JPH03188088A

JPH03188088A - 新規リゾホスファチジルセリン

Info

Publication number: JPH03188088A
Application number: JP1325566A
Authority: JP
Inventors: Tetsuo Shiba; 哲夫芝
Original assignee: Ajinomoto Co Inc
Current assignee: Ajinomoto Co Inc
Priority date: 1989-12-15
Filing date: 1989-12-15
Publication date: 1991-08-16

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、ＮＢ”、　　Ｋ”−ＡＴＰａｓｅの阻害剤を
有する新規なりゾホスファチジルセリンおよびその塩に
関する。

〔従来の技術〕

モルヒネは、ケシの未熟果中に含まれるアヘンアルカロ
イドの主成分であり、優れた麻酔作用、鎮痛作用がある
ことで知られている。生体には、このモルヒネと結合す
る受容体が存在し、そのモルヒネ受容体と特異的に結合
する内因性の鎮痛活性物質が検索され、エンケファリン
が発見された。

ジギタリスは、ゴマノハグサ科の植物より得られる強心
配糖体で、強心作用、血圧上昇作用、血管収縮作用等を
有し、心不全の治療薬として使用されている。エンケフ
ァリンの場合と同様に、生体内に内因性ジギタリス様活
性物質が存在し、動物細胞においてＮａ”やに゛の能動
輸送のために細胞膜に組み込まれたイオンポンプである
Ｎａ’、　Ｋ″″−ＡＴＰａｇｅの活性を調節したり、
ナトリウム尿排泄を調節することによって、本態性高血
圧の発症に関わっていると考えられており、その活性本
体の検索に関する種々の報告がなされている。たとえば
、Ｔａｍｕｒａらによるウシ副腎からのＮａ”　＋　Ｋ
”　−へＴＰａｓｅ阻害物質の精製の試み（Ｍ、　Ｔａ
ｍｕｒａ　ｅｔ　ａｌ、。

Ｂｉｏｃｈｅ＋＋＋１ｓｔｒｙ、　２７．４２４４　（
１９８８））、Ｇｏｔｏらによるイヌ血漿中に存在する
ジギタリス様活性物質の精製の試み（八、　Ｇｏｔｏ　
ｅｔ　ａｌ−＋　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｂｉｏｐｈｙｓ。

Ｒｅｓ、　Ｃｏｉｍｕｎ、、　１５２．３２２　（１９
８Ｂ））。Ｄａｓｇｕｐｔａらによるヒト血漿中からの
内因性ジゴキシン様活性物質の精製の試み（Ａ、　Ｄａ
ｓｇｕｐｔａ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｂｉｏｃｈｅｍ。

Ｂｉｏｐｈｙｓ、　Ｒｅｓ、　Ｃｏｍｍｕｎ、、　１４
８．６２３　（１９８７））などが挙げられる。しかし
ながら、これらの試みにもかかわらず、いまだにその活
性本体の単離ならびにその構造についての詳細な報告は
なされていない。唯一、Ｄａｓｇｕｐｔａらは、ヒト血
漿より抗ジギタリス抗体を認識する極微量得られた活性
物質、ＤＬＩＳ−２（ｄｉｇｏｘｉｎｌｉｋｅ　ｉｍｍ
ｕｎｏｒｅａｔｊｖｅ　５ｕｂｓｔａｎｃｅ−２）のＭ
Ｓ／ＭＳスペクトル解析により、下記のような推定構造
を提出している。しかし、この式においてもリゾホスフ
ァチジルセリンのアシル基部分の２重結合の位置につい
て不明な点が多い。

〔発明が解決しようとする課題〕

本発明の課題は優れたＮａ・＋　Ｋ’−ＡＴＰａｓｅ阻
害作用を有し、内因性ジギタリス様活性物質により近い
構造を有する化合物を提供することにおる。

〔課題を解決するための手段〕

本発明者らは、種々のアシル基を有するリゾホスファチ
ジルセリンを合成し、Ｎａ”、　Ｋ”−ＡＴＰａｓｅ阻
害作用について見当したところ、特定のアシル基を有す
るリゾホスファチジルセリンがＮａ’　、　Ｋ”−ＡＴ
Ｐａｇｅ阻害作用を有することを見出し、本発明を完成
した。すなわち本発明は式（１）％式％で示される新規リゾホスファチジルセリンおよびその塩
である。

