JPH0322933A - サフラン種苗の大量生産方法 - Google Patents
サフラン種苗の大量生産方法Info
- Publication number
- JPH0322933A JPH0322933A JP1154616A JP15461689A JPH0322933A JP H0322933 A JPH0322933 A JP H0322933A JP 1154616 A JP1154616 A JP 1154616A JP 15461689 A JP15461689 A JP 15461689A JP H0322933 A JPH0322933 A JP H0322933A
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- JP
- Japan
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- callus
- saffron
- plant
- tissue
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- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は組織培養によるサフラン種苗の生産方法に係り
，特に，増殖の効率化による大量生産方法に関する． 〔従来の技術〕 サフラン（Ｃｒｏｃｕｓ． Ｓａｔｉｖｕｓ Ｌ Ｉ
ＮＮ． ）は、アヤメ科に属する多年草で、その花柱及
び柱頭の乾燥物は従来から鎮静，通経、止血用の漢方薬
として用いられており、また食品、化粧品の着色科、さ
らに香辛料としての需要も大きい． ところで，サフランは開花しても結実せず、種子繁殖が
できないため球茎の分球により繁殖させるが、この自然
増殖率は親株１球から年に一度平均３球程度の球茎が得
られるのみで，非常に低いものである． また、栽培中にサフラン腐敗病菌（ Ｂ ａｃｉｌｌｕ
ｓｃｒｏｃｉ Ｍ Ｉ Ｚ Ｕ Ｓ ＡＷＡ）に感染し
やすく、これによって収球が著しく困難になる等の問題
があった。
，特に，増殖の効率化による大量生産方法に関する． 〔従来の技術〕 サフラン（Ｃｒｏｃｕｓ． Ｓａｔｉｖｕｓ Ｌ Ｉ
ＮＮ． ）は、アヤメ科に属する多年草で、その花柱及
び柱頭の乾燥物は従来から鎮静，通経、止血用の漢方薬
として用いられており、また食品、化粧品の着色科、さ
らに香辛料としての需要も大きい． ところで，サフランは開花しても結実せず、種子繁殖が
できないため球茎の分球により繁殖させるが、この自然
増殖率は親株１球から年に一度平均３球程度の球茎が得
られるのみで，非常に低いものである． また、栽培中にサフラン腐敗病菌（ Ｂ ａｃｉｌｌｕ
ｓｃｒｏｃｉ Ｍ Ｉ Ｚ Ｕ Ｓ ＡＷＡ）に感染し
やすく、これによって収球が著しく困難になる等の問題
があった。
これらの問題を解決すべく組織培養によるサフラン種苗
の繁殖に関する研究が始められているが、今１］までに
試みられている組織培養の手法では多大な労力と時間を
要し，また増殖率もさほど高いものとは言えない。
の繁殖に関する研究が始められているが、今１］までに
試みられている組織培養の手法では多大な労力と時間を
要し，また増殖率もさほど高いものとは言えない。
伊佐（日本育種学会紙（１９８８）第３８号，第３７１
〜３７４頁）の方法は植物体を得るために球茎切片を２
．４−Ｄを含む培地で培養してカルスを形成し、次いで
ナフタレン酢酸とベンジルアミノプリンを含む培地で該
カルスを培養して小球塊を形成させ、この培養を長期間
続けることによって該小球塊から植物体を形成させ、更
に肥培させるものである。しかしながら、この方法は植
物体を形成する小球塊を得るまでに一旦カルスを経由し
なければならず，また植物体の形成に長期の培養期間を
要するという操作工程が多く、労力と時間とを要する方
法である。
〜３７４頁）の方法は植物体を得るために球茎切片を２
