JPH03170053A - 抗生物質の生物学的活性の予測方法およびそれにより誘導した新規なベータラクタム抗菌剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、新規な抗菌剤およびその抗菌剤の生物学的活
性をペニシリンに対比して予測する方法に関するもので
ある。更゛に詳細には、この出願には、候補化合物の，
細菌細胞壁レセプターに対する適合性ならびに反応性を
決定する分子モデル化手法，つまり活性を発現する構造
形式を予測する方法か記載されている。

１　９　１　０ｑ−代から、ペニシリン類やセファロス
ボリン類などのβ−ラクタム系抗生物質は、細菌細胞壁
それ自体に干渉することにより効力か生しることか知ら
れている。また、この干渉は、ペニシリン結合蛋白Ｊ　
（ＰＢＰ）と呼ばれるグループの一つまたはそれ以上の
酵素の活性部位のセリン残基との共有結合により生じる
ことか発見されている．これらの酵素は、ベプチドグル
カン鎖の架橋により、細菌細胞壁合或を完或するのに役
立つものてあり、これらの酵素は細胞にとっては必須の
ものである。公知のＰＢＰの全ては，　−Ｓｅｒ−Ｘ−
Ｘ−Ｌｙｓ−という配列を有していて、ＰＢＰとβ−ラ
クタム系抗生物質との反応の最も簡単な反応速度論的記
載は下記式ｌの通ってあり、式中Ａは一般化した構造て
ある，ＰＢＰは脱アシル化工程により再生されるのて、
有用な抗菌活性には、ｋ３／ｋ≧ｌ　Ｏ　Ｏ　Ｏ　Ｍ−
’ｓｅｅ−’ならびにｋ４≦１ｘ１０−’　　ｓｅｃ−
’てある必要かあると考えられる。

Ｓｔｅｐ　Ｉ　　　Ｓｔｅｐ　２ したかって、問題は，抗菌活性と、ＰＢＰと抗生物質と
の間て起る”ロックと鍵”の関係になる相互作用との因
果関係かあるとすればそれが何であるかである． 本発明は、抗菌活性と、ＰＢＰならびに選択された抗生
物質の間におけるロックと鍵との相互作用との因果関係
を決定し，それにより，ペニシリンの適合性ならびに反
応性に比例して，あらゆる選択された候補構造の「適合
性（王程１）Ｊと「反応性（工程２）」とが、ペニシリ
ンの適合性と反応性に対比して、ある程度の定量的な正
確さで予測てきる手段を提供することを目的とするもの
てある。

本発明の別の目的は、このモデルによって、抗菌活性を
有する新規な非β−ラクタム化合物を作り出すことてあ
る。

本発明の一態様は、分子の種エネルギー（ｓｔｒａｉｎ
　ｅｎｅｒｇｙ）か分子パラメータについて最少になる
大きい分子の分子構造を決定する方法であって、その方
法が，最小化法のための出発パラメータを特定するため
に、最も蓋然性のある多数のランダム構造のワンポイン
トエネルギーを最初に計算し、そして最少のエネルギー
を有する前記ランダム構造を所定数を前記最小化法のた
めに選択することを特徴とする． したかって、本発明の別の態様では，あらゆる選択され
た候補抗菌化合物の適合性ならびに反応性を決定する方
法が提供され、その方法が、（ａ）ペニシリン結合蛋白
質に含まれるセリンーリシン活性部位のセリンのＯＨと
前記化合物の反応部位との間の４つの中心を持つ関係を
形成するための相対的容易さを決定することにより，前
記化合物と、前記ペニシリン結合蛋白質のモデルとの反
応をシムレートし、そして（ｂ）メタノールとＮーメチ
ルアゼチジノンとの対応反応の活性エネルギーに対比し
て、前記化合物の化学的に活性な官能基とメタノールと
の４中心の反応のための活性エネルギーを決定すること
からなる方法を提供するものてある． 本発明の別の態様は、非β−ラクタム含有化合物てあっ
て、前記化合物か４中心をもつ遷移構造を形成すること
かでき，その遷移構造には、この化合物に反応したペニ
シリン結合蛋白質のモデル中に含まれたセリンＯＨ基が
含有されていて、また前記化合物は，Ｎ−メチルアセチ
ジノンによって示される活性エネルギーよりも３Ｋｃａ
ｌ／モルほとも大きくないメタノールとの反応のための
活性エネルギーを有している化合物を提供することであ
る． 本発明の更に別の８様は、下記一般式（Ｉ）で示される
化合物： （式中、ＸはＳ、０、ＣＨ２、Ｎ｝Ｉ，　ＮＲ？および
Ｓｅからら選ばれる基であり， Ｙは（ＩＨ．ＮＨ２、ＮＩＩＣＯＲ９およびＳＨから選
ばれる基てあり、 Ｒ，、Ｒ２．　Ｒ３、Ｒ４、ＲＳ，　Ｒ６およびＲ７は
それぞれ水素原子、アルキル基またはア リール基を意味し、 Ｒ９はβ−ラクタムの活性側鎖を意味する） ならびにその医薬的に許容される塩を提供するものてあ
る。

β−ラクタムの活性側鎖とは、β−ラクタム抗生物質に
おいて活性てあると知られている側鎖てある。この発明
において使用されるβ−ラクタム抗生物質において許容
される置換基としては、ペニシリンならひにセファロス
ボリン化合物に関する文献に記載された広範囲な許容さ
れるあらゆる置換基が挙げられる。かかる置換基として
は、例えば、式 ？ＸＱ （式中、Ｘは酸素原子またはａ黄原子を意味し、モして
ＱはＣ，■アルキル基（例えば、メチルまたはエチル）
、Ｃ２■アルケニル基（例えば、ビニルまたはブロベニ
ル）またはアリールＣ１−４アルキル基（例えば、ベン
ジル基などのフエニルＣ，−４アルキル基）を意味する
。

かかる置換基はまた、例えば、式， Ｒ１ （式中、Ｒ１およびＲ２は同一てあっても、異なってい
てもよく、水素原 子、カルボキシ、シアノ、Ｃ２−７ アルコキシカルボニル（たとえ ば、メトキシカルボニルまたは エトキシカルボニル）および置 換ならびに非置換脂肪族（例え は、アルキル、好ましくはＣ．− Ｃ６アルキル（例えば、メチル、 エチル、イングロビルまたはｎ− プロビル）から選ばれた基を意 味する）。

上記式て表わされる置換ビニル基の具体例としては，２
−カルボキシビニル、２−メトキシカルボニルビニル、
２−エトキシカルボニルビニルおよび２−シアノビニル
か挙げられる。

別のβ−ラクタムに許容される置換基としてはまた、式 −ＣＩ｛２Ｙ （式中、Ｙは水素原子または親核原子 もしくは基，例えば、親核 剤残基または親核剤残基の 誘導体を意味する） て表わされる非置換もしくは置換メチル基が挙げられる
。つまり，Ｙは、例えば、親核性窒素原子、炭素原子、
硫黄原子または酸素原子を有することて特徴付けられる
広範囲の親核性物質から誘；９することかてきる。かか
る親核剤はβ−ラクタム化学に関する特許ならびに技術
文献に広く記載されていて、その例としては、例えば、
アメリカ国特許第４３８５１７７号〈特許権者フォック
ストン等、特許日１９８３年５月２４日〉第４欄第４２
行目から第８ＭＡ第２４行目まて記載された化合物、な
らびに第３４欄第５１行目から第３６ｉ第１７行目まて
に参照された記載か挙げられる．本発明の更に別の態様
は、 次の一般式， （式中、Ｘはｓ．ｏ．ｃ＋＋．、ＮＨ．ＮＲ．およびＳ
ｅからら選ばれる基てあり、 ＹはＯ｝Ｉ．ＮＨ．、ＮＨＣＯＲ，およびＳＨから選ば
れる基てあり、 Ｒ．，　　Ｒ２，　　Ｒ３、Ｒ．，Ｒ１、　　Ｒ６、Ｒ
，およびＲ６はそれぞれ水素原子、アルキル基または アリール基を意味し、 Ｒ９はβ−ラクタムの活性側鎖を意味する） ならびにその医薬的に許容される塩を提供するものてあ
る。

本発明の更にまた別の態様は、 次の一般式 （ＩＩ１）て表わされる化合物： ［式中， ？−ＹはＳ−Ｓ，　ＣＨｔｅ｝１２．　Ｓ−ＣＨ２，　
Ｃｆ＋２−Ｓ，Ｓ−ＮＲ■　ＮＲａ−Ｓ，（：ｌＩＪ−
０，Ｏ−ＣＩ＋２．０−ＮＲａ．ＮＲａ−０，Ｓｅ−Ｓ
ｅ，Ｃｌｌ＊−Ｃｔｌｔ，Ｓｅ−ＣＨ＊から選ばれる基
てあり、 ＺはＯＨ，　Ｎｌｌ＊，　ＮＨＣＯＲｓおよび３Ｂから
遺ばれる基であり、 Ｒｌ，　Ｒ２、Ｒ３，Ｒ４．　Ｒｓ．　ＲａおよびＲ６
はそれぞれ水素原子、アルキル基また はアリール基な意味し、 Ｒ７はアルキル基またはアリール基を意味し、 Ｒ，はβ−ラクタムの活性側鎖を意味 し］ ならびにその医薬的に許容される塩を提供するものてあ
る。

本発明の更にまた別の態様は、次の一般式（ｒｖ）て示
される化合物： Ｒ５ ［式中， ＸはＳ、０、Ｃｌ２、Ｎ｝Ｉ，　ＮＲ６およびＳｅから
ら選ばれる基てあり、 ？はＮ．ＣＩ１およびＣＲ７から選ばれる基てあり、 ＺはＯＨ．Ｎｌｌ■、ＳＮまたはＮＩＩＣＯＲｔ　（Ｙ
かＮであるとき）を意味し、 ＺはＲＩＧ　（ＹかＣＨまたはＣＲ，てあるとき）を意
味し， Ｒｌ，　Ｒ２，　Ｒ３．　Ｒ４、Ｒ１、　Ｒ．およびＲ
，はそれぞれ水素原子、アルキル基また はアリール基を意味し、 Ｒ９はβ−ラクタムの活性側鎖を意味 し、 Ｒ，。はＲ＋＋−ＣＨ− Ｒｌｌ （式中、Ｒ．はアルキル基またはア リール基を意味し、 Ｒｌ！はＯＨ，　Ｎ｝１１．ＮＨＣＯＲ９またはＳＨを
意味する）］ ならびにその医薬的に許容される塩を提供するものであ
る。

更に本発明の別の態様は，下記一般式（Ｖ）て示される
化合物： ［式中、 ＸはＳ、０、ＣＨ２、ＮＨ，　ＮＩＩＳおよびＳｅから
ら選ばれる基であり， ＹはＮＲ６−Ｚであり、 Ｒｌ．Ｒ２．　ＲＩ　Ｒ４，　Ｒ．ＪおよびＲ６はそれ
ぞれ水素原子、アルキル基またはア リール基を意味し、・ Ｚは０｝１，　３１１、ＮＨ２またはＮ｝ＩＣＯｌ’ｌ
，を意味し、 Ｒ９はβ−ラクタムの活性側鎖を意味 する］ ならびにその医薬的に許容される塩を提供するものてあ
る。

のてある。奸まし〈は、Ｒ，は水素原子てあり、ｌはＮ
ＩＩＣＯＲ９　（式中、Ｒ，は低級アルキル基、特にペ
ンシル基を意味する）てある。

本発明において使１４される「アルキル基」という用語
は，２０まての炭素原子を含むアルキル基，奸まし〈は
次素数か１から６まてのアルキル基であって、そのアル
キル基は場合により、官能基、例えば遊離の、エーテル
化されたもしくはエステル化されたヒトロキシ基もしく
はメルカプト基によっ゛Ｃモノ置換、ジ置換もしくはポ
リ置換されたもの、例えば、低級アルキルもしくは低級
アルキルチオ：場合により置換されていてもよい低級ア
ルコキシカルボニルオキシもしくは低級アルカノイルオ
キシ；ハロゲン；オキソ；ニトロ；場合により置換され
ていてもよいアミノ，例えば、低級アルキルアミノ，シ
ー低級アルキルアミノ低級アルキルアミノ、オキソー低
級アルキレンアミノもしくはアザー低級アルキルアミノ
、ならびにアシルアミノ、例えば、低級アルカノイルア
ミノ、低級アルコキシカルボニルアミノ、ハロゲノー低
級アルコキシカルボニルアミノ、場合により置換されて
いてもよいフェニルー低級アルコキシカルポニルアミノ
、場合により置換されていてもよいカルハモイルアミノ
、ウレイトカルボニルアミノもしくはグアニシノカルボ
ニルアミノ、更にまた，場合ｑより、アルカリ金属塩，
アシト、もしくは、低級アルカノイルもしくはペンゾイ
ルなどのアシルの形などの、塩の形で存在していてもよ
い。

更には、場合により官能性に修飾されていてもよいカル
ボキシ基、たとえば塩の形て存在するカルボキシル、エ
ステル化されたカルボキシル基、たとえば低級アルコキ
シカルボニル、場合により置換されていてもよいカルハ
モイル基，たとえばＮ一低級アルキルカルハモイルもし
くはＮ，Ｎ−シー低級アルキルカルハモイル、ならびに
場合により置換されていてもよいウレイトカルボニルも
しくはクアニシノカルボニル基：ニトリル基：場合によ
り官能性に修飾されていてもよいスルホ基，たとえは塩
の形て存在してもよいスルファモイルもしくはスルホ：
または場合はより０−モノ置換もしくは０．０〜ジ置換
されていてもよいホスホノ基てあって、例えば，場合に
より置換されていてもよい低級アルキル、フェニルもし
くはフエニルー低級アルキルによって置換されていても
よく、更には、たとえばアルカリ金属塩の形などの塩の
形になるように〇一非置換されていても、もしくは〇一
モノ置換されていてもよい置換基が挙げられる。

