JPH03232889A - 抗生物質ａｂ３２１７ａ、ａｂ３２１７ｂ及びａｂ３２１７ｃとそれらの製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は広く生理活性として殺虫活性、殺ダニ活性、除
草活性、殺菌活性などを有する新規な抗生物質ＡＢ３２
１７Ａ、　ＡＢ３２１７Ｂ及びＡＢ３２１７Ｃ並びにそ
れらの製造法に関するものである。

（従来技術及び発明が解決しようとする課題）本発明に
よる抗生物質ＡＢ３２１７Ａ、　ＡＢ３２１７Ｂ及びＡ
Ｂ３２１７Ｃと類似した部分構造を持つ既知の抗生物質
としては、アニソマイシン等の数種類が知られているが
、本抗生物質ＡＢ３２１７Ａ、　ＡＢ３２１７Ｂ、ＡＢ
３１７Ｃはそれら既知の抗生物質と同一の部分構造を有
するが、それらとは明らかに異なった全体構造と生理活
性を有する新規な抗生物質であることを見いだした。本
発明の目的は新規な抗生物質ＡＢ３２１７Ａ、　ＡＢ３
２１７Ｂ及びＡＢ３２１７Ｃ並びにそれらの製造法を提
供することにある。本発明の他の目的は後の説明から明
らかである。

（課題を解決するための手段） 本発明者らは、農業用抗生物質の探索を続けていたとこ
ろ、ストレプトミセス属に属する特定の菌株の培養液中
に強い殺ダニ活性を有する数種の物質が生産されている
ことを見いだした。そこでそれらの物質三種を単離し、
夫々に抗生物質ＡＢ３２１７Ａ、抗生物質ＡＢ３２１７
Ｂ及び抗生物質ＡＢ３２１７Ｃとの名称をつけ、それら
の理化学的性質並びに化学構造を調べたところ、後記の
一般式（Ｉ）で表わし得ることを認めた。更に、これら
抗生物質ＡＢ３２１７Ａ、　ＡＢ３２１７Ｂ及びＡＢ３
２１７Ｃを既知の抗生物質と比較したところ、該当する
ものがないので新規物質であることが判明した。

更に、これら抗生物質ＡＢ３２１７Ａ、　ＡＢ３２１７
Ｂ及びＡＢ３２１７Ｃは、殺ダニ活性を有することに加
えて、殺虫活性、殺菌活性及び除草活性を有することも
認められた。これらの知見に基づいて、本発明は完成さ
れた。

すなわち、第１の本発明によると、−数式（Ｉ）（式中
、Ｒは水素原子、６−メチル−６−ハイドロキシへブタ
ニル基または４−メチルペンタニル基を示す）で表わさ
れる抗生物質ＡＢ３２１７Ａ、抗生物質３− ＡＢ３２１７Ｂ、及びＡＢ３２１７Ｃ並びにそれらの酸
付加塩が提供される。

次に、本発明による一般式（Ｉ）の抗生物質の各側を第
１表に示した。なお、抗生物質名は後記の実施例および
試験例でも参照される。

一 式（Ｉ）の抗生物質は、塩酸、硫酸、リン酸、硝酸、な
どの無機酸、あるいは酢酸、プロピオン酸、しゆう酸、
メタンスルホン酸などの有機酸と酸付加塩を形成できる
。

（Ｉ）本発明による抗生物質ＡＢ３２１７Ａは下記の理
化学的性質を有する。

■　融点：２４１℃ ■　元素分析： ＣＨＮ 実測値（％）　　５７，３９　　６，４４　　４．１３
理論値（％）　　５７，７８　　６，５６　　３．９６
■　分子量：　３５３．１４６９（質量分析法）■　分
子式：　Ｃｚ　７　Ｈ２ａ　Ｎ１０？■　比旋光度：〔
α）ｉ、’＝＝−５２，５°（ｃｌ、ｏ、Ｈ２Ｏ）■　
紫外部吸収スペクトル：水溶液中で測定した紫外部吸収
スペクトルは添付図面の第１図に示す通りである。

λｗａｘ　　２２６ｎｍ（ε１１４４０）２７２ｎｍ（
ε１１３０） ２７８ｎ＋ｎ（ε９５０） ■　赤外線吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤中で測定
した赤外部吸収スペクトルは添付図面の第２図に示す通
りである。