．４−Ｄを含む培地で培養してカルスを形成し、次いで
ナフタレン酢酸とベンジルアミノプリンを含む培地で該
カルスを培養して小球塊を形成させ、この培養を長期間
続けることによって該小球塊から植物体を形成させ、更
に肥培させるものである。しかしながら、この方法は植
物体を形成する小球塊を得るまでに一旦カルスを経由し
なければならず，また植物体の形成に長期の培養期間を
要するという操作工程が多く、労力と時間とを要する方
法である。
上記従来技術では、栄養繁殖法には増殖率の低さと植物
病の感染という問題，組織培養法には培養と増殖の効率
化が行われていないという問題点があった． 本発明の目的は、組織培養により植物病に感染させるこ
となく安定な品質でサフラン種苗を生産する方法におい
て、更に増殖を効率化して，大量にサフラン種苗を生産
することにある．本発明の他の目的は，組織培養の培養
条件を最適化し生産効率を向上させることにある。
病の感染という問題，組織培養法には培養と増殖の効率
化が行われていないという問題点があった． 本発明の目的は、組織培養により植物病に感染させるこ
となく安定な品質でサフラン種苗を生産する方法におい
て、更に増殖を効率化して，大量にサフラン種苗を生産
することにある．本発明の他の目的は，組織培養の培養
条件を最適化し生産効率を向上させることにある。
上記目的は、組織培養によるサフラン種苗の生産方法に
さらに繰り返し大量に増殖させることが可能な増殖工程
を加えることによって達戒することができる． また上記他の目的は組織培養の培養条件を最適化し、種
苗の生産効率を上げるために、生産の各工程において植
物生長調節物質としてナフタＬ／ン酢酸とペンジルアミ
ノプｊＪンを用いること、お上び，組織片として生育中
の細胞分裂の活発な地上部植物体組織を用いることによ
って達成することができる． 上記の工程は、さらに詳しくは，以下の（イ）〜（二）
に示すような工程からなるものである．（イ）サフラン
の生育中の地上部植物体の組織片をナフタレン酢酸とベ
ンジルアミノプリンとを組み合わせて含む固形培地上で
静置培養することによって球塊状のカルスを形成させる
工程（ロ）上記球塊状のカルスをナフタレン酢酸とベン
ジルアミノプリンを高濃度で含む培地に移植し、培養す
ることによって繰り返し大量に増殖させる工程 （ハ）上記大量増殖させた球塊状のカルスを（口）の培
地におけるベンジルアミノプリンをより低い濃度に変更
した固形培地上に移植し，静置培養することによって植
物体および植物器官を分化形成さサる工程 （二）上記植物体を球塊状のカルスから分離し、微量の
ナフタレン酢酸もしくはペンジルアミ，ノブリン，また
は両者を含む．または全く含まない固形培地上に移植し
静置培養することによって、植物体および植物器官を生
長，肥大させ、種苗として使用できる植物体を得る工程 〔作用〕 上記工程の作用について以下に説明する。
さらに繰り返し大量に増殖させることが可能な増殖工程
を加えることによって達戒することができる． また上記他の目的は組織培養の培養条件を最適化し、種
苗の生産効率を上げるために、生産の各工程において植
物生長調節物質としてナフタＬ／ン酢酸とペンジルアミ
ノプｊＪンを用いること、お上び，組織片として生育中
の細胞分裂の活発な地上部植物体組織を用いることによ
って達成することができる． 上記の工程は、さらに詳しくは，以下の（イ）〜（二）
に示すような工程からなるものである．（イ）サフラン
の生育中の地上部植物体の組織片をナフタレン酢酸とベ
ンジルアミノプリンとを組み合わせて含む固形培地上で
静置培養することによって球塊状のカルスを形成させる
工程（ロ）上記球塊状のカルスをナフタレン酢酸とベン
ジルアミノプリンを高濃度で含む培地に移植し、培養す
ることによって繰り返し大量に増殖させる工程 （ハ）上記大量増殖させた球塊状のカルスを（口）の培
地におけるベンジルアミノプリンをより低い濃度に変更
した固形培地上に移植し，静置培養することによって植
