JPH03264530A - 抗レトロウイルス剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、レトロウィルスに起因する各種ウィルス性疾
患の治療に有効な抗レトロウィルス剤に関するものであ
る。

［従来の技術および課題］ ウィルスに関する研究がなされるにつれ、ウィルス性疾
患の治療法が徐々に確立されつつある。

特に最近問題となっている後天性免疫不全症候群（ＡＩ
ＤＳ）を引き起こすＨＩＶ（Ｈｕｍａｎ　Ｉｍｍｕｎ。

ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　Ｖｉｒｕｓ）は、レトロウィル
スとして知られている。

レトロウィルスはウィルス粒子内に、ＲＮＡ依存ＤＮＡ
合或合成（以下、逆転写酵素という）を含むウィルスで
あり、以下のようにして増殖している。

■宿主細胞に感染後、まずウィルスＲＮＡが逆転写酵素
によりＤＮＡに転写される。

■このＤＮＡが宿主細胞染色体に組み込まれ、次いで宿
主細胞のＲＮＡ合或合成によってｍＲＮＡが合成される
。

■このｍＲＮＡにより各種のウィルス蛋白が生成される
。

このレトロウィルスに起因するヒトの疾病に画期的な治
療効果を有する薬剤の開発が望まれていた。

［課題を解決するための手段］ 本発明者等は、ポルフィリン骨格、フタロシアニン骨格
、プロトポルフィリン骨格を有する種々の化合物につい
て、レトロウィルス増殖阻害効果に関する研究を行った
結果、ポルフィリン骨格、フタロシアニン骨格、プロト
ポルフィリン骨格を有する数種の化合物に、レトロウィ
ルス増殖阻害効果のあることを見いだし、本発明を完成
するに至った。

すなわち本発明は、以下の如くである。

（１）下記式工 （Ｒ１，Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、スルホニル基または水
素原子を示す。） で表される化合物及びその薬理学的に許容しうる塩を有
効成分とする抗レトロウィルス剤。

（２）下記式ＩＩ で表される化合物及びその薬理学的に許容しうる塩を有
効成分とする抗レトロウィルス剤。

（３）下記式ＩＩＩ （Ｓｌ、Ｓ２、Ｓ３及びＳ４は、水素原子、基、または
下記式ＩＩ　−１ スルホニル （Ｔ１及びＴ５は、エチル基またはビニル基を示し、Ｔ
２及びＴ４は、カルボキシエチル基またはカルボキシル
基を示し、Ｔ３は、水素原子またはカルボキシメチル基
を示し、Ｔ６は、２価の金属イオンを示す。） で表される化合物及びその薬理学的に許容しうる塩を有
効成分とする抗レトロウィルス剤。

で表される基を示し、Ｓ５は、 示す。） ２価の金属イオンを 以下、式１〜ＩＩＩで表される化合物を式の化合物とい
う。

式の化合物を具体的に示すならば例えば以下に示す化合
物が挙げられる。

化合物Ａ（αＩＬγ、δ−テトラフェニルポルフィンテ
トラスルフォニックアシッドデイスルフォニックアシッ
ドソルトテトラヒドレート）化合物Ｂ（カッパーフタロ
シアニン−３，４’、４”、４”２テトラスルフオニツ
クアシツド　テトラソデイウムソルト） 化合物Ｃにッケルフタロシアニンテトラスルフオニツク
アシツド、テトラソデイウムソルト）化合物Ｅ（クロロ
フィリン、カッバード、トリソディウムソルト） 化合物Ｄ（リアクティブブルー１５） 化合物Ｆ（ヘミン） 一１１＝ 上記の化合物は、同じ化学研究所（株）及びアルドリッ
チ社（Ａｌｄｒｉｃｈ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃａｍｐａ
ｎｙ　Ｉｎｃ、）より市販されている。

式の化合物は、従来より金属の比色定量や、染色等に用
いられているが、抗レトロウイルス効果を有することは
全く知られていなかったことである。

次に式の化合物が抗レトロウイルス効果を有することに
ついて実験例を挙げて説明する。

実験例１ ＜５ＵＰ−Ｔ１細胞（Ｔ　ｃｅｌｌ　１ｉｎｅ系）を用
いた抗エイズウイルス活性試験〉 ９６穴マイクロプレートに１穴あたり５ＵＰ−ＴＩ細胞
をＩ　Ｘ　１０４細胞入れる。次に段階希釈した被験物
質を各式に入れる。そしてこれらの各式に人免疫不全ウ
ィルス（Ｈ９／ＨＴＬＶ−ＩＩＩ　Ｂ細胞の上清液）を
１０〜２０ＴＣＩＤ５０（５０％ｏｆ　Ｔｉ５ｓｕｅ　
Ｃｕ１ｔｕｒｅ　ＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎＤｏｓｅ）を入
れ感染させる。このプレートを３ＴＣ５％ＣＯ２下で７
日間培養後、細胞傷害能をＭＴＴ法で１２− 測定し、各被検物質における最高阻害率及びその阻害濃
度を算出した。その結果を第１表に示す。