式中ＲＣＯは炭素数１０〜２５のアシル基を表わす。

本発明のりゾホスファチジルセリンは、種々のアシル基
を導入し、ジギタリス様活性を有する化合物を検索する
ことによって得られた。すなわち、グリセロール誘導体
とセリン誘導体を用いてホスニモノクロロモノアミダイ
ト法により亜リン酸エステルを調製、次いで、過酸化水
素で処理することにより、リン酸ジエステルとする。こ
のリン酸ジエステルを、リン酸の保護基であるメチル基
とグリセロールの保護基であるイソプロピリデン基を脱
離後、各種の脂肪酸とクロロ炭酸イソブチルとから調製
される混合酸無水物とを縮合させ、生成する縮合物中の
セリンの保護基を除去することによって製造し得る。

さらに、本発明のりゾホスファチジルセリンは通常の方
法に従い精製される。たとえば、調製用ｆ３１１ｉクロ
マトグラフィー、シリカゲルクロマトグラフィー、高速
液体クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラ
フィー等が挙げられる。

本発明のりゾホスファチジルセリンは、常法に従って各
種のアルカリ金属及びアルカリ＋：：類金属つム塩、ナ
トリウム塩、カルシウム塩、Ｌｙｓ塩などが挙げられる
。さらに、無機酸または有機酸と処理することによって
も、塩類に導くことができる。これらの塩類としては、
塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、リン
酸塩等の無機酸塩及び酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、ク
エン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、乳酸
塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩等
の有機酸塩が挙げられる。

本発明のりゾホスファチジルセリンまたはその塩は、優
れたＮａ”、　Ｋ”−ＡＴＰａｇｅ阻害作用を示し、内
因性ジギタリス様活性物質と同じかまたは類似の構造を
有するので有毒性の高い強心配糖体より副作用の少ない
強心剤や、血圧調節剤、ナトリウム尿排泄調節剤として
使用することができる。

本発明のりゾホスファチジルセリンまたはその塩の投与
量は、化合物の種類、投与方法、患者の症状・年齢等に
より異なるが、通常１回ｏ、ｏｏｏｏｉ〜１１０００ｒ
ｒ、好ましくは０．０１〜１０■を１日当たり１〜３回
である。本発明のりゾホスファチジルセリンまたはその
塩は通常、製剤用担体と混合して調製した製剤の形で投
与される。製剤用担体としては、製剤分野において常用
され、かつ本発明のりゾホスファチジルセリンまたはそ
の塩と反応しない物質が用いられる。

剤型としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロ
ップ剤、懸濁剤、坐剤、軟膏、クリーム剤、ゲル剤、貼
付剤、吸入剤、注射剤等が挙げられる。これらの製剤は
常法に従って調製される。

なお、液体製剤にあっては、用時、水または他の適当な
媒体に溶解または懸濁する形であってもよい。また錠剤
、顆粒剤の周知の方法でコーティングしてもよい。注射
剤の場合には、本発明のりゾホスファチジルセリンまた
はその塩を水に溶解させて調製させるが、必要に応じて
生理食塩水あるいはブドウ糖溶液に溶解させてもよく、
また緩衝剤や保存剤を添加してもよい。

これらの製剤は、本発明のりゾホスファチジルセリンま
たはその塩を０．２％以上、好ましくは０．５〜７０％
の割合で含有することができる。これらの製剤はまた、
治療上価値ある他の成分を含有していてもよい。

