【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は固定化マルトオリゴ糖生成アミラーゼ
に関し、詳しくは特定の多孔性担体に固定された
活性の高い固定化マルトオリゴ糖生成アミラーゼ
に関する。
〔従来技術及び発明が解決しようとする問題点〕
近年、でん粉またはアミロースに作用してマル
トトリオース、マルトテトラオース、マルトペン
タオース、マルトヘキサオース等のマルトオリゴ
糖をを生成する各種マルトオリゴ糖生成アミラー
ゼが相ついで発見され、マルトオリゴ糖の効率的
な工業的製造に期待が集まつている。
マルトオリゴ糖生成アミラーゼとしてはβ−ア
ミラーゼ以外に次のものが知られている。
マルトトリオース生成アミラーゼ〔若生勝雄
ら：澱粉化学、26、175.（1979）、ストレプトミセ
ス・グリセウス（Streptomyces griseus）起原
のもの；高崎義幸：昭和58年度日本農芸化学大会
要旨集、P169（1983）、バチルス（Bacillus）属起
原のもの〕
マルトテトラオース生成アミラーゼ〔J.F.
Robytand R.J.Ackerman：Arch.Biochem.
Biophys.、145、105（1971）、シユードモナス・
ストツツエリ（Pseudomonas stutzeri）起原の
もの〕
マルトペンタオース生成アミラーゼ〔N.
Saito：Arch.Biochem.Biophys.、155、290
（1973）、バチルス・リケニホルミス（Bacillus
licheniformis）起原のもの；小林ら；昭和58年
度日本澱粉学会大会要旨集、P301（1983）；吉儀
ら：昭和59年度日本農芸化学大会要旨集、P584
（1984）〕
マルトヘキサオース生成アミラーゼ〔K.
Kainumaら：FEBS Lett.、26、281（1972）、エ
アロバクター・エアロゲネス（Aerobacter
aerogenes）起原のもの；J.F.Kennedy and C.
A.White：St¨arke、31、93（1979）；谷口ら：澱粉
化学、29、107（1982）；Y.Takasaki：Agric.
Biol.Chem.、47、2193（1983）〕
しかしながら、これらのマルトオリゴ糖生成ア
ミラーゼは一般のアミラーゼに比べて非常に高価
であり、それらアミラーゼを用いて製造されたマ
ルトオリゴ糖の試薬グレード品が少量生産されて
いるにすぎない。したがつて、これらマルトオリ
ゴ糖生成アミラーゼを用いて各種オリゴ糖を工業
的に生産するためには、これらアミラーゼを効率
的に使用することが不可欠である。その具体的手
法としてこれらアミラーゼを固定化して使用する
ことが考えられる。
これまでにマルトトリオース以上の重合度を有
するマルトオリゴ糖を生成するアミラーゼの固定
化例としては、マルトヘキサオース生成アミラー
ゼをポリアクリルアミドに放射線重合法によつて
包括固定化する方法〔Biotech.and Bioeng.、
25、p1095−1107（1983）〕が知られているにすぎ
ない。しかし、この方法は酵素の固定化率は高い
が、大量生産に不向きであり、高価である上に固
定化酵素の重量あたりの活性が低いという欠点が
あつた。
そこで、本発明者らは上記マルトオリゴ糖生成
アミラーゼを効率よく固定化し、かつ固定化酵素
の重量あたりの活性も工業的使用に十分な値をも
ち、長期間にわたつてその活性を維持しうる固定
化酵素を開発すべく鋭意研究を重ねた。
〔問題点を解決するための手段〕
その結果、特定の多孔性担体に固定することに
よつて目的とする優れた固定化酵素が得られるこ
とを見出し、本発明を完成した。
すなわち本発明は、下記特性を有する多孔性担
体に固定された固定化マルトオリゴ糖生成アミラ
ーゼである。
(イ) 酵素との親和性が80％以上である
(ロ) 100Å以上の細孔径を有する細孔の比表面積
が20〜300m2／ｇである
酵素を固定化方法としては各種と方法が知られ
ており、その１つに物理的吸着法、イオン結合
法、共有結合法糖を含む担体結合法がある。この
中、物理的吸着法、イオン結合法は操作が簡単で
あり、酵素タンパク質の活性中心の破壊あるいは
高次構造の変化が小さく、また担体の再生利用も
容易であることから適当な担体を発見できれば工
業化に対して有望な方法と云える。
本発明ではマルトオリゴ糖生成アミラーゼの担
体として、(イ)酵素との親和性が80％以上であり、
(ロ)100Å以上の細孔径を有する細孔の比表面積が
20〜300m2／ｇである多孔性担体を使用する。こ
こで、酵素と担体の親和性は次の方法によつて求
めた値を意味する。
担体0.5ｇと25IUの酵素（PH7.0の50mMリン酸
緩衝液2.0mlに溶解したもの）を50ml三角フラス
コに入れ、室温下で１時間、120ストローク、４
cm幅で振とうしながら酵素を担体に固定化したの
ち濾過を行ない、得られた濾液中の活性を測定し
て次式により酵素と担体との親和性を求める。
添加した酵素活性−濾液中の酵素活性／添加した酵素活
性×100
