JPH03240789A - ６―メルカプトプリンおよび６―チオグアニンのプロドラツグ - Google Patents
６―メルカプトプリンおよび６―チオグアニンのプロドラツグInfo
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- JPH03240789A JPH03240789A JP2297354A JP29735490A JPH03240789A JP H03240789 A JPH03240789 A JP H03240789A JP 2297354 A JP2297354 A JP 2297354A JP 29735490 A JP29735490 A JP 29735490A JP H03240789 A JPH03240789 A JP H03240789A
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- compound
- mercaptopurine
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
- C07D473/26—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with an oxygen, sulphur, or nitrogen atom directly attached in position 2 or 6, but not in both
- C07D473/36—Sulfur atom
- C07D473/38—Sulfur atom attached in position 6
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
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- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
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- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は、ＮＩＨ：ＢＲＳＧにより与えられた米国政府
の支持によりなされた。米国政府は、本発明にある橿の
権利を有する。
の支持によりなされた。米国政府は、本発明にある橿の
権利を有する。
本出願は、１９８９年１１月３日提出の出願番号第０７
／４３２．０９８号の一部継続出願である。
／４３２．０９８号の一部継続出願である。
本発明は、抗腫瘍薬物に腎臓を標的とさせることのでき
る化合物に関する。さらに詳細には、本発明は、抗腫瘍
藁剤の放出に先立ち胃履に存在する多数の酵素にさらす
ことを必要とするように設計された６−メルカブｐプリ
ノおよび６−チオグアニンのプロドラ／り複合体（ｃｏ
ｎｊｕｇａｔｅ）に関する。
る化合物に関する。さらに詳細には、本発明は、抗腫瘍
藁剤の放出に先立ち胃履に存在する多数の酵素にさらす
ことを必要とするように設計された６−メルカブｐプリ
ノおよび６−チオグアニンのプロドラ／り複合体（ｃｏ
ｎｊｕｇａｔｅ）に関する。
（発明の背景わよひ発明か解決りようとする課題）活性
な薬物を酵素作用により生しさせる新規化学物質を与え
る生化学的に活性な基剤の化学的修飾は、薬物の作用か
特定の細胞および組織を標的とするようにさせ、そして
非標的細胞への毒性また１ま副作用を減するために重要
な方法である。エヌ、ホーダー（Ｎ、ＢｏｄｏｒＪ
ら、２２ Ａｎｎ、Ｒｅｐ、Ｍｅｄ、Ｃｈｅｍ、３０
３−３１３（１９８７）：ティー フレニラキー（Ｔ、
Ｋｒｅｎｉｔｓｋｙン ら、８１ Ｐ、Ｎ、Ａ、Ｓ、
米国３２０９−３２１３ （１９８４）：ン二−
ヒ工−ル（Ｈｊｅｌｌｅ） ら、２２９ Ｊ、Ｐｈ
ａｒｍａｃｏｌ、Ｅｘｐ、Ｔｈｅｒ、３７２−３８０
（１９８４）；ニス、マグナン（Ｓ、Ｍａｇｎａｎ）
ら、２５ Ｊ、Ｍｅｄ、Ｃｈｅｍ、１０１８−１０
２１ （１９８２）；エム オーロウスキ（Ｍ、Ｏｒ
ｌｏｗｓｋ １）ら、２１２Ｊ、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ
、 Ｅｘｐ、 Ｔｈｅｒ、 １６７ −１７２
（１９８０）。これらの親交および本明細書に挙げだす
へての他の親交の開示は、参考のために記載した。この
ような化合物は「プロトラッグ」として知られている。
な薬物を酵素作用により生しさせる新規化学物質を与え
る生化学的に活性な基剤の化学的修飾は、薬物の作用か
特定の細胞および組織を標的とするようにさせ、そして
非標的細胞への毒性また１ま副作用を減するために重要
な方法である。エヌ、ホーダー（Ｎ、ＢｏｄｏｒＪ
ら、２２ Ａｎｎ、Ｒｅｐ、Ｍｅｄ、Ｃｈｅｍ、３０
３−３１３（１９８７）：ティー フレニラキー（Ｔ、
Ｋｒｅｎｉｔｓｋｙン ら、８１ Ｐ、Ｎ、Ａ、Ｓ、
米国３２０９−３２１３ （１９８４）：ン二−
ヒ工−ル（Ｈｊｅｌｌｅ） ら、２２９ Ｊ、Ｐｈ
ａｒｍａｃｏｌ、Ｅｘｐ、Ｔｈｅｒ、３７２−３８０
（１９８４）；ニス、マグナン（Ｓ、Ｍａｇｎａｎ）
ら、２５ Ｊ、Ｍｅｄ、Ｃｈｅｍ、１０１８−１０
２１ （１９８２）；エム オーロウスキ（Ｍ、Ｏｒ
ｌｏｗｓｋ １）ら、２１２Ｊ、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ
、 Ｅｘｐ、 Ｔｈｅｒ、 １６７ −１７２
（１９８０）。これらの親交および本明細書に挙げだす
へての他の親交の開示は、参考のために記載した。この
ような化合物は「プロトラッグ」として知られている。
ニー、エルファラ （Ａ、Ｅ’ｌ ｆａｒｒａ）らは、
ＦＡＳＥＢ Ｊｏｕｒｎａｌ、Ａｂｓｔｒａｃｔ４９
２２ （１９８８圧３月２０日）で、我々の実験室の報
告として、Ｓ−（６−プリニル）−Ｌシスティンすなわ
ち抗１ｉ１！および免疫抑制性の基剤６−メルカブトプ
リンのシスティン誘導体が可能性あるプロトラッグであ
り得るとしている。この点（二関し、６−メルカプトプ
リンは、各種の腫瘍の治療に効果的であることが知られ
ている。しかしながら、このものに、Ｇ １．路から活
性的に運ばれず、午すンチンオキシダーセによって容易
に代謝されて生化学的に不活性な代謝産物を生する。し
たかってこのものｊま、効果的であるためには長期にわ
たり多量投与されねばならない。概念としては、６〜メ
ルカ７°ドブリンを方文出するのに必要なβ−リアーセ
か腎臓にかなり見いたされるということである。さら１
こ、腎臓運搬システムはアミノ酸誘導体を濃縮する傾向
かある。この展開は、腎臓腫瘍の治療に対し現在、満足