実施例以下に実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明する
。

実施例１Ｏ−（１−ノナデカノイル−５ｎ−グリセロ−３ｒ〜一ホス９’？）　　Ｎ　　（９−フルオレニルメチルオ
キシカルボニル）−Ｌ−セリン　９−フルオレニルメチ
ルエステルの合成７ｒ）Ａ、　Ｏ−（ｓｎ−グリセロ−３−ホステア）−Ｎ−（
９−フルオレニルメトキシカルボニル）−Ｌ−セリン　
９−フルオレニルメチルエステルの合成（リン酸ジエス
テルの合成）（１１Ｎ−フルオレニルメチルオキシカルボニル−０−
ｔｅｒｔ−ブチル−し−セリン　９−フルオレニルメチ
ルエステルＮ−フルオレニルメチルオキシカルボニル−０ｔｅｒ　
ｔ−ブチル−し−セリン（５，０９ｇ、１３．３ｍｍｏ
ｌ）のＴＨＦ　（２５ｍｊり溶液に塩−氷浴冷却下、９
−フロレニルメタノール（２，７４ｇ、　　１４．Ｏｍ
ｍｏｌ）　、４−ジメチルアミノピリジン（４８７ｍｇ
。

３．９９ｍｍｏｌ）　、ＤＣＣ（２，７４ｇ、　　Ｉ　
３．３ｔａｍｏｌ）を順次加えた後、水冷下２時間攪拌
した後、室温で３時間攪拌した。不溶物を濾去した後、
減圧濃縮し残渣を酢酸エチルに溶かし飽和食塩水、１０
％クエン酸水溶液、飽和食塩水、飽和重曹水、飽和食塩
水で順次洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃
縮後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（２
００ｇ、ベンゼン−酢酸エチル３０：１）で精製し無色
油状物を得た。

収量６．２９ｇ（８４，３％）０元素分析値：Ｃ，７１
，９１；Ｈ，６，９１；Ｎ、　　１．９６％。

ＣｚｂＨ８ＩｓＮＯｓ　・２ＣＪｓＯｚとしての計算値
：Ｃ，７１，６１、Ｈ，６，９７；Ｎ、　　１．９０％
。

（２）　Ｎ−９−フルオレニルメチルオキシカルボニル
−Ｌ−セリン　９−フルオレニルメチルエステル（１）で合成した化合物（６，２９ｇ＋　　１１．２ｍ
ｍｏｌ）に、９０％ＴＦＡ　（１９，２ｍｊ！、　０．
２２４ｍ１Ｉｏｌ）を加え、室温で２時間放置した。減
圧濃縮後、再び９０％ＴＦＡ　（１９，２ｍｌ、　０．
２２４ｍｎ＋ｏｌ）を加え室温で２時間放置した。減圧
濃縮後、残渣を９０％エタノールに加温して溶かし、析
出した結晶を酢酸エチル−ヘキサンより再結晶した。収
量５．４５ｇ（９６，３％）。元素分析値：Ｃ，７３，
１６ｉＨ，５，６２；Ｎ、　２．５９％。

Ｃ５ＪｚＪＯｓ・ＨｌＯとしての計算値：室′温で３０
分間攪拌し、直ちに減圧蒸留し、沸点６５〜６６℃（１
，３ｗｍＨｇ）の両分を得た。収量（４１０−（Ｃ（Ｓ
）　−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−
メチル）メチルホスホナリン〕−Ｎ−（９−フルオレニ
ルメチ５７完ボニル）−Ｌ〜セリン　９−フルオレニル
メチルエステル（２）で合成した化合物１１．１　ｇの塩化メチレン懸
濁液（ｏ、３Ｍｍ度）にジイソプロピルエチルアミン（
１０，５ｍ　４！　）を加えた後、水冷下、（３）で合
成した化合物５．３１ｍ＆’を加えた。室温で１５分間
攪拌し、酢酸エチルを加え、５％炭酸水素ナトリウム、
次いで、水で洗浄後、減圧濃縮し、残渣にアセトニトリ
ルを加えて０．１９Ｍ濃度の溶液とすｍｉりを加えた後
、０．５Ｍテトラゾール−アセトニトリル溶液を室温で
加え、１時間攪拌した。減圧濃縮し、アセトニトリルを
留去後、３０％過酸化水素水２．８５　ｍ　ｌを加え、
１５分間攪拌した。

これに酢酸エチルを加えて、５％亜硫酸水素ナトリウム
水溶液、飽和食塩水で洗浄した。減圧濃縮後、残った油
状物を中圧シリカゲルカラムクロマトグラフィー（２５
ｇ、ベンゼン−酢酸エチル３：１）で精製し、得られた
油状物をジオキサンで凍結乾燥し、無色不定形粉末を得
た。収量４．２０ｇ（収率７６．６％）０元素分析値：Ｃ，６５，０３；Ｈ，５，８８；Ｎ、１．８５％。