第１表 実験例２ ＜ＭＴ−４細胞（Ｔ　ｃｅｌｌ　１ｉｎｅ系）を用いた
抗エイズウイルス活性試験〉 ９６穴マイクロプレートに１穴あたりＭＴ−４細胞（Ｔ
ｃｅｌｌ　１ｉｎｅ系）を２Ｘ１０４細胞入れる。次に
段階希釈した被験物質を各式に入れる。そしてこれらの
各式に人免疫不全ウィルス（Ｈ９／ＨＴＬＶ−ＩＩＩ　
Ｂ細胞の上清液）を１０〜２０ＴＣＩＤ５Ｑ（５０％ｏ
ｆ　Ｔｉ５ｓｕｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅＩｎｈｉｂｉｔｉｏ
ｎ　Ｄｏｓｅ）を入れ感染させる。このプレートを３Ｔ
Ｃ５％ＣＯ２下で５日間培養後、細胞傷害能をＭＴＴ法
で測定し、以下に示す各被検物質における５０％阻害濃
度（ＩＣ５Ｑ）を算出した。その結果を第２表に示す。

第２表 実験例３ く逆転写酵素活性に及ぼす影響〉 以下の組成の反応混合液を調製した。

○逆転写酵素（Ｈｕｍａｎ　ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉ
ｅｎｃｙ　ｖｉｒｕｓｒｅｖｅｒｓｅ　ｔｒａｎｓｃｒ
ｉｐｔａｓｅ）１単位／ｍｌ ○テンプレート・プライマー複合体としてのポリアデニ
ル酸・オリゴチミジル酸複合体［ポリアデニル酸ｐｏｌ
ｙｒＡ　、オリゴチミジル酸ｐｄＴ１２−１８（１：　
１）］ファルマシア製　　　　　　　　　　　　　５ツ
１ｒｎｌ○トリス塩酸（ｐＨ８，０）　　　　　２５工
。ｌ○塩化カリウム　　　　　　’１５ｍｍｏｌ○塩化
マグネシウム　　　　８ｍｍｏｌ○ジチオスレイトール
　　　　　　　　２ｍｍｏｌ○［３Ｈ］デオキシチミジ
ン三リン酸 （８３，ＯＣｉ／ｍｍｏｔ）（１，０ｍＣ１／ｍｔ）　
　　０．２ｐｍｏｔ○デオキシチミジン三リン酸　　　
　９．８□ｏｌ○被験物質　　　　　　　　０．０３〜
１１００ｐ／　ｍｌ○精製水　　　　　　　　　適量 ＊１１単とは、逆転写酵素が３７℃、１Ｑ分間でｄＮＴ
Ｐ１５− １６− （デオキシ核酸三リン酸）１□ｏｌを消費する比活性単
位である。

この反応混合液５０１１を３７℃、３０分間反応させた
。

反応産物ＤＮＡの定量はイオン交換濾紙法を用い、［３
Ｈ］デオキシチミジン三リン酸のＤＮＡへの放射活性の
取り込みをベックマン・シンチレーションカウンターで
測定して、逆転写酵素活性とし、各被験物質における５
０％阻害濃度（Ｉｃ５ｏ）を算出した。その結果を第３
表に示す。

第３表 実験例４ くラウス肉腫ウィルス（Ｒ８Ｖ）による初代ニワトリ胚
繊維芽細胞形質転換に対する抑制効果〉２４穴マイクロ
プレートに１穴当たり３．５　Ｘ　１０５細胞の初代ニ
ワトリ胚繊維芽細胞を入れ、３７℃、５％ＣＯ２下で６
時間培養した。培養後、この細胞にＲ８Ｖ−８Ｒ−Ａ株
、感染多重度（Ｍ、Ｏ，１，）約２．０Ｘ１０−４およ
び各被験物質を加え、２時間培養した後、細胞を洗浄し
、更に各被験物質と寒天培地を加え、３７℃、５％ＣＯ
２下で８日間培養した後、そのフォーカス数を測定し、
各被験物質における５０％阻害濃度（ＩＣ５０）を算出
した。その結果を第４表に示す。

第４表 実験例１．２．３及び４の結果から本発明の抗レトロウ
ィルス剤の有効成分である式の化合物は、逆転写酵素活
性阻害作用に基づく抗レトロウイルス効果を有すること
が確認された。

すなわち式の化合物は、レトロウィルスの増殖において
必要な逆転写酵素活性を阻害することにより、その増殖
を抑制するものであるから、レトロウィルスであればい
かなるウィルスにも適用することができる。

