JPH03184918A - ホスファチジルカルニチンを含有するヒトの神経損傷関連疾患治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、一般式（Ｉ）： 制 ＣＢ　、　−０−Ｐ−０−Ｃ１ ＨＯＣＨ，−Ｃｏｏ（−） ［式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なる、直鎖状ま
たは分枝鎖状、飽和または−またはポリ不飽和のＣＩ−
〇、。脂肪酸基である］ で示されるラセミ形または光学活性形のホスファチジル
カルニチン誘導体またはその薬学的に許容し得る塩を含
有する、神経損傷に関連するヒトの疾患の治療における
神経線維の再生剤として有用な医薬組成物に関するもの
である。Ｒ１およびＲ含はピバリン酸、ラウリン酸、ミ
リスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステア
リン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、アラキ
ドン酸の基であるのが好ましく、神経損傷に関連するヒ
トの疾患はとりわけ末梢性ニューロバシー（神経損傷）
、脳血管性疾患、大脳レベルの外傷および慢性神経変性
疾患である。明確かつ簡便にするために、本明細書では
、その使用が本発明の目的である一般式（１）を有する
カルニチンホスファチジル誘導体を、総称してホスファ
チジルカルニチンと呼ぶ。

ホスファチジルカルニチンは既知の物質である。

その製造方法および物理化学的特性は、ヒンツエおよび
ガーデン（Ｈ，Ｈｉｎｔｚｅ　＆　Ｇ、Ｇｅｒｃｋｅｎ
　ｉｎ　Ｌｉｐｉｄｓ　Ｖｏｌ、　　１Ｏｎ、１（１９
７５）１１１．２Ｏ−２４）によって記載されたが、こ
の物質についての治療的用途の可能性については言及さ
れなかった。

驚くべきことに、本発明者らは、ホスファチジルカルニ
チンが、神経損傷に関連するヒトの疾患の治療、とりわ
け末梢性ニューロバシー（神経損傷）、脳血管性疾患、
大脳レベルの外傷および慢性神経変性疾患の治療におい
て、神経線維の再生剤として有用であることを見い出し
た。

より具体的には、形態学上および機能上神経損傷に関連
するヒトの疾患の例は以下の通りであるａ、末梢神経系
の外傷、代謝または毒に起因する損傷（末梢性ニューロ
バシー）、 ４ ｂ、大脳神経系の外傷または血管に起因する損傷（大脳
レベルにおける神経血管性疾患および外傷）、Ｃ１中枢
神経系の老化に伴う損傷、 ｄ、まだ未知の病理学的原因（慢性神経変性疾患）また
は感染性または腫瘍性疾患に起因する損傷。

本明細書に於いては、末梢性ニューロバシーとは、独立
して、またはより複雑な病態の一部としてしばしば起こ
り得る、−群の永久的末梢神経障害を意味するものとす
る。

末梢性ニューロバシーの病理学的分類は、トーマス（Ｐ
、に、Ｔｈｏｍａｓ−Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃ
ｏｎｆｅｒｅｎｃｅ　ｏｎＰｅｒｉｐｈｅｒａｌ　Ｎｅ
ｕｒｏｐａｔｈｉｅｓ、２４ｔｈ−２５ｔｈ　Ｊｕｎｅ
　１９８１Ｍａｄｒｉｄ　Ｐ、７９．　Ｅｘｃｅｒｐｔ
ａ　Ｍｅｄｉｃａ）によって、第１表に記載した様な提
案がなされている。

第１茎 末梢性ニューロバシーの病理学的分類 １、通常、軸索の欠損に至る障害 ａ、ニューロバシー を髄部萎縮 抜根細胞および自律神経節細胞の変性 す、アクソノパシー（軸索損傷） 近位アクソノパシー 遠位アクソノバシー 中心の軸索の遮断 ２、基本的に、支持組織に関する障害 シュパン（Ｓｃｔｖａｎｎ）細胞の障害ミニリンの障害
（Ｍｙｅｌ　１ｎｏｐａｔｈｉｅｓ）神経連結組織の障
害 血管性障害。

通常、実質上、末梢神経における軸索の欠損を生じる障
害と、神経線維損傷が、シュパン細胞およびミニリン、
連結神経組織および血管系を包含する支持構造に関する
障害による２次的なものである障害に分類することがで
きる。