物体および植物器官を分化形成さサる工程 （二）上記植物体を球塊状のカルスから分離し、微量の
ナフタレン酢酸もしくはペンジルアミ，ノブリン，また
は両者を含む．または全く含まない固形培地上に移植し
静置培養することによって、植物体および植物器官を生
長，肥大させ、種苗として使用できる植物体を得る工程 〔作用〕 上記工程の作用について以下に説明する。
（イ）サフランの生育中の地上部植物体の組織片をナフ
タレン酢酸とベンジルアミノプリンを組み合わせて含む
固形培地上で静置培養することによって球塊状のカルス
を形成させる．組織片としては生育中の葉，生長点，子
葉鞘、子房等地上部の組織を小片に切断したもの（２ｘ
５〜５ Ｘ３０＋ｕ＋＋）を用いる。この組織片は、表
面を例えばエチルアルコール、次亜塩素酸ソーダ等で殺
菌処理した後に無菌水で十分に洗って使用する．固形培
地としては通常の植物の組織培養に用いられる培地であ
れば，いかなる培地も使用することができる。例えばム
ラシゲ＆スクーグ氏培地、Ｂ５培地、ホワイト氏培地な
ど、あるいはこれらを基本培地として改変を加えたもの
を用いることができる．固形化には寒天を用いる。また
、球塊状のカルス形戊のために植物の生長ｍＢ物質であ
るナフタレン酢酸とベンジルアミノプリンを組み合わせ
て添加する。これらの添加量は使用基本培地、使用組織
，組織の生育段階等によって異なるが、一般に１０″″
７〜１０″”Ｍ程度でよい．シヨ糖もしくはブドウ糖は
２〜３％の割合で加える．また培地のｐＨは４．５〜６
．５の範囲が望ましい．光は培養中には必ずしも必要で
はないが、照明下で培養すると更に良い結果が得られる
場合がある．（照明下で行う場合は５００〜４０００
Ｌ ｕｘの光量で行うと良い。）以下，（口）〜（二）
の培養においても上記培地、生長調節物質は適宜用いら
れ、照明も適宜行われる．固形培地２．５〜２０ｖｓ
Ｑあたり上記組織片の小片一個の割合で置床後、１５〜
２５℃で３０〜６０日間静置培養すると球塊状のカルス
が形成される．球塊状のカルスは組織小片上に直接形成
される場合と組織小片の一部が肥大し、その肥大組織上
に形成される場合とがある． Ｃ口）上記球塊状のカルスを組織小片から分離し、ナフ
タレン酢酸とベンジルアミノプリンを高濃度で含む培地
に移植し、培養することによって繰り返し大量に増殖さ
せる．この場合、ベンジルアミノプリンは５ｘｌＯ−’
〜５Ｘ１０−’Ｍの濃度で、ナフタレン酢酸は５Ｘ１０
−’〜５Ｘ１０−’Ｍの濃度で添加する．培地に移植し
， １５〜２５℃で２０〜６０日間培養すると２〜５倍
に大量に増殖する．また、大量に増殖させた球塊状のカ
ルスを分割し、再度（口）の培地で培養することにより
繰り返し球塊状のカルスを増殖させることができる． （ハ）上記大量増殖させた球塊状のカルスを（口）の培
地におけるベンジルアミノプリンをより低い濃度番コ変
更した固形培地上に移植し，静置培養することによって
植物体および茎葉などの植物器官を分化形成させる．こ
の場合，ナフタレン酢酸はそのままでベンジルアミノプ
リンを ５Ｘ１０’〜２Ｘ１０’Ｍの濃度で添加する．
固形培地に移植し、１５〜２５℃で２０〜６０日間静置
培養すると１個の球塊状のカルスから１〜数個の植物体
及び茎葉等の植物器官が分化してくる。
タレン酢酸とベンジルアミノプリンを組み合わせて含む
固形培地上で静置培養することによって球塊状のカルス
を形成させる．組織片としては生育中の葉，生長点，子
葉鞘、子房等地上部の組織を小片に切断したもの（２ｘ
５〜５ Ｘ３０＋ｕ＋＋）を用いる。この組織片は、表
面を例えばエチルアルコール、次亜塩素酸ソーダ等で殺
菌処理した後に無菌水で十分に洗って使用する．固形培
地としては通常の植物の組織培養に用いられる培地であ
れば，いかなる培地も使用することができる。例えばム
ラシゲ＆スクーグ氏培地、Ｂ５培地、ホワイト氏培地な
ど、あるいはこれらを基本培地として改変を加えたもの
を用いることができる．固形化には寒天を用いる。また
