ５．　水及び有機溶媒のいずれにも難溶であるが両溶媒
間の分配係数が有機溶媒に傾いているＯＩ質を微細な水
懸濁液とするため、呻乳類乳汁中の脂肪球皮膜と上記物
質とを、水中において物理的な手段により乳化すること
を特徴とする水及び有機溶媒のいずれにも難溶であるが
、両溶媒間の分配係数が有機溶媒に傾いている物質の新
規懸濁化方法、 ６．　生理活性ペプチドの微細な水懸濁液を調製するた
め、生理活性ペプチドを哺乳類乳汁中の脂肪球皮膜を用
い乳化することを特徴とする生理活性ペプチドの新規懸
濁化方法、 ７．　生理活性ペプチドを水に溶解あるいは懸濁した後
、中性脂肪と哺乳類乳汁中の脂肪球皮膜を添加し、物理
的な手段により乳化することを特徴とする新規懸濁化方
法、 ８，　生理活性ペプチドを水に溶解あるいは懸濁１３ した後、中性脂肪と哺乳類乳汁中の脂肪球皮膜および蛋
白分解酵素阻害剤を添加し、物理的な手段により乳化す
ることを特徴とする新規懸濁化方法、９．　請求項１な
いし８のいずれかに記載の方法において、明乳類乳汁中
の脂肪球皮膜が精製された牛乳脂肪球皮膜であることを
特徴とする新規懸濁化方法、 １０．請求項１ないし９において、哺乳類乳汁中の脂肪
球皮膜に代えて、牛乳脂肪球皮膜を含む乳製品を用いる
ことを特徴とする新規懸濁化方法、１１．牛乳脂肪球皮
膜を含む乳製品がバターミルクまたはクリームである請
求項１０記載の新規懸濁化方法、 １２．請求項エないし１１のいずれがに記載の方法で調
製した懸濁化組成物をそのまま、或いは増量剤を加え噴
霧乾燥するかまたは凍結乾燥して粉末化することを特徴
とする経口投与に適した新規製剤の製法、 １３．請求項１ないし１２のいずれがの記載の方法によ
って調製された組或物、に関する。

１４ 本発明において用いる噛乳動物の乳汁中の脂肪球皮膜と
して好適なのは、その原料の入手の容易性からして牛乳
脂肪球皮膜である。以下本発明において用いる噛乳動物
の乳汁中の脂肪球皮膜の性質、製法等について述べる。

噛乳動物の乳汁が非常に優れた栄養食品であることはよ
く知られている。乳汁中には動物種によって異なるが、
２−１８％にも及ぶ脂肪が含まれ、幼獣のエネルギー源
となっている。しかも乳汁中には水と決して混じること
がない脂肪が、直径０．１−１７μｍの脂肪球の形で浮
遊し安定な懸濁液を作っているのである。脂肪球の大き
さによって分類すると、直径１μ論以下の脂肪球が総数
の８０％以上占めるが、乳汁中の全脂肪の中に占めるそ
の脂肪含量は数％に過ぎない。また直径６μ輸以上の脂
肪球も小数であるため、全脂肪中に占める割合は約２−
３％にすぎない。脂肪球中の脂肪の大部分は直径が２−
６μ餉（平均３．４μ一の脂肪球に存在し、この分布範
囲に含まれる脂肪球の脂肪は、乳汁中の全脂肪の９４％
を占めている．したがって代表的な乳汁である牛乳の脂
肪球は極めて大きな表面積を持ち、その脂肪１ｇ当たり
の表面積は２−にも達する。この様に膨大な面積を持っ
た脂肪球が安定な懸濁液の形態を保持できる理由は、疎
水性が高い脂質と外界の水との仕切りをしている界面層
、すなわち脂肪球皮膜（ｍｉｌｋ　　ｆａｔｇｌｏｂｕ
ｌｅ　　ｍｅｍｂｒａｎｅ：ＭＦＧＭ）が存在するから
である。脂肪球からＭＦＧＭを分離する方法としては、
乳汁を遠心分離して得られるクリームを水で数回洗浄し
てから、チャーニングと呼ばれる工程で脂肪球を物理的
に破壊する方法が一般的である。

この方法の原理は、クリームを冷却して脂肪球の核を構
成する高融点中性脂肪を硬化させて脆くシ、この脆くな
った脂肪球を激しく振盪して破壊する。

この処理法によって破壊された脂肪球から流出した脂肪
は、相互に融合して大きな塊になって水層の上に分離し
、水層中にはＭＦＧＭが分散して残留する。従ってこの
ようにして分離した水層（バターミルク〉を適当な手段
によって乾燥すると、ＭＦＧＭは白色の粉末状で得られ
る。こうして得られるＭＦＧＭは主として脂質と蛋白質
で楕戒される構造リボ蛋白質で、それが生体内で合成さ
れる過程からみて乳ｗＡＩｉＩＩＩ胞由来であろうと考
えられている。つまり乳腺細胞内で合成された乳脂肪は
、細胞から分泌される過程で乳腺細胞膜によって被覆さ
れ、乳汁中に分泌されるからである。

ＭＦＧＭの収量は牛乳からの分離法によっても異なるが
、乳脂肪１ｆＩから０．５−１．２である。このＭＦＧ
Ｍは９０％以上が蛋白質と脂質とで占められていて、約
５５％が脂質画分として、残りの４５％が蛋白質画分と
して回収される。

ＭＦＧＭが他の生体膜と異なる点は、脂質画分中に高融
点中性脂肪（ｂｉｇｈ　ｍｅｌｔｉｎｇ　　ｔｒｉ　ｇ
ｌｙｃｅ　一ｒｉｄｅ：ＨＭＴＧ）と呼ばれる中性脂肪
を多量に含んでいることである。この高融点中性脂肪の
役割は明確ではないが、蛋白質とリン脂質とから楕戒さ
れるＭＦＧＭ膜内側の乳脂肪と接する部分に存在するこ
とからみて、脂肪球内部の疎水的環境の保持と脂肪球の
強度を増大させる点で重要な役割を果たしていると考え
られている。従って通常の生１７ 体膜は二重膜構造をとるが、内部に極めて疎水性の中性
脂肪を被覆する役割を持つＭＦＧＭ膜は一重構造をとる
ことが特徴である。

このＭＦＧＭを走査型電子顕微鏡で観察すると、二次元
的に広がった膜様構造を認めるだけで、リポソームの電
子顕微鏡像のように球状ないし半球状の構造は認められ
ない。