本発明において使用される「アリール基」という用語は
、炭環式もしくは複素環式のアリール基を意味する。震
環式アリール基としては、例えば、フェニル基またはナ
フチル基てあって、これらは場合により、３個まてのハ
ロゲン原子、Ｃ，−６アルキル基、Ｃ，−６アルコキシ
基，ハロ（（：＋−６）アルキル基，ヒトロキシ基，ア
ミン基、カルボキシ基Ｃ，−６アルコ斗シカルボニル基
、Ｃ１−６アルコキシカルホニル＝（Ｃ＋−Ｓ）アルキ
ル基、二トロ基、スルホンアミト基、　ＣＩ−６アルキ
ルカルボニル基、アミト（ＣＯＮ＋＋２）基またはＣ，
−６アルキルアミノ基を意味する。

前記用語「複素環式」は、その環に４個までの酸素原子
、窒素原子および硫黄原子から選ばれたべテロ原子から
なり、場合によって３個までのハロケン原子、Ｃ１−６
アルキル基＋　Ｃ　Ｉ−　６アルコキシ基，ハロ（Ｃ＋
−ｓ）アルキル基、ヒトロキシ基、アミノ基、カルボキ
シ基．　　ＣＩ−６アルコキシカルボニル基、Ｃ１−６
アルコキシカルボニル−（Ｃ＋一。）アルキル基、アリ
ール基、オキソ基、ニトロ基、スルホンアミト基、　Ｃ
，−６アルキルカルボニル基、アミド基またはＣ１−６
アルキルアミノ基て置換されていてもよい単一のまたは
縮合した環を意味している。

適邑なＣ１−６アルキル基としては、直鎖状または分枝
状の基てあり、例えば、メチル、エチル、ｎープロビル
、イソブロビル、ｎ−フチル、ｓｅｃ−ブチル、イソフ
チル、Ｅ−ツチルなどが挙げられる。

ペプチド類（例えば．酵素類），ペニシリン類やセファ
ロスボリン類の可能な構造は，アメリカ合衆国インジア
ナ州、ブルーミントン所在のインジアナ大学の量子化学
プログラム・エクスチェンジ（ＱｕａｎｔｕＩＩＣｈｅ
ｍｉｓｔｒｙ　Ｐｒｏｇｒａｍ　Ｅｘｃｈａｎｇｅ　−
　ＱＣＰＥ）から入手てきるコンピュタープログラムＭ
ＭＰ２（８５）を使用して調た．このプログラム｛よ、
結合の伸長、結合角度の屈折、結合の変形、および非結
合原子の静電気的ならびにファン・デル・ヴアール相互
作用に関連する、分子の種エネルギーに対する寄与とい
う点て，分子の種エネルギーを計算するするものである
．この計算を行なうためには、全ての原子のデカルト座
標値を入力し、そして結合原子ならびに付属原子のリス
トを定義しなければならない．もし関心のある分子中に
存在する原子の形式が知られていれば、その種エネルギ
ーは、ニュートン・ラフソン（Ｎｅｗｔｏｎ−Ｒａｐｈ
ｓｏｎ）手法を、前述した個々の寄与の全てを含む非拘
束の、多変数の，非線形の関数に適用することにより最
少にすることができる。この関数は力場（フォース・フ
ィールド）と呼ばれる。信頼かてきる様式に最少化を進
めるためには、計算の初めに入力する幾何学的配置が合
理的な程度に精度か高く、かつエネルギーウエルの底部
に近いことか重要てある。

コンピュータ　プログラムＭＭＰ２（８５）によって調
べる異なる分子のそれぞれにとって，先ず、この分子内
部に存在する原子の形式に関連するパラメータを決定す
る必要かある。これらのパラメータとしては，就中、標
準の結合の長さならびに結合角度および伸長力ならびに
曲げ力定数が含まれる．結合の長さならびに角度は振動
データの集積から得ることかてき、そのほかは分子軌道
（ＭＯ）法により計算することかてきる。パラメータ展
開の一般的な手法は、アメリカン・ケミカル・ソサイエ
テイ−（ワシントン、１９８２）発行、ユー・バーカー
ト（ｕ．　Ｂｕｒｋｅｒｔ）、エヌ・エル・アリンジャ
−　（Ｎ．　ｌ−　ＡＩｌｉｎｇｅｒ）共著による論文
「モレキュラー０メカニックス（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　
Ｍｅｃｈａｎｉｃｓ）」に記載されている。）Ｉ！ｌ！
Ｐ２に要求される力場を確定するためのペプチド類（例
えば、酵素類）、ペニシリン類やセファロスボリン類に
対するパラメータは以前は未知てあったが、これらのパ
ラメータか初めに決定され、既知の実験的結晶構造を再
生する能力のために試験し、そして異なる構造形式の形
態（三次元構造）に対する溶媒の既知の効果か調べられ
る．これらのパラメータは，　ＰＥＰＣＯＮ（付録１）
（ベブチドについては）　．　ＰＥＮＣＯＮ　（付録２
）（ペニシリンについては）　．　ＣＥＰＡＲＡＭ　　
（付録３）（セファロスポリンについては）と呼ばれる
． コンピュータ・プログラムＭＭＰ２（８５）を使用する
ために必要な第２の要件は、デカルト座標値の初期セッ
トノ規定である．ペニシリン類やセファロスボリン類の
ような小さな分子にとっては、実験的結晶構造の座標値
か使用できる．それて適当なパラメータによる最小化に
より、実験的構造を再生する計算された構造を得ること
かてきる．この、構造から他の形態に進み，そして分子
のジヘドラル角（二面角）のそれぞれの周りの一連のシ
ヘトラル（二面）運動により分イの球形最小になる。

これはコンピュータ・プロクラムＭＭＰ２（８５）で得
られるオプションてあり、これは良好に作動する．しか
しなから，かかる手法は、２個または３個以上のアミノ
酸残基を含有するかかるあらゆる分子について調査しな
ければならないジヘドラル角の数か非常に多数あるのて
ベプチドの分析のためには実用的てはない． したかって．　ＱＣＰＥより入手てきるコンビュタープ
ログラムＥＣＥＰＰ（Ｅ＋＊ｐｉｒｉｃａｌ　Ｃｏｎｆ
ｏｒｍａｔｉｏｎａｌＥｎｅｒｇｙ　Ｐｒｏｇｒａｍ　
ｆｏｒ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ）が変更されて、ランダム・
ナンバー・ジェネレー夕を用いて，最も蓋然性のあるバ
ックボーンならびにジヘドラル角の順列を含む２０００
００個の初期構造のワンポイントエネルギーを計算でき
るようにされている。このようにして特定した最小エネ
ルギーを有する５０個の構造を読み出し、二次最小化手
法（ｑｕａｄｒａｔｉｃ　ｍｉｎｉｍｉｚａｔｉｏｎ　
ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ）を使用して最小化し，ついてニュ
ートン・ラフソン手法により＠Ｐ：顔小化のためのＭＭ
Ｐ２（８５）フ才−マットに変更される。この初期サー
チの目的は，適当な出発パラメータを特定するためてあ
る。この手法は広範聞に亙って試験されていて、良く作
動し、そして後述ずるようにＰＢＰの処理のために適用
された。

これらの手法を実際に適用することにより、初期シリー
スの９個のペニシリン（ｌａ−１ｉ）か調べられた。こ
れら９個のペニシリンのうち、１ａ−１ｄは医薬として
広く使用されている非常に活性の高い抗生物質（アンピ
シリン、シンシリンペニシリンＧ、ペニシリンＶ）てあ
り、ｌｅ−１ｆは大幅に活性か低いものてあり、１ｇ−
１ｉは生物学的に不活性てあるものであった。これらの
化合物の形態的分析から、抗菌活性は、カルボキシ基な
らびに側ＭＮ−Ｈが凸面から突き出ている３次元構造に
具体的に関連していること、つまりレセブター，即ちＰ
ＢＰとの，水素を結合するロックと鍵との相互作用に関
係していることか分かる。

口 １Ｃ： Ｒ− ＰｌＩＣＨ２ＣＯ− １ｄ： ＲＩＩ ＰｈＯＣＨ２ＣＯ− 口 次に１形態的分析を、セファロスボリン類２ａ−２ｃに
ついて行なった。これらの化合物のそれぞれはフェノキ
シアセチル側鎖を有していることカラ、ペニシリンＶ（
ｌｄ）と比較することがてきる。▲３一異性体２ａは生
物学的に活性があるが、生物学的に不活性てある▲２一
異性体２ｂと容易に平衡になる．２ｂの活性か欠如して
いる理由は、これまでは確立されていなかったが、４−
エピー▲２一異性体２ｃかＰＢＰレセプターに対しより
良い適合性を示し、そして抗菌活性を有することが示唆
されている。しかしなから、かかる化合物はまた不活性
である。したがって、この活性の欠如の理由はまた知ら
れていない。

セファロスボリン化合物２ａ−２ｃは、ペニシリン化合
物１ａ−１ｄと同様に、側釦Ｎ−Ｈか分子の凸面を占め
ている形態を好先でとることか判明している。ペニシリ
ンの場合のように、したかって、レセプターとのロック
と鍵との相互作用は、主にカルボキシル基とこの側％Ｎ
−Ｈとの一次結合か関与していることか当然のことと仮
定される。

ＣＯ２− Ｃ○２− 菌株ストレプトマイセスＲ６１の活性部位セリンＤ−ア
ラニルカルボキシベブチターゼ・トランスベブチターゼ
は、β−ラクタム化合物の導入により結晶化され、その
結晶構造は一部解析されている。同し酵素のｐＦＩ依存
性もまた調べた。これらの２種類の試験で、ペニシリン
のカルボキシル基はＸ−Ｘ−Ｌｙｓのリシン残基のプロ
トン化された末端アミノ基と密按に関連していることか
示された。その結晶構造ては、その複合体において，ペ
ニシリンのβ−ラクタム環は活性部位セリンに密接して
存在していることが確認されている。ｐＨ依存性試験は
、キモトリブシンおよび関連セリンプロテアーゼの挙動
とは異なって，化学方法におけるヒスチシンの関与を排
除している．この結果は、セソンＯ−Ｈか基質との化学
反応に関与していることか意味している． これらの観察から、独特のセリン残基な囲むアミノ酸、
つまり、この場合には、Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｖａ
ｌ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓによって．ＰＢＰの活性部位の正当
なモデルか得られることが示される。従って、べプチト
Ａｃ−Ｖａ　Ｉ−Ｇ　ｌｙ−Ｓｅ　ｒ−Ｖａ　ｌ−Ｔｈ
ｒ−Ｌｙｓ−ＮＨ−ｅｌｆｓが、２０００００個の初期
構造のＥＣＥＰＰサーチに付され、続いて）４ＭＰ２（
８５）プロクラムにより、このサーチにより同定された
５０個の低エネルギー構造を精選した．近接するリシン
およびセリン側鎖を有する１個の低エネルギー構造か見
出されている．この構造は，下記第１表に要約されてい
るセットのシヘトラル角により特長付けられていて、そ
の構造は第１図の通りである。

第１図に示す構造は、関心のある数個の態様を有してい
る。その凸面は主に疎水性であり、その凹面はセリンお
よびリシン側釦か含まれていて、生に親木性である。そ
の凹面はまた、Ｎ末端アセチル基のアＺ　ｌ’酸素を含
有している．これらの３つの部位は、第１図においては
、Ｓ（セリン），Ｌ（リジン），Ａ（アセチル基）で示
されている。第１図の凹面と、ペニシリンおよびセファ
ロスボリンの前に定めた凸面との間にロックと鍵との関
係か存在することは明らかなように思われる。

かかる関係については、その抗生物質のカルボキシ基と
リシンの末端アミノ基とを接触させることが必要であり
、またその抗生物質の側鎖Ｎ−Ｈとそのアセチル酸素と
を接触されることも必要である。

そのレセプターが，Ｎ　Ｈｙ　−．．−Ｏｘ　Ｃおよび
Ｎ　−　Ｈ　．．．．Ｏ　＝　Ｃ水素結合を介して基質
に結合しているスーパー分子（超分子）の構造が従って
望ましい。プログラムＭＭＰ２（８５）を使用してかか
るスーパー分子の構造とエネルギーを得るためには，？
カルト座標の出発セットを出力するための手貼を工夫す
る必要かある。

コンピュターブロクラムは、問題に対する以下のような
アプローチに基づいて書かれている。ＡはＮ，ＩＫ子を
含むレセプター分子とし、Ｂは、Ａに結合されるＮ２原
子を含む基質分子としている。ＡおよびＢの幾何学的配
置はデカルト座標、つまり内部座標値として知られてい
て、そして座標系の２つの形式との間の変形か可能であ
ることを前提としている。従って、出発は、（３Ｎ＋−
６）および（３Ｎ．−６）所定内部座標値を用いてなさ
れる。（Ｎ１十Ｎ！）原子を含むスーパー分子の幾何学
的配置を記載するために，３（Ｎ■十Ｎ２）　−　６の
内部座標値、つまり，６個の新内部座標値が特定され，
最小化される必要がある。これらは、典型的には、１個
の結合の長さ、２個の結合角および３個のシヘトラル角
からなっていて，そしてこれらは「分子内」内部座標値
と呼ぶことかてきる．ソースコードリストか付録４に示
されているコンピュタープログラムを使用するためには
、所望の水素結合祖互作用の１つか選択され、そしてそ
の距離か１．７−２．５オンクストロームに、つまり典
型的な分子内水素結合距離に設定される。次いで，初期
値か残りの５個の変数に与えられ、そのエネルキーを最
小にして第２の水素結合距離をブローフとして使用する
：得られたスーパー分子の幾何学的配置は、ここではデ
カルト座標て表示されていて、第２の水素結合距離か１
．７−２．５オンクストロームてあるときに、ｌｌｌＭ
Ｐ２（８５）による最小化にとって適当であると考えら
れる。

第２〜５図は、レセブターモテルが、ペニシリン■、▲
３−セファロスボリンＶ、▲２−セファロスボリンＶお
よび４−エピー▲２−セファロスボリンＶにそれぞれ結
合している結果を示す立体図をそれぞれ示している。そ
れぞれの場合において、０−Ｈと（０）Ｃ−Ｎとの間に
４中心の相互作用を創造するように、セリンＯ−Ｈがβ
−ラクタム化合物の凸面上に位置していることか分かる
。この４中心相互作用は、第６図に示すペニシリン■に
おいて詳細に示されている。