■　１Ｈ核磁気共鳴スペクトル：重ジメチルスルホキシ
ド溶液中で測定した１Ｈ核磁気共鳴スペクトル（４００
ＭＨｚ）は添付図面の第３図に示す通りである。

■　１３Ｃ核磁気共鳴スペクトル二重ジメチルスルホキ
シド溶液中で測定した１３Ｃ核磁気共鳴スペクトル（Ｉ
００ＭＨｚ）は添付図面の第４図に示す通りである。

［相］　溶解性：水、メタノール、エタノール、ジメチ
ルスルホキシドに可溶である。

酢酸エチル、クロロホルム、ｎ−ヘキサン、ジエチルエ
ーテルに難溶である。

■　呈色反応：バニリン硫酸、リンモリブデン酸、ヨウ
素反応で陽性である。

ニンヒドリン、塩化第２鉄反応で陰性である。

７− ＠　薄層クロマトグラフィー：メルク社製シリカゲル薄
層（Ａｒｔ、　５７１５）を使用し、展開溶媒がｎ−ブ
タノール−エタノール−クロロホルム−アンモニア（４
：５：２：５）の場合のＲｆ値は０．６３であり、同シ
リカゲル薄層を使用し、展開溶媒がｎ−プロパツール−
アンモニア−水（２０：　１　：　１）の場合のＲｆ値
は０．４７であり、同じく展開溶媒が酢酸エチル−メタ
ノール（Ｉ：　１）の場合のＲｆ値は０．２０である。

Ｏ高圧電気泳動：泳動用バッファーとして蟻酸−酢酸一
水（Ｉ：　３　：３６）を使用し、２０００ボルトで３
０分間泳動し、Ｌ−アラニンを１．００とした時のＲｍ
値が０．７９である。

０　外観：無色針状結晶である。

（２）本発明による抗生物質ＡＢ３２１７Ｂは下記の理
化学性質を有する。

■　融点：１１６℃（塩酸塩として） ■　分子量：　４９５　（ＦＡＢＭＳ、見／ｚ　４９６
、Ｍｌ（”）■　分子式”　Ｃ２−Ｈａ７Ｎ１０９ ■　比旋光度：〔α〕も５＝−６８，３°（ｃ　１．０
、Ｎ２０）−８− ■　紫外部吸収スペクトル：水溶液中で測定した塩酸塩
の紫外部吸収スペクトルは下記の主要ピークを示す。

λｍａｘ　　２２６ｎｍ（ε１２４００）２７２ｎｍ（
ε１０１０８ ０）２７８ｎε９２１） ■　赤外線吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤中で測定
した塩酸塩の赤外部吸収スペクトルは添付図面の第５図
に示す通りである。

■　１Ｈ核磁気共鳴スペクトル：重水溶液中で測定した
塩酸塩の１Ｈ核磁気共鳴スペクトル（４００ＭＨｚ）は
添付図面の第６図に示す通りである。

■　１３Ｃ核磁気共鳴スペクトル：重水溶液中で測定し
た塩酸塩の１３Ｃ核磁気共鳴スペクトル（Ｉ００ＭＨｚ
）は添付図面の第７図に示す通りである。

■　溶解性：塩酸塩は水、メタノール、ジメチルスルホ
キシドに可溶であるが酢酸エチル、クロロホルム、ｎ−
ヘキサン、ジエチルエーテルに難溶あるいは不溶である
。

［相］　呈色反応：バニリン硫酸、リンモリブデン酸、
ヨウ素反応で陽性である。

ニンヒドリン、塩化第２鉄反応で陰性である。

■　薄層クロマトグラフィー：メルク社製シリカゲル薄
層（Ａｒｔ、　５７１５）を使用し、展開溶媒がジクロ
ルメタン−メタノール（８：　２）の場合の塩酸塩のＲ
ｆ値は０．４６である。

＠　外観：塩酸塩は白色粉末である。

（３）本発明による抗生物質ＡＢ３２１７Ｃは下記の理
化学性質を有する。

■　融点＝１１７℃（塩酸塩として） ■　分子量：　４５１　（ＦＡＢＭＳ、　ｍ／ｚ　４５
２、ＭＨ”）■　分子式；　Ｃｚ　３Ｈａ　ａ　Ｎ１０
ｓ■　比旋光度：〔α〕も”＝−７６，８°（ｃ　１．
０、Ｎ２０）■　紫外部吸収スペクトル：水溶液中で測
定した塩酸塩の紫外部吸収スペクトルは下記の主要ピー
クを示す。

λｍａｘ　　２２６ｎｍ（ε１４０００）２７２ｎｍ（
ε１３８０） ２７８ｎｍ　（ε１２１０） ■　赤外線吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤中で測定
した塩酸塩の赤外部吸収スペクトルは添付図面の第８図
に示す通りである。

■　１Ｈ核磁気共鳴スペクトル二重水溶液中で測定した
塩酸塩の１Ｈ核磁気共鳴スペクトル（４００ＭＨｚ）は
添付図面の第９図に示す通りである。

■　１３Ｃ核磁気共鳴スペクトル二重水溶液中で測定し
た塩酸塩の１３０核磁気共鳴スペクトル（Ｉ００ＭＨｚ
）は添付図面の第１０図に示す通りである。

■　溶解性：塩酸塩は水、メタノール、ジメチルスルホ
キシドに可溶であるが酢酸エチル、クロロホルム、ｎ−
ヘキサン、ジエチルエーテルに難溶である。

［相］　呈色反応：バニリン硫酸、リンモリブデン酸、
ヨウ素反応で陽性である。

ニンヒドリン、塩化第２鉄反応で陰性である。

０　薄層クロマトグラフィー：メルク社製シリカゲル薄
層（Ａｒｔ、　５７１５）を使用し、展開溶媒がジクロ
ルメタン−メタノール（８：　２）の場合の塩酸塩のＲ
ｆ値は０．６０である。

