JPH03292880A - 複数の異なった希釈液のセットを調製する方法，その装置及び該方法に適した諸器具 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は一般に複数の異なった希釈液のセットを調整す
る方法、その装置及び該方法および装置において用いる
に適した希釈液容器に関し、特に微生物的検査における
希釈液、混釈培地、培地入り培養器の調整、微生物の接
種、培養、培養結果の観察等の作業を自動化する方法、
その装置、並びにそれらに用いる諸容器に関する。

用語の定義 本明細書において、下記の用語は下記の意味において用
いられている。

クリーン室： 希釈液の使用目的に関してクリーンな室を意味し、希釈
液が化学的検査に用いられる場合には、化学的にクリー
ンであればよく、微生物的検査に用いられる場合には、
微生物学的にクリーンであれば良い。

被希釈液： 希釈されるべき物質を含む液体または希釈されるべき微
生物を含む液体を言う。

希釈用液： 被希釈液を希釈するために用いる液体を言い、蒸留水の
外、生理食塩水、緩衝液、液体培地及び溶融°状態の固
体培地をも含む。希釈液が微生物的検査に用いられる場
合には、これらは無菌状態のものであることは勿論であ
る。

希釈液： 希釈されるべき所与の液体を他の液体で希釈した液体を
言い、所与の物質を含有する液体、微生物の懸濁液等を
培地で希釈した混釈培地をも含む。

微生物的検査： 微生物自体の存否１種類、特性、に関する検査、例えば
、生菌数検査、微生物の同定、微生物のスクリーニング
、微生物の耐性検査等の微生物を検査対象とした検査の
みならず、薬物、生物活性物質等の検索、有効性または
有効濃度の判定１等のように、微生物を手段として用い
る検査、例えば薬物の抗菌性スペクトラム検査、最小阻
止円測定。

増殖促進物質の活性検査等をも含む微生物が関与するも
ろもろの検査を意味する。

検体： 検査対象となる微生物を含有する液体、または検査対象
となる物質を含有する液体を意味する。

微生物。

単細胞生物のみならず、多細胞生物または高等生物の培
養細胞をも含むものとして用いている。

技術の背景及び問題点 一般に化学的検査においては、検体の複数の希釈液のセ
ットを調整する作業、特に微生物的検査において、検査
目的に適合した種々の検体の異なった複数の希釈液のセ
ットの調整、培地の調製、所定量の培地の培養器への計
量分注、微生物の培地への接種、培養等の作業を必然的
に伴う。

特に微生物的検査においては、１種類の検体の希釈系列
、複数の検体の希釈液等をセットとして大量に調製し、
或は反復して調製することが必要である。

これらの作業は、多くの場合に熟練技術者の人手によっ
て行われており、極めて非効率的であった。

特に微生物的検査においては、これらの希釈。

培地の調製、計量分注１等の作業は、多くの場合に無菌
室内において人手によって行わねばならず、非効率的で
あった。

これらの作業に用いる、ピペット、ベトリ皿またはシャ
ーレ、三角フラスコ等の洗浄、滅菌もまた多大の人手と
労力とを必要としていた。

さらに、培養される微生物が病原性を有するか、その恐
れがある場合には、作業者への感染の危険もあった。

特に、希釈、培地の調製、計量分注並びに使用済みの器
具の洗浄、滅菌作業が、これらの検査において極めて多
くの時間と人手とを必要としていＩ；。

また、これらの検査においては、顕微鏡等を用いて或は
用いずに肉眼によって熟練者が観察１判断を行っていた
。

従って、これらの作業の一部分、望ましくはその連続し
た作業部分を一貫して自動化し、或は全部を自動化する
ことは望ましい。

従来、培地を分注する自動分注装置、混釈装置、微生物
接種装置、計量分注装置等は存在したが、検体等の複数
の異なった希釈液のセットを調製し、あるいは更にそれ
らに培地成分を調合し、調製された希釈液、培地等を計
量分注して複数の異なった培地のセットを調製し、得ら
れた培地のセットに微生物を接種し、培養し、観察判定
する作業の幾つかを一貫して行う装置は知られていなか
った。

また、無菌室内において行うべき希釈作業の少なくとも
一部分を、通常の環境において行うことのできる希釈容
器は存在しなかった。

また、ある種の微生物的検査を簡便に行う方法装置、そ
れらに使用するに適した器具は知られていなかった。

問題を解決する手段 本発明者らは、従来技術の現状に鑑みて、１種類の検体
の希釈系列、多種類の検体の異なった希釈液のセットを
大量に調製し、或は反復して調製する自動化方法、装置
及びそれらにおいて用いるに適した諸器具等につき鋭意
研究を重ねて来た。

また本発明者らは微生物的検査における、希釈。

培地の調製、培地入り培養器の調製、微生物の接種、培
養、観察判定等の幾つかを一貫して行うことができる方
法、装置、それらに用いるに適した器具等につき研究を
重ねて来た。その結果、本発明を完成するに至った。

本発明の最も基本的な方法においては、一つのクリーン
室内において、 （ａ）　　被希釈液（検体液）を収容した少なくとも一
つの被希釈液容器を所定の位置に配置すること、 （ｂ）　　希釈用液を収容し、閉蓋手段により密封され
た希釈容器の複数個が所定の配列で一体成形された希釈
液容器集合体の少なくとも１個を所定の位置に配置する
こと、 （ｃ）　　上記希釈容器集合体の閉蓋手段を少なくとも
部分的に開封すること、 （ｄ）　　ビペノトチノブを着脱可能に装着し得る少な
くとも一つの陰陽圧発生手段と、上記陰陽圧発生手段に
装着されたピペットチップを交換する手段と、上記少な
くとも一つの陰陽圧発生手段を上記ピペットチップ交換
手段と、上記被希釈液容器と上記希釈容器集合体とに関
して相対的に移動させる移動手段と、を有する計量分注
手段を設け、上記陰陽圧発生手段に装着されたピペット
チップの各々と上記被希釈液容器の各々とを整列させて
、被希釈液の所定量を上記ピペットチップに吸引するこ
と、 （ｅ）　　上記計量分注装置に装着されたピペットチッ
プの各々と上記希釈容器集合体とを相対的に移動させて
、上記ピペットチップの各々と上記希釈容器集合体にお
ける対応する数の希釈容器の各々とを整列させ、上記ピ
ペットチップの各々に吸引された被希釈液を上記整列さ
れた希釈容器内にそれぞれ排出し、それぞれ均一に混合
して少なくとも一つの希釈液を調製すること、 （ｆ）　　上記工程（ｄ）、（ｅ）を必要に応じて所定
回数反復すること、及び （ｇ）　　下記の２工程を必要に応じて所定回数（０回
を含む）反復して行うこと、 （ｉ）　　前工程において調製された希釈液の各々の所
定量を上記計量分注装置に装 着された対応する数のピペットチップ にそれぞれ吸引すること、 （ｉｊ）　　上記計量分注装置に装着されたピペットチ
ップの各々と上記希釈容器集合体 とを相対的に移動させて上記希釈容器 集合体における対応する数の他の希釈 容器と整列させ、吸引された希釈液の 各々を整列された上記希釈容器内に排 出し、均一に混合すること、 Ｃｈ）　　上記計量分注装置に装着された少なくとも一
つのピペットチップをピペットチップ交換装置によって
所定のタイミングで交換すること、（ｉ）　　少なくと
も上記工程（ｄ）〜（ｈ）を制御手段の予めプログラム
された制御の下に行って複数の異なった希釈液のセット
を調製すること、を特徴とする複数の異なった希釈液の
セットを調製する。

上記の方法において、クリーン室は、調製されるべき希
釈液が微生物的検査に用いられる場合には、無菌室を用
いる。

被希釈液は、少なくとも一つの容器に収容されてクリー
ン室内の所定の位置に配置される。

本発明の方法においては、希釈用液を収容し。

閉蓋手段によって密封された希釈容器の複数個が所定の
配列で一体成形された希釈容器集合体をクリーン室内の
所定の位置に配置する。容器集合体は、プラスチック等
の廉価な素材で形成して使い捨てとするのが望ましい。

希釈容器集合体における複数の希釈容器の配列は、いか
なる配列であっても良い。例えば、複数個の希釈容器を
一直線上に配列しても、マトリクス状に配列しても、或
はリング状に配列しても良い。これらの配列は、検査目
的に応じてセットで調製されるべき希釈液種類数及び、
自動化装置の可動部分の運動を単純化を考慮して決定さ
れる。希釈容器集合体に収容される希釈用液は、検体に
応じて（無菌）希釈用蒸留水、（無菌）希釈用生理食塩
水、（無菌）緩衝希釈用水、（無菌）希釈用培地等であ
って良い。