最適化された複合体のＣ−０−Ｈと（０）Ｎ−Ｃのテカ
ルト座標から、標準基質（この場合には、ペニシリン■
）に対比して、異なる４個の中心を看する相互作用の根
平均平方偏差（ｒｏｏｔ　ｍｅａｎｓｑｕａｒｅ　ｄｅ
ｖｉａｔｉｏｎ）　（ｒｍｓ）を計算して、オンクスト
ロームて表示することが可能である。これかペニシリン
化合物１ａ−１ｉのシリーズについて行なわれると、全
ての活性ペニシリンは０．２オンクストロームより小さ
なｒｍＳを有し、また全ての不活性ペニシリンは０．４
オングストロームよりも大きなｒｌｌｌｓを有すること
か分かる。第２〜５図に示すシリーズについて、ｒｍｓ
偏差はそれぞれ０．０００、０．＋４９、ロ，３３８お
よび０．１４８オングストロームである。

このことにより，生物学的に活性な▲３−セファロスボ
リンと、生物学的な不活性な４−エビー▲２−セファロ
スボリンとの、ペニシリンレセフターに対する「適合性
」は同一てあることか示唆されている。生物学的に不活
性な▲２−セファロスボリンはその適合性か劣っている
。

医薬品の生物学的活性は、そのレセプターに対する適合
能力、つまり上記式１の工程１ばかりてはなく、そのレ
セブターに対する化学的反応を行なうその能力、つまり
上記式１の工程２にも依存している。第２−６図によっ
て示された化学反応は　Ｃ　７　−　０　（Ｓｅｒ）′
（　Ａを参照）ならびにＮ−Ｈ（Ｓｃｒ）結合形成か一
致している４中心の方法である。これは先例のない化学
機構てある。

β−ラクタム化合物の加水分解ならびにアルコル分解は
実験的ならびに理論的にも多くの注目を浴びている，ｐ
Ｈ８よりも大きな水中ては、速度決定工程はカルボニル
基への付加てあり、４面中間体を形戒するが、ｐ１１６
より低い領域では、分子の凸面から、β−ラクタム窒素
へ、速度を決定するプロトンの移動かある。生物学的に
関連するｐｎ領域６〜８においては、加水分解は極めて
遅く、そしてこの領域における分子（４中心）機構の存
在の可能性は未だ確定されていない。同様に、β−ラク
タムの加水分解の前述した理論的研究の全ては、β−ラ
クタムのカルボニル基へのアニオニック付加を強調して
いる。

初期タイプの分子軌道（ＭＯ）計算は、化学反応の機構
を調べるための容認されかつ十分に確立された手順を表
わしている。かかる計算は、アメリカ合衆国ペンシルハ
ニア州ビッツハーク所在のＧＡＬＩＳＳＩＡＮ　Ｉｎｃ
から入手されるコンピュータ・ブロクラムＧＡＵＳＳＩ
ＡＮ　８２およびＧＡＵＳＳＩＡＮ　８５を使用してい
る低レベル（ＳＴＯ−３Ｇ）およひ（３−２１Ｇ）を基
にしたセットを用いて実施することかてきる。半経験タ
イプの分子軌道計算は、比較的大きな分子システムに基
づいて行なうことがてきそしてその分子軌道計算は、一
旦、同一のシステムについての初期の計算について算定
されたならば、有効てある。半経験的手法ＡＭＩ、ＭＮ
ＤＯおよひＭ　Ｉ　ＮＤＯ／３はＱＣＰＥより入手てき
るコンビュータプロクラムＡＭＰＡＣの中にあり、それ
から入手することがてきる。

第２表は、外に（ｅｘｏ）配向したＮ一ならびにＯ−プ
ロトン化した構造を経由した、Ｎ−メチルアゼチシノン
と水との反応、ならびにメタノールとの反応のための初
期データ（▲Ｅ≠，　ｋｃａｌ／ｍｏｌ）を要約したも
のてある．加水分解反応のためには、Ｏ−プロトン化し
た構造は、より低いＳＴＯ−３Ｇレベル（ＳＴＯ−３Ｇ
／／ＳＴＯ−３Ｇ）て１．７５　　ｋｃａｌ／ｍｏｌに
よって確証される。より適当な３−２１Ｇレベル（３−
２１Ｇ／／３−２１Ｇ）でのワンポイント計算は、Ｎ−
プロトン化された転移構造の選択を増やして、５．６６
　ｋｃａｌ／ｍｏ＋にする。同様の結果が、Ｎ−メチル
アゼチジノンのメタノール分解においても見ることがて
きる。これらの結果から、第２−６図において見られる
４中心の相互作用は、純粋の化学方法のみならず、エネ
ルギー的に好ましい化学方法を反映していることか分か
る．Ｎ一および０−プロトン化されたメタノール分解転
移構造はそれぞれ第７図および第８図に示されている． 第２表はまた，Ｎ−メチルアゼチジノンの加水分解なら
びにメタノール分解についての半経験的結果を要約した
ものであり、ＭＩＮＤＯ／３たけかＮ−プロトン化され
た転移構造の優先的選択を正しく再生することは明白て
ある。したかって．ＭＩＮＤＯ／３は、多数の二環状ア
ゼチジノンとメタノールとの反応のための活性エネルギ
ーを調へるために使用された。これらは下記第３表に要
約されている。

第２表 Ｎ一およびＯ−プロトン化された転移構造ａ）を経由し
たＮ−メチルアゼチジノンの加水分解およびメタノール
分解のための相対▲Ｅ≠（ｋｃａｌ／ｍｏｌ）ａ）相対
エネルギーはｋｃａｌ／ｍｏｌて表示されている．下記
第３表の各行には、異なる構造形式の反応がペニシリン
の親骨格であるペナム環システムのそれと比較され、そ
のデータは各行毎に下記に説明する。

匙１１ ４中心のＮ−プｄトシ化された遷移構造のエキソ（ＥＸ
Ｏ）形成を経由したβ−ラクタム化合物のメタノール分
解のための、Ｎ−メチルアゼチジノンに対比した、計算
▲▲Ｅ≠（ｋｃａｌ／ｍｏｌ，　ＭＩＮＤＯ／３）−２
．８０ −４．１５ −４．１１ −０．２５ ０．４６ −２．８０ 一３８６ −２．３５ （１）相対的反応性は、カルバペナム〉ペネム〉オキサ
ペナム〉ペナムの順てある．オキサペニシリン類と、ペ
ニシリンのＣ３ならびにＣ６置換基を有するペネム類は
，抗菌活性を有することか知られている．カルハペナム
の環システムは公知であるけれども、カルハペニシリン
は未だ製造されてはいない． （２）ペナムとセフェム環システムの比較においては、
その相対的反応性は、ペナム〉▲３−セフェム〉▲２−
セフェム、アセトキシメチルー▲３−セフェムの順てあ
る。共通のアシルアミノ側鎖を有するものては，ペニシ
リン類がアセトキシメチル▲３−セファロスボリシ類よ
りもより高い活性強度のオーターてあり、後者は一般的
には３−メチルー▲３−セフェムよりもより高い活性強
度のオーターてあり、▲２−セフェムは不活性てある。

（３）Ｃ３α一カルボキシ基の導入は、その反応性を強
める。そのカルボキシ基は、エビマー化（Ｃ３β）かそ
の反応性を大幅に低下させるところから、水素結合を介
してのメタノール分解を助長する． （４）Ｃ２置換基の導入は、Ｃ３α一カルボキシ基が存
在していなければ、その反応性を低下する。

（５〉６β−アシルアミノ置換基はその反応性に対して
はほとんど効果を有していない。その結果、ペニシリン
の化学反応性はその親てあるペナムのそれより僅かに異
なるたけてある。

第９〜１１図は、それぞれ、ペニシリンのエキソ（ｅｘ
ｏ）メタノール分解ならびにペナムのＯ−フロトン化さ
れたエンド（ｅｎｄｏ）メタノール分解のためのＮ−お
よび０−プロトン化された転移構造の立体図を示してい
る。かかるエント配向転移構造は　エネルギーとしては
ほぼ１　　ｋｃａｌ／ｍｏｌほどＯ−プロトン化された
エキソ構造よりも高＜，Ｎ−プロトン化されたエキソ構
造よりも５　−　６　ｋｃａｌ／＋ｗｏｌほど高い。

第４表は、ペニシリンＶおよび前記セファロスボリン化
合物２ａ〜２Ｃの「適合性」ならびに異なる環システム
の「反応性」を要約したもので、カルボキシ化した基質
とメタノールとの反応についての▲▲Ｅ≠によって表示
している。

積ｒｍｓ　ｘ▲▲Ｅ≠は、適合性と、反応性との組み合
わせを表わし、異なるクラスの抗生物質をその生物学的
活性の順に正しく並べるようになっている．この量に基
づいて、セファロスボリン化合物２ｂはレセプターに対
する適合性が劣っていることから不活性てあり、またセ
ファロスボリン化合物２Ｃはその反応性か低下している
ことから不活性である。

セファロスボリン化合物２ｂと２０との差異は第３表第
３行に示された差異と比較される。その差異は，カルボ
キシ基が分子の凸面の上に存在するときに、その攻撃す
るアルコールの、このカルボキシ基との水素結合により
、化学反応か促進されることに基づいている。したかっ
て、セファロスボリン化合物２ｃは、セファロスボリン
化合物２ｂにおいて失われた適合性を回復しているか同
時に反応性が小さくなっている。これらの考察から、水
素結合のドナーとなる置換基がセファロスボリン化合物
２ｃの凸面上に結合することによって、その化学的反応
性を回復するとともに、そのレセプターに対する許容さ
れる適合性を保持していることか示されている。要求さ
れる置換基の結合のための可能な部位は、Ｓ．Ｃ４なら
びにＣ７（第４表の番号を参照のこと）てある。Ｆ、Ｃ
Ｈ：＋ＯならびにＣ　１１　２０　８か０４ならびにＣ
７に要求されたように結合していても、セファロスボリ
ン化合物２Ｃの反応性を強めないが、アルファ−配向し
たそのスルホキシト体（３）はペニシリンよりも優れた
反応性を示す。セファロスボリン化合物２ｂと２０との
好ましい性質を組み合わせたマロンＭｕ導体（４）はペ
ニシリンに比べたらいくらか低下した反応性を示す（▲
▲Ｅ≠　−３．５１ｋｃａｌ／ＩＩｌｏ１）けれども、
その積ｒＩｌｓ　ｘ　　▲▲Ｅ≠は下記第４表に示した
活性ならび不活性化合物の中間に存在している。したか
って，化合物（３）および（４）は，潜在的に生物学的
関心のある構造形式を含む新規なβ−ラクタムである． 第４表 β−ラクタム化合物とペニシリンレセプターとの複合体
におけるセリンのＣ−０−Ｈ［子とアゼチジノン環のＮ
−Ｃ−０原子のカルテシアン座標値の、ペニシリン■に
対する根平均平方（ｒｐ園）の差異（オングストローム
）；ペナム核に対比して，アゼチジノンとメタノールと
の反応のための活性エネルギー（　ｋｃａ　ｌ／Ｉｌｌ
ｏ　ｌ）　；積ｒａｍｓ▲▲Ｅ≠ Ｃ） 右式のＭＩＮＤＯ／３ 計算 本発明おいて開発された適合性と反応性との組み合わせ
と適合する完全に新しい構造形式をデザインすることも
また可能である．ペニシリン■のジヘドラル角に基づい
て、カルボキシル基が配向すると、「反応部位』てのシ
ヘトラル角が−１５（１〜−１６０°になり、そしてＮ
−ＨまたはＯ−Ｈのような水素結合ドナーが配向すると
，その「反応部位」てのジヘドラル角は−１５０〜−１
６０”である必要がある．その反応部位は４中心遷移構
造を経由してメタノールと反応するものでなければなら
ず、そのＥは，アゼチジノンとの反応とのそれより３一
４　ｋｃａｌ／ｍｏｌほど小さい． 活性エネルギーの系統的な計算では、イくノ基（−Ｃ−
Ｎ−）が要求された反応性を有する官能基として同定さ
れ，この基を、要求された強度のジヘドラル角を有する
環状構造中に導入すると、ペニシリンーセファロスポリ
ン機構による抗菌活性を有する候補楢造として構造５か
同定された．この結果は第１２図に示す． Ｗ生よ このポリペプチドは、４６アミノ酸残基、３２７重原子
ならびに水素原子を含む６３６原子を含有している。こ
の発表された結晶構造は、１．５オンクストロームの回
折データを含んている。この結晶構造の重（非水素）原
子のカルテシアン座標値は．　ＭＭＰ２（８５）への入
力として使用され、水素はＭＭＰ２（８５）て入手てき
るオプションを使用して追加され、そしてニュートン・
ランソン最小化はＰＥＰＣＯＮを使用して実施された。

計算された構造は、実験的な構造からのｒＩｌｓ偏差が
、そのハックボーンの重原子にとっては、０．２９オン
グストロームになり、そして全ての重原子にとっては０
．３１０オングストロームになる。

ペニシリンＶの結晶構造のカルテシアン座標値を使用し
、かっＰＥＮＣＯＮパラメータか全て原子に対して０．
１オンクストロームのｒｍｓ偏差になるようにした以外
は実施例１の実験を繰り返した。

フェノキシアセチル側鎖を有する▲２−セファロスボリ
ンの結晶構造のカルテシアン座標か入力され、そしてエ
ネルキーが、ＣＥＰＡＲＡＭパバラメータとともにｌｉ
ｌＭＰ２（８５）を使用して最小化した。得られたｒＩ
Ｉｌｓ偏差は０．３５オンクストロームてあった。

ベブチドＧ　ｌｙ−Ｔｒｐ−ＩＡｅｔ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ
−ＮＨ２がＥＣＥＰＰに入力され、そしてこの分子の２
０００００個の初期形態についての初期サーチか実施さ
れた。このようにして同定された５０個の最小エネルキ
ーの構造か２次最小化手法（ｑｕａｄｒａｔｉｃ　ｍｉ
ｎｉｍｉｚａｔｉｏｎｐｒｏｃｅｄｕｒｅ）を使用して
のＥＣＥＰＰにより最小化さ？、次いでＭＭＰ２（８５
）のＰＥＰＣＯＮパラメータを使用して精選した。１つ
の構造か特に好ましく、この構造のシヘトラル角は、上
記化合物のＴｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｎｌｌ■
を含有するガストリン・テトラペプチドのそれと同一て
あった。