＠　外観：塩酸塩は白色粉末である。

上述の本発明に係る新規な抗生物質ＡＢ３２１７Ａ、Ａ
Ｂ３２１７Ｂ及びＡＢ３２１７Ｃは、夫々にストレプト
ミセス属に属し、下記に示す菌学的特徴及び性質を有し
て且つ抗生物質ＡＢ３２１７Ａ生産能、ＡＢ３２１７Ｂ
生産能及びＡＢ３２１７Ｃ生産能をもつ菌株（以下、Ａ
８３２１７株と言う）（微工研菌寄第１１０９５号とし
て寄託）を培養することにより生産されて得られる。

従って、第２の本発明によると、ストレプトミセス属に
属する抗生物質ＡＢ３２１７Ａ生産菌又はＡＢ３２１７
Ｂ生産菌又はＡＢ３２１７Ｃ生産菌を培養し、その培養
物から抗生物質ＡＢ３２１７Ａ又はＡＢ３２］、７Ｂ又
はＡＢ３２１７Ｃを採取することを特徴とする、抗生物
質ＡＢ３２１７Ａ又はＡＢ３１７株又はＡＢ３２１７Ｃ
の製造法が提供される。

本発明の方法において、抗生物質ＡＢ３２１７Ａを製造
する時にはＡＢ３２１７Ａ生産菌を、また抗生物質１ｌ
− ＡＢ３２１７Ｂを製造する時にはＡＢ３２１７Ｂ生産菌
を、また抗生物質ＡＢ３２１７Ｃを製造する時にはＡＢ
３２１７Ｃ生産菌を培養し、そして培養物から夫々に目
的の抗生物質を採取する。しかし、上記のＡＢ３２１７
株を用いて培養する場合には、抗生物質ＡＢ３２１７Ａ
、Ｂ及びＣが培養物中に並行的に生産、蓄積される。

本発明の方法で用いられる抗生物質ＡＢ３２１７Ａ生産
菌又はＡＢ３２１７Ｂ生産菌又はＡＢ３２１７Ｃ生産菌
の一例には、上記のＡＢ３２１７株がある。このＡ８３
２１７株は昭和６２年１０月、北興化学工業株式会社開
発研究所において、長野県北安曇郡美麻村の土壌から分
離された放線菌でＡＢ３２１７の菌株番号が付与された
菌株である。

Ａ８３２１７株の菌学的性質は以下に示す通りである。

（Ｉ）形態学的性質 ＡＢ３２１７株は分枝した基中菌糸より螺旋状（ｏｐｅ
ｎｓｐｉｒａｌ）あるいは固く巻いた螺旋（ｔｉｇｈｔ
ｌｙ　ｃｏｉｌ）の気菌糸を共に形成し、輪生技は認め
られない。

成熟した胞子鎖は１０個以上の胞子の連鎖を認め、胞子
の大きさは０．５〜０．６　Ｘ　Ｏ，６〜０．８ミクロ
ン位で１２− あり、胞子の表面は平滑である。

（２）各種培地における生育状態 色調は財団法人日本色彩研究所のｒ色の標準」、次いで
〔〕内にコンテイナー・コーポレーション・オブ・アメ
リカの「カラー・ハーモニイ・マニュアルＪ　（Ｃｏｎ
ｔａｉｎｅｒ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａｍｅ
ｒｉｃａ。

Ｃｏ１ｏｒ　ｈａｒｍｏｎｙ　ｍａｎｕａｌ）を用いて
記載した。

（ａ）シュクロース・硝酸塩寒天培地（２７°Ｃ培養）
うす黄味だいだい（２ｄｂ）の発育上に茶灰（３ｆｅ）
の気菌糸を着生し、可溶性色素は認められない。

（ｂ）グリセロール・硝酸塩寒天培地（２７℃培養）茶
白（２ｇｃ）の発育上に白〜黄味灰〔ａ〜２ｄｂ）の気
菌糸を着生し、培養１０日目上から黄味を帯びた可溶性
色素をわずかに産生ずる。

（ｅ）グルコース・アスパラギン寒天培地（２７℃培養
） うす黄（２ｇｅ）の発育上に白〔ａ〕の気菌糸を着生し
、培養１０日目上から黄味を帯びた可溶性色素をわずか
に産生ずる。

（ｄ）普通寒天培地（２７℃培養） うす黄茶（２ｇｃ：］の発育上に白〜灰白〔ａ〜２ｆｅ
）の気菌糸を着生し、培養２１１日目頃ら暗い黄だいだ
いの可溶性色素をわずかに産生ずる。

