JPH03219898A

JPH03219898A - 微生物等の自動移殖方法

Info

Publication number: JPH03219898A
Application number: JP1330490A
Authority: JP
Inventors: Takahito Tabata; 田畑　高仁; Isao Kadokura; 門倉　功
Original assignee: Hitachi Electronics Engineering Co Ltd
Current assignee: Hitachi High Tech Corp
Priority date: 1990-01-23
Filing date: 1990-01-23
Publication date: 1991-09-27

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】［発明の技術分野］本発明は微生物等の自動移植方法に関する。更に詳細に
は、本発明は微生物または微生物培養物（例えば、コロ
ニー）などの移殖に、培地として多数個のアが一ピース
（寒天筒培地）を使用する際に、移植順序を特定するこ
とのできる自動移植方法に関する。

［従来技術］従来、新しい菌種は、一般に、次のような９つの工程を
経て処理され、培養されている。

それは、（＋）土壌の採取、（２）水による希釈。

（３）培養シャーレ内の寒天培地への植え付け、（４）
保温器内で一定時間の培養、（５）寒天培地上で繁殖し
た各種の菌のコロニーを目視判定、（６）所望の色をし
たコロニーのみを白金耳などで採取。

（７）試験シャーレまたは試験管の寒天培地への移殖、
（８）培養してみて有望な菌であれば種々のテスト繰り
返して検討、（９）薬、醸造、その他のバイオテクノロ
ジーの分野への適用というステップを経て行われる。

以」二の工程で有望そうな特定の菌のコロニーの目視判
定と採取、そして移殖は、人手によって行われ、面倒で
効率の良くない作業である。そこで、このような欠点を
解消するために、Ｘ−Ｙステージを利用してシャーレの
培地を順次観察できるような操作装置とか、直接肉眼あ
るいは顕微鏡を介して培養シャーレの培地を観察するこ
とに代わって、カラーＴＶモニターによって画像処理を
し、このカラーＴＶを目視することによって観察し、そ
の作業の効率化と疲労を軽減しようとする自動装置が提
案され、また、開発されている。

この種の自動装置として開発されたコロニー自動移植装
置は、各種のコロニーが混在した状態で繁殖しているソ
ースシャーレの培地から、所定の色のコロニーを選別し
、選別に応じたコロニーを自動的に、かつ、連続的に順
次採取してオブジェクト（培養）ンヤーレＬの培地に順
次移植するものである。

［発明が解決しようとする課題］微生物などの培養には、ンヤーレの下皿の内側に寒天を
流し込むことにより形成された平板状寒天培地が広く使
用されている。しかし、この培地に複数種類の微生物等
を移殖すると、培地面上に境界が存在しないので増殖し
たコロニー同士が接触し、試験結果を誤らせることがあ
った。

このため、最近は所定の高さの円柱状の寒天培地（アガ
ーピース）を所定の間隔でシャーレ下皿の内側底面に複
数個配列したものが使用されている。この形態では、培
地同士が互いに独立して離れているため、培養してもコ
ロニー同士が接触を起こす危険性は極めて少ない。

しかし、シャーレは略真円形なので、アガーピースをｎ
Ｘｎ個配列した場合、自動移殖装置にシャーレを搬送す
る際にシャーレが回転すると、移殖順序を特定すること
が極めて困難となる。

従って、本発明の目的は、アガーピースを用いても移殖
順序を特定することのできる自動移植方法を提供するこ
とである。

［課題を解決するための手段］前記目的を達成するために本発明では、シャーレ下皿の
内側底面に所定の高さの円柱形状のアガーピースを所定
の間隔で複数個配列し、該各アガーピースの上面に微生
物または微生物培養物を移殖する方法において、アガー
ピースの列外で、配列された複数個のアガーピースによ
り形成されるパターン像の回転対称でない位置に、少な
くとも１個のインデックス用アガーピースを配置したこ
とを特徴とする微生物等の移植方法を提供する。

［作用コ前記のように、本発明の方法によれば、インデックス用
のアガーピースが移植用アガーピースにより形成される
パターン像の回転非対称位置に配置されているので、こ
のインデックス用アガーピースを目印にすれば、シャー
レがどのように回転しようとも、常に移植開始点を容易
に特定することかできる。