ペプチドＡｃ−Ｖａ　ｌ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｖａ　Ｉ−
Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−ＮＨＣＨ３は前記実施例４と同様にし
て処理され，そして５０個の最終構造か調べられた。そ
のうちの１個の構造たけが分子の同一側のリシンならび
にセリン側鎖を有していた．この構造は第１図に示され
ていて，そしてそのジヘドラル角は第１表に要約されて
いる． 実施例５のレセプターモデルは、 付録５のコン ピュータ・ブロクラムを使用してのベニシソンＶに結合
した。ペニシリンの数個の形態を調へてその最終の最低
エネルギーの複合体は第２図に示す通りである。

このようにして同定された化合物は，その後、当業者に
知られた標準化学手法に従って合戒することかてきる。

本発明を、製造された化合物の、次のような具体例によ
り詳細に説明する。

実施例７：３−カルボキシル−５−ヒドロキシメチル−
６．６−ジメチル−▲’−１．４−チアジン 下記式■において、Ｘ　−　ｓ；　Ｙ　＝　ＯＨ；　Ｒ
＋＝Ｒ２謬Ｃｌｌユ；　Ｒ：＋　＝　Ｒ４冨Ｒ５−　Ｒ
．　−　Ｈ．０３位におけるＤ−およびＬ一配置か作或
された。

工程ｌ メチルイソプロビルケトン（１５　ａ＋１，　１４０　
ｍｍｏｌ）を、塩化カリ（１．１　ｇ．　１４．８　ａ
ｕｅｏｌ）を水（９．６　ｍｌ）に溶解された溶液に添
加した。この混合物を攪拌し、６０℃に加熱し、そして
フラスコの側に取り付けた３５０ワットのタンクステン
ランブて照射した．次いで，臭素（１１．９　ｇ、７４
．４　■ｏｌ）を滴加した．最初の２，３滴の色か消え
たとき、加熱浴を冷水浴に変えて、３５０ワット電球を
６０ワット電球に変えた．臭素の添加を、内部温度が４
０〜４５℃に維持するのに十分な割合で！Ｉ統した．そ
の添加を完了したときに（２５分間）、得られた反応混
合物を２時間放置し、そしてその有機相を次いで分離し
、水一酸化マグネシウムで洗浄し、無水塩化カルシウム
て乾燥した。分画蒸留により７ｇの化合物Ａｌを得た，
　ｂｐ８２−８６／１４５Ｌｏｒｒ；ＮＭＲ（ＣＤＣｌ
ｉ）　２．：１５（３１｛，　ｓ），　１．７７　（６
Ｈ，　ｓ）Ａ１ 工程２ プロムケトンＡ　Ｉ　（４．６５　ｇ，　２８量１０１
）を氷酢酸（４０■ｌ）に溶解し、新たに再結晶したテ
トラ酢酸鉛（１２．５　ｇ、２８．２　ｇａｏｌ）を添
加した．この混合物を、攪拌しなから１００℃で２時間
加熱した後、室温に冷却した．次いで、エチレングリコ
ール（２ｍｌ）を添加して未反応のテトラ酢酸鉛を破壊
した．得られた反応混合物をエーテル（１００　ｍｌ）
で希釈し、１０％炭酸ナトリウム、水，次いで飽和塩化
ナトリウムで連続して洗浄し、乾燥し、ついて蒸発させ
た。得られた残査を蒸留し、ｂＰ５７〜６０℃／　１　
２　０　Ｌｏｒｒの分画を更にクロマトグラフィ（シリ
カゲル、５％　）　１０％　−＞　１５％　ｊ−−テ）
Ｌｔ−ヘキサン）て精製して、ブロモケトアセテートＢ
１か得られた。ＮＭＲ　ＣＣＤＣＩ３：　５．１５　（
２Ｈ，　ｓ）．　２．１３　（ＩＬ　ｓ），　１．８７
　（６８，　ｓ）工程３ トリエチルアミン（ｌ４０■ｌ）を塩化メチレン（３１
ｍｌ）を添加した．この溶液を−２０℃に冷却し、気体
状の硫化水素をｌＯ分間導入した．次いで、塩化メチレ
ン（１．０　ｍｌ）に入れたプロモケトアセテ−　｝　
Ｂ　ｌ　（２００ｍｇ）を、攪拌しなから、１０分間掛
けて滴加した．得られた黄色の溶液を塩化メチレン（３
０　ｍｌ）て箱釈し．２Ｎ塩酸、水、ついて飽和塩化ナ
トリウムて連続して洗浄して，メルカプトケトアセテー
トＣ１を得た。ＮＭＲ　（（：ＤＣ］３）　５．１６　
（２Ｈ，　ｓ），　２．１８　（３Ｌ　ｓ），　１．５
７　（６Ｈ，　ｓ），　　１．５５　（ＬＨ，　ｓ） 工程４ 乾燥したテトラヒトロフラン（１．Ｏ　ｎ＋Ｉ）に入れ
たトリフェニルホスフィン（２５８　ＩＩｌｇ，　０．
９８　ｉ＋ｍｏｌ）に、窒素雰囲気下で−７８゜Ｃて、
攪拌しなからジメチルアセチレンシカルボキシレート（
１４４　ｍｇ，０．９９　ｍｍｏｌ）をテトラヒトロフ
ラン（１．０　ｍｌ）Ｉ，：溶解した溶液を滴加した。

得られた白色のスラリーをー７８°Ｃて１０分間維持し
、モしてＢｏｃ−Ｌ（またはＤ−）一セリン（１８４　
Ｉｌｇ．　０．９０　ｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（
１．０　ｍｌ）に溶解した溶液を滴加した。温度を−７
８゜ＣＣ２０分間維持し，そして得られた反応混合物を
次いで室温に加温し、そのｍ度に２時ｎｎｍ持した。そ
の溶媒を除去した後，その残査をシリカゲルを用いたク
ロマトグラフィにて精製した。得られた精製物を、１５
％　−＞　２２１−＞　３０＄　−＞　３５１エチルア
セテートーヘキサンで溶出することにより、ベーターラ
クトン体Ｄ１を得た。ＮＭＲ　（ＣＤ（：ｈ）　５．２
９　（ＩＩＬ　ｂｒ）．　４．９２　（ＩＨ，　　ｂｒ
），　４．３４　（２１１，　ｂｒ）．　１．０７　（
９Ｈ，　ｓ）．工程５ 上記化合物Ｃ　Ｉ　（７９．９　ｍｇ，　０．４５　ｍ
ｍｏｌ）を脱ガスした乾燥シメチルホルムアミト（１．
５　ｍｌ）に溶解した溶液に、リチウムシイソブロビル
アミト（０．８ｍａ＋ｏｌ）をテトラヒトロフラン（１
．５　ｍｌ）に溶解した溶液を滴加した。添加を窒素下
−６０゜Ｃにおいて行なって、得られた反応混合物を−
２５℃て５０分間加温し、再度−５５゜Ｃに冷却し、そ
して上記化合物Ｄ　ｌ　（５６．４　ｍｇ，　［１１０
問０１）を脱ガスした乾燥ジメチルホルムアミド（０．
５　ｍｌ）に溶解した溶液を滴加した．添加が完了した
後、その混合物を−２０”Ｃに加温し、２５分間攪拌し
て、次いでエチルアセテート（：ｌＯ　ｍｌ）て耗釈し
た後、０．５Ｎ塩酸（２　ｍｌ）て洗浄した。得られた
水層をエチルアセテ｝（２ｘ　１０　ｍｌ）て抽出し、
得られた有機抽出液を合せて水（２　ｘ　５　ｍｌ）、
次いで飽和塩化ナトリウム（］Ｘ５ｍｌ）で洗浄後、乾
燥、蒸発させた。得られた油状の残査を、シリカゲルを
塗布したＩＯＸ２０ｃＩ１のプレートを用いたプレパラ
テイブ・レイヤー・クロマトグラフィーで、塩化メチレ
ンーエチルアセテート・酢酸（１．７　：　０．３　：
　０．０５）を溶出液として使用して精製して化合物Ｅ
　１　（７７　ｔａｇ．７０．３＄）を得た。Ｎ　Ｍ　
Ｒ　（ＣＤＣｌ３）　５．４３　（ＬＨ，　ｂｒ）　，
５．２０　（ＩＮ，　ｄ，　１８　Ｈｚ），　５．０４
　（Ｉｌｌ，　ｄ，　１８　｝１２），４．４５　（Ｉ
｝Ｉ，　ｂｒ）．　２．９７　（ｉｔ｛，　ｂｒ），　
２．７８、２．７４　（ＩＨｄｄ，　４，５，　９．０
　Ｈｚ），　２．１７　（３Ｈ．　ｓ）．　１．４８　
（３Ｈ，　ｓ）１．４７（３Ｈ，　Ｓ），　１．４４　
（９Ｌ　ｓ）工程６ 得られた酸Ｅ　１　（７７　ｍｇ）を塩化メチレン（１
０Ｉｌｌ）に溶解し、０゜Ｃてシアゾメタンのエーテル
溶液で処理した。その溶媒を除去した後、その残査を溶
出液としてヘキサンーエチルアセテー｝−（１．４　：
０．６）を用いて、５ｘｌＯｃｍシリカゲルプレートて
精製をしてエステル体Ｆ　１　（４８．２　ｍｇ）を得
た。

Ｎ　Ｍ　Ｒ　（ＣＤＣｈ）　５Ｊ２　（ＩＨ，　ｂｒ　
ｄ），　５．１５　（ＬＨ，　ｄ，１１　Ｈｚ）、５．
０７　（ＩＨ．　ｄ，　１１　｝１ｚ），　４．４８　
（ＩＨ，　ｂｒ，ｑ），　３．７６　Ｃ３Ｈ，　ｓ），
　２．９１　（ＩＨ，　ｑ，　４．　１２Ｈｚ），２．
７４　（ｉｌｌ，　ｑ．　５．５．　１２Ｈｚ），　１
．４７　（６Ｈ，　ｄ），　ｌ．．４４（９ｔｌ，　ｓ
） 工程７ 得られたエステルＦ　ｌ　（７４６　ｏ＋ｇ）をテトラ
ヒトロフラン（Ｉ　ＩＩｆ）に入れ、室温で０．２５Ｍ
酸化リチウム（０．４　ｍｌ）を用いて処理した。２５
分後、更に０，４ＩＩＩＩの酸化リチウムを添加した．
この混合物を３５分間攪拌し、次いでエチルアセテート
（１０　ａ＋１）て箱釈した後、０．５Ｎ塩酸（２　ｘ
　Ｓ　ｍｌ）て洗浄した。得られた水層をエチルアセテ
ーｈ（２　Ｘ　５　ｍｌ）で抽出し、得られた有機抽出
液を合せ水（Ｉ　Ｘ　Ｓ　ｍｌ）で、次いで飽和塩化ナ
トリウム（ｌ　Ｘ　５　＋＊ｌ）で洗浄した後，乾燥し
て、蒸発させた。得られた残査を最小の塩化メチレンに
溶解した後、ジアゾメタンのエーテル溶液で処理し、濃
縮して、得られた残査な１０Ｘ２０ｃｍシリカゲルプレ
ートで精製した．ヘキサンーエチルアセテート（１．４
　：　０．６）て溶出すると、化合物Ｇ　ｌ　（１４．
４■ｇ）を得た．Ｎ　Ｍ　Ｒ（（；ＤＣ＋３）　５．２
２　（ＩＨ，　ｂｒ），　４．５８　（２１１，　ｄ）
、４．４８　（ＩＨ，　ｂｒ）．　３．７５　（３｝１
，　ｓ），　３．０６　（ＩＨ，　ｂｒ）．２．９２　
（ＩＩＩ，　ｂｒ），　２．７４　（ＩＨ，　ｄｄ，　
５，　Ｉｌｌ｛ｚ）．　１．４６（９Ｈ， ｓ）， １．４４ （６１１， Ｓ） 工程８ 得られた化合物Ｇ　１　（５　ｍｇ，　０．０１５　ｍ
ｍｏｌ）を新たに乾燥したピリジン（０．２　＋ｉｌ）
に溶解した溶液に連続して硝酸銀（３．４　ｍｇ，　０
．０２　＋ｕｉｏｌ）　，次いでｔ−プチルジフェニル
クロロシラン（６．３　ｍｇ，　０．０２３１１１００
を添加した．得られた溶液を室温て窒素下で１５分間攪
拌した。溶媒を除去した後，生戒物をプレバラテイブ・
レイヤー・クロマトクラフイーて精製すると、化合物Ｈ
　１　（Ｓ．Ｓｍｇ）か得られた． ＮＭＲ（ＣＤＣＩ．）　７．６９　（４Ｈ，　ｍ），　
７．４１　（６Ｈ，　ａｉ）、５．０７ ３．７２ １．４３ １．１０ （ＩＨ，　　ｂｒ），　　４．７０　　（２Ｈ，　　ｓ
），（３｝１，　　ｓ），　　２．７０　　（ＩＨ，　
　ｄｄ）。

（９Ｈ，ｓ），１．２８　　（３Ｈ，ｓ），（９Ｈ，ｓ
） ４．４１ ２．５５ １．２６ （１■， （ＩＨ， （３Ｈ， ｂｒ）　＋ ｄｄ）， ＳＬ 工程９ シリル化されたエステル体（５　ｍｇ）を室温で蟻酸（
５　　ｍｌ）を用いて処理した。３３分後，得られた反
応混合物を凍結して溶媒を凍結乾燥して除去すると、エ
ナくン体ＩＩが得れれた． ＮＭＲ（＋１：ＤＣＩｆｆ）　７．６９　（４｝１，　
ｍ），　７．４０　（６Ｈ，思）、５．９０　（ＩＨ，
　ｓ），　４．６５　（ＩＨ，　ｂｒ），　３．７９　
（３Ｌ　ｓ），３．７６　　（ＩＨ，　　ｂｒ），　　
３．１７　　（ｌｔｌ，　　ｄｄ，　　１０．　　１５
Ｈｚ）．　　３．００（ＩＩ｛，　　ｄｄ，　　３，　
　Ｉｓ｝ｌｚ），　　１．４９　　（３Ｈ，　　ｓ），
　　１．：１１　　（３Ｈ，ｓ）， １．０８ （ｇＨ，ｓ） 工程ｌＯ 得られたチアシン体Ｉｆを前記工程７に記載した方法と
同様にして、水酸化リチウムで処理し、エステル保護基
を除去した．またシリル化された保護基を部分的に除去
すると、得られた反応混合物には３−カルボキシー５−
ヒドロキシメチル−６，６−ジメチルー▲’−１．４−
チアジンか含まれた。