Ｃ５ｑＨａ。Ｎｏｒ。Ｐ・１／２Ｃ４ＨｓＯ□としての
計算値：Ｃ，６４，９９；Ｈ，５，８５；Ｎ、　　１．
８５％。

（５）　　０−（１，２−イソプロピリデン−５ｎ−グ
リセ、口心 −３−ホスチｙ）−Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキ
シカルボニル）−Ｌ−セリン　９−フルオレニルメチル
エステル　ナトリウム塩（４）で合成したトリエステル
（３５，７■、５０．１μｍｏ１　）の２−ブタノン（
０，６ｍ　Ｉｌ）溶液にヨウ化ナトリウム（８，３■、
５５μ＋ｗｏｌ）を加え８０℃に５時間加温した。放冷
浸減圧濃縮して、残渣を中圧シリカゲルカラムクロマト
グラフィー（９ｇ。

クロロホルム−メタノール５：１）で精製し、ジオキサ
ンで凍結乾燥し、無色不定形粉末を得た。

Ｃ，６０，２１；）（、５，５Ｑ　　；Ｎ、　　２．０
０％。

Ｃ３ＪｓＪＯ＋ｏＰＮａ　’　２ＨｚＯとしての計算値
：Ｃ，６０，２４、Ｈ，５，４５；Ｎ、　　１．８５％
。

ハ（６）　　Ｏ−（ｓｎ−グリセロ−３−ホス五＃）　　
Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）Ｌ−
セリン　９−フルオレニルメチルエステルナトリウム塩（５）で合成した化合物（２１，４■、２９．７μｓ＋
ｏＪ）の塩化メチレン溶液（２５ｍｌに９５％トリフル
オロ酢酸（１，２５ｍ１）を加え、室温で１５分間放置
した。加温せずに減圧濃縮し、これにベンゼンを加えて
減圧濃縮する操作を２回繰り返して、過剰のトリフルオ
ロ酢酸を留去した。残渣をジオキサンで凍結乾燥し、無
色不定形粉末を得た。収１１１９．９■（１００％）９
元素分析値：Ｃ，５７，４６、Ｈ，５，１０；Ｎ、　　
１．９７％。

Ｃｓ５Ｈ！ＪＯ＋ｏＰＮａ　・３８ｚＯとしての計算値
：Ｃ，５７，１４；Ｈ，５，３４、Ｎ、１．９０％。

４００　ＭＨｚ　’Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７
．８Ｂ（４Ｈ，ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ）。

７．７２（４Ｎ、＋＋＋）、　　７．４１（４Ｈ，ｂｒ
、ｔ、、Ｊ＝８）１ｚ）、　　７．３０（４Ｈ，ｍ）。

５．３５（１Ｂ、ｂｒ）、　　４．８０（ＩＨ，ｂｒ）
、　　４．２〜４−４−４（７Ｈ９＋４．０３（２）１
．ｍ）、　　３．７１（２Ｂ、ｍ）、　　３．５２（２
Ｈ，ｍ）ノナデカン酸（１０，８■、３６．２μｎ＋ｏ
ｌ）のＤＭＦ（１ｍｌ）溶液に塩−氷浴冷却攪拌下トリ
エチルアミン（５，０μｌ、３６μｍｏｌ）、クロロ炭
酸イソブチル（４，７μｌ、３６μｍｏｌ）を加えて、
１５分間攪拌した。これをＡで合成したリン酸ジエステ
ル（１９，９■、　　３０．２　μ５ｏｌ）、４−ジメ
チルアミノピリジン（１，３■、１１μ＋５ｏｌ）の混
合物へ加えた後、室温で３時間攪拌した。減圧濃縮し、
残った油状物を中圧シリカゲルカラムクロマトグラフィ
ー（６ｇ、クロロホルム−メタノール５：１）で精製し
、無色不定形粉末を得た。収量７．０■４００Ｍ１ｌｚ
　　’Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄｉ）　　６７．８７（４Ｂ、ｄ、Ｊ＝７
．５Ｈｚ）、　７．７１（４Ｈ，ｂｒ。