親和性を求める際に用いる酵素の純度は必ずし
も絶対的なものではないが、好ましくは比活性が
30IU／mg・タンパク質以上あるものを使用する。
なお、上記酵素と担体の親和性は工業的に利用す
る場合の酵素活性／担体重量比よりも低いレベル
で求めたものであるが、酵素と担体の親和性を知
る尺度として重要である。すなわち、実際に高い
酵素活性／担体重量比において固定化した酵素が
基質に対し高い発現活性を示すものは上記親和性
についても高い値を示すことを本発明者らは見出
している。この親和性については、上記の如く80
％以上であることが必要であるが、マルトテトラ
オース生成アミラーゼ用担体の場合は95％以上で
あることが好ましく、マルトペンタオース生成ア
ミラーゼ用担体の場合は80％以上であることが好
ましい。これらの値は使用酵素の起原および比活
性によつて決まる。ここで発現活性とは以下の如
く定義されるものである。
固定化酵素の発現する活性がその使用条件によ
つて絶対値が大きく変わるので、次のような測定
条件を設定して求めた。すなわち、固定化酵素10
mg（Wet）を0.5mlの10mMリン酸バツフアー
（PH7.0）（50ml三角フラスコ中）に加え、十分に
馴染ませた後、10w／ｖ％可溶性でん粉（Merck
社製）5.0mlを加えて40℃で10分間往復振とう機
により120ストローク／min、４cm幅で振とうし
ながら酵素反応を行ない、生成還元糖を
Somogyi−Nelson法で測定し、発現する活性を
求めた。なお、１単位とは１分間に1μmolのグル
コシド結合を切断する酵素量を意味する。
本発明に用いる担体は、さらに以下の条件を満
足するものであることを要する。すなわち、担体
の100Å以上の細孔径を有する細孔の比表面積が
20〜300m2／ｇ、好ましくは40〜200m2／ｇである
ことが必要である。この比表面積が300m2／ｇを
越えると、担体は強度が弱いものとなり、好しく
ない。なお、マルトテトラオース生成アミラーゼ
用担体にあつては、さらに400Å以上の細孔径を
有する細孔の比表面積が３〜100m2／ｇ、好まし
くは５〜50m2／ｇであることが望ましい。ここ
で、比表面積は水銀圧入法により測定した値であ
る。
上記の条件は、いずれか一方を満足するだけで
は不十分であり、すべての条件を同時に満たすも
のだけが基質に対して高い反応性を示す。
本発明に使用する多孔性担体としては上記特性
を満足するものであれば、素材、製法等を問わな
いが、通常はフエノール系吸着樹脂、スチレン−
ジビニルベンゼン系吸着樹脂、トリアジン系吸着
樹脂、アクリルエステル系吸着樹脂、弱塩基性ア
ニオン交換樹脂などの多孔性合成樹脂が用いられ
る。より具体的には、デユオライト系樹脂（ダイ
ヤモンドシヤムロツク社製）の商品名「Ｓ−
761」、「Ｓ−762」、「ES−771」、「ES−8610」な
ど；ダイヤイオン系樹脂（三菱化成工業(株)製）の
商品名「HP−10」、「HP−20」、「HP−50」、「SP
−206」など；アンバーライト系樹脂（ローム・
アンド・ハース社製）の商品名「XAD−７」、
「XAD−８」などを挙げることができる。
また、多孔性担体の粒径については、発現活性
が高ければ特に制限はないが、通常は0.05〜1.5
mm、より好ましくは0.2〜1.0mmのものを用いるの
が適当である。粒径が小さいことは酵素の固定化
や発現活性に対しては好ましい要因であるが、あ
まり小さいと、固定化酵素を反応器に充填し、こ
れにでん粉液化液を供給したとこに、圧力損失が
大きいため、運転上不都合である。一方、粒径が
あまり大きいと、酵素の固定化や発現活性に対し
て効率的でない。
また、酵素としてはマリトトリオース生成アミ
ラーゼからマルトヘキサオース生成アミラーゼま
での酵素が本発明の対象とされ、酵素の固定化は
各種の方法を適当しうるが、最も一般的な方法
は、前述したように、適当な緩衝液に酵素を溶解
し、この酸素液を担体と混ぜて撹拌する方法であ
る。次いで、濾過等の操作により固・液分離を行
ない、得られた固定化酵素を適当な緩衝液で洗浄
する。緩衝液としてはリン酸緩衝液（PH６〜７）、
トリス塩酸緩衝液（PH７〜９）または蒸溜水など
が好適に用いられる。
酵素の固定化量は、用いる酵素およびその比活
性や担体の種類等によつても異なるが、通常は担
体１ｇ当りタンパク質として１〜40mg、好ましく
は２〜15mgが適当である。
酵素の固定化量が担体１ｇ当りタンパク質とし
て１mgより少ない場合、固定化率が高く、効率的
に固定化することができるが、発現活性の絶対値
が小さく、目的成分の収量が少ない。一方、固定
化量が担体１ｇ当りタンパク質として40mgよりも
多い場合、酵素固定化時の固定化率が低下するた
め、酵素の使用効率が悪いばかりでなく、発現活
性として利用される割合も減少し、好ましくな
い。
〔実施例〕
次に、本発明を実施例により詳しく説明する。
実施例 １
酵素としてマルトテトラオース生成アミラーゼ
（シユードモナス・ストツツエリ起原のもの、比
活性80.8IU／mg・タンパク質）を用い、担体とし