（ｅ）リンゴ酸石灰寒天培地（２７℃培養）うす黄茶（
２ｇｃ〕の発育上に白〜明るい灰〔ａ〜２ｆｅ）の気菌
糸を着生し、可溶性色素は認められない。

（ｆ）スターチ寒天培地（２７℃培養）うす黄茶［２ｇ
ｃ）の発育上に白〜明るい灰〔ａ〜２ｆｅ）の気菌糸を
着生し、可溶性色素は認められない。

（ｇ）イースト・麦芽寒天培地（ＩＳＰ培地Ｎα２）　
（２７℃培養） 黄茶（３ｎｇ）の発育上に明るい茶灰［３ｎｇ）の気菌
糸を着生するが、培養７日目頃から湿った（ｈｙｇｒｏ
ｓｃｏｐｉｃ）状態を呈する。培養３週間目で黄茶の可
溶性色素をわずかに産生ずる。

（ｈ）オートミール寒天培地（ＩＳＰ培地Ｎα３）　（
２７℃培養） うす黄味だいだい（２ｄｂ）の発育上に明るい灰茶（３
ｆｅ〜３ｉｈ）の気菌糸を着生し、可溶性色素は認めら
れない。

（ｉ）スターチ・無機塩寒天培地（ＩＳＰ培地Ｎｎ４）
（２７℃培養） うす黄茶〔２ｃｂ〕の発育上に暗い灰（３ｐｏ）の気菌
糸を着生するが、培養７日目頃から湿った（ｈｙｇｒｏ
ｓｃｏｐｉｃ）状態を呈する。可溶性色素は認められな
い。

（ｊ）グリセリン・アスパラギン寒天培地（ＩＳＰ培地
Ｎα５）（２７℃培養） うす黄茶（２ｃｂ）の発育上に白〜灰白（ａ−ｂ）の気
菌糸を着生し、可溶性色素は認められない。

（ｋ）ペプトン・イースト・鉄寒天培地（ＩＳＰ培地Ｎ
α６　）　（２７℃培養） うす茶（３ｉｅ）の発育上にうつすらと白い（ａ）気菌
糸を着生し、可溶性色素は認められない。

（Ｉ）チロシン寒天培地（ＩＳＰ培地Ｎｃｉ７）（２７
℃培養）うす黄茶（３ｉｅ）の発育上に白〜灰白（ａ”
ｂ）の気菌糸を着生する。

（３）生理生化学的性質 １ｂ （ａ）生育温度範囲 酵母エキス−スターチ寒天斜面を用い１０℃、２０℃、
２４℃、２７℃、３０℃、３７℃、５０℃の各温度で試
験の結果、５０℃を除き、いずれの温度に於いても生育
が可能であるが、２７℃付近が最適生育温度と思われる
。

（ｂ）ゼラチンの液化（単純ゼラチン培地、２０℃培養
及びグルコース・ペプトン・ゼラチン培地、２７℃培養
） 単純ゼラチン培地及びグルコース・ペプトン・ゼラチン
培地では共に培養後１２２日目頃ら、わずかに液化が始
まり、その作用は中程度である。

（Ｃ）スターチの加水分解（スターチ寒天培地、２７℃
培養） 培養後７日目頃から加水分解性が認められ、作用は中程
度〜強い方である。

（ｄ）脱脂牛乳の凝固・ペプトン化（脱脂牛乳、３７℃
培養） 培養後７日目頃にすばやく凝固が完了し、ＩＯ０日目頃
らペプトン化が認められ、その作用は中程度である。

（ｅ）メラニン様色素の生成（トリプトン・イースト・
ブロス、ＩＳＰ培地Ｎα１：　ペプトン・イースト・鉄
寒天、ＩＳＰ培地Ｎα６：チロシン寒天、ｒｓｐ培地翫
７；何れも２７℃培養）何れの培地に於いてもメラニン
様色素の生成は認められない。

（ｆ）炭素源の利用性（ブリードハム・ゴトリーブ寒天
培地、ＩＳＰ培地Ｎａ　９．２７℃培養）Ｄ−クルコー
ス、ｉ−イノシトール、ラフィノース、Ｄ−マンニトー
ルを利用して良く成育し、Ｄ−フラクトース、シュクロ
ースも利用して成育する。Ｌ−アラビノース、Ｄ−キシ
ロースはおそらく利用し、ラムノースはおそらく利用し
ない。

（ｇ）リンゴ酸石灰の溶解（リンゴ酸石灰寒天培地、２
７℃培養） 培養後１４４日目頃ら発育周辺のリンゴ酸石灰を溶解し
、その作用は中程度である。

（ｈ）硝酸塩の還元反応（Ｉ％硝酸ソーダ含有ペプトン
水、ＩＳＰ培地Ｎα８．２７℃培養）還元されない。

（４）細胞壁組成 主としてＬｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ、　Ｍ、Ｐ、、とＬｅ
ｃｈｅｖａｌｉｅｒ。

Ｈ＋Ａ、　、により行われたｒＡｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔ
ｅ　ＴａｘｏｎｏｍｙＷｏｒｋｓｈｏｐ、　Ｓｏｃ、　
Ｉｎｄ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、Ｊ　Ａｕｇ、１３．１
９７８のテキストに記載されている方法に従い行った。