希釈用培地が固体培地である場合には、クリーン室内の
温度を、その固体培地のゲル化温度を越える温度とする
ことが必要である。また、そのクリーン室内において微
生物が取り扱われる場合にはクリーン室内の温度は、関
係する微生物が生存可能な温度に維持することが更に必
要である。例えば、寒天培地においては４５℃程度とす
ることが可能である。所定量の希釈液または混釈用培地
が予め希釈容器セットに収容されているので、検査現場
における作業が効率的となる。希釈容器集合体における
一つ以上の希釈容器を、被希釈液の容器として利用する
ことも可能であり、この場合には、希釈容器集合体にお
ける一つ以上の希釈容器を空にしておけば良い。必要な
らば、かかる希釈容器集合体の外側面を滅菌する手段を
設けることも可能である。更に、かかる希釈容器集合体
の複数個を所定の位置にストックし、そこから所定の位
置に供給する手段を設けても良い。必要ならば、無菌室
に隣接して滅菌室を設け、滅菌された希釈容器集合体を
ストック位置に供給しても良い。所定の検査に必要な希
釈液、培地の複数個をセットとして調製でき、それらが
一体化された希釈容器集合体に形成されるので、その後
の取り扱いが便利であり、また希釈液を取り違えるなど
の誤りケ回避することもできる。

希釈容器集合体の閉蓋手段は、閉蓋手段の開封が人手に
よって行われる場合には、いかなる形式であっても良い
が、かかる希釈用液を収容し、閉蓋手段で密封した状態
で大量に生産し、貯蔵し搬送する場合、特に機械によっ
て開封が行われる場合には、密封シートをヒートシール
、粘着シールするのが望ましい。機械による密封シール
の開封は、後述のピペットチップの先端によって突き刺
すことにより開封しても良く、或はピペットチップの挿
入に先立って、切開手段、加熱溶融手段などで行っても
良い。更に、閉蓋手段を機械的に係止する手段を設けて
、係止手段と希釈容器集合体とを相対的に移動させて密
封シートを剥離しても良い。

計量分注手段は、ピペットチップを装着し得る少なくと
も一つの陰陽圧発生手段と、陰陽圧発生手段に装着され
たピペットチップを交換するピペット交換手段き、上記
陰陽圧発生手段手段に装着された少なくとも一つのピペ
ットチップとピペット交換手段、被希釈液容器及び希釈
容器集合体とを相対的に移動させる移動手段とを有する
。ピペットチップは、それ自体が一般のピペットと同様
に陰陽圧を発生するための弾性材料で形成された袋状部
分と、液体を収容する筒状部分とを有するピペットチッ
プであっても、あるいは単に筒状部分のみを有するピペ
ットチップであっても良い。前者の場合には、陰陽圧発
生手段に、ピペットチップの袋状部分を圧縮、弛緩させ
る手段を配置し、後者の場合には、陰陽圧発生手段に、
例えば、電磁ツレノド又はエアシリンダ等によってスト
ロークを調節できるシリンダを配置すれば良い。ピペッ
トチップの陰陽圧発生手段への装着態様はいがなる形式
でも良いが、例えば押し込み嵌めであって良い。ピペッ
ト交換手段は、多数のピペットチップをストックし、使
用済みのピペットチップを抜去し、新たなピペットを押
し込んで嵌め込む形式であって良い。陰陽圧発生手段に
装着されたピペットチップは、移動手段によって被希釈
液容器と相対移動されて、所定量の被希釈液をピペット
チップ内に吸引する。　吸引が完了したピペットチップ
は、移動手段によって希釈容器集合体と相対的に移動さ
れて対応する数の希釈容器と整列され、被希釈液を排出
させられる。あらかじめ収容された（無菌）希釈用液と
被希釈液とを均一に混合する方法は、いかなる形式であ
っても良い。しかしながら、希釈容器の用量が小さい場
合には、ピペットチップ内に陽圧と陽圧とを交互に与え
て、混合液を吸引排出して混合することができる。他の
方法としては、希釈容器集合体を動揺又は振盪させる方
法、撹拌手段を希釈容器内に挿入して撹拌する方法など
があり、この際、希釈容器内に転動する物体をあらかじ
め配置しておくこともできる。

かくて、少なくとも一つの希釈液が調製される。

詳述すれば、複数の異なった被希釈液を希釈した液のセ
ットを１セツト調製する場合には、それらの数に対応す
るピペットチップを用いて同時にまたは並列的に１セツ
トの希釈液を調製しても良く、単一のピペットチップを
用いて、複数回の動作を反復して直列的に希釈を行うこ
ともできる。

後者の場合には、必要に応じて、１種類の希釈液を調製
する度にピペットチップを交換することもできる。

１種類の被希釈液の複数段階の希釈液系列を調製する場
合には、最初の希釈容器内に一つの希釈液を調製した後
、その希釈液の所定量を吸引して、次の希釈容器に注入
し、均一に混合した後、同様の操作を反復して１セツト
の希釈系列を調製しても良い。この際、複数のピペット
を用いれば、同じ希釈系列の希釈液の複数セットが同時
に調製できる。

ピペットチップの交換は、一連の希釈工程の手順に応じ
て行えば良い。

上述の工程において、少なくとも、計量分注手段におけ
るピペットチップと被希釈液容器との相対的移動、整列
、被希釈液の所定量の吸引、ピペットチップと希釈容器
との相対的移動、整列、吸弓された被希釈液の希釈用液
への分注、撹拌、一つの希釈液の所定量の吸引、ピペッ
トチップと他の希釈容器との相対的移動、吸引された希
釈液の他の希釈用液への分注、撹拌、ピペットチップの
交換の工程をプログラム可能な制御手段の制御の下に行
う。

かくて本発明の基本方法によれば、検体、即ち検査の対
象である微生物を含有する液体、または検査の対象であ
る物質を含有する液体の複数の異なった希釈液のセット
を調製できる。

第３の液体を収容した一つ以上の容器をクリーン室内の
所定位置に配置して、被希釈液、希釈用液と混合するこ
ともできる。第３の液体は、計量分注手段を用いて希釈
液に混合しても良く、或は、第３の液体を収容した各容
器に専用の計量分注手段を個々的に設けても良い。後者
の方法は、被希釈液に比して比較的大量の素材を収容す
ることが望まれる場合、ピペットチップ交換の頻度を少
なくすることのメリントがある。

かくて得られた希釈液は、上記計量分注手段を用いて、
或は同様な他の計量分注手段を用いて、希釈液容器に分
注することも可能である。

更に、微生物接種手段を付加して、調製された希釈培地
に微生物を接種することも可能である。

かくて得られた混釈培地、微生物を接種された培地は、
移送手段によって他の無菌室に搬送されて所定時間に亙
り培養することも可能である。その上更に、培養された
培地の観察判定をも自動化することかできる。

本発明の簡単化された方法においては、シャーレまたは
ペトリ皿に代えて本発明による特別の希釈液プレート（
培養プレート）を用いている。この実施例においては、
ガラス又はプラスチック族のプレート表面に所定の配列
で所定数の希釈液滴下領域と、それらを囲繞する分離領
域とを設けた希釈液プレートが所定の位置に配置される
。希釈液容器に希釈液を分注する代わりに、希釈液プレ
ートの滴下領域に少量の希釈液を滴下して、可及的に広
い面積に可及的に薄く展開せしめる。希釈液が培地であ
る場合には、かくて得られた希釈液滴下領域に形成され
た薄い培地においては、成育したコロニーが重なり合う
事がないので、例えば生菌数検査等においては判定を自
動化するのに有効である。しかも、この方法においては
使用培地量が極端に減少するので、培地原料を節減でき
、装置を小型化でき、また培養プレートを使い捨てとす
る場合には、培養プレートの費用をも節減できる。所定
の検査に必要な培地の複数個をセットとして調製でき、
それらが一体化され希釈液プレートに滴下されるので、
その後の取り扱いが便利であり、また培地を取り違える
などの誤りを回避することもできる。

本発明の他の簡便な検査方法においては、筒型の希釈液
容器を用いる。この希釈液容器は、一端に吸引口を、他
端に陰陽圧発生手段に装着する装着部を、中間部に空洞
部を設け、上記空洞部の内容積を定めるＸ、Ｙ、Ｚ軸直
交座標の少なくとも一つの軸方向の寸法を可及的に小さ
く形成しである。かくて、この筒型希釈液容器は、希釈
液を吸引したとき、可及的に広い面積に可及的に薄く展
開され、上記の希釈液プレートと同様の利点が得られる
。

本発明の装置及び本発明の方法及び装置に適した諸器具
の概要は上述の説明から明らかである。

以上に本発明の方法、装置並びに諸器具の概要を説明し
たが、以下に本発明の具体的実施例について添付図面を
参照して詳述する。

実施例の説明 本発明の方法及び装置は、それらに用いる諸器具の改善
とも関係するので、先ずそれらの諸器具の実施例につい
て先に説明する。

第１図ａは、本発明の方法及び装置において使用するに
適した希釈容器集合体の平面図、第１図すはその右側面
図である。希釈容器集合体は、所定数の希釈容器が所定
の配列で配置されて１例えばプラスチングなどの素材で
一体的に成形された容器部分１と、それらの希釈容器の
開口を密封する閉蓋手段２とを有する。この実施例にお
いては、容器部分ｌは４個の希釈容器１ａ＝ｌｄが一直
線上に整列しているものとして示されている。個々の希
釈容器は概して円錐台形状をなし、その上方部分に外側
に膨出した部分１ｅが設けられている。