実施例８・３−カルホキシ−５−（２−ヒドロキシプロ
ピル）−６、６−ジメチル− ▲’−１．４−チアジンの合戒 式ＴＩ中において、Ｘ　−　ｓ；　ｙ−　ｏｎ；　Ｒ，
　＝　Ｒ２−Ｃｌｌ，；　Ｒ，　−　Ｒ．社Ｒｓ　＝　
Ｒｓ禦Ｈ：　Ｒ７　−　ＣＨ：＋Ｃ３におけるＤ−およ
びＬ一配置の両方を製造したが、Ｃ８におけるＲ−なら
びにＳ一エピマーは分離されなかった：Ｄ−アイソマー
は活性かある。

工程１ ２−メチルシクロブロバンカルボン酸エチル（５ｍｇ，
　３８．９　ｍｉｏｌ）を乾燥エーテル（５　ｍｌ）に
溶解した溶液な、窒素下に攪拌しなから、マグネシウム
屑（１．．９３５　ｇ，　０．０８０　ｇ−ａｔｏｍ）
と臭化メチル（１２．４３ｇ，８７．６　ｍｍｏｌ）と
の乾燥工′−テル（４２　ｍｌ）溶液から調製されたク
リニャール試薬に滴加した。この添加に３０分間を要し
、攪拌を室温で２．７５時間、次いで還流下て２時間継
続した。得られた反応混合物を水浴中て冷却し、飽和塩
化アンモニウム（１０ｍｌ）を攪拌して添加した。分離
した相のうち、その水相をエーテル（２　ｘ　２０　ｍ
ｌ）て抽出した。得られた有機相を合せて、それを乾燥
して蒸発させた．得られた残査な１３１−１３６゜Ｃて
蒸留すると、下記式て示される第３級アルコールＡ２か
得られた（４．２４　ｇ，９５％）。

工程２ 水浴で冷却した前記アルコールＡ　２　（４．２４ｍｇ
，３７ｍｌ１ｏ　１　）に、氷て冷却した４８％臭化水
素酸（１５ｍｌ）を添加した。この混合物を水浴中で３
０分間激しく振とうして，２層に分離した。その水層を
ヘキサン（２　ｘ　２０　ｍｌ）て抽出して，得られた
有機相を飽和寓次酸塩（２　ｘ　１０　ｉｔ），水（２
　ｘ　１０　ｍｌ），飽和硫酸ナトリウム（２　ｘ　１
０　ｍｌ）で連続して洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾
燥した後、蒸留した。蒸留によって、臭化物Ｂ２が３．
７２　ｇ（６０％）得られた。沸点４６−５４℃／１０
　ｔｏｒｒ日ｒ 工程３ 得られた臭化物Ｂ　２　（３．７２　ＩＩｌｇ，　２１
　ｍｍｏｌ）を水酢酸（２０　ｍｌ）に溶解した溶液に
、酢酸カリ（３．１　ｍｇ，３１．６　＋ｉｍｏｌ）を
添加した。この混合物を還流下て１２時間加熱し、冷却
した後、水（３０　Ｉｌｌｌ）中に注入した。エーテル
（３　ｘ　”ｉｏ．ｍｌ）て抽出して、その有機相を飽
和炭酸ナトリウム、水、次いで飽和塩化ナトリウムて連
続して洗浄し、乾燥した後、室温て蒸留すると、アセテ
ート体Ｃ２か得られた。２．８２ｇ＜８５％）。

Ｎ　Ｍ　Ｒ　（（：ＤＣＩ：＋）　５．１０　（ＩＨ，
　ｂｒｔ），　４．８８　（ＩＩＩ，　ｑ，６１｛ｚ）
，　２．：１０　（Ｉｔ｛，　ｍ），　　２．１９　（
ＩＨ，　ｍ），　２．０２　（３Ｎ，ｓ），　１．７１
　（３Ｈ，　ｂｒ　ｓ），　１．５２　（３Ｈ，　ｂｒ
　ｓ），　８．００（３Ｈ，　ｄ，　６Ｈｚ） 工程４ 得られたアセテート体Ｃ　２　（１２０ｍｇ，　２．０
５　ｍｍｏｌ）をメタノール（２ｍｌ）に溶解し，水酸
化カリをメタノール（１．３８　ｍｌ）に溶解した１．
５Ｍ溶液を滴加して処理した。得られた反応混合物を６
時間放置した後、１．５Ｍメタノール性塩化水素て中和
して、溶媒を除去した。得られた残査を塩化メチレンを
溶解し，この溶液を水そして飽和塩化ナトリウムで連続
して洗浄し、乾燥した後、蒸留すると、アルコール体Ｄ
　２　（　２０８＋ｉｇ，　９９％）か得られた．工程
５Ａ 前記アルコール体Ｄ　２　（３１２　ｔａｇ，　２．７
：ｌ　ｍＩｌｏｌ）をシメチルホルムアミト（２　ｏｗ
ｌ）に溶解し，この溶液に連続してｔ−ツチルシメチル
クロロシラン（５：１５　ｒａｇ，　：ｌ．５５　ｍｍ
ｏｌ）を添加した．この混合液を２時間攪拌した後、濾
過した。その不溶物質はエーテル（２０　ｍｌ）で滴定
し、得られた有機物質を連続して飽和重炭酸ナトリウム
，水、飽和塩化ナトリウムで洗浄し，乾燥、蒸留すると
、シリル化さレタ化合物Ｅ　２　Ａ　（６２０　ｍｇ，
　１００％）か得られた。

工程５Ｂ 前記アルコール体Ｄ　２　（２５　ｍｇ，　０．２２　
ｗＩＩｏｌ）をジメチルホルムアミト（０．２　ｍｌ）
に溶解し、この溶液を連続してビリジン（２７ルＩ，　
０．：１３■ｏｌ），ｔ−プチルジフェニルクロロシラ
ン（９０　ｐＬＬ　Ｏ．３５ｎｏｔ）、次いで硝酸銀（
５６　Ｂ，　０．３３　ｍｏｌ）で処理した。この混合
液を室温で４時間攪拌した後、得られた生成物を前記工
程５Ａに記載した方法と同様にして単敲すると，化合物
Ｅ２Ｂが得られた。

工程６Ａ 得られたオレフイン体Ｅ　２　Ａ　（６２４１ｇ，　２
．７３１■ｏｌ）をアセトン（：ｌｍｌ）および１８−
クラウン−　６　（１００　ｔａｇ，　０．２７　Ｉｌ
ｌｏｌ）に溶解し、そして酢酸（０．１６　ｍｌ）を添
加して，その後連続して過マンガン酸カリ（６０３１ｇ
ｔ　３．８２旧ｏｌ）を水（７．５　ｍｌ）に溶解した
溶液を滴加した。この混合物を１時間攪拌した後、塩化
メチレン（５０　ｍｌ）で希釈した。得られた有機相を
２０％重亜硫酸ナトリウム，水、０．５Ｎ塩酸、飽和重
炭酸ナトリウム，水、次いで飽和塩化ナトリウムと連続
して洗浄した後，乾燥、蒸留した．得られた残査をシリ
カゲル（７ｇ）を用いてフラッシュ・クロマトグラフィ
ーを施した．４−）１５％エチルアセテート・ヘキサン
で溶出すルト、ケ｝　−　ル体Ｆ　２　Ａ　（４７９　
ｒａｇ，　７０％）か得られ■程６Ｂ 得られたオレフィン体（７７．５　ｍｇ，　０．２２　
ｍｍｏｌ）を工程６Ａと同様にして、過マンガン酸カリ
て酸化すると、ケトール体Ｆ２Ｄか得られた。

Ｎ　Ｍ　Ｒ（ＣＤＣＩ＊）　７．７２　（４１Ｌ　ｍ）
，　７．４３　（６Ｈ，　ＩＩ１）、４．４３　（ＩＨ
，　ｑ，　６１１ｙ．），　：ｌ．８１　（ＩＨ，　ｓ
），　　２．８１　（１８，ｄｄ，　５．　１６｝１７
．）．　２．５８　（ＩＩＩ，　ｄｄ，　７．　１６Ｈ
ｚ），　１．３１（３８，　ｓ），　１．２９　　（３
１１，　ｓ），　１．１０　（：ｔＨ，　ｄ，　５Ｈｚ
），１．Ｄ４　（９＋１，　ｓ） 工程７Ａ 得られた前記ケトール体Ｆ　２　Ａ（４７８　ｍｇ，　
１８：ｉＨｏ　Ｉ　）を塩化メチレン（５ｍｌ）に溶解
して得られた溶液に、連続的に、トリエチルアミン（０
．７６ｍｌ，４．０　ｍｍｏｌ）と塩化メタンスル７才
−”−ル（０．２４　ｍｌ，：ｌ．１　ｔｎｏｌ）を添
加した；この反応液をを室温て５時間攪拌して、塩化メ
チレン（８０　ｍｌ）て希釈した。この溶液を水、０．
５Ｎ塩酸、飽和重炭酸ナトリウム，水、次いで飽和塩化
ナトリウムで連続的に洗浄した。得られた生成物をシリ
カゲル（３ｇ）上でフラッシュ・クロマトクラフィーを
行ない、７蔦−＞　８％　−＞　！Ｈ　−＞　１０％エ
チルアセテート・ヘキサンで溶出すると、化合ｍ　Ｇ　
２　Ａ　（４３２ｍｇ，　７０％）か得られた． 工程７Ｂ 得られた前記ケトール体Ｆ　２　Ｂ　（２７７ｍｇ，　
０．７２■０１）を、前記工程７Ａと同様（処理するこ
とにより，メシレート体０　２　Ｂ　Ｃ２３３　ｍｇ）
を得た。

Ｎ　Ｍ　Ｒ　（ＣＤ（：Ｉ：＋）　７．４１　（４Ｈ，
　ｍ），　７．４］．　（６Ｈ，　ｍ）、４．４４　（
ｌｔｌ，　ｄｄ）．　：Ｉ．０８　（３Ｈ，　ｓ），　
　２．！Ｉｓ　（ＩＨ，　ｄｄ，６．　１８Ｈｚ），　
２．２７　（ＩＨ，　ｄｄ，　７．　１８Ｈｚ），　１
．６３　　（：ＩＨ，ｓ），　１．６１　（３Ｈ，　ｓ
），　１．１５　（３｝１，　ｄ，　６Ｈｚ），　１．
ｆｌ６（９８，　Ｓ） Ｐｈ 工程８Ａ 塩化メチレン（５　ｍｌ）を硫化水素て−２０℃におい
て飽和して、トリエチルアミン（０．１４　ｍｌ，Ｉ　
ｍｉｏｉ）および前記メシレート体（２：ｌ：ｌ　ｍｇ
，　０．５■ｏｌ）を連続して添加した。この溶液を−
２０゜ＣてｌＯ分間、次いで−２０℃−＞０℃て４５分
間攪拌して、塩化メチレン（３０　ｍｌ）で希釈した後
、０．５Ｎ塩酸、水、次いで飽和塩化ナトリウムて連続
して洗浄し、乾燥、蒸留すると，ロ．１ｔｏｒｒて乾燥
後に、メルカブタン体（１７０　ｍｇ，　８５％）か得
られた。

ＮＭＲ（ｆｌ：Ｄ（：Ｉｚ）　４．３７　（ＩＨ，　ｍ
），　２．９８　（ＩＨ，　ｄｄ，　５，１１８？．）
、　２．６３　（１８，　ｄｄ，　４．　　１１Ｈｚ）
，　　１．９８　（ＩＨ，　　ｓ）１．４９　（３８，
　ｓ）．　１．４８　（３１１，　ｓ），　１．１７　
（３Ｌ　ｄ，５｝１ｚ），　　０．８４　　（９Ｈ，　
　ｓ），　０．０５　（３８，　　ｓ），　　０．０１
　　（：ｌＨ，Ｓ） 工程８Ｂ 得られた前記メシレート体０２Ｂを、前記工程８Ａと同
様にして、メルカブタン体Ｈ２Ｂに変換した。

ＮＭＲ（ＣＤＣＩｚ）　７．７１　（４Ｈ，　ｍ），　
７．４０　（６Ｈ，　ｍ），３．００　　（ＩＨ（　　
ｄｄ，　　６．　　１＋ｉＨｚ）、　　２．７５　　（
Ｉｌｌ，　　ｄｄ，　　７，　　１６１−１ｚ）．　１
．９３　（ＩＨ，　ｓ）．　１．４６　（３｝１，　ｓ
）．　１．４５　（：ｌＨ，ｓ），　１．１：ｌ　（３
Ｈ，　ｄ，．６Ｈｚ）．　１．０５　（９Ｈ，　ｓ）Ｐ
ｈ ■ 工程９ 窒素下に、得られた前記メルカプタン体Ｈ２Ａ（１００
　Ｂ，　０．３６　ｇａｏｌ）を脱ガスしたジメチルホ
ルムアミト（１．０　ｍｌ）に溶解した。この溶液を−
５５℃に冷却した後，ｎ−ブチルリチウム（１．６Ｍヘ
キサン溶液０．８　ａｌｌ）およびジイソプロビルアミ
ン（０．３６　ＩＩｌｌ，　０．２５９　ｇ，　２．５
６　ｍｍｏｌ）から調製されたリチウムシイソプロピル
アミトを脱ガスしたテトラヒトロフラン（０．８　ｍｌ
）に溶解した溶液０．４５ａ＋１て処理した。得られた
反応液を−４５゜Ｃて３０分間攪拌し、これに前に得ら
れたベーター・ラクトンＤＩ（Ｄ−またはＬ一体）　（
５［ｉ．８　ｍｇ，　０．：ｌロｍｍｏ１）を脱ガスし
たシメチルホルムアミト（０．８　ｍｌ）に溶解した溶
液を添加した。この混合物を−３０℃で２０分間攪拌し
た後，塩化メチレン（１０Ｉｌｌ）て希釈し、ついて０
．５Ｎ塩酸て洗浄した。得られた水層な塩化メチレン（
２　ｘ　Ｓ　ｍｌ）て抽出し，得られた有機抽出液を合
せて、水で洗浄した。その後、塩化ナトリウムで飽和し
て，乾燥、蒸留した．得られた残査を高真空下て乾燥後
、フラッシュ・クロマトクラフィ−（シリカゲル，　４
　ｇ，　０％一〉８ｚエチルアセテートー塩化メチレン
（１！酢酸））によって精製すると、カップルした生威
物Ｉ２Ｄまたは１２Ｌか得られた。