て第１表に示したものを使用して固定化酵素を得
た。すなわち、担体0.2ｇに対し100IUの酵素をPH
7.0の50mMリン酸緩衝液で2.0mlとしたものを50
ml三角フラスコに入れ、室温下１時間、120スト
ロース、４cm幅で振とうしながら酵素を担体に固
定化した。次いで、これを濾過して濾液を除き、
さらに10mMリン酸緩衝液（PH7.0）を用いタン
パク質が流出しなくなるまで十分に洗浄して固定
化酵素を得た。
この固定化担体について、前記した方法により
親和性を測定し、かつ固定化酵素の発現する活性
についても測定した。結果を担体の比表面積の値
と共に第１表に示す。
【表】
比較例 １
親和性が十分でない担体を用いたこと以外は実
施例１と同様にして固定化酵素を得た。測定結果
を第２表に示す。
比較例 ２
比表面積の物性が十分でない担体を用いたこと
以外は実施例１と同様にして固定化酵素を得た。
測定結果を第３表に示す。
【表】
【表】
アニオン交換樹脂
〓A−374〓 99.3
6 6 3
実施例 ２
酵素としてマルトペンタオース生成アミラーゼ
（バチルス・リケニホルミス起原のもの、比活性
40.9.IU／mg・タンパク質）を用いたこと以外は
実施例１と同様に行なつた。なお、発現活性は40
℃で測定した。結果を第４表に示す。
【表】
比較例 ３
親和性が十分でない担体を用いたこと以外は実
施例２と同様にして固定化酵素を得た。測定結果
を第５表に示す。
【表】
比較例 ４
比表面積の物性が十分でない担体を用いたこと
以外は実施例２と同様にして固定化酵素を得た。
測定結果を第６表に示す。
【表】
【表】
使用例
実施例１に示す方法で得た固定化酵素（担体
「ES−8610）」）10ｇをカラムリアクターに詰め、
20w／ｖ％可溶性でん粉（和光純薬(株)製）を
LHSV（液時空間速度）1.0hr-1で温度40℃の当該
カラムリアクターに供給した。その運転結果を第
１図に示す。
図から明らかなように、1500時間を越えて安定
して運転できることを確認すると共に製品中の基
質を除いたマルトテトラオースの純度は80〜90％
と高純度のものを得ることができた。
〔発明の効果〕
本発明によれば、マルトオリゴ糖生成アミラー
ゼは効率よく固形化され、しかも固定化酵素を重
量あたりの活性も十分に高い。その上、この活性
は長期間保持される。
それ故、この固定化酵素を用いれば、工業的に
マルトオリゴ糖を製造することができる。 DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION [Field of Industrial Application] The present invention relates to an immobilized maltooligosaccharide-forming amylase, and more particularly to a highly active immobilized maltooligosaccharide-forming amylase immobilized on a specific porous carrier. [Prior art and problems to be solved by the invention] In recent years, various maltooligosaccharide-producing amylases that act on starch or amylose to produce maltooligosaccharides such as maltotriose, maltotetraose, maltopentaose, and maltohexaose have been developed. have been discovered one after another, and expectations are high for efficient industrial production of maltooligosaccharides. In addition to β-amylase, the following are known as malto-oligosaccharide-producing amylases. Maltotriose-producing amylase [Katsuo Wakao et al.: Starch Chemistry, 26 , 175. (1979), originating from Streptomyces griseus; Yoshiyuki Takasaki: Abstracts of the 1983 Japan Agricultural Chemistry Conference, P169 (1983) ), originating from the genus Bacillus] maltotetraose-producing amylase [JF
Robytand RJ Ackerman: Arch.Biochem.