障害の第１のカテゴリーは更に、ニューロンの完全な欠
損が生しる症状にニューロバシー）と、選択的な軸索破
壊が生じる症状に副骨類することができる。

回し著者は、病因に基づく末梢性ニューロバシーの分類
を第２表に記載の様に提案している。

第２表 末梢性ニューロバシーの病因による分類以下の要因に基
づくニューロバシー： 医薬品、 全身性疾患、 毒、 栄養欠乏、 炎症および感染後の障害、 神経形成およびパラプロティン血症、 遺伝性因子、 原因不明の因子。

本発明は、神経線維の再生剤としての活性を有し、神経
損傷に関連するヒトの疾患の治療、とりわけ末梢性ニュ
ーロバシー（神経損傷）、脳血管性疾患、大脳レベルの
外傷および慢性神経変性疾患の治療に有効であることが
証明された医薬組成物であって、毒性または副作用のな
い医薬組成物を提供することを目的とするものである。

この目的は、−形成（Ｉ）： ［ＯＣＨ，−ＣＯＯ（−） ［式中、Ｒ１およびＲ″は同一または異なる、直鎖状ま
たは分枝鎖状、飽和または−またはポリ不飽和のＣ，−
Ｃ，。脂肪酸基であるコ で示され、好ましくはＲ１およびＲ雪がピバリン酸、ラ
ウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイ
ン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレ
ン酸、アラキドン酸の基である、ラセミ形または光学活
性形のホスファチジルカルニチン誘導体またはその薬学
的に許容し得る塩によって達成される。

この１０年間に得られた結果は、神経細胞が、イン・ビ
トロおよびイン・ビボの両者において、その微小環境に
おける内因性または外因性の変化に応答して形態学的お
よび機能的変化を受は易いということを示している。神
経柔軟性という語句で要約されるこの能力は、神経損傷
後の修復過程の発現に必要であることがわかった。神経
培養の使用は、ヒトにおける神経損傷後の神経形成過程
の促進および神経学的結果の改善におけるこの新規な活
性成分の効果を評価するために非常に有用である。

神経細胞の形態学上の変化（例えば神経炎の増大）およ
び／または機能上の変化の誘導は、神経柔軟性に含まれ
る過程によって支配されるので、神経培養の使用はこの
様な評価のための基礎となる。

従って、イン・ビトロにおいて神経炎の増大を誘導また
は促進し得る薬物は、神経柔軟性の現象の発現を促進し
易い薬物である。

本発明のホスファチジルカルニチン誘導体の活性を証明
するために、本発明者らは、イン・ビトロで多数の試験
を行った。本発明を例示するため、以下に例を挙げる。

試験１ タイプＣ１３００のマウス神経芽腫細胞（アメリカン・
セル・タイプ・カルチャー・コレクション、ベセスダ、
メリーランドから得たＮ　ｅｕｒｏ−２ａ　（Ｎ　２　
Ａ）クローン）に対するジパルミトイルホスファチジル
カルニチンの生物学的活性を証明するために、この試験
を行った。比較として、アセチル−Ｌ−カルニチンを選
択した。なぜなら、末梢性ニューロバシーの治療におけ
るその活性は、例えば１９８６年８月４日に出願された
イタリア特許第１１９６５６４号に記載されているから
である。

神経芽細胞腫の神経培養は、好適な条件において、成熟
したニューロンの種々の機能特性を示し得、更に、デニ
スードニニ；アウグステイ・トコ（Ｄｅｎｉｓ−Ｄｏｎ
ｉｎｉ　Ｄ、　；＾ｕｇｕｓｔｉ　Ｔｏｃｃｏ　Ｇ、　
；　（１９８０）　Ｍｏ１ｅｃｕｌａｒ　ａｎｄ　Ｌｅ
ｃｉｔｉｎ　Ｐｒｏｂｅ　Ａｎａｌｙｓｅｓ　ｏｆ　ｎ
ｅｕｒ。

ｎａｌ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｓ；　ｉｎ　
Ｍｏ５ｃｏｎａ、　Ｍｏｎｒｏｙ、　Ｎｅｕｒｏｎａｌ
　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｉｎ　Ｍｏｄｅｌ　Ｓｙｓ
ｔｅｍｓ、　ｐ、３２３−３４８、＾ｃａｄｅ＋ｎｉｃ
　Ｐｒｅｓｓ、　Ｎ、Ｙ、）に記載されている様な、種
々の成長過程に相互に関連し得る生化学的パラメーター
の定性的および定量的分析を可能に０ する。