１　２　Ｄ　（８３％；　　［ａｌｏ　◆２．３３　（
ｃ　Ｏ．１，　　’）　Ｏ　ロ＊）Ｌｔム）） Ｎ　Ｍ　Ｒ　（ＣＤＣＩｓ）　　（　Ｌ　ツの異性体）
　４．４８　（０１，　ｂｒ）．４．３２　　（ＩＨ，
　　ｆｌｌ），　　２．８３，　　２．７１　　（２８
，　　ＩＩ１）、２．７１．２．６２（２Ｈ，　　＋＊
），　　１．４４　　（９Ｈ，　　ｓ），　　１．４３
　　（６｝１，　　ｓ），　　１．１６（３Ｈ，　　ｄ
，　　６｝１ｚ），　　０．８５　　（９Ｈ，　　ｓ）
，　　０．０５　（３Ｈ，　　ｓ）．０．００　　（：
ｌＩｌ，　　ｓ） ＮＭＲスペクトラムては２−ヒドロキシブロビル側鎖に
おけるエピマーか１：ｌの混合物であることが判明した
。

１　２　Ｌ（８３％；　　［（ＸＩＤ　＋２．：１３　
（ｃ　Ｏ．１，　　’）ロロホルム）） ＮＭＲ（ＣＤＣＩ３）　　（　１ツの異性体）　５．２
８　（ＩＨ，　ｂｒ，ｔ），　　４．４８　　（ＩＩ−
１，　　ｂｒ），　　４．３２　（ＩＨ，　　ｍ），　
　２．８６，　　２．７９（２ｔｌ，　ｍ）、２．７０
，　　２．６１　（２Ｈ．　ｍ），　　１．４３　（９
ｔｌ，　　ｓ），１．４２　　（５Ｈ，　　ｓ），　　
１．１６　（３Ｈ，　　ｄ，　　ＢＨｚ），　　０．８
３　　（９Ｌｓ），　　０，０４　　（３１｛，　　ｓ
），　　０．００　　（３Ｈ，　　ｓ）ＮＭＲスベクト
ラムでは２−ヒドロキシプロピル側鎖におけるエピマー
か１：ｌの混合物てあることか判明した． 工程１０Ａ 前記化合物１　２　Ｄ　（２２．７　ｔｓｇ，　０．０
４９　ｍ＋＊ｏｌ）に蟻酸（０．３　ｍｌ）を添加した
．この溶液を室温て２０分間振とうし，次いでその溶媒
を凍結乾燥により除去した。得られた残査をエーテル（
３　ｍｌ）と水（］　ＩＩｌｌ）との混合物に溶解して
、そのエーテル相を水（ｌｍｌ）て抽出した後、得られ
た水相を合せて、これを５蔦重炭酸ナトリウムで中和し
、次いで凍結乾燥すると、２−ヒト口キシプロビル側鎖
におけるエピマーの混合物として、Ｃ３においてＤ体を
イ■する化合物２　（５１１ｇ，　４０％）を得た。

ＮＭ　Ｒ（Ｄ２０）　４．２：ｌ　（ＩＨ，　ｍ）．　
３．８０　（ＩＩＬ　ｍ），　３１０（Ｉｌｌ．　ｑ）
，　２．７０　−　２．８５　（３Ｈ，　［０）、１．
４０　（６Ｈ，　ｓ），１．１５　（３１１，　ｄ） 工程１０Ｂ 得られた化合ＱＩ　２Ｌについて工程１０Ａの方法を繰
り返したところ、Ｃ３においてＬ一配置をイ了する化合
物２を得た。

実施例９　化合物２−Ｄのハイオアッセイ本実施例て得
られた化合物を、サルチナ・ルテアまたはエシェリヒア
・コリのいずれかを接種したプレートを用いて抗菌活性
を測定した。前者の場合には，ペニシリンＧが標準とし
て使用され、後者の場合には、セファレキシンか標準と
して使用された。その結果、この化合物は，ペニシリン
Ｇよりも活性が８００倍も低く、またセファレキシンよ
りも１ ０倍その活性か低いことか判明し 前記化合物２のＬ一異性体は、 両方のアッセ− て不活性てあることか判明した。

実施例１０・２−チア−４−カルボキシ−６＝（２−ヒ
ドロキシプロピル）−７、７ ーシメチルー▲’−ｉ，ｓ−チアゼピンの合或 ＩＩ中におイテ、Ｘ　−　Ｙ　−　Ｓ−Ｓ．　Ｚ　−　
ＯＨ；Ｒ＋　＝　Ｒ２　−　　Ｒ７　−　　Ｃｆｈ；Ｒ
３−Ｒ４−Ｒｓ−ＲｓＣ４におけるＤ−およびＬ一配置
の両方を製造したが、Ｃ９におけるＲ−ならびにＳ一異
性体は分離されなかった；Ｌ一異性体は活性かある（第
１３図〉． 式Ｉ Ｌ−システイン塩酸ｔｍ（４．１　ｍｇ，　０．０２［
ｉ　ｌＩｌｍｏｌ）を９０％メタノールー水（ＯＪ５　
ｍｌ）に溶解し、この溶液に、前記メルカブタン体（実
施例２，工程８Ａ　）　（７．１　ｒａｇ．　０．０２
５　ｍｍｏｌ）をメタノール（０．：１５　ｍｌ）に溶
解して得られた溶液を添加し、次いでヨート（５．５　
０１ｇ，　０．０２６　ｍｍｏｌ）およびトリエチルア
ミン（７　終１；　０．０５０　ｍｍｏｌ）を添加した
。得られた反応混合物を室温て３０分間放置した後、溶
媒を減圧下て除去した。その残査を、ｐＨ７のリン酸緩
衝液（Ｄチオ硫酸ナトリウム１滴を含有する）と塩化メ
チレンとの間て分配をした。得られた水居をエチルアセ
テート（１　ｘ　５　ａｌｌ）て抽出した後、凍結乾燥
した。この残査をメタノールで滴定し、そのメタノール
抽出液を塩化メチレンとエチルアセデートの抽出液を合
せて、これを蒸発させた。得られた生或物を、溶出液と
して，塩化メチレンーメタノールー水（１．８　：　０
．２　：　０．１５）を用いて、１０ｘ　１５　ｃｒａ
アルくナプレートで精製すると、下記式テ示さレルシス
ルフィト体Ａ　４　−　Ｌ　（８．９Ｂ，　８０２）か
得られた。

Ｎ　Ｍ　Ｒ　（Ｄ２０）　４．１９　（ＩＨ，　ｍ），
　３．９２　（ＩＨ，　ｄｄ，　：ｌ．７１１ｚ），　
：ｌ．１８　（ＩＨ，偏），　３．Ｇ４　（１｝１，　
ｍ），　２．９２　（ＩＨ，Ｉ１），　２．７６　（ｉ
ｌｌ，　ｍ）、１．４３　（５｝１，　ｓ），　１．１
２　（３８，　ｄ，７｝１ｚ） この化合物は、２−ヒドロキシブロビル側鎖におけるエ
ビマーの混合物である． Ｈ この実験を、 Ｌ−システインの代わりに、 Ｄ　一 システインを使用して繰り返したところ、下記に 示す化合物Ａ４−Ｄか得られた。

得られた酸Ａ４−ＤおよびＡ４−Ｌを、＊炭酸ナトリウ
ムを含有している水に溶解して、サルチナ・ルテアを使
用して、プレートによるアッセーて抗菌活性を調べた。

阻止ゾーンはＬ一異性体についてａ察し，Ｄ一異性体に
ついては観察しなかった．その阻止は、環状構造３Ｌの
形成に帰するものであり、ペニシリンレセプターモデル
との相互作用は第１３図に示されている。

実施例１１：３−カルボキシ−５一才キシミノ−１、４
−チアジンの合成 式ＩＶ中におイテ、Ｘ　−　ｓ；　Ｒ．　−　Ｒ２−　
　ｏ；Ｒ，　−　Ｒ．　−　Ｒ．　−　Ｈ；　Ｘ　＝　
Ｎ；　Ｚ　−　ＯＨＤ−およびＬ一異性体が記載されて
いる。

ｈ Ｄ−システイン（６０５．８　Ｂ，　５　ｇａｏｌ）を
メタノール（１０　ｍｌ）に溶解した溶液に、エチルブ
ロモアセテ−　｝（０．９９　ｇ，　５．９５　ｍｍｏ
ｌ）　，次いでトリエチルアミン（１，４■Ｉ．　１．
０２　ｇ，　１０　ｍｍｏｌ）を連続して添加した．こ
の溶液を室温で２０分間攪拌した後，エーテル（２０　
ｍｌ）を添加した．ｍられた生威物を濾過して集め、エ
ーテルで洗浄した後、乾燥した．この物質ＳＯＯｍｇを
ジメチルホルムアミト（５　ｍｌ）に懸濁して、これに
ｐ−トルエンスルホン酸（４５８Ｂ，２．４１　ｍａｏ
ｌ）を添加した。得られた溶液をシフェニルシアゾメタ
ンを滴加して，そのジアゾ化合物の色か消えなくなるま
で処理し、この反応液を一夜攪拌した．次いで、この液
をエーテル（２０　ｍｌ）て希釈した後、水（２κ１０
　＋＊Ｉ）で抽出した。その水相を飽和炭酸ナトリウム
でアルカリ性にして、酢酸エチル（３　ｘ　１０　ｍｌ
）で抽出した。得られた有機抽出掖を合せて、水、次い
で飽和塩化ナトリウムて洗浄した後，乾燥、蒸発させた
。この残査（０．９９　ｍｓｏＪ）３７０ｍｇを１、４
−ジオキサン（８　ｍｌ）に溶解したあと，２〜ピリド
ン（４７　ｌＩｇ，　０．４９　ｇａｏｌ）を添加して
、その溶液を窒素下において１０２゜Ｃで７時間加熱し
た．更に，２−ビリトンＣ２３．Ｓ騰ｇ，　０．２５ａ
ｍｏｌ）を追加して添加して、加熱を４時間継続した．
この時に、溶媒を減圧下で除去し、そしてその残査をシ
リカゲル１５ｇで精製した，　８％エチルアセテート・
ヘキサンで溶出すると、チアジノンベン７：　ヒＦ　’
Ｊ　ルエステル体Ａ５−Ｄ（２５２　ｍｇ，　７８＄）
が得られた． ＮＭＲ （ＣＤＣＩ＋）　　７．１４　　（ｔｏｌｌ，　　ｍ）
，　　６．９５　　（ＩＨ，　　ｓ），ｓ），　　６．
４８　　（ＩＨ，　　ｓ），　　４．４６　　（Ｉ｝ｌ
，　　ｍ），：ｌ．：ｌ：Ｉ　　（２Ｈ，ｓ），３．２
１　　（１Ｎ，ｄｄ，４，１５１１ｚＬ　　２．！１８
　　（］｝Ｉ．　　ｄｄ，　　９．　　１５Ｈｚ）工程
２ 前記チアシノンＡ　５　−　Ｄ　（２５２　＠ｇ，　０
．７７　ｍｓｕａｌ）を乾燥テトラヒトロフラン（５ｍ
ｌ）に窒素下にて溶解して、ベンタ硫化リンおよびジフ
エニルエーテルからＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ
ｅｒｓ　３８１５　（１９８：ｌ）に従って調製した試
薬（３４４　ｍｇ，　０．４６　ｇａｏｌ）を添加した
。この溶液を３５分間攪拌して濃縮後、その残査をシリ
カケル（８ｇ）で精製した。これを、１５％エチルアセ
テート・ヘキサンて溶出すると、チオアミト休Ｂ　５　
−　Ｄ　（２１４　ＩＩｌｇ，　８１％）か得られた。

Ｎ　Ｍ　Ｒ　（ＣＤＣＬ）　８．５９　（ＬＨ，　ｓ）
，　７．１５　（ＩＯＨ，　ａ＋），５．９８　（ｌｉ
ｔ，　ｓ），　４．：１９　（ＬＨ，　ｍ），　３．７
９　（２Ｈ，　ｓ）．：ｌ．３２　（Ｉｔ｛，　ｄｄ，
　４，　１５ｔｌｚ）．　３．０２　（ＩＨ，　ｄｄ，
　８，ＩＳＩＩｚ） 工程３ 得られたチオアミト体Ｂ　５　−　Ｄ　（８０ｍｇ，　
０．２３１ｏｌ）を，水浴中で攪拌しなから、乾燥テト
ラヒトロフラン（９２　ｍｌ）に窒素下にて溶解し、水
素化ナトリウムＣ８０％．　８．４　ｍｇ，　０．２８
　■ｏｌ）を添加した。水浴中て５分間攪拌した後、そ
の反応液をメチルヨータイト］ＯＪＬＩ（０．４８　１
ＩＩＬｌｏｌ）て処理した。反応を２５分間で完了する
と、エーテルて希釈し、次いで水、飽和重炭酸ナトリウ
ム、飽和塩化ナトリウムて連続して抽出した後、乾燥、
蒸留すると生或物か得られ、これをシリカゲルで精製し
た。