この膨出部分１ｅは、閉蓋手段２を部分的に剥離して、
ピペットなどの注入手段を受は入れる。各希釈容器１ａ
−１ｄの開口部は連接板３によって互いに連接されてい
る。連接板３は概して長方形の平面外形を有し、その周
縁部に少なくとも一つの切り欠き部を設ける。この実施
例では閉蓋手段２の長方形の対向する一対の短辺の一方
の両隅に切り欠き部が、他方の短辺の中央部分に台形状
の切り欠き部が設けられているものとして示されている
。閉蓋手段２は、この実施例においては粘着面を有する
長方形の粘着シートであって、粘着面が連接板３の頂面
に粘着されたとき、それらの−対の短辺の一方の両隅部
分２ａは連接板３の上記切り落とし部分からはみ出して
おり、他方の中央部分２ｂは連接板３の台形状の切り落
とし部分からはみ出している。これらのはみ出し部分は
、人手又は機械によって閉蓋手段２が開封される際のつ
まみ部分として役立つ。

本発明においては、かかる希釈容器集合体の各希釈容器
１ａ〜１ｄに、所定量（例えば９ｍ０）の希釈液をそれ
ぞれ分注、密封して検査現場に供給することをもくろん
でいる。勿論、検査現場においてかかる希釈容器集合体
に、希釈用液を計量。

分注して、クリーン室内の所定の位置に配置しても良い
。使用に際して、閉蓋手段２のつまみ部分２ａ、２ｂの
何れか一つが人手又は機械によってつままれて、あるい
は係止されて、少なくとも部分的に剥離される。この際
、膨出部分１ｅの形状は剥離が進むにしたがって、徐々
に剥離抵抗を減少させる効果を有し、したがって剥離に
際して希釈容器集合体を動揺させることがなく、内容液
がこぼれるのを防止できる。

第２図は、第１図の実施例の変形例を示す平面図である
。同様な部分は同様な参照符号が与えられておりそれら
については、重複を避けるために説明せず、異なる部分
についてのみ以下に説明する。この実施例においては、
連接板３には、一対の対向する長辺の一方に、希釈容器
に対応して複数の切り欠き部３ａが設けられている。ま
た閉蓋手段２は長方形の一対の対向する長辺の一側から
隣接する希釈容器の間の領域まで延長する切り込み２ｃ
が形成されており、個々の希釈容器１ａ〜ｌｄの開口を
個々的に部分的に開閉することができる。

第３図は、第１図の希釈容器集合体の変形例を示す斜視
図である。同様な部分は同様な参照符号が与えられてお
りそれらについては、重複を避けるために説明せず、異
なる部分についてのみ以下に説明する。この実施例にお
いては、容器部分１はシェブロン状の断面形状を有する
所定数（この実施例では６個）の希釈容器１ａ−１ｆの
容器壁が融合した構造として形成されている。したがっ
て連接板３は存在せず、粘着面を有する閉蓋手段（粘着
シート）２は容器壁の上端面に粘着される。

閉蓋手段２は、容器部分ｌの上端部の形状に対応してン
エプロン状の形状を有し、その一端には穴２ｃを有する
つまみ部分２ｂが設けられているものとして示されてい
る。容器部分１のシェブロン状の図形を構成する全ての
輪郭線の長手方向が、閉蓋手段２の剥離方向（矢印Ａ）
に対して斜め又は平行に配置されている。かくて、閉蓋
手段２が人手又は機械によって剥離開封される際に、極
端な抵抗の変化を受けることがなく、希釈容器の動揺に
よって内容物が溢出するのを防止できる。

第４図は、第３図の希釈容器集合体の変形例を示す斜視
図である。同様な部分は同様な参照符号が与えられてお
りそれらについては、重複を避けるために説明せず、異
なる部分についてのみ以下に説明する。この実施例にお
いては、各希釈容器ｌａ〜１ｄはほぼ正方形の断面形状
とし、それらの各−辺を部分的に融合させ、それらの対
角線を互いに平行に整列させている。閉蓋手段（粘着シ
ート）２のつまみ部分２ｂは上方に折り曲げられている
。つまみを折り曲げることにより、希釈容器集合体を矢
印Ａと反対方向に供給し、移動する間につまみ部分２ｂ
を装置の固定部分に保持するだけで、閉蓋手段２が剥離
開封され得る。また、希釈容器集合体の側壁は鋸歯状と
なっているが、これは、希釈容器集合体の供給手段にお
ける給送機構において希釈容器集合体を確実に保持して
移動させる手段との保合構造として利用可能である。

更に、この希釈容器集合体の他の利点は、例えば、これ
らの各希釈容器１ａ−１ｄに所定の希釈系列の混釈培地
を調製しＩ；後、希釈容器集合体を長手方向の側面の側
に傾斜させることによって、それぞれの希釈容器の開口
の隅部から対応する間隔で配置された複数の培地容器に
流し込むことができることである。

上述の変形として、各希釈容器の開口部を正方形とし、
隣接する希釈容器の開口部の正方形の一辺を互いに完全
に重ね合わせて配置すること、換言すれば、長方形の容
器を複数の正方形開口を有する複数の区画室に区分した
構造とすることも可能である。この場合においても、閉
蓋手段２の剥離方向をそれら正方形の各辺に対して斜め
にすれば、同様の効果を期待できるが、閉蓋手段を正方
形の各辺に対して斜めに剥離する剥離機構を別個に設け
るか、希釈容器集合体の供給方向を正方形の各辺に対し
て斜めに配置しなければならない。

かかる設計は余分な装置及び／またはスペースを必要と
するので望ましくない。ただし、閉蓋手段２の剥離が、
人手によって行われる場合には、かかる希釈容器集合体
も利用可能である。

第５図は、第４図の実施例の変形例の平面図であって、
この実施例では、希釈容器集合体はｎ列。

ｍ行のマトリクス状に配置されたｎＸｍ個（この実施例
では３列、４行の１２個）の希釈容器のセットとして形
成されていることを除けば、第２図の実施例と同様であ
る。尚、簡便のために各希釈容器には参照符号を付けず
、各列と行とに符号を付して、各列１行の順位番号をハ
イフン記号で結んで個々の希釈容器を表示することにす
る。

この実施例は、多段階の希釈系列（の１セツト）を必要
とする場合、又は少数段階の希釈、混釈の多数セットを
必要とする場合に適している。例えば、多段階（ｉ２段
階）の希釈、混釈を行う場合について、その使用態様を
説明すれば、各列ｎｌ。

ｎ２．ｎ３の行ｍｌの各希釈容器１−１．２−１３−１
には予め異なった量の希釈液を収容し、且つ被希釈液の
異なった量を分注するか、あるいは各希釈容器１−１．
２−１．３−１には予め等量の希釈液を収容し、被希釈
液の異なった量を分注するか、あるいは各希釈容器１−
１．２−１．３＝１に異なった量の希釈液を封入してお
き、非希釈液の一定量を分注して、所望の希釈段階の飛
躍した希釈段階の混合液を調整する。

これらの希釈容器１−１．２−１．３−１の所定量を各
列の次の行の希釈容器１−２．２−２゜３−２に分注し
て予め収容されていＩ；同−又は異なった所定量の希釈
液と混合し、順次同様の手順で１−２〜１−４．２−２
〜２−４．３−２〜３−４の各希釈容器において上述の
飛躍した希釈段階の中間の濃度を補完する希釈混合液を
調製する。

予め各希釈容器に収容される希釈液の量、最初の行の各
希釈容器に分注される被希釈液の量、及び前の行の各希
釈容器から次の行の各希釈容器に分注される混合液の量
とを適宜調整することによって、直列的な希釈作業を行
う場合に比して、所望の多段階希釈系列が短時間で調製
できる。

４段階希釈系列の３セツトを同時に調製する場合には、
例えば予め各希釈容器に９ｍＱ、の希釈液を収容してお
き、行ｍ１の各容器１−１．２−１゜３−１に１ｍ＋１
の被希釈液をそれぞれ分注し、その混合液を次の行ｍ２
の各希釈容器１−２．２−２．３−２に分注し、最後の
行ｍ４の希釈容器１−４．２−４．３−４まで同様の操
作を反復することにより調製できることが理解されよう
。

上述の各実施例において各希釈容器の形状は円形、シェ
ブロン状又は正方形断面の筒状として示されているが、
断面形状は特に制限されることはなく、いかなる形状で
あっても良い。