レトロウィルスの具体例としては、白血病ウィルス、肉
腫ウィルス、乳癌ウィルス、ビスナウィルス、マエディ
ウイルス、ＨＩＶ（Ｈｕｍａｎ　Ｉｍｍｕｎ。

ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　Ｖｉｒｕｓ）、ＨＴＬＶ−Ｉ（
Ｈｕｍａｎ　Ｔ　ｃｅｌｌＬｅｕｋｅｍｉａ　Ｖｉｒｕ
ｓ　Ｔｙｐｅ　Ｉ　）等が挙げられる。

次に、式の化合物の毒性が低く安全性が高いことを急性
毒性実験の結果を示して証明する。

急性毒性実験は、被験物質Ａ、　Ｂ、　Ｃ，Ｄ及びＥ１
００ｍｇ／ｋｇをそれぞれ５匹のマウスに腹腔内投与し
、７日間後にマウスの生存数を調べた。その結果、被験
物質Ａ、　Ｂ、　Ｃ，Ｄ及びＥについて死亡例は認めら
れなかった。

以上の急性毒性実験の結果より、これらの化合物は、毒
性が低く安全性の高いものであることが示された。

次に、式の化合物の投与量および製剤化について説明す
る。

式の化合物はそのまま、あるいは慣用の製剤担体と共に
動物および人に投与することができる。

投与形態としては、特に限定がなく、必要に応じ適宜選
択して使用され、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、
散剤等の経口剤、注射剤、坐剤等の非経口剤が挙げられ
る。

経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年
令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で式の
化合物の重量として１０ｍｇ〜７ｇを、１日数回に分け
ての服用が適当と思われる。

本発明において錠剤、カプセル剤、顆粒剤等の経口剤は
、例えばデンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキ
シメチルセルロース、コーンス１９− ２０− ターナ、無機塩類等を用いて常法に従って製造される。

この種の製剤には、適宜前記賦形剤の他に、結合剤、崩
壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着
色剤、香料等を使用することができる。それぞれの具体
例は以下に示す如くである。

［結合斉１月 デンプン、デキストリン、アラビアゴム末、ゼラチン、
ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、カル
ボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピ
ルセルロース、結晶セルロース、エチルセルロース、ポ
リビニルピロリドン、マクロゴール。

［崩壊剤１ デンプン、ヒドロキシプロピルスターチ、カルボキシメ
チルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロー
スカルシウム、カルボキシメチルセルロース、低置換ヒ
ドロキシプロピルセルロース。

［界面活性剤］ ラウリル硫酸ナトリウム、大豆レシチン、ショ糖脂肪酸
エステル、ポリソルベート８０゜［滑沢剤１ タルク、ロウ類、水素添加植物油、ショ糖脂肪酸エステ
ル、ステアリン酸マグネシウム、ステアノン酸カルシウ
ム、ステアリン酸アルミニウム、ポリエチレングリコー
ル。

［流動性促進剤］ 軽質無水ケイ酸、乾燥水酸化アルミニウムゲル、合成ケ
イ酸アルミニウム、ケイ酸マグネシウム。

また式の化合物は、懸濁液、エマルジョン剤、シロップ
剤、エリキシル剤としても投与することができ、これら
の各種剤形には、矯味矯臭剤、着色剤を含有してもよい
。

非経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の
年令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で式
の化合物の重量として１日０．５ｍｇ〜１．５ｇまでの
静注、点滴静注、皮下注射、筋肉注射が適当と思われる
。

この非経口剤は常法に従って製造され、希釈剤として一
般に注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、注射
用植物油、ゴマ油、ラッカセイ油、ダイズ油、トウモロ
コシ油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコー
ル等を用いることができる。さらに必要に応じて、殺菌
剤、防腐剤、安定剤を加えてもよい。また、この非経口
剤は安定性の点から、バイアル等に充填後冷凍し、通常
の凍結乾燥技術により水分を除去し、使用直前に凍結乾
燥物から液剤を再調製することもできる。更に、必要に
応じて適宜、等張化剤、安定剤、防腐剤、無痛化剤等を
加えても良い。

その他の非経口剤としては、外用液剤、軟膏等の塗布剤
、直腸内投与のための型剤等が挙げられ、常法に従って
製造される。

次に製造の実施例を示す。

実施例１ ■コーンスターチ　　　　　　４４ｇ ■結晶セルロース　　　　　　４０ｇ ■カルボキシメチル セルロースカルシウム　　５ｇ ■軽質無水ケイ酸　　　　　０．５ｇ ■ステアリン酸マグネシウム０．５ｇ ■化合物Ａ１ 計　　　１００ｇ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、打錠機にて
圧縮成型して一錠２００ｍｇの錠剤を得た。