ｔ）、　７．４０（４８，ｂｒ、ｔ）、　７．２９（４
８，ｂｒ、ｑ）、　５．８０（ＩＨ，ｂｒ。

ｓ）、　４．２〜４．４（７Ｈ，ｍ）、　４．０（４８
，ｍ）、　３．７３（３Ｈ，ｍ）。

２．２２（２Ｂ、ｔ、Ｊ＝７．６）１ｚ）、　１．４６
（２Ｈ，ｂｒｔ）、　１．１〜１．２（３０Ｈ，ｍ）、
　０．８４（３Ｈ，ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）。

実施例２Ｏ−（１−アラキト＋ルーｓｎ−グリセロ−３−庄＼ホス＃）９−Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカル
ボニル）−Ｌ−セリン　９−フルオレニルメチルエステ
ルの合成実施例１と同様にして市販のアラキドン酸と実施例１．
Ａで合成したリン酸ジエステルと縮合させ、標記化合物
６．２■を得た。

実施例３Ｏ−（１−ノナデカ−５，８，１１，１４−テトライン
７Ｔ”Ｘノイル−５ｎ−グリセロ−３−ホス＃ヰ）−Ｎ−（９−
フルオレニルメチルオキシカルボニル）Ｌ−セリン　９
−フルオレニルメチルエステルの合成以下のようにしてノナデカ−５，８，１１，１４−テト
ライン酸を合成した。

（１）２−ヘブチノールマグネシウムリボン（７，９２ｇ　、　０．３２６　ｍ
ｏｌ）のエーテル（１２５ｍｊり溶液に水冷攪拌上臭化
エチル（２８，５ｍ　ｌ　、　０．３８１　ｍｏｌ）の
エーテル（２５ｍ１）溶液を２時間で滴下した０滴下終
了後１時間さらに水冷上攪拌した後これに室温で１−ヘ
キシン（３５，０ｍ　ｌ　、　０．３０５　ｍｏｌ）の
エーテル（４０ｍｊり溶液を１時間３０分かけて攪拌上
滴下した。

さらに、室温で１時間攪拌した後、水冷攪拌下ホルムア
ルデヒドを３時間吹き込んだ、これを冷２Ｎ硫酸に加え
た後、エーテル抽出し、エーテル層を飽和食塩水で洗浄
した。硫酸マグネシウムで乾燥下、減圧濃縮後、減圧蒸
留した。収量２５．３　ｇ（７３，８％）。沸点５５−
５７℃／　０．５　ｆｌＨｇ中…。

（２）２−ブロモヘプチン室温で攪拌下、（１）で合成した化合物（５４，８ｇ。

０．４８９　ｍｏｌ）とピリジン（１，９８ｍｆｆ１．
　２４．５ｎｍｏｌ）のエーテル（３８０ｍｊり溶液に
、三臭化リン（１６，７ｍ　Ｉｔ、　０．１７６ｍｏｌ
）を１時間で滴下した。

その後、１時間３０分加熱還流した後、室温まで放冷し
、これを氷の中へ加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液
、５％チオ硫酸ナトリウム水溶液、ＩＮ塩酸、飽和食塩
水で順次洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃
縮後、減圧蒸留した。