全菌体中に含まれるジアミノピメリン酸の立体異性はＬ
Ｌ型を示し、糖はリボース及びガラクトースが認められ
る。Ｌｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ　らの分類に従えば、セル
ウォールタイプエ、シュガーパターンＣとなる。

以上の（Ｉ）〜（４）の性状を要約すると、ＡＢ３２１
７株はストレプトミセス属に属し、気菌糸は螺旋及び固
く巻いた螺旋の形成を認め、輪生技は観察されず、胞子
表面は平滑である。種々の培地でうす黄茶の発育上に白
〜灰白〜うす茶灰の気菌糸を着生し、溶解性色素は認め
られないか、わずかにうす黄を呈する程度である。また
一部の培地で７〜１０日日頃から気菌糸が湿潤（ｈｕｇ
ｒｏｓｃｏｐｉｃ）な状態となる。メラニン形成、硝酸
還元能は陰性、蛋白の凝固及び分解能、ゼラチンの液化
能が陽性の中温性菌である。

よって、ＡＢ３２１７株をストレプトミセス・エスピー
（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｄｅｓ　ｓｐ、）の−菌株と同定
した。本発明に云うストレプトミセス属に属しＡＢ３２
１７Ａ物質、又はＡＢ３２１７Ｂ又はＡＢ３２１７Ｃ物
質を生産し、本菌及びその変異菌と明確に区別され無い
菌はすべてこれを包含する。また放線菌は自然界及び人
工的にも変異を起こし易いことは既に良く知られており
、本発明に云うストレプトミセスＡＢ３２１７はそれら
の変異菌の全てを包括する。Ａ８３２１７株は、平成元
年１１月４日　に工業技術院微生物工業技術研究に保管
寄託申請され寄託番号１１０９５号が付された。

第３の本発明によると、新規な微生物として、−数式（
Ｉ）の抗生物質を生産できる特性をもち且つ前記の菌学
的特徴を有するストレプトミセス属の菌株が提供される
。

本発明によるＡＢ３２１７Ａ物質、ＡＢ３２１７Ｂ又は
１９ Ａ８３２１７Ｃ物質の製造は、それの生産菌を通常に微
生物が利用しうる栄養物を含有する培地で培養し、その
培養物からＡＢ３２１７Ａ又はＡＢ３２１７Ｂ又はＡＢ
３２１７Ｃ物質を夫々に又は−諸に単離することによっ
て行われる。

培地に使用される炭素源、窒素源、無機物は使用菌株の
利用可能な物質ならばいずれの種類でも良い。例えば、
炭素源としては、グルコース、グリセロール、シュクロ
ース、フラクトース、ガラクトース、デキストリン、ス
ターチ等を利用しうる。窒素源としては、塩化アンモニ
ウム、燐酸アンモニウム、硫酸アンモニウム、硝酸アン
モニウムなどの各種アンモニウム塩類の他、ペプトン、
肉エキス、酵母エキス、コーンスチープリカー、フィツ
シュミール、大豆粉、小麦胚芽等の含窒素有機物が利用
可能である。無機物としては、炭酸カルシウム、塩化カ
リウム、硫酸マグネシウムなどの他、微量の重金属塩が
適宜使用される。

培養条件は培地組成などにより異なるが、例えば培養は
振どう培養または通気撹はん培養等の好２０− 気的条件下で行う。培養温度は通常２５℃〜３５℃で、
ｐＨは４〜９（７付近が最適）である。４〜７日培養す
ると、菌体内外にＡＢ３２１７Ａ又はＡＢ３２１７Ｂ又
はＡＢ３２１７Ｃ物質又はこれらの混合物を生成、蓄積
する。

一般的には、本発明のＡＢ３２１７Ａ又はＡＢ３２１７
Ｂ又はＡＢ３２１７Ｃ物質の単離、精製には陽イオン交
換樹脂など化合物の官能基の差を利用する方法、シリカ
ゲル、ダイヤイオンＨＰ−２０（三菱化成工業株式会社
製）などの吸着親和力の差を利用する方法、溶媒に対す
る溶解度差を利用する方法などいずれも、それぞれ単独
、または適宜組み合わせて、あるいは反復して使用する
ことができる。活性画分の確認はシリカゲル薄層クロマ
トグラフィー（ＴＬＣ）により行うことができる。

本発明によって得られる抗生物質ＡＢ３２１７Ａ、　Ｂ
およびＣの培養物からのＡＢ３２１７Ａ、　ＢおよびＣ
の採取に当たっては、その性状を利用した通常の分離手
段、例えば、溶剤抽出法、イオン交換樹脂法、吸着また
は分配カラムクロマト法、ゲルろ適法、透新法、沈澱法
などを単独でまたは適し組み合わせて抽出精製すること
ができる。例えば、ＡＢ３２１７Ａ。