この錠剤−錠には、化合物Ａ２０ｒｎｇが含有されてお
り、成人１日３〜１０錠を数回にわけて服用する。

２３− ２４一 実施例２ ■結晶セルロース　　　　　８４．５ｇ■ステアリン酸
マグネシウム　０．５ｇ■カルボキシメチル セルロースカルシウム　　　５ｇ ■化合物Ｂ１ 計　　　　１００ｇ 上記の処方に従って■、■および■の一部を均一に混合
し、圧縮成型した後、粉砕し、■および■の残量を加え
て混合し、打錠機にて圧縮成型して一錠２００ｍｇの錠
剤を得た。

この錠剤−錠には、化合物Ｂ２ｏｒｎｇが含有されてお
り、成人１日３〜１０錠を数回にわけて服用する。

実施例３ ■結晶セルロース　　　　　３４．５ｇ■１０％ヒドロ
キシプロピル セルロースエタノール溶液５０ｇ ■カルボキシメチル セルロースカルシウム　　５ｇ ■ステアリン酸マグネシウム０．５ｇ ■化合物Ｃ１ 計　　　　１００ｇ 上記の処方に従っての、■および■を均一に混合し、常
法によりねっ和し、押し出し造粒機により造粒し、乾燥
・解砕した後、■および■を混合し、打錠機にて圧縮成
型して一錠２ｏｏｍｇの錠剤を得た。

この錠剤−錠には、化合物ｃ２ｏｒｎｇが含有されてお
り、成人１日３〜１０錠を数回にわけて服用する。

実施例４ ■コーンスターチ　　　　　　８４ｇ ■ステアリン酸マグネシウム０．５ｇ ■カルボキシメチル セルロースカルシウム　　５ｇ ■軽質無水ケイ酸　　　　　０．５ｇ ■化合物Ｄ１ 計　　　　１００ｇ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、圧縮成型機
にて圧縮成型後、破砕機により粉砕し、篩別して顆粒剤
を得た。

この顆粒剤１ｇには、化合物Ｄ１００ｍｇが含有されて
おり、成人１日０．６〜２ｇを数回にわけて服用する。

実施例５ ■結晶セルロース　　　　　　５５ｇ ■１０％ヒドロキシプロピル セルロースエタノール溶液３５ｇ ■化合物Ｅ１ 計　　　　１００ｇ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、ねつ和した
。押し出し造粒機により造粒後、乾燥し、篩別して顆粒
剤を得た。

この顆粒剤１．には、化合物Ｅ１００．ｎｇが含有され
ており、成人１日０．６〜２ｇを数回にわけて服用する
。

実施例６ ■コーンスターチ　　　　　８９．５ｇ■軽質無水ケイ
酸　　　　　０．５ｇ ■化合物Ｆ１ 計　　　１００ｇ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、２００ｍｇ
を２号カプセルに充填した。

２７ ２８− このカプセル剤１カプセルには、化合物Ｆ２０ｍｇが含
有されており、成人１日３〜１０カプセルを数回にわけ
て服用する。

実施例７ ■注射用蒸留水　　　　　　　適量 ■ブドウ糖　　　　　　　　　２００ｍｇ■化合物Ｂ　
　　　　　　　　　１０ｍｇ全量　　　　　　　１５ｍ
１ 注射用蒸留水に■および■を溶解させた後、５ｍｔのア
ンプルに注入し、１２１℃で１５分間加圧滅菌を行って
注射剤を得た。

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）下記式 I ▲数式、化学式、表等があります▼ I （Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３及びＲ＿４は、スルホニル基
   または水素原子を示す。） で表される化合物及びその薬理学的に許容しうる塩を有
   効成分とする抗レトロウイルス剤。
2. （２）下記式II ▲数式、化学式、表等があります▼II （Ｓ＿１、Ｓ＿２、Ｓ＿３及びＳ＿４は、水素原子、ス
   ルホニル基、または下記式II＿−＿１ ▲数式、化学式、表等があります▼II＿−＿１ で表される基を示し、Ｓ＿５は、２価の金属イオンを示
   す。） で表される化合物及びその薬理学的に許容しうる塩を有
   効成分とする抗レトロウイルス剤。
3. （３）下記式III ▲数式、化学式、表等があります▼III （Ｔ＿１及びＴ＿５は、エチル基またはビニル基を示し
   、Ｔ＿２及びＴ＿４は、カルボキシエチル基またはカル
   ボキシル基を示し、Ｔ＿３は、水素原子またはカルボキ
   シメチル基を示し、Ｔ＿６は、２価の金属イオンを示す
   。） で表される化合物及びその薬理学的に許容しうる塩を有
   効成分とする抗レトロウイルス剤。