な化学療法の技術かないことから非常に重要である。こ
の５−（６−プリニル）−Ｌ−システィンのアプローチ
は、いくらかうまくいくか、さらに大きな特異性が求め
られている。さらに、６−メルカプトプリンは、ある患
者については６−チオグアニン代用物の使用を必要とさ
せるという点である種の不便な点を有している。
ＦＡＳＥＢ Ｊｏｕｒｎａｌ、Ａｂｓｔｒａｃｔ４９
２２ （１９８８圧３月２０日）で、我々の実験室の報
告として、Ｓ−（６−プリニル）−Ｌシスティンすなわ
ち抗１ｉ１！および免疫抑制性の基剤６−メルカブトプ
リンのシスティン誘導体が可能性あるプロトラッグであ
り得るとしている。この点（二関し、６−メルカプトプ
リンは、各種の腫瘍の治療に効果的であることが知られ
ている。しかしながら、このものに、Ｇ １．路から活
性的に運ばれず、午すンチンオキシダーセによって容易
に代謝されて生化学的に不活性な代謝産物を生する。し
たかってこのものｊま、効果的であるためには長期にわ
たり多量投与されねばならない。概念としては、６〜メ
ルカ７°ドブリンを方文出するのに必要なβ−リアーセ
か腎臓にかなり見いたされるということである。さら１
こ、腎臓運搬システムはアミノ酸誘導体を濃縮する傾向
かある。この展開は、腎臓腫瘍の治療に対し現在、満足
な化学療法の技術かないことから非常に重要である。こ
の５−（６−プリニル）−Ｌ−システィンのアプローチ
は、いくらかうまくいくか、さらに大きな特異性が求め
られている。さらに、６−メルカプトプリンは、ある患
者については６−チオグアニン代用物の使用を必要とさ
せるという点である種の不便な点を有している。
別の研究で、我々の実験室は、ガンマーグルタミルトラ
ンスペプチダーセ、システイニルグリシンシペプチダー
セ、およびシスティン共役β−リアーゼ（ｃｙｓｔｅｉ
ｎｅ ｃｏｎｊｕｇａｔｅβ−１ｙａｓｅ）はすべて
腎臓に存在し、共同してＳ−（１，２−シフ００ビニル
グルタチオン）からＳ−（１，２−シクロロヒニルンチ
オ部分を放出するように働き得ることを報告している。
ンスペプチダーセ、システイニルグリシンシペプチダー
セ、およびシスティン共役β−リアーゼ（ｃｙｓｔｅｉ
ｎｅ ｃｏｎｊｕｇａｔｅβ−１ｙａｓｅ）はすべて
腎臓に存在し、共同してＳ−（１，２−シフ００ビニル
グルタチオン）からＳ−（１，２−シクロロヒニルンチ
オ部分を放出するように働き得ることを報告している。
工エルファラ（Ａ、Ｅｉｆａｒｒａ）ら、３５Ｂｉｏｃ
ｈｅｍ、 Ｐ’Ｔｈａｒｍ、 ２８３−２８８
（１９８６）。賢アンラーでおよび腎エステラーセか、
腎臓にかなりある二とも報告されている。／クロロビニ
ルのホモ／ステイシＳ−？Ｍ合体か、腎臓中てアミノ交
換反応を受：すで対応する２−ケト酸を生しること、腎
臓で存在する条件下での非酵素解毒が、ンクロロヒニル
基を放出することかエーエルファラらの８３ Ｐ、Ｎ
、Ａ、Ｓ、米国２６７０ （１９８６）に報告されてい
る。ヒドロキシ類似体のＳ−複合体は、アミノ酸オキシ
ダーセにより腎臓で代謝されてケト酸になるので有毒で
もある。エル、ラブシｘ （Ｌ、Ｌａ５ｈ）ら、２７６
Ａｒｃｈ、Ｂｉｏｃ？＋ｅｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ。
ｈｅｍ、 Ｐ’Ｔｈａｒｍ、 ２８３−２８８
（１９８６）。賢アンラーでおよび腎エステラーセか、
腎臓にかなりある二とも報告されている。／クロロビニ
ルのホモ／ステイシＳ−？Ｍ合体か、腎臓中てアミノ交
換反応を受：すで対応する２−ケト酸を生しること、腎
臓で存在する条件下での非酵素解毒が、ンクロロヒニル
基を放出することかエーエルファラらの８３ Ｐ、Ｎ
、Ａ、Ｓ、米国２６７０ （１９８６）に報告されてい
る。ヒドロキシ類似体のＳ−複合体は、アミノ酸オキシ
ダーセにより腎臓で代謝されてケト酸になるので有毒で
もある。エル、ラブシｘ （Ｌ、Ｌａ５ｈ）ら、２７６
Ａｒｃｈ、Ｂｉｏｃ？＋ｅｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ。
３２２ （１９９０）を参Ｂりされたい。
したがって、より特異的−腎臓プロトラングの開発の必
要性があることか理解されよう。
要性があることか理解されよう。
（課題を解決するための手段）
本発明の１実施態様：よ、式
（式中、Ｒ１は、ＨおよびＮＨｌからなる群から選択さ
れ、Ｒ１は、 好ましくは−ＣＨＪまたは−ＣＨｚＣＨｓである）から
なる群から選択される）を有する化合物を提供する。
れ、Ｒ１は、 好ましくは−ＣＨＪまたは−ＣＨｚＣＨｓである）から
なる群から選択される）を有する化合物を提供する。
もう１つの態様では、本発明は、式
（式中、Ｒ１は、ＨおよびＮＨ２からなる群から選択さ
れ、Ｒ２は、 ４−Ｃｏｏｌ からなる群から選択される）を有する
化合物を提供する。
れ、Ｒ２は、 ４−Ｃｏｏｌ からなる群から選択される）を有する
化合物を提供する。
もう１つの態様では、本発明は、前記の化合物の１種ま
たはそれ以上に腎臓をさらすことを含む哺乳類の腎臓の
１瘍の発育を抑制する方法を提供する。
たはそれ以上に腎臓をさらすことを含む哺乳類の腎臓の
１瘍の発育を抑制する方法を提供する。
上記のプロドラフグのほとんとは、６−メルカブトプリ
ンまたはチオグアニンを放出する前；こ複合（ｍｕｌｔ
ｉｐｌｅ）酵素活性を必要として（蔦る。この点に関し
、グルタチオン変種は、ガンマグルタミルトランスベプ
チターセ（このものは、グルタメート部分を放出する）
、システイニルり′リンンシペプチダーセ（このものは
、グリシン残基を放出する）およびシスティン共役β−
リアーセによる働きを必要とする。システイニルグリシ
ン変種は、抗腫瘍薬剤を放出するのに後の２種類の酵素
の使用を必要とする。アセチル変種は、腎臓アシラーセ
およびβ−リアーセの使用を必要とする。エステル変種
は、腎臓エステラーゼおよび腎臓β−リアーセの使用を
必要とする。
ンまたはチオグアニンを放出する前；こ複合（ｍｕｌｔ
ｉｐｌｅ）酵素活性を必要として（蔦る。この点に関し
、グルタチオン変種は、ガンマグルタミルトランスベプ
チターセ（このものは、グルタメート部分を放出する）
、システイニルり′リンンシペプチダーセ（このものは
、グリシン残基を放出する）およびシスティン共役β−
リアーセによる働きを必要とする。システイニルグリシ
ン変種は、抗腫瘍薬剤を放出するのに後の２種類の酵素
の使用を必要とする。アセチル変種は、腎臓アシラーセ
およびβ−リアーセの使用を必要とする。エステル変種
は、腎臓エステラーゼおよび腎臓β−リアーセの使用を
必要とする。
これらの５種の酵素は、腎臓がアミノ酸誘導体を濃縮す
る能力を有しているために腎臓にかなり見いたされるこ