ＢおよびＣは、培養菌体中からメタノール水またはアセ
トン水で抽出される。また、培養液中に蓄積されたＡＢ
３２１７Ａ、ＢおよびＣは陽イオン交換樹脂であるアン
バーライトｌＲ１２０Ｂ　（ロームアンドハース社製）
等や、合成吸着剤であるダイヤイオンＨＰ−２０（三菱
化成社製）等に吸着される。また水に混ざらない有機溶
剤、例えば、酢酸エチル等で、アルカリ条件で抽出すれ
ばＡＢ３１７株およびＣは有機溶剤層に抽出され、同条
件下で有機溶剤層に抽出されないＡＢ３２１７Ａから分
離することができる。

ＡＢ３２１７Ａ、ＢおよびＣを更に精製するには、吐セ
ファデックスＣ−２５（ファルマシア社製）等のイオン
交換樹脂、ダイヤイオンＣＩ（Ｐ−２０Ｐ　（三菱化成
社製）、シリカゲル、アルミナ等の吸着剤やセファデッ
クスＬＨ−２０（ファルマシア社製）などを用いるクロ
マトグラフィーを行うとよい。

このようにして培養物中に生産されたＡＢ３２１７Ａ。

ＢおよびＣは遊離の形として分離することができる。

また、ＡＢ３２１７Ａ、ＢおよびＣを含有する溶液また
はその濃縮液を酸、例えば、塩酸、硫酸、燐酸等の無機
酸、蟻酸、酢酸等の有機酸により、各工程の操作中例え
ば抽出、分離または精製の各工程の操作中に処理した場
合、ＡＢ３２１７Ａ、ＢおよびＣは対応するその塩類の
形に変化し、分離される。また別に、このようにして製
造されたＡＢ３２１７Ａ、ＢおよびＣの塩類は、常法に
より遊離の形に変化させることができる。従って、ＡＢ
３２１７Ａ、ＢおよびＣの塩類および遊離の形はともに
この発明の範囲内に包含されるものとする。

本発明の式（Ｉ）の化合物は、これを有効成分として用
い、適当な担体と混和することにより、殺菌剤組成物、
殺ダニ剤組成物又は除草剤組成物に調合することができ
る。

以下に本発明の実施例を示すが、抗生物質ＡＢ３２１７
Ａ、ＢおよびＣの性状が本発明によって明らかにされた
ので、それらの性状に基づきＡＢ３２１７Ａ、　Ｂおよ
びＣの製造法を種々考案することができる。

従って、本発明は実施例に限定されるものではな２３− く、実施例の修飾手段はもちろん、本発明によって明ら
かにされたＡＢ３２１７Ａ、ＢおよびＣの性状に基づい
て公知の手段を施してＡＢ３２１７Ａ、ＢおよびＣを生
産、濃縮、抽出、精製する方法をすべて包含する。

ヌ」１例」２（抗生物質ＡＢ３２１７Ａの製造例）（Ｉ
）ストレプトミセス属１８３２１７株の培養デキストリ
ン２．０％、ガラクトース２．０％、コーンスチープリ
力−０，５％、バクトソイトン（ディフ’：１社ＩＢ＞
　１．０％、硫酸アンモニウム０．２％、炭酸カルシウ
ム０．２％を含有する種培地（ｐＨ７，４）を１２５＋
ｎＱずつ５００ｍＲの坂ロフラスコ３本に分注して、１
２１℃、２０分間高圧滅菌した。次いでＡＢ３２１７株
（微工研菌寄第１１０９５号）を１白金耳ずつ植菌し、
２７℃で３日間１３５ｒｐｍにて振とう培養した。

生産培地は、上記種培地と同一組成の培地であり、この
生産培地を調製し、１２５ｍＱずつ５００ｍＱの坂ロフ
ラスコ８０本に分注し、１２１℃、２０分間高圧滅菌し
た。この生産培地に前記種培養物を３社ずつ接種し２７
℃で５日間１３５ｒｐｍにて振とう培養した。

（２）抗生物質ＡＢ３２１７Ａの単離、精製２４− 培養終了後、培養液をセライトを用いて濾過し、培養濾
液（約１０Ｑ）と培養菌体を得た。培養菌体をメタノー
ル抽出し、培養菌体から活性成分をメタノール中に溶出
せしめ、セライトを用いて濾過し、培養菌体を除いた。