Ａ．本発明において水に難溶ないし不溶の脂溶性薬物の
懸濁化はＭＦＧＭ被覆微小球体を再構戒することにより
行なわれる。

水に難溶ないし不溶の脂溶性薬物をＭＦＧＭによって被
覆するためには、原則として薬物は水と混じり合わない
油状でなければならない。したがって室温で油状の薬物
はそのままＭＦＧＭによって被覆できる。固体の場合に
は、通常、蛋白変性を起こさせない適当な溶媒、例えば
植物油、具体的には例えばオリーブ油、に溶かす必要が
ある。しかし、固体であっても粉末の場合は、そのよう
な溶媒を用いることなく、そのままＭＦＧＭとよく混合
して水中に懸濁させることが可能である。本１８ 願明細書においては、液状の薬物ないしは薬物溶液を油
状物と呼ぶことにする。ＭＦＧＭを使って油状物もしく
は粉末が水中に懸濁した乳濁液の調製は、例えばＭＦＧ
Ｍを中性の緩衝液に分散し、油状物を加え物理的な手段
、例えば種々のタイプのホモジナイザー或いは超音波よ
り乳化することにより行なわれる。このような操作によ
ってＭＦＧＭ微小球体が再構成される。この再構成のた
めには、例えばホモジナイザーを用いた場合、ホモジナ
イザーの速度、時間、温度、ＭＦＧＭ濃度、被覆する油
状物の濃度、ｐＨなどが主要な変動要因であり、適宜選
択することができる。例えばＭＦＧＭ濃度、すなわち薬
剤に対するＭＦＧＭの添加量は１重量％以上であればよ
く、ＭＦＧＭの添加量を増大させれば、ＭＦＧＭ小球体
の懸濁液の乳化活性、乳化安定性、泡安定性を上昇させ
ることができる。しかし、実用上の見地からは、ＭＦＧ
Ｍの添加量は２〜８重量％が好ましい。一般的な調製条
件は次の通りである。

（一般的な調製条件） ２７０＋ｎｇのＭ　Ｆ　Ｇ　Ｍを１０＋ｎＭのリン酸ナ
１〜リウノ、緩衝液（ｐｒ｛７．０）に分散させｉｏｇ
０ｎとする。

方、薬剤を含む２．５ｇの油状物をパイレックス試験管
（２．５７１７ｃｍ）に採取し、これに」二記の緩衝溶
液を７．５＋ｎＮ（Ｍ　Ｆ　Ｇ　Ｍを約２００＋Ｈ含有
）加えて、４５゜Ｃで５分間加温する。油状物１ｇに対
ずるＭＦＣＭの含有量は８０Ｂである。次いで加温しな
がら、ポリトロンホモジナイザー（ＳＴ２０シャフト使
用）を用いて、最高スピード（マーク１１）て１分間撹
拌して乳濁液を得る。特に油状ｅＡ１ｇに対するＭＦＧ
Ｍの含有量が８Ｑ＋ｎｙの場合に、乳化安定性が１の非
常に安定性の優れた乳濁液が得られる。

このようにして得られる乳濁液は所望により粉末化する
ことができる。例えば粉末化の条件は以下の通りである
。

■　溶媒（中性脂肪）：室温で固体ないし半固体の物性
を持つ中性脂肪を脂溶性薬物を溶解する溶媒として選択
する。

■　増量剤：乳蛋白、乳糖など。

薬物を封入したＭＦＧＭ微小球体を上記の増量剤と混き
し、噴霧乾燥するか凍結乾燥すれば、Ｍ　Ｆ　Ｇ　Ｍ微
小球体を含む安定な粉末を得ることができる。

Ｂ．本発明の生理活性ペプチドの製剤化方法において、
生理活性ペプチドとしては、例えばインスリン、オキシ
トシン、バソプレシン、下垂体性々腺刺激ホルモン（Ｈ
ＭＧ）．胎盤性々腺刺激ホルモン（ＨＣＧ）、成長ホル
モン、コルチコトロピン、カルシトニン、性腺刺激ホル
モン放出ホルモン、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン、
インターフェロンーα、インターフェロン−β、エリス
ロボエチン、コロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、同Ｇ
ＣＳＦ、同Ｍ−ＣＳＦ、上皮生長因子（Ｅ　Ｇ　Ｆ　）
、神経細胞成長因子（ＮＧＦ）、ソマトメジン、バトロ
キソビン、プロウロキナーゼ、組織プラスミノーンアク
チベーター、スタフィロキナーゼ、スーパーオキサイド
ディスｌ＼ターゼ、成長ホルモン放出因子、ソマトスタ
チ〉′、心房ナトリウム利尿ベプタイド、プロテインＣ
、プロテインＳ、肺サー２１ ファクタント、リボコルチン、インターロイキンｌ、イ
ンターロイキン２、インターロイキン３、腫瘍壊死因子
（Ｔ　Ｎ　Ｆ　）、ラクトフェリン、トランスフェリン
、免疫グロブリン等である。

製剤化は、上記した生理活性ペプチドを水に溶解あるい
は懸濁した後、中性脂肪と噛乳動物の乳汁中の脂肪球被
膜（ＭＦＧＭ）を添加し、物理的な手段により乳化せし
めることにより行なわれる。

この際蛋白分解酵素阻害剤を同時に加えると有利である
。使用する蛋白分解酵素阻害剤に特に制限はないが、具
体的には例えばトラピビール、ペプスクチン、ロイペプ
チン等である。なお、生理活性ベブチドを溶解あるいは
分散する水に代えて中性の緩衝液を用いることもできる
。中性の緩衝液の例としては、１〕Ｈ７のリン酸緩衝液
あるいはトリス・塩酸緩衝液が挙げられる。本発明の生
理活性ペプチドの懸濁化に用いられ，る中性脂肪として
は、例えば常温で液状若しくは半固体状のものがら任意
に選択することができる。具体的には、例えば、人工的
な中性脂肪であるオクチルデジルト２２ リグリセライド、ヤシ油等の植物油、バターオイル、不
飽和脂肪酸を含む動植物油等が挙げられる。

なお、生理活性ペプチドとしてインスリンを用いる場合
、その溶解性が優れている点からヤシ油は好適な中性脂
肪の例である。

本発明において用いる物理的な乳化手段としては、種々
のホモジナイザーの利用あるいは超音波で処理すること
により行なわれる。噛乳動物の乳汁中の脂肪球皮膜（Ｍ
ＦＧＭ）、具体的には、例えば牛乳脂肪球皮膜の添加量
は、使用する中性脂肪に対し２〜１０％（ｗ／ｗ）の範
囲が好ましい。