とと、これらの５種の酵素を一緒にした有意的な濃度が
体の他の部分に見いだされないことから、これらの化合
物の使用により特異性か達成できる。同様にして、ホモ
システィン（およびそのヒドロキシ類似体）のＳ−複合
体は、ケト−酸型への酵素改質とこれに続く腎臓での作
用により薬物を放出する必要がある。
る能力を有しているために腎臓にかなり見いたされるこ
とと、これらの５種の酵素を一緒にした有意的な濃度が
体の他の部分に見いだされないことから、これらの化合
物の使用により特異性か達成できる。同様にして、ホモ
システィン（およびそのヒドロキシ類似体）のＳ−複合
体は、ケト−酸型への酵素改質とこれに続く腎臓での作
用により薬物を放出する必要がある。
したがって、本発明の目的は次のことを含有する
（ａ）前記の種類の化合物を提供すること（ｂ）そのよ
うな化合物を使用して哺乳類の腎臓の腫瘍を治療する前
記の種類の方法を提供すること （ｃ）そのような化合物を合成する方法を提供すること
。
うな化合物を使用して哺乳類の腎臓の腫瘍を治療する前
記の種類の方法を提供すること （ｃ）そのような化合物を合成する方法を提供すること
。
本発明のこれらの目的および他の目的および利点は、以
下の説明から明らかとなろう。これらの実施態様は、本
発明のすべての範囲を示すものではない。本発明は外の
実施態様でも用いることができる。本発明の範囲は、特
許請求の範囲にある。
下の説明から明らかとなろう。これらの実施態様は、本
発明のすべての範囲を示すものではない。本発明は外の
実施態様でも用いることができる。本発明の範囲は、特
許請求の範囲にある。
本発明を実施する最良の態様
Ｓ−（６−プリニル）−Ｌ−システィンの詳細な合成法
を以下に示す（ＲｒはＨ，Ｒｚは、■ −Ｃ）Ｉ−べＸ）ゴＨ である）。
を以下に示す（ＲｒはＨ，Ｒｚは、■ −Ｃ）Ｉ−べＸ）ゴＨ である）。
特許請求の範囲の化合物の合成は、この合成法と関連し
て説明する。基本的には、６−クロログアニンまたは６
−クロロプリンを、アミノ酸先駆体（グルタチオン、シ
ステイニルグリシン、Ｎ−アセチル−し−ノステインま
たはシスティンアルキルエステル、たとえば、システィ
ンメチルエステルまたはシスティンエチルエステル）と
特定の条件下で反応させて所望の化合物を生じさせる。
て説明する。基本的には、６−クロログアニンまたは６
−クロロプリンを、アミノ酸先駆体（グルタチオン、シ
ステイニルグリシン、Ｎ−アセチル−し−ノステインま
たはシスティンアルキルエステル、たとえば、システィ
ンメチルエステルまたはシスティンエチルエステル）と
特定の条件下で反応させて所望の化合物を生じさせる。
次に化合物はう１トの腎臓で試験することかできる。
見μ
６−クロロプリン、６−クロログアニン、グルタチオン
、システイニルグリシン、Ｎ−アセチル−Ｌ−システィ
ン、６−メルカプトプリンおよび２−クロロベシゾチア
ゾールは、アルドリッヒケミカル社（Ａｌｄｒｉｃｈ
ＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ、）ｌミルウオ−キー ウイス
コンンン州（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ ＷＩ）ｌから得ら
れる。セフアゾｙクス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）ＬＨ−２０
は、ファーマシア社（Ｐｈａｒｍａｃ゛ｉａ、 Ｉ
ｎｃ、）１ビスカツタウエイ、ニューシャーシー州（Ｐ
ｉｓｃａｔａｗａｙ、？１；Ｊ）ｌ から供給された。
、システイニルグリシン、Ｎ−アセチル−Ｌ−システィ
ン、６−メルカプトプリンおよび２−クロロベシゾチア
ゾールは、アルドリッヒケミカル社（Ａｌｄｒｉｃｈ
ＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ、）ｌミルウオ−キー ウイス
コンンン州（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ ＷＩ）ｌから得ら
れる。セフアゾｙクス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）ＬＨ−２０
は、ファーマシア社（Ｐｈａｒｍａｃ゛ｉａ、 Ｉ
ｎｃ、）１ビスカツタウエイ、ニューシャーシー州（Ｐ
ｉｓｃａｔａｗａｙ、？１；Ｊ）ｌ から供給された。
Ｌ−ノスナイン、アミノキシ酢酸、システィンメチルエ
ステル、システィンエチルエステルおよびラン由来血清
アルブミン！よ、／クマケミカル７１（Ｓｉｇｍａ
Ｃｂｅｍｉｃａｌ Ｃｏ、）Ｉセントルイス、ミスリ
ー州（Ｓ １．Ｌｏｕ ｉ ｓ、ＭＯ）１から購入でき
る。酵素活性の標準として、Ｓ−Ｌ２−へシンルチアヅ
リル］−Ｌ−システィン（ｒＢＴＣ，＞を、デイ−、ト
ーン（Ｄ、Ｄｏｈｎ）らの１２０ Ａｎａｌ、、Ｂｉ
ｏｃｈｅｍ、３７９−３８６ （１９８２）に既に記載
しであるようにして＄備した。プロトンＮ Ｍ Ｒの供
給は、ウィルマドグラス社（Ｗｉｌｍａｄ Ｇｌａｓ
ｓ Ｃｏ、）１ブエナ、ニューシャーシー州（Ｂｕｅ
ｎａ、ＮＪ）ｌ より得た。他のシステイニルアルキル
エステル出発化合物は、標準的なエステル形成反応を用
いることにより製造できる。すへての他の試薬は、商業
的に入手できる最高グレートとした。
ステル、システィンエチルエステルおよびラン由来血清
アルブミン！よ、／クマケミカル７１（Ｓｉｇｍａ
Ｃｂｅｍｉｃａｌ Ｃｏ、）Ｉセントルイス、ミスリ
ー州（Ｓ １．Ｌｏｕ ｉ ｓ、ＭＯ）１から購入でき
る。酵素活性の標準として、Ｓ−Ｌ２−へシンルチアヅ
リル］−Ｌ−システィン（ｒＢＴＣ，＞を、デイ−、ト
ーン（Ｄ、Ｄｏｈｎ）らの１２０ Ａｎａｌ、、Ｂｉ
ｏｃｈｅｍ、３７９−３８６ （１９８２）に既に記載
しであるようにして＄備した。プロトンＮ Ｍ Ｒの供
給は、ウィルマドグラス社（Ｗｉｌｍａｄ Ｇｌａｓ
ｓ Ｃｏ、）１ブエナ、ニューシャーシー州（Ｂｕｅ
ｎａ、ＮＪ）ｌ より得た。他のシステイニルアルキル
エステル出発化合物は、標準的なエステル形成反応を用
いることにより製造できる。すへての他の試薬は、商業
的に入手できる最高グレートとした。
５−６−プリニル−し−システィンの合成６−クロロプ
リン（１５２ｍｇ：１．０ミリモル）およびＬ−システ
ィン（１８２ｍｇ：１．５ミリモル）を、ＩＮのＮａＯ
Ｈ溶液２．５ｍｌとメタノール２．５ｍｌとの混合物に
溶解させた。
リン（１５２ｍｇ：１．０ミリモル）およびＬ−システ
ィン（１８２ｍｇ：１．５ミリモル）を、ＩＮのＮａＯ
Ｈ溶液２．５ｍｌとメタノール２．５ｍｌとの混合物に
溶解させた。
これにより、システィンの２ナトリウム塩による塩素の