物質および方法 ａ）使用した溶液 ジパルミトイルホスファチジルカルニチンを１０ｘｇ／
ｍＱ　）リス／ＨＣＣ５０ｎＭ　ｐＨ７，８の濃度で溶
解し、種々の時間、音波処理しくＣＤＩ。

２：３分間；ＣＤ３．４・２分間：ＣＤ５．５１分間）
、アクロディスク・フィルター（Ａｃｒｏｄｉｓｃ　Ｆ
ｉｌｔｃｒ）４５　ａｍ　（ゲルマン（Ｇｅｌｍａｎ）
）で濾過し、ダルベツコ調製イーグル培地（１）ｍｅｍ
、　Ｆ　ｌｏｗ）、１０％ウシ胎児血／ｌ！ｆ（ＦＣ３
１０ット２ＡＯ２Ｓｅｒｏｍｅｄ）、ペニシリン（１０
０単位／ｍ１２．１ｒｖｉｎｅ）およびＬ−グルタミン
（２ｍＭ、　Ｓｉｇｍａ）を含有している培養培地でｌ
Ｘｌ０−’Ｍの終ｆｉ度まで希釈した。

アセチル−し−カルニチンを上記培養培地に直接溶解し
、濾過し、次いで、培地で希釈して１×１０−’Ｍ、５
Ｘ１０−３ＭＳ　１ｘｌＱ−”Ｍ、５ｘｌＯ−’Ｍ、ｌ
Ｘｌ０〜’Ｍ、５Ｘ１０−５Ｍの終濃度を得た。

ｂ）使用した培養、インキュベート法、分析法上記培養
培地にＮ、Ａ細胞を１０，０００細胞／ウエル（２４−
コスタ−）の密度でプレートした。

プレートして２４時間後、培養培地を、ホスファチジル
カルニチン誘導体を含有しているか、または含有してい
ない３５０μｍの新しい培養培地で置キ換工、レオン、
ファツジ、ペンベグニュ、トラフアノによる記載（Ｌｅ
ｏｎ　Ａ、、　Ｆａｃｃｉ　Ｌ、、　Ｂｅｎｖｅｇｎｕ
　Ｄ、、　ＴｏｆＴａｎｏ　Ｇ、、　　ｉｎ　Ｍｏｒｐ
ｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ
　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅ　ｉｎ
　ｎｅｕｒｏｂｌａｓｔｏｍａ　ｃｅｌｌｓ、　Ｄｅｖ
、　Ｎｅｕｒｏｓｃｉ、　５：　１０８−］１４＋　（
１９８２））に従い、形態学的評価のために２４時間、
次いでＤＮＡ中にメチル３−Ｈチミジン（’ＨＴｄｒ、
アマ−ジャム（＾ｍｅｒｓｈａｍ））を導入するために
４８時間放置し、モスマンによる記載（Ｍｏｓｍａｎｎ
　Ｔ、　　ｉｎ“Ｒａｐｉｄ　Ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉ
ｃ　Ａｓ５ａｙ　ｆｏｒ　Ｃｅ１ｌｕｌａｒ　Ｇｒｏｗ
ｌｈ　ａｎｄ　５ｕｒｖｉｖａｌ：＾ｐｐｌｉｃａｔｉ
ｏｎ　ｔｏ　ＰｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎＣｙｔｏｔｏ
ｘｉｃｉｔｙ　Ａｓ５ａｙ″Ｊ、　　Ｉｍｍｕｎ、　Ｍ
ｅｔｈｏｄｓ　６５．５５−６３）に従い、比色定量−
ＭＴＴ　（３−（４，５ジメチルアゾール−２−イル）
−２，５−ジフェニルテトラゾリウムによって生存細胞
を数えた。

積呈 第１図ｄかられかるように、ジパルミトイルホスファチ
ジルカルニチンは、神経芽腫細胞Ｎ、Ａにおける形態学
的分化の誘導に活性であることがわかったが、一方、第
１図すかられかるように、アセチル−Ｌ−カルニチンは
、使用した種々ノ濃度で全く不活性であり、対照群につ
いては修飾を全く誘導しなかった（第１図ａ）。