収量８５．６　ｇ　（１００％）。沸点４３−４５℃／
１．８ｍ　Ｈｇ　。

（３）２．５−デカジインノールマグネシウムリボン（６，１７ｇ　、　０．２５８　ｍ
ｏｌ）のＴＨＦ　（５５ｍＡ’）溶液に、窒素気流中氷
冷攪拌下、臭化エチル（２１，１ｍ　Ｉｔ　、　０．２
８３　ｍｏｌ）のＴＨＦ（２５ｍｌ）を２０分間で滴下
した。室温で１時間攪拌した後、氷冷して、攪拌下プロ
パルギルアルコール（７，５１ｍ　ｌ！　、　０．１２
９　ｍｏｌ）のＴ’ＨＦ（７，６ｍｌ溶液を１時間かけ
て滴下した。滴下終了後、室温で３０分、５０℃で３０
分攪拌した後、塩化銅（１）　　（２７３ｎｇ、　　２
．７６ｍｍｏｌ）　、（２）で合成した化合物（１４，
１ｇ＋　　８０．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ　（１５ｍｌ）
溶液を加えて、延べ８時間加熱還流後塩化銅（Ｉ）（１
５２■、　　１．５４ｍｍｏ））を追加し、さらに６時
間加熱還流した。放冷後、冷２Ｎ塩酸に加え、エーテル
抽出した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩
水で洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮後
、減圧蒸留した。収量８．８６ｇ、　　（７３，２％）
。沸点１０１−１０３　　℃／　１−２　ｖｎｘ　Ｈｇ
　＊（４）２．５−ブロモデカジイン（３）で合成した化合物（８，００ｇ、　　５３．３ｗ
ａ＋ｏｌ）を使用し、（２）の合成と同様の操作を行な
い、８．１９ｇ（’７１．８％）の標記化合物を得た。

沸点９５−９６℃／　１．２　ｍＨｇ。

Ｔ５１２．５．８−ブロモトリデカトリインマグネシウ
ムリボン（２，８７ｇ、　０．１２０　ｍｏｌ）のＴＨ
Ｆ　（２５ｍｊ）溶液に、窒素気流下臭化エチＪしく９
．８２　ｍ　ｌ　、　０．１３２　ｍｏｌ）のＴＨＦ　
（１２ｍｌ）溶液を水冷攪拌下２５分かけて滴下した。

４５分間室温で攪拌した後、水冷攪拌下、プロパルギル
アルコール（３，４９ｍ　Ｉｔ　、　　６０．０ｍｓ＋
ｏｌ）のＴＨＦ（３，５ｍ　ｌ　）溶液を３０分で滴下
した。２時間室温で攪拌後、これに塩化銅（１）（１２
７■。

１、２８　ｍａ＋ｏｌ）　、（４）で合成した化合物（
７，９９ｇ。

３７、５　ｍｅａｌ）のＴＨＦ　（７ｍｆ）を加えて、
６時間加熱還流した。これに塩化銅（Ｉ）　　（７１，
０■。

０．７１８　ｍｍｏｌ）を追加し延べ１０時間加熱還流
した。

これを冷２Ｎ塩酸に加えた後、エーテルで抽出し、５％
亜硫酸水素ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム
水溶液、飽和食塩水で洗浄した。硫酸マグネシウムで乾
燥後、減圧濃縮し、残渣をヘキサンより再結晶し、淡黄
色粉末を得た。これのエーテル（３０ｍｌり溶液にピリ
ジン（１５２，ｃｌ。

１、８２　＋ｍｓ＋ｏｌ）を加えた後、室温攪拌上三臭
化リン（１，２８ｍ１．　１３．５ｍｍｏｌ）を２０分
で滴下した後、２時間加熱還流した。これを氷の中へ移
し、エーテルで抽出した後、飽和炭酸水素ナトリウム水
溶液、飽和食塩水で洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥
後、減圧濃縮し、褐色液体を得た。収量６．７６ｇ（７
１，８％）。

（６）５−ヘキシン酸水酸化ナトリウム（３，６１ｇ　、　　９０．３ｍｍｏ
ｌ）の水−メタノール（１：　１，２４ｍｊり溶液に、
５−ヘキシンニトリル（５，００ｇ、　　５３．７＋＋
ｕａｏｌ）を加えて、窒素気流中延べ１５時間加熱還流
した。

放冷後、エタノールで未反応のニトリルを抽出後、水冷
下水層を５Ｎ硫酸でｐＨ４に調整し、酢酸エチルで抽出
後、飽和食塩水で洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥後
、減圧濃縮し、減圧蒸留した。収量５．４７　ｇ　（９
１，０％）。沸点７５−７６℃／１．５　ｍｍＨｇ。