メタノール抽出液を減圧下で濃縮することにより、メタ
ノールを蒸発せしめ除いた。この培養菌体からの抽出液
と培養濾液とを合わせた。

次にシュウ酸で培養濾液をｐＨ２，０に調整し、沈澱す
るシュウ酸カルシウムを遠心分離し除いた。

上清を水酸化ナトリウムでＰＨ７，０に調整し、陽イオ
ン交換樹脂アンバーライトｌＲ１２０（Ｈ＋型）（東京
有機化学工業株式会社製）２．５Ｑのカラムに通し、水
洗後２％アンモニア水７．５Ωで活性画分を溶出させた
。溶出液の活性画分を減圧下濃縮し、アンモニアを蒸発
せしめた後、この濃縮液を水と共に充填したダイヤイオ
ンＨＰ−２０（三菱化成工業株式会社製）２Ｑのカラム
に通した。３０％メタノール水溶液６Ｑで洗った後、カ
ラムから１００％メタノール６Ωで活性画分を溶出させ
た。この活性画分を濃縮乾固し、少量の水に溶解し、予
め５０％メタノール水溶液で満たしたＣＭ−３ｅｐｈａ
ｄｅｘ（トリエチルアミン型）（ファルマシア社製）２
００ｍｆｌのカラムクロマトにチャージし、５０％メタ
ノール水溶液６００ｍＱで洗った後、０．０５モルのト
リエチルアミン−炭酸バッファー（５０％メタノール）
６００ｍＱで活性画分を溶出させた。活性画分を集め、
減圧下で濃縮乾固し、淡黄色の粗粉末３７０ｍｇを得た
。この粗粉末を約２０ｍｕのメタノールを用いて加温溶
解し４℃にて１昼夜静置した。析出した結晶を濾別し乾
燥させ、無色針状結晶１６０ｍｇとして抗生物質ＡＢ３
２１７Ａを得た。

本ＡＢ３２１７Ａ物質の理化学的性質は、前記■〜０　
のとおりであった。

Ｗ　　　（ＡＢ３１７Ｂ、ＢおよびＣ物質の製造例）実
施例１の（Ｉ）の方法にしたがって得られた培養濾液１
０１２を５Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨ９に調整し、ダイ
ヤイオンＨＰ−２０カラム（５００ｍＡ）に通した。

水２Ｑでカラムを洗浄した後、０．０５Ｎ塩酸−５０％
アセトン水で活性画分を溶出させた。活性画分を集め５
Ｎ水酸化ナトリウムで中和し、アセモノ臭がなくなるま
で減圧濃縮後ＰＨ９に調整せしめ、水を加えて５００ｍ
Ａに溶液量を調節した。

この溶液に５００ｍΩの酢酸エチルを加え、撹はん後に
分液ロートにて分液した。その酢酸エチル層を採取しく
水層にはＡＢ３２１７Ａ物質が含まれる）、この酢酸エ
チル溶液を水５００ｍＱを加えて６Ｎ塩酸にてｐＨ２に
調整し、撹はん後に分液ロートにて分液した。その水層
を採取し、５Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨ５に調整せしめ
減圧下に濃縮乾固させ、粗粉末６６１■を得た。

この粗粉末を水１０＋ｎｆｌに溶解せしめ、ＩＮ水酸化
ナトリウムにてｐＨ９に調整後ダイヤイオンＣＨＰ２０
Ｐカラム（Ｉ５ｍＲ）に吸着させ、０．０５Ｎ塩酸酸性
のアセトン濃度勾配溶出法（アセトン濃度Ｏ％から５０
％）にて活性物質を溶出させた。この時、画分１から画
分５０まで１００滴づつ分画し、画分５０からは１５０
滴づつ分画採取した。ＡＢ３２１７Ｂ物質が含まれる画
分５５−６８を集め適当量のアンバーライトＩＲＡ４５
（ＯＨ型、東京有機化学工業株式会社製）で中和した後
に濃縮乾固せしめ、ＡＢ３２１７Ｂ物質が含まれる粗７
− 粉末１２１■を得た。同様な方法で画分８６−１１０か
らＡＢ３２１７Ｃ物質が含まれる粗粉末７２■を得た。

ＡＢ３２１７Ｂ物質の粗粉末を少量に水に溶解しシリカ
ゲルＴＬＣ（キーゼルゲル６０Ｆ２５４、ＡＲＴ５７１
５、メルク社製）に吸着せしめジクロルメタン−メタノ
ール（８：　２）を展開溶媒とした薄層クロマトグラフ
ィーを行った。Ｒｆ値が０．４６付近のＵＶ吸収（２５
４ｎｍ）帯をかき採って、そのシリカゲル末から活性物
質をジクロルメタン−メタノール（６：　４）で溶出さ
せ、溶出液を濃縮後水を加え０．１塩酸にてｐＨ５に調
整した後凍結乾燥せしめ、抗生物質ＡＢ３２１７Ｂの塩
酸塩を白色粉末として５７．６■得た。

同様に、ＡＢ３２１７Ｃ物質の粗粉末を少量に水に溶解
しシリカゲルＴＬＣ（キーゼルゲル６０Ｆ２５４．ＡＲ
Ｔ５７１５゜メルク社製）に吸着せしめジクロルメタン
−メタノール（８：　２）を展開溶媒とした薄層クロマ
トグラフィーを行った。Ｒｆ値が０．６付近のＵＶ吸収
（２５４ｎｍ）帯をかき採って、そのシリカゲル末から
活性物質をジクロルメタン−メタノール（６：　４）で
溶出させ、溶出液を濃縮後水を加え０．ＩＮ塩酸にてｐ
）１５２８− に調整した後凍結乾燥せしめ、抗生物質ＡＢ３２１７Ｇ
の塩酸塩を白色粉末として２３．４■得た。