第３表は、対照群細胞、アセチル−Ｌ−カルニチン処理
細胞およびラセミ形ジパルミトイルホスファチジルカル
ニチン処理細胞についてそれぞれ、軸索を有する細胞の
百分率、メチル”Ｈチミジンの導入量、比色定量による
生存細胞の数および最後の２データの比に関して得られ
た結果を示す。

第３表に示したデータから、ジパルミトイルホスファチ
ジルカルニチンは、軸索を有する細胞の数の増加、ＤＮ
Ａへの３−ＨＴｄｒの導入の低下（増殖の低さ、従って
、細胞分化の高さの指数）に活性であることを示したが
、アセチル−Ｌ−カルニチンは不活性であることを示し
たということがわかる。

ＭＴＴの比色定量的投薬量によって得られた結果は、試
験化合物に関しては、毒性効果が全くないという証拠を
示していることも認めるべきである。

本発明のホスファチジルカルニチン誘導体またはその薬
理学的に許容し得る塩を使用して得られる医薬組成物は
、１００〜１０００ｍｇ、好ましくは２００〜５００ｍ
ｇの範囲の量の活性成分を含有し、製薬技術において通
常使用される処方によって、経口または非経口投与に好
適な形態に製造することができる。−形式（１）で示さ
れるホスファチジルカルニチン誘導体またはその薬理学
的に許容し得る塩の治療的有効量の投与を特徴とする、
神経損傷によるヒトの疾患の治療法は、１０〜８０ｘｇ
／ｋｇ／日、好ましくは２０〜５０ｘｇ／ｋｇ／日の範
囲の量の活性成分を、■日当たり２〜４回、経口的また
は非経口的に投与することによって行われる。

本発明者らは、本発明の医薬製剤の実施例を幾つか挙げ
るが、例示を目的とするものであって、本発明の範囲を
限定するものではない。

注射用医薬組成物 実施例１ ２Ｒ（ｌバイアルは、 ジパルミトイル−ホスファ チジル−し一カルニチン　　　２００ｘｇ−塩基性リン
酸ナトリウム　　２．４ｉｇ二塩基性リン酸ナトリウム
　　２．２６＋ｇ２回蒸留した発熱物質不含の水を必要
量加えて２ＩＱとする を含有する。

実施例２ ２叶バイアルは、 ジピバロイル−ホスファ チジルーＬ−カルニチン　　　２００麗ｇ−塩基性リン
酸ナトリウム　　２．４ｊ＋ｇ二塩基性リン酸ナトリウ
ム　　２．２６ｍｇ２回蒸留した発熱物質不含の水を必
要量加えて２籾とする を含有する。

実施例３ ２村バイアルは、 シミリストイル−ホスファ チジルーＬ−カルニチン　　　２００皮ｇ−塩基性リン
酸ナトリウム　　２．４ｘｇ二塩基性リン酸ナトリウム
　　２．２６ｘｇ２回蒸留した発熱物質不含の水を必要
量加えて２Ｒ（ｌとする を含有する。

実施例４ ３ｆｆ（バイアルは、 ジパルミトイル−ホスファ チジルーＬ−カルニチン　　　３００ｘｇ７ 一塩基性リン酸ナトリウム　　３．２１ｘｇ二塩基性リ
ン酸ナトリウム　　３．３９ｘｇマンニトール　　　　
　　　　３０ｍｇ２回蒸留した発熱物質不含の水を必要
量加えて３１１Ｑとする を含有する。

実施例５ ３ｊ１１２バイアルは、 ジピバロイル−ホスファ チジルーＬ−カルニチン　　　３００＋ｇ−塩基性リン
酸ナトリウム　　３．２１＊ｇ二塩基性リン酸ナトリウ
ム　　３．３９ｍｇマンニトール　　　　　　　　３０
ｘｇ２回蒸留した発熱物質不含の水を必要量加えて３対
とする を含有する。

実施例６ ３ｆｆ（２バイアルは、 シミリストイル−ホスファ チジルーＬ−カルニチン　　　３００ｘｇ−塩基性リン
酸ナトリウム　　３．２１ｘｇ二塩基性リン酸ナトリウ
ム　　３．３９ｘｇマンニトール　　　　　　　　３０
ｚｇ２回蒸留した発熱物質不含の水を必要量加えて３Ｒ
Ｑとする を含有する。