（７）　ノナデカ−５，８，１１，１４−テトライン酸
マグネシウムリボン（３，１０■、　　１２７ｍｍｏｌ
）のＴＨＦ　（４５ｍｌ溶液に水冷攪拌臭化エチル（１
０，９ｍ　１．　１４７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ　（１７，
５ｍＪ）溶液を２０分間で滴下した。室温で３０分攪拌
した後、（６）で合成した化合物（７，１３ｇ　、　６
３．７＋ｍｏｌ）のＴＨＦ　（６，５ｍｊり溶液を水冷
攪拌下１５分間で滴下した。室温で１５分間攪拌後加温
して、析出した固体を溶解後、さらに室温で１時間攪拌
した。これに、シアン化銅（Ｉ）　　（２８６■、　３
．１８ｍｍｏｌ）を加えて、５分間５０℃に加温攪拌後
、（５）で合成した化合物（８，００ｇ　、　　３１．
８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ　（１０，９ｍｊｌり溶液を加え
、５時間加温還流後、４日間室温で攪拌した。これを冷
２Ｎ塩酸に加えた後、酢酸エチルで抽出後、飽和食塩水
で洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮して
得られた油状物に石油エーテル（３００ｍＦ）を加えて
、１０分間超音波攪拌した。この処理により得られた不
溶の淡黄色固体を濾取しく３．３１ｇ、３７．１％）、
母液を減圧濃縮し、中圧シリカゲルカラムクロマトグラ
フィー（シリカゲル２００ｇ、ベンゼン−酢酸エチル５
：１で展開）で精製し、得られた油状物に石油エーテル
（１００ｍ１）を加えて不溶の淡黄色固体を濾取した（
１．５４ｇ。

１７．３％）。収量針４．８５ｇ（５４，４％）。

２７０　ＭＨｚ　’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣＩ！ｓ）　　６
３．１５（６Ｈ，ｍ）、　２．４８（２Ｈ，Ｌ、Ｊ＝６
．８Ｈｚ＞、　２．２６（２Ｈ，ｔｔ、Ｊ＝６．８Ｈｚ
、２．２Ｈｚ）。

２．１７（２Ｈ，ｔｔ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、２．２Ｈｚ）
、　１．８２（２Ｈ，ｑｕｉｎｔｅｔ。

Ｊ＝６．８Ｈｚ）、　１．５〜１．３（５Ｈ，ａ＋）、
　０．８９（３Ｈ，ｔ、Ｊ＝６．８Ｈｚ）。

実施例１と同様にして得られたノナデカ−５，８゜１１
．１４−テトライン酸と実施例１．Ａで合成したリン酸
ジエステルとを縮合し、標記化合物　５．７■を得た。

実施例４Ｏ−（１−ノナデカ−５，８，１１，１４−テトラエン
＋ｒ％ノイル−５ｎ−グリセロ−３−ホス≠晴）−Ｎ−（９−
フルオレニルメチルオキシカルボニル）−Ｌ−セリン　
９−フルオレニルメチルエステルの合成以下のようにしてノナデカ−５，８，１１，１４−テト
ラエン酸を合成した。

キノリン（５６，４μＩｌ）に、５％パラジウム／硫酸
バリウム（Ａｌｄ、２０５７２−９）　（６１，７■）
を加えた後、９９％エタノール（９ｍＪ）で薄めて、室
温で水素気流下で５０分間、もはや水素を吸収しなくな
るまで攪拌した。これに実施例３で得たノナデカ−５，
８，１１，１４−テトライン酸（１００■０．３５４　
ｍｍｏｌ）の９９％エタノール（１１）溶液を加えた後
、室温で水素気流下攪拌し、計算量の水素を吸収した後
さらに３０分間攪拌した。触媒を濾去した後、減圧濃縮
し、これに酢酸エチルを加えＩＮ塩酸、飽和食塩水で洗
浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮後、調製
用シリカゲル薄層クロマトグラフィー（２枚、ベンゼン
−酢酸エチル３：１で展開）でＲｆｏ、５の画分を酢酸
エチルで抽出後、減圧濃縮し無色液体を得た。確、色誌
；乙４−一、。収！９５．５■（９２，７％）　、６７
．５ＭＨｚ、　　＋３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣ１，）　　δ
　１８０．０２．１３０．４２゜１２９．０８．　１２
８．７４．　１２８．５９．　１２８．２５．　１２８
．１２゜１２７．８７．　１２７．５Ｂ、　　３３．４
３．　３１．８４．２９．２Ｂ、　　２７．１５゜２６
．４８．　２５．６５．　２４．５２．　２２．３５．
　１４．００　。

