JPH03236786A - 発酵法によるl―スレオニンの製造法 - Google Patents
発酵法によるl―スレオニンの製造法Info
- Publication number
- JPH03236786A JPH03236786A JP3117290A JP3117290A JPH03236786A JP H03236786 A JPH03236786 A JP H03236786A JP 3117290 A JP3117290 A JP 3117290A JP 3117290 A JP3117290 A JP 3117290A JP H03236786 A JPH03236786 A JP H03236786A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- threonine
- strain
- acetic acid
- culture
- escherichia coli
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
め要約のデータは記録されません。
Description
失または低下し、かつL−スレオニン生産能を有する微
生物を用いるL−スレオニンの製造法に関する。L−ス
レオニンは、アミノ酸製剤などの医薬品として有用であ
るだけでなく、飼料添加用としても利用できるアミノ酸
である。
リウム属、コリネバクテリウム属またはセラチア属など
に属する微生物を用いた発酵法により、工業的に生産さ
れている。
ンゴ酸、コハク酸、乳酸、酢酸などの有機酸が生成され
る。これらの有機酸の生成は目的生産物の発酵収率を低
下させ、酢酸においてはL−スレオニン生合成を阻害す
るということが知られている。乳酸などの有機酸の生成
を低下させる方法としては、培養液中の乳酸の量がlO
〜200■/d1になるように通常の空気よりも酸素濃
度を高めた酸素を培地に供給する方法(特開昭61−2
16697号公報)が開示されているが、培養管理が煩
雑であり工業的生産には必ずしも充分ではない。
唯一の炭素源として生育できない株あるいはモノフルオ
ロ酢酸耐性株がジャーナル・オブ・ジェネラル・ミクロ
バイオロジー(Journal ofGeneral
Microbiology、 1977年)102巻
、327〜336頁に既に開示されている。しかし、該
文献中にはその変異株のアミノ酸生産に関する記述はな
い。
なL−スレオニンを、工業的により効率よく安価に製造
する方法を提供することにある。
性が欠失または低下し、かつL−スレオニン生産能を有
する微生物を培地に培養し、培養物中にL−スレオニン
を生成蓄積させ、該培養物よりL−スレオニンを採取す
ることを特徴とする発酵法によるL−スレオニンの製造
法を提供することができる。
属する微生物であって、L−スレオニン生産能を有し、
しかも酢酸生合成活性が欠失または低下した菌株であれ
ばいずれでもよく、公知のL−スレオニン生産能を有す
る菌に酢酸生合成活性を欠失または低下させる変異を付
与することによって取得できる。
合成経路と代謝経路は可逆的な関係にあり、「酢酸生合
成活性を欠失または低下させる」ということは「酢酸代
謝活性を欠失または低下させる」ということと同じこと
を表わすので、酢酸代謝活性を欠失または低下させる変
異を付与することによっても取得できる。さらに野生株
から誘導した酢酸生合成活性もしくは酢酸代謝活性の欠
失または低下した変異株に、ジアミノピメリン酸やメチ
オニンの要求性、α−アミノ−β−ヒドロキシ吉草酸耐
性などのL−スレオニン生産性を向上させる変異を付与
しても本発明に用いる菌株を得ることができる。本発明
における酢酸生合成活性もしくは酢酸代謝活性の欠失ま
たは低下した変異株は、紫外線照射やN−メチル−N′
−二トロN−ニトロソグアニジン(NTG) 、亜硝酸
などの化学処理など、通常用いられる変異処理を施して
得られる変異株から見出すことができる。好適な例とし
てエシェリヒア・コリH−7596をあげることができ
る。
85゜ジアミノピメリン酸要求性、メチオニン要求性、
α−アミノ−β−ヒドロキシ吉草酸耐性、リファンピシ
ン耐性)にN−メチル−N′−ニトロ−N−ニトロソグ
アニジン(NTG)による常法の変異処理(0,2ta
g/rd1. 30℃、30分間)をおこなった後、モ
ノフルオロ酢酸ナトリウム(Ig/l)、を含む最少培
地(ピルビン酸す) IJウム3g/l、NH*CI
2g/l、KH2PO< 2g/l。
s20m1g/ J!、 シフ ミ/ ヒl IJ :
/150sg/ 1、DL−メチオニン50■/1、寒
天20g/l、p H7,2)に塗布した。30℃で2
〜6日間培養し、生育してくる耐性株のコロニーを釣菌
分離する。得られたモノフルオロ酢酸耐性株の中から酢
酸を唯一の炭素源として生育できない株を分離し、L−
スレオニン生産試験にかけ、培地中の酢酸生成量がH−
4258株より減少した株を取得し、エシェリヒア・コ
リH−7596と命名した。この菌株はブダペスト条約
に基づき、平成1年上2月21日付で工業技術院微生物
工業技術研究所に微工研条寄第2697号(F[!RM
0P−2697)として寄託されている。
る。使用培地としては、炭素源、窒素源、無機物その他
使用菌株の必要とする微量の栄養素を程よく含有するも
のならば、合成培地または天然培地いずれも使用可能で
ある。
ス、糖蜜、澱粉または粗糖の加水分解物などの炭水化物
、ピルビン酸、ギ酸、フマール酸、リンゴ酸などの有機
酸が用いられる。
アンモニウム、酢酸アンモニウム、燐酸アンモニウムな
どの各種無機酸もしくは有機酸のアンモニウム塩、アミ
ン類、その信金窒素化合物、ならびにペプトン、肉エキ