このような方法によって得られる乳濁液は、所望により
粉末化することができる。粉末化は乳濁液に適当な増量
剤、例えば乳糖、乳清蛋白、カゼイン、微結晶セルロー
スなどを加え凍結乾燥または噴霧乾燥することにより行
なわれる。このようにして得られた粉末はそれ自体化学
的に安定であり、適宜錠剤、顆粒剤等に製剤化すること
ができる。

本発明で用いるＭＦＧＭの特徴は人工的な界面活性剤と
比較して、中性脂肪をより効率的に乳化することおよび
安定性が極めて高いという点にある。つまり人工的な界
面活性剤は溶血性を有する一種の細胞毒であり、大量に
摂取すると消化管粘膜の剥離・脱落から激しい下痢を起
こすこともまれではない。これに対しＭ　Ｆ　Ｇ　Ｍは
細胞膜由来の表面を持っており、人工的な界面活性剤の
ように細胞膜とは無祥であり、極めて安定性が高いとい
う特徴を有している。なお本発明においてＭＦＧＨに代
えてＭＦＧＭを含む乳製品、例えばバターミルクまたは
クリーム等を使用することもできる。

以下実施例、実験例を挙げて本発明を更に具体的に説明
するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

（実施例１）可溶化能の測定 ＭＦＧＭ（中外製薬（株〉の生研機構プロジェクトより
供与されたものを用いた。〉、ＨＣＯ６０（日光ケミカ
ルズ社製）及びＢＬ９（日光ケミカルズ社製〉をそれぞ
れ１００μｇ／ｍｌの濃度で懸濁あるいは溶解した懸濁
液あるいは水溶液にビタミンＡを２５．５０，１００μ
ｌＦ／＋ａ１の濃度となるように加え、超音波細胞破砕
器（大岳製剤所社製）によって、３０Ｗで５分間超音波
処理した。各液の６４０ｎｍにおける光透過率を測定し
たところ、第１図に示すような結果を得た。

この図からわかるように、いずれの可溶化剤を用いたと
きも、ビタミンＡの濃度を増すにつれて透過率の低下、
すなわち濁度の増大が認められたが、ＨＣＯ６０を用い
た場合は濁度の増大度が低いのに対し、ＢＬ９及びＭＦ
ＧＭを用いた場合には緩衝液のみの場合とほぼ同様の挙
動を示した。

したがって、ＭＦＧＭは可溶化能をほとんど持たないこ
とが明らかとなった。なお、油層としてトリオレインを
用いた。

（実施例２）乳化能の測定 ４ｌ直Δ跣４： ビタミンＡを１２Ｂ含むが油脂１ｇと、ＭＦＧＭを８　
０　ｍｇ／　ｍｌ２含有するリン酸ナトリウム緩衝液１
９９とを合わせて４０−４５℃で５分間加温し、次にポ
リトロンホモジナイザーを用いて最高速で１分間撹拌し
て乳濁液を得た。（ここで得られた２５ のは油脂を５重量％含有する乳濁液である。）上記ＭＦ
ＧＭの代りに、レシチン（シグマ（Ｓ　ｉｇｍａ）社製
〉、シヨ糖脂肪酸エステルＳ−１１７０（三菱化成食品
社製〉、シヨ糖脂肪酸エステルＰ１６７０（三菱化成食
品社製〉、Ｔ　ｗｅｅｎ　８　０　（日光ケミカルズ社
製）及びＨＣＯ６０（日光ケミカルズ社製〉の各界面活
性剤をそれぞれ８０ＩＩｌｇ／一含有するリン酸ナトリ
ウム緩衝液１９ｇとビタミンＡ１２＋ｎｇを含む油脂１
ｇとを混合して、上記と同様にしてそれぞれの界面活性
剤を含有する乳濁液を調製した。

上で調製した各乳濁液をそれぞれ試験管に入れ垂直に立
てて室温で放置し、経時的にクリーム層長及び乳濁液の
全層長を測定し、これらの測定値から（クリーム層長／
懸濁液全層長）を求めて乳化安定性の指標とした。結果
を第２図に示す。なお、油脂としてトリオレインを使用
した。

第２図からわかるように、Ｍ　Ｆ　Ｇ　Ｍのエマルジョ
２６ ンスタビリティー値は、レシチン及びＴｗｅｅｎ８０に
比べて低く、ＨＣＯ６０とほぼ同程度の値であり、この
ことはＭＦＧＭの乳化安定性が良好であることを示して
いる。

上で調製１７た各乳濁液をそれぞれ試験管に入れ垂直に
立てた。室温において経時的に試験管底より０．２ｍＩ
ずつ各乳濁液を採取し、これらを０．１ｚのドデシル硫
酸ナトリウム水溶液３．８１Ｉ＋Ｎと混ぜ、６４０１ｌ
ｌｌにおける透過率を種の条件の下で測定した。これら
の結果を第３図〜第６図に示す。

第３図は乳濁液における各界面活性剤の効果を示したも
のである。これによると、ＭＦＧＭのエマルジョンアク
ティビティーは、緩衝液のみレシチンに比べて低い値を
示し、３０時間後まで、Ｔｗｅｅｎ８０及びＨＣＯ６０
とほぼ同じ値を示した。

特に、１０時間後までの値が低く、ＭＦＧＭが乳濁液と
しての状態を良好に保持していることが明らかである。

第４図はエマルジョンアクテイビテイーに及ぼすＭ　Ｆ
　Ｇ　Ｍ添加量の影響について示したものである。これ
によると、通常使用する含有量である８　０ｗｎ）７Ｍ
　Ｆ　ＧＭ　／ｇ油脂に比べて、低い場１（４０ｍ　ｇ
　Ｍ　Ｆ　Ｇ　Ｍ　／　ｇ油脂〉ではエマルジョンアク
テイビティーの急速な上昇が認められたが、逆に高い場
合（１　６０＋ｎｙＭＦＧＭ／ｙ油脂）では３０分後に
おいても値の上昇は少ない。このことから、ＭＦＧＨの
添加量が多い程、乳化状態の保持が良好になると考えら
れる。