第６図は、本発明の一実施例による簡便な希釈液プレー
トの断面図である。この希釈液プレートは、従来の培養
容器（例えばペトリ皿）に代えて使用するに適する。こ
の実施例においては、例えばガラス、プラスチック等の
素材で形成されたプレート１０の表面に、所定数（この
実施例では４個）の互いに分離した希釈液滴下領域１０
ａ〜】Ｏｄと、それらを囲繞する分離領域１０ｅとを形
成している。各滴下領域は滴下された希釈液を可及的広
い面積に展開させる底面積と深さ（浅さ）とを有する。

凹部として形成されている。従来、培地は試験管、シャ
ーレ（ベトリ皿）、三角フラスコ、坂ロフラスコ等に収
容して培養されていた。

しかし、これらの容積が大きいので、大量の培地を必要
とするばかりでなく、それらの取り扱いを機械化する場
合には、培地容器のストックスペース、培地容器の供給
機構、それらを収容するクリーン室、または無菌恒温室
も大きくなる。この実施例は、例えば、固形培地におい
て生菌数を検査する場合に、上記の希釈液の滴下領域に
所定量。

例えば１ｍ１２の混釈培地を滴下して可及的広い面積に
展開させることによって培地の厚さを薄くするとともに
、一つの培地が占める容積をも小型化できる。従って、
プレートをストックするスペース、プレートの供給機構
、それらを収容するクリーン室、無菌恒温室を小型化で
きる。しかも関連する培地が一枚のプレート上に乗って
いるので、−括して取り扱いができ、サンプル（培地）
の取り違えなどのミスを防止できる。更に、培地の厚さ
が薄いので、適正なコロニー密度においては、コロニー
が重なり合うことがなく、従って生菌数の計数作業を機
械化することすら可能になる。

第７図は、第６図の変形例の模式的断面図を示す。同様
な部分は同様な参照符号が与えられており、それらにつ
いては重複を避けるために説明せず、異なる部分につい
てのみ以下に説明する。この実施例においては、滴下領
域１０ａ”ｌＯｄの表面に滴下される培地にたいして親
和性を与え。

分離領域１０ｅの表面に滴下される培地にたいして非親
和性を与えている。例えば、プレート１０をガラス製と
し、分離領域１０ｅをシリコン樹脂で被覆する。図にお
いては、シリコン樹脂の被覆の厚さが誇張して示されて
いるが、実際にはμｍのオーダーの厚さとすることがで
きる。かくて滴下された希釈液（培地）は充分に広く展
開して、極めて薄い培地を形成することができる。また
滴下された培地の輪郭を所望の形状に形成することが可
能である。これは、機械によるコロニーの計数に極めて
好都合である。この実施例において、培養の間に培地が
乾燥する虞れがある場合には、各滴下領域を分離して覆
うカバーまたは、それら滴下領域の全体を覆うカバーを
設けても良い。かかるカバーの形状は図示するまでもな
く明らかであるが、第８図に希釈液プレートＩＯとカバ
ーｌｌの一例が斜視図で示されており、第９図にそれら
のが断面で示されている。

第１０図は、第７図の実施例の変形例を示す模式的断面
図である。同様な部分は同様な参照符号が与えられてお
り、それらについては重複を避けるために説明せず、異
なる部分についてのみ以下に説明する。この実施例にお
いては、プレートＩＯの背面に滴下領域１０ａ〜１０ｄ
に対応した配置でレンズ状の凸面１０ｆが形成されてい
る。かくて、背面から観察する際にコロニーを拡大して
見ることができ、肉眼による場合にも機械によるば場合
にも計数が確実に行える。

第１１図は、本発明の他の一実施例による簡便な筒型希
釈液容器２０の斜視図である。容器２０は、両端に開口
２０ａ、２０ｂを有し、中間に空洞部２０ｃを有する筒
型構造を有するものとして示されている。この実施例に
おいては、空洞部２０ｃは偏平な矩形状断面を有する筒
状構造をなし、開口２０ａはその筒状構造の末端を開放
しただけの構造として示されており、開口２０ｂは、後
述の陰陽圧発生手段に装着する拡大された円筒状構造部
分と筒状構造への遷移部として漏斗を構造部分とをもつ
ものとして示されている。

詳述すれば、空洞部２０ｃの内容積を定めるＸ。

Ｙ、Ｚ軸直交座標の少なくとも一つの軸方向（この実施
例ではＺ軸方向）における寸法が可及的小さく形成され
ている。陰陽圧発生手段により陰圧が開口２０ｂに与え
られたとき培地は開口２０ａから吸引される。空洞部に
は一対の境界線２０ｄが筒状構造を鉢巻き状に表示され
ており、それらの間に所定量の培地が存在することを表
示している。従って、その間のコロニー数を計数すれば
良い。境界線の代わりに、筒状の空洞部分の両端部を不
透明にして、観察領域を限定しても良い。また、Ｘ、Ｙ
、Ｚ方向の２方向の寸法を可及的小さく形成して細管状
に形成しても良い。

以上に本発明の様々な器具の実施例を説明したが、以下
に本発明の方法及び装置を若干の実施例を通じて説明す
る。

本発明の最も基本的な方法に関しては、先に［問題点を
解決する手段」の項において、希釈容器集合体に関連し
て充分に説明した。従って、ここでは本発明の基本方法
を実施する装置について詳述する。

第１２図は、上述の基本方法を実施するだめの装置の一
実施例を模式的に示す配置図である。この実施例の希釈
装置においては、少なくとも一つのクリーン室５０と制
御手段Ｃとを有する。クリーン室５０内には、被希釈液
を収容した少なくとも一つの被希釈液容器を配置する被
希釈液容器配置位置６０、（無菌）希釈用液を収容し、
閉蓋手段により密封された希釈容器の複数個が所定の配
列で一体成形された希釈容器集合体の少なくとも１個を
配置する希釈容器集合体配置位置７０、計量分注手段８
０とを有する。

クリーン室５０は、本発明の装置によって調製されるべ
き希釈液の使用目的に適合した意味でクリーンな室であ
れば良く、例えば微生物的検査のための希釈液の調製を
目的とする場合には無菌室であって良い。また固体培地
を溶融して混釈培地を調製する場合には、無菌恒温室と
し、それによって無菌恒温室内における固体培地を溶融
状態に維持する。勿論、除菌フィルタを備えた空気循環
装置５１、室内を嫌気状態に維持するガス供給手段５２
、室内温度を一定に維持するサーモスタット５３、及び
熱交換装置５４などを具備することができる。これらの
無菌室の装備自体は公知であり、従ってそれらの詳細は
説明を省略する。

被希釈液容器配置位置６０は、検査の対象である被希釈
液を収容した少なくとも一つの被希釈液容器を所定の位
置に配置できることが必須であるが、この実施例におい
ては、四つの被希釈液容器６１．６２，６３．６４が一
列に整列して配置される試験管ラックとして示されてい
る。

被希釈液は、検査目的に応じて適宜選択される。

例えば、被希釈液が１種類のみの場合には、被希釈液容
器は１個だけで良い。被希釈液が複数種類ある場合には
、それに応じて同数の被希釈液容器を所定の配列で所定
の位置に配置することが必要である。

希釈容器集合体配置位置７０は、先に説明した少なくと
も一つの希釈容器集合体ｌを所定の位置に配置できるこ
とが必須であるが、この実施例においては、多数の希釈
容器集合体をストックし、そこから一つずつ所定の位置
（希釈ステーションＤＳ）に配置する希釈容器集合体供
給手段として示されている。しかしながら、最も簡単な
装置においては、単に人手によって希釈容器集合体１の
１個以上を、所定の位置に配置する単なる配置台であっ
て良い。この場合希釈容器集合体の閉蓋手段２は人手に
よって開封する。

上述のいかなる希釈容器集合体も使用可能であるが、こ
の実施例では第４図に示した希釈容器集合体を用いるも
のとして示されている。希釈容器集合体ｌにおける希釈
容器の数は、検査目的に応じて適切に選択すれば良い。

希釈容器の配列、配置は、いかなる形態であっても良い
が、比較的少数の希釈容器からなる集合体においては第
１図〜第４図に示した直線的配列が望ましい。それによ
って、クリーン室５０内における諸操作の態様が単純化
できる。また希釈容器集合体ｌの各希釈容器ｌａ、ｌｂ
・・・内に予め収容される希釈液の種類及び量は、検査
目的に応じて適宜選択することができる。予め希釈液を
収容した希釈容器集合体１を供給することにより、希釈
作業が効率化されると共に、検査目的に応じて関連する
希釈液がセットとして常に一体的に取り扱われることが
でき、検査中に取り扱いが簡便となりまた希釈容器を取
り違える誤りを回避できる。

第１３図には、希釈容器集合体供給手段７０の模式的配
置図が示されている。この供給手段７０は、多数の希釈
容器集合体ｌをストックするストック手段７１と、スト
ック手段７１から希釈容器集合体ｌを一つずつ所定位置
（例えば希釈ステーションＤＳ）に移送する移送手段７
２とを有する。