ス、コーン・ステイープ・リカー、カゼイン加水分解物
、大豆粕加水分解物、各種発酵菌体およびその消化物な
どが用いられる。
、燐酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、塩化ナトリウ
ム、硫酸第一鉄、硫酸マンガン、硫酸銅、炭酸カルシウ
ムなどが用いられる。
下、温度20〜40℃、好ましくは25〜35℃、pH
5〜9の範囲、好ましくは中性付近に保持しておこなわ
れ、通常2〜7日で完了する。培地のpH調整は炭酸カ
ルシウム、無機または有機の酸、アルカリ溶液、アンモ
ニア、pH緩衝液などによっておこなわれる。
オン交換処理法、濃縮法、塩析法などを併用することに
より、培養液からL−スレオニンを回収することができ
る。
−4258株を、グルコース20g/l、ペプトン10
g/R,酵母エキスlOg/l、NaCl2 2.5g
/l、ジアミノピメリン#0.5g / Rの組成から
なる種培地(pH7,4)に植菌し、30℃、16時時
間上う培養した。得られた種培養液100−を11の下
記発酵培地を含む21の発酵槽に植菌し、攪拌数80
Orpm、 30℃、通気III!/min、で培養し
た。培養中のpHI!I整および窒素源の供給はアンモ
ニア水でおこない、pHは約6.5に維持した。グルコ
ースを適宜供給しつつ、80時間培養をおこなった。そ
の際のしスレオニンの生産量と酢酸生成量を高速液体ク
ロマトグラフィー法により定量し、結果を第1表にまと
めた。
/j!−KHxP042g/12.MgS○17H3○
1g/f1ジアミノピメリン酸0.9g/l、DLメチ
オニン0.3 g / R、コーン・スチーブ・りカー
5g/Il (pH7,4) 第 1 表 H−759637,3 )1−4258 35.9 実施例2 実施例1の培養条件で攪拌数を80 Orpmから60
Orpmに変えた以外は、実施例1と同様におこなっ
た。結果を第2表に示した。
養液11を遠心分離(3000rpm、 10分)にか
け菌体その他の不純物を除去した。得られた上澄液を強
酸性陽イオン交換樹脂ダイヤイオン5KI(H型)のカ
ラムに通し、L−スレオニンを吸着させ、水洗後0.5
規定のアンモニア水で溶出して、L−スレオニン画分を
集めた。集めた両分を濃縮し、エタノールを加えて冷却
下で保存することにより、純度98%以上のL−スレオ
ニンの結晶が27g得られた。
/1))1−7596 33.8
2.1H−4258& 8 42.4発
明の効果 本発明によれば、アミノ酸製剤や飼料添加物として有゛
用なL−スレオニンを、効率よく安価に製造することが
できる。また、副生のアミノ酸が少ない。
Claims (1)
- エシェリヒア属に属し、酢酸生合成活性が欠失または
低下し、かつL−スレオニン生産能を有する微生物を培
地に培養し、培養物中にL−スレオニンを生成蓄積させ
、該培養物よりL−スレオニンを採取することを特徴と
する発酵法によるL−スレオニンの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3117290A JP2877414B2 (ja) | 1990-02-09 | 1990-02-09 | 発酵法によるl―スレオニンの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3117290A JP2877414B2 (ja) | 1990-02-09 | 1990-02-09 | 発酵法によるl―スレオニンの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03236786A true JPH03236786A (ja) | 1991-10-22 |
| JP2877414B2 JP2877414B2 (ja) | 1999-03-31 |
Family
ID=12324026
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3117290A Expired - Lifetime JP2877414B2 (ja) | 1990-02-09 | 1990-02-09 | 発酵法によるl―スレオニンの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2877414B2 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH07163360A (ja) * | 1993-10-01 | 1995-06-27 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | 物質の製造法 |
| WO2003008615A3 (en) * | 2001-07-18 | 2003-10-30 | Degussa | Process for the preparation of l-amino acids using strains of the enterobacteriaceae family which contain an enhanced succ or sucd gene |
| WO2002081722A3 (en) * | 2001-04-03 | 2003-10-30 | Degussa | Process for the production of l-amino acids using strains of the family enterobacteriaceae that contain an attenuated acea gene |