、球塊状のカルス形戊のために植物の生長ｍＢ物質であ
るナフタレン酢酸とベンジルアミノプリンを組み合わせ
て添加する。これらの添加量は使用基本培地、使用組織
，組織の生育段階等によって異なるが、一般に１０″″
７〜１０″”Ｍ程度でよい．シヨ糖もしくはブドウ糖は
２〜３％の割合で加える．また培地のｐＨは４．５〜６
．５の範囲が望ましい．光は培養中には必ずしも必要で
はないが、照明下で培養すると更に良い結果が得られる
場合がある．（照明下で行う場合は５００〜４０００
Ｌ ｕｘの光量で行うと良い。）以下，（口）〜（二）
の培養においても上記培地、生長調節物質は適宜用いら
れ、照明も適宜行われる．固形培地２．５〜２０ｖｓ
Ｑあたり上記組織片の小片一個の割合で置床後、１５〜
２５℃で３０〜６０日間静置培養すると球塊状のカルス
が形成される．球塊状のカルスは組織小片上に直接形成
される場合と組織小片の一部が肥大し、その肥大組織上
に形成される場合とがある． Ｃ口）上記球塊状のカルスを組織小片から分離し、ナフ
タレン酢酸とベンジルアミノプリンを高濃度で含む培地
に移植し、培養することによって繰り返し大量に増殖さ
せる．この場合、ベンジルアミノプリンは５ｘｌＯ−’
〜５Ｘ１０−’Ｍの濃度で、ナフタレン酢酸は５Ｘ１０
−’〜５Ｘ１０−’Ｍの濃度で添加する．培地に移植し
， １５〜２５℃で２０〜６０日間培養すると２〜５倍
に大量に増殖する．また、大量に増殖させた球塊状のカ
ルスを分割し、再度（口）の培地で培養することにより
繰り返し球塊状のカルスを増殖させることができる． （ハ）上記大量増殖させた球塊状のカルスを（口）の培
地におけるベンジルアミノプリンをより低い濃度番コ変
更した固形培地上に移植し，静置培養することによって
植物体および茎葉などの植物器官を分化形成させる．こ
の場合，ナフタレン酢酸はそのままでベンジルアミノプ
リンを ５Ｘ１０’〜２Ｘ１０’Ｍの濃度で添加する．
固形培地に移植し、１５〜２５℃で２０〜６０日間静置
培養すると１個の球塊状のカルスから１〜数個の植物体
及び茎葉等の植物器官が分化してくる。
（二）上記植物体及び茎葉などの植物器官を球塊状のカ
ルスから分離し、微量のナフタレン酢酸もしくはベンジ
ルアミノプリン、または両者を含む、または全く含まな
い固形培・地上に移植し静置培養することによって、植
物体および植物器官を生長肥大させ、種苗として使用で
きる植物体を得る．植物生長調節物質を添加する場合は
、１０”−１０”Ｍの濃度で用いる．分離した植物体を
固形培地に移植し１５〜２５℃で１００日間程度静置培
養すると、４〜５倍に生育し、種苗として使用できる植
物体を得ることが出来る．また、茎葉などの植物器官か
らは根が新生して生長肥大し、種苗として使用できる植
物体を得ることができる． 〔実施例〕 サフランの球茎から芽を含むように組織片（ｌ Ｘ １
． ｘ ｌａａ）を切り出し、７０％エチルアルコー・
ルついで１５％次亜塩素酸ソーダ（有効塩素量１．５％
）で殺菌し，無菌蒸留水で十分に洗浄した後に生長点と
子葉硝とを無菌的に切り出し２これを第１表１の組成の
寒天培地１０ｍＱを含む直径２５ｍｍ深さ１７０ｍ＋ｍ
試験管に試験管１本あたりエ個置床させ、２５℃、照明
下（３００６〜４０００Ｌｕｘ） テ６ｏ日間静置培養
した．この培養によって球塊状のカルスが形成された。
ルスから分離し、微量のナフタレン酢酸もしくはベンジ
ルアミノプリン、または両者を含む、または全く含まな
い固形培・地上に移植し静置培養することによって、植
物体および植物器官を生長肥大させ、種苗として使用で
きる植物体を得る．植物生長調節物質を添加する場合は
、１０”−１０”Ｍの濃度で用いる．分離した植物体を
固形培地に移植し１５〜２５℃で１００日間程度静置培
養すると、４〜５倍に生育し、種苗として使用できる植
物体を得ることが出来る．また、茎葉などの植物器官か
らは根が新生して生長肥大し、種苗として使用できる植
物体を得ることができる． 〔実施例〕 サフランの球茎から芽を含むように組織片（ｌ Ｘ １