１０％エチルアセテート・ヘキサンで溶出するとチ才メ
チルイミン体Ｃ　５　−　Ｄ　（５９．１　Ｉ１ｇ，　
７５％）カｍられた。

Ｎ　Ｍ　Ｒ　（ＣＤＣＩ：＋）　　７．：１５　（ＩＤ
Ｈ，　ｍ），　　６．９５　（ｉｌｌ，　　ｓ），４．
５３　（ｌ｝Ｉ，　　ｍ），　　：Ｉ．２７　　（１Ｂ
，　ｄｄ，　Ｓ，　　１８１Ｉｚ），　　３．１８（Ｉ
Ｈ，　ｄｄ，　５．　　１８｝１ｚ），　２．９９　（
ＩＨ，　ｄｄ，　３，　１：ｌＨｚ），２．８１　　（
ｉｔ−１，　　ｄｄ，　　４，　　１：ｌＩｌｚ），　
　２．：１７（：Ｉｔ｛，　　ｓ）工程４ 得られた前記チオメチルイジン体Ｃ　５　−　Ｄ　（５
９＋ｍｇ，　０．１６５　ｍｏｌ）をテトラヒトロフラ
ン（０．５　ｍｌ）に溶解し、この溶液を、窒素下にお
いて、ヒトロキシノレアミン塩酸塩（６８．８　ｔｓｇ
、Ｑ，９！］　ａｕａｏｌ）と１．６５Ｍメタノール性
メチレンナトリウム（ＯＪ　ｍｌ，　０．５Ｈｏｌ）を
メタノール（０．７　ｍｌ）に溶解して調製して得られ
た溶液に添加した。反応を１０分間て完了した後、反応
液を塩化メチレン（１０　ｍｌ）て昂釈し，飽和重炭酸
ナトリウム、水，次いで飽和塩化ナトリウムで連続して
洗浄した後、乾燥、蒸留した．この生戒物をシリカゲル
（１．５　ｇ）を用いてクロマトグラフィーにより、１
２％エチルアセテートー塩化メチレンを用いて溶出する
と、オキシミノエステル体Ｄ　５　−　Ｄ　（５２．７
　ｔａｇ，　９４２）が得られた．Ｎ　Ｍ　Ｒ　（ＣＤ
ＣＩ：ｌ）　　７．３４　　（ＩＩＨ，　　閣），　　
６．９３　　（ＬＨ，　　ｓ），５．９７　（ＩＩＩ，
　ｓ），　４．２８　（ＩＨ．　ｍ），　３．３０　（
１８，　ｄ，１３Ｈｚ），　３．２１　（１８，　ｄｄ
，　３．　１：ｌＨｚ），　３．１６　（１｝１，　ｄ
，１：ｌｌｌｚ），　３．０８　（Ｉｆｔ，　ｄｄ，　
７，　１：ｔＨｚ）得られたエステル体（４７　Ｂ）を
、蟻酸（１　ｍｌ）に溶解した．室温で５時間後、得ら
れた反応混合物を凍結し、溶媒を凍結乾燥により除去し
た．得られた残査をエーテルと水との間で分配し、その
エーテル層を水で一旦抽出し、得られた水抽出液をを合
せて再度凍結乾燥すると、化合物４−Ｄが得られた． Ｎ　Ｍ　Ｒ　（ＤＪ）　４．１５　（ＩＨ，ｍ）．３．
５０　（ＩＬ　ｄ，１４１１ｚ）３．３４　（ＩＨ，　
ｄ，　１４Ｈｚ），　３．１５　（ＩＨｌｄｄ，　６．
　１５Ｈｚ）．３．０２　（１｝１，　ｄｄ，　６．　
１５Ｈｚ）化合物４のＬ一エナンシオマーは、Ｄ−シス
テインの代わりに、Ｌ−システインを出発物質として、
前述した方法て得ることができる。

実施例ｌ２： ３Ｄ一カルボキシ−５−フェニル アセチルヒドラジルー▲４−チアジン の合威 チオメチルイミンＣ　５　−　Ｄ　（ｌｌｍｇ，　０．
０３１　ｍｍｏｌ）およびフェニル酢酸ヒドラジド（９
．２１ｇ，　０．０１ｉ２ｍｍｏ１）を塩化メチレン（
０．６■ｌ）に溶解して得られた溶液を窒素下で一夜攪
拌した．この反応液をシリカゲルを用いてプレパラテイ
ブ・レイヤー・クロマトグラフィーによって，付加物Ｐ
Ｃ１４　ｍｇ，　９Ｈ）か得られた． ＮＭＲ（ＣＤＣＩ３）　７．３４　（ＩＨ，　ｍ），　
６．８９　（ＩＨ，　ｓ），６．５５　（ＩＬ　ｂｒ　
ｓ），　４．２４　（ＩＨ，　ｂｒ　ｓ），　３．７Ｂ
　（２｝１，ｓ）１、１５５　　（ｌｔｌ，ｂｒ，ｓ）
，３．３３　　（ｌｉｔ，ｄ，１ＳＩＩｚ）， ３．１７　　（ＩＨ，ｄ，ＩＳＨｚ），３．０５　　（
２１１，ｂｒ）付加体Ｐ　（１０１ｌｇ，　０．０２２
ｍｍｏｌ）を蟻酸（０．４１１）て処理した。得られた
溶液を室温で５時間放置し、その溶媒を凍結乾燥て除去
した．得られた残査をエーテル（０．２１１）と水（０
．２厘ｌ）との間で分配し，そのエーテル層を水（０．
２　ｍｌ）て一度抽出した．次いで，その水相を合せて
、凍結乾燥すると、生或５ｋＱ　（：Ｉ　ｍｇ．　４７
％）を得た．ＮＭＲ　（ＤＪ，　ＮａＨＣＯ：＋）　８
．３３　（ＩＨ，　ｓ），　７．２８　（５Ｈ，ｍ），
　３．９８　（ＩＨ，　ｍ）．　３．５５　（２Ｈ，　
ｓ），　３．：１５　（ＩＨ，ｄ，　１７．５Ｈｚ）．
　３．１２　（ＩＨ，　ｄ，　１７．５Ｈｚ），　３．
１１（Ｉｌｌ，　ｂｒ　ｄ，　１５　Ｈｚ），　２．８
：ｌ　（ＩＨ，　ｂｒ　ｄ，　１５Ｈｚ），Ｃｌｌ＋， Ｓ） このｌ， 異性体ＱＬを、 化合物Ｃ５ ｌ．を出発Ｔｈ質として 同様に製造した。

ｈ啼▼Ｗ　Ｉｌ１　−　＋　＋　−−＋ψ＝−０円一一
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［Ｆ］０００φψ−ＡＤＤＥｎ　Ｏ．Ｐ　＾ （朋２） 零ＫＹ リ■ ？一＋　ｆｉ−一＋　：：■＝８３＝冒：：　Ｍ　ｌ”
ｌ　＋：：：÷３：：：：　ＰＩ　ＦＩ　Ｍ　Ｌ！！　
：　：；　：：　ｅ　：：　：；：：５：：一Ｎ″５″
″一一−０００＝＝＝−一一一−一一一一　一−−一一
−−、、、一一一〜〜Ｎ〜ｌ＋ｌＦｌ　ｌ＋ｌ　ｌ＋Ｉ
Ｍ　ＰＩ　ＦＩ　Ｆ’ｌ　Ｍ　ｔ／’Ｉ　Ｌｌ’ｌ　Ｌ
ｌ’ｌ　＋Ｊ’ｌ　Ｌｌ’ｌ　ＬＩＴ　Ｌｌ’ｌ　Ｌｌ
’ｌ−φ一一一−ψψφ哨一一＋３．３６ ５．１０ ２．２Ｏ ｎ７．９０ ０．６０ ４．７０ ＋７．ｎｏ ３１．１１１ １０ＪＱ ９７．６０ ２１１．００ ＋２６．ｌｎ １１Ａ．Ｑｌ１ ９４．６０