第５図は、界面活性剤のうち安全性が高いシヨ糖脂肪酸
エステルとＭＦＧＭとについてエマルジョンアクティビ
テイーに及ぼす効果の比較結果を示したものである。こ
れによると、ＭＦＧＭは、Ｐ−１６７０（パルミチン酸
残基が結きしたＨ　Ｌ　Ｂ　一１６のシヨ糖脂肪酸エス
テル）に比べてエマルジョンアクティビテイーの上昇が
見られたが、８１．１７０（ステアリン酸残基が結合し
たＨＬＢ＝１１のシヨ糖脂肪酸エステル〉とほぼ同じ値
を示した。

なお、上記第３図〜第５図に関する実験においては、油
脂としてトリオレインを用いた。

第６図は、油脂としてトリオレイン以外のものを用いた
場合のエマルジョンアクティビティーに及ぼす効果につ
いて示したちのてある。トリオレイン以外の油脂として
、オレイン酸、モノオレイン及びバターオイルを用いた
。その結果、モノオレインがエマルジョンアクティビテ
ィーの上昇が最も低く、オレイン酸が最も上昇した。バ
ターオイルとトリオレインはその中間でほぼ同じ値を示
した。

次に、本願発明方法により調整した薬物含有のＭＦＧＭ
微小球体を動物に投与した際の薬物吸収状況を従来の方
法で調製した製剤と比較した試験例を示す。

（実施例３）　　ＤＤＴのリンパ管吸収に及ぼすＭＦＧ
Ｍの影響 試験薬物として、経口投与における薬物吸収を検討する
際、脂溶性薬物のモデル化合物として使われるＤＤＴを
用いた。

まず、ウィスタ一系の雄性ラットを一夜絶食さ２９ せ、手術して十二指腸並びに胸管リンパにカニューレを
挿入する。次にＤＤＴのオリーブ油溶液を用いて上記一
般的な調製条件に従って調製したＭＦＧＭ含有微小球体
乳濁液及びＭＦＧＭを含有しない単なるＤＤＴのオリー
ブ油溶液をそれぞれカニューレを通してラットの十二指
腸内に投与した。ＤＤＴの投与量はいずれの場合も１０
ｍｙ／ｋｇであった。

ＤＤＴの投与後、胸管リンバから流出するリンパ液を集
めてＤＤＴを分析した。結果を第１表に示す。

吸収率（ｚ） ラ　トの ＊＊Ｐ＜０．０１ １５．３１ ＋７．７９ ６ ０ ６ ４１．１６ ＋１４．７＊＊ ４ ０ ４ この表から明らかなように、ＤＤＴをオリーブ油に溶か
してラットの十二指腸に投与した場合に３０ は、１２時間内に吸収されるＤＤＴの総量は１５．３１
ｇに過ぎないが、ＤＤＴのオリーブ溶液をＭＦＧＭによ
って微小球体化して同様に投与すると、吸収量は４１．
１６ｇに上昇し、Ｍ　Ｆ　Ｇ　Ｍの吸収促進効果が明確
に裏付けられている。

（実施例４）　ビタミンＡのリンパ管吸収に及ぼすＭＦ
ＧＭの影響 体重約４００ｇのウィスター系雄性ラットを一昼夜絶食
させた。絶食させたラットをベントバルビタール腹腔内
投与にて麻酔させた後、ラット腹部を切開し胃幽門部と
十二指腸の間及び回盲部にシリコンカニューレを挿入し
た。上部カニューレより、（実施例２〉で調製した各乳
濁液からなる薬液（５−）を小腸（−二指腸、空腸、回
腸）ループ内に注入し、カニューレを鉗子で閉じた。

経時的に股間動脈及び胸管リンパより血液及びリンパ液
を採取し、両液中のビタミンＡ濃度を測定した。また、
胆管にカニューレを施し、胆汁を体外に排泄させた（ｂ
ｉｌｅ　　ｆｉｓｔｕｌａ）ラットについても同様のこ
とを行い、このような処理を施さない（ｉｎｔａｃｔ）
ラットと比較した。

なお、ビタミンＡの投与量は１５ＩＩｌｇ／ラットであ
った。ビタミンＡ濃度の定量は、各サンプルをシクロヘ
キサンで抽出後、励起波長３４０ｎｍ、測定波長４８０
ｎｍでの蛍光測定により行った。

結果を第７図〜第９図に示す。ビタミンＡは小腸から吸
収された後キロミクロンを形成し、その大部分が血液系
ではなく、リンパ系へ移行することが知られている。本
試験においても、血液中には殆ど検出されなかったため
、リンパ液中の濃度で効果を判定した。

第７図は、油脂としてゴマ油を用いて調製した乳濁液を
ｂｉｌｅ　　ｆｉｓｔｕｌａラットの小腸ループに投与
したときの結果を示す。これによると、ＭＦＧＭを用い
た場合と合成界面活性剤であるＴｗｅｅｎ８０及びＨＣ
Ｏ６０を用いた場合とで、いずれの時間においても大き
な濃度差はない。投与後２．５〜３．５時間後にリンパ
中の濃度は最高値になったが、ＭＦＧＭを用いた場合に
値が最も高いことがわかる。

第８図は、第７図における場合と同様の条件で、乳濁液
をｉｎｔａｃｔラットの小腸ループに投与したときの結
果を示す。これによると、ＭＦＧＭ及びＴｗｅｅｎ８０
ともにピーク値は２〜３倍に上昇し、リンパ中への移行
量が増大したことがわかる。

一方、油脂含有量を５％から２５％に増加させた場合、
リンパ中のビタミンＡ濃度は極めて低くなっていること
から、乳濁液中の油脂含有割合がビタミンＡの吸収に大
きく影響することが明らかとなった。

第９図は、乳濁液中の油脂の種類によるビタミンＡのリ
ンパ中濃度を示す。なお、この場合に限り、ビタミンＡ
の投与量は２．５Ｂ／ラットで行った。

油脂含有量５ｚの乳濁液を用いた。第９図によると、バ
ターオイルを用いた場合がビタミンＡのリンパ中濃度が
最も高く、オレイン酸を用いた場合が最も低かった。こ
のことから、ビタミン人の吸収については、天然の乳汁
中脂肪球の状態に極めて近いバターオイルの乳濁液が有
用であることが明らかとなった。