． ｘ ｌａａ）を切り出し、７０％エチルアルコー・
ルついで１５％次亜塩素酸ソーダ（有効塩素量１．５％
）で殺菌し，無菌蒸留水で十分に洗浄した後に生長点と
子葉硝とを無菌的に切り出し２これを第１表１の組成の
寒天培地１０ｍＱを含む直径２５ｍｍ深さ１７０ｍ＋ｍ
試験管に試験管１本あたりエ個置床させ、２５℃、照明
下（３００６〜４０００Ｌｕｘ） テ６ｏ日間静置培養
した．この培養によって球塊状のカルスが形成された。
次いで殺菌したメス，ピンセットを用いて上記球塊状の
カルスを勺離し、第１表２の組威の寒天培地２０ｓ 怠
を含む直径４ｏ■鵬、深さ１５０■の試験管に移植し、
２５℃，照明下（３０００〜４０００ Ｌυス）で３０
日間静置培養した。この培養によって約２〜４倍に増殖
した．この増殖した球塊状のカルスを分割し，再度第１
表２の組成の寒天培地２０＊ Ｑを含む直径４０ｍｍ、
深さ１５０■の試験管に移植し、２５℃、照明下（３０
００ 〜４０００Ｌｕｘ）で３０日間静置培養した．こ
の培養によって約２〜４倍に再度増殖した．次いでこの
増殖した球塊状のカルスを４等分に割断し，それぞれを
第１表３の組成の寒天培地２０１党を含む直径４０關、
深さ１５０ｍｍの試験管に移植し，２５℃、照明下（３
０００ 〜４０００Ｌｕｘ） テ３０日間静置培養した
．この培養によって１球塊状のカルスから約ｌＯ個の植
物体及び茎葉などの植物器官が得られた． 次いで上記植物体及び茎葉などの植物器官を分離し、第
１表４の組成の寒天培地１０ｍＱを含む直径２５ｍ■、
深さ１７０鵬曽の試験管に１個ずつ移植して２０℃、照
明下（３０００ 〜４０００ Ｌ ｕｘ）で１００日程
度静置培養した．この培養によって移植した植物体は著
しく生長した．また茎葉などの植物器官からは根が新生
し、著しく生長した． このようにして、種苗として使用できるサフランが得ら
れた．本実施例ではサフランの組織片１個から２２０日
間で約４０個体のサフラン種苗を、つまり、中程度の大
きさの工個の球茎から約４８０個体のサフラン種苗を得
ることができた．第１表 〔発明の効果〕 本発明は、以上説明したように構成されているので以下
に記載されるような効果を奏する．従来の組織培養方法
に繰り返し大量増殖させる工程を加えることにより、栄
養繁殖法に比べてはるかに増殖が良いことは勿論のこと
組織培養法においても増殖が効率化され、サフラン種苗
を安定な品質で大量に生産することができた。
カルスを勺離し、第１表２の組威の寒天培地２０ｓ 怠
を含む直径４ｏ■鵬、深さ１５０■の試験管に移植し、
２５℃，照明下（３０００〜４０００ Ｌυス）で３０
日間静置培養した。この培養によって約２〜４倍に増殖
した．この増殖した球塊状のカルスを分割し，再度第１
表２の組成の寒天培地２０＊ Ｑを含む直径４０ｍｍ、
深さ１５０■の試験管に移植し、２５℃、照明下（３０
００ 〜４０００Ｌｕｘ）で３０日間静置培養した．こ
の培養によって約２〜４倍に再度増殖した．次いでこの
増殖した球塊状のカルスを４等分に割断し，それぞれを
第１表３の組成の寒天培地２０１党を含む直径４０關、
深さ１５０ｍｍの試験管に移植し，２５℃、照明下（３
０００ 〜４０００Ｌｕｘ） テ３０日間静置培養した
．この培養によって１球塊状のカルスから約ｌＯ個の植
物体及び茎葉などの植物器官が得られた． 次いで上記植物体及び茎葉などの植物器官を分離し、第
１表４の組成の寒天培地１０ｍＱを含む直径２５ｍ■、
深さ１７０鵬曽の試験管に１個ずつ移植して２０℃、照
明下（３０００ 〜４０００ Ｌ ｕｘ）で１００日程
度静置培養した．この培養によって移植した植物体は著
しく生長した．また茎葉などの植物器官からは根が新生
し、著しく生長した． このようにして、種苗として使用できるサフランが得ら
れた．本実施例ではサフランの組織片１個から２２０日
間で約４０個体のサフラン種苗を、つまり、中程度の大
きさの工個の球茎から約４８０個体のサフラン種苗を得