| US7052883B2 (en) | 2001-04-03 | 2006-05-30 | Degussa Ag | Process for the production of L-amino acids using strains of the family Enterobacteriaceae that contain an attenuated fruR gene |
-
1990
- 1990-02-09 JP JP3117290A patent/JP2877414B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH07163360A (ja) * | 1993-10-01 | 1995-06-27 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | 物質の製造法 |
| WO2002081698A3 (en) * | 2001-04-03 | 2003-10-30 | Degussa | Process for the production of l-amino acids using strains of the family enterobacteriaceae that contain an attenuated frur gene |
| US7052883B2 (en) | 2001-04-03 | 2006-05-30 | Degussa Ag | Process for the production of L-amino acids using strains of the family Enterobacteriaceae that contain an attenuated fruR gene |
| WO2002081722A3 (en) * | 2001-04-03 | 2003-10-30 | Degussa | Process for the production of l-amino acids using strains of the family enterobacteriaceae that contain an attenuated acea gene |
| WO2002081721A3 (en) * | 2001-04-03 | 2003-10-30 | Degussa | Process for the production of l-amino acids using strains of the family enterobacteriaceae that contain an attenuated dgsa gene |
| WO2003008606A3 (en) * | 2001-07-18 | 2003-12-18 | Degussa | Process for the preparation of l-amino acids using strains of the enterobacteriaceae family which contain an enhanced phob or phor gene |
| WO2003008608A3 (en) * | 2001-07-18 | 2003-10-30 | Degussa | Process for the preparation of l-amino acids using strains of the enterobacteriaceae family which contain an enhanced phoe gene |
| WO2003008607A3 (en) * | 2001-07-18 | 2003-11-13 | Degussa | Process for the preparation of l-amino acids using strains of the enterobacteriaceae family |
| WO2003008605A3 (en) * | 2001-07-18 | 2003-10-30 | Degussa | Process for the preparation of l-amino acids using strains of the enterobacteriaceae family which contain an enhanced male gene |
| WO2003008611A3 (en) * | 2001-07-18 | 2003-12-24 | Degussa | Process for the preparation of l-amino acids using strains of the enterobacteriaceae family which contain an enhanced talb gene |
| WO2003008610A3 (en) * | 2001-07-18 | 2004-01-08 | Degussa | Process for the preparation of l-amino acids using strains of the enterobacteriaceae family which contain an enhanced pfkb gene |
| WO2003008609A3 (en) * | 2001-07-18 | 2004-01-08 | Degussa | Process for the preparation of l-amino acids using strains of the enterobacteriaceae family which contain an enhanced pykf gene |