［実施例］以ト、図面を参照しながら本発明の方法について史に詳
細に説明する。

ンヤーレは一般的に、所定の深さの下皿と、このＦ皿の
開口部に施蓋される上皿とからなる。シャーレのＦ面に
は培地として円柱形状のアガーピースを複数個、所定の
間隔で配列する。平板培地と穴なり、アガーピース培地
はコロニーナトの培養物間における相ｒｉ　？％染か生
じないので、微生物の大量培養試験に広く使用されてい
る。しかし、略真円形のシャーレにアガーピースを配列
すると、移植開始点や移植終了点などの基準となるべき
点を特定することは極めて困難であり、移植作業の取扱
中にシャーレが少しでも位置ずれを起こすと移植基準点
が全く不明となる。シャーレの全面に培地が流し込まれ
ているような場合には、培地面に傷等のマーカーを施す
ことにより移殖の基準点を明示することもできるが、ア
ガーピースのような円柱形状の培地では、培地自体にマ
ーキング処理を施すことは不可能である。

そこで、第１図に示されるように、シャーレ下皿ｌの内
側底面３に移植用アガーピース５を５×５個配列したと
きに、図示されているように、移植用アガーピースの列
外で、移植用アガーピースの全体の中心から偏心した位
置に、上下に各１個のインデックス用アガーピース７　
ａ　＋　　７　ｂを配置する。

ンヤーレ上部にカメラを配置し、シャーレ内アガーピー
ス、インデックスピースを読取、画像処理し、インデッ
クスピースを認識する。認識されたインデックスピース
の位置と、アガーピースの位置関係から、アガーピース
移植順序を自動決定する。

インデックスピース認識処理は、第２図に示されるよう
に、全ピースが１ケの画像になるまで拡大処理を続け１
、その後、第３図に示されるように、画像が３ケに分割
されるまで縮小処理を続行し、インデックスピースを認
識する。

インデックスピースが認識されると、アガーピース群の
中心に対してインデックスピースがどちら側にあるか判
別し、第４図に示されるように、アガーピースの移植順
序が自動的に決定される。

アガーピースの配設個数は図示されたようなｎ×ｎ個に
限定されない。例えばＮｎＸ（ｎ−１）個の配列も当然
可能である。

また、インデックスピースの配設個数も図示されている
ような２個の事例に限定されない。移植順序を決定する
ことができれば、インデックスピースの配設個数は１個
でも差し支えない。重要なことはインデックスピースの
配設位置がアガーピース群のパターン像の回転非対称位
置に存在することである。仮に２個のインデックスピー
スを使用したとしても、これらがアが一ピース群のパタ
ーン像の回転対称位置に存在すれば移植順序を決定でき
ない。例えば、第５図、第６図および第７図に示される
ような位置にインデックスピースを配置すると、アガー
ピース群のパターン像の回転対称位置になるので移植順
序を決定することはできない。

［発明の効果コ以上説明したように、本発明の方法によれば、アガーピ
ースの移植順序を特定できるので、別の培養シャーレの
とのコロニーが、どこの位置のアガーピース上に移殖さ
れたか、コロニーの自動管理および自動移植が可能とな
る。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の方法を実施するためのアガーピースと
インデックスピースとの配置の一例を示す平面図であり
、第２図はその拡大画像の図であり、第３図は縮小画像
の図であり、第４図は本発明の方法により特定された移
植順序を示す模式的平面図であり、第５図、第６図およ
び第７図は本発明の方法を実施できないアガーピースと
インデックスピースとの配置例を示す平面図である。１・・・ンヤーレ。３・・・シャーレ内側底面。５・・・アガーピース。７ａ、７ｂ・・・インデックスピース第１図

Claims

【特許請求の範囲】

（１）シャーレ下皿の内側底面に所定の高さの円柱形状
のアガーピースを所定の間隔で複数個配列し、該各アガ
ーピースの上面に微生物または微生物培養物を移殖する
方法において、アガーピースの列外で、配列された複数
個のアガーピースにより形成されるパターン像の回転対
称でない位置に、少なくとも１個のインデックス用アガ
ーピースを配置したことを特徴とする微生物等の自動移
植方法。
（２）インデックスピースは２個配置されることを特徴
とする請求項１記載の微生物等の自動移植方法。