これを実施例１と同様にして実施例１．Ａで合成したリ
ン酸ジエステルと縮合させ、標記化合物７．０■を得た
。

実施例５以下のようにして、本発明のりゾホスファチジルセリン
のＮａ”　、　Ｋ”−ＡＴＰａｓｅの阻害活性を評価し
た。

まず（１１から（５）の試薬を調製する。

（１１酵素基質：　Ｎａ（１！　（１４０ｍＭ）、　Ｍ
Ｃｌ０．５２ｇ（１４ｍＭ）。

Ｎａｚ　・ＡＴＰ　・３）１ｚＯ（３ｍＭ）、　ＭｇＣ
ｊｉ！　０．４８ｇ（５−）を５００ｍｊ！の５０ｍＭ
　トリス・塩緩衝液７　ｍ　ｌに溶かす。（０，４８ｕ
ｎ　ｉ　ｔ／７＋ｎｊ２に相当する）（３）阻害剤溶液：　０．０４　ｘ　１０−　’Ｍ〜４
　Ｘｌ０−５Ｍの濃度の溶液を同緩衝液で調製する。

（４）モリブデン酸・硫酸混液：　０．６７Ｎ硫酸に０
．３３３χモリブデン酸アンモニウムを溶解する。

（５）還元試薬：１−アミノ−２−ナフトール−４−ス
ルホン酸０．２ｇ、亜硫酸ナトリウム１．２ｇ、亜硫酸
水素ナトリウム１．２ｇの割合で混合した物を２■１０
．１ｍｊ！の割合で水に溶かす。

（阻害剤とは、実施病と４の化合物を示す。）これらの
試薬を用いて、以下に示す操作にて、ＡＴＰａｓｅ活性
の残存率を求めた。

進−作基質Ｑ、　ｌ　ｍ　ｌ　、阻害剤Ｑ、　ｌ　ｍ　ｌ、ト
リス塩酸緩衝液０．’　２　ｍ　ｊ２を試験管にとり、
酵素Ｑ、ｌ　ｍ　Ｉ！を加え、３７℃、６０ｍ１ｎ反応
させる。（Ｂｘ）また、別に阻害剤を含まないもの（Ｂ
ｏ）を同時に反応させ、酵素活性１００％とする。ブラ
ンク（Ｂｋ）は酵素を含まないものを同様に反応させる
。

前述の酵素反応液０．５　ｍ　ｊ！にあらかじめ氷冷し
ておいたモリブデン酸・硫酸混液を１．５　ｍ　ｌ加え
る。反応停止をかねる。不溶物が析出する場合は、３０
　ｍｉｎ、　３０００　ｒ、ｐ、ｍ−で遠心分離する。

上清Ｌｍｌを別の試験管にとり、これに還元試薬０．０
５　ｍｌを加えて、１５〜３０ｒａｉｎ放置後、６６０
ｎｍで形成されたモリブデン青を比色する。次式より残
存活性を求める。

残存活性（％）　−（Ｂｘ−Ｂｋ）／　（Ｄｏ−８ｋ）
　Ｘ１００このような操作によって被検物質の種々の濃
度におけるＡＴＰａｓｅの残存活性を求め、下表に示す
ＩＣ６゜を決定した。

１、　　　　　　　　　　　　　　Ｃｏ　　　Ｑ、０Ｘ
１０−’Ｍ以上の結果より、本発明のりゾホスファチジ
ルセリンは優れたＮａ”、　Ｋ”−ＡＴＰａｓｅ阻害活
性を有することが明らかである。

〔発明の効果〕

本発明のりゾホスファチジルセリンは優れたＮａ”。

Ｋ　”　−ＡＴＰａｓｅ阻害活性を有し強心剤、血圧調
節剤として有用である。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）一般式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ）で示されるリゾホスファチジルセリンまたはその塩。式中ＲＣＯは炭素数１０〜２５のアシル基を表わす。
（２）ＲＣＯがノナデカノイル基、ノナデカ−５，８，
１１，１４−テトラインノイル基、ノナデカ−５，８，
１１，１４−テトラエンノイル基またはアラキドニル基
である請求項１記載のリゾホスファチジルセリン。