３３ 以上、ＤＤＴ及びビタミンＡのリンパ管吸収に及ぼすＭ
ＦＧＭの影響について述べたが、他の脂溶性薬物につい
てもＭＦＧＭの吸収促進作用が認められた。

例えば、ビタミンＥのように室温で油状の化合物につい
ても、ＭＦＧＭによって微小球体化した際には顕著な消
化管吸収促進効果が認められた。

すなわち、ビタミンＥの綿実油溶液とその溶液をＭＦＧ
Ｍによって微小球体化したものをそれぞれラットに経口
投与したところ、前者に比べ後者の吸収量は２．６倍に
達した。同一の条件下でＭＦＧＭ微小球体化した際にお
ける脂溶性薬物の吸収促進作用は、ビタミンＤ、ビタミ
ンＩ（などの脂溶性ビタミン及びユビキノンなどのイソ
プレン化合物にも認められた。また、各種の脂溶性薬物
、例えば、プロブコール、アバン、イソフラボン、プロ
スタグランジン類などの薬物についても同様の現象が認
められた。

更に、水及び有機溶媒のいずれにも溶けにくいが、「有
機溶媒（例えば、オクタノール）：水」の間３４ の分配係数が大きく有機溶媒（オクタノール〉側に傾い
ている薬物も、ＭＦＧＭによって微小球体化して投与す
ると顕著な吸収促進が認められた。このような薬物の例
としてハイドロコーチゾンを用いた場合の試験例を以下
に示す。

（実施例５）　ハイドロコーチゾンの体内吸収に及ぼす
ＭＦＧＭの影響 体重約３００ｙのウィスタ一系雄性ラットを一夜絶食さ
せた後、右総頚動脈部位の皮膚を切開してこの動脈にカ
ニューレを挿入した。一方、トリチウム（３Ｈ）ラベル
・ハイドロコーチゾンの綿実油溶液をＭＦＧＭで微小球
体化した乳濁液（前記の一般的調製条件により調製〉を
経口投与した。

対照としては界面活性剤Ｔ…ｅｅｎ８０で透明にミセル
化したハイドロコーチゾンを用いた。ハイドロコーチゾ
ンの投与量は１．５Ｂ／ｋ！？であった。投与した後に
定期的に採血した。糞及び尿を集め、投与してから４９
時間後に屠殺して、消化管、その内容物、各臓器に分け
てハイドロコーチゾンの放射能を測定し、ハイドロコー
チゾン含有量を求めた。

（なお、脂溶性薬物等をＴｕ＋ｅｅｎ８０によって処理
すると、一見透明な溶液状になって脂溶性薬物等が溶解
したと銘覚する。しかしこの様な場きでも脂溶性薬物等
は分子の状態で溶解しているのではなく、大部分は微細
なミセルとして存在しているが、直径が光の波長以下で
あるために光が透過するからである。この様な脂溶性薬
物等を透明にミセル化した状態で投与すると、薬物の吸
収速度と吸収量が大きく上昇することが知られている。

その原因としては次の２点が関与していると考えられて
いる。

■　ミセル直径が光の波長より小さいので、薬物粒子の
表面積が飛躍的に増大ずる。

■　ミセル化の際使用する界面活性剤が一時的に小腸粘
膜を障害するため、腸管粘膜の透過性障壁が失われ、吸
収が増大ずる。

従って、本試験はハイドロコーチゾンに対し最高の吸収
速度を示す試験条住を対照として、ＭＦＧＭの吸収促進
効果を比較したことになる。）試験結果を第１０図及び
第２表に示す。

第１０図は、トリチリムハイドロコーチゾン投与後のこ
の薬物の血中濃度を示したものである。

Ｔｕ＋ｅｅｎ８０によって可溶化したさいには、投与後
５分て最高血中濃度に到達し、そのさいの最高血中濃度
も、ＭＦＧＭ微小球体として投与した場Ｊの２倍弱であ
る。ＭＦＧＭ微小球体として投与すると、最高血中濃度
に到達するには６０分かかり、，しかもピークの高さも
低い。しかしＡＵＧの比較では両群は、ほとんど同じか
、ＭＦＧＭ群のほうがやや大きい傾向がある。従ってハ
イドロコーチゾンをＭＦＧＭ微小球体として投与した場
合には、現行の経口投与用製剤の中で最高の血中濃度と
ＡＵＧを示すとされるＴＩｌｌｅｅｎ８０の可溶化ミセ
ルと同等のＡＵＧを示すことになる。

第２表は、ハイドロコーチゾンの体内残留に及ぼすＭ　
Ｆ　Ｇ　Ｍの影響を示したものである。これによると、
ＭＦＧＭ微小球体の形で投与した場合には、Ｔｕ＋ｅｅ
ｎ８０ミセルとは違った経路で薬物が吸収されることが
示唆されている。

３７ ２ ハイドロコー ゾンの に ぼ ９．６±０．２ ３５．３±１３，５ １１．６（８．５，１４．８） ３９．０（３２．３，４５．６） 胃 小腸 大腸 盲腸 胃内容物 小腸内容物 ０．２３±０，２５ ０，７５±０．４７ ０．０６±０．０４ ９．２５＋３．０７ ０．５２±０．５８ ３．２７＋：１．３７ ０．１５（０．２１，０．０８） ３．９８（５．５４，２．４１） ０．３８（０．７２　０．０３） １８．９６（１７．７０，２０．２１）０．３４（０．
６０，０．０７） １２．７１（１６．６８，８．５４） すなわちラットに経口投与して２４時間後のハイドロコ
ーチゾンの収支を見ると、総投与量から排泄量と消化管
内残留物を差し引いた体内残留量は、３８ Ｔｗｅｅｎ８０群で１２．４１ｇだが、Ｍ　Ｆ　Ｇ　Ｍ
群では５３．１２２、すなわち４．３倍も体内に分布し
ている。この様に体内分布に大差が生ずる原因としては
薬物吸収経路の変化が推定される。すなわち、Ｔｗｅｅ
ｎ８０ミセルを投与した場合には、腸管粘膜から吸収さ
れたハイドロコーチゾンは門脈から肝臓を経由して大循
環に流入するが、ＭＦＧＭ微小球体で投与した場合には
、腸管粘膜に付着した微小球体の内容物は、リンパ管に
取り込まれ胸部リンパ管から静脈に注ぐと考えられるか
らである。

すなわちＭＦＧＭはハイドロコーチゾンのように水にも
有機溶媒にも溶けにくいが、水と比べ有機溶媒への分配
係数が大きい薬物を製剤化するさいにも次のような大き
な利点を有する。