置換が起こった。次に、この反応混合物を窒素下に保ち
、水浴中で、連続的に撹拌させなから５０℃で４５分間
加熱した。反応混合物は、半分取逆相ＨＰＬＣを用いる
かまたは低圧セフアゾｌシス（ｌｏｗ ｐｒｅｓｓｕ
ｒｅ ５ｅｐｈａｄｅｘ）ＬＨ−２０クロマトグラフ
イーにより５−６−プリニル−し−システィン（ｒＰｃ
−）か単離されるまで水浴に保持した。
置換が起こった。次に、この反応混合物を窒素下に保ち
、水浴中で、連続的に撹拌させなから５０℃で４５分間
加熱した。反応混合物は、半分取逆相ＨＰＬＣを用いる
かまたは低圧セフアゾｌシス（ｌｏｗ ｐｒｅｓｓｕ
ｒｅ ５ｅｐｈａｄｅｘ）ＬＨ−２０クロマトグラフ
イーにより５−６−プリニル−し−システィン（ｒＰｃ
−）か単離されるまで水浴に保持した。
セファデックスＬＨ−２０クロマトグラフィーを室温で
行ったとき、セファデックスＬＨ−２０クロマトグラフ
ィーに対し、反応混合物（ｐＨ１０，２〜１０．５）は
、ＰＣが明らかに不安定であることから、４℃に保った
２、２ｘ７６ｃｍセファデックスＬＨ−２０カラムに適
用した。生成物は、溶離剤として、ｐＨ１０，５にＩＮ
のＮａＯＨで調節した水を用いて反応混合物から分離さ
せた。流速は、０．６８ｍ１／分とし、５分間留分を、
留分コレクターを用いて集めた。生成物を含む留分５５
〜６２を一緒にし、凍結乾燥し、２０°Ｃてデシケータ
−に保存した。化合物の収率は約１５％であった。
行ったとき、セファデックスＬＨ−２０クロマトグラフ
ィーに対し、反応混合物（ｐＨ１０，２〜１０．５）は
、ＰＣが明らかに不安定であることから、４℃に保った
２、２ｘ７６ｃｍセファデックスＬＨ−２０カラムに適
用した。生成物は、溶離剤として、ｐＨ１０，５にＩＮ
のＮａＯＨで調節した水を用いて反応混合物から分離さ
せた。流速は、０．６８ｍ１／分とし、５分間留分を、
留分コレクターを用いて集めた。生成物を含む留分５５
〜６２を一緒にし、凍結乾燥し、２０°Ｃてデシケータ
−に保存した。化合物の収率は約１５％であった。
半分取ＨＰＬＣによる化合物の単離に対し、反応混合物
のサンプル（酢酸によりｐＨ５〜６に調節）を、ベック
マン（Ｂｅｃｋｍａｎ）１１４ＭＨＰＬＣポンプ、レオ
ジン（Ｒｈｅｏｄｙｎｅ）注入弁、３ｃｍの長さのＣ−
１８ガートカラム、スペクトロ７０−（Ｓｐｅｃｔｒｏ
ｆ ｌｏｗ）７５７可変波長検出器（クラトスアナリテ
ィカル社、ニューシャーシー（Ｋｒａｔｏｓ Ａｎａ
ｌｙｔｉｃａｌ Ｉｎｃ、 ＮＪ）ｌおよび４２７
０５Ｐ積分器（スペクトラフィジックス社（Ｓｐｅｃｔ
ｒａ Ｐｈｙｓｉｃｓ ｒｎｃｌ、ＮＪ）ｌに取り
付けたホワットマンパティシル（Ｗｈａｔｍａｎ Ｐ
ａｒｔｉｓｉｌ）１０ ００５ ３マグナム−９ＨＰＬ
Ｃカラム（９，４ｍｍｘ２５０ｍｍ）に適用した。溶離
剤は、アセトニトリル 水（１０：９０容量／容量％）
二流速は、２，０ｍ１７分：検知波長は、２６６ｍｍと
した。生成物を含む留分（保持時間１１〜１２分ンを集
め、凍結乾燥するまで水上に保持した。
のサンプル（酢酸によりｐＨ５〜６に調節）を、ベック
マン（Ｂｅｃｋｍａｎ）１１４ＭＨＰＬＣポンプ、レオ
ジン（Ｒｈｅｏｄｙｎｅ）注入弁、３ｃｍの長さのＣ−
１８ガートカラム、スペクトロ７０−（Ｓｐｅｃｔｒｏ
ｆ ｌｏｗ）７５７可変波長検出器（クラトスアナリテ
ィカル社、ニューシャーシー（Ｋｒａｔｏｓ Ａｎａ
ｌｙｔｉｃａｌ Ｉｎｃ、 ＮＪ）ｌおよび４２７
０５Ｐ積分器（スペクトラフィジックス社（Ｓｐｅｃｔ
ｒａ Ｐｈｙｓｉｃｓ ｒｎｃｌ、ＮＪ）ｌに取り
付けたホワットマンパティシル（Ｗｈａｔｍａｎ Ｐ
ａｒｔｉｓｉｌ）１０ ００５ ３マグナム−９ＨＰＬ
Ｃカラム（９，４ｍｍｘ２５０ｍｍ）に適用した。溶離
剤は、アセトニトリル 水（１０：９０容量／容量％）
二流速は、２，０ｍ１７分：検知波長は、２６６ｍｍと
した。生成物を含む留分（保持時間１１〜１２分ンを集
め、凍結乾燥するまで水上に保持した。
４．６ｘ２５０ｍｍホワノトマンＯＤＳ １．Ｏｕｍ
カラムを用い、流速をＬｍ ｌ／分とする点を別として
、半分取ＨＰＬＣについて説明したように分析用のＨＰ
ＬＣ分析を行った。
カラムを用い、流速をＬｍ ｌ／分とする点を別として
、半分取ＨＰＬＣについて説明したように分析用のＨＰ
ＬＣ分析を行った。
ＴＬＣは、イソプロパツール：水、水酸化アンモニウム
（９２・１容量／容量／容量）で２５０ｕｍシリカケル
ＧＦｌｌｌｉｊ ＋アナルテック社、プラウエア州（Ａ
ｎａｌｔｅｃｈ Ｉｎｃ、ＤＥ）１を用いて展開させ
た。生成物は、ＵＶ光（ＰＣは、２８４ｎｍて最大ＵＶ
吸収を有した：第３図）またはニンヒドリンスプレーに
より視覚化された。
（９２・１容量／容量／容量）で２５０ｕｍシリカケル
ＧＦｌｌｌｉｊ ＋アナルテック社、プラウエア州（Ａ
ｎａｌｔｅｃｈ Ｉｎｃ、ＤＥ）１を用いて展開させ
た。生成物は、ＵＶ光（ＰＣは、２８４ｎｍて最大ＵＶ
吸収を有した：第３図）またはニンヒドリンスプレーに
より視覚化された。
生成物、６−クロロプリン、Ｌ−システィンおよびＬ−
シスチンのＲｆ値は、示した溶剤システムで、それぞれ
０．４２．０．６７．０．０５および０．２であった。
シスチンのＲｆ値は、示した溶剤システムで、それぞれ
０．４２．０．６７．０．０５および０．２であった。
腎臓での試験
雄のスプラグーダウリイ（Ｓｐｒａｑｕｅ−Ｄａ ｗ
ｌ ｅ ｙ ）ラット（２５０〜３５０ｇ）（チャール
スリバー試験所、ウイルミントン、マサチューセｙツ（
Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒ
ｉｅｓ、 Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、 ＭＡ）ｌ を
断頭により死なせ、腎臓を取り出した。
ｌ ｅ ｙ ）ラット（２５０〜３５０ｇ）（チャール
スリバー試験所、ウイルミントン、マサチューセｙツ（
Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒ
ｉｅｓ、 Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、 ＭＡ）ｌ を
断頭により死なせ、腎臓を取り出した。
デイ−、トーン（Ｄ、Ｄｏｈｎ） らの１２０ Ａｎ
ａｌ。Ｂｉｏｃｈｅｍ、３７９ ３８６ （１９８２）
に記載しであるようにして遠心分離によるサブセルラー
分別（ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ ｆｒａｃｔｉｎａｔ
ｉｏｎ）を行った。これらのサブセルラー留分はさらに
精製せずに酵素給源として用いた。異なる留分の蛋白質