次に本発明の抗生物質ＡＢ３２１７Ａ、　ＡＢ３１７Ｂ
及びＡＢ３２１７Ｃの生理活性の一部を試験例によって
説明する。

区腹板よ　（殺ダニ活性） ＡＢ３１７Ｂ、　ＡＢ３２１７Ｂ又はＡＢ３２１７Ｇ物
質を水に溶解し、所定濃度に希釈した被検液を作成した
。ナミハダニに対して散布し、散布後から１６日後のダ
ニ生存数を数え、防除価を求めた。

その結果を第２表に示した。

第−じＬ二茂 区龜桝ス　（ＡＢ３２１７Ａ物質の除草活性）水に溶解
したＡＢ３２１７Ａ物質の所定薬量を下記の各種の植物
に施用して処理した。本物質で処理から２週間後に下記
に示す判定基準に基づいて除草効果を調べた。その結果
を第３表に示した。

判１ｉＬ夛 １００％ ９０〜１００％未満 ７０〜９０ ５０〜７０　　〃 ３０〜５０　　〃 ３０％未満 第３ 表 数１卸３　（ＡＢ３２１７Ａ物質抗菌活性）寒天希釈法
によって常法で測定して抗生物質ＡＢ３２１７Ａ物質の
各種の菌に対する最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を調べた
。

その結果を第４表に示した。

３１− 第 表 ５） 農研培地、３７℃、２日培養。

農研培地、２４℃、５日培養。

普通寒天培地、３７℃、２日培養。

ポテトシュクロース寒天培地、２４℃、培養。

農研培地、２７℃、２日培養。

５日 ２− （発明の効果） 本発明の新規な抗生物質ＡＢ３２１７Ａ、　Ｂ及びＣは
新規な化学構造を持ち、多様な生理活性を有するので、
様々な用途に期待される。

【図面の簡単な説明】

第１図は、ＡＢ３２１７Ａ物質の水溶液中で濃度１００
μｇ／ｍΩでの紫外部吸収スペクトル図である。 第２図は、ＡＢ３２１７Ａ物質の臭化カリウム錠剤中で
の赤外部吸収スペクトル図である。 第３図は、ＡＢ３２１７Ａ物質の重ジメチルスルホキシ
ド中での１Ｈ核磁気共鳴スペクトル図である。 第４図は、ＡＢ３２１７Ａ物質の重ジメチルスルホキシ
ド中での１３Ｃ核磁気共鳴スペクトル図である。 第５図は、ＡＢ３２１７Ｂ物質の臭化カリウム錠剤中で
の赤外吸収スペクトル図である。 第６図は、ＡＢ３２１７Ｂ物質の重水中での１Ｈ核磁気
共鳴スペクトル図である。 第７図は、ＡＢ３２１７Ｂ物質の重水中での１３Ｃ核磁
気共鳴スペクトル図である。 第８図は、ＡＢ３２１７Ｃ物質の臭化カリウム錠剤中で
の赤外吸収スペクトル図である。 第９図は、ＡＢ３２１７Ｃ物質の重水中での１Ｈ核磁気
共鳴スペクトル図である。 第１０図は、ＡＢ３２１７Ｇ物質の重水中での１３Ｃ核
磁気共鳴スペクトル図である。 ３５− ００ ５０ ０Ｃ 第 ）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒは水素原子、６−メチル−６−ハイドロキシ
   ヘプタニル基または４−メチルペンタニル基を示す）で
   表わされる抗生物質ＡＢ３２１７Ａ、抗生物質ＡＢ３２
   １７Ｂ、及びＡＢ３２１７Ｃ並びにそれらの酸付加塩。 ２、一般式（ I ）においてＲが水素原子である化合物
   としての抗生物質ＡＢ３２１７Ａである請求項１記載の
   化合物。 ３、一般式（ I ）においてＲが６−メチル−６−ハイ
   ドロキシヘプタイル基である化合物としての抗生物質Ａ
   Ｂ３２１７Ｂである請求項１記載の化合物。 ４、一般式（ I ）においてＲが４−メチルペンタニル
   基である化合物としての抗生物質ＡＢ３２１７Ｃである
   請求項１記載の化合物。 ５、ストレプトミセス属に属する抗生物質 ＡＢ３２１７Ａ生産菌又は抗生物質ＡＢ３２１７Ｂ生産
   菌又は抗生物質ＡＢ３２１７Ｃ生産菌を培養し、その培
   養物から請求項１に記載の抗生物質ＡＢ３２１７Ａ又は
   ＡＢ３２１７Ｂ又はＡＢ３２１７Ｃを採取することを特
   徴とする新規な抗生物質ＡＢ３２１７Ａ又はＡＢ３２１
   ７Ｂ又はＡＢ３２１７Ｃの製造法。 ６、請求項１記載の一般式（ I ）の抗生物質ＡＢ３２
   １７Ａ、ＡＢ３２１７Ｂ、ＡＢ３２１７Ｃを生産する特
   性をもつストレプトミセス・エスピー株。