■　吸収速度および吸収率が非常に高い界面活性剤によ
る可溶化ミセルと同等の吸収率を示す。

■　界面活性剤のように腸管粘膜の障害作用はない。

■　吸収経路が変化するために薬物の体内滞留時間が著
しく延長する。すなわち持続性の効力を示すようになる
。

（実施例６） ８０ｍｙのＭＦＧＭを含むｐＨ７．０の１０ｍＭリン酸
緩衝液３．５ｍ（ｌに、油脂としてヤシ油３Ｉ０１を加
え、さらにヒト・インスリン溶液（４０Ｕ／ＩＩ１１）
を６ｍＮ加えて４５゜Ｃで５分間加温した。次にポリト
ロン型ホモジナイザーで１分間撹拌してヤシ油を完全に
乳化させた。この乳濁液は１ｍｌ当たりインスリンを１
９．２０含んでいる。この製剤はそのまま経口投与する
こともできるが、保存性を持たせるため、乳糖’ｙ．５
ｇ、乳清蛋白１．２ｇを加えて凍結乾燥して粉末化した
。この粉末のインスリン含量は２０Ｕ／ｇであった。

（実施例７〉 ７週令、体重２５０ＦＩの雄性ドンリュー系ラットにス
トレプトゾトシンのＩＯＩＩＩＭクエン酸溶液（１）Ｈ
４．Ｏ＞を６０ｍｇ／ｋｇになるように尾静脈から注入
し、インスリン依存性糖尿病モデルを作成した。

ラットはストレブトゾトシン靜注１週間後に１２時間絶
食し、ランダムにＭＦＧＭ／インスリン群、インスリン
群、生理食塩水投与群の３群に分け、実験に用いた。ま
ずラットをネンブタール麻酔下に開腹し、十二指腸にカ
テーテルを挿入した後、カテーテルを通して１１０１の
インスリン（４０Ｕ）ないし生理食塩水を腸管内に注入
した。注入１，２，３そして４時間後に尾静脈から採血
し、血糖および血清インスリン（ｉｍｍｕｎｏｒｅａｃ
ｔｉｖｅ　　ｉｎｓｕｌｉｎ；ＩＲＴ）を測定した。ま
ず血糖については第１１図に示すよういずれの群でも投
与前値は２　８　０　ｍｙ／ｄｌ前後であったが、イン
スリン注入群の血糖は対照群と比べ、１〜２時間値が低
下傾向にあるが有意差は認められなかった。一方、ＭＦ
ＧＭ／インスリン群の血糖値は、注入２時間後まで急速
に下降し、２〜３時間値は対照群と比べ有意な低下が認
められた。なお、第１１図の各々の点は９ないし１０頭
の糖尿病ラットにおける血糖値を平均値＋あるいは一標
準誤差によって示した。また、ラジオイムノアッセイ法
（Ｄ　ｉｎａｂｂｏｔｔ　　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ
）で測定した対照群の血中ＩＲＩは、いずれの時点にお
いても検出限界以下であった。一方、ＭＦＧＭ４１ ／インスリン群の血中ＩＲＩは、注入前は検出できなか
ったが、注入ｌ時間後に１３０μＵ／ＩＩ１１まで上昇
し、２時間以降は次第に減少した。この群の血中ＩＲＩ
をインスリン群と比較すると、１〜２時間値が危険率Ｐ
　＜’０．０１，３時間値が危険率Ｐ＜０．０５で有意
に高＜、ＡＵＧの比較でも１００倍以上の差が認められ
た。なお、第１２図の各々の点は９ないし１０頭の糖尿
病ラットにおける血中インスリンの平均値を＋あるいは
一標準誤差で示した。対照群の血中インスリンは、いず
れの時点においても検出限界以下なので、図では省略し
てある。注入１時間後におけるＭＦＧＭ／インスリン群
のインスリン吸収率は、血液量を体重の１／１３と置け
ば、約５％であり、さらに吸収されたインスリンのうち
で１／３が肝臓で捕捉されることを考慮にいれると、約
８％が腸管から吸収されたと考えられる結果である。従
来の投与法によるインスリンの腸管吸収率は、最も良い
場合でも高々１％で、通常は０．１π以下がほとんどで
ある。従って経口投与したＭＦＧＭ／インスリン群の腸
管吸４２ 収率は、従来の方法と比べ５０〜１００倍効率が良いこ
とになる。

（実施例８〉 体重３００ｆＩの雄性スプラーグ・ドーレイ系ラットに
実施例７と同様な方法でストレプトゾトシンを５０ＩＩ
ｌｇ／ｋｇ静注して糖尿病を発症させた。ストレプトゾ
トシン注射１週間後に、ラットをランダムに３群に分け
、一つを対照群、残りの二つをインスリン群およびイン
スリン／ＭＦＧＭ群とした。

ラッＩ〜を一夜絶食させた後、対照群（ｎ＝６）には生
理食塩水、他の群（それぞれｎ−６）には実施例１で調
製したＭＦＧＭ／インスリン粉末を水に懸濁しインスリ
ンとして４０Ｕを経口投与し、第３の群（ｎ＝６）には
４０Ｕのインスリンを経口投与した。投与液量は、ラッ
トの体重１００ｇあたり１−である。ラットはボールマ
ン・ケージに収容して一定時間ごとに尾静脈から採血し
、血糖ならびに血清インスリン（Ｉ　Ｒ　Ｉ　）を測定
した。

表３から明らかなように高い濃度のインスリンが血中に
検出され、血糖が降下したのはＭＦＧＭ／インスリン群
のみである。同じ量のインスリン溶液を投与しただけの
インスリン群は、血中から殆どインスリンが検出されず
、血糖の有意な降下も認められなかった。従って、イン
スリンを牛乳脂肪球皮膜ならびに油脂を用いて乳化し、
さらにこの乳化液を牛乳成分を加えて粉末化しても、腸
管から多量に吸収されることは明白である。

（実施例９） 健常な体重約２００ｇのウイスタ一系雄性ラット２４頭
を一夜絶食させた後、ランダムに３群に分け、第１群を
対照群（ｎ＝８）、第２群をインスリン対照群（ｎ＝８
）、第３群をインスリン脂肪乳化液群（ｎ＝８＞とした
。インスリン脂肪乳化液は、ヒト・インスリン溶液（４
　０　Ｕ　／ｍｌ）　１　０−に新鮮な牛乳から分離し
たクリーム１０ｍｌを加え、完全に混合して調製した。