ることができた．第１表 〔発明の効果〕 本発明は、以上説明したように構成されているので以下
に記載されるような効果を奏する．従来の組織培養方法
に繰り返し大量増殖させる工程を加えることにより、栄
養繁殖法に比べてはるかに増殖が良いことは勿論のこと
組織培養法においても増殖が効率化され、サフラン種苗
を安定な品質で大量に生産することができた。
また、生産の各工程において植物生長調節物質としてナ
フタレン酢酸とベンジルアミノプリンを組み合わせて用
い、さらに、組織片として生育中の地上部植物体組織を
用いることにより、組織培養の培養条件を最適化し，種
苗の生産効率を向上させることができた．
フタレン酢酸とベンジルアミノプリンを組み合わせて用
い、さらに、組織片として生育中の地上部植物体組織を
用いることにより、組織培養の培養条件を最適化し，種
苗の生産効率を向上させることができた．
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、サフランの組織片を培養し、球塊状のカルスを形成
させる工程と該球塊状のカルスから植物体及び植物器官
を形成させる工程、該植物体及び植物器官を生長、肥大
させる工程から構成されるサフラン種苗の生産方法に、
さらに植物生長調節物質の濃度を高くして培養すること
により上記球塊状のカルスを繰り返し大量に増殖させる
工程を加えたことを特徴とする組織培養によるサフラン
種苗の大量生産方法。 ２、上記のサフラン種苗の大量生産方法の各工程におい
て、生長調節物質としてナフタレン酢酸とベンジルアミ
ノプリンを組み合わせて用いることを特徴とする特許請
求の範囲第１項記載のサフラン種苗の大量生産方法。 ３、上記球塊状のカルスを形成させる工程において、組
織片として生育中の地上部植物体組織を使用することを
特徴とする特許請求の範囲第１記載のサフラン種苗の大
量生産方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1154616A JPH0322933A (ja) | 1989-06-19 | 1989-06-19 | サフラン種苗の大量生産方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1154616A JPH0322933A (ja) | 1989-06-19 | 1989-06-19 | サフラン種苗の大量生産方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0322933A true JPH0322933A (ja) | 1991-01-31 |
Family
ID=15588079
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1154616A Pending JPH0322933A (ja) | 1989-06-19 | 1989-06-19 | サフラン種苗の大量生産方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0322933A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH08334444A (ja) * | 1995-06-09 | 1996-12-17 | Matsuura Denki Kk | 薄板貼り付け装置 |
-
1989
- 1989-06-19 JP JP1154616A patent/JPH0322933A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH08334444A (ja) * | 1995-06-09 | 1996-12-17 | Matsuura Denki Kk | 薄板貼り付け装置 |
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