機械技術において、複数の物品をストックするストック
手段は様々な形式のものが知られており、ストック手段
７１はいかなる形式のものであっても良いが、この実施
例では、筒状のケース７１ａ内において左右（第１３図
において紙面と直交する方向）に移動するテーブル７１
ｂ上に多数の希釈容器集合体を積み重ねて多数列収容し
く第１３図においてはその１列のみが現れている）、ケ
ース７１ａの下方に設けた開ロア１ｃからダルマ落とし
の要領で希釈容器集合体の積み重ねの下の方から一つず
つ押し出す形式のものとして示されている。希釈容器集
合体ｌの押し出しは、テーブル７１ｂの下方に配置され
て楕円軌道に沿って回転するブツシュパー７１ｄを有す
るブツシャ手段として示されている。ブツシュパー７１
ｄは、テーブル７１ｂに設けられたスリット７１ｅを通
ってテーブル面の上下に出没し、テーブル面上に突出し
たとき、押し出し方向（矢印Ｂ）に移動し、後退する際
はテーブル面から下方に没する。テーブル７１ｂは、−
重ねの希釈容器集合体を放出した後、所定位置だけ左右
に移動して、次のスタックから同様な態様で希釈容器集
合体を押し出す。

物体を移送路に沿って移送する移送手段もまた様々な形
式のものが知られており、いかなる形式のものであって
も良いが、この実施例においては、第１３図に模式的に
示されているように、移送方向にスリット７２ａを有す
る底面７２ｂと、希釈容器セットの側面を移送方向に案
内する側面案内手段７２ｃとを有する移送路７２の下方
から移送路の表面に出没し、楕円軌道に沿って案内され
るブツシャ手段７２ｄとして示されている。ブツシャ手
段７２ｄは、ストック手段７１から押し出された希釈容
器集合体を希釈ステーションＤＳに移送する。

計量分注手段８０は、ピペットチップを着脱可能に装着
し得る少なくとも一つの陰陽圧発生手段８１と、陰陽圧
発生手段８１にピペットチップを着脱するピペットチッ
プ交換手段９０と、少なくとも一つの陰陽圧発生手段８
１をピペットチップ交換手段９０と、被希釈液容器６１
〜６４及び希釈容器集合体に関して相対移動させる移動
手段８２とを有する計量分注手段８０と、上記陰陽圧発
生手段にピペットチップを着脱するピペット交換手段９
０と、が設けられている。

第１２図においては、陰陽圧発生手段８１は、シリンダ
として示されており、それは電磁ソレノイド（図示せず
）によってストロークを変更し得る形式のものが望まし
い。この実施例においては、ピペットチップ８１ａは、
それ自身は弾性注水嚢をもたない、先細部分を有する単
なる筒状体として模式的に示されている。

移動手段８２は、ロボット技術において知られている公
知の機構を用いることができるが、この実施例では第１
２図に示したように、一対のサイトレール８２ａ上を適
切な駆動手段（図示せず）によって矢印りの方向に往復
走行するコの字状の架橋部材８２ｂと、上記架橋部材８
２ｂの横桁部材上を矢印Ｅ方向に移動する可動部材８２
ｃとを有するものとして示されている。

可動部材８２ｃには、リニアモータ（図示せず）で上下
運動可能なシリンダ８２ｄが支持されており、シリンダ
８２ｄは電磁ソレノイド又はエアシリンダ（図示せず）
で駆動されて陰陽圧を発生するものとして示されている
。

しかしながら、ピペットチップ８１ａ自体が弾性注水嚢
のような陰陽圧を発生し得る構造のものである場合には
、陰陽圧発生手段８１は、かかるピペットチップを保持
する保持手段と９弾性注水嚢を圧迫、復元させる単なる
押圧手段とで構成できる。

ピペットチップ交換手段９０は、第１２図において見ら
れるように、多数のピペットチップ８１ａの陰陽圧発生
手段への装着口を上方に向けて。

マトリクス状に配列して収容した容器９１と該容器を水
平面上で縦横に移動させる手段と、使用済みのピペット
チップ８１ａを受は取る廃棄容器９２とを有するものと
して示されている。容器９１は、未使用のピペットチッ
プ８１ａがピペットチップ交換位置に位置付けられるよ
う、適切な駆動手段によって前後左右に移動される。か
かる駆動機構自体は機械技術において周知であり、従っ
て図示せず、説明も省略する。勿論、陰陽圧発生手段８
１を固定して、被希釈液容器、希釈容器集合体。

ピペットチップ交換手段を移動させても良い。

もはや明らかなように、計量分注手段８０は、被希釈液
容器６１〜６４、無菌希釈用液の所定量を収容した希釈
容器集合体における一つの希釈容器と相対的に移動して
、被希釈液を無菌希釈用液に添加することができる。そ
れらの液を液を均一に混合することが必要であるが、こ
の実施例では、ピペット９１の先端を混合液中に浸して
吸引、排出を複数回反復するものとして、示されている
。

この混合方法はｌＯ〜２０ｒ１２程度の比較的少量の液
体を混合するのに３回程度の吸引、排出を行うことによ
って充分に均一な混合が行えることが判った。さらに大
量の液体を混合するには吸引。

排出の回数を若干多くすることが必要となるものと推定
される。

希釈容器集合体における各希釈容器内にピペットチップ
８１ａをアクセスさせるために、希釈容器集合体ｌの閉
蓋手段２を少なくとも部分的に開封することが必要であ
る。閉蓋手段２の開封は、簡便な装置においては、人手
によって開封するが、この実施例においては、ピペット
８１ａの先端によって穿刺して開封するものとして示さ
れている。

しかしながら本件出願人の別件出願（特願昭６３−２８
７１１７号、発明の名称：密封包装体からのサンプルの
注出装置及び該装置に用いるサンプル採取管）に開示さ
れた穿孔手段が好都合に利用可能である。

複数種類の被希釈液を用いる場合には、それらを個々的
に（あるいは直列的に）計量７分注しても良く、あるい
は複数の陰陽圧発生手段８１ｂを並列して用いて同時に
（あるいは並列的に）計量。

分注しても良い。

以上の装置においては、被希釈液と　希釈容器集合体に
予め分注された希釈用液とのみを用いるものとして説明
したが、第３の液体を配合した希釈液を調製することが
必要な場合が多々ある。例えば、被希釈液が微生物の懸
濁液であり、希釈用液が無菌緩衝希釈用液であり、これ
らによって調製される希釈系列に一つ以上の固体培地材
料を混合して混釈培地を調製する場合には、固体培地の
溶融液を第３の液体として収容しｔ；一つ以上の容器１
０１を、クリーン室内に配置することが可能である。こ
の場合、培地溶融液は、上述の計量分注手段によって分
注できるが、必要ならば第３の液体容器に専属の計量分
注手段を夫々設けることができる。かかる専属の計量分
注手段としては、夫々の容器に接続されたチューブ１０
２を複数の抑圧ローラを一体的に回転させて、チューブ
の圧迫と釈放によってノズル１０３を介して分注する分
注ポンプ１０４が知られている。

上述の装置を用いた本発明方法の若干の実施耐用につき
、以下に説明する。

［複数の希釈段階の希釈系列の１セツトを調製する方法
］ 検査対象としての微生物を含む検体液（例えば、食品の
ホモジナイズされた懸濁液）を被希釈液容器６’ｌに収
容し、位置６０に配置する。

無菌緩衝希釈用水の所定量（例えば９ｍＱ）をそれぞれ
収容し、密封シート（閉蓋手段２）によって密封された
希釈容器１ａ−１ｄを有する希釈容器集合体の複数個を
ストック手段７１に配置する。

一つの希釈容器集合体が所定量１ｍ（希釈ステーション
ＤＳ）に移送される。

ピペット交換手段９０により、計量分注手段の陰陽圧発
生手段８１にピペット８１ａが装着される。

移動手段８２によりピペットチップ８１ａと容器６１と
か相対移動され、整列される。

被希釈容器６１内の被希釈液の所定量（例えば１ｍ＋１
）が吸引される。

移動手段８２により、ピペットチップ８１ａが希釈ステ
ー／コンＤＳに位置付けられた希釈容器集合体ｌに関し
て相対移動され、一つの希釈容器（例えばｌａ）と整列
され、ピペットチップが圧し下げられて密封シート２を
穿刺して開封し、陰陽圧発生手段８１に陽圧を発生させ
て、ピペットチップ８１ａ内に吸引された被希釈液を排
出する。

ピペットチップ８１ａの先端をその希釈容器１ａの液面
下に浸して、吸引、排出を複数回反復し、均−に混合さ
せ、第１段階の希釈液が調製される。

調製された希釈液の所定量（例えばｌｒ＋Ｊ）を陰陽圧
発生手段８１によりピペットチップ８１ａ内に吸引する
。

移動手段８２により、希釈容器集合体ｌとピペット８１
ａとを相対移動させて、希釈容器１ｂとピペットチップ
８１ａとを整列させ、ピペットチップ８１ａの先端で密
封シート２を開封し、陰陽圧発生手段８１により吸引さ
れた希釈液を排出する。