第１群のラットには生理食塩水、第２群にはインスリン
溶液、第３群にはインスリン脂肪乳化液を経口投与した
。投与液量は２０Ｕ／ｋ，である。ラットは拘束ゲージ
に収容し、投与直前、投与３０分後、６０分後、１２０
分後、１８０分後に尾静脈から採血して、血糖および血
清インスリンを測定した。結果は表４に示すように、イ
ンスリンをクリームに混合して投与した場合に限って、
多量のインスリンが血中に出現し、それにともなった血
糖が下降した。

く実施例１０） 遺伝子工学で製造したヒト成長ホルモンをウイスター系
雄性ラットに経口投与して実験を行った。

体重約２００グラｌ＼のウイスタ一系雄性ラットの尾静
脈にエーテル麻酢下でカニュレーションを施し、ボール
マン・ケージに拘束した。ヒト成長ホルモン１１０ｇを
１４＋ｎＮのｐｌ＋ｏｓｐｌ＋ａｔｅ　ｌ＋ｕｆｆｅｒ
　　ｓａｌｉｎｅ（Ｐ　Ｂ　Ｓ　．＋）Ｈ　７．４＞に
溶解し、２４０＋ｎｇのＭＦＧＭを加えて４０℃に加温
した。この液にあらかじめ４０℃に加温・溶解したヤシ
油６］ｎ１を添加して、ポリトロン・ホモジナイザーを
用い最高速度で１分間ホモジナイズし、成長ホルモンの
乳濁液（５０μ２／＋ｏｆｆ）を作成した。対照として
はＰＢＳおよびＰＢＳの成長ホルモン溶液（５０Ｊｉｇ
／ｍ／）を用いた。ラットは１群あたり６頭とした。対
照群にはＰＢＳ，成長ボルモン対照群には成長ホルモン
のＰＢＳ溶液、成長ホルモン乳濁液群には乳濁液をそれ
ぞれ２＋ｎＮ／ｒａｔの割きで経口投与し、血液０　．
　３　＋ｎ　１を尾静脈から経時的に採血し、血中のヒ
ト成長ポルモン・レベルを２抗体法のラジオイムノアッ
セイによって定量した。

表５　ヒト成長ホルモン乳濁液投与ラットの血中成乳濁
液として投与した場合には、ヒト成長ホルモンは３０分
後から高い濃度で血中に出現し、投与２時間後で最高値
を示した。一方、対照群の血中からはヒト成長ホルモン
は検出されなかった。またＰＢＳに溶解して経口的に与
えた場きには、９０分後から僅かに血中に出現するが、
乳濁液と比べると腸からの吸収率は１／１００以下と推
定される。従って、乳濁液として投与した場合の優位は
明らかである。

（実施例１１〉 体重約２００グラムのウイスター系雄性ラットの十二指
腸と尾静脈にエーテル麻酔下でカニュレーションを施し
、ボールマン・ケージに拘束した。

一方、ウナギ・カルシトニン１ＩＩＩｆＩを７１Ｉ１１
のｐ　ｌ＋　ｏ　ｓ　ｐｂａｔｅ　　Ｉ＋ｕｆｆｅｒ　
　ｓａｌｉｎｅ（ｐＨ７．４）に溶解し、１２０ｍｇの
ＭＦＧＭを加えて４０℃に加温した。この液にあらかじ
め４０℃に加温・溶解したバターオイル３ｍｌを添加し
て、２分間の超音波処理を施し、カルシトニン乳濁液（
　１．　Ｏ　Ｏ　Ｊｉｇ／　ｍ＃）を作成した。

このカルジトニン乳濁液０．５『ｏｌをカニューレを通
して十二指腸内に注入し、尾静脈から経時的に０．３ｆ
ｏｌを採血し、血中のウナギ・カルシトニン・レベルを
２抗体法のラジオイムノアッセイによって定量した。対
照群にはＰＢＳ（−）、カルシトニン対照群にはカルジ
トニンのｐｌ＋ｏｓｐｌ＋ａｔｅ　ｌ１ｕｒｆｅｒｓａ
ｌｉｎｅ溶液（１００μｇ　／’　１ｎｌ−　）をそれ
ぞれ０．５＋ｎＮづつ注入し、乳濁液投与群と同一のス
ケジュールで採血した。なおカルシトニンを投与する３
０分前に塩化力ルジウムを生理食塩水に溶解し、６　０
　＋ｎｇｌ　ｋｙを腹腔内に投与し、内因性力ルジトニ
ン分泌を刺激した。−群は６頭のラッ１・から成り立っ
ている。

５０ 表６ カルシトニン乳濁液投与ラットの血中カノレ表から明ら
かなようにカルシトニン乳濁液投与ラ・ソトの血中カル
シトニン濃度は、二つの対照群と比べて圧倒的に高く、
乳濁液中のカルシトニンが腸管から相当量吸収されてい
ることは確実である。

（実施例１２） エーテル麻酔下、体重約２００グラムのウイスタ一系雄
性ラットの門脈にカニュレーションを施し、ボールマン
・ケージに拘束・固定した。牛乳から分離したラクトフ
エリンｏ．ｔｇを１４−のｐ　Ｉ＋　ｏ　ｓ　ｐ　ｌ＋
　ａ　ｔ　ｅ１＋ｕｆｆｅｒ　　ｓａｌｉｎｅ（ｐＨ７
．４＞に溶解し、２４０ｍｇのＭＦＧＭを加えて４０℃
に加温した。この液にあ５１ らかしめ４０℃に加温・溶解したバターオイル６＋ｎ１
を添加して、２分間の超音波処理を施し、ラクトフェリ
ン乳濁液（５　ｍｇ／　ｍｅ）を作成した。また、対照
としてラクトフェリンの１＋ｌ＋ｏｓｌ＋ｂａｔｅ　　
ｂｕｆｆｅｒｓａｌｉｎｅ溶液（５＋＾＃／ｍＮ）を調
製した。このラクトフェリン溶液ないし乳濁液をガスト
リック・チューブを通してラット胃内に２『ｏｒｌづつ
注入し、門脈から経時的に０．３ｍｌを採血し、血中の
ウシ・ラクトフェリン・レベルを２抗体法のラジオイム
ノアッセイによって定量した。一群は６頭のラットから
成り立っている。

リン乳濁液群 ＊ｐ＜ｏ．ｏｏｔ 表７から明らかなようにラクトフェリンをリン酸ｔＳｍ
液中に溶解して投与した場合には、ラクトフェリンはほ
とんど血中に出現しないが、ラクトフェリン乳濁液を経
口投与したさいには高いレベルで血中に出現することが
明らかになった。すなわち、分子量８万７千のウシ・ラ
クトフェリンは牛乳脂肪球と一緒に乳濁液として経口投
与すると、明らかに消化管から体内に吸収される。