Biophys., 145 , 105 (1971), Pseudomonas
Originated from Pseudomonas stutzeri] Maltopentaose-producing amylase [N.
Saito: Arch.Biochem.Biophys., 155 , 290
(1973), Bacillus licheniformis
licheniformis) origin; Kobayashi et al.; Abstracts of the 1983 Japan Starch Society Conference, P301 (1983); Yoshigi et al.: Abstracts of the 1988 Japan Agricultural Chemistry Conference, P584
(1984)] Maltohexaose-producing amylase [K.
Kainuma et al.: FEBS Lett., 26 , 281 (1972), Aerobacter aerogenes
aerogenes) origin; JFKennedy and C.
A. White: St¨arke, 31 , 93 (1979); Taniguchi et al.: Starch Chemistry, 29 , 107 (1982); Y. Takasaki: Agric.
Biol.Chem., 47 , 2193 (1983)] However, these maltooligosaccharide-producing amylases are very expensive compared to general amylases, and reagent grade products of maltooligosaccharides produced using these amylases are only produced in small quantities. It's just that it's being done. Therefore, in order to industrially produce various oligosaccharides using these maltooligosaccharide-producing amylases, it is essential to use these amylases efficiently. As a specific method, it is possible to immobilize and use these amylases. As an example of the immobilization of amylase that produces malto-oligosaccharide having a degree of polymerization higher than maltotriose, there is a method in which maltohexaose-producing amylase is comprehensively immobilized on polyacrylamide using a radiation polymerization method [Biotech.and Bioeng .,
25, p1095-1107 (1983)] is known. However, although this method has a high enzyme immobilization rate, it is not suitable for mass production, is expensive, and has the drawbacks of low activity per weight of immobilized enzyme. Therefore, the present inventors have developed an immobilized enzyme that can efficiently immobilize the above-mentioned maltooligosaccharide-producing amylase, have sufficient activity per weight of the immobilized enzyme for industrial use, and maintain its activity over a long period of time. He conducted extensive research to develop the enzyme. [Means for Solving the Problems] As a result, the present inventors discovered that an excellent target immobilized enzyme could be obtained by immobilizing it on a specific porous carrier, and completed the present invention. That is, the present invention is an immobilized malto-oligosaccharide-producing amylase immobilized on a porous carrier having the following characteristics. (b) The affinity for the enzyme is 80% or more. (b) The specific surface area of pores with a pore diameter of 100 Å or more is 20 to 300 m 2 /g. Various methods and methods are known for immobilizing enzymes. One of these methods is a physical adsorption method, an ionic bonding method, a covalent bonding method, and a carrier bonding method involving sugar. Among these methods, physical adsorption methods and ionic bonding methods are easy to operate, cause little destruction of the active center of the enzyme protein or change in higher-order structure, and are easy to recycle, making it easy to find suitable carriers. If possible, this can be said to be a promising method for industrialization. In the present invention, as a carrier for malto-oligosaccharide-producing amylase, (a) the affinity with the enzyme is 80% or more;
(b) The specific surface area of pores with a pore diameter of 100 Å or more is
A porous support of 20 to 300 m 2 /g is used. Here, the affinity between enzyme and carrier means a value determined by the following method. 0.5 g of carrier and 25 IU of enzyme (dissolved in 2.0