ピペットチップ８１ａの先端をその希釈容器１ｂの液面
下に浸して、吸引、排出を複数回反復し、均一に混合さ
せ、第２段階の希釈液が調製される。

同様の動作を反復して希釈容器１ｃ、ｌａ内に第３．第
４段階の希釈液を調製する。

かくて得られた希釈系列は、別に用意された培地に接種
されて培養される。接種が培地上への散布である場合に
は、上述の計量分注手段によって、培養容器内の培地上
に分注し、適切な手段によって例えば培養容器を揺動さ
せて培地表面上に展開させることができる。かかる揺動
する手段は、本件出願人の別件出願によって開示されて
いる。

上述の希釈系列の複数セットを同時に調製するには、希
釈容器集合体の複数個を希釈ステーションＤＳに配置し
、計量分注手段８０に陰陽圧発生手段８１を複数連接し
、移動手段８２によって上記と同様の動作を同時に行え
ば良い。

［複数種類の被希釈液を希釈した複数種類の希釈液の１
セツトを調製する方法１ 検査対象としての複数の抗生物質を夫々含む検体液を４
個の被希釈液容器６１〜６４に収容し、位置６０に配置
する。

無菌緩衝希釈用水の所定量（例えば９ｍ＋２）をそれぞ
れ収容し、密封シート（閉蓋手段２）によって密封され
た希釈容器１ａ〜１ｄを有する希釈容器集合体の複数個
をストック手段７１に配置する。

一つの希釈容器集合体が所定位置（希釈ステーションＤ
Ｓ）に移送される。

ピペット交換手段９０により、計量分注手段の陰陽圧発
生手段８１にピペットチップ８１ａが装着される。

移動手段８２によりピペットチップ８１ａと容器６１と
が相対移動され、整列される。

被希釈液の所定量（例えば１ｍｌ２）が吸引される。

移動手段８２により、ピペットチップ８１ａが希釈ステ
ーションＤＳに位置付けられた希釈容器集合体ｌに関し
て相対移動され、一つの希釈容器（例えばｌａ）と整列
され、ピペットチップの先端で密封シート２を穿刺して
開封し、陰陽圧発生手段８１に陽圧を発生させて、ピペ
ットチップｓｌａ内に吸引された被希釈液を排出する。

ピペットチップ８１ａの先端をその希釈容器ｌａの液面
下に浸して、吸引、排出を複数回反復し、均一に混合さ
せ、第１段階の希釈液が調製される。

ピペット交換手段９０により、計量分注手段の陰陽圧発
生手段８１に装着されたピペットチップ８１ａが交換さ
れる。

移動手段８２によりピペットチップ８１ａと容器６２と
が相対移動され、整列される。

第２の被希釈液の所定量（例えば１ｍα）が吸引される
。

移動手段８２により、ピペットチップ８１ａが希釈ステ
ーションＤＳに位置付けられた希釈容器集合体１に関し
て相対移動され、一つの希釈容器（例えばｌｂ）と整列
され、ピペットチップ８１ａの先端で密封７−ト２を穿
刺して開封し、陰陽圧発生手段８１に陽圧を発生させて
、ピペットチップ８１ａ内に吸引された被希釈液を排出
する。

ピペットチップ８１ａの先端をその希釈容器ｌｂの液面
下に浸して、吸引７排出を複数回反復し、均一に混合さ
せ、第１段階の希釈液が調製される。

同様の操作を反復して、第１〜第４の抗生物質の希釈液
が各希釈容器１　ａ−１ｄ内に調製される。

かくて得られた各希釈液のセットは、例えば、別に用意
された培地調整装置において異なった抗生物質を含む培
地のセットの調製に用いられる。

上述の複数の希釈液の複数セットを同時に調製するには
、希釈容器集合体の複数個を希釈ステーションＤＳに配
置し、計量分注手段８０に陰陽圧発生手段８１を複数連
接し、移動手段８２にょって上記と同様の動作を同時に
行えば良い。

上述の並列希釈、並列分注を行う際、複数のピペットチ
ップ８１８間の離隔距離、複数の被希釈液容器６１〜６
４間の離隔距離、希釈容器集合体における複数の希釈容
器ｌａ〜ｌｄ間の離隔距離が等しくない場合には何等か
の調製手段が必要である。一つの方法は、ピペット間の
間隔を変更する手段を設けることが可能であるが、他の
方法としては、第１４図に示すように、被希釈液容器６
１〜６４間の距離Ｑにピペット間の間隔を合わせておき
、複数の希釈容器集合体Ｉを互いにずらせて配置して、
隣接する集合体の対応する希釈容器（例えば各集合体の
希釈容器１ａ）間の距離を調製しても良い。この場合に
は、第５図に示した希釈容器集合体のようなマトリクス
状の配列が利用可能である。

詳述しないが、上述の方法の組み合わせによって、異な
った種類の複数の被希釈液の希釈系列の１セツトまたは
複数セットを同時に調製することもてきることが理解さ
れよう。

上述の装置において、希釈容器集合体供給手段７０、計
量分注手段８０．ピペット交換手段９０の諸動作及び無
菌室５０内の諸条件の維持は、プログラム可能な制御手
段Ｃの制御の下におこなう。

かかる制御手段はロボット技術において周知であり、従
って詳述しない。

微生物的検査に用いる希釈液を調製する場合には、希釈
容器集合体に予め収容される希釈用液は、無菌生理食塩
水、無菌緩衝希釈用水、無菌希釈用蒸留水、無菌希釈用
培地であって良い。また培地は液体培地であっても、固
体培地であっても良い。

固体培地の場合には予めオートクレーブなどで溶融させ
た後、クリーン室に配置するのが良い。

方、被希釈液は、検査対象である微生物を含む液体、検
査対象である種々の物質を含む溶液であって良い。固体
培地が調製されるときは、クリーン室５０内の温度を、
固体培地のゲル化温度を越える温度とする必要があり、
また被希釈液または第３の液体が微生物を含む検体であ
る場合には、微生物の生存可能な温度範囲に維持するこ
とが必要である。かかる温度範囲は、微生物に応じて固
体培地素材を適切に選択することにより実現可能である
ことは、画業技術の熟達者には明らかであろう。かくて
得られた希釈液が、微生物を含む培地（混釈培地）であ
るときは、希釈容器集合体ｌの容器部分をそのまま培養
器として利用可能である。

勿論、他の培養容器に分注して培養に付することも可能
である。まＩ；得られた希釈液が、被希釈液の希釈され
た液を含む培地であるときは、その希釈容器集合体を培
養器として利用して、直ちに微生物を接種し、培養する
ことができ、あるいは他の培養容器に分注して、微生物
を接種したのち培養されることができる。更に、得られ
た希釈液が物質の希釈液である場合には、それらの希釈
液は培地成分と混合された後微生物を接種して、培養に
付される。

培養容器への分注も、他の培地分注装置を用いて行うこ
とができる。更に、調製された培地入り培養容器に微生
物を接種する作業は、本件出願にによる別件出願特願昭
６３−２２５８００号（特開平２−７２８９８号）に開
示した接種装置によって行うことができる。さらに第２
の無菌室または無菌恒温室に培地を分注され、微生物を
接種または混釈されＩ；培地入り培養器を搬送して所定
時間に亙り培養を行うことも可能である。かかる接種装
置を無菌室５０内に組み込み、あるいは第２の無菌室、
無菌恒温室を隣接して配置し、それらの間に搬送手段を
設ければ良く、関連装置及び関連容器の相対移動は、上
述の移動手段またはその均等手段によって達成され得る
ことは明らかである。

しかしながら、本発明は、上述の作業に引き続き、本発
明による特別な希釈液（培養）プレート及び筒型希釈（
培Ｉり容器を用いて、培地を分注し、培養する方法及び
装置にも関している。

この方法並びにその装置を第１５図、第１６図を参照し
て説明する。無菌室５０内には、第１２゜１３図に示さ
れた全ての手段が含まれているが、図面を簡便にするた
めそれらの大部分は省略されて示されている。

培地を収容した培養器は、従来は三角フラスコ吸口フラ
スコ、シャーレまたはベトリ皿等が用いられて来た。本
発明の方法及び装置においては、勿論かかる培養器のセ
ットを供給して希釈液を分注することが可能である。こ
の際、希釈容器集合体と同様に複数の培養容器が一体化
された培養容器集合体を用いることは有利である。

本発明方法及び装置の特別な実施例においては、特殊な
培養器を用いて、上述の方法及び装置を簡便化し、効率
的にする。

簡便化方法の第１の実施態様においては、第６〜８図に
示したような、複数の希釈液滴下領域のセットをもった
希釈液プレートの使用に特徴がある。かかる希釈液プレ
ートを用いることにより、同一検査目的に関して使用さ
れる培地容積を節減し、従ってまた、培養容器自体を小
型化し、その素材を節減し、更にそれを取り扱う装置を
小型化し、従ってまたその素材を節減し、それによって
培養容器を使い捨て可能とし、その上更に、コロニー形
成を平面化させ、それによって培養時間を短縮させ、そ
れに要するエネルギを節減し、また観察をも容易にさせ
、あるいは観察の機械化をも可能にさせる。

簡便化方法の第２の実施態様においては、第１１図に例
示したような筒型の希釈液容器２０の使用に特徴がある
。かかる筒型希釈液容器を用いることにより、第１の簡
便化方法及び装置と同様な利点がある。

詳述すれば、上記第１の簡便化方法及び装置においては
、第１５図に示すように、希釈液プレート１０の複数個
をストックするストツク手段１１Ｏ１希釈容器集合体供
給手段７０と同様な機構によって供給され、上述の計量
分注手段８０を用いて、プレートＩＯの滴下領域１０ａ
−１０ｄに所定量の希釈液（培地）を滴下する。培地と
して固体培地を用いる場合には以上の作業は、固体培地
の溶融温度に維持された無菌室５０内において行う。所
定の滴下領域に希釈液（培地）を滴下されたプレート１
０は、必要に応じ、上述の塗抹手段によって塗床を行っ
た後上述の移動手段７２と同様または均等な移送手段１
２０によって第２の無菌室１３０に移送される。第２の
無菌室１３０は、固体培地の溶融温度以下の温度で且つ
所望の培養温度に維持される。かくてプレート１０が第
２の無菌室１３０に移送されたとき、プレート１０上の
固体培地は、固化し、所定時間に亙って培養される。必
要ならば、第２の無菌室１３０に移送される際に、培地
を短時間に冷却固化させるため、冷却室を通過させるか
、あるいは冷風にさらすようにしても良い。第２の無菌
室における諸工程も制御手段Ｃの予めプログラムされた
制御の下に行うことができる。

第１１図に示した筒型の希釈液容器２０を用いる場合に
は、第１６図に示すように、上述の計量分注手段８０の
陰陽圧発生手段８１に筒型希釈液容器２０の円筒状開口
２０ｂをピペットチップ８１ａの代わりに装着し、培地
を吸引すれば良い。

筒型希釈液容器の供給、装着はピペットチップ８１ａの
のそれと同様か均等な手段が用いられ得ることは、明ら
かである。従って、容器９１に対応する容器を１４１と
して図示し、該容器１４’ｌを水平面上で縦横に移動さ
せる手段は図示せず、またそれらの動作については説明
を省略する。希釈液（培地）を吸引した希釈液容器２０
は上記方法と同様に第２の無菌室１３０に移送され、所
定時間に亙り培養する。

更に培養された結果の観察９判定もコロニー数の計数、
最小阻止円測定等は光学装置により容易に自動化可能で
あり、また種々の微生物のコロニーに関する特徴、例え
ばコロニーまたはその周辺部の形状、光反射率、吸光波
長１反射光波長等の標準データを蓄積して光学装置から
のデータとを自動的に対比させることにより自動化が可
能となる可能性もある。この際、培地表面に判定用の物
質を添加して、判定を容易化することも可能性がある。

以上に本発明の若干の実施例につき詳述したが、本発明
は上述の実施例に限定されるものではなく当該技術の熟
達者には本発明の技術思想を逸脱する事なく様々な改変
、変形が可能であることは明らかであろう。

【図面の簡単な説明】

第１図ａは本発明の方法及び装置において用いられる希
釈容器集合体の平面図、 第１図すは上記希釈容器集合体の右側面図、第２図は、
希釈容器集合体の変形例の平面図、第３図は希釈容器集
合体の変形例の斜視図、８１！４図は希釈容器集合体の
変形例の斜視図、第５図は希釈容器集合体の変形例の平
面図、第６図は希釈液プレートの断面図、 第７図は希釈液プレートの変形例の断面図、第８図は希
釈液プレートの変形例の斜視図、第９図は第８図の希釈
液プレートの断面図、第１０図は第７図の希釈液プレー
トの変形例の断面図、 第１１図は本発明による筒型希釈液容器の斜視図、 ８１２図は本発明の基本方法を実施する装置の模式的配
置図、 第１３図は本発明の希釈容器集合体の模式的配置図、 第１４図は被希釈液容器と希釈容器集合体との相対配置
関係を示す配置図、 第１５図は本発明の他の実施例による希釈装置の模式的
配置図、 第１６図は本発明の更に他の変形例による希釈装置の模
式的配置図である。 符号の説明 ｌ：容器部分、１ａ−１ｆ：希釈容器、ｌｅ：膨出部分
、２：閉蓋手段、２ａ：両隅部分、２ｂ＝中央部分、２
ｃ：切り込み、３：連接板、３ａ：切り欠き部分、１０
ニブレート、１０ａ−１０ｄ：希釈液滴下領域、ｌｏｅ
　：分離領域、１０ｆ＝凸面、１１：カバー、２０：筒
型希釈液容器、２０ａ−２０ｂ：開口、２０ｃ：空洞部
、２０ｄ：境界線、５０：クリーン室、５１：空気循環
装置、５２：ガス供給手段、５３：サーモスタット、５
４：熱交換装置、Ｃ：制御手段、６０：被希釈液容器配
置位置、６１〜６４：被希釈液容器、７０：希釈容器集
合体配置位置、８０：計量分注手段、７Ｉニスドック手
段、７１ａ：ケース、７１ｂ：テーブル、７１ｃ：開口
、７１ｄ：プッ’ｉ　ユバ−１７１ｅニスリツト、７２
：移送手段、７２ａニスリツト、７２ｂ：底面、７２ｃ
：側面案内手段、７２ｄ：プッシャ手段、ＤＳ＝希釈ス
テンヨン、８０：計量分注手段、８Ｉ：陰陽圧発生手段
、８１ａ：ピペットチップ、８２：移動手段、８２ａ：
サイドレール、８２ｂ＝架橋手段、８２Ｃ：可動部材、
８２ｄニジリンダ、９０：ピペットチップ交換手段、９
１：ピペットチップ容器、９２：廃棄容器、１０１：第
３液容器、１０２：チューブ、１０３：ノズル、１０４
：分注ポンプ、Ｊ」０ニスドック手段、］２０：移送手
段、１３０：第２のクリーン室、１４１：容器、図面の
浄書（内容に変更なし） 第１図ｑ 柩２図 兜１図す

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ［１］一つのクリーン室内において、 （ａ）被希釈液を収容した少なくとも一つの被希釈液容
   器を所定の位置に配置すること、（ｂ）希釈用液を収容
   し、閉蓋手段により密封された希釈容器の複数個が所定
   の配列で一体成形された希釈液容器集合体の少なくとも
   １個を所定の位置に配置すること、 （ｃ）上記希釈容器集合体の閉蓋手段を少なくとも部分
   的に開封すること、 （ｄ）ピペットチップを着脱可能に装着し得る少なくと
   も一つの陰陽圧発生手段と、上記陰陽圧発生手段に装着
   されたピペットチップを交換する手段と、上記少なくと
   も一つの陰陽圧発生手段を上記ピペットチップ交換手段
   と、上記被希釈液容器と上記希釈容器集合体とに関して
   相対的に移動させる移動手段と、を有する計量分注手段
   を設け、上記陰陽圧発生手段に装着されたピペットチッ
   プの各々と上記被希釈液容器の各々とを整列させて、被
   希釈液の所定量を上記ピペットチップに吸引すること、 （ｅ）上記計量分注装着に装着されたピペットチップの
   各々と上記希釈容器集合体とを相対的に移動させて、上
   記ピペットチップの各々と上記希釈容器集合体における
   対応する数の希釈容器の各々とを整列させ、上記ピペッ
   トチップの各々に吸引された被希釈液を上記整列された
   希釈容器内にそれぞれ排出し、それぞれ均一に混合して
   少なくとも一つの希釈液を調製すること、 （ｆ）上記工程（ｄ）、（ｅ）を必要に応じて所定回数
   反復すること、及び （ｇ）下記の２工程を必要に応じて所定回数（０回を含
   む）反復して行うこと、 （ｉ）前工程において調製された希釈液の 各々の所定量を上記計量分注装置に装 着された対応する数のピペットチップ にそれぞれ吸引すること、 （ｉｉ）上記計量分注装置に装着されたピペットチップ
   の各々と上記希釈容器集合体 とを相対的に移動させて上記希釈容器 集合体における対応する数の他の希釈 容器と整列させ、吸引された希釈液の 各々を整列された上記希釈容器内に排 出し、均一に混合すること、 （ｈ）上記計量分注装置に装着された少なくとも一つの
   ピペットチップをピペットチップ交換装置によって所定
   のタイミングで交換すること、（ｉ）少なくとも上記工
   程（ｄ）〜（ｈ）を制御手段の予めプログラムされた制
   御の下に行って複数の異なった希釈液のセットを調製す
   ること、を特徴とする複数の異なった希釈液のセットを
   調製する方法。 ［２］請求項第１項記載の方法において、更に下記工程
   を付加したことを特徴とする複数の異なった希釈液をセ
   ットで調製する方法、 （ａ）上記クリーン室内に第３の液体を収容した容器と
   、上記容器から第３液の所定量をくみ出すポンプ手段と
   、くみ出された第３液を排出するノズルとを有する第３
   液供給手段の少なくとも一つと、上記少なくとも一つの
   ノズルと上記希釈容器集合体とを相対的に移動させて、
   対応する数の希釈容器と整列させる相対移動手段とを更
   に設け、上記少なくとも一つのノズルと対応する数の希
   釈容器とが整列されたとき、所定量の第３液を夫々の希
   釈容器に分注すること、 （ｂ）上記少なくとも一つの第３液が固体培地成分であ
   る場合には、上記クリーン室内の温度を該固形培地成分
   のゲル化温度を越える温度に維持し、上記クリーン室内
   において微生物が取り扱われる場合には更に上記クリー
   ン室内を微生物が生存可能な温度に維持すること、 （ｃ）上記工程（ａ）、（ｂ）を上記クリーン室内にお
   いて上記制御手段の予めプログラムされた制御の下に行
   うこと。 ［３］請求項第１項または第２項記載の方法において、
   更に下記の工程を付加したことを特徴とする複数の異な
   った希釈液のセットを滴下された希釈液プレートを調製
   する方法、 （ａ）プレート表面に所定数の互いに分離した希釈液滴
   下領域を所定の配列で配置した希釈液滴下領域のセット
   とそれらを囲繞する分離領域とを有する少なくとも一つ
   の希釈液プレートを所定の位置に配置すること、 （ｂ）上記計量分注手段における少なくとも一つのピペ
   ットチップと上記希釈容器集合体における対応する数の
   希釈容器とを相対移動させて整列させ、調製された希釈
   液の所定量を吸引させること、 （ｃ）上記計量分注手段における上記少なくとも一つの
   ピペットチップと上記希釈液プレートにおける対応する
   数の希釈液滴下領域とを相対移動させて整列させ、上記
   ピペット内に吸引された希釈液を夫々滴下させること、 （ｄ）必要に応じて上記工程（ｂ）及び（ｃ）を所定回
   数反復すること、 （ｅ）上記工程（ｂ）〜（ｄ）を上記クリーン室内にお
   いて上記制御手段の予めプログラムされた制御の下に行
   うこと。 ［４］請求項第１項または第２項記載の方法において、
   更に下記の工程を付加したことを特徴とする複数の異な
   った希釈液入り筒型希釈液容器のセットを調製する方法
   、 （ａ）一端に吸引口を他端に陰陽圧発生手段に装着する
   装着部を、中間部に空洞部を有し、上記空洞部の内容積
   を定めるＸ、Ｙ、Ｚ軸直交座標の少なくとも一つの軸方
   向の寸法が可及的に小さく形成された筒型希釈液容器の
   セットを所定の位置に配置すること、 （ｂ）上記計量分注手段における少なくとも一つの陰陽
   圧発生手段と上記筒型の希釈液容器のセットとを相対移
   動させて、少なくとも一つの筒型希釈液容器を上記陰陽
   圧発生手段に装着すること、 （ｃ）上記陰陽圧発生手段に装着された少なくとも一つ
   の筒型希釈液容器と上記希釈容器集合体における対応す
   る数の希釈容器とを相対移動させて整列させ、調製され
   た希釈液の所定量を吸引させること、 （ｄ）上記希釈液を吸引した筒型希釈液容器を上記吸引
   手段から脱着すること、 （ｅ）上記工程（ｂ）〜（ｄ）を上記制御手段の予めプ
   ログラムされた制御の下に行うこと。 ［５］下記を特徴とする複数の異なった希釈液のセット
   を調製する装置、 一つのクリーン室と、一つの制御手段とを有し、上記ク
   リーン室は、 （ａ）被希釈液を収容した少なくとも一つの被希釈液容
   器を配置する被希釈容器配置位置と、（ｂ）希釈用液を
   収容し、閉蓋手段により密封された希釈容器の複数個が
   所定の配列で一体成形された希釈液容器集合体の少なく
   とも１個を所定の位置に配置する希釈容器集合体配置位
   置と、（ｃ）ピペットチップを着脱可能に装着し得る少
   なくとも一つの陰陽圧発生手段と、上記陰陽圧発生手段
   に装着されたピペットチップを交換する手段と、上記少
   なくとも一つの陰陽圧発生手段を上記ピペットチップ交
   換手段と、上記被希釈液容器と上記希釈容器集合体とに
   関して相対的に移動させる移動手段とを有する計量分注
   手段と、を内蔵しており、 上記制御手段は、上記クリーン室内の諸手段の動作を制
   御するプログラム可能な制御手段であること。 ［６］請求項第５項記載の装置において、 上記希釈容器集合体の閉蓋手段の少なくとも一部を開封
   する手段を更に有すること、を特徴とする複数の異なっ
   た希釈液のセットを調製する装置。 ［７］請求項第５項または第６項記載の装置において、
   更に下記を特徴とする複数の異なった希釈液等のセット
   を調製する装置、 （ａ）第３液を収容した第３液容器の少なくとも１個を
   所定位置に配置する第３液配置位置を更に有し、 （ｂ）上記計量分注手段における移動手段は、その陰陽
   圧発生手段と、第３液配置位置に配置された第３液容器
   とを相対的に移動させること。 ［８］請求項第５項〜第７項記載の装置において、更に
   下記を特徴とする複数の異なった希釈液のセットを調製
   する装置、 （ａ）第３の液体を収容した容器の少なくとも１個を配
   置する第３液配置位置と、 （ｂ）上記第３液容器から所定量の第３液をくみ出すポ
   ンプ手段と、くみ出された第３液を排出するノズルとを
   有する第３液供給手段の少なくとも一つと、 （ｃ）上記少なくとも一つのノズルと上記希釈容器集合
   体とを相対的に移動させる第２の移動手段と、 を更に有すること。 ［９］請求項第５項〜第８項のうち何れか１項記載の装
   置において、更に下記を特徴とする複数の異なった希釈
   液のセットを調製する装置、（ａ）プレート表面に所定
   数の互いに分離した希釈液滴下領域を所定の配列で配置
   した滴下領域のセットとそれらを囲繞する分離領域とを
   有する少なくとも一つの希釈液プレートを所定の位置に
   配置する希釈液プレート配置位置をさらに有し、（ｂ）
   上記計量分注手段における移動手段は、その陰陽圧発生
   手段に装着された少なくとも一つのピペットチップと、
   希釈液プレート配置位置に配置された対応する数の希釈
   液プレートとを相対的に移動させる第２の移動手段を有
   すること。 ［１０］請求項第５項〜第８項のうち何れか１項記載の
   装置において、更に下記を特徴とする複数の異なった希
   釈液のセットを調製する装置、（ａ）一端に吸引口を、
   他端に陰陽圧発生手段に装着する装着部を、中間部に空
   洞部を有し、上記空洞部の内容積を定めるＸ、Ｙ、Ｚ軸
   直交座標の少なくとも一つの軸方向の寸法が可及的に小
   さく形成された筒型希釈液容器のセットを所定の配列で
   配置する筒型希釈液容器配置位置と、（ｂ）上記計量分
   注手段における移動手段は、その陰陽圧発生手段に装着
   された少なくとも一つのピペットと、上記筒型希釈液容
   器配置位置に配置された対応する数の筒型希釈液容器と
   を相対的に移動させて、それらを交換する手段と、を更
   に有すること。 ［１１］プレート表面に、所定数の互いに分離した希釈
   液滴下領域と、それらを囲繞する分離領域とをを形成し
   、上記各滴下領域は滴下された希釈液を可及的広い面積
   に展開させる底面積と深さ（浅さ）とを有すること、を
   特徴とする希釈液プレート。 ［１２］請求項第１１項記載の希釈液プレートにおいて
   、上記滴下領域が、広い面積と浅い深さとを有する凹部
   であること、を特徴とする希釈液プレート。 ［１３］請求項第１１または１２項記載の希釈液プレー
   トにおいて、上記滴下領域の表面が滴下される希釈液に
   たいして親和性を与えられており、上記分離領域の表面
   が滴下される希釈液にたいして非親和性を与えられてい
   ること、を特徴とする培養プレート。 ［１４］請求項第１１項〜第１３項のうち何れか１項記
   載の希釈液プレートにおいて、上記プレートの背面に上
   記滴下領域に対応した配置でレンズ状の凸面が形成され
   ていること、を特徴とする希釈液プレート。 ［１５］一端に吸引口を他端に陰陽圧発生手段に装着す
   る装着部を、中間部に空洞部を有し、上記空洞部の内容
   積を定めるＸ、Ｙ、Ｚ軸直交座標の少なくとも一つの軸
   方向の寸法が可及的に小さく形成されており、上記空洞
   部に希釈液が吸引充填されたとき、希釈液を薄く展開さ
   せること、を特徴とする希釈液容器。 ［１６］請求項第１５項記載の希釈液容器において、上
   記空洞部内の希釈液の所定量を表示する境界表示りが付
   されていること、を特徴とする希釈液容器。