【図面の簡単な説明】

第１図は、ペニシリンレセブターモデルの構造を示す図
面てあり、そのレセブターはペニシリンおよびセファロ
スボリンへの結合が、セリンのＣ−０−Ｈとペニシリン
またはセファロスボリンの（０）Ｃ−Ｎとの間の、４中
心の相互作用に均等に結び付いている。 第２図は、第１図のべブチドに結合したペニシリンＶの
立体図を示す。 第３図は、第１図のべブチトに結合した▲３−セファロ
スボリンの立体図を示す。 第４図は、第１図のペプチドに結合した▲２−セファロ
スボリンの立体図を示す。 第５図は、第１図のペプチドに紡合した４−エビー▲２
−セファロスボリンの立体図を示す。 第６図は、セリンのＣ−０−Ｈと、＄２図て示されてい
るβ−ラクタムの環との間の４中心の相互作用の拡大図
を示す。 第７図は、メタノールのＮ−メチルアゼチシノンのｅｘ
ｏ面に対する攻撃のためのＮ−プロトン化された転移構
造（初期計算）を示す図てある。 ｆｆｉ８［２Ｉは、メタノールのＮ−メチルアセチシノ
ンのｅｘＯ面に対する攻撃のための○−プロトン化され
た転移構造（初期計算）を示す図てある。 第９図は、メタノールを、Ｎ−プロトン化された経路を
経由したペニシリンに反応させるためのＭＩＮＤＯ／３
を用いて計算された転移構造の立体図てある。 第ｌＯ図は、メタノールを、Ｏ−プロトン化された経路
を経由したペニシリンに反応させるためのＭＩＮＤＯ／
３を用いて計算された転移構造の立体図てある。 第１１図は、ｅｎｄｏ一攻撃を経由する、メタノールの
ペナムに対する反応のための転移構造を示す立体図であ
る。 第１２図は、第１図のペプチドに対する，５の複合体の
立体図を示す。 第１３図は、環状構造の、ペニシリンレセブターのモデ
ルに対する相互作用を示す立体図を示す。 １！ｌｉｔの浄書（内容に変更なし） ＣＨ３ＣＯ　−　ＮＨ　−Ｖａ　ｌ−　Ｇ　ｌｙ　−　
Ｓｏｒ−Ｖａ　Ｉ　−Ｔｈｒ　一Ｌｙｓ　−　ＮＨＣＨ
３ＦＩＧＵＲＥ　２ ＰＥＮＶＳ ＦＩＧＵＲＥ ＣＥＰＨＩＡＳ ＦＩＧＬＩＲＥ ＣＥＰＨ２５ ＦＩＧＵＲＥ ＣＥＰＨ３７ ＦＩＧＵＲＥ６ ＦＩＧＵＲＥ　８ ＦＩＧＵＲＥ ＰＥＮＧＮＴ ＦＩＧＵＲＥ ＰＥＮＧＯＴ ＦＩＧＵＲＥ ＥＮＤＯＰＥＮ ＦＩＧＵＲＥ ＤＲＵＧ４Ｓ ＦｉｇＬ １ｒｅ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）ポリペプチドの分子構造の決定方法であって、分
   子の種エネルギーを、結合の長さと結合の角度を一定に
   保持しなから該分子の二面角（ジヘドラル角）の関数と
   して最小にすること、その最小化の前に完全なパラメー
   タスペースの特定のサブセットのための基礎を形成する
   パラメータのサブセットを考慮し、前記サブセットが該
   分子の背骨（バックボーン）のφ二面角およびψ二面角
   のためには０、±９０、１８０度から、側鎖の第１の二
   面角のためには−６０および１８０度で構成され、ω二
   面角とその他の二面角の全てが１８０度に維持されてい
   ること、このパラメータのサブスペースにおけるポイン
   トの不特定数のそれぞれを関連する分子の種エネルギー
   に対応させ、次いで該サブスペースを、十分に豊富な、
   不連続な、ランダムに分配された、均一のマップ化に付
   することにより、任意の大きさの確立があって、いくつ
   かのポイント（ｒ）が局所のエネルギーの最小量の凸面
   の近傍に見出され、次いでポイント（ｒ）のこのセット
   を最小化法の初期化に使用することを特徴とする方法。 （２）請求項第（１）項に記載された方法において、ラ
   ンダムに選択された不連続の前記サブセットのための合
   理的な数が、１０個までのアミノ酸残基を含有するポリ
   ペプチドの場合には２０００００個であり、ポイント（
   ｒ）のセットが５０個になること。 （３）ペニシリン結合蛋白質（ＰＢＰ）の活性部位が下
   記表に示した形態を有する配列Ａｃ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−
   Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−ＮＨＣＨ＿３を含む
   ペプチドとしてモデル化すると共に、候補分子を前記ペ
   プチドと結合する能力を計算することにより同定するこ
   とを特徴とする抗菌活性を有する化合物を同定する方法
   。 ▲数式、化学式、表等があります▼ （４）請求項第（３）項に記載された方法において、候
   補分子が前記ペプチドと結合する能力が、基質のカルボ
   キシ基ならびにＮ−Ｈ（またはＯ−Ｈ）の間の水素を結
   合する相互作用、およびそれぞれのリシン残基の末端ア
   ミノ基ならびにレセプタ−ペプチドのアセチル酸素の間
   のその相互作用を前提として計算することを特徴とする
   こと。 （５）請求項第（４）項に記載された方法において、化
   合物の、前記ペプチドに対する固有反応性が、ペニシリ
   ンのペナム環システムの反応性に対比して、前記化合物
   の、メタノールに対する固有反応性を決定することによ
   り予測すること。 （６）４つの中心を持つコンプレックスを経由して、セ
   リンのＣ−Ｏ−Ｈのためのｒｍｓ差と、候補化合物の適
   当な官能基のためのｒｍｓ差との積を、ペニシリンＶに
   対比して決定すること、そして、メタノールと反応する
   前記官能基の固有反応性を、ペニシリンのペネム環シス
   テムの反応性に対比して決定することを特徴とする抗菌
   活性を有する化合物を同定する方法。 （７）請求項第（５）項に記載された方法において、前
   記官能基が下記式であること。 ▲数式、化学式、表等があります▼ （８）請求項第（５）項に記載された方法において、前
   記官能基が下記式であること。 ▲数式、化学式、表等があります▼ （９）（ａ）ペニシリン結合蛋白質に含まれるセリン−
   リシン活性部位のセリンのＯＨと前記化合物の反応部位
   との間の４つの中心を持つ関係を形成するための相対的
   容易さを決定することにより、前記化合物と、前記ペニ
   シリン結合蛋白質のモデルとの反応をシムレートし、そ
   して（ｂ）メタノールとＮ−メチルアゼチジノンとの対
   応反応の活性エネルギーに対比して、前記化合物の化学
   的に活性な官能基とメタノールとの４中心の反応のため
   の活性エネルギーを決定することを特徴とする、あらゆ
   る選択された候補抗菌物質の、ＰＢＰに対する適合性な
   らびに反応性を決定する方法。 （１０）非β−ラクタム含有化合物が４つの中心を持つ
   転移構造を形成することができて、その転移構造にはそ
   の化合物と反応したペニシリン結合蛋白質のモデル中に
   含まれるセリンＯＨ基が含まれていて、かつ、前記化合
   物がＮ−メチルアゼチジノンによって示される活性エネ
   ルギーよりも３ｋｃａｌ／ｍｏｌ以上は大きくない、メ
   タノールとの反応のための活性エネルギーを有すること
   を特徴とする非β−ラクタム含有化合物。 （１１）反応部位との二面角が１５０−１６０度である
   構造を有し、水素結合ドナーを配向させて該反応部位と
   の二面角が−１５０ないし−１６０度になるようにし、
   かつ、前記反応部位が４つの中心を持つ転移構造を経由
   してメタノールと反応し、その活性エネルギー▲Ｅ≠が
   、アゼチジノンとの反応のための活性エネルギーよりも
   ３−４ｋｃａｌ／ｍｏｌ以上は高くないことを特徴とす
   る抗菌剤。 （１２）請求項第（１１）項に記載の抗菌剤において、
   前記水素結合ドナーがＮ−ＨまたはＯ−Ｈであることを
   特徴とすること。 （１３）請求項第（１２）項に記載の抗菌剤において、
   前記構造が、要求される反応性を有する官能基としてイ
   ミノ基（−Ｃ＝Ｎ−）を有することを特徴とすること。 （１４）下記核を有することを特徴とする抗菌剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼ （１５）下記核を有することを特徴とする抗菌剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼ （１６）下記核を有することを特徴とする抗菌剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼ （１７）請求項第（１１）項に記載の抗菌剤において、
   前記核が、要求された反応性を付与する官能基としてイ
   ミノ基（−Ｃ＝Ｎ−）を有することを特徴とすること。 （１８）（ａ）下記一般式（ I ）で示される化合物：
   ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、ＸはＳ、Ｏ、ＣＨ＿２、ＮＨ、ＮＲ＿７および
   Ｓｅからら選ばれる基であり、 ＹはＯＨ、ＮＨ＿２、ＮＨＣＯＲ＿９およびＳＨから選
   ばれる基であり、 Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿５、Ｒ＿６およ
   びＲ＿７はそれぞれ水素原子、アルキル基またはアリー
   ル基を意味し、 Ｒ＿９はβ−ラクタムの活性側鎖を意味する） ならびにその医薬的に許容される塩； （ｂ）下記一般式（II）で示される化合物：▲数式、化
   学式、表等があります▼（II） （式中、ＸはＳ、Ｏ、ＣＨ＿２、ＮＨ、ＮＲ＿８および
   Ｓｅからら選ばれる基であり、 ＹはＯＨ、ＮＨ＿２、ＮＨＣＯＲ＿９およびＳＨから選
   ばれる基であり、 Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿５、Ｒ＿６、Ｒ
   ＿７およびＲ＿８はそれぞれ水素原子、アルキル基また
   はアリール基を意味し、 Ｒ＿９はβ−ラクタムの活性側鎖を意味する） ならびにその医薬的に許容される塩； （ｃ）下記一般式（III）で示される化合物：▲数式、
   化学式、表等があります▼（III）［式中、Ｘ−ＹはＳ
   −Ｓ、ＣＨ＿２ＣＨ＿２、Ｓ−ＣＨ＿２、ＣＨ＿２−Ｓ
   、Ｓ−ＮＲ＿８、ＮＲ＿８−Ｓ、ＣＨ＿２Ｈ−Ｏ、Ｏ−
   ＣＨ＿２、Ｏ−ＮＲ＿８、ＮＲ＿８−Ｏ、Ｓｅ−Ｓｅ、
   ＣＨ＿２−ＣＨ＿２およびＳｅ−ＣＨ＿２から選ばれる
   基であり、 ＺはＯＨ、ＮＨ＿２、ＮＨＣＯＲ＿９およびＳＨから選
   ばれる基であり、 Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿５、Ｒ＿６およ
   びＲ＿８はそれぞれ水素原子、アルキル基またはアリー
   ル基を意味し、 Ｒ＿７はアルキル基またはアリール基を意味し、 Ｒ＿９はβ−ラクタムの活性側鎖を意味し、 ならびにその医薬的に許容される塩； （ｄ）下記一般式（IV）で示される化合物：▲数式、化
   学式、表等があります▼（IV） ［式中、ＸはＳ、Ｏ、ＣＨ＿２、ＮＨ、ＮＲ＿６および
   Ｓｅからら選ばれる基であり、 ＹはＮ、ＣＨおよびＣＲ＿７から選ばれる基であり、 ＺはＯＨ、ＮＨ＿２、ＳＨまたはＮＨＣＯＲ＿９（Ｙが
   Ｎであるとき）を意味し、 ＺはＲ＿１＿０（ＹがＣＨまたはＣＲ＿７であるとき）
   を意味し、 Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿５、Ｒ＿６およ
   びＲ＿７はそれぞれ水素原子、アルキル基また はアリール基を意味し、 Ｒ＿９はβ−ラクタムの活性側鎖を意味し、 Ｒ＿１＿０は▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＿１＿１はアルキル基またはアリール基を意
   味し、 Ｒ＿１＿２はＯＨ、ＮＨ＿２、ＮＨＣＯＲ＿９またはＳ
   Ｈを意味する）］ ならびにその医薬的に許容される塩；および（ｅ）下記
   一般式（Ｖ）で示される化合物：▲数式、化学式、表等
   があります▼（Ｖ） 式中、ＸはＳ、Ｏ、ＣＨ＿２、ＮＨ、ＮＲ＿５およびＳ
   ｅからら選ばれる基であり、 ＹはＮＲ＿６−Ｚであり、 Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿５およびＲ＿６
   はそれぞれ水素原子、アルキル基またはアリール基を意
   味し、 ＺはＯＨ、ＳＨ、ＮＨ＿２またはＮＨＣＯＲ＿７を意味
   Ｒ＿９はβ−ラクタムの活性側鎖を意味する） ならびにその医薬的に許容される塩； から選ばれた抗菌性化合物。 （１９）下記一般式（ I ）： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、ＸはＳ、Ｏ、ＣＨ＿２、ＮＨ、ＮＲ＿７および
   Ｓｅからら選ばれる基であり、 ＹはＯＨ、ＮＨ＿２、ＮＨＣＯＲ＿９およびＳＨから選
   ばれる基であり、 Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿５、Ｒ＿６およ
   びＲ＿７はそれぞれ水素原子、アルキル基またはアリー
   ル基を意味し、 Ｒ＿９はβ−ラクタムの活性側鎖を意味する） で表わされる化合物またはその医薬的に許容される塩か
   らなることを特徴とする請求項第（１８）項記載の新規
   な抗菌性化合物。 （２０）ＸがＳであることを特徴とする請求項第（１９
   ）項記載の化合物。 （２１）Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿５、Ｒ
   ＿６およびＲ＿７がそれぞれ水素原子または低級アルキ
   ル基であることを特徴とする請求項第（２０）項記載の
   化合物。 （２２）前記低級アルキル基がメチル基であることを特
   徴とする請求項第（２１）項記載の化合物。 （２３）下記一般式（II）： ▲数式、化学式、表等があります▼（II） （式中、ＸはＳ、Ｏ、ＣＨ＿２、ＮＨ、ＮＲ＿８および
   Ｓｅからら選ばれる基であり、 ＹはＯＨ、ＮＨ＿２、ＮＨＣＯＲ＿９およびＳＨから選
   ばれる基であり、 Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿５、Ｒ＿６、Ｒ
   ＿７およびＲ＿８はそれぞれ水素原子、アルキル基また
   はアリール基を意味し、 Ｒ＿９はβ−ラクタムの活性側鎖を意味する） で表わされる化合物ならびにその医薬的に許容される塩
   からなることを特徴とする特徴とする請求項第（１８）
   項記載の新規な抗菌性化合物。 （２４）ＸがＳであることを特徴とする請求項第（２３
   ）項記載の化合物。 （２５）Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿５、Ｒ
   ＿６、Ｒ＿７およびＲ＿８がそれぞれ水素原子または低
   級アルキル基であることを特徴とする請求項第（２４）
   項記載の化合物。 （２６）前記低級アルキル基がメチル基であることを特
   徴とする請求項第（２５）項記載の化合物。 （２７）下記一般式（III）： ▲数式、化学式、表等があります▼（III） ［式中、Ｘ−ＹはＳ−Ｓ、ＣＨ＿２ＣＨ＿２、Ｓ−ＣＨ
   ＿２、ＣＨ＿２−Ｓ、Ｓ−ＮＲ＿６、ＮＲ＿８−Ｓ、Ｃ
   Ｈ＿２Ｈ−Ｏ、Ｏ−ＣＨ＿２、Ｏ−ＮＲ＿８、ＮＲ＿８
   −Ｏ、Ｓｅ−Ｓｅ、ＣＨ＿２−ＣＨ＿２およびＳｅ−Ｃ
   Ｈ＿２から選ばれる基であり、 ＺはＯＨ、ＮＨ＿２、ＮＨＣＯＲ＿９およびＳＨから選
   ばれる基であり、 Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿５、Ｒ＿６およ
   びＲ＿８はそれぞれ水素原子、アルキル基またはアリー
   ル基を意味し、 Ｒ＿７はアルキル基またはアリール基を意味し、 Ｒ＿９はβ−ラクタムの活性側鎖を意味し、 で表わされる化合物ならびにその医薬的に許容される塩
   からなることを特徴とする請求項第（１８）項記載の新
   規な抗菌性化合物。 （２８）−Ｘ−Ｙが−Ｓ−Ｓ−であることを特徴とする
   請求項第（２７）項記載の化合物。 （２９）Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿５、Ｒ
   ＿６およびＲ＿８がそれぞれ水素原子または低級アルキ
   ル基であり、Ｒ＿７が低級アルキル基であることを特徴
   とする請求項第（２８）項記載の化合物。 （３０）前記低級アルキル基がメチル基であることを特
   徴とする請求項第（２９）項記載の化合物。 （３１）下記一般式（IV）： ▲数式、化学式、表等があります▼（IV） ［式中、ＸはＳ、Ｏ、ＣＨ＿２、ＮＨ、ＮＲ＿６および
   Ｓｅからら選ばれる基であり、 ＹはＮ、ＣＨおよびＣＲ＿７から選ばれる基であり、 ＺはＯＨ、ＮＨ＿２、ＳＨまたはＮＨＣＯＲ＿９（Ｙが
   Ｎであるとき）を意味し、 ＺはＲ＿１＿０（ＹがＣＨまたはＣＲ＿７であるとき）
   を意味し、 Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿５、Ｒ＿６およ
   びＲ＿７はそれぞれ水素原子、アルキル基またはアリー
   ル基を意味し、 Ｒ＿９はβ−ラクタムの活性側鎖を意味し、 Ｒ＿１＿０は▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＿１＿１はアルキル基またはアリール基を意
   味し、 Ｒ＿１＿２はＯＨ、ＮＨ＿２、ＮＨＣＯＲ＿９またはＳ
   Ｈを意味する）］ で表わされる化合物ならびにその医薬的に許容される塩
   からなることを特徴とする請求項第（１８）項記載の新
   規な抗菌性化合物。 （３２）ＸがＳであることを特徴とする請求項第（３１
   ）項記載の化合物。 （３３）Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿５、Ｒ
   ＿６およびＲ＿７がそれぞれ水素原子または低級アルキ
   ル基であることを特徴とする請求項第（３２）項記載の
   化合物。 （３４）前記低級アルキル基がメチル基であることを特
   徴とする請求項第（３３）項記載の化合物。 （３５）ＺがＯＨであり、ＹがＮであることを特徴とす
   る請求項第（３１）項ないし（３４）項のいずれかに記
   載の化合物。 （３６）下記一般式（Ｖ）： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｖ） （式中、ＸはＳ、Ｏ、ＣＨ＿２、ＮＨ、ＮＲ＿５および
   Ｓｅからら選ばれる基であり、 ＹはＮＲ＿６−Ｚであり、 Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿５およびＲ＿６
   はそれぞれ水素原子、アルキル基またはアリール基を意
   味し、 ＺはＯＨ、ＳＨ、ＮＨ＿２またはＮＨＣＯＲ＿７を意味
   し、 Ｒ＿９はβ−ラクタムの活性側鎖を意味する） で表わされる化合物ならびにその医薬的に許容される塩
   からなることを特徴とする請求項第（１８）項記載の新
   規な抗菌性化合物。 （３７）ＺがＮＨＣＯＲ＿７（式中、Ｒ＿７はフェニル
   基または低級アルキル基を意味する）であることを特徴
   とする請求項第（３６）項記載の化合物。 （３８）Ｒ＿７がベンジル基であることを特徴とする請
   求項第（３７）項記載の化合物。（３９）Ｒ＿１、Ｒ＿
   ２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿５およびＲ＿６がそれぞれ水
   素原子または低級アルキル基であることを特徴とする請
   求項第（３６）、（３７）または（３８）項記載の化合
   物。 （４０）Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿５およ
   びＲ＿６がそれぞれ水素原子であることを特徴とする請
   求項第（３６）、（３７）または（３８）項記載の化合
   物。 （４１）ＸはＳであり、Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿
   ４ならびにＲ＿６およびＺがＮＨＣＯベンジル基である
   ことを特徴とする請求項第（３６）項記載の化合物。 （４２）化合物が３−カルボキシル−５−ヒドロキシメ
   チル−６、６−ジメチル−▲＾４−１、４−チアジンで
   あることを特徴とする請求項第（１８）項の化合物。 （４３）化合物が３−カルボキシル−５−（２−ヒドロ
   キシプロピル）−６，６−ジメチル−▲＾４−１，４−
   チアジンであることを特徴とする請求項第（１８）項の
   化合物。 （４４）化合物が２−チア−４−カルボキシル−６−（
   ２−ヒドロキシプロピル）−７，７−ジメチル−▲＾５
   −１，５−チアゼピンであることを特徴とする請求項第
   （１８）項の化合物。 （４５）化合物が３−カルボキシル−５−オキシミノ−
   １，４−チアジンであることを特徴とする請求項第（１
   ８）項の化合物。 （４６）化合物が３Ｄ−カルボキシ−５−フェニルアセ
   チルヒドラジル−▲＾４−チアジンであることを特徴と
   する請求項第（１８）項の化合物。