経口用医薬組成物 実施例７ ゼラチンカプセルは、 ジパルミトイル−ホスファ チジル−し一力ルニチン　　　４００ｍｇ植物油　　　
　　　　　　　　２７０ｍｇミツロウ　　　　　　　　
　　ｌ肩ｇ を含有する。

実施例８ ゼラチンカプセルは、 ジピバロイル−ホスファ チジル−し一カルニチン　　　４００ｇｇ植物油　　　
　　　　　　　　２７０ｇｇミツロウ　　　　　　　　
　　　ｌｉｇを含有する。

尖塵廼１ ゼラチンカプセルは、 シミリストイル−ホスファ チジル−し一カルニチン 植物油 ミツロウ を含有する。

実施例１０ ゼラチンカプセルは、 ジパルミトイル−ホスファ チジル−し一カルニチン 植物面 ミツロウ を含有する。

実施例１１ ゼラチンカプセルは、 ジピバロイル−ホスファ チジルーＬ−カルニチン ００ｍｇ ７０ｍｇ １尻ｇ ００ｍｇ ７０１ｍｇ １次ｇ ５００＋ｇ 植物油 ７０ｘｇ ミツロウ を含有する。

実施例１２ ゼラチンカプセルは、 シミリストイル−ホスファ チジルーＬ−カルニチン 植物油 ミツロウ を含有する。

実施例１３ 糖剤は、 ジパルミトイル−ホスファ チジル−し一カルニチン マンニトール 微結晶性セルロース デンプン シュクロース ラッカー を含有する。

実施例１４ ５００戻ｇ ２７０肩ｇ ｌｉｇ ５０ｘｇ １００＋ｇ ５ＩＷｇ ｌｉｇ ０ｍｇ ｘｇ 糖剤は、 ジピバロイル−ホスファ チジル−し一力ルニチン マンニトール 微結晶性セルロース デンプン シュクロース ラッカー を含有する。

実施例１５ 糖剤は、 シミリストイル−ホスファ チジルーＬ−カルニチン マンニトール 微結晶性セルロース デンプン シュクロース ラッカー を含有する。

実施例１６ ２５０＋ｇ ］００＋ｇ ５ｘｇ ｉｇ ０ｘｇ ５＋ｙｇ ５０ｙｇ ００ｘｇ ２５次ｇ ｘｇ ０ｘｇ ｉｇ ２ カシェ剤は、 ジパルミトイル−ホスファ チジルーＬ−カルニチン マンニトール ラクトース を含有する。

実施例１７ カシェ剤は、 ジピバロイル−ホスファ チジル−し一力ルニチン マンニトール ラクトース を含有する。

実施例１８ カシェ剤は、 シミリストイル−ホスファ チジルーＬ−カルニチン マンニトール ラクトース を含有する。

５０ｘｇ １００πｇ ００ｍｇ ４５０＋ｇ ００ｘｇ ００ｘｇ ５０ｍｇ ００ｚｇ １００肩ｇ

【図面の簡単な説明】

図面の第１図は、神経芽腫細胞Ｎ２Ａにおける形態学的
変化を示す模写図である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式（ I ）： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒ＾１およびＲ＾２は同一または異なる、直鎖
   状または分枝鎖状、飽和または一またはポリ不飽和のＣ
   ＿１−Ｃ＿２＿０脂肪酸基である］ で示されるラセミ形または光学活性形のホスファチジル
   カルニチン誘導体またはその薬学的に許容し得る塩の少
   なくとも１種類を活性成分として含有する、神経損傷に
   関連するヒトの疾患の治療に有効な神経線維の再生剤医
   薬組成物。 ２、Ｒ＾１およびＲ＾２がピバリン酸、ラウリン酸、ミ
   リスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステア
   リン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、アラキ
   ドン酸の基であることを特徴とする請求項１に記載の医
   薬組成物。 ３、神経損傷に関連するヒトの疾患が末梢性ニューロバ
   シー（神経損傷）、脳血管性疾患、大脳レベルの外傷お
   よび慢性神経変性疾患であることを特徴とする請求項１
   に記載の医薬組成物。 ４、活性成分を１００〜１０００ｍｇの範囲の量で含有
   することを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。 ５、活性成分を２００〜５００ｍｇの範囲の量で含有す
   ることを特徴とする請求項４に記載の医薬組成物。