製炭を、オー、ロウリー（０，Ｌｏｗｒｙ） らの１
９３ Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、２６５−２７５ （
１９５１）の手順にしたがい牛由来血清アルブミンを標
準として測定した。
ａｌ。Ｂｉｏｃｈｅｍ、３７９ ３８６ （１９８２）
に記載しであるようにして遠心分離によるサブセルラー
分別（ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ ｆｒａｃｔｉｎａｔ
ｉｏｎ）を行った。これらのサブセルラー留分はさらに
精製せずに酵素給源として用いた。異なる留分の蛋白質
製炭を、オー、ロウリー（０，Ｌｏｗｒｙ） らの１
９３ Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、２６５−２７５ （
１９５１）の手順にしたがい牛由来血清アルブミンを標
準として測定した。
最終的な量の１．２ｍｌ中に、それぞれの製置試験管は
、硼酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ８，６，０，１モル）：
プロドラッグ（３ミリモル）：および腎臓ホモジネート
（４ｍｇ／ｍｌ）を含んだ。
、硼酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ８，６，０，１モル）：
プロドラッグ（３ミリモル）：および腎臓ホモジネート
（４ｍｇ／ｍｌ）を含んだ。
いくつかの試験管は、１ミリモルのアミノオキシ酢酸（
β−リアーゼの抑制剤）を含んだ。対照製置は、酵素を
加えないで行った。酵素反応は、連続的に振盪させつつ
、タブノフ（Ｄａｂｎｏｆｆ）代謝インキュヘータ中で
３７℃で２０分間行った。
β−リアーゼの抑制剤）を含んだ。対照製置は、酵素を
加えないで行った。酵素反応は、連続的に振盪させつつ
、タブノフ（Ｄａｂｎｏｆｆ）代謝インキュヘータ中で
３７℃で２０分間行った。
反応は、試験管を水のうえに！いてから、０．２部ｍの
アクｏ （Ａｃ ｒ ｏ） ＬＣ１３１１１フイルター
（ＶＷＲサイエンティフィック社、シカゴ（ＭＷＲ５ｃ
ｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｃ、、Ｃｈｉｃａｇｏ）で濾
過して終わらせた。ＨＬＰＣ分析は、基準として６−メ
ルカプトプリンの信頼のおけるサンプルの追加の使用に
より前記したようにして行った。
アクｏ （Ａｃ ｒ ｏ） ＬＣ１３１１１フイルター
（ＶＷＲサイエンティフィック社、シカゴ（ＭＷＲ５ｃ
ｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｃ、、Ｃｈｉｃａｇｏ）で濾
過して終わらせた。ＨＬＰＣ分析は、基準として６−メ
ルカプトプリンの信頼のおけるサンプルの追加の使用に
より前記したようにして行った。
腎臓β−リアーゼの活性は、プロドラッグを基質として
測定し、生成した６−メルカプトプリンの量は、ＨＰＬ
Ｃにより測定した。アッセイ混合物は、最終量２ｍｌ中
に、プロトラッグ（２〜１０ミリモル）、硼酸ナトリウ
ム緩衝液（ｐＨ８゜６：０．１モル）および酵素溶液（
０，６〜１゜２ｍｇ／ｍｌ）を含んでいた。反応混合物
は、３７℃で２０分間ｆＡｉ！シてから、反応を前記の
ようにして終わらせた。ろ液の１部（２Ｑｕｌ）をＨＰ
ＬＣンステムに注入した。６−メルカポトプリンビーク
のピーク面積をプロットすることにより得た標準曲線は
、温室混合物の６−メルカプトプリン１〜３５０ｕＭの
範囲で直線であった。
測定し、生成した６−メルカプトプリンの量は、ＨＰＬ
Ｃにより測定した。アッセイ混合物は、最終量２ｍｌ中
に、プロトラッグ（２〜１０ミリモル）、硼酸ナトリウ
ム緩衝液（ｐＨ８゜６：０．１モル）および酵素溶液（
０，６〜１゜２ｍｇ／ｍｌ）を含んでいた。反応混合物
は、３７℃で２０分間ｆＡｉ！シてから、反応を前記の
ようにして終わらせた。ろ液の１部（２Ｑｕｌ）をＨＰ
ＬＣンステムに注入した。６−メルカポトプリンビーク
のピーク面積をプロットすることにより得た標準曲線は
、温室混合物の６−メルカプトプリン１〜３５０ｕＭの
範囲で直線であった。
腎臓β−リアーゼに対する基質としてのプロドラッグの
有効性を測定するため、６−メルカプトプリンの生成の
割合を、原形β−リアーゼ基質；２メルカプトベンゾチ
アゾール（デー、トーン（Ｄ。
有効性を測定するため、６−メルカプトプリンの生成の
割合を、原形β−リアーゼ基質；２メルカプトベンゾチ
アゾール（デー、トーン（Ｄ。
Ｄｏｈｎ） ら、１２０ Ａｎａｌ、Ｂｉｏｃｈｅｍ
、３７９−３８６ （１９８２）ｌを形成するＢＴＣ（
０，１モルの硼酸ナトリウム中の０．５〜６ミリモル、
ｐＨ８，６）］の代謝の割合と比較した。
、３７９−３８６ （１９８２）ｌを形成するＢＴＣ（
０，１モルの硼酸ナトリウム中の０．５〜６ミリモル、
ｐＨ８，６）］の代謝の割合と比較した。
本発明者の研究は、６−メルカプトプリンが、プロドラ
ッグのβ−リアーゼ依存代謝により生成することを示し
ている。さらに研究したところ、β−メルカプトプリン
の形成は、温置時間および基質と蛋白質の濃度に依存す
ることを示した。各種腎臓の分別の結果は、プロドラッ
グを基質として各種のサブセルラー留分のβ−リアーゼ
活性を示し、プロドラッグ依存β−リアーセ活性のほと
んとか、サイトツル留分およびミトコンドリア留分に存
在したことを示した。これらの結果は、腎臓β−リナー
セのサブセルラーの局在（Ｉｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ）
と一致する。
ッグのβ−リアーゼ依存代謝により生成することを示し
ている。さらに研究したところ、β−メルカプトプリン
の形成は、温置時間および基質と蛋白質の濃度に依存す
ることを示した。各種腎臓の分別の結果は、プロドラッ
グを基質として各種のサブセルラー留分のβ−リアーゼ
活性を示し、プロドラッグ依存β−リアーセ活性のほと
んとか、サイトツル留分およびミトコンドリア留分に存
在したことを示した。これらの結果は、腎臓β−リナー
セのサブセルラーの局在（Ｉｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ）
と一致する。
アミノ酸誘導体を濃縮する腎臓の能力は、腎臓の近位管
状細胞（ｐｒｏｘｉｍａｌ ｔｕｂｕｌａｒ ｃｅ
ｌｌ）ｌここでは、プロドラッグがβ−リアーセ（さら
には、他の）要な酵素）により代謝されて６−メルカプ
トプリンまたは６−チオグアニンになる１中のプロドラ
ッグの蓄積をもたらすことになる。腎臓が、６−メルカ
プトプリンの高い濃度にさらされるようになることが体
の他の部分をそのような化合物の不利な濃度にさらすこ
となく起こる。このこと（ま、ラットの生体内での実験
で確かめられた。
状細胞（ｐｒｏｘｉｍａｌ ｔｕｂｕｌａｒ ｃｅ
ｌｌ）ｌここでは、プロドラッグがβ−リアーセ（さら
には、他の）要な酵素）により代謝されて６−メルカプ
トプリンまたは６−チオグアニンになる１中のプロドラ
ッグの蓄積をもたらすことになる。腎臓が、６−メルカ
プトプリンの高い濃度にさらされるようになることが体
の他の部分をそのような化合物の不利な濃度にさらすこ
となく起こる。このこと（ま、ラットの生体内での実験
で確かめられた。
特許請求の範囲の化合物を合成するのには、５（６−プ
リニル）−Ｎ−アセチル−し−システィン：５−（６−
プリニル）−システイニル−グリシン；５−（６−プリ
ニル）−グルタチオン５−（６−プリニル）−システィ
ンメチルエステル、５−（６−プリニル）−システィン
−エチルエステル、他の５−（６−プリニル）−システ
ィンアルキルエステル；５−（６−グアニル）−Ｎアセ
チル−し−システィン；５−（６−グアニル）−システ
イニルグリシン：５−（６−グアニル）−システィンメ
チルエステル；５−（６−グアニル）−システィンエチ
ルエステル、他の５−（６−グアニル）−システィンア
ルキルエステル：および５−（６−グアニル）−グルタ
チオンを得るのと間様な条件下で、５−クロロプリンま
たは６−クロログアニンを、先駆チオ化合物（Ｌ−シス
ティン、グルタチオン、システイニル−グリシン、シス
ティンメチルエステル、システィンエチルエステル、他
のシスティンアルキルエステルまたはＮ−アセチル−し
−システィン）と反応させる。５−（６−グアニル）−
Ｌ−システィンもつくらることかできる。
リニル）−Ｎ−アセチル−し−システィン：５−（６−
プリニル）−システイニル−グリシン；５−（６−プリ
ニル）−グルタチオン５−（６−プリニル）−システィ
ンメチルエステル、５−（６−プリニル）−システィン
−エチルエステル、他の５−（６−プリニル）−システ
ィンアルキルエステル；５−（６−グアニル）−Ｎアセ
チル−し−システィン；５−（６−グアニル）−システ
イニルグリシン：５−（６−グアニル）−システィンメ
チルエステル；５−（６−グアニル）−システィンエチ
ルエステル、他の５−（６−グアニル）−システィンア
ルキルエステル：および５−（６−グアニル）−グルタ
チオンを得るのと間様な条件下で、５−クロロプリンま
たは６−クロログアニンを、先駆チオ化合物（Ｌ−シス
ティン、グルタチオン、システイニル−グリシン、シス
ティンメチルエステル、システィンエチルエステル、他
のシスティンアルキルエステルまたはＮ−アセチル−し
−システィン）と反応させる。５−（６−グアニル）−
Ｌ−システィンもつくらることかできる。
ホモシスティン変種をつくるのには、Ｓ−（６ブリニル
）−Ｌ−ホモシスティン（化合物Ｈ１）を製造すること
から始める。これを行うためには、ナトリウム金属を、
液体アンモニア（１５０ｍｌ）にＬ−ホモシステイン１
シグマ化学社（Ｓ ｉ ｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ
Ｃｏ、）：２ミリモル）を含む撹拌した溶液にゆっ
くりと加え、青色が１０分間持続するようにした。アン
モニアの蒸発後に得られる白色の固体を、ＥＤＴＡ （
エチレンジアミン四酢酸；アルドリッヒ化学社（Ａｌｄ
ｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ、 ） ：５ｍ
ｇ１を含む１５ｍ１の水に溶解させた。６−クロロプリ
ン（２ミリモル：アルドリッヒ化学社）を加えてから、
得られる溶液のＥ）Ｈを、水酸化ナトリウム（アルトリ
ッヒ化学社）の１０９１ｉ溶液を用いて、１０．８に調
節した。
）−Ｌ−ホモシスティン（化合物Ｈ１）を製造すること
から始める。これを行うためには、ナトリウム金属を、
液体アンモニア（１５０ｍｌ）にＬ−ホモシステイン１
シグマ化学社（Ｓ ｉ ｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ
Ｃｏ、）：２ミリモル）を含む撹拌した溶液にゆっ
くりと加え、青色が１０分間持続するようにした。アン
モニアの蒸発後に得られる白色の固体を、ＥＤＴＡ （
エチレンジアミン四酢酸；アルドリッヒ化学社（Ａｌｄ
ｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ、 ） ：５ｍ
ｇ１を含む１５ｍ１の水に溶解させた。６−クロロプリ
ン（２ミリモル：アルドリッヒ化学社）を加えてから、
得られる溶液のＥ）Ｈを、水酸化ナトリウム（アルトリ
ッヒ化学社）の１０９１ｉ溶液を用いて、１０．８に調
節した。
２．７時間還流後、反応混合物を室温まで冷却してから
、トリフルオロ酢酸（アルドリッヒ化学社）の２０％溶
液を用いてｐＨを２．７に調節した。反応混合物の各部
分（それぞれ２ｍ１）をファーマシア（Ｐｈａ ｒｍａ
ｃ １ａ）ＫＸ２６コラムに適用し、溶離剤として水（
ｐＨ２，５）を用いて生成物を分離させた。流速は、２
．５ｍｌ／分で１． ｔ、； Ｖ−検出は、２５４ ｎ
ｍで、Ｖｅは、４５８ｍ１とした。集めたものを一緒に
してから凍結乾燥させ、デシケータ−に保存した。
、トリフルオロ酢酸（アルドリッヒ化学社）の２０％溶
液を用いてｐＨを２．７に調節した。反応混合物の各部
分（それぞれ２ｍ１）をファーマシア（Ｐｈａ ｒｍａ
ｃ １ａ）ＫＸ２６コラムに適用し、溶離剤として水（
ｐＨ２，５）を用いて生成物を分離させた。流速は、２
．５ｍｌ／分で１． ｔ、； Ｖ−検出は、２５４ ｎ
ｍで、Ｖｅは、４５８ｍ１とした。集めたものを一緒に
してから凍結乾燥させ、デシケータ−に保存した。
チオグアニン変種（化合物Ｈ２）の合成は、６−クロロ
プリンの代わりに６−クロログアニン（アルトリッヒ化
学社）を用いて達成できる。Ｒ１が、ｉ１ −ＣＩ−Ｃｏｏｌ であるホモシスティン化合物（それぞれ化合物Ｈ３およ
びＨ４）の合成は、エム、ウイニッツ（Ｍ。
プリンの代わりに６−クロログアニン（アルトリッヒ化
学社）を用いて達成できる。Ｒ１が、ｉ１ −ＣＩ−Ｃｏｏｌ であるホモシスティン化合物（それぞれ化合物Ｈ３およ
びＨ４）の合成は、エム、ウイニッツ（Ｍ。
Ｗｉｎｉｔｚ） らの７８ Ｊ、Ａｍｅｒ、Ｃｈｅ
ｍ、Ｓａｃ、２４２３−２４３０（１９５６）の方法の
変形により達成できる。亜硝酸ナトリウム（アルトリッ
ヒ化学社）を化合物Ｈ１およびＨ２である関連する化合
物の合成は、フレミー塩を化合物Ｈ３およびＨ４とそれ
ぞれ反応させることによりｉ！成され得る。ニー、ガル
シアーラフォ（Ａ。
ｍ、Ｓａｃ、２４２３−２４３０（１９５６）の方法の
変形により達成できる。亜硝酸ナトリウム（アルトリッ
ヒ化学社）を化合物Ｈ１およびＨ２である関連する化合
物の合成は、フレミー塩を化合物Ｈ３およびＨ４とそれ
ぞれ反応させることによりｉ！成され得る。ニー、ガル
シアーラフォ（Ａ。
Ｇａｒｃｉａ−Ｒａｆｏ） ら、５１ Ｊ、Ｏｒｇ
。
。
Ｃｎｅｍ、４２８５ （１９８６）を参照されたい。
追加の試験
Ｓ−プリニル−Ｌ−グルタチオン（０，８ミリモル／ｋ
ｇ、ｉ、ｐ、）てのラット（生体内）の処理の後３０分
て、６−メルカプトプリンおよびその代謝書物である６
−チオ尿酸および６−メチルメルカプトプリンが腎臓で
、濃度１はぼ２０ｎｍＯ１代謝産物／湿潤組１ｍ １
ｇのｓｒｘで検出された。
ｇ、ｉ、ｐ、）てのラット（生体内）の処理の後３０分
て、６−メルカプトプリンおよびその代謝書物である６
−チオ尿酸および６−メチルメルカプトプリンが腎臓で
、濃度１はぼ２０ｎｍＯ１代謝産物／湿潤組１ｍ １
ｇのｓｒｘで検出された。
これらの化合物はこの実験では血漿または肝に全く検出
されなかった（しかしながら、いくつかの投与、キルタ
イム（ｋｉｌｌ ｔｉｍｅ）および他のプロトラッグ
ては、少量の６−メルカブトプＪンか血漿または肝で検
出され得る） Ｓ−（プリニル）−Ｌ−グルタチオンでのラットの処理
債２４時間で、Ｓ−（プリニル）−Ｎアでチル−トーン
スティンまたはＳ−（プリニル）Ｌ−ノステイノエチル
エステル（０，４ミリモル／ｋｇ、ｉ、ｐ、） 、６−
メルカ・プトブリシおよびその代謝産物か、それぞれ理
論的に可能な投与量の４．２および１％の相当するレベ
ルでそれぞれ尿中に存在した。
されなかった（しかしながら、いくつかの投与、キルタ
イム（ｋｉｌｌ ｔｉｍｅ）および他のプロトラッグ
ては、少量の６−メルカブトプＪンか血漿または肝で検
出され得る） Ｓ−（プリニル）−Ｌ−グルタチオンでのラットの処理
債２４時間で、Ｓ−（プリニル）−Ｎアでチル−トーン
スティンまたはＳ−（プリニル）Ｌ−ノステイノエチル
エステル（０，４ミリモル／ｋｇ、ｉ、ｐ、） 、６−
メルカ・プトブリシおよびその代謝産物か、それぞれ理
論的に可能な投与量の４．２および１％の相当するレベ
ルでそれぞれ尿中に存在した。
ラットに５−（６−プリニル）−ホそシスチン（０，４
ミリモル／ ｋ ｇ ）を与えたところ、２４時間後処
理で尿に検出された６−メルカプトプリンおよびその代
謝の生成物の量は、５−（６−プリニル）−Ｌ−システ
ィンに対して見付は出される量の４倍に相当するレベル
であった。
ミリモル／ ｋ ｇ ）を与えたところ、２４時間後処
理で尿に検出された６−メルカプトプリンおよびその代
謝の生成物の量は、５−（６−プリニル）−Ｌ−システ
ィンに対して見付は出される量の４倍に相当するレベル
であった。
ラットにホモシスティン変種（０，８ミリモル／ｋｇ、
ｉ、ｐ、）を与えた場合、３０分の後処理で肝および腎
臓に存在する代謝産物（６−メルカプトプリン、６−メ
チルメルカプトプリンおよび６−チオ尿酸）の濃度は、
それぞれほぼ１０および９０ｎｍｏｌ／湿潤組織１ｇで
あった。血漿には、代謝産物は検出されなかった。これ
らの結果は、この化合物が、６−メルカプトプリンの選
択的腎臓先駆体であることを示している。
ｉ、ｐ、）を与えた場合、３０分の後処理で肝および腎
臓に存在する代謝産物（６−メルカプトプリン、６−メ
チルメルカプトプリンおよび６−チオ尿酸）の濃度は、
それぞれほぼ１０および９０ｎｍｏｌ／湿潤組織１ｇで
あった。血漿には、代謝産物は検出されなかった。これ
らの結果は、この化合物が、６−メルカプトプリンの選
択的腎臓先駆体であることを示している。
多数の酵素が６−メルカプトプリンまたは６−チオグア
ニンの放出を調節するようにするこの概念は、高實に有
利なシステムを提供し、向上した特異性をもったプロト
ラッグを生しさせる。チオグアニンプロドラフグもかな
り望ましい。
ニンの放出を調節するようにするこの概念は、高實に有
利なシステムを提供し、向上した特異性をもったプロト
ラッグを生しさせる。チオグアニンプロドラフグもかな
り望ましい。
以上の記載は本発明の単なる好ましい実施例であること
か理解されよう。多くの他の変更態様および変形は本発
明の範囲にはいり、特許請求の範囲に入るものであるも
のである。たとえば、Ｌ立体化学と区別されるＤＬも含
まれる。放射能でラベルした変種のような同等なものも
含まれる。本発明の範囲の判断は特許請求の範囲を見る
ようにされたい。
か理解されよう。多くの他の変更態様および変形は本発
明の範囲にはいり、特許請求の範囲に入るものであるも
のである。たとえば、Ｌ立体化学と区別されるＤＬも含
まれる。放射能でラベルした変種のような同等なものも
含まれる。本発明の範囲の判断は特許請求の範囲を見る
ようにされたい。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 （１）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ｛式中、Ｒ＿１は、ＨおよびＮＨ＿２からなる群から選
択され、Ｒ＿２は、 ▲数式、化学式、表等があります▼ および▲数式、化学式、表等があります▼（ここで、Ｒ
＿３は、アルキルである）からなる群から選択される｝
を有する化合物。 （２）Ｒ＿３が、−ＣＨ＿３および−ＣＨ＿２ＣＨ＿３
からなる群から選択される請求項（１）記載の化合物。 （３）Ｒ＿１が、Ｈであり、Ｒ＿２が、▲数式、化学式
、表等があります▼である請求項（２）記載の化合物。 （４）Ｒ＿１が、Ｈであり、Ｒ＿２が、 ▲数式、化学式、表等があります▼ である請求項（２）記載の化合物。 （５）Ｒ＿１が、Ｈであり、Ｒ＿２が、 ▲数式、化学式、表等があります▼ である請求項（２）記載の化合物。 （６）Ｒ＿１が、Ｈであり、Ｒ＿２が、 ▲数式、化学式、表等があります▼ である請求項（２）記載の化合物。 （７）Ｒ＿１が、Ｈであり、Ｒ＿２が、 ▲数式、化学式、表等があります▼ である請求項（２）記載の化合物。 （８）Ｒ＿１が、ＮＨ＿２であり、Ｒ＿２が、▲数式、
化学式、表等があります▼ である請求項（２）記載の化合物。 （９）Ｒ＿１が、ＮＨ＿２であり、Ｒ＿２が、▲数式、
化学式、表等があります▼ である請求項（２）記載の化合物。 （１０）Ｒ＿１が、ＮＨ＿２であり、Ｒ＿２が、▲数式
、化学式、表等があります▼ である請求項（２）記載の化合物。 （１１）Ｒ＿１が、ＮＨ＿２であり、Ｒ＿２が、▲数式
、化学式、表等があります▼ である請求項（２）記載の化合物。 （１２）Ｒ＿１が、ＮＨ＿２であり、Ｒ＿２が、▲数式
、化学式、表等があります▼ である請求項（２）記載の化合物。 （１３）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＿１は、ＮＨ＿２であり、Ｒ＿２は、▲数式
、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼および▲数式、化学
式、表等があります▼（ここで、Ｒ＿３は、 アルキルである）からなる群から選択される）を有する
化合物。 （１４）Ｒ＿２が、▲数式、化学式、表等があります▼ である請求項（１３）記載の化合物。 （１５）６−メルカプトプリンおよび６−チオグアニン
からなる群から選択された化合物のレベルを哺乳類の腎
臓で上げる方法において、腎臓を請求項（１）の化合物
にさらす段階を含むことにより該レベルを上げることを
特徴とする方法。 （１６）６−メルカプトプリンのレベルを哺乳類の腎臓
で上げる方法において、腎臓を請求項（３）の化合物に
さらす段階を含むことにより該レベルを上げることを特
徴とする方法。 （１７）６−メルカプトプリンのレベルを哺乳類の腎臓
で上げる方法において、腎臓を請求項（４）の化合物に
さらす段階を含むことにより該レベルを上げることを特
徴とする方法。 （１８）６−メルカプトプリンのレベルを哺乳類の腎臓
で上げる方法において、腎臓を請求項（５）の化合物に
さらす段階を含むことにより該レベルを上げることを特
徴とする方法。 （１９）６−メルカプトプリンのレベルを哺乳類の腎臓
で上げる方法において、腎臓を請求項（６）の化合物に
さらす段階を含むことにより該レベルを上げることを特
徴とする方法。 （２０）６−メルカプトプリンのレベルを哺乳類の腎臓
で上げる方法において、腎臓を請求項（７）の化合物に
さらす段階を含むことにより該レベルを上げることを特
徴とする方法。 （２１）６−チオグアニンのレベルを哺乳類の腎臓で上
げる方法において、腎臓を請求項（８）の化合物にさら
す段階を含むことにより該レベルを上げることを特徴と
する方法。（２２）６−チオグアニンのレベルを哺乳類
の腎臓で上げる方法において、腎臓を請求項（９）の化
合物にさらす段階を含むことにより該レベルを上げるこ
とを特徴とする方法。（２３）６−チオグアニンのレベ
ルを哺乳類の腎臓で上げる方法において、腎臓を請求項
（１０）の化合物にさらす段階を含むことにより該レベ
ルを上げることを特徴とする方法。 （２４）６−チオグアニンのレベルを哺乳類の腎臓で上
げる方法において、腎臓を請求項（１１）の化合物にさ
らす段階を含むことにより該レベルを上げることを特徴
とする方法。 （２５）６−チオグアニンのレベルを哺乳類の腎臓で上
げる方法において、腎臓を請求項（１２）の化合物にさ
らす段階を含むことにより該レベルを上げることを特徴
とする方法。 （２６）６−チオグアニンのレベルを哺乳類の腎臓で上
げる方法において、腎臓を請求項（１４）の化合物にさ
らす段階を含むことにより該レベルを上げることを特徴
とする方法。 （２７）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ｛式中、Ｒ＿１は、ＨおよびＮＨ＿２からなる群から選
択され、Ｒ＿２は、 ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼（ここで、Ｒ＿３は
、アルキルである）；▲数式、化学式、表等があります
▼（ここで、Ｒ＿３は、アルキ ルである）；および ▲数式、化学式、表等があります▼からなる群から選択
される｝を有する化合物。 （２８）Ｒ＿１が、Ｈであり、Ｒ＿２が、▲数式、化学
式、表等があります▼である請求項（２７）記載の化合
物。 （２９）Ｒ＿２が、Ｈであり、Ｒ＿２が、▲数式、化学
式、表等があります▼である請求項（２７）記載の化合
物。 （３０）Ｒ＿１が、Ｈであり、Ｒ＿２が、▲数式、化学
式、表等があります▼である請求項（２７）記載の化合
物。 （３１）Ｒ＿１が、ＮＨ＿２であり、Ｒ＿２が、▲数式
、化学式、表等があります▼である請求項（２７）記載
の化合物。 （３２）Ｒ＿１が、ＮＨ＿２であり、Ｒ＿２が、▲数式
、化学式、表等があります▼である請求項（２７）記載
の化合物。 （３３）Ｒ＿１が、ＮＨ＿２であり、Ｒ＿２が、▲数式
、化学式、表等があります▼である請求項（２７）記載
の化合物。 （３４）６−メルカプトプリンのレベルを哺乳類の腎臓
で上げる方法において、腎臓を請求項（２８）の化合物
にさらす段階を含むことにより該レベルを上げることを
特徴とする方法。 （３５）６−メルカプトプリンのレベルを哺乳類の腎臓
で上げる方法において、腎臓を請求項（２９）の化合物
にさらす段階を含むことにより該レベルを上げることを
特徴とする方法。 （３６）６−メルカプトプリンのレベルを哺乳類の腎臓
で上げる方法において、腎臓を請求項（３０）の化合物
にさらす段階を含むことにより該レベルを上げることを
特徴とする方法。 （３７）６−チオグアニンのレベルを哺乳類の腎臓で上
げる方法において、腎臓を請求項（３１）の化合物にさ
らす段階を含むことにより該レベルを上げることを特徴
とする方法。 （３８）６−チオグアニンのレベルを哺乳類の腎臓で上
げる方法において、腎臓を請求項（３２）の化合物にさ
らす段階を含むことにより該レベルを上げることを特徴
とする方法。 （３９）６−チオグアニンのレベルを哺乳類の腎臓で上
げる方法において、腎臓を請求項（３３）の化合物にさ
らす段階を含むことにより該レベルを上げることを特徴
とする方法。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US43209889A | 1989-11-03 | 1989-11-03 | |
| US432,098 | 1989-11-03 | ||
| US542,664 | 1990-06-25 | ||
| US07/542,664 US5120740A (en) | 1989-11-03 | 1990-06-25 | Prodrugs of 6-mercaptopurine and 6-thioguanine |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03240789A true JPH03240789A (ja) | 1991-10-28 |
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Family Applications (1)
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1990
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