（実施例１３） ロタウイルス（Ｎ　Ｃ　Ｄ　Ｖ株、血清６型）に対し（
１　：３１２５０）Ｑ中和抗体価を持つウシ免疫グロブ
リン８ｇを４００−のｐｂｏｓｐｂａｔｅ　　ｂｕｆｆ
ｅｒ　　ｓａｌｉｎｅ（Ｐ　Ｂ　Ｓ　，ｐＨ７．４）に
溶かし、４０℃に加温しつつ乳脂肪１６ｇと牛乳脂肪球
皮膜８００Ｂを加え、ポリトロン・ホモジナイザーで２
分間ホモジナイズした。この乳濁液２００ｍｌを健康な
成人男子ボランティア−４名に内服させ、内服直前、内
服３０分後、１．２および３時間後に５−づつ採血し血
清を得た。１週間後に、再び同一のボランティアー４名
は、各人とも前回と同一の免疫グロブリン２１？を２０
０ｍｌのｐｌ＋ｏｓｐｂａｔｅ　　ｂｕｆｆｅｒ　　ｓ
ａｌｉｎｅ（ｐＨ７．４）に溶かして内服し、前回と同
一のスケジュールにしたがって採血し、血清を分離した
。これらの分離した血清中に含まれるロタウイルスに対
する中和抗体は、ＮＣＤＶ株を用いてｐｌａｑｕｅ　　
ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ法によって測定し、血清中の抗ロタ
ウイルス中和抗体価は希釈倍率であらわした。

５４ 表８ 血清中の中和抗体価 ５５ 表８から明らかなように血中の中和抗体価は、脂肪乳剤
として免疫グロブリンを内服したほうがＰＢＳ溶液とし
て内服した場合と比べ高度に有意に上昇した。従って、
脂肪乳剤として内服するとかなりの量の免疫グロブリン
が腸管から吸収されることは明らかである。

免肚α然最 以上説明したように、ＭＦＧＭを用いる本発明の方法及
びこの方法により得られた薬剤組成物によれば、脂溶性
薬物および生理活性ペプチド等を経口投与した場合の吸
収速度及び吸収量が、従来の製剤化技術による場合に比
べて、著しく改善される。また、ＭＦＧＭが食品由来の
界面活性剤であることから安全性の点においても優れて
いる。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明で使用するＭＦＧＭの可溶化能を示すグ
ラフ、第２図乃至第６図は本発明で使用するＭＦＧＭの
種々の条件下における乳化能を示すグラフ、第７図乃至
第９図はビタミンＡのリンパ管吸収に及ぼすＭＦＧＭの
影響を示すグラフ、第１０図はＭＦＧＭを用いたハイド
ロコーチゾン乳濁液の経口投与後におけるハイドロコー
チゾンの血中濃度を示すグラフ、第１１図は糖尿病ラッ
トの十二指腸内にインスリンを投与した後のラットにお
ける血糖値の経時的変化を示すグラフ、第１２図は糖尿
病ラットの十二指腸内にインスリンを投与した後のラッ
トにおける血中インスリンの経時的変化を示すグラフで
ある。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、懸濁化剤として哺乳類乳汁中の脂肪球皮膜を用いる
   ことを特徴とする新規懸濁化方法。 ２、水に難溶ないし不溶で有機溶媒に可溶な脂溶性物質
   の微細な水懸濁液を調製するため、脂溶性物質を哺乳類
   乳汁中の脂肪球皮膜によって被覆することを特徴とする
   脂溶性物質の新規懸濁化方法。 ３、水及び有機溶媒のいずれにも難溶であるが、両溶媒
   間の分配係数が有機溶媒に傾いている物質の微細な水懸
   濁液を調製するため、この物質を哺乳類乳汁中の脂肪球
   皮膜によって被覆することを特徴とする水及び有機溶媒
   のいずれにも難溶であるが、両溶媒間の分配係数が有機
   溶媒に傾いている物質の新規懸濁化方法。 ４、水に難溶ないし不溶で有機溶媒に可溶な脂溶性物質
   を微細な水懸濁液とするため、哺乳類乳汁中の脂肪球皮
   膜と脂溶性物質とを、水中において物理的な手段により
   乳化することを特徴とする脂溶性物質の新規懸濁化方法
   。 ５、水及び有機溶媒のいずれにも難溶であるが両溶媒間
   の分配係数が有機溶媒に傾いている物質を微細な水懸濁
   液とするため、哺乳類乳汁中の脂肪球皮膜と上記物質と
   を、水中において物理的な手段により乳化することを特
   徴とする水及び有機溶媒のいずれにも難溶であるが、両
   溶媒間の分配係数が有機溶媒に傾いている物質の新規懸
   濁化方法。 ６、生理活性ペプチドの微細な水懸濁液を調製するため
   、生理活性ペプチドを哺乳類乳汁中の脂肪球皮膜を用い
   乳化することを特徴とする生理活性ペプチドの新規懸濁
   化方法。 ７、生理活性ペプチドを水に溶解あるいは懸濁した後、
   中性脂肪と哺乳類乳汁中の脂肪球皮膜を添加し、物理的
   な手段により乳化することを特徴とする新規懸濁化方法
   。 ８、生理活性ペプチドを水に溶解あるいは懸濁した後、
   中性脂肪と哺乳類乳汁中の脂肪球皮膜および蛋白分解酵
   素阻害剤を添加し、物理的な手段により乳化することを
   特徴とする新規懸濁化方法。 ９、請求項１ないし８のいずれかに記載の方法において
   、哺乳類乳汁中の脂肪球皮膜が精製された牛乳脂肪球皮
   膜であることを特徴とする新規懸濁化方法。 １０、請求項１ないし９において、哺乳類乳汁中の脂肪
   球皮膜に代えて、牛乳脂肪球皮膜を含む乳製品を用いる
   ことを特徴とする新規懸濁化方法。 １１、牛乳脂肪球皮膜を含む乳製品がバターミルクまた
   はクリームである請求項１０記載の新規懸濁化方法。 １２、請求項１ないし１１のいずれかに記載の方法で調
   製した懸濁化組成物をそのまま、或いは増量剤を加え噴
   霧乾燥するかまたは凍結乾燥して粉末化することを特徴
   とする経口投与に適した新規製剤の製法。 １３、請求項１ないし１２のいずれかに記載の方法によ
   って調製された組成物。