| WO2003008612A3 (en) * | 2001-07-18 | 2004-01-22 | Degussa | Process for the preparation of l-amino acids using strains of the enterobacteriaceae family which contain an enhanced rsea or rsec gene |
| WO2003008614A3 (en) * | 2001-07-18 | 2004-01-22 | Degussa | Process for the preparation of l-amino acids using strains of the enterobacteriaceae family which contain an enhanced suca or sucb gene |
| WO2003008615A3 (en) * | 2001-07-18 | 2003-10-30 | Degussa | Process for the preparation of l-amino acids using strains of the enterobacteriaceae family which contain an enhanced succ or sucd gene |
| US7332309B2 (en) | 2001-07-18 | 2008-02-19 | Degussa Ag | Process for the preparation of L-amino acids using strains of the enterobacteriaceae family which contain an enhanced sucC or sucD gene |
| EP2083080A1 (en) * | 2001-07-18 | 2009-07-29 | Evonik Degussa GmbH | Process for the preparation of l-amino acids using strains of the Enterobacteriaceae family which contain an enhanced rseA or rseC gene |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2877414B2 (ja) | 1999-03-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3036930B2 (ja) | 発酵法によるl−イソロイシンの製造法 | |
| JP3006926B2 (ja) | 発酵法によるl−スレオニンの製造法 | |
| JP3151073B2 (ja) | 発酵法によるアミノ酸の製造法 | |
| JP3698758B2 (ja) | 発酵法によるl−ロイシンの製造法 | |
| EP0301572A2 (en) | Process for producing l-threonine by fermentation | |
| JP3131311B2 (ja) | 発酵法によるl−イソロイシンの製造法 | |
| JPH02131589A (ja) | 発酵法によるl−スレオニンの製造法 | |
| JP2877414B2 (ja) | 発酵法によるl―スレオニンの製造法 | |
| JP2971089B2 (ja) | 発酵法によるl―スレオニンの製造法 | |
| JP3510331B2 (ja) | 発酵法によるl−アミノ酸の製造法 | |
| JP3100763B2 (ja) | 発酵法によるl−アルギニンの製造法 | |
| JP2810739B2 (ja) | 発酵法によるl―スレオニンの製造法 | |
| JPH04330291A (ja) | 発酵法によるl−アラニンの製造法 | |
| JPS63273487A (ja) | L−スレオニンの製造法 | |
| JPS5988094A (ja) | 発酵法によるl−リジンの製造法 | |
| JPS61260891A (ja) | 発酵法によるl−スレオニンの製造方法 | |
| JPH0346111B2 (ja) | ||
| JPH0346112B2 (ja) | ||
| JPH0673460B2 (ja) | 発酵法によるl−スレオニンの製造方法 | |
| JPH0673461B2 (ja) | 発酵法によるl−スレオニンの製造法 | |
| JPS63209593A (ja) | 発酵法によるl−スレオニンの製造法 | |
| JPH0346113B2 (ja) | ||
| JPS58216692A (ja) | 含硫アミノ酸の製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080122 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090122 Year of fee payment: 10 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100122 Year of fee payment: 11 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110122 Year of fee payment: 12 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term | ||
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110122 Year of fee payment: 12 |