JPH0349676A - Ｍｉｃ及び生菌数の測定自動化装置および自動測定方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、ＭＩＣ（最小発育阻止濃度）及び生菌数測定
自動化装置及び自動測定方法に関し、詳しくは、抗菌剤
からなる検体の希釈液を寒天培地と混合して寒天平板を
作製し、該寒天平板に彼検菌を接種して培養判定するＭ
ＩＣ測定系および、寒天培地に細菌浮遊液からなる検体
の希釈液を展延接種あるいは混択して培養判定する生菌
数測定系の自動化を図るものである。

従来の技術 上記したＭＩＣ測定は、多数の病原細菌に対ずる各種の
抗菌剤の抗菌活性を同一条件下で比較するために確立さ
れた測定系で、抗菌剤に関する基礎、臨床の領域で汎用
されていると共に、スクリニングおよび薬効評価にも使
用されている。

該ＭＩＣ測定系における作業工程は、検体（抗菌剤）の
秤量取出一ピベッティングによる検体の希釈一希釈検体
液の寒天培地への分注一混合撹拌一冷却による検体含有
寒天平板の作製一該寒天平板への被検菌肢接種一培養一
判定からなる。

一方、上記生菌数測定系の作業工程は、ＭＩＣ測定系と
ほぼ同様な工程からなり、寒天平板の作製一該寒天平板
への検体（細菌浮遊肢）の希釈液の接種あるいは混択一
培養一判定からなる。

発明が解決しようとする課題 上記したＭＩＣｉ！ｌ１定系の一連の作業工程は、従来
、全工程とも作業員の手作業で行われており、そのため
、測定作業が非能率となると共に、測定データの客観性
に問題があった。また、生菌数測定作業ｃ）ＭＩＣｉｌ
ｌｌ１定作業とほぼ同様で、コロニー計測以外は手作業
で行なわれ、よって同様に、作業能率等に問題があった
。

従って、本発明は、従来、手作業で行なわれていたＭＩ
Ｃ測定および生菌数測定を行う場合に、全作業工程を連
続的に自動化して行うことか出来るようにすると共に、
いずれの測定を行う場合にも必要工程を選択的に組み合
わせることにより両方のホ１１定に利用できる測定自動
化装置及び自動測定方法を提供することを目的とするも
のである。

課題を解決するための手段 上記目的を達成するため、本発明は、抗菌剤または細菌
浮遊演からなる検体の希釈装置と、シャーレへの希釈検
体夜の分注装置と、シャーレへの寒天培地の分注装置と
、検体の希釈液と寒天培地との混合撹拌装置と、寒天平
板とするために寒天培地を冷却する装置と、寒天平板へ
の接種装置、接種後の寒天培地の培養装置、培養後の自
動判定装置を連続して設けると共に、上記シャーレに対
して作用する上記各装置へシャーレを順次搬送する搬送
装置を設け、上記各装置を自動制御して、検体の希釈分
注、該希釈検体液のシャーレへの分注、寒天培地のシャ
ーレへの分注、該希釈検体と寒天培地との昼合撹拌、冷
却による寒天平板の作製、寒天平板への被検菌液または
検体の希釈液の接種、接種後の培養、培養後の自動判定
の工程を自動的に行い得るようにし、かつ、ＭＩＣ測定
系と生菌数測定系に応じて上記工程を選択して組み合わ
せて連続的に行い得る構成としているＭＩＣおよび生菌
散の測定自動化装置を提供するものである。

詳しくは、上記した検体希釈装置は、検体試験管より検
体を吸液して希釈試験管へ分注すると共に検体の希釈液
（以下希釈検体液ということもある）を吸液・分注して
所要倍数希釈作用するマイクロ・ピペットと、該マイク
ロ・ピペットをＸ、Ｙ，Ｚ方向へ移動するロボットと、
上記マイクロ・ピペットに使用毎にチップを取り替えて
装着すると共に使用済みのチップを取り外す機構と、検
体を注入している試験管を並設したラックを移動して順
次検体を吸液位置へ移動させる機構と、希釈用試験管を
並設したラックを移動して順次検体分注位置へ移動させ
る機構とを備えていることを特徴としている。

上記希釈検体液をシャーレヘ分注する装置は、希釈検体
岐を試験管より吸液してシャーレヘ分注するマイクロ・
ピペットと、該マイクロ・ピペットをＸ，ＹＳＺ方向へ
移動するロボットと、上記マイクロ・ピペットに使用毎
にチップを取り替えて装着すると共に使用済みのチップ
を取り外す機構を備えていることを特徴としている。

上記シャーレへの寒天培地分注装置は、シャーレの上方
に位置した培地分注ノズルを備えると共に、該ノズルに
接続した管の上部に上下作動する押え板を備え、該押え
板を管で抑圧することにより所定量の培地をシャーレへ
供給する構成としている。

上記シャーレヘ分注した希釈検体演と培地との混合撹拌
装置は、コンベヤの下部に配置した回転駆動機構で回転
板を回転させ、該回転板に連動してシャーレを回転させ
る構成としている。

上記冷却装置はコンベヤ上に冷却フードをかぶせ、該冷
却フード内に冷風を導入し、該冷却フード内を搬送する
寒天培地を固化乾燥して寒天平板を作製する構成として
いる。

上記寒天平板への接種装置として、被検菌液が分注され
ているミクロプランタと、該ミクロブランクに設けた被
検菌液分注穴と同数の接種欅を円形支持板に垂設した接
種具と、該接種具を移動してミクロブランクより被検菌
液を採取して寒天平板の表面に滴下する移動する手段を
備えたＭＩＣ測定用の接種装置を設けている。

さらに、上記接種装置として、細菌浮遊液からなる検体
の希釈液を寒天平板の表面に滴下するマイクロ・ピペッ
ト、滴下した希釈検体液を寒天平板の表面に展延するヘ
ラ板とを備えたスプレッド法による生菌数測定用に用い
る接種装置を設けている。

上記培養装置として、接種された寒天平板を備えている
シャーレを搬入して、ラック内に積層し、所定温度で、
所定時間培養するインキュベター・プールが用いられる
。

上記培養後の測定装置は、寒天表面を撮影するＣＣＤカ
メラ、該カメラからの映像を解析する画像処理コンピュ
ータ、該コンピュータの判定結果を打ち出すプリンタと
を備えている。

さらに、本発明は、検体を注入している試験管から検体
を、ロボットによりＸ、Ｙ、Ｚ方向に自動的に移動され
るマイクロピペットにより吸液して、希釈液が注入され
ている試験管に吐出し、１回目の希釈を行い、 ついで、上記マイクロ・ピペットの作用で上記した希釈
検体液を更に希釈液で所要倍数まで希釈し、 所要倍数まで希釈した希釈検体族を、ロボットによりｘ
，ｙ．ｚ方向に自動的に移動されるマイクロ・ピペット
で、コンベヤにより順次搬送されてくるシャーレに分注
し、 上記希釈検体液が分注されているシャーレに、コンベヤ
の移動に応じて、コンベヤ上に設置している培地分注装
置より、所要量の寒天培地を分注し、 上記希釈検体液と寒天培地が分注された後に、コンベヤ
の下部に設置している回転円板によりシャーレを回転し
て希釈検体液と寒天培地とを混合撹拌し、 上記混合撹拌後に、コンベヤ上に設置している冷却フー
ド内を挿通させて、伶却により固化して寒天平板を作製
し、 上記作製された寒天平板の表面に、自動的に作動される
接種棒により所定間隔をあけて被検菌を接種し、 接種後に、シャーレに蓋を閉め、 ついで、所定時間、所定温度で保持して培養するインキ
ュベター・プール内へ搬入し、培養後に、蓋空けを行っ
た後に、カメラで培養状態を撮影し、その映像を画像処
理用コンピュータに出力して解析して判定し、 上記一連の工程をコンピュータ制御により自動的に連続
的に行うことを特徴とするＭＩＣの自動測定方法を提供
するものである。

さらにまた、本発明は、コンベヤ上に載置したシャーレ
に対して、所定位置で、コンベヤ上に設置している培地
分注装置より、所要量の寒天培地を分注し、 その後、コンベヤ上に設置している冷却フード内を挿遍
させて、冷却により固化して寒天平板を作製し、 上記作製された寒天平板の表面に、自動的に作動される
マイクロ・ピペットで細菌浮遊液からなる検体の希釈液
を吸液、滴下した後、寒天平板の表面に均一に展延し、 上記接種後に、シャーレに蓋を閉め、 ついで、所定時間、所定温度で保持して培養するインキ
ュベター・プール内へ搬入し、培養後に、蓋空けを行っ
た後に、カメラで培毘状態を撮影し、その映像を画像処
理用コンピュータに出力して解析して判定し、 上記一連の工程をコンピュータ制御により自動的に連続
的に行うことを特徴とするスプレッド法による生菌数の
自動測定方峡を提供するものである。

さらにまた、本発明は、コンベヤ上に載置したシャーレ
に対して、所定位置で、希釈検体液を分注し、 ついで、コンベヤ上に設置している培地分注装置より、
所要量の寒天培地を分注し、 その後、コンベヤの下部に設置している回転円板により
シャーレを回転して希釈検体液と寒天培地とを混合撹拌
し、 その後、コンベヤ上に設置している冷却フード内を挿通
させて、冷却により固化して寒天平板を作製し、 ついで、シャーレに蓋を閉めた後、 所定時間、所定温度で保持して培養するインキュベター
・プール内へ搬入し、 培養後に、蓋空けを行った後に、カメラで培養状態を撮
影し、その映像を画像処理用コンピュータに出力して解
析して判定し、 上記一連の工程をコンピュータ制御により自動的に連続
的に行うことを特徴とする混釈法による生菌数の自動測
定方法を提供するものである。

作用 上記したように、本発明に係わる測定自動化装置によれ
ば、ＭＩＣ測定作業において必要な全ての各作業工程を
自動化した装置を並設し、かつ、これらの装置をコンピ
ュータで自動制御しているため、全工程を連続して自動
的に行うことが出来る。また、上記装置により混択法お
よびスプレッド法による生菌数の測定作業も自動的に行
うことが出来る。

ｇ奥牲 以下、本発明を図面に示す実施例により詳細に説明する
。

本発明に係わるＭＩＣ及び生菌数の自動測定装置は、一
連の作業工程を順次行う各装置をブロック化して並設し
ており、ＭＩＣｉｊｌｌＪ定工程で用いる機構の一郎を
利用して生菌数の測定を行うようにしている。

第ｌ図および第２図に示すように、本自動測定装置は、
ｌつの基台ｉ上に各装置を効率良く配置しており、図中
、右端部に培畏装置のインキュベター・プール２、対向
する左端部に寒天平板作製用の空シャーレ・ラック・プ
ール３を設けている。

上記両側のブール２と３の間の基台！上の後部側に、検
体の希釈装置および、希釈検体液のシャーレ分注装置を
配置している。即ち、右方向より左側にかけて空検体試
験管ラック収納郎４、検体試験管ラック収納郎５、検体
用チップ収納部兼チップ移動用ロボット設置部６、希釈
試験管ラック収納郎７、分注チップ収納郎８、空希釈ラ
ック収納部兼分注チップ移動用ロボット設置部９を順次
設置している。これら各部４〜９の前部側にはシャーレ
搬送装置のコンベヤｌ１を配置し、シャーレ・ラック・
プール３から取り出された前後２列の空シャーレＩＯを
インキュベター・プール２側へ図中矢印方向で搬送する
ようにしている。

上記した検体希釈装置および希釈検体演のシャーレ分注
装置の各部について、以下に説明すると、まず、検体試
験管ラック収納部５は検体（抗菌剤）が注入されている
複数の試験管ｌ２を横方向に並設する検体ラック１３を
設け、該検体ラックｌ３を複数列前後方向に設置してい
る。これら検体ラックｌ３をＸ，Ｙ方向に移動して、最
前列右端の検体吸液用ビペツティング位置Ｐ，に検体試
験管ｌ２を順次搬送するようにしている。該位置Ｐ１で
検体が吸液されて空となった試験管ｌ２は順次右刺の空
検体ラック収納部４に間欠的に搬送される。

上記ラックｌ３の移動は図中矢印方向に沿って行なわれ
、これらの移動はラックｌ３の下側に設けている駆動機
構（図示せず）によって行っている。

希釈試験管ラック収納部７は、上記検体試験管ラック収
納郎５と同様に、複数の希釈用試験管ｌ４を検方向に並
設した希釈用ラック１５を前後方向に複数列配置してお
り、該希釈用ラックｌ５をＸ、Ｙ方向に移動し、最前列
の左端の検体吐出用ビベッティング位置Ｐ，に希択試験
管ｌ４を順次搬送するようにしている。該位置Ｐ，での
希釈作用が終わった希釈用試験管ｌ４は空希釈ラック収
納部９へと左方向に移動される。該空希釈ラック収納部
９の最前列右端の分注位置Ｐ，で希釈検体液をシャーレ
ｌＯへ分注した後に、該空希釈ラック収納部９内で矢印
方向に移動されて収納される。この希釈試験管用のラッ
クＩ５の移動も、上記検体試験管用のラック１３と同様
に、下部の駆動機構（図示せず）によって行っている。

検体用チップ収納部兼チップ移動用ロボット設置郎６に
は、支持枠ｌ６に取り付けたエアーシリンダ１７等によ
りＸ，Ｙ，Ｚ方向へ移動される検体用マイクロ・ピペッ
トｌ８を設置している。また、該マイクロ・ピペットｌ
８の先端に自動的に着脱される検体用チップｌ９を縦・
横方向に並設している検体用チップテーブル２０を設け
ている。

該チップテーブル２０を下部駆動機構（図示せず）でＸ
１Ｙ方向に移動して、取り替えるチップ１９をマイクロ
・ピペットへの装着位置Ｐ４に順次搬送している。さら
に、前部側の位置Ｐ，には、マイクロ・ピペットｌ８か
ら使用済のチップｌ９を取り外すためのチップ取外用チ
ャック機構２１を設置している。上記のようにマイクロ
・ピペットｌ８をエアーシリンダ等のロボットで第１図
中に矢印で示すようにｘ１ｙ．ｚ方向に移動することに
より、検体を希釈する際、まず、位置Ｐ，でマイクロ・
ピペット１８に新しいチップｌ９を装着し、その後、吸
液位置Ｐ＋で検体試験管ｌ２内より所定量の検体を秤量
吸引し、ついで、希釈試験管ラック収納部７の位置Ｐ，
で希択試験管１４に検体を吐出する。希釈試験管ラック
収納郎７での必要回数の希釈混合作業を終了した後、位
置Ｐ，において取外用ヂャック機構２１で使用済みのチ
ップｌ９を取り外している。

上記希釈試験管ラック収納郎７に収納している希釈用試
験管ｌ４には、第３図に示すように、希釈液タンク２２
に充填している希釈液を、希釈肢分注ボンプ２３で管２
４を介して先端ノズル２５より分注している。該希釈液
分注位置Ｐ６は上記検体液吐出位置Ｐ，の右側に隣接し
た位置で、希釈液を分注した試験管ｌ４に検体液を注入
するようにしている。該希釈液が分注された試験管ｌ４
に検体液を注入するようにしている。該希釈液が分注さ
れた試験管ｌ４は、位置Ｐ，でマイクロ・ビベットｌ８
により検体が注入されて希釈検体液を調製し、さらに、
該位置Ｐ，で希釈検体液を吸液し、次の希釈液を充填し
ている試験管１４に希釈検体液を注入し、これを所要回
数繰り返すことにより、所要希釈倍数の希釈検体液を調
製している。

分注チップ収納部８には、上記検体チップ収納郎６と同
様に、多数の取替用分注チップ２６を着脱自在に装着し
ている分注チップテーブル２７を設置している。該チッ
プテーブル２７はＸＳＹ方向へ移動され、分注チップ装
着位置Ｐ，へ次に装着する分注チップ２６を順次位置さ
せるようにしている。

空希釈ラック収納部兼分注用チップ移動用ロボット設置
郎９には、上記検体用チップ移動用ロボット設置部６と
同様に、エアーシリンダ２８等によりなるロボットでＸ
，Ｙ，Ｚ方向へ移動される分注用マイクロ・ピペット３
０を設置している。また、コンベヤ１１を隔てｋ前方位
置Ｐ０に使用済みの分注チップ２６をマイクロ・ピペッ
ト３０より取り外すための取外用チャック３ｌを設置し
ている。上記ロボットでマイクロ・ピペット３０をＸ１
Ｙ，Ｚ方向へ移動することにより、所定の希釈倍率とな
った希釈検体液を、寒天平板作製のために空シャーレ！
Ｏに分注する際、位置Ｐ７でマイクロ・ピペット３０に
チップ２６を装着し、その後、位置Ｐ３で希釈試験管１
５より所定量の希釈検体液を吸引し、コンベヤ１．１で
搬送されてくる前後２列シャーレＩＯＡ，ＩＯＨに位置
Ｐ，で希釈検体液を分注し、その後、位置Ｐ１。で使用
済みのチップ２６を取り外すようにしている。

シャーレ・ラック・プール３には第４図に示すようにシ
ャーレｌＯを上下積層状態で収納したラック３２を設け
、該ラック３２を第１図に示すように２列づつ並設して
矢印方向へ搬送しており、最前列右端の取出位置でｌ枚
づつ取り出し、コンベヤ１１上へ前後２列で搬出してい
る。

上記シャーレを搬送するコンベヤ１ｌに沿って、上流側
より下流のインキュベターブール２に向けて、上記希釈
検体液の分注装置、寒天培地分注装置、希釈検体液と寒
天培地の混合撹拌装置、冷却装置、接種装置を順次並設
している。

即ち、シャーレＩＯＡ，ＩＯＢが移し替えられるコンベ
ヤ１ｌの上流端に近接した位置に、上記のマイクロ・ピ
ペット３０により希釈検体液をシャーレＩＯＡＳ　１０
３３に分注する分注位置Ｐ．が設けられている。この分
注位置Ｐ．に隣接した下流は置Ｐ１。には培地分注ノズ
ル３３Ａ，３３Ｂを設置し、シャーレＩＯＡ，ＩＯＢに
培地が分注されるようにしている。該培地分注ノズル３
３Ａ、３３Ｂは、培地溜槽（図示せず）に接続した循環
管３４Ａ，３４Ｂより分岐した分岐管３５Ａ，３５Ｂの
先端に取り付けている。上記分岐管３５Ａ、３５Ｂの夫
々の上方には、押え弁３６Ａ，３６Ｂを設置している。

これら押え弁３６Ａ，　３ｅＢを下降して分岐管３５Ａ
，３５Ｂを押圧することにより、溶融寒天からなる培地
を設定量だけ、各シャーレ１０Ａ，ＩＯＨに供給するよ
うにしている。上記した培地溜槽、循環管等からなる培
地分注装置４０は、第１図中に２点鎖線で示すように、
基台ｌの前方に可搬式で設置される。

上記培地分注位置Ｐｌｏに隣接した下流の位置Ｐ．には
、シャーレ内に注入した希釈検体液と寒天培地との混合
撹拌装置４１を設置している。該混合撹拌装置４ｌはコ
ンベヤ１ｌの下部に回転駆動機構４３を設置し、該回転
駆動機構４３により回転される回転板４４と連結した撹
拌板４２を設けている。該撹拌板４２は撹拌混合時に上
昇してシャーレｌＯの底面に当接し、回転駆動機構４３
により撹拌板４２を回転することによりシャーレ！０を
図中矢印方向へ回転し、シャーレ１０内の希釈検体液と
溶融寒天培地とを混合撹拌している。

上記混合撹拌位置Ｐ，ｌに隣接した下流位置Ｐｌｔより
検体試験管ラック収納部５の前部側の位置まで、コンベ
ヤｌＩ上に冷却フード４５を設置して冷却装置を設けて
いる。該冷却フード４５の上端には冷却導入管４８を接
続し、冷却フード４５内に無菌の冷却風を導入している
。よって、該冷却フード４５内を挿通する間に、上記混
合した希釈検体液と寒天培地とが固化し、寒天平板４６
が作製されるようにしている。

上記冷却フード４５より下流位置で、即ち、冷却フード
４５より出た寒天平板４６の表面が乾燥した位置Ｐ．に
、被検菌液を接種するための接種装置を設けている。該
接種装置としてはＭＩＣ測定用の接種装置４７Ａとスプ
レッド法による生菌数測定用の接種装置４７Ｂとがあり
、これら接種装置４７Ａ，４７Ｂはいずれも可搬式で実
施する測定に応じて、いずれかの接種装置を第！図に示
すように基台ｌの前方に配置している。ＭＩＣ測定用の
接種装置４７Ａは第３図に示すように、作製する寒天平
板と略同形の円形支持板５０の下面に多数本（本実施例
では２７本）の接種棒５ｌを所定間隔あけて垂設した接
種具５２を２個設け、これら接種具５２をエアーシリン
ダ５６を介して移，動台５３に取り付けている。また、
上記接種棒５ｌに対応した数の穴郎５４を対応位置に設
けたミクロプランタ５５を２個設けている。該ミクロブ
ランタ５５の穴部５４には、夫々、例えば、種類の相違
する被検菌液を充填している。これら穴郎５４に接種棒
５ｌをエアーシリンダ５６により下降して挿入し、被検
菌液を吸液した後、コンベヤｌｉ上に移動し、寒天平板
４６上に下降して、被検菌液を寒天平板４６の表面に接
種するようにしている。このように、１つの寒天平板４
６に対して種類の相違する被検菌液を接種し、かつ、接
種偉置をマークしておくことを容易としている。

一方、スプレッド法による生菌数測定用の接種装置４７
Ｂは、第４図中に一点鎖線で囲む部分に示したように、
検体（細菌浮遊液）の希釈岐接種用のマイクロ・ビベッ
ト６０を設け、該ピペット６０で寒天平板４６の表面に
希釈検体岐を滴下するようにしている。該希釈検体液の
滴下後、寒天平板４６と略同一直径のヘラ板６０を下降
し、寒天平［４６の表面に当接させている。該状態でシ
ャーレＩＯの外周部に配置した回転ローラ６２Ａ，６２
Ｂを回転駆動することによりシャーレ１０を矢印方向に
一回転している。該作動によって、言わば、ヘラ板６０
が寒天平板４６の表面全体に添って摺接移動することと
なり、寒天平板４６上に滴下された希釈検体液は寒天平
板の表面全体に略均一な厚さで展延塗布（所謂、スプレ
ッド）されるようにしている。

上記生菌数測定用に使用される希釈検体液は、第４図に
示すように、上記した検体の希釈工程と同一の工程で被
検菌を希釈している。よって、基台ｉの後部側に配設し
た検体の希釈装置を利用して希釈してもよく、あるいは
、別途に設けた精釈装置により行ってもよい。

上記寒天平板４６に被検菌を接種した後、シャーレＩＯ
のＭ６５を取り付けて締結する機構（第ｌ図中には図示
せず）を設けている。

コンベヤ１ｌの下流端は培養装置のインキュベター・プ
ール２に連続し、該インキュベター・ブール２内におい
て、蓋６５が取り付けられたシャーレｌＯは矢印方向に
搬送され、第４図に示すようにプール・ラック６６内に
上下方向に積層されて培養されるようにしている。該イ
ンキュベター・ブール２内は温風を循環させて３７℃等
の所定温度に維持している。該インキュベター・プール
２内で２０時間等の所定時間、培養した後に取り出し、
蓋６５を取り外すと共に、矢印方向に搬出するようにし
ている。該搬出経路に測定用のＣＣＤカメラ６６を配置
し、寒天平板の表面の培養状態を撮影するようにしてい
る。該ＣＯＤカメラ６６を第４図に示すように、計測装
置（画像処理コンピュータ）６８と接続して映像信号を
送り、それに基づいて計測し、計測した判定結果をプリ
ンター６９より打ち出すようにしている。このように、
培養後にカメラ、計測装置等からなる自動測定装置によ
り判定を行っている。

上記各装置の作動は、基台ｌとは別個に設けた操作卓７
５に設置していコンピュータ制御装置で全自動制御で行
っている。また、両側のインキュベター・ブール２と空
シャーレ・ラック・プール３を除く基台ｌの上面全体に
安全カバー７０を設置して、外部と遮断している。さら
に、インキュベター・プール２には断熱カバー７１を設
置している。

次に、上記測定自動化装置により、ＭＩＣ測定作用を行
う場合および混釈法あるいはスプレッド法による生菌数
測定作用を行う場合について説明する。

まず、第５図に示すように、スタート時に、ＭＩＣ測定
か生菌敗測定かを選択する。ついで、検体数を入力した
後、希釈段数を入力し、準備の確認を行う。

Ｍ［Ｃ測定の場合は、第６図に示す流れに従った作用が
なされ、抗菌剤よりなる検体Ａ，Ｂ・・・を秤量後、一
定濃度に溶解して段階希釈をおこなっている。該段階希
釈は、上記装置において、検体試験管収納郎５内の試験
管ｌ２の一定濃度に溶解している検体を、検体吸液位置
Ｐ．でマイクロ・ピペットｌ８に装着したチップｌ９に
より吸夜し、希釈試験管収納部７に設置している希釈試
験管ｌ４に対して希釈位置Ｐ，で分注し、第１回希釈を
行っている。該希釈位置Ｐ，において、希釈した希釈検
体液を再度吸液した後、、次の希釈液を充填した希釈試
験管１４に分注することにより、所定の希釈倍数になる
まで設定回数だけ繰り逼す。

上記希釈段階に於けるマイクロ・ピペットｌ８の作動は
、ロボット設置郎７のエアーシリンダ！７等の駆動ｆ機
構がコンピュータに入力したプログラムに従って自動作
動することにより行われる。該検体の希釈工程は第７図
のフローチャートにおいて右側部に記載されているステ
ップで進んでいる。

上記フローチャートに示す実施例では、ＭＩＣ測定の場
合、検体試験管ｌ２に５ｍＱの検体を注入しており、マ
イクロ・ピペットｌ８には５ｍｌ２用のチップｌ９を装
着し、１回の検体吸ｉ１ｆｉｌを２．５１ＩＩＱとして
いる。１回の希釈で２倍希釈を行い、最終的に１６段の
希釈を行っている。

上記所定倍数に希釈された希釈検体液は、希釈試験管ラ
ックｌ５が移動することにより希釈検体液分注位１ｐｓ
において、マイクロ・ピペット３０により希釈試験管ｌ
４より所定量吸液されシャーレＩＯＡ，ＩＯＨに分注さ
れる。該マイクロ・ピペット３０の作動は、上記マイク
ロ・ビベットｌ８と同様に、ロボット設置郎９のエアー
シリンダ２８等が自動制御されることにより、自動的に
行われる。

シャーレ１０（ＩＯＡ，ＩＯＢ）は第７図のフローチャ
ートで左側に記載したステップに従ってプール・ラック
３２より取り出され、コンベヤｌＩ上へ移し変えられ、
矢印方向へ搬送される。分注位置Ｐ，でシャーレＩＯＡ
．ｌＯＢに上記したように希釈検体液がマイクロ・ピペ
ット３０のチップ２６より所定量分注される。尚、本実
施例では、ＩｍＱの希釈検体液を各シャーレに分注して
いる。

上記希釈検体液が分注されたシャーレＩＯＡ、＋０１３
は培地分注位置Ｐｌｏで培地分注ノズル３３Ａ、３３Ｂ
により所定量の溶融した寒天培地か分注される。本実施
例では９−の培地を分注している。

ついで、コンベヤ２の移動に従って位置Ｐ，１で、混合
撹拌装置４１によりシャーレが回転されることにより、
内部に分注されている希釈検体液と寒天倍地とが混合撹
拌される。その後、コンベヤ１１の移動に従って、位置
Ｐ１，より冷却フード４５内に搬入され、所定時間冷却
フード内を搬送されて寒天培地及び希釈検体液が冷却さ
れる。該冷却により、固化・乾燥することにより、抗菌
剤含有の寒天平板４６が作製される。

上記冷却フード４５内から出た上記寒天平板４６に対し
て、位置Ｐｌ３で接種装置４７Ａにより被検菌液が接種
される。被検菌液は第４図および第６図に示すように、
被検菌ａ，　ｂ・・・が植菌された後、菌液接種皿（ミ
クロブランク５５）に分注され、所要倍数希釈されたも
のである。該ミクロプランター５５内の種類が相違した
被検菌液は多数の接種棒５１により夫々一度に吸液され
、上記乾燥した寒天平板４６の表面に所定間隔をあけて
接種される。

上記接種後、コンベヤＩＩは下流端に達し、シャーレＩ
ＯＡ，ＩＯＢはインキュベター・プール２内に搬入され
る。該インキュベター・プール２内において、蓋６５で
閉鎖された後に反転されて、プール・ラック６４内に積
層された状態で収納される。

インキュベター・ブール２内において所要温度で所要時
間（本実施例では３７゜Ｃで２０時間）培養される。上
記培養時間経過後、プール・ラック６４より取り出され
、蓋６５が取り除かれた状態で搬出される。該搬出経路
に設置したカメラ６６で寒天平板の表面が撮影される。

該カメラ６６のの映像データか計測装置６８に出力され
て、該装置で画像を解析することにより測定結果が出さ
れ、プリンタ６９で測定結果が打ち出される。

次に、第８図に示すスプレッド法による生菌敗の測定方
法について説明する。

該生菌敗の測定作業は上記ＭＩＣ測定作業と略同様な工
程からなり、該生菌数測定の場合は第７図のフローチャ
ートに記載する検体として細菌浮遊液が用いられる。従
って、上記ＭＩＣ測定装置の検体希釈装置を用いて希釈
する場合、細菌浮遊液からなる検体は検体試験管＋２に
一定量として充填され、該検体はマイクロ・ピペット１
８により希釈試験管ｌ４へ分注され、さらに所要回数の
希釈が繰り近されて設定倍数の希釈検体液が凋製される
。第７図のフローチャートでボす実施例においては、検
体試験管ｌ２内に２ｎ＋１２の検体が注入され、マイク
ロ・ピペット１８に０．５−のチップ１９が装着され、
該チップｌ９により検体試験管＋２から０　．　２　ｍ
Ｑの検体が吸液され、希釈試験管１４に分注されている
。希釈は１回でｌＯ倍に希釈され、該希釈は６段行われ
る。

尚、生菌数測定のための希釈工程は別の希釈装置で行い
、希釈検体液を注入している試験管および該試験管より
吸液して、後述するように、寒天平板の表面に滴下する
マイクロ・ピペット６０を備えた可搬式の装置を第ｌ図
に示す装置の接種位置まで移動する方法を用いることも
出来ろ。

一方、シャーレｌＯに対して、寒天培地が培地分注ノズ
ル３３Ａ，３３Ｂから分注され（本実施例では９　ｍ＆
）、ついで、冷却フード４５内を移動されて、寒天平板
４６が作製される。この寒天平板４６の表面に接種位置
Ｐｌ３で接種装置４７Ｂのマイクロ・ピペット６０で上
記希釈検体液が滴下される（本実施例では０　．　１　
ｍｌ２）。ついで、ヘラ板６ｌが寒天平板の表面に接触
するまで下降された後、シャーレ１０が回転され、希釈
検体液が寒天平板４６の表面全体に均一な厚さで展延さ
れる。

この状態で、インキュベター・プール２へ搬入される。

該インキュベター・ブール２内では上記ＭＩＣ測定の場
合と同様に所要時間、所要温度で（実施例では２０時間
、３７℃）培養され、培養後、カメラ６６で撮影され、
画像分析により判定結果が出される。

上記した生菌数測定方法はスプレッド方法による測定方
法であるが、混択法による生菌散測定では、上記Ｍ［Ｃ
測定方法と同様に、シャーレ１０内に先に細菌浮遊肢の
希釈検体液が分注され、ついで、寒天培地が分注され、
これが混合撹拌された後、冷却フード４５で被検閑含有
の寒天平板か作製される。該寒天平板はインキュベター
・プール２内で培養され、その結果が測定される。

上記したように、本発明に係わる測定自動化装置におい
ては、検体の希釈が任意の倍数で自動的に行われると共
に、第４図に示すように、シャーレに対する下記の一連
の作業工程、 シャーレ・ラック・プール３からのシャーレｌＯの取り
出し一該シャーレ１０に対する検体液の分注一シャーレ
への培地の分注一混合撹拌一冷却一接種一接種菌の展延
一シャーレの蓋閉めーインキュベター・ブール２への搬
入一反転収納培養一取り出し一計測判定 を適宜に選択して、自動的に連続して行うことが出来る
。

即ち、上記作用の説明で記載したように、第４図中に（
１）で示すシャーレへの検体液の分ｉｔ、（ＩＩ）で示
すシャーレへの培地分注、（ＩＩＩ）で示す検体液の分
注およびスプレッドによる展延、（ＩＶ）で示す接種棒
による接種の工程が、下記に示すように、測定系に応じ
て適宜に組み合わされて用いられろ。

ＭＩＣｉ１１１＋定・・・（Ｉ）（ＩＩ）（Ｊ／）スプ
レッド法による生菌数測定・・・（ＩＩＸＩ）混釈法に
よる生菌数測定・・・（１）（ＩＩ）よって、同一の測
定装置により、ＭＩＣ測定および生菌数測定を任意に選
択して行うことが出来発明の効果 以上の説明より明らかなように、本発明に係わる測定自
動化装置によれば、ＭＩＣ測定作業で行われる一連の作
業工程、即ち、検体の希釈、寒天平板の作製（シャーレ
への検体および寒天培地の分注、混合撹拌、冷却）、・
菌肢の希釈、菌肢の接種、培養判定が全て自動的に連続
して行うことが出来る。よって、全ての工程を手作業で
行っていた従来と比較して作業効率を飛躍的に向上させ
ることができる。まｔこ、自動的に行うために測定結果
の信頼性が大幅に向上する利点を有する。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明１こ係わる測定自動化装置の平面図、第
２図は第１図の正面図、第３図は第ｌ図に示す装置の斜
視図、第４図は作業工程を示す図面、第゜５図は作業開
始時のフローチャート、第６図はＭＩＣ測定作業の流れ
を示す図面、第７図はＭＩＣ測定および生菌数測定の工
程を示すフローチャート、第８図は生菌数測定作業の流
れを示す図面である。 ｌ・・基台、２・・インキュベター・プール。 ３・・シャーレ・ラック・プール、 ５・・検体試験管ラック収納部、 ６・・検体用チップ収納部兼チップ移動用ロボット設置
部、 ８・・希釈試験管ラック収納部、 ９・・希釈空ラック収納部兼分注チップ移動用ロボット
設置部、 １　０（Ｉ　ＯＡ，１　０Ｂ）・・シャーレ、１１・・
コンベヤ、 ｌ２・・検体試験管、　　ｌ４・・希釈試験管、ｌ８●
・マイクロ・ピペット、 １９・・検体用チップ、２２・・希釈液タンク、２５・
・希釈演分注ノズル、 ２６・・分注用チヅブ、 ３０・・マイクロ・ピペット、 ３３Ａ，３３Ｂ・・培地分注ノズル、 ３６Ａ，３．６Ｂ・・押え弁、 ４０・・培地分注装置、４ｌ・・混合撹拌装置、４５・
・冷却フード、　４６・・寒天平板、４　７（４　７Ａ
，４　７Ｂ）・・接種装置、５ｌ．．接種棒、５５・・
ミクロプランタ、６０・・マイクロ・ピペット、６ｌ・
．ヘラ板、６５・・蓋、　　　　　６６・・カメラ、６
８・・計測装置、　　６９・・プリンタ、７０・・安全
カバー

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、検体の希釈装置と、シャーレへの希釈検体液の分注
   装置と、シャーレへの寒天培地の分注装置と、希釈検体
   液と寒天培地との混合撹拌装置と、寒天平板とするため
   に寒天培地を冷却する装置と、寒天平板への接種装置、
   接種後の寒天培地の培養装置、培養後の自動判定装置を
   連続して設けると共に、上記シャーレに対して作用する
   上記各装置へシャーレを順次搬送する搬送装置を設け、
   上記各装置を自動制御して、検体の希釈分注、該希釈検
   体液のシャーレへの分注、寒天培地のシャーレへの分注
   、該希釈検体と寒天培地との混合撹拌、冷却による寒天
   平板の作製、寒天平板への被検菌液または希釈検体液の
   接種、接種後の培養、培養後の自動判定の工程を自動的
   に行い得るようにし、かつ、ＭＩＣ測定系と生菌数測定
   系に応じて上記工程を選択して組み合わせて連続的に行
   い得る構成としているＭＩＣおよび生菌数の測定自動化
   装置。 ２、上記検体希釈装置は、検体試験管より検体を吸液し
   て希釈試験管へ分注すると共に希釈検体液を吸液・分注
   して所要倍数希釈作用するマイクロ・ピペットと、該マ
   イクロ・ピペットをＸ、Ｙ、Ｚ方向へ移動するロボット
   と、上記マイクロ・ピペットに使用毎にチップを取り替
   えて装着すると共に使用済みのチップを取り外す機構と
   、検体を注入している試験管を並設したラックを移動し
   て順次検体を吸液位置へ移動させる機構と、希釈用試験
   管を並設したラックを移動して順次検体分注位置へ移動
   させる機構とを備え、かつ、 上記希釈検体液をシャーレへ分注する装置は、希釈検体
   液を試験管より吸液してコンベヤ上のシャーレへ分注す
   るマイクロ・ピペットと、該マイクロ・ピペットをＸ、
   Ｙ、Ｚ方向へ移動するロボットと、上記マイクロ・ピペ
   ットに使用毎にチップを取り替えて装着すると共に使用
   済みのチップを取り外す機構を備えていることを特徴と
   する請求項１記載の装置。 ３、ロボットによりＸ、Ｙ、Ｚ方向に自動的に移動され
   るマイクロピペットにより、検体注入試験管より検体を
   吸液して、希釈液が注入されている試験管に吐出して１
   回目の希釈を行い、 ついで、上記マイクロ・ピペットの作用で上記した希釈
   検体液を更に希釈液で所要倍数まで希釈し、 所要倍数まで希釈した希釈検体液を、ロボットによりＸ
   、Ｙ、Ｚ方向に自動的に移動されるマイクロ・ピペット
   で、コンベヤにより順次搬送されてくるシャーレに分注
   し、 上記希釈検体液が分注されているシャーレに、コンベヤ
   の移動に応じて、コンベヤ上に設置している培地分注装
   置より、所要量の寒天培地を分注し、 上記希釈検体液と寒天培地が分注された後に、コンベヤ
   の下部に設置している回転円板によりシャーレを回転し
   て希釈検体液と寒天培地とを混合撹拌し、 上記混合撹拌後に、コンベヤ上に設置している冷却フー
   ド内を挿通させて、冷却により固化して寒天平板を作製
   し、 上記作製された寒天平板の表面に、自動的に作動される
   接種棒により所定間隔をあけて被検菌を接種し、 ついで、インキュベター・プール内に搬入して、所定温
   度で所定時間培養し、 培養後に、カメラで培養状態を撮影し、その映像を画像
   処理用コンピュータに出力して解析して判定し、かつ、 上記一連の工程をコンピュータ制御により自動的に連続
   的に行うことを特徴とするＭＩＣ自動測定方法。 ４、コンベヤ上に載置したシャーレに対して、所定位置
   で、コンベヤ上に設置している培地分注装置より、所要
   量の寒天培地を分注し、 ついで、コンベヤ上に設置している冷却フード内を挿通
   させて、冷却により固化して寒天平板を作製し、 上記作製された寒天平板の表面に、自動的に作動される
   マイクロ・ピペットで希釈検体液を吸液、滴下した後、
   寒天平板の表面に均一に展延し、その後、インキュベタ
   ー・プール内に搬入して、所定温度で所定時間保持して
   培養し、 培養後に、カメラで培養状態を撮影し、その映像を画像
   処理用コンピュータに出力して解析して判定し、 上記一連の工程をコンピュータ制御により自動的に連続
   的に行うことを特徴とするスプレッド法による生菌数の
   自動測定方法。 ５、コンベヤ上に載置したシャーレに対して、所定位置
   で、希釈検体液を分注し、 ついで、コンベヤ上に設置している培地分注装置より寒
   天培地を分注し、 上記希釈検体液と寒天培地が分注された後に、コンベヤ
   の下部に設置している回転円板によりシャーレを回転し
   て希釈検体液と寒天培地とを混合撹拌し、 上記混合撹拌後に、コンベヤ上に設置している冷却フー
   ド内を挿通させて、冷却により固化して寒天平板を作製
   し、 その後、インキュベター・プール内に搬入して、所定温
   度で所定時間保持して培養し、 培養後に、カメラで培養状態を撮影し、その映像を画像
   処理用コンピュータに出力して解析して判定し、 上記一連の工程をコンピュータ制御により自動的に連続
   的に行うことを特徴とする混希法による生菌数の自動測
   定方法。