JPH03251185A - 耐熱性β―アミラーゼの製造方法 - Google Patents
耐熱性β―アミラーゼの製造方法Info
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- JPH03251185A JPH03251185A JP4847790A JP4847790A JPH03251185A JP H03251185 A JPH03251185 A JP H03251185A JP 4847790 A JP4847790 A JP 4847790A JP 4847790 A JP4847790 A JP 4847790A JP H03251185 A JPH03251185 A JP H03251185A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、耐熱性β−アミラーゼ遺伝子を導入したプラ
スミド、このプラスミドをバチルス プレビスに導入し
た形質転換体及びこの形質転換体を用いた耐熱性β−ア
ミラーゼの製造方法に関する。
スミド、このプラスミドをバチルス プレビスに導入し
た形質転換体及びこの形質転換体を用いた耐熱性β−ア
ミラーゼの製造方法に関する。
β−アミラーゼは、デンプンに作用してその非還元末端
からマルトース単位にα−１，４−グルコシド結合を切
断し、β−マルトースを生成する酵素である。
からマルトース単位にα−１，４−グルコシド結合を切
断し、β−マルトースを生成する酵素である。
現在、工業的には、約６０°Ｃで使用可能な大豆由来の
β−アミラーゼが主に使用されている。
β−アミラーゼが主に使用されている。
それに対して、本発明者らは、より高い温度で安定な耐
熱性β−アミラーゼについて研究し、耐熱性β−アミラ
ーゼの遺伝子の塩基配列を解明した〔特開平１−２１８
５８９号〕。
熱性β−アミラーゼについて研究し、耐熱性β−アミラ
ーゼの遺伝子の塩基配列を解明した〔特開平１−２１８
５８９号〕。
本発明の目的は、上記耐熱性β−アミラーゼの遺伝子を
用いて、耐熱性β〜アミラーゼを効率良く生産すること
である。
用いて、耐熱性β〜アミラーゼを効率良く生産すること
である。
本発明の目的は、より具体的には、耐熱性β−アミラー
ゼを効率良く生産することができる、耐熱性β−アミラ
ーゼの遺伝子を含むプラスミド、このプラスミドを導入
した微生物及びこの微生物を用いた耐熱性β−アミラー
ゼの製造方法を提供することにある。
ゼを効率良く生産することができる、耐熱性β−アミラ
ーゼの遺伝子を含むプラスミド、このプラスミドを導入
した微生物及びこの微生物を用いた耐熱性β−アミラー
ゼの製造方法を提供することにある。
本発明は、（ａ）枯草菌に生育し得るプラスミドに耐熱
性β−アミラーゼを導入したプラスミド、（ｂｌこのプ
ラスミドをバチルス プレビス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂ
ｒｅｖｉｓ） （以下、Ｂ、プレビスと略記することが
ある）に導入した形質転換体、及び（Ｃ）この形質転換
体を培養し、培養物から耐熱性β−アミラーゼを採取す
る耐熱性β−アミラーゼの製造方法に関する。
性β−アミラーゼを導入したプラスミド、（ｂｌこのプ
ラスミドをバチルス プレビス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂ
ｒｅｖｉｓ） （以下、Ｂ、プレビスと略記することが
ある）に導入した形質転換体、及び（Ｃ）この形質転換
体を培養し、培養物から耐熱性β−アミラーゼを採取す
る耐熱性β−アミラーゼの製造方法に関する。
以下本発明をさらに説明する。
（ａ）プラスミド
本発明のプラスミドは、枯草菌又はＢ、プレビスに生育
し得るプラスミドに耐熱性β−アミラーゼを導入したプ
ラスミドである。枯草菌に生育し得るプラスミドとして
は、ｐＵＢｌｌｏ、ｐｃ１９４、ｐＥ１９４等を例示で
きる。
し得るプラスミドに耐熱性β−アミラーゼを導入したプ
ラスミドである。枯草菌に生育し得るプラスミドとして
は、ｐＵＢｌｌｏ、ｐｃ１９４、ｐＥ１９４等を例示で
きる。
本発明のプラスミドは、上記枯草菌に生育し得るプラス
ミドに耐熱性β−アミラーゼを導入したプラスミドに、
Ｂ、プレビスの細胞壁タンパク質遺伝子の一部または全
部をさらに導入したプラスミドも包含する。Ｂ、プレビ
スの細胞壁タンパク質遺伝子の一部または全部を導入し
た枯草菌に生育し得るプラスミドとしては、プラスミド
ｐＮＵ２００を例示できる。
ミドに耐熱性β−アミラーゼを導入したプラスミドに、
Ｂ、プレビスの細胞壁タンパク質遺伝子の一部または全
部をさらに導入したプラスミドも包含する。Ｂ、プレビ
スの細胞壁タンパク質遺伝子の一部または全部を導入し
た枯草菌に生育し得るプラスミドとしては、プラスミド
ｐＮＵ２００を例示できる。
プラスミドｐＮＵ２００は、枯草菌のプラスミドである
ｐＵＢ １１０とＢ、プレビスの細胞壁タンパク質遺伝
子の５°位制御領域を含む多コピープラスミドであり、
鵜高重三、日本農芸化学会誌６１６６９ （１９８７）
及びＴ、カワズ（Ｋａｗａｚｕ）ら、Ｊ、Ｂａｃｔｅｒ
ｉｏｌ、、 １６９． １５６４（１９８７）に記載
の方法により得ることができる。
ｐＵＢ １１０とＢ、プレビスの細胞壁タンパク質遺伝
子の５°位制御領域を含む多コピープラスミドであり、
鵜高重三、日本農芸化学会誌６１６６９ （１９８７）
及びＴ、カワズ（Ｋａｗａｚｕ）ら、Ｊ、Ｂａｃｔｅｒ
ｉｏｌ、、 １６９． １５６４（１９８７）に記載
の方法により得ることができる。
一方、耐熱性β−アミラーゼ遺伝子は、クロストリジラ
ム サーモサルフロゲネス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍゲ
ネスと略記することがある）ＡＴＣＣ３３７３３から得
られ、例えばプラスミドｐＮＫ１に含まれている。ｐＮ
Ｋｌを例えば制限酵素ＭｆｌＩで切断することにより、
耐熱性β−アミラーゼ遺伝子を含むＤＮＡ断片を得るこ
とができる。尚、プラスミドｐＮＫ１は、特開平１−２
１８５８９号に記載の方法により得ることができる。
ム サーモサルフロゲネス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍゲ
ネスと略記することがある）ＡＴＣＣ３３７３３から得
られ、例えばプラスミドｐＮＫ１に含まれている。ｐＮ
Ｋｌを例えば制限酵素ＭｆｌＩで切断することにより、
耐熱性β−アミラーゼ遺伝子を含むＤＮＡ断片を得るこ
とができる。尚、プラスミドｐＮＫ１は、特開平１−２
１８５８９号に記載の方法により得ることができる。
本発明のプラスミドの１例として、上記プラスミドｐＮ
ＫｌのＭｆｌＩ−ＭｆｌＩ約３．６Ｋｂ断片の一部また
は全部を切出し、プラスミドｐＮＵ２００（７）Ｂａｍ
ＨＩ部位を連結することにより得られるプラスミドを挙
げられる。このようなプラスミドの内、ｐＮＫｌのＭｆ
ｌＩ−ＭｆｌＩ約３．６Ｋｂ断片の全部を含むプラスミ
ドを、以下ｐＭＭ１と呼ぶ。
ＫｌのＭｆｌＩ−ＭｆｌＩ約３．６Ｋｂ断片の一部また
は全部を切出し、プラスミドｐＮＵ２００（７）Ｂａｍ
ＨＩ部位を連結することにより得られるプラスミドを挙
げられる。このようなプラスミドの内、ｐＮＫｌのＭｆ
ｌＩ−ＭｆｌＩ約３．６Ｋｂ断片の全部を含むプラスミ
ドを、以下ｐＭＭ１と呼ぶ。
さらに本発明は、細胞壁タンパク質遺伝子の内、５８６
塩基以降の塩基を欠く細胞壁タンパク質遺伝子を含むプ
ラスミドｐＮＵ２００の細胞壁タンパク質遺伝子の直後
に耐熱性β−アミラーゼ構造遺伝子を連結したプラスミ
ドも包含する。このプラスミドを、以下ｐＭＭ２と呼ぶ
。
塩基以降の塩基を欠く細胞壁タンパク質遺伝子を含むプ
ラスミドｐＮＵ２００の細胞壁タンパク質遺伝子の直後
に耐熱性β−アミラーゼ構造遺伝子を連結したプラスミ
ドも包含する。このプラスミドを、以下ｐＭＭ２と呼ぶ
。
さらに本発明は、細胞壁タンパク質遺伝子の内、５１６
塩基以降の塩基を欠く細胞壁タンパク質遺伝子を含むプ
ラスミドｐＮＵ２００の細胞壁タンパク質遺伝子の直後
に耐熱性β−アミラーゼのシグナル遺伝子及び構造遺伝
子を連結したプラスミドも包含する。このプラスミドを
、以下ｐＭＭ３と呼ぶ。
塩基以降の塩基を欠く細胞壁タンパク質遺伝子を含むプ
ラスミドｐＮＵ２００の細胞壁タンパク質遺伝子の直後
に耐熱性β−アミラーゼのシグナル遺伝子及び構造遺伝
子を連結したプラスミドも包含する。このプラスミドを
、以下ｐＭＭ３と呼ぶ。
９ＭＭ２及びｐ Ｍ Ｍ ３は、以下のようにして調製
できる。
できる。
細胞壁タンパク質遺伝子のシグナル切断部位以前とβ−
アミラーゼのシグナル切断部位以後を合成りＮＡを用い
て結合させることにより、９ＭＭ２を構築することがで
きる。
アミラーゼのシグナル切断部位以後を合成りＮＡを用い
て結合させることにより、９ＭＭ２を構築することがで
きる。
また、両遺伝子の翻訳開始部位に制限酵素ＢｓｐＨＩの
認識部位を導入後、５ｐｅｌ−Ｂｓｐ旧、ＢｓｐＨｌ−
３ｐｈｌ断片をｐ Ｍ Ｍ ２の５ｐｅｌ −５ｐｈ１
部位に挿入することにより、ｐＭＭ３を構築することが
できる。
認識部位を導入後、５ｐｅｌ−Ｂｓｐ旧、ＢｓｐＨｌ−
３ｐｈｌ断片をｐ Ｍ Ｍ ２の５ｐｅｌ −５ｐｈ１
部位に挿入することにより、ｐＭＭ３を構築することが
できる。
（ｂ）上記プラスミドを導入した形質転換本発明は、上
記プラスミドを８．プレビスに導入した形質転換体も包
含する。Ｂ、プレビスとしては、例えば、４７に株（Ｆ
ＥＲＭ ＢＰ−２３０８）、４７株（ＦＥＲＭ Ｐ
−７２２４）、ＨＯ１４株（ＦＥＲＭ Ｐ−８８９１
）、８１４０２株（ＦＥＲＭ Ｐ−８８９２）、ＨＯ
２３株（Ｆ Ｅ ＲＭＰ−８８９３）、８１４４株等を
挙げることができる。
記プラスミドを８．プレビスに導入した形質転換体も包
含する。Ｂ、プレビスとしては、例えば、４７に株（Ｆ
ＥＲＭ ＢＰ−２３０８）、４７株（ＦＥＲＭ Ｐ
−７２２４）、ＨＯ１４株（ＦＥＲＭ Ｐ−８８９１
）、８１４０２株（ＦＥＲＭ Ｐ−８８９２）、ＨＯ
２３株（Ｆ Ｅ ＲＭＰ−８８９３）、８１４４株等を
挙げることができる。
さらに、本発明のプラスミドは、Ｂ、プレビス以外に、
枯草菌やその他、このプラスミドが生育し得る細菌中に
導入することもできる。そのような細菌とができる。
枯草菌やその他、このプラスミドが生育し得る細菌中に
導入することもできる。そのような細菌とができる。
本発明のプラスミドのＢ、プレビス等への導入は、Ｊ、
Ｂａｃｔｅｒ ｉｏ １． 、１５６ ：１１３０−
１１３４（１９８３）に記載の方法により行うことがで
きる。
Ｂａｃｔｅｒ ｉｏ １． 、１５６ ：１１３０−
１１３４（１９８３）に記載の方法により行うことがで
きる。
（Ｃ）耐熱性 −アミラーゼの製造方法さらに、本発明
は、上記本発明のプラスミドをＢ、プレビス等に導入し
た形質転換体を培養し、培養物から耐熱性β−アミラー
ゼを採取する耐熱性β−アミラーゼの製造方法も包含す
る。
は、上記本発明のプラスミドをＢ、プレビス等に導入し
た形質転換体を培養し、培養物から耐熱性β−アミラー
ゼを採取する耐熱性β−アミラーゼの製造方法も包含す
る。
本発明の形質転換体の培養は、例えばトリプトン、酵母
抽出物、カッオニキス等を含む培養液中、３０〜３７℃
、５〜６日間行うことが適当である。
抽出物、カッオニキス等を含む培養液中、３０〜３７℃
、５〜６日間行うことが適当である。
培養物からの耐熱性β−アミラーゼの採取は、常法、例
えば硫安沈澱法等により行うことができる。
えば硫安沈澱法等により行うことができる。
さらに、得られた耐熱性β−アミラーゼは、さらに菌体
外酵素取得の常法により、精製することができる。
外酵素取得の常法により、精製することができる。
本発明の形質転換体を用いる耐熱性β−アミラーゼの製
造方法によれば、大量に耐熱性β−アミラーゼを製造す
ることができる。
造方法によれば、大量に耐熱性β−アミラーゼを製造す
ることができる。
以下、本発明を実施例によりさらに説明する。
ただし、本発明は、これらの実施例に限定されるもので
はない。
はない。
実施例１ ｐＭＭｌの調製及び培養
鵜高重三、日本農芸化学会誌６１．６６９（１９８７）
に記載の方法により枯草菌プラスミドｐＵＢＩＩＯとＢ
、プレビスの細胞壁タンパク質遺伝子とも含むプラスミ
ドｐＮ０２００を得た。
に記載の方法により枯草菌プラスミドｐＵＢＩＩＯとＢ
、プレビスの細胞壁タンパク質遺伝子とも含むプラスミ
ドｐＮ０２００を得た。
一方、特開平１−２１８５８９号に記載の方法により耐
熱性β−アミラーゼ遺伝子を含むプラスミドｐＮＫ１を
得た。このプラスミドｐＮＫ１（ＤＭｆｌＩ−ＭｆｌＩ
約３．６Ｋｂ断片を切出し、上記プラスミドｐＮＵ２０
０（７）ＢａｍＨＩ部位に連結し、プラスミドｐＭＭ１
（８４６６ｂｐ）を得た。
熱性β−アミラーゼ遺伝子を含むプラスミドｐＮＫ１を
得た。このプラスミドｐＮＫ１（ＤＭｆｌＩ−ＭｆｌＩ
約３．６Ｋｂ断片を切出し、上記プラスミドｐＮＵ２０
０（７）ＢａｍＨＩ部位に連結し、プラスミドｐＭＭ１
（８４６６ｂｐ）を得た。
プラスミドｐＭＭ１の制限酵素地図を第４図に示し、Ｄ
ＮＡ塩基配列の一部を第１図に示す。第４図中のＭＷＰ
は、細胞壁タンパク質遺伝子を示す。尚、第１図中、１
〜９６塩基までが細胞壁タンパク質遺伝子であり、９７
〜３７４４塩基がβ−アミラーゼ遺伝子であり、３７４
５塩基以後がｐＮＵ２００の遺伝子である。さらに、６
６０〜６６２塩基に翻訳開始点「ＡＴＧ」があり、７５
５塩基までがシグナル配列である。２３１３〜２３１５
塩基に翻訳終止点ｒＴＡＡＪがある。
ＮＡ塩基配列の一部を第１図に示す。第４図中のＭＷＰ
は、細胞壁タンパク質遺伝子を示す。尚、第１図中、１
〜９６塩基までが細胞壁タンパク質遺伝子であり、９７
〜３７４４塩基がβ−アミラーゼ遺伝子であり、３７４
５塩基以後がｐＮＵ２００の遺伝子である。さらに、６
６０〜６６２塩基に翻訳開始点「ＡＴＧ」があり、７５
５塩基までがシグナル配列である。２３１３〜２３１５
塩基に翻訳終止点ｒＴＡＡＪがある。
プラスミドｐＭＭｌをＢ、プレビス４７−５Ｑ（日、プ
レビス４７株のウラシル要求株）に導入し、トリプトン
、酵母抽出物、カッオニキス、ブドウ糖を含む培養液（
ｐＨ７，０）中、３７°Ｃ１３日間培養した。培養終了
後、培養液上清をＤＮＳ法により測定したところ、７．
０７０／−の耐熱性β−アミラーゼを得た。
レビス４７株のウラシル要求株）に導入し、トリプトン
、酵母抽出物、カッオニキス、ブドウ糖を含む培養液（
ｐＨ７，０）中、３７°Ｃ１３日間培養した。培養終了
後、培養液上清をＤＮＳ法により測定したところ、７．
０７０／−の耐熱性β−アミラーゼを得た。
比較のため、上記プラスミドｐＮＫ１をＢ、プレビス４
７−５Ｑ株に導入して同様の条件で培養した。その結果
、耐熱性β−アミラーゼの生産量は、１．６４１Ｊ／−
であった。
７−５Ｑ株に導入して同様の条件で培養した。その結果
、耐熱性β−アミラーゼの生産量は、１．６４１Ｊ／−
であった。
実施例２ ９ＭＭ２の調製及び培養
プラスミドｐＮ０２００の細胞壁タンパク質遺伝子のシ
グナル直後にプラスミドｐＮＫ１の耐熱性β−アミラー
ゼ遺伝子の構造部分を連結するプラスミド（９ＭＭ２）
を、以下のようにして構築した。
グナル直後にプラスミドｐＮＫ１の耐熱性β−アミラー
ゼ遺伝子の構造部分を連結するプラスミド（９ＭＭ２）
を、以下のようにして構築した。
Ｂ、プレビスの細胞壁タンパク質遺伝子のＮｃｏｌ以後
、β−アミラーゼ遺伝子のＡｖａＩＩ部位迄ＤＮＡ合成
した。次いで、Ａｖａｌｌ−ＭｆｌＩ断片と結合し、Ａ
ｐａＬＩ−３ｐｈｌ断片を切出し、ｐＭＭｌの相当部位
と置換することにより９ＭＭ２ （７７３１ｂｐ）を得
た。
、β−アミラーゼ遺伝子のＡｖａＩＩ部位迄ＤＮＡ合成
した。次いで、Ａｖａｌｌ−ＭｆｌＩ断片と結合し、Ａ
ｐａＬＩ−３ｐｈｌ断片を切出し、ｐＭＭｌの相当部位
と置換することにより９ＭＭ２ （７７３１ｂｐ）を得
た。
プラスミドｐＭＭ２の制限酵素地図を第５図に示し、Ｄ
ＮＡ塩基配列の一部を第２図に示す。第５図中のＭＷＰ
は、細胞壁タンパク質遺伝子を示す。尚、第２図中、５
１７〜５８５塩基までが細胞壁タンパク質遺伝子のシグ
ナル配列であり、５８６塩基以後がβ−アミラーゼ遺伝
子である。さらに、５１７〜５１９塩基に翻訳開始点「
ＡＴＧ」があり、２１４３〜２１４５塩基に翻訳終止点
ｒＴＡＡ」がある。
ＮＡ塩基配列の一部を第２図に示す。第５図中のＭＷＰ
は、細胞壁タンパク質遺伝子を示す。尚、第２図中、５
１７〜５８５塩基までが細胞壁タンパク質遺伝子のシグ
ナル配列であり、５８６塩基以後がβ−アミラーゼ遺伝
子である。さらに、５１７〜５１９塩基に翻訳開始点「
ＡＴＧ」があり、２１４３〜２１４５塩基に翻訳終止点
ｒＴＡＡ」がある。
得られた９ＭＭ２を実施例１と同様にしてＢ、２レビス
４７−５Ｑ株に導入し、ＴＺＵ＋５０ｍＭＭＥＳ＋グル
コース２％を含む培養液（ｐＨ６，０）中、３７°Ｃ１
７日間培養し、培養液液中の耐熱性β−アミラーゼ量を
経時的に測定した。その結果を表１に示す。
４７−５Ｑ株に導入し、ＴＺＵ＋５０ｍＭＭＥＳ＋グル
コース２％を含む培養液（ｐＨ６，０）中、３７°Ｃ１
７日間培養し、培養液液中の耐熱性β−アミラーゼ量を
経時的に測定した。その結果を表１に示す。
これとは別に、９ＭＭ２をＢ、プレビス−４７に株、３
１株（Ｂ、プレビスＨ１０２、ＦＥＲＭ ＢＰ−１０
８７）、３１Ｍ株（３１株のミュータント）にも同様に
して導入し、培養した。結果を表１に示す。
１株（Ｂ、プレビスＨ１０２、ＦＥＲＭ ＢＰ−１０
８７）、３１Ｍ株（３１株のミュータント）にも同様に
して導入し、培養した。結果を表１に示す。
さらに９ＭＭ２を導入したＢ、プレビス４７に株を、Ｔ
３±１００ｍＭ ＭＥＳ＋グルコース２％を含む培養液
（ｐＨ６，０）を用いて培養した結果、耐熱性β−アミ
ラーゼの生産量は２６００ Ｕ／１ｎｌであった。この
値は、タンパク質量に換算すると約１．７ｇ／ｌに相当
する。
３±１００ｍＭ ＭＥＳ＋グルコース２％を含む培養液
（ｐＨ６，０）を用いて培養した結果、耐熱性β−アミ
ラーゼの生産量は２６００ Ｕ／１ｎｌであった。この
値は、タンパク質量に換算すると約１．７ｇ／ｌに相当
する。
得られた耐熱性β−アミラーゼをセファクリル（５ｅｐ
ｈａｃｒｙ ｌ ）Ｓ−２００で精製した結果比活性ハ
、１６３４０７ｍｇタンパク質であり、Ｃ，サーモサル
フロゲネスの耐熱性β−アミラーゼを同様にして精製し
た酵素の比活性、１５１５０７ｍｇタンパク質とほぼ同
じであった。
ｈａｃｒｙ ｌ ）Ｓ−２００で精製した結果比活性ハ
、１６３４０７ｍｇタンパク質であり、Ｃ，サーモサル
フロゲネスの耐熱性β−アミラーゼを同様にして精製し
た酵素の比活性、１５１５０７ｍｇタンパク質とほぼ同
じであった。
表 １
シス法により、各開始コドン（ＡＴＧ）を含む部分の塩
基配列をＴＣＡＴＧＡ、即ちＢｓｐ旧部位に変更した。
基配列をＴＣＡＴＧＡ、即ちＢｓｐ旧部位に変更した。
ＭＷＰ：
↑
実施例３ ｐＭＭ３の調製及び培養
ｐＭＭ３を以下のように調製した。
プラスミドｐＮＵ２００の細胞壁タンパク質遺伝子（Ｍ
ＷＰ）及びプラスミドｐＮＫｌの耐熱性β−アミラーゼ
遺伝子（β−ａｍ）の各開始コドン直前に、新しく制限
酵素の認識部位を導入し、後に続く部分をつなぎかえた
。即ち、以下に示すように、サイト−ブイレフテッド
ミュータジエネ次に、Ｂｓｐ旧切断後、両配列をつなぎ
かえることにより開始コドン以降は、Ｃ、サーモサルフ
ロゲ＋２の配列とし、それ以前は、細胞壁タンパク質遺
伝子（ＭＷＰ）であるプラスミドｐＭＭ３ （７７５８
Ｍ）を構築した。
ＷＰ）及びプラスミドｐＮＫｌの耐熱性β−アミラーゼ
遺伝子（β−ａｍ）の各開始コドン直前に、新しく制限
酵素の認識部位を導入し、後に続く部分をつなぎかえた
。即ち、以下に示すように、サイト−ブイレフテッド
ミュータジエネ次に、Ｂｓｐ旧切断後、両配列をつなぎ
かえることにより開始コドン以降は、Ｃ、サーモサルフ
ロゲ＋２の配列とし、それ以前は、細胞壁タンパク質遺
伝子（ＭＷＰ）であるプラスミドｐＭＭ３ （７７５８
Ｍ）を構築した。
プラスミドｐＭＭ３の制限酵素地図を第６図に示し、Ｄ
ＮＡ塩基配列の一部を第３図に示す。第６図中のＭＷＰ
は、細胞壁タンパク質遺伝子を示す。尚、第３図中、１
〜５１６塩基が細胞壁タンパク質遺伝子であり、５１７
〜６１２塩基がβ−アミラーゼ遺伝子のシグナル配列で
あり、６１３塩基以後がβ−アミラーゼ構造遺伝子であ
る。さらに、５１７〜５１９塩基に翻訳開始点「ＡＴＧ
」があり、２１７０〜２１７２塩基に翻訳終止点ｒＴＡ
ＡＪがある。
ＮＡ塩基配列の一部を第３図に示す。第６図中のＭＷＰ
は、細胞壁タンパク質遺伝子を示す。尚、第３図中、１
〜５１６塩基が細胞壁タンパク質遺伝子であり、５１７
〜６１２塩基がβ−アミラーゼ遺伝子のシグナル配列で
あり、６１３塩基以後がβ−アミラーゼ構造遺伝子であ
る。さらに、５１７〜５１９塩基に翻訳開始点「ＡＴＧ
」があり、２１７０〜２１７２塩基に翻訳終止点ｒＴＡ
ＡＪがある。
得られたｐＭＭ３をＢ、プレビス４７に株に導入し、Ｔ
３＋ １００ｍＭ ＭＥＳ＋グルコース２％を含む培養
液（ｐＨ６，０）中、３７℃、７日間培養し、培養液液
中の耐熱性β−アミラーゼ量を経時的に測定した。その
結果を表２に示す。
３＋ １００ｍＭ ＭＥＳ＋グルコース２％を含む培養
液（ｐＨ６，０）中、３７℃、７日間培養し、培養液液
中の耐熱性β−アミラーゼ量を経時的に測定した。その
結果を表２に示す。
表 ２
その結果、耐熱性β−アミラーゼの生産量は約５００Ｕ
／−であった。得られた耐熱性β−アミラーゼをセファ
クリル（５ｅｐｈａｃｒｙｌ）Ｓ−２００で精製した結
果鳩活性は、ｌ ５１７０７ｍｇタンパク質であり、Ｃ
，サーモサルフロゲネスの耐熱性β−アミラーゼの比活
性、１５１５０７ｍｇタンパク質とほぼ同じであった。
／−であった。得られた耐熱性β−アミラーゼをセファ
クリル（５ｅｐｈａｃｒｙｌ）Ｓ−２００で精製した結
果鳩活性は、ｌ ５１７０７ｍｇタンパク質であり、Ｃ
，サーモサルフロゲネスの耐熱性β−アミラーゼの比活
性、１５１５０７ｍｇタンパク質とほぼ同じであった。
さらに、Ｃ，サーモサルフロゲネス由来の耐熱性β−ア
ミラーゼタンパク質、及び実施例１〜３で得たｐＭＭ１
〜３由来の耐熱性β−アミラーゼタンパク質の５ＤＳ−
ＰＡＧＥを測定した結果、全て同一の箇所に一本のバン
ドが得られた。
ミラーゼタンパク質、及び実施例１〜３で得たｐＭＭ１
〜３由来の耐熱性β−アミラーゼタンパク質の５ＤＳ−
ＰＡＧＥを測定した結果、全て同一の箇所に一本のバン
ドが得られた。
さらに、実施例２及び３で得たｐＭＭ２及び３由来の耐
熱性β−アミラーゼの活性の温度依存性を測定した結果
、いずれの耐熱性β−アミラーゼも約７０℃に最適温度
を有していた。
熱性β−アミラーゼの活性の温度依存性を測定した結果
、いずれの耐熱性β−アミラーゼも約７０℃に最適温度
を有していた。
第１図は、９〜１Ｍ１のＤＮＡ塩基配列の一部を示す。
第２図は、ｐＭＭ２のＤＮＡ塩基配列の一部を示す。第
３図は、ｐＭＭ３のＤＮＡ塩基配列の一部を示す。第４
図は、ｐＭＭｌの制限酵素地図を示す。第５図は、ｐＭ
Ｍ２の制限酵素地図を示す。第６図は、ｐＭＭ３の制限
酵素地図を示す。 第 １図−その ０ ＣＣＡＡＴＧＧＣＴＴ ０ ＴＣＧＣＡＧＣＡＧＡ ０ ＡＧＡＡＧＣＡＧＣＡ ０ ＡＣＴＡＣＴＡＣＡＧ ０ ＣＴＣＣＡＡＡＡＡＴ ０ ＧＧＡＣＧＣＴＧＡＴ ０ ＡＴＧＧＡＡＡＡＡＡ ０ ＣＣＧＴＡＡＡＡＣＧ ０ ＴＣＴＧＧＡＡＧＣＴ ００ ＣＴＴＧＧＣＧＧＡＴ １０ ＣＴＴＡＧＴＴＴＡＧ ２０ ＧＴＧＴＧＴＴＴＴＴ ３０ ＡＴＡＣＴＡＴＧＧＣ ４０ ＧＣＡＴＴＡＡＡＡＧ ５０ ＧＡＡＴＡＣＣＧＡＣ ６０ ＡＴＣＴＴＴＡＧＡＴ ７０ ＧＡＡＧＣＡＧＣＴＴ ８０ ＴＡＡＴＡＧＡＴＧＧ ９０ ＴＴＧＴＡＧＴＡＧＡ ００ ＴＴＴＡＧＡＡＴＣＴ １０ ＡＣＴＧＧＡＡＴＡＴ ２０ ＣＡＴＡＣＴＧＣＣＡ ３０ ＴＴＡＴＴＡＡＡＴＣ ４０ ＣＴＡＣＴＡＣＧＡＴ ５０ ＣＡＣＣＣＴＴＧＣＡ ６０ ＧＴＴＴＴＧＧＡＴＡ ７０ ＴＴＡＴＧＴＧＧＡＴ ８０ ＡＴＧＧＡＡＴＧＡＣ ９０ ＴＡＣＴＴＡＴＴＧＣ ００ ＣＡＴＣＴＴＴＡＧＴ’ １０ ＣＡＴＡＡＡＣＡＡＧ ２０ ＴＣＧＧＴＴＣＣＡＧ ３０ ＧＡＣＧＣＴＴＣＣＡ ４０ ＣＴＡＡＴＧＡＴＴＴ ５０ ＴＴＴＡＣＴＴＣＴＴ ６０ ＴＡＧＣＣＡＧＴＡＣ ７０ ＡＣＡＡＡＧＣＡＧＴ ８０ ＧＧＡＡＴＣＴＣＧＧ ９０ ＴＡＴＧＧＣＡＧＧＡ ００ ＣＴＧＡＣＡＡＴＡＧ 弔 １図〜その １０ ＣＡＡＴＴＴＴＡＣＣ ２０ ＴＧＴＴＧＴＡＡＴＴ ３０ ＴＴＣＴＡＣＴＴＣＴ ４０ ＴＧＧＣＡＣＡＧＡＧ ５０ ＡＡＡＡＴＴＡＧＴＣ ６０ ＡＣＡＧＣＴＡＴＡＡ ７０ ＴＡＧＣＴＧＧＴＧＣ ８０ ＴＧＴＡＡＡＧＣＡＧ ９０ ＴＡＧＧＴＡＡＡＧＣ ００ ＡＡＡＡＴＴＡＴＡＧ １０ ＴＴＡＧＧＡＧＧＴＧ ２０ ＡＴＡＴＴＡＡＡＡＴ ３０ ＡＧＡＡＡＴＴＴＧＡ ４０ ＴＡＧＡＡＡＣＴＧＡ ５０ ＡＴＡＴＡＡＴＴＡＴ ６０ ＴＧＡＡＡＧＧＧＧＴ ７０ ＧＧＧＡＡＣＴＡＴＴ ８０ ＧＧＣＡＡＡＡＴＡＡ ９０ ＴＡＴＣＴＴＡＴＴＡ ００ ＡＡＡＴＴＴＴＴＧＧ １０ ＣＧＧＣＡＡＡＡＡＡ ２０ ＴＡＧＴＧＡＴＴＡＴ ３０ ＡＴＴＡＴＴＴＴＴＡ ４０ ＴＣＧＴＡＴＧＡＴＧ ５０ ＧＧＡＧＧＧＡＡＡＡ ６０ ＴＡＡＡＡＡＴＡＧＡ ７０ ＴＧＡＴＴＧＧＡＧＣ ８０ ＴＴＴＴＡＡＡＡＧＧ ９０ ＴＴＧＧＧＴＣＡＡＡ ００ ＡＡＴＴＧＴＴＴＴＴ １０ ＧＡＣＡＴＴＧＴＴＡ ？２０ ＡＣＧＧＣＡＴＣＡＴ ３０ ＴＡＡＴＴＴＴＴＧＣ ４０ ＡＴＣＴＴＣＴＡＴＡ ５０ ＧＴＡＡＣＴＧＣＴＡ ） ７９０ ８００Ｔ
ＴＴＧＴＡＡＴＧＧＧ ＴＣＣＡＴＴＡＧＡＡ５８４
− 第１図 その５ １８６０ １８７０ ＴＣＣＡＡＣＡＡＣＡ ＡＴＣＡＡＧＣＴＴＡ８８０ ＴＧＴＧＡＡＴＴＧＴ ８９０ ＧＣＡＡＡＴＧＡＡＴ ９００ ＴＡＡＣＡＧＧＡＴＡ ９１０ ＴＡＡＴＴＴＴＴＣＴ ９２０ ＧＧＡＴＴＴＡＣＡＣ ９３０ ＴＴＴＴＡＡＧＡＣＴ ９４０ ＴＴＣＧＡＡＴＡＴＴ ９５０ ＧＴＡＡＡＴＡＧＴＧ ９６０ ＡＴＧＧＡＴＣＴＧＴ ９７０ ＧＡＣＡＴＣＡＧＡＧ ９８０ ＡＴＧＧＣＴＣＣＴＴ ９９０ ＴＴＧＴＡＡＴＴＡＡ ０００ ＴＡＴＡＧＴＴＡＣＡ ０１０ ＣＴＡＡＣＧＣＣＴＡ ０２０ ＡＣＧＧＴＡＣＧＡＴ ０３０ ＡＣＣＡＧＴＴＡＣＡ ０４０ ＴＴＴＡＣＡＡＴＡＡ ０５０ ＡＣＡＡＴＧＣＧＡＣ ０６０ ＡＡＣＴＴＡＴＴＡＴ ２０７０ ２０８０ ＧＧＡＣＡＡＡＡＴＧ ＴＡＴＡＴＡＴＴＧＴ０９０ ＴＧＧＴＡＧＴＡＣＡ １００ ＴＣＴＧＡＴＣＴＴＧ ２１１０ ２１２０ ＧＡＡＡＴＴＧＧＡＡ ＴＡＣＡＡＣＣＴＡＴ１３０ ＧＣＣＣＧＴＧＧＴＣ １４０ ＣＴＧＣＡＴＣＡＴＧ １５０ ＣＣＣＴＡＡＴＴＡＴ １６０ ＣＣＴＡＣＴＴＧＧＡ １７０ ＣＡＡＴＡＡＣＧＣＴ １８０ ＴＡＡＴＣＴＡＴＴＡ １９０ ＣＣＴＧＧＴＧＡＧＣ ２００ ＡＧＡＴＡＣＡＧＴＴ ２２１０ ２２２０ ＴＡＡＡＧＣＴＧＴＡ ＡＡＡＡＴＴＧＡＴＡ２３０ ＧＴＴＣＡＧＧＡＡＡ ２４０ ＴＧＴＡＡＣＴＴＧＧ ２５０ ＧＡＡＧＧＴＧＧＣＴ ２６０ ＣＧＡＡＴＣＡＴＡＣ ２７０ ＴＴＡＴＡＣＴＧＴＧ ２２８０ ２２９０ ＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧ ＧＧＡＣＴＧＧＴＡＧ３００ ＴＧＴＣＡＣＣＡＴＴ ３１０ ＡＣＡＴＧＧＣＡＡＡ ３２０ ＡＴＴＡＡＴＣＡＡＴ ３３０ ＡＡＡＡＴＧＴＴＡＣ ２３４０２３５０ ＡＣＡＴＡＧＡＡＣＡ ＡＡＴＴＧＴＡＡＡＣ３６０ ＡＣＴＧＧＡＡＴＡＴ ３７０ ＡＴＴＣＣＧＧＴＧＴ ３８０ ＴＴＴＴＴＴＧＴＡＴ ３９０ ＡＴＴＡＴＧＧＧＣＧ ４００ ＴＴＴＡＡＴＧＴＴＡ 第１図 その６ ４１０ ＡＡＡＡＴＡＡＴＡＧ ４２０ ＴＧＴＴＴＴＧＡＴＴ ４３０ ＴＴＡＴＴＡＡＡＡＡ ４４０ ＧＴＴＴＧＧＡＧＧＴ ４５０ ＡＡＧＡＧＡＴＧＡＧ ４６０ ＴＡＡＡＡＡＡＧＴＴ ４７０ ＧＧＴＡＴＴＣＣＡＡ ４８０ ＡＡＧＧＧＣＴＴＴＴ ４９０ ＡＴＡＣＴＡＣＡＡＣ ５００ ＴＴＴＴＡＴＣＣＴＡ ５１０ ＴＧＴＧＧＡＡＡＡＣ ５２０ ＡＴＴＴＴＴＴＧＡＡ ５３０ ＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧ ５４０ ＣＴＧＡＡＧＴＧＧＴ ５５０ ＴＡＣＴＴＣＣＡＧＴ ５６０ ＧＡＴＡＣＡＴＧＴＡ ５７０ ＡＡＡＡＡＡＴＡＡＴ ５８０ ＴＧＡＴＧＡＴＧＧＣ ５９０ ＡＴＣＡＡＧＡＣＴＴ ６００ ＧＣＧＴＧＧＡＴＧＡ ６１０ ＡＡＣＣＴＧＣＣＴＴ ６２０ ＣＣＴＧＴＣＡＡＧＡ ２６３０ ２６４０ ＣＡＴＴＴＡＴＧＧＧ ＴＣＡＴＧＴＧＡＴＴ６５０ ＧＡＴＴＴＧＡＡＧＧ ６６０ ＡＡＡＡＧＧＧＴＧＴ ６７０ ＴＧＡＴＴＡＴＡＴＡ ６８０ ＴＴＴＧＴＴＣＣＡＡ ６９０ ＧＡＧＴＣＡＴＡＡＧ ７００ ＣＧＴＡＧＡＡＡＧＧ ７１０ ＣＧＴＡＧＡＴＡＴＣ ７２０ ＴＡＴＧＣＴＣＡＡＡ ７３０ ＡＴＴＴＴＴＧＧＧＴ ７４０ ＴＴＧＣＣＴＧＡＣＴ ７５０ ＴＡＧＴＧＡＧＡＡＡ ７６０ ＴＣＴＴＡＴＴＴＣＴ ７７０ ＧＡＴＴＴＧＣＣＡＣ ２７８０２７９０ ＡＡＡＴＡＡＴＡＧＡ ＴＡＴＧＡＡＧＡＴＴ８００ ＧＡＴＴＡＣＴＡＴＣ ８１０ ＧＴＧＧＡＧＡＡＧＡ ２８２０ ２８３０ ＧＴＴＴＡＴＧＧＡＡ ＡＧＡＧＡＡＡＴＴＴ８４０ ＴＧＡＧＡＧＴＴＧＧ ８５０ ＣＡＡＧＣＴＧＴＴＴ ８６０ ＧＴＴＧＡＴＡＧＣＡ ８７０ ＣＡＡＧＴＡＡＡＡＴ ８８０ ＴＡＡＡＧＡＣＧＣＡ ８９０ ＴＡＣＧＡＡＡＡＡＴ ９００ ＣＴＴＴＡＡＡＡＡＧ ５８６− 第１図−そのＴ ２９１０ ２９２０ ＧＣＡＡＡＧＧＡＣＴ ＴＴＴＧＡＡＴＴＣＡ２９３
０ ２９４０ ＴＴＡＴＴＡＧＡＧＡ ＡＧＧＡＴＴＴＴＣＡ９５０ ＡＡＴＡＣＡＧＡＡＧ ９６０ ＣＡＡＴＡＡＡＡＡＴ ９７０ ＴＡＴＧＧＡＡＧＧＧ ９８０ ＡＡＡＡＡＡＴＴＡＧ ９９０ ＡＣＧＣＡＡＡＴＡＣ ０００ ＡＡＡＡＧＧＧＧＡＴ ０１０ ＴＴＡＡＡＡＡＴＡＧ ０２０ ＣＴＴＴＡＴＴＡＧＣ ０３０ ＣＣＡＴＴＣＣＴＡＴ ０４０ ＧＡＣＡＴＡＡＴＧＧ ０５０ ＡＴＧＡＴＴＡＴＴＴ ０６０ ＡＴＣＴＡＴＧＧＧＡ ０７０ ＴＴＧＡＴＡＡＡＴＡ ０８０ ＧＧＣＴＴＡＡＧＡＡ ０９０ ＴＡＴＧＧＧＡＧＣＴ １００ ＴＡＴＧＴＧＣＴＴＡ １１０ ＣＡＡＣＡＡＡＴＡＴ １２０ ＧＡＴＡＧＡＡＡＧＡ １３０ ＧＡＴＡＡＡＡＴＴＧ １４０ ＡＡＡＡＴＧＧＴＧＣ １５０ ＣＡＧＣＡＡＡＣＴＴ １６０ ＣＡＡＡＡＡＧＡＴＴ １７０ ＴＡＴＴＴＴＧＧＡＣ １８０ ＴＴＡＴＧＧＡＡＧＧ １９０ ＧＡＴＡＴＴＴＴＡＧ ２００ ＧＴＧＣＡＧＧＴＡＡ ２１０ ＡＴＡＴＴＴＴＡＴＣ ２２０ ＧＡＧＡＧＣＡＡＡＧ ２３０ ＡＡＧＴＧＧＡＣＧＧ ２４０ ＧＧＴＡＡＴＡＴＣＴ ２５０ ＧＴＴＴＣＴＧＣＴＴ ２６０ ＴＴＧＧＡＴＧＴＧＧ ２７０ ＧＣＣＡＧＡＣＴＣＴ ２８０ ＡＴＣＡＣＴＧＡＴＧ ２９０ ＡＣＣＴＴＴＴＡＧＡ ３００ ＡＡＧＧＧＡＴＴＡＣ ３１０ ＡＡＧＡＧＡＧＡＴＧ ３２０ ＧＴＧＧＧＡＴＴＣＣ ３３０ ＡＴＴＴＡＴＧＣＣＣ ３４０ ＡＴＡＡＣＣＡＴＴＧ ３５０ ＡＴＧＡＡＣＡＴＡＣ ３６０ ＴＧＧＴＧＡＧＧＣＡ ３７０ ＧＧＴＴＴＡＡＡＣＴ ３８０ ＡＣＣＴＡＧＧＴＴＡ ３９０ ＧＡＡＧＣＣＴＴＴＡ ４００ ＴＧＧＡＴＴＴＧＴＴ 第１図−その８ ４１０ ＡＡＧＡＴＧＧＣＣＡ ４２０ ＣＡＡＧＧＡＧＡＧＡ ４３０ ＴＴＡＴＧＧＣＡＴＧ ４４０ ＡＡＡＡＴＡＡＣＡＴ ４５０ ＡＴＣＣＡＣＡＴＡＴ ４６０ ＧＧＧＴＴＣＧＴＴＡ ４７０ ＡＡＴＡＴＧＡＴＡＴ ４８０ ＴＡＡＡＧＡＣＧＡＴ ４９０ ＧＴＴＴＧＡＡＧＧＡ ５００ ＡＴＣＡＡＴＧＴＡＧ ５１０ ＡＡＧＴＴＧＴＧＧＡ ５２０ ＧＣＣＧＣＣＡＣＣＴ ５３０ ＧＴＧＡＣＴＡＡＴＡ ３５４０ ３５５０ ＧＧＡＣＴＣＴＡＴ、ＣＡＡＴＴＧＧＡＧＴＡ５６０ ＡＡＡＴＡＴＴＣＡＣ ５７０ ＣＴＧＡＧＴＴＴＧＴ ５８０ ＣＴＧＴＣＴＴＣＣＡ ５９０ ＴＡＴＡＡＧＡＴＡＡ ６００ ＡＴＣＴＧＧＧＧＡＡ ６１０ ＴＴＴＴＡＴＡＧＡＡ ６２０ ＧＣＡＣＴＴＧＡＡＡ ６３０ ＡＣＧＧＴＧＣＴＧＡ ６４０ ＴＡＣＴＡＴＡＡＴＡ ６５０ ＡＴＧＴＴＧＧＧＴＧ ６６０ ＧＴＡＴＡＧＧＧＣＣ ６７０ ＴＴＧＣＡＧＧＴＴＣ ６８０ ＧＧＴＴＡＴＴＡＴＧ ６９０ ＧＡＣＡＡＧＣＡＣＡ ７００ ＡＡＧＡＧＡＡＡＣＡ ７１０ ＴＴＡＡＴＴＧＡＴＣ ７２０ ＴＴＧＧＡＴＡＣＡＡ ７３０ ＧＴＴＴＡＡＴＡＴＧ ７４０ ＡＣＴＡＡＴＡＴＴＡ ７５０ ＧＡＴＣＣＡＣＡＧＧ ７６０ ＡＣＧＧＧＴＧＴＧＧ ７７０ ＴＣＧＣＣＡＴＧＡＴ ７８０ ＣＧＣＧＴＡＧＴＣＧ ７９０ ＡＴＡＧＴＧＧＣＴＣ ８００ ＣＡＡＧＴＡＧＣＧＡ ８１０ ＡＧＣＧＡＧＣＡＧＧ ８２０ ＡＣＴＧＧＧＣＧＧＣ ８３０ ＧＧＣＣＡＡＡＧＣＧ ８４０ ＧＴＣＧＧＡＣＡＧＴ ８５０ ＧＣＴＣＣＧＡＧＡＡ ８６０ ＧＧ 第２図 その ０ ＡＧＡＴＣＴＡＡＡＧ ０ ＣＴＡＴＣＣＴＧＴＣ ０ ＴＴＡＣＡＡＣＴＴＧ ０ ＧＣＴＧＴＴＧＴＡＡ ０ ＡＣＴＴＴＧＡＡＡＡ ０ ＴＧＣＡＴＴＡＧＧＡ ０ ＡＡＴＴＡＡＣＣＴＡ ０ ＡＴＴＣＡＡＧＣＡＡ ０ ＧＡＴＴＡＴＧＡＧＧ ００ ＴＴＴＴＧＡＡＣＣＡ １０ ＡＡＴＴＧＧＡＡＡＡ ２０ ＡＧＧＴＴＣＡＧＴＣ ３０ ＧＴＧＡＣＡＧＣＣＣ ４０ ＧＣＣＡＴＡＴＧＴＣ ５０ ＣＣＣＴＡＴＡＡＴＡ ６０ ＣＧＧＡＴＴＧＴＧＧ ７０ ＣＧＧＡＴＧＴＣＡＣ ８０ ＴＴＣＧＴＡＣＡＴＡ ９０ ＡＴＧＧＡＣＡＧＧＴ ００ ＧＡＡＴＡＡＣＧＡＡ １０ ＣＣＡＣＧＡＡＡＡＡ ２０ ＡＡＣＴＴＴＡＡＡＴ ３０ ＴＴＴＴＴＴＣＧＡＡ ４０ ＧＧＣＧＣＣＧＣＡＡ ５０ ＣＴＴＴＴＧＡＴＴＣ ６０ ＧＣＴＣＡＧＧＣＧＴ ７０ ＴＴＡＡＴＡＧＧＡＴ ８０ ＧＴＣＡＣＡＣＧＡＡ ９０ ＡＡＡＣＧＧＧＧＡＡ ００ ＴＴＧＴＧＴＡＡＡＡ １０ ＡＡＧＡＴＴＣＡＣＧ ２０ ＡＡＴＴＣＴＡＧＣＡ ３０ ＧＴＴＧＴＧＴＴＡＣ ４０ ＡＣＴＡＧＴＧＡＴＴ ５０ ＧＴＴＧＣＡＴＴＴＴ ６０ ＡＣＡＣＡＡＴＡＣＴ ７０ ＧＡＡＴＡＴＡＣＴＡ ８０ ＧＡＧＡＴＴＴＴＴＡ ９０ ＡＣＡＣＡＡＡＡＡＧ ００ ＣＧＡＧＧＣＴＴＴＣ 第２図−その２ １０ ＣＴＧＣＧＡＡＡＧＧ ２０ ＡＧＧＴＧＡＣＡＣＧ ３０ ＣＧＣＴＴＧＣＡＧＧ ４０ ＡＴＴＣＧＧＧＣＴＴ ５０ ＴＡＡＡＡＡＧＡＡＡ ６０ ＧＡＴＡＧＡＴＴＡＡ ７０ ＣＡＡＣＡＡＡＴＡＴ ８０ ＴＣＣＣＣＡＡＧＡＡ ９０ ＣＡＡＴＴＴＧＴＴＴ ００ ＡＴＡＣＴＡＧＡＧＧ １０ ＡＧＧＡＧＡＡＣＡＣ ２０ ＡＡＧＧＴＴＡＴＧＡ ３０ ＡＡＡＡＧＧＴＣＧＴ ４０ ＴＡＡＣＡＧＴＧＴＡ ５０ ＴＴＧＧＣＴＡＧＴＧ ６０ ＣＡＣＴＣＧＣＡＣＴ ７０ ＴＡＣＴＧＴＴＧＣＴ ８０ ＣＣＣＡＴＧＧＣＴＴ ９０ ＴＣＧＣＴＡＧＣＡＴ ００ ＣＧＣＴＣＣＡＡＡＣ １０ ＴＴＣＡＡＡＧＴＴＴ ２０ ＴＣＧＴＴＡＴＧＧＧ ３０ ＴＣＣＡＴＴＡＧＡＡ ４０ ＡＡＡＧＴＣＡＣＡＧ ５０ ＡＴＴＴＴＡＡＴＧＣ ６０ ＡＴＴＣＡＡＡＧＡＴ ７０ ＣＡＡＴＴＧＡＴＡＡ ８０ ＣＴＴＴＡＡＡＧＡＡ ９０ ＴＡＡＴＧＧＴＧＴＴ ００ ＴＡＴＧＧＴＡＴＡＡ １０ ＣＡＡＣＡＧＡＴＡＴ ２０ ＴＴＧＧＴＧＧＧＧＣ ３０ ＴＡＴＧＴＴＧＡＡＡ ４０ ＡＴＧＣＡＧＧＴＧＡ ５０ ＡＡＡＴＣＡＡＴＴＴ ６０ ７０ ８０ ９０ ００ 第２図−その３ ８１０ ＧＡＡＧＴＧＧＧＴＴ ２０ ＣＣＡＡＴＡＡＴＧＴ ３０ ＣＡＡＣＧＣＡＴＧＣ ４０ ＣＴＧＴＧＧＡＧＧＴ ５０ ＡＡＴＧＴＴＧＧＴＧ ６０ ＡＴＡＣＡＧＴＡＡＡ ７０ ＴＡＴＡＣＣＴＡＴＴ ８０ ＣＣＧＴＣＡＴＧＧＧ ９０ ＴＡＴＧＧＡＣＡＡＡ ００ ＡＧＡＴＡＣＣＣＡＡ １０ ＧＡＴＡＡＴＡＴＧＣ ２０ ＡＧＴＡＴＡＡＧＧＡ ３０ ＴＧＡＡＧＣＣＧＧＡ ４０ ＡＡＴＴＧＧＧＡＴＡ ５０ ＡＴＧＡＡＧＣＡＧＴ ６０ ＡＡＧＴＣＣＡＴＧＧ ７０ ＴＡＴＴＣＴＧＧＣＴ ８０ ＴＡＡＣＣＣＡＡＣＴ ９０ ＣＴＡＴＡＡＴＧＡＡ ０００ ＴＴＴＴＡＴＴＣＡＴ ０１０ ＣＴＴＴＴＧＣＡＴＣ ０２０ ＡＡＡＴＴＴＴＡＧＣ ０３０ ＡＧＣＴＡＴＡＡＡＧ ０４０ ＡＴＡＴＡＡＴＴＡＣ ０５０ ＴＡＡＡＡＴＡＴＡＴ ０６０ ＡＴＡＴＣＴＧＧＡＧ ０７０ ＧＣＣＣＴＴＣＴＧＧ ０８０ ＡＧＡＡＴＴＡＡＧＡ ０９０ ＴＡＴＣＣＴＴＣＡＴ １００ ＡＴＡＡＴＣＣＴＴＣ １１０ ＧＣＡＴＧＧＡＴＧＧ １２０ ＡＣＡＴＡＴＣＣＴＧ １３０ ＧＡＣＧＴＧＧＣＴＣ １４０ ＧＣＴＧＣＡＧＴＧＣ １５０ ＴＡＴＡＧＴＡＡＡＧ １６０ ＣＧＧＣＴＡＴＡＡＣ １７０ ＡＡＧＴＴＴＴＣＡＡ １８０ ＡＡＴＧＣＴＡＴＧＡ １９０ ＡＧＴＣＴＡＡＡＴＡ ２００ ＴＧＧＡＡＣＴＡＴＡ ２１０ ＧＣＡＧＣＡＧＴＴＡ ２２０ ＡＴＡＧＴＧＣＡＴＧ ２３０ ＧＧＧＴＡＣＡＡＧＣ ２４０ ＣＴＡＡＣＴＧＡＴＴ ２５０ ＴＴＴＣＴＣＡＡＡＴ ２６０ ＴＡＧＴＣＣＡＣＣＴ ２７０ ＡＣＡＧＡＴＧＧＴＧ ２８０ ＡＴＡＡＴＴＴＣＴＴ ２９０ ＴＡＣＡＡＡＴＧＧＴ ３００ ＴＡＴＡＡＡＡＣＴＡ 第２図 その４ ３１０ ＣＴＴＡＴＧＧＴＡＡ １３２０ １３３０ ＴＧＡＣＴＴＴＴＴＧ ＡＣＡＴＧＧＴＡＴＣ３４０ ＡＡＡＧＴＧＴＴＴＴ ３５０ ＧＡＣＴＡＡＴＧＡＧ ３６０ ＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡ ３７０ ＴＴＧＣＴＴＣＴＧＴ ３８０ ＡＧＣＴＣＡＴＡＧＣ １３９゜ ＴＧＣＴＴＴＧＡＴＣ ４００ ＣＡＧＴＡＴＴＴＡＡ ４１０ ＴＧＴＴＣＣＡＡＴＡ ４２０ ＧＧＡＧＣＡＡＡＡＡ ４３０ ＴＡＧＣＴＧＧＡＧＴ ４４０ ＧＣＡＴＴＧＧＣＴＡ ４５０ ＴＡＴＡＡＴＡＧＴＣ ４６０ ＣＧＡＣＡＡＴＧＣＣ ４７０ ＡＣＡＴＧＣＴＧＣＡ ４８０ ＧＡＡＴＡＴＴＧＴＧ ４９０ ＣＣＧＧＴＴＡＴＴＡ ５００ ＴＡＡＴＴＡＴＡＧＣ １５１０１５２０ ＡＣＧＣＴＡＣＴＣＧ ＡＴＣＡＡＴＴＴＡＡ５３０ ＧＧＣＡＴＣＴＡＡＴ ５４０ ＣＴＴＧＣＴＡＴＧＡ ５５０ ＣＡＴＴＴＡＣＡＴＧ ５６０ ＴＣＴＴＧＡＡＡＴＧ ５７０ ＧＡＴＧＡＴＴＣＴＡ ５８０ ＡＴＧＣＡＴＡＴＧＴ ５９０ ＡＡＧＴＣＣＡＴＡＴ ６００ ＴＡＴＴＣＴＧＣＡＣ ６１０ ＣＴＡＴＧＡＣＧＴＴ ６２０ ＡＧＴＣＣＡＴＴＡＴ ６３０ ＧＴＡＧＣＴＡＡＴＣ ６４０ ＴＴＧＣＴＡＡＴＡＡ ６５０ ＴＡＡＡＧＧＴＡＴＡ １６６０ １６７０ ＧＴＣＣＡＣＡＡＴＧ ＧＡＧＡＡＡＡＴＧＣ６８０ ＴＴＴＧＧＣＴＡＴＡ ６９０ ＴＣＣＡＡＣＡＡＣＡ ７００ ＡＴＣＡＡＧＣＴＴＡ ７１０ ＴＧＴＧＡＡＴＴＧＴ ７２０ ＧＣＡＡＡＴＧＡＡＴ ７３０ ＴＡＡＣＡＧＧＡＴＡ ７４０ ＴＡＡＴＴＴＴＴＣＴ ７５０ ＧＧＡＴＴＴＡＣＡＣ ７６０ ＴＴＴＴＡＡＧＡＣＴ ７７０ ＴＴＣＧＡＡＴＡＴＴ １７８０ １７９０ ＧＴＡＡＡＴＡＧＴＧ ＡＴＧＧＡＴＣＴＧＴ８００ ＧＡＣＡＴＣＡＧＡＧ ８１０ １８２゜ １日３０ ８４０ ８５０ 第２図−その５ １８６０ ＡＣＣＡＧＴＴＡＣＡ ８７０ ＴＴＴＡＣＡＡＴＡＡ ８８０ ＡＣＡＡＴＧＣＧＡＣ ８９０ ＡＡＣＴＴＡＴＴＡＴ ９００ ＧＧＡＣＡＡＡＡＴＧ ９１０ ＴＡＴＡＴＡＴＴＧＴ ９２０ ＴＧＧＴＡＧＴＡＣＡ ９３０ ＴＣＴＧＡＴＣＴＴＧ ９４０ ＧＡＡＡＴＴＧＧＡＡ ９５０ ＴＡＣＡＡＣＣＴＡＴ ９６０ ＧＣＣＣＧＴＧＧＴＣ ９７０ ＣＴＧＣＡＴＣＡＴＧ ９８０ ＣＣＣＴＡＡＴＴＡＴ ９９０ ＣＣＴＡＣＴＴＧＧＡ ０００ ＣＡＡＴＡＡＣＧＣＴ ０１０ ＴＡＡＴＣＴＡＴＴＡ ０２０ ＣＣＴＧＧＴＧＡＧＣ ０３０ ＡＧＡＴＡＣＡＧＴＴ ０４０ ＴＡＡＡＧＣＴＧＴＡ ０５０ ＡＡＡＡＴＴＧＡＴＡ ０６０ ＧＴＴＣＡＧＧＡＡＡ ０７０ ＴＧＴＡＡＣＴＴＧＧ ０８０ ＧＡＡＧＧＴＧＧＣＴ ０９０ ＣＧＡＡＴＣＡＴＡＣ １００ ＴＴＡＴＡＣＴＧＴＧ １１０ ＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧ １２０ ＧＧＡＣＴＧＧＴＡＧ １３０ ＴＧＴＣＡＣＣＡＴＴ １４０ ＡＣＡＴＧＧＣＡＡＡ １５０ ＡＴＴＡＡＴＣＡＡＴ １６０ ＡＡＡＡＴＧＴＴＡＣ １７０ ＡＣＡＴＡＧＡＡＣＡ １８０ ＡＡＴＴＧＴＡＡＡＣ １９０ ＡＣＴＧＧＡＡＴＡＴ ２００ ＡＴＴＣＣＧＧＴＧＴ ２１０ ＴＴＴＴＴＴＧＴＡＴ ２２０ ＡＴＴＡＴＧＧＧＣＧ ２３０ ＴＴＴＡＡＴＧＴＴＡ ２４０ ＡＡＡＡＴＡＡＴＡＧ ２５０ ＴＧＴＴＴＴＧＡＴＴ ２６０ ＴＴＡＴＴＡＡＡＡＡ ２７０ ＧＴＴＴＧＧＡＧＧＴ ２８０ ＡＡＧＡＧＡＴＧＡＧ ２９０ ＴＡＡＡＡＡＡＧＴＴ ３００ ＧＧＴＡＴＴＣＣＡＡ ３１０ ＡＡＧＧＧＣＴＴＴＴ ３２０ ＡＴＡＣＴＡＣＡＡＣ ３３０ ＴＴＴＴＡＴＣＣＴＡ ３４０ ＴＧＴＧＧＡＡＡＡＣ ３５０ ＡＴＴＴＴＴＴＧＡＡ 第２図−その６ ２３６０ ２３７０ ＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧ ＣＴＧＡＡＧＴＧＧＴ３８０ ＴＡＣＴＴＣＣＡＧＴ ２３９０ ２４００ ＧＡＴＡＣＡＴＧＴＡ ＡＡＡＡＡＡＴＡＡＴ４１０ ＴＧＡＴＧＡＴＧＧＣ ４２０ ＡＴＣＡＡＧＡＣＴＴ ２４３０ ２４４０ ＧＣＧＴＧＧＡＴＧＡ ＡＡＣＣＴＧＣＣＴＴ２４５
゜ ＣＣＴＧＴＣＡＡＧＡ ４６０ ＣＡＴＴＴＡＴＧＧＧ ４７０ ＴＣＡＴＧＴＧＡＴＴ ２４８０ ２４９０ ＧＡＴＴＴＧＡＡＧＧ ＡＡＡＡＧＧＧＴＧＴ５００ ＴＧＡＴＴＡＴＡＴＡ ５１０ ＴＴＴＧＴＴＣＣＡＡ ２５２０ ２５３０ ＧＡＧＴＣＡＴＡＡＧ ＣＧＴＡＧＡＡＡＧＧ５４０ ＣＧＴＡＧＡＴＡＴＣ ５５０ ＴＡＴＧＣＴＣＡＡＡ ５６０ ＡＴＴＴＴＴＧＧＧＴ ５７０ ＴＴＧＣＣＴＧＡＣＴ ５８０ ＴＡＧＴＧＡＧＡＡＡ ５９０ ＴＣＴＴＡＴＴＴＣＴ ６００ ＧＡＴＴＴＧＣＣＡＣ ６１０ ＡＡＡＴＡＡＴＡＧＡ ６２０ ＴＡＴＧＡＡＧＡＴＴ ６３０ ＧＡＴＴＡＣＴＡＴＣ ６４０ ＧＴＧＧＡＧＡＡＧＡ ６５０ ＧＴＴＴＡＴＧＧＡＡ ６６０ ＡＧＡＧＡＡＡＴＴＴ ２６７０ ２６８０ ＴＧＡＧＡＧＴＴＧＧ ＣＡＡＧＣＴＧＴＴＴ６９０ ＧＴＴＧＡＴＡＧＣＡ ７００ ＣＡＡＧＴＡＡＡＡＴ ７１０ ＴＡＡＡＧＡＣＧＣＡ ７２０ ＴＡＣＧＡＡＡＡＡＴ ２７３０ ２７４０ ＣＴＴＴＡＡＡＡＡＧ ＧＣＡＡＡＧＧＡＣＴ７５０ ＴＴＴＧＡＡＴＴＣＡ ２７６０ ２７７０ ２７８０Ｔ
ＴＡＴＴＡＧＡＧＡ ＡＧＧＡＴＴＴＴＣＡ ＡＡＴＡ
ＣＡＧＡＡＧ７９０ ＣＡＡＴＡＡＡＡＡＴ ８００ ＴＡＴＧＧＡＡＧＧＧ ８４０ ＝ＴＡＡＡＡＡＴＡＧ ２８５゜ ＣＴＴＴＡＴＴＡＧＣ ８６０ ８７０ ８８０ ８９０ ９００ 第２図−その７ ２９１０ ２９２０ ＧＧＣＴＴＡＡＧＡＡ ＴＡＴＧＧＧＡＧＣＴ９３０ ＴＡＴＧＴＧＣＴＴＡ Ａ ９４０ 第３図− １０ ＣＴＧＣＧＡＡＡＧＧ ２０ ＡＧＧＴＧＡＣＡＣＧ ３０ ＣＧＣＴＴＧＣＡＧＧ ４０ ＡＴＴＣＧＧＧＣＴＴ ５０ ＴＡＡＡＡＡＧＡＡＡ ６０ ＧＡＴＡＧＡＴＴＡＡ ７０ ＣＡＡＣＡＡＡＴＡＴ ８０ ＴＣＣＣＣＡＡＧＡＡ ９０ ＣＡＡＴＴＴＧＴＴＴ ００ ＡＴＡＣＴＡＧＡＧＧ １０ ＡＧＧＡＧＡＡＣＡＣ ２０ ＡＡＧＧＴＣＡＴＧＡ ３０ ＴＴＧＧＡＧＣＴＴＴ ４０ ＴＡＡＡＡＧＧＴＴＧ ５０ ＧＧＴＣＡＡＡＡＡＴ ６０ ＴＧＴＴＴＴＴＧＡＣ ７０ ＡＴＴＧＴＴＡＡＣＧ ８０ ＧＣＡＴＣＡＴＴＡＡ ９０ ＴＴＴＴＴＧＣＡＴＣ ００ ＴＴＣＴＡＴＡＧＴＡ １０ ＡＣＴＧＣＴＡＡＴＧ ２０ ＣＡＡＧＣＡＴＡＧＣ ３０ ＡＣＣＡＡＡＴＴＴＣ ４０ ＡＡＡＧＴＴＴＴＴＧ ５０ ＴＡＡＴＧＧＧＴＣＣ ６０ ＡＴＴＡＧＡＡＡＡＡ ７０ ＧＴＣＡＣＡＧＡＴＴ ８０ ＴＴＡＡＴＧＣＡＴＴ ９０ ＣＡＡＡＧＡＴＣＡＡ ００ ＴＴＧＡＴＡＡＣＴＴ １０ ＴＡＡＡＧＡＡＴＡＡ ２０ ＴＧＧＴＧＴＴＴＡＴ ３０ ＧＧＴＡＴＡＡＣＡＡ ４０ ＣＡＧＡＴＡＴＴＴＧ ５０ ＧＴＧＧＧＧＣＴＡＴ ６０ ＧＴＴＧＡＡＡＡＴＧ ７０ ＣＡＧＧＴＧＡＡＡＡ ８０ ＴＣＡＡＴＴＴＧＡＣ ９０ ＴＧＧＡＧＴＴＡＴＴ ００ ＡＴＡＡＧＡＣＡＴＡ ５９１− 第３図−その３ ８１０ ８２０ ８３０
８４０ ８５０ＴＧＣＴＧＡＴＡＣＣＧ
ＴＡＣＧＣＧＣＴＧ ＣＧＧＧＡＴＴＧＡＡ ＧＴＧＧ
ＧＴＴＣＣＡ ＡＴＡＡＴＧＴＣＡＡ６０ ＣＧＣＡＴＧＣＣＴＧ ７０ ＴＧＧＡＧＧＴＡＡＴ ８０ ＧＴＴＧＧＴＧＡＴＡ ９０ ＣＡＧＴＡＡＡＴＡＴ ００ ＡＣＣＴＡＴＴＣＣＧ １０ ＴＣＡＴＧＧＧＴＡＴ ９２０ ９３０ ＧＧＡＣＡＡＡＡＧＡ ＴＡＣＣＣＡＡＧＡＴ４０ ＡＡＴＡＴＧＣＡＧＴ ５０ ＡＴＡＡＧＧＡＴＧＡ ６０ ＡＧＣＣＧＧＡＡＡＴ ９７０ ９８０ ９９０ＴＧ
ＧＧＡＴＡＡＴＧ ＡＡＧＣＡＧＴＡＡＧ ＴＣＣＡＴ
ＧＧＴＡＴ０００ ＴＣＴＧＧＣＴＴＡＡ ０１０ ＣＣＣＡＡＣＴＣＴＡ ０２０ ＴＡＡＴＧＡＡＴＴＴ ０３０ ＴＡＴＴＣＡＴＣＴＴ ０４０ ＴＴＧＣＡＴＣＡＡＡ １０５゜ ＴＴＴＴＡＧＣＡＧＣ ０６０ ＴＡＴＡＡＡＧＡＴＡ ０７０ ＴＡＡＴＴＡＣＴＡＡ １０８０ １０９０ ＡＡＴＡＴＡＴＡＴＡ ＴＣＴＧＧＡＧＧＣＣ１００ ＣＴＴＣＴＧＧＡＧＡ １１０ ＡＴＴＡＡＧＡＴＡＴ １１２０ １１３０ ＣＣＴＴＣＡＴＡＴＡ ＡＴＣＣＴＴＣＧＣＡ１４０ ＴＧＧＡＴＧＧＡＣＡ １５０ ＴＡＴＣＣＴＧＧＡＣ １６０ ＧＴＧＧＣＴＣＧＣＴ １７０ ＧＣＡＧＴＧＣＴＡＴ １８０ ＡＧＴＡＡＡＧＣＧＧ １１９０ １２００ ＣＴＡＴＡＡＣＡＡＧ ＴＴＴＴＣＡＡＡＡＴ１２１
０ １２２０ １２３０
１２４０ＧＣＴＡＴＧＡＡＧＴ ＣＴＡＡＡＴＡＴ
ＧＧ ＡＡＣＴＡＴＡＧＣＡ ＧＣＡＧＴＴＡＡＴＡ２
５０ ＧＴＧＣＡＴＧＧＧＧ １２６０ １２７０ ＴＡＣＡＡＧＣＣＴＡ ＡＣＴＧＡＴＴＴＴＴ２８０ ＣＴＣＡＡＡＴＴＡＧ ２９０ ＴＣＣＡＣＣＴＡＣＡ ３００ ＧＡＴＧＧＴＧＡＴＡ ３１０ ＡＴＴＴＣＴＴＴＡＣ ３２０ ＡＡＡＴＧＧＴＴＡＴ ３３０ ＡＡＡＡＣＴＡＣＴＴ ３４０ ＡＴＧＧＴＡＡＴＧＡ ３５０ ＣＴＴＴＴＴＧＡＣＡ 第３図−その４ ３６０ ＴＧＧＴＡＴＣＡＡＡ ３７０ ＧＴＧＴＴＴＴＧＡＣ ３８０ ＴＡＡＴＧＡＧＴＴＡ ３９０ ＧＣＣＡＡＴＡＴＴＧ ４００ ＣＴＴＣＴＧＴＡＧＣ ４１０ ＴＣＡＴＡＧＣＴＧＣ ４２０ ＴＴＴＧＡＴＣＣＡＧ ４３０ ＴＡＴＴＴＡＡＴＧＴ ４４０ ＴＣＣＡＡＴＡＧＧＡ ４５０ ＧＣＡＡＡＡＡＴＡＧ ４６０ ＣＴＧＧＡＧＴＧＣＡ ４７０ ＴＴＧＧＣＴＡＴＡＴ ４８０ ＡＡＴＡＧＴＣＣＧＡ ４９０ ＣＡＡＴＧＣＣＡＣＡ ５００ ＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡ ５１０ ＴＡＴＴＧＴＧＣＣＧ ５２０ ＧＴＴＡＴＴＡＴＡＡ １５３゜ ＴＴＡＴＡＧＣＡＣＧ ５４０ ＣＴＡＣＴＣＧＡＴＣ ５５０ ＡＡＴＴＴＡＡＧＧＣ ５６０ ＡＴＣＴＡＡＴＣＴＴ ５７０ ＧＣＴＡＴＧＡＣＡＴ ５８０ ＴＴＡＣＡＴＧＴＣＴ ５９０ ＴＧＡＡＡＴＧＧＡＴ ６００ ＧＡＴＴＣＴＡＡＴＧ ６１０ ＣＡＴＡＴＧＴＡＡＧ ６２０ ＴＣＣＡＴＡＴＴＡＴ ６３０ ＴＣＴＧＣＡＣＣＴＡ ６４０ ＴＧＡＣＧＴＴＡＧＴ ６５０ ＣＣＡＴＴＡＴＧＴＡ ６６０ ＧＣＴＡＡＴＣＴＴＧ ６７０ ＣＴＡＡＴＡＡＴＡＡ ６８０ ＡＧＧＴＡＴＡＧＴＣ ６９０ ＣＡＣＡＡＴＧＧＡＧ ７００ ＡＡＡＡＴＧＣＴＴＴ ７１０ ＧＧＣＴＡＴＡＴＣＣ ７２０ ＡＡＣＡＡＣＡＡＴＣ ７３０ ＡＡＧＣＴＴＡＴＧＴ ７４０ ＧＡＡＴＴＧＴＧＣＡ ７５０ ＡＡＴＧＡＡＴＴＡＡ ７６０ ＣＡＧＧＡＴＡＴＡＡ ７７０ ＴＴＴＴＴＣＴＧＧＡ ７８０ ＴＴＴＡＣＡＣＴＴＴ ７９０ ＴＡＡＧＡＣＴＴＴＣ ８００ ＧＡＡＴＡＴＴＧＴＡ 第３図−その６ ２４１０ ＴＴＣＣＡＧＴＧＡＴ ４２０ ＡＣＡＴＧＴＡＡＡＡ ４３０ ＡＡＡＴＡＡＴＴＧＡ ４４０ ＴＧＡＴＧＧＣＡＴＣ ４５０ ＡＡＧＡＣＴＴＧＣＧ ４６０ ＴＧＧＡＴＧＡＡＡＣ ４７０ ＣＴＧＣＣＴＴＣＣＴ ４８０ ＧＴＣＡＡＧＡＣＡＴ ４９０ ＴＴＡＴＧＧＧＴＣＡ ５００ ＴＧＴＧＡＴＴＧＡＴ ５１０ ＴＴＧＡＡＧＧＡＡＡ ５２０ ＡＧＧＧＴＧＴＴＧＡ ５３０ ＴＴＡＴＡＴＡＴＴＴ ５４０ ＧＴＴＣＣＡＡＧＡＧ ５５０ ＴＣＡＴＡＡＧＣＧＴ ５６０ ＡＧＡＡＡＧＧＣＧＴ ５７０ ＡＧＡＴＡＴＣＴＡＴ ５８０ ＧＣＴＣＡＡＡＡＴＴ ５９０ ＴＴＴＧＧＧＴＴＴＧ ６００ ＣＣＴＧＡＣＴＴＡＧ ６１０ ＴＧＡＧＡＡＡＴＣＴ ６２０ ＴＡＴＴＴＣＴＧＡＴ ６３０ ＴＴＧＣＣＡＣＡＡＡ ６４０ ＴＡＡＴＡＧＡＴＡＴ ６５０ ＧＡＡＧＡＴＴＧＡＴ ６６０ ＴＡＣＴＡＴＣＧＴＧ ６７０ ＧＡＧＡＡＧＡＧＴＴ ６８０ ＴＡＴＧＧＡＡＡＧＡ ６９０ ＧＡＡＡＴＴＴＴＧＡ ７００ ＧＡＧＴＴＧＧＣＡＡ ７１０ ＧＣＴＧＴＴＴＧＴＴ ７２０ ＧＡＴＡＧＣＡＣＡＡ ７３０ ＧＴＡＡＡＡＴＴＡＡ ７４０ ＡＧＡＣＧＣ：ＡＴＡＣ ７５０ ＧＡＡＡＡＡＴＣＴＴ ７６０ ＴＡＡＡＡＡＧＧＣＡ ７７０ ＡＡＧＧＡＣＴＴＴＴ ７８０ ＧＡＡＴＴＣＡＴＴＡ ７９０ ＴＴＡＧＡＧＡＡＧＧ ８００ ＡＴＴＴＴＣＡＡＡＴ ８１０ ＡＣＡＧＡＡＧＣＡＡ ８２０ ＴＡＡＡＡＡＴＴＡＴ ８３０ ＧＧＡＡＧＧＧＡＡＡ ８４０ ＡＡＡＴＴＡＧＡＣＧ ８５０ ＣＡＡＡＴＡＣＡＡＡ 第３図−その７ ２９１０ ＡＴＴＡＴＴＴＡＴＣ ２９２゜ ＴＡＴＧＧＧＡＴＴＧ ９３０ ＡＴＡＡＡＴＡＧＧＣ ９４０ ＴＴＡＡＧＡＡＴＡＴ ９５０ ＧＧＧＡＧＣＴＴＡＴ ９６０ ＧＴＧＣＴＴＡＣＡ
３図は、ｐＭＭ３のＤＮＡ塩基配列の一部を示す。第４
図は、ｐＭＭｌの制限酵素地図を示す。第５図は、ｐＭ
Ｍ２の制限酵素地図を示す。第６図は、ｐＭＭ３の制限
酵素地図を示す。 第 １図−その ０ ＣＣＡＡＴＧＧＣＴＴ ０ ＴＣＧＣＡＧＣＡＧＡ ０ ＡＧＡＡＧＣＡＧＣＡ ０ ＡＣＴＡＣＴＡＣＡＧ ０ ＣＴＣＣＡＡＡＡＡＴ ０ ＧＧＡＣＧＣＴＧＡＴ ０ ＡＴＧＧＡＡＡＡＡＡ ０ ＣＣＧＴＡＡＡＡＣＧ ０ ＴＣＴＧＧＡＡＧＣＴ ００ ＣＴＴＧＧＣＧＧＡＴ １０ ＣＴＴＡＧＴＴＴＡＧ ２０ ＧＴＧＴＧＴＴＴＴＴ ３０ ＡＴＡＣＴＡＴＧＧＣ ４０ ＧＣＡＴＴＡＡＡＡＧ ５０ ＧＡＡＴＡＣＣＧＡＣ ６０ ＡＴＣＴＴＴＡＧＡＴ ７０ ＧＡＡＧＣＡＧＣＴＴ ８０ ＴＡＡＴＡＧＡＴＧＧ ９０ ＴＴＧＴＡＧＴＡＧＡ ００ ＴＴＴＡＧＡＡＴＣＴ １０ ＡＣＴＧＧＡＡＴＡＴ ２０ ＣＡＴＡＣＴＧＣＣＡ ３０ ＴＴＡＴＴＡＡＡＴＣ ４０ ＣＴＡＣＴＡＣＧＡＴ ５０ ＣＡＣＣＣＴＴＧＣＡ ６０ ＧＴＴＴＴＧＧＡＴＡ ７０ ＴＴＡＴＧＴＧＧＡＴ ８０ ＡＴＧＧＡＡＴＧＡＣ ９０ ＴＡＣＴＴＡＴＴＧＣ ００ ＣＡＴＣＴＴＴＡＧＴ’ １０ ＣＡＴＡＡＡＣＡＡＧ ２０ ＴＣＧＧＴＴＣＣＡＧ ３０ ＧＡＣＧＣＴＴＣＣＡ ４０ ＣＴＡＡＴＧＡＴＴＴ ５０ ＴＴＴＡＣＴＴＣＴＴ ６０ ＴＡＧＣＣＡＧＴＡＣ ７０ ＡＣＡＡＡＧＣＡＧＴ ８０ ＧＧＡＡＴＣＴＣＧＧ ９０ ＴＡＴＧＧＣＡＧＧＡ ００ ＣＴＧＡＣＡＡＴＡＧ 弔 １図〜その １０ ＣＡＡＴＴＴＴＡＣＣ ２０ ＴＧＴＴＧＴＡＡＴＴ ３０ ＴＴＣＴＡＣＴＴＣＴ ４０ ＴＧＧＣＡＣＡＧＡＧ ５０ ＡＡＡＡＴＴＡＧＴＣ ６０ ＡＣＡＧＣＴＡＴＡＡ ７０ ＴＡＧＣＴＧＧＴＧＣ ８０ ＴＧＴＡＡＡＧＣＡＧ ９０ ＴＡＧＧＴＡＡＡＧＣ ００ ＡＡＡＡＴＴＡＴＡＧ １０ ＴＴＡＧＧＡＧＧＴＧ ２０ ＡＴＡＴＴＡＡＡＡＴ ３０ ＡＧＡＡＡＴＴＴＧＡ ４０ ＴＡＧＡＡＡＣＴＧＡ ５０ ＡＴＡＴＡＡＴＴＡＴ ６０ ＴＧＡＡＡＧＧＧＧＴ ７０ ＧＧＧＡＡＣＴＡＴＴ ８０ ＧＧＣＡＡＡＡＴＡＡ ９０ ＴＡＴＣＴＴＡＴＴＡ ００ ＡＡＡＴＴＴＴＴＧＧ １０ ＣＧＧＣＡＡＡＡＡＡ ２０ ＴＡＧＴＧＡＴＴＡＴ ３０ ＡＴＴＡＴＴＴＴＴＡ ４０ ＴＣＧＴＡＴＧＡＴＧ ５０ ＧＧＡＧＧＧＡＡＡＡ ６０ ＴＡＡＡＡＡＴＡＧＡ ７０ ＴＧＡＴＴＧＧＡＧＣ ８０ ＴＴＴＴＡＡＡＡＧＧ ９０ ＴＴＧＧＧＴＣＡＡＡ ００ ＡＡＴＴＧＴＴＴＴＴ １０ ＧＡＣＡＴＴＧＴＴＡ ？２０ ＡＣＧＧＣＡＴＣＡＴ ３０ ＴＡＡＴＴＴＴＴＧＣ ４０ ＡＴＣＴＴＣＴＡＴＡ ５０ ＧＴＡＡＣＴＧＣＴＡ ） ７９０ ８００Ｔ
ＴＴＧＴＡＡＴＧＧＧ ＴＣＣＡＴＴＡＧＡＡ５８４
− 第１図 その５ １８６０ １８７０ ＴＣＣＡＡＣＡＡＣＡ ＡＴＣＡＡＧＣＴＴＡ８８０ ＴＧＴＧＡＡＴＴＧＴ ８９０ ＧＣＡＡＡＴＧＡＡＴ ９００ ＴＡＡＣＡＧＧＡＴＡ ９１０ ＴＡＡＴＴＴＴＴＣＴ ９２０ ＧＧＡＴＴＴＡＣＡＣ ９３０ ＴＴＴＴＡＡＧＡＣＴ ９４０ ＴＴＣＧＡＡＴＡＴＴ ９５０ ＧＴＡＡＡＴＡＧＴＧ ９６０ ＡＴＧＧＡＴＣＴＧＴ ９７０ ＧＡＣＡＴＣＡＧＡＧ ９８０ ＡＴＧＧＣＴＣＣＴＴ ９９０ ＴＴＧＴＡＡＴＴＡＡ ０００ ＴＡＴＡＧＴＴＡＣＡ ０１０ ＣＴＡＡＣＧＣＣＴＡ ０２０ ＡＣＧＧＴＡＣＧＡＴ ０３０ ＡＣＣＡＧＴＴＡＣＡ ０４０ ＴＴＴＡＣＡＡＴＡＡ ０５０ ＡＣＡＡＴＧＣＧＡＣ ０６０ ＡＡＣＴＴＡＴＴＡＴ ２０７０ ２０８０ ＧＧＡＣＡＡＡＡＴＧ ＴＡＴＡＴＡＴＴＧＴ０９０ ＴＧＧＴＡＧＴＡＣＡ １００ ＴＣＴＧＡＴＣＴＴＧ ２１１０ ２１２０ ＧＡＡＡＴＴＧＧＡＡ ＴＡＣＡＡＣＣＴＡＴ１３０ ＧＣＣＣＧＴＧＧＴＣ １４０ ＣＴＧＣＡＴＣＡＴＧ １５０ ＣＣＣＴＡＡＴＴＡＴ １６０ ＣＣＴＡＣＴＴＧＧＡ １７０ ＣＡＡＴＡＡＣＧＣＴ １８０ ＴＡＡＴＣＴＡＴＴＡ １９０ ＣＣＴＧＧＴＧＡＧＣ ２００ ＡＧＡＴＡＣＡＧＴＴ ２２１０ ２２２０ ＴＡＡＡＧＣＴＧＴＡ ＡＡＡＡＴＴＧＡＴＡ２３０ ＧＴＴＣＡＧＧＡＡＡ ２４０ ＴＧＴＡＡＣＴＴＧＧ ２５０ ＧＡＡＧＧＴＧＧＣＴ ２６０ ＣＧＡＡＴＣＡＴＡＣ ２７０ ＴＴＡＴＡＣＴＧＴＧ ２２８０ ２２９０ ＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧ ＧＧＡＣＴＧＧＴＡＧ３００ ＴＧＴＣＡＣＣＡＴＴ ３１０ ＡＣＡＴＧＧＣＡＡＡ ３２０ ＡＴＴＡＡＴＣＡＡＴ ３３０ ＡＡＡＡＴＧＴＴＡＣ ２３４０２３５０ ＡＣＡＴＡＧＡＡＣＡ ＡＡＴＴＧＴＡＡＡＣ３６０ ＡＣＴＧＧＡＡＴＡＴ ３７０ ＡＴＴＣＣＧＧＴＧＴ ３８０ ＴＴＴＴＴＴＧＴＡＴ ３９０ ＡＴＴＡＴＧＧＧＣＧ ４００ ＴＴＴＡＡＴＧＴＴＡ 第１図 その６ ４１０ ＡＡＡＡＴＡＡＴＡＧ ４２０ ＴＧＴＴＴＴＧＡＴＴ ４３０ ＴＴＡＴＴＡＡＡＡＡ ４４０ ＧＴＴＴＧＧＡＧＧＴ ４５０ ＡＡＧＡＧＡＴＧＡＧ ４６０ ＴＡＡＡＡＡＡＧＴＴ ４７０ ＧＧＴＡＴＴＣＣＡＡ ４８０ ＡＡＧＧＧＣＴＴＴＴ ４９０ ＡＴＡＣＴＡＣＡＡＣ ５００ ＴＴＴＴＡＴＣＣＴＡ ５１０ ＴＧＴＧＧＡＡＡＡＣ ５２０ ＡＴＴＴＴＴＴＧＡＡ ５３０ ＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧ ５４０ ＣＴＧＡＡＧＴＧＧＴ ５５０ ＴＡＣＴＴＣＣＡＧＴ ５６０ ＧＡＴＡＣＡＴＧＴＡ ５７０ ＡＡＡＡＡＡＴＡＡＴ ５８０ ＴＧＡＴＧＡＴＧＧＣ ５９０ ＡＴＣＡＡＧＡＣＴＴ ６００ ＧＣＧＴＧＧＡＴＧＡ ６１０ ＡＡＣＣＴＧＣＣＴＴ ６２０ ＣＣＴＧＴＣＡＡＧＡ ２６３０ ２６４０ ＣＡＴＴＴＡＴＧＧＧ ＴＣＡＴＧＴＧＡＴＴ６５０ ＧＡＴＴＴＧＡＡＧＧ ６６０ ＡＡＡＡＧＧＧＴＧＴ ６７０ ＴＧＡＴＴＡＴＡＴＡ ６８０ ＴＴＴＧＴＴＣＣＡＡ ６９０ ＧＡＧＴＣＡＴＡＡＧ ７００ ＣＧＴＡＧＡＡＡＧＧ ７１０ ＣＧＴＡＧＡＴＡＴＣ ７２０ ＴＡＴＧＣＴＣＡＡＡ ７３０ ＡＴＴＴＴＴＧＧＧＴ ７４０ ＴＴＧＣＣＴＧＡＣＴ ７５０ ＴＡＧＴＧＡＧＡＡＡ ７６０ ＴＣＴＴＡＴＴＴＣＴ ７７０ ＧＡＴＴＴＧＣＣＡＣ ２７８０２７９０ ＡＡＡＴＡＡＴＡＧＡ ＴＡＴＧＡＡＧＡＴＴ８００ ＧＡＴＴＡＣＴＡＴＣ ８１０ ＧＴＧＧＡＧＡＡＧＡ ２８２０ ２８３０ ＧＴＴＴＡＴＧＧＡＡ ＡＧＡＧＡＡＡＴＴＴ８４０ ＴＧＡＧＡＧＴＴＧＧ ８５０ ＣＡＡＧＣＴＧＴＴＴ ８６０ ＧＴＴＧＡＴＡＧＣＡ ８７０ ＣＡＡＧＴＡＡＡＡＴ ８８０ ＴＡＡＡＧＡＣＧＣＡ ８９０ ＴＡＣＧＡＡＡＡＡＴ ９００ ＣＴＴＴＡＡＡＡＡＧ ５８６− 第１図−そのＴ ２９１０ ２９２０ ＧＣＡＡＡＧＧＡＣＴ ＴＴＴＧＡＡＴＴＣＡ２９３
０ ２９４０ ＴＴＡＴＴＡＧＡＧＡ ＡＧＧＡＴＴＴＴＣＡ９５０ ＡＡＴＡＣＡＧＡＡＧ ９６０ ＣＡＡＴＡＡＡＡＡＴ ９７０ ＴＡＴＧＧＡＡＧＧＧ ９８０ ＡＡＡＡＡＡＴＴＡＧ ９９０ ＡＣＧＣＡＡＡＴＡＣ ０００ ＡＡＡＡＧＧＧＧＡＴ ０１０ ＴＴＡＡＡＡＡＴＡＧ ０２０ ＣＴＴＴＡＴＴＡＧＣ ０３０ ＣＣＡＴＴＣＣＴＡＴ ０４０ ＧＡＣＡＴＡＡＴＧＧ ０５０ ＡＴＧＡＴＴＡＴＴＴ ０６０ ＡＴＣＴＡＴＧＧＧＡ ０７０ ＴＴＧＡＴＡＡＡＴＡ ０８０ ＧＧＣＴＴＡＡＧＡＡ ０９０ ＴＡＴＧＧＧＡＧＣＴ １００ ＴＡＴＧＴＧＣＴＴＡ １１０ ＣＡＡＣＡＡＡＴＡＴ １２０ ＧＡＴＡＧＡＡＡＧＡ １３０ ＧＡＴＡＡＡＡＴＴＧ １４０ ＡＡＡＡＴＧＧＴＧＣ １５０ ＣＡＧＣＡＡＡＣＴＴ １６０ ＣＡＡＡＡＡＧＡＴＴ １７０ ＴＡＴＴＴＴＧＧＡＣ １８０ ＴＴＡＴＧＧＡＡＧＧ １９０ ＧＡＴＡＴＴＴＴＡＧ ２００ ＧＴＧＣＡＧＧＴＡＡ ２１０ ＡＴＡＴＴＴＴＡＴＣ ２２０ ＧＡＧＡＧＣＡＡＡＧ ２３０ ＡＡＧＴＧＧＡＣＧＧ ２４０ ＧＧＴＡＡＴＡＴＣＴ ２５０ ＧＴＴＴＣＴＧＣＴＴ ２６０ ＴＴＧＧＡＴＧＴＧＧ ２７０ ＧＣＣＡＧＡＣＴＣＴ ２８０ ＡＴＣＡＣＴＧＡＴＧ ２９０ ＡＣＣＴＴＴＴＡＧＡ ３００ ＡＡＧＧＧＡＴＴＡＣ ３１０ ＡＡＧＡＧＡＧＡＴＧ ３２０ ＧＴＧＧＧＡＴＴＣＣ ３３０ ＡＴＴＴＡＴＧＣＣＣ ３４０ ＡＴＡＡＣＣＡＴＴＧ ３５０ ＡＴＧＡＡＣＡＴＡＣ ３６０ ＴＧＧＴＧＡＧＧＣＡ ３７０ ＧＧＴＴＴＡＡＡＣＴ ３８０ ＡＣＣＴＡＧＧＴＴＡ ３９０ ＧＡＡＧＣＣＴＴＴＡ ４００ ＴＧＧＡＴＴＴＧＴＴ 第１図−その８ ４１０ ＡＡＧＡＴＧＧＣＣＡ ４２０ ＣＡＡＧＧＡＧＡＧＡ ４３０ ＴＴＡＴＧＧＣＡＴＧ ４４０ ＡＡＡＡＴＡＡＣＡＴ ４５０ ＡＴＣＣＡＣＡＴＡＴ ４６０ ＧＧＧＴＴＣＧＴＴＡ ４７０ ＡＡＴＡＴＧＡＴＡＴ ４８０ ＴＡＡＡＧＡＣＧＡＴ ４９０ ＧＴＴＴＧＡＡＧＧＡ ５００ ＡＴＣＡＡＴＧＴＡＧ ５１０ ＡＡＧＴＴＧＴＧＧＡ ５２０ ＧＣＣＧＣＣＡＣＣＴ ５３０ ＧＴＧＡＣＴＡＡＴＡ ３５４０ ３５５０ ＧＧＡＣＴＣＴＡＴ、ＣＡＡＴＴＧＧＡＧＴＡ５６０ ＡＡＡＴＡＴＴＣＡＣ ５７０ ＣＴＧＡＧＴＴＴＧＴ ５８０ ＣＴＧＴＣＴＴＣＣＡ ５９０ ＴＡＴＡＡＧＡＴＡＡ ６００ ＡＴＣＴＧＧＧＧＡＡ ６１０ ＴＴＴＴＡＴＡＧＡＡ ６２０ ＧＣＡＣＴＴＧＡＡＡ ６３０ ＡＣＧＧＴＧＣＴＧＡ ６４０ ＴＡＣＴＡＴＡＡＴＡ ６５０ ＡＴＧＴＴＧＧＧＴＧ ６６０ ＧＴＡＴＡＧＧＧＣＣ ６７０ ＴＴＧＣＡＧＧＴＴＣ ６８０ ＧＧＴＴＡＴＴＡＴＧ ６９０ ＧＡＣＡＡＧＣＡＣＡ ７００ ＡＡＧＡＧＡＡＡＣＡ ７１０ ＴＴＡＡＴＴＧＡＴＣ ７２０ ＴＴＧＧＡＴＡＣＡＡ ７３０ ＧＴＴＴＡＡＴＡＴＧ ７４０ ＡＣＴＡＡＴＡＴＴＡ ７５０ ＧＡＴＣＣＡＣＡＧＧ ７６０ ＡＣＧＧＧＴＧＴＧＧ ７７０ ＴＣＧＣＣＡＴＧＡＴ ７８０ ＣＧＣＧＴＡＧＴＣＧ ７９０ ＡＴＡＧＴＧＧＣＴＣ ８００ ＣＡＡＧＴＡＧＣＧＡ ８１０ ＡＧＣＧＡＧＣＡＧＧ ８２０ ＡＣＴＧＧＧＣＧＧＣ ８３０ ＧＧＣＣＡＡＡＧＣＧ ８４０ ＧＴＣＧＧＡＣＡＧＴ ８５０ ＧＣＴＣＣＧＡＧＡＡ ８６０ ＧＧ 第２図 その ０ ＡＧＡＴＣＴＡＡＡＧ ０ ＣＴＡＴＣＣＴＧＴＣ ０ ＴＴＡＣＡＡＣＴＴＧ ０ ＧＣＴＧＴＴＧＴＡＡ ０ ＡＣＴＴＴＧＡＡＡＡ ０ ＴＧＣＡＴＴＡＧＧＡ ０ ＡＡＴＴＡＡＣＣＴＡ ０ ＡＴＴＣＡＡＧＣＡＡ ０ ＧＡＴＴＡＴＧＡＧＧ ００ ＴＴＴＴＧＡＡＣＣＡ １０ ＡＡＴＴＧＧＡＡＡＡ ２０ ＡＧＧＴＴＣＡＧＴＣ ３０ ＧＴＧＡＣＡＧＣＣＣ ４０ ＧＣＣＡＴＡＴＧＴＣ ５０ ＣＣＣＴＡＴＡＡＴＡ ６０ ＣＧＧＡＴＴＧＴＧＧ ７０ ＣＧＧＡＴＧＴＣＡＣ ８０ ＴＴＣＧＴＡＣＡＴＡ ９０ ＡＴＧＧＡＣＡＧＧＴ ００ ＧＡＡＴＡＡＣＧＡＡ １０ ＣＣＡＣＧＡＡＡＡＡ ２０ ＡＡＣＴＴＴＡＡＡＴ ３０ ＴＴＴＴＴＴＣＧＡＡ ４０ ＧＧＣＧＣＣＧＣＡＡ ５０ ＣＴＴＴＴＧＡＴＴＣ ６０ ＧＣＴＣＡＧＧＣＧＴ ７０ ＴＴＡＡＴＡＧＧＡＴ ８０ ＧＴＣＡＣＡＣＧＡＡ ９０ ＡＡＡＣＧＧＧＧＡＡ ００ ＴＴＧＴＧＴＡＡＡＡ １０ ＡＡＧＡＴＴＣＡＣＧ ２０ ＡＡＴＴＣＴＡＧＣＡ ３０ ＧＴＴＧＴＧＴＴＡＣ ４０ ＡＣＴＡＧＴＧＡＴＴ ５０ ＧＴＴＧＣＡＴＴＴＴ ６０ ＡＣＡＣＡＡＴＡＣＴ ７０ ＧＡＡＴＡＴＡＣＴＡ ８０ ＧＡＧＡＴＴＴＴＴＡ ９０ ＡＣＡＣＡＡＡＡＡＧ ００ ＣＧＡＧＧＣＴＴＴＣ 第２図−その２ １０ ＣＴＧＣＧＡＡＡＧＧ ２０ ＡＧＧＴＧＡＣＡＣＧ ３０ ＣＧＣＴＴＧＣＡＧＧ ４０ ＡＴＴＣＧＧＧＣＴＴ ５０ ＴＡＡＡＡＡＧＡＡＡ ６０ ＧＡＴＡＧＡＴＴＡＡ ７０ ＣＡＡＣＡＡＡＴＡＴ ８０ ＴＣＣＣＣＡＡＧＡＡ ９０ ＣＡＡＴＴＴＧＴＴＴ ００ ＡＴＡＣＴＡＧＡＧＧ １０ ＡＧＧＡＧＡＡＣＡＣ ２０ ＡＡＧＧＴＴＡＴＧＡ ３０ ＡＡＡＡＧＧＴＣＧＴ ４０ ＴＡＡＣＡＧＴＧＴＡ ５０ ＴＴＧＧＣＴＡＧＴＧ ６０ ＣＡＣＴＣＧＣＡＣＴ ７０ ＴＡＣＴＧＴＴＧＣＴ ８０ ＣＣＣＡＴＧＧＣＴＴ ９０ ＴＣＧＣＴＡＧＣＡＴ ００ ＣＧＣＴＣＣＡＡＡＣ １０ ＴＴＣＡＡＡＧＴＴＴ ２０ ＴＣＧＴＴＡＴＧＧＧ ３０ ＴＣＣＡＴＴＡＧＡＡ ４０ ＡＡＡＧＴＣＡＣＡＧ ５０ ＡＴＴＴＴＡＡＴＧＣ ６０ ＡＴＴＣＡＡＡＧＡＴ ７０ ＣＡＡＴＴＧＡＴＡＡ ８０ ＣＴＴＴＡＡＡＧＡＡ ９０ ＴＡＡＴＧＧＴＧＴＴ ００ ＴＡＴＧＧＴＡＴＡＡ １０ ＣＡＡＣＡＧＡＴＡＴ ２０ ＴＴＧＧＴＧＧＧＧＣ ３０ ＴＡＴＧＴＴＧＡＡＡ ４０ ＡＴＧＣＡＧＧＴＧＡ ５０ ＡＡＡＴＣＡＡＴＴＴ ６０ ７０ ８０ ９０ ００ 第２図−その３ ８１０ ＧＡＡＧＴＧＧＧＴＴ ２０ ＣＣＡＡＴＡＡＴＧＴ ３０ ＣＡＡＣＧＣＡＴＧＣ ４０ ＣＴＧＴＧＧＡＧＧＴ ５０ ＡＡＴＧＴＴＧＧＴＧ ６０ ＡＴＡＣＡＧＴＡＡＡ ７０ ＴＡＴＡＣＣＴＡＴＴ ８０ ＣＣＧＴＣＡＴＧＧＧ ９０ ＴＡＴＧＧＡＣＡＡＡ ００ ＡＧＡＴＡＣＣＣＡＡ １０ ＧＡＴＡＡＴＡＴＧＣ ２０ ＡＧＴＡＴＡＡＧＧＡ ３０ ＴＧＡＡＧＣＣＧＧＡ ４０ ＡＡＴＴＧＧＧＡＴＡ ５０ ＡＴＧＡＡＧＣＡＧＴ ６０ ＡＡＧＴＣＣＡＴＧＧ ７０ ＴＡＴＴＣＴＧＧＣＴ ８０ ＴＡＡＣＣＣＡＡＣＴ ９０ ＣＴＡＴＡＡＴＧＡＡ ０００ ＴＴＴＴＡＴＴＣＡＴ ０１０ ＣＴＴＴＴＧＣＡＴＣ ０２０ ＡＡＡＴＴＴＴＡＧＣ ０３０ ＡＧＣＴＡＴＡＡＡＧ ０４０ ＡＴＡＴＡＡＴＴＡＣ ０５０ ＴＡＡＡＡＴＡＴＡＴ ０６０ ＡＴＡＴＣＴＧＧＡＧ ０７０ ＧＣＣＣＴＴＣＴＧＧ ０８０ ＡＧＡＡＴＴＡＡＧＡ ０９０ ＴＡＴＣＣＴＴＣＡＴ １００ ＡＴＡＡＴＣＣＴＴＣ １１０ ＧＣＡＴＧＧＡＴＧＧ １２０ ＡＣＡＴＡＴＣＣＴＧ １３０ ＧＡＣＧＴＧＧＣＴＣ １４０ ＧＣＴＧＣＡＧＴＧＣ １５０ ＴＡＴＡＧＴＡＡＡＧ １６０ ＣＧＧＣＴＡＴＡＡＣ １７０ ＡＡＧＴＴＴＴＣＡＡ １８０ ＡＡＴＧＣＴＡＴＧＡ １９０ ＡＧＴＣＴＡＡＡＴＡ ２００ ＴＧＧＡＡＣＴＡＴＡ ２１０ ＧＣＡＧＣＡＧＴＴＡ ２２０ ＡＴＡＧＴＧＣＡＴＧ ２３０ ＧＧＧＴＡＣＡＡＧＣ ２４０ ＣＴＡＡＣＴＧＡＴＴ ２５０ ＴＴＴＣＴＣＡＡＡＴ ２６０ ＴＡＧＴＣＣＡＣＣＴ ２７０ ＡＣＡＧＡＴＧＧＴＧ ２８０ ＡＴＡＡＴＴＴＣＴＴ ２９０ ＴＡＣＡＡＡＴＧＧＴ ３００ ＴＡＴＡＡＡＡＣＴＡ 第２図 その４ ３１０ ＣＴＴＡＴＧＧＴＡＡ １３２０ １３３０ ＴＧＡＣＴＴＴＴＴＧ ＡＣＡＴＧＧＴＡＴＣ３４０ ＡＡＡＧＴＧＴＴＴＴ ３５０ ＧＡＣＴＡＡＴＧＡＧ ３６０ ＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡ ３７０ ＴＴＧＣＴＴＣＴＧＴ ３８０ ＡＧＣＴＣＡＴＡＧＣ １３９゜ ＴＧＣＴＴＴＧＡＴＣ ４００ ＣＡＧＴＡＴＴＴＡＡ ４１０ ＴＧＴＴＣＣＡＡＴＡ ４２０ ＧＧＡＧＣＡＡＡＡＡ ４３０ ＴＡＧＣＴＧＧＡＧＴ ４４０ ＧＣＡＴＴＧＧＣＴＡ ４５０ ＴＡＴＡＡＴＡＧＴＣ ４６０ ＣＧＡＣＡＡＴＧＣＣ ４７０ ＡＣＡＴＧＣＴＧＣＡ ４８０ ＧＡＡＴＡＴＴＧＴＧ ４９０ ＣＣＧＧＴＴＡＴＴＡ ５００ ＴＡＡＴＴＡＴＡＧＣ １５１０１５２０ ＡＣＧＣＴＡＣＴＣＧ ＡＴＣＡＡＴＴＴＡＡ５３０ ＧＧＣＡＴＣＴＡＡＴ ５４０ ＣＴＴＧＣＴＡＴＧＡ ５５０ ＣＡＴＴＴＡＣＡＴＧ ５６０ ＴＣＴＴＧＡＡＡＴＧ ５７０ ＧＡＴＧＡＴＴＣＴＡ ５８０ ＡＴＧＣＡＴＡＴＧＴ ５９０ ＡＡＧＴＣＣＡＴＡＴ ６００ ＴＡＴＴＣＴＧＣＡＣ ６１０ ＣＴＡＴＧＡＣＧＴＴ ６２０ ＡＧＴＣＣＡＴＴＡＴ ６３０ ＧＴＡＧＣＴＡＡＴＣ ６４０ ＴＴＧＣＴＡＡＴＡＡ ６５０ ＴＡＡＡＧＧＴＡＴＡ １６６０ １６７０ ＧＴＣＣＡＣＡＡＴＧ ＧＡＧＡＡＡＡＴＧＣ６８０ ＴＴＴＧＧＣＴＡＴＡ ６９０ ＴＣＣＡＡＣＡＡＣＡ ７００ ＡＴＣＡＡＧＣＴＴＡ ７１０ ＴＧＴＧＡＡＴＴＧＴ ７２０ ＧＣＡＡＡＴＧＡＡＴ ７３０ ＴＡＡＣＡＧＧＡＴＡ ７４０ ＴＡＡＴＴＴＴＴＣＴ ７５０ ＧＧＡＴＴＴＡＣＡＣ ７６０ ＴＴＴＴＡＡＧＡＣＴ ７７０ ＴＴＣＧＡＡＴＡＴＴ １７８０ １７９０ ＧＴＡＡＡＴＡＧＴＧ ＡＴＧＧＡＴＣＴＧＴ８００ ＧＡＣＡＴＣＡＧＡＧ ８１０ １８２゜ １日３０ ８４０ ８５０ 第２図−その５ １８６０ ＡＣＣＡＧＴＴＡＣＡ ８７０ ＴＴＴＡＣＡＡＴＡＡ ８８０ ＡＣＡＡＴＧＣＧＡＣ ８９０ ＡＡＣＴＴＡＴＴＡＴ ９００ ＧＧＡＣＡＡＡＡＴＧ ９１０ ＴＡＴＡＴＡＴＴＧＴ ９２０ ＴＧＧＴＡＧＴＡＣＡ ９３０ ＴＣＴＧＡＴＣＴＴＧ ９４０ ＧＡＡＡＴＴＧＧＡＡ ９５０ ＴＡＣＡＡＣＣＴＡＴ ９６０ ＧＣＣＣＧＴＧＧＴＣ ９７０ ＣＴＧＣＡＴＣＡＴＧ ９８０ ＣＣＣＴＡＡＴＴＡＴ ９９０ ＣＣＴＡＣＴＴＧＧＡ ０００ ＣＡＡＴＡＡＣＧＣＴ ０１０ ＴＡＡＴＣＴＡＴＴＡ ０２０ ＣＣＴＧＧＴＧＡＧＣ ０３０ ＡＧＡＴＡＣＡＧＴＴ ０４０ ＴＡＡＡＧＣＴＧＴＡ ０５０ ＡＡＡＡＴＴＧＡＴＡ ０６０ ＧＴＴＣＡＧＧＡＡＡ ０７０ ＴＧＴＡＡＣＴＴＧＧ ０８０ ＧＡＡＧＧＴＧＧＣＴ ０９０ ＣＧＡＡＴＣＡＴＡＣ １００ ＴＴＡＴＡＣＴＧＴＧ １１０ ＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧ １２０ ＧＧＡＣＴＧＧＴＡＧ １３０ ＴＧＴＣＡＣＣＡＴＴ １４０ ＡＣＡＴＧＧＣＡＡＡ １５０ ＡＴＴＡＡＴＣＡＡＴ １６０ ＡＡＡＡＴＧＴＴＡＣ １７０ ＡＣＡＴＡＧＡＡＣＡ １８０ ＡＡＴＴＧＴＡＡＡＣ １９０ ＡＣＴＧＧＡＡＴＡＴ ２００ ＡＴＴＣＣＧＧＴＧＴ ２１０ ＴＴＴＴＴＴＧＴＡＴ ２２０ ＡＴＴＡＴＧＧＧＣＧ ２３０ ＴＴＴＡＡＴＧＴＴＡ ２４０ ＡＡＡＡＴＡＡＴＡＧ ２５０ ＴＧＴＴＴＴＧＡＴＴ ２６０ ＴＴＡＴＴＡＡＡＡＡ ２７０ ＧＴＴＴＧＧＡＧＧＴ ２８０ ＡＡＧＡＧＡＴＧＡＧ ２９０ ＴＡＡＡＡＡＡＧＴＴ ３００ ＧＧＴＡＴＴＣＣＡＡ ３１０ ＡＡＧＧＧＣＴＴＴＴ ３２０ ＡＴＡＣＴＡＣＡＡＣ ３３０ ＴＴＴＴＡＴＣＣＴＡ ３４０ ＴＧＴＧＧＡＡＡＡＣ ３５０ ＡＴＴＴＴＴＴＧＡＡ 第２図−その６ ２３６０ ２３７０ ＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧ ＣＴＧＡＡＧＴＧＧＴ３８０ ＴＡＣＴＴＣＣＡＧＴ ２３９０ ２４００ ＧＡＴＡＣＡＴＧＴＡ ＡＡＡＡＡＡＴＡＡＴ４１０ ＴＧＡＴＧＡＴＧＧＣ ４２０ ＡＴＣＡＡＧＡＣＴＴ ２４３０ ２４４０ ＧＣＧＴＧＧＡＴＧＡ ＡＡＣＣＴＧＣＣＴＴ２４５
゜ ＣＣＴＧＴＣＡＡＧＡ ４６０ ＣＡＴＴＴＡＴＧＧＧ ４７０ ＴＣＡＴＧＴＧＡＴＴ ２４８０ ２４９０ ＧＡＴＴＴＧＡＡＧＧ ＡＡＡＡＧＧＧＴＧＴ５００ ＴＧＡＴＴＡＴＡＴＡ ５１０ ＴＴＴＧＴＴＣＣＡＡ ２５２０ ２５３０ ＧＡＧＴＣＡＴＡＡＧ ＣＧＴＡＧＡＡＡＧＧ５４０ ＣＧＴＡＧＡＴＡＴＣ ５５０ ＴＡＴＧＣＴＣＡＡＡ ５６０ ＡＴＴＴＴＴＧＧＧＴ ５７０ ＴＴＧＣＣＴＧＡＣＴ ５８０ ＴＡＧＴＧＡＧＡＡＡ ５９０ ＴＣＴＴＡＴＴＴＣＴ ６００ ＧＡＴＴＴＧＣＣＡＣ ６１０ ＡＡＡＴＡＡＴＡＧＡ ６２０ ＴＡＴＧＡＡＧＡＴＴ ６３０ ＧＡＴＴＡＣＴＡＴＣ ６４０ ＧＴＧＧＡＧＡＡＧＡ ６５０ ＧＴＴＴＡＴＧＧＡＡ ６６０ ＡＧＡＧＡＡＡＴＴＴ ２６７０ ２６８０ ＴＧＡＧＡＧＴＴＧＧ ＣＡＡＧＣＴＧＴＴＴ６９０ ＧＴＴＧＡＴＡＧＣＡ ７００ ＣＡＡＧＴＡＡＡＡＴ ７１０ ＴＡＡＡＧＡＣＧＣＡ ７２０ ＴＡＣＧＡＡＡＡＡＴ ２７３０ ２７４０ ＣＴＴＴＡＡＡＡＡＧ ＧＣＡＡＡＧＧＡＣＴ７５０ ＴＴＴＧＡＡＴＴＣＡ ２７６０ ２７７０ ２７８０Ｔ
ＴＡＴＴＡＧＡＧＡ ＡＧＧＡＴＴＴＴＣＡ ＡＡＴＡ
ＣＡＧＡＡＧ７９０ ＣＡＡＴＡＡＡＡＡＴ ８００ ＴＡＴＧＧＡＡＧＧＧ ８４０ ＝ＴＡＡＡＡＡＴＡＧ ２８５゜ ＣＴＴＴＡＴＴＡＧＣ ８６０ ８７０ ８８０ ８９０ ９００ 第２図−その７ ２９１０ ２９２０ ＧＧＣＴＴＡＡＧＡＡ ＴＡＴＧＧＧＡＧＣＴ９３０ ＴＡＴＧＴＧＣＴＴＡ Ａ ９４０ 第３図− １０ ＣＴＧＣＧＡＡＡＧＧ ２０ ＡＧＧＴＧＡＣＡＣＧ ３０ ＣＧＣＴＴＧＣＡＧＧ ４０ ＡＴＴＣＧＧＧＣＴＴ ５０ ＴＡＡＡＡＡＧＡＡＡ ６０ ＧＡＴＡＧＡＴＴＡＡ ７０ ＣＡＡＣＡＡＡＴＡＴ ８０ ＴＣＣＣＣＡＡＧＡＡ ９０ ＣＡＡＴＴＴＧＴＴＴ ００ ＡＴＡＣＴＡＧＡＧＧ １０ ＡＧＧＡＧＡＡＣＡＣ ２０ ＡＡＧＧＴＣＡＴＧＡ ３０ ＴＴＧＧＡＧＣＴＴＴ ４０ ＴＡＡＡＡＧＧＴＴＧ ５０ ＧＧＴＣＡＡＡＡＡＴ ６０ ＴＧＴＴＴＴＴＧＡＣ ７０ ＡＴＴＧＴＴＡＡＣＧ ８０ ＧＣＡＴＣＡＴＴＡＡ ９０ ＴＴＴＴＴＧＣＡＴＣ ００ ＴＴＣＴＡＴＡＧＴＡ １０ ＡＣＴＧＣＴＡＡＴＧ ２０ ＣＡＡＧＣＡＴＡＧＣ ３０ ＡＣＣＡＡＡＴＴＴＣ ４０ ＡＡＡＧＴＴＴＴＴＧ ５０ ＴＡＡＴＧＧＧＴＣＣ ６０ ＡＴＴＡＧＡＡＡＡＡ ７０ ＧＴＣＡＣＡＧＡＴＴ ８０ ＴＴＡＡＴＧＣＡＴＴ ９０ ＣＡＡＡＧＡＴＣＡＡ ００ ＴＴＧＡＴＡＡＣＴＴ １０ ＴＡＡＡＧＡＡＴＡＡ ２０ ＴＧＧＴＧＴＴＴＡＴ ３０ ＧＧＴＡＴＡＡＣＡＡ ４０ ＣＡＧＡＴＡＴＴＴＧ ５０ ＧＴＧＧＧＧＣＴＡＴ ６０ ＧＴＴＧＡＡＡＡＴＧ ７０ ＣＡＧＧＴＧＡＡＡＡ ８０ ＴＣＡＡＴＴＴＧＡＣ ９０ ＴＧＧＡＧＴＴＡＴＴ ００ ＡＴＡＡＧＡＣＡＴＡ ５９１− 第３図−その３ ８１０ ８２０ ８３０
８４０ ８５０ＴＧＣＴＧＡＴＡＣＣＧ
ＴＡＣＧＣＧＣＴＧ ＣＧＧＧＡＴＴＧＡＡ ＧＴＧＧ
ＧＴＴＣＣＡ ＡＴＡＡＴＧＴＣＡＡ６０ ＣＧＣＡＴＧＣＣＴＧ ７０ ＴＧＧＡＧＧＴＡＡＴ ８０ ＧＴＴＧＧＴＧＡＴＡ ９０ ＣＡＧＴＡＡＡＴＡＴ ００ ＡＣＣＴＡＴＴＣＣＧ １０ ＴＣＡＴＧＧＧＴＡＴ ９２０ ９３０ ＧＧＡＣＡＡＡＡＧＡ ＴＡＣＣＣＡＡＧＡＴ４０ ＡＡＴＡＴＧＣＡＧＴ ５０ ＡＴＡＡＧＧＡＴＧＡ ６０ ＡＧＣＣＧＧＡＡＡＴ ９７０ ９８０ ９９０ＴＧ
ＧＧＡＴＡＡＴＧ ＡＡＧＣＡＧＴＡＡＧ ＴＣＣＡＴ
ＧＧＴＡＴ０００ ＴＣＴＧＧＣＴＴＡＡ ０１０ ＣＣＣＡＡＣＴＣＴＡ ０２０ ＴＡＡＴＧＡＡＴＴＴ ０３０ ＴＡＴＴＣＡＴＣＴＴ ０４０ ＴＴＧＣＡＴＣＡＡＡ １０５゜ ＴＴＴＴＡＧＣＡＧＣ ０６０ ＴＡＴＡＡＡＧＡＴＡ ０７０ ＴＡＡＴＴＡＣＴＡＡ １０８０ １０９０ ＡＡＴＡＴＡＴＡＴＡ ＴＣＴＧＧＡＧＧＣＣ１００ ＣＴＴＣＴＧＧＡＧＡ １１０ ＡＴＴＡＡＧＡＴＡＴ １１２０ １１３０ ＣＣＴＴＣＡＴＡＴＡ ＡＴＣＣＴＴＣＧＣＡ１４０ ＴＧＧＡＴＧＧＡＣＡ １５０ ＴＡＴＣＣＴＧＧＡＣ １６０ ＧＴＧＧＣＴＣＧＣＴ １７０ ＧＣＡＧＴＧＣＴＡＴ １８０ ＡＧＴＡＡＡＧＣＧＧ １１９０ １２００ ＣＴＡＴＡＡＣＡＡＧ ＴＴＴＴＣＡＡＡＡＴ１２１
０ １２２０ １２３０
１２４０ＧＣＴＡＴＧＡＡＧＴ ＣＴＡＡＡＴＡＴ
ＧＧ ＡＡＣＴＡＴＡＧＣＡ ＧＣＡＧＴＴＡＡＴＡ２
５０ ＧＴＧＣＡＴＧＧＧＧ １２６０ １２７０ ＴＡＣＡＡＧＣＣＴＡ ＡＣＴＧＡＴＴＴＴＴ２８０ ＣＴＣＡＡＡＴＴＡＧ ２９０ ＴＣＣＡＣＣＴＡＣＡ ３００ ＧＡＴＧＧＴＧＡＴＡ ３１０ ＡＴＴＴＣＴＴＴＡＣ ３２０ ＡＡＡＴＧＧＴＴＡＴ ３３０ ＡＡＡＡＣＴＡＣＴＴ ３４０ ＡＴＧＧＴＡＡＴＧＡ ３５０ ＣＴＴＴＴＴＧＡＣＡ 第３図−その４ ３６０ ＴＧＧＴＡＴＣＡＡＡ ３７０ ＧＴＧＴＴＴＴＧＡＣ ３８０ ＴＡＡＴＧＡＧＴＴＡ ３９０ ＧＣＣＡＡＴＡＴＴＧ ４００ ＣＴＴＣＴＧＴＡＧＣ ４１０ ＴＣＡＴＡＧＣＴＧＣ ４２０ ＴＴＴＧＡＴＣＣＡＧ ４３０ ＴＡＴＴＴＡＡＴＧＴ ４４０ ＴＣＣＡＡＴＡＧＧＡ ４５０ ＧＣＡＡＡＡＡＴＡＧ ４６０ ＣＴＧＧＡＧＴＧＣＡ ４７０ ＴＴＧＧＣＴＡＴＡＴ ４８０ ＡＡＴＡＧＴＣＣＧＡ ４９０ ＣＡＡＴＧＣＣＡＣＡ ５００ ＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡ ５１０ ＴＡＴＴＧＴＧＣＣＧ ５２０ ＧＴＴＡＴＴＡＴＡＡ １５３゜ ＴＴＡＴＡＧＣＡＣＧ ５４０ ＣＴＡＣＴＣＧＡＴＣ ５５０ ＡＡＴＴＴＡＡＧＧＣ ５６０ ＡＴＣＴＡＡＴＣＴＴ ５７０ ＧＣＴＡＴＧＡＣＡＴ ５８０ ＴＴＡＣＡＴＧＴＣＴ ５９０ ＴＧＡＡＡＴＧＧＡＴ ６００ ＧＡＴＴＣＴＡＡＴＧ ６１０ ＣＡＴＡＴＧＴＡＡＧ ６２０ ＴＣＣＡＴＡＴＴＡＴ ６３０ ＴＣＴＧＣＡＣＣＴＡ ６４０ ＴＧＡＣＧＴＴＡＧＴ ６５０ ＣＣＡＴＴＡＴＧＴＡ ６６０ ＧＣＴＡＡＴＣＴＴＧ ６７０ ＣＴＡＡＴＡＡＴＡＡ ６８０ ＡＧＧＴＡＴＡＧＴＣ ６９０ ＣＡＣＡＡＴＧＧＡＧ ７００ ＡＡＡＡＴＧＣＴＴＴ ７１０ ＧＧＣＴＡＴＡＴＣＣ ７２０ ＡＡＣＡＡＣＡＡＴＣ ７３０ ＡＡＧＣＴＴＡＴＧＴ ７４０ ＧＡＡＴＴＧＴＧＣＡ ７５０ ＡＡＴＧＡＡＴＴＡＡ ７６０ ＣＡＧＧＡＴＡＴＡＡ ７７０ ＴＴＴＴＴＣＴＧＧＡ ７８０ ＴＴＴＡＣＡＣＴＴＴ ７９０ ＴＡＡＧＡＣＴＴＴＣ ８００ ＧＡＡＴＡＴＴＧＴＡ 第３図−その６ ２４１０ ＴＴＣＣＡＧＴＧＡＴ ４２０ ＡＣＡＴＧＴＡＡＡＡ ４３０ ＡＡＡＴＡＡＴＴＧＡ ４４０ ＴＧＡＴＧＧＣＡＴＣ ４５０ ＡＡＧＡＣＴＴＧＣＧ ４６０ ＴＧＧＡＴＧＡＡＡＣ ４７０ ＣＴＧＣＣＴＴＣＣＴ ４８０ ＧＴＣＡＡＧＡＣＡＴ ４９０ ＴＴＡＴＧＧＧＴＣＡ ５００ ＴＧＴＧＡＴＴＧＡＴ ５１０ ＴＴＧＡＡＧＧＡＡＡ ５２０ ＡＧＧＧＴＧＴＴＧＡ ５３０ ＴＴＡＴＡＴＡＴＴＴ ５４０ ＧＴＴＣＣＡＡＧＡＧ ５５０ ＴＣＡＴＡＡＧＣＧＴ ５６０ ＡＧＡＡＡＧＧＣＧＴ ５７０ ＡＧＡＴＡＴＣＴＡＴ ５８０ ＧＣＴＣＡＡＡＡＴＴ ５９０ ＴＴＴＧＧＧＴＴＴＧ ６００ ＣＣＴＧＡＣＴＴＡＧ ６１０ ＴＧＡＧＡＡＡＴＣＴ ６２０ ＴＡＴＴＴＣＴＧＡＴ ６３０ ＴＴＧＣＣＡＣＡＡＡ ６４０ ＴＡＡＴＡＧＡＴＡＴ ６５０ ＧＡＡＧＡＴＴＧＡＴ ６６０ ＴＡＣＴＡＴＣＧＴＧ ６７０ ＧＡＧＡＡＧＡＧＴＴ ６８０ ＴＡＴＧＧＡＡＡＧＡ ６９０ ＧＡＡＡＴＴＴＴＧＡ ７００ ＧＡＧＴＴＧＧＣＡＡ ７１０ ＧＣＴＧＴＴＴＧＴＴ ７２０ ＧＡＴＡＧＣＡＣＡＡ ７３０ ＧＴＡＡＡＡＴＴＡＡ ７４０ ＡＧＡＣＧＣ：ＡＴＡＣ ７５０ ＧＡＡＡＡＡＴＣＴＴ ７６０ ＴＡＡＡＡＡＧＧＣＡ ７７０ ＡＡＧＧＡＣＴＴＴＴ ７８０ ＧＡＡＴＴＣＡＴＴＡ ７９０ ＴＴＡＧＡＧＡＡＧＧ ８００ ＡＴＴＴＴＣＡＡＡＴ ８１０ ＡＣＡＧＡＡＧＣＡＡ ８２０ ＴＡＡＡＡＡＴＴＡＴ ８３０ ＧＧＡＡＧＧＧＡＡＡ ８４０ ＡＡＡＴＴＡＧＡＣＧ ８５０ ＣＡＡＡＴＡＣＡＡＡ 第３図−その７ ２９１０ ＡＴＴＡＴＴＴＡＴＣ ２９２゜ ＴＡＴＧＧＧＡＴＴＧ ９３０ ＡＴＡＡＡＴＡＧＧＣ ９４０ ＴＴＡＡＧＡＡＴＡＴ ９５０ ＧＧＧＡＧＣＴＴＡＴ ９６０ ＧＴＧＣＴＴＡＣＡ
Claims (11)
- （１）枯草菌又は￥バチルスブレビス￥に生育し得るプ
ラスミドに耐熱性β−アミラーゼ遺伝子を導入したプラ
スミド。 - （２）￥バチルスブレビス￥の細胞壁タンパク質遺伝子
の一部または全部をさらに導入した請求項１記載のプラ
スミド。 - （３）￥バチルスブレビス￥の細胞壁タンパク質遺伝子
の一部または全部を導入した枯草菌に生育し得るプラス
ミドが、プラスミドｐＮＵ２００であり、耐熱性β−ア
ミラーゼ遺伝子が￥クロスト￥￥リジウムサーモサルフ
ロゲネス￥のβ−アミラーゼ遺伝子である請求項１又は
２記載のプラスミド。 - （４）￥クロストリジウムサーモサルフロゲネス￥のβ
−アミラーゼ遺伝子がプラスミドｐＮＫ１のＭｆｌＩ−
ＭｆｌＩ約３．６Ｋｂ断片の一部または全部である請求
項３記載のプラスミド。 - （５）プラスミドｐＮＵ２００（７）ＢａｍＨＩ部位に
プラスミドｐＮＫ１（ＤＭｆｌＩ−ＭｆｌＩ約３．６Ｋ
ｂ断片の一部または全部を連結した請求項４記載のプラ
スミド。 - （６）プラスミドｐＮＵ２００が細胞壁タンパク質遺伝
子の５８６塩基以降を欠くものであり、この細胞壁タン
パク質遺伝子の直後に￥クロストリ￥￥ジウムサーモサ
ルフロゲネス￥のβ−アミラーゼ構造遺伝子を連結した
ものである請求項４記載のプラスミド。 - （７）プラスミドｐＮＵ２００が細胞壁タンパク質遺伝
子の５１６塩基以降を欠くものであり、この細胞壁タン
パク質遺伝子の直後に￥クロストリ￥￥ジウムサーモサ
ルフロゲネス￥のβ−アミラーゼのシグナル遺伝子及び
構造遺伝子を連結したものである請求項４記載のプラス
ミド。 - （８）請求項１〜７のいずれか１項記載のプラスミドを
￥バチルスブレビス￥に導入した形質転換体。 - （９）￥バチルスブレビス￥が￥バチルスブレビス￥４
７Ｋ株である請求項８記載の形質転換体。 - （１０）請求項８記載の形質転換体を培養し、培養物か
ら耐熱性β−アミラーゼを採取する耐熱性β−アミラー
ゼの製造方法。 - （１１）形質転換体が請求項９記載の形質転換体である
請求項１０記載の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4847790A JPH03251185A (ja) | 1990-02-28 | 1990-02-28 | 耐熱性β―アミラーゼの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4847790A JPH03251185A (ja) | 1990-02-28 | 1990-02-28 | 耐熱性β―アミラーゼの製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03251185A true JPH03251185A (ja) | 1991-11-08 |
Family
ID=12804469
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4847790A Pending JPH03251185A (ja) | 1990-02-28 | 1990-02-28 | 耐熱性β―アミラーゼの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH03251185A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6506595B2 (en) | 1998-03-31 | 2003-01-14 | Itoham Foods Inc. | DNAs encoding new fusion proteins and processes for preparing useful polypeptides through expression of the DNAs |
| WO2006004067A1 (ja) * | 2004-07-06 | 2006-01-12 | Kaneka Corporation | ブレビバチルス属細菌を用いたプロテインａ様蛋白質の生産方法 |
-
1990
- 1990-02-28 JP JP4847790A patent/JPH03251185A/ja active Pending
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6506595B2 (en) | 1998-03-31 | 2003-01-14 | Itoham Foods Inc. | DNAs encoding new fusion proteins and processes for preparing useful polypeptides through expression of the DNAs |
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| JPWO2006004067A1 (ja) * | 2004-07-06 | 2008-04-24 | 株式会社カネカ | ブレビバチルス属細菌を用いたプロテインａ様蛋白質の生産方法 |
| JP2010246569A (ja) * | 2004-07-06 | 2010-11-04 | Kaneka Corp | ブレビバチルス属細菌を用いたプロテインａ様蛋白質の生産方法 |
| US8597908B2 (en) | 2004-07-06 | 2013-12-03 | Kaneka Corporation | Process for producing protein A-like protein with use of Brevibacillus genus bacterium |
| JP2014064589A (ja) * | 2004-07-06 | 2014-04-17 | Kaneka Corp | ブレビバチルス属細菌を用いたプロテインａ様蛋白質の生産方法 |
| US8889389B2 (en) | 2004-07-06 | 2014-11-18 | Kaneka Corporation | Process for producing protein A-like protein with use of Brevibacillus genus bacterium |
| JP2016063844A (ja) * | 2004-07-06 | 2016-04-28 | 株式会社カネカ | ブレビバチルス属細菌を用いたプロテインａ様蛋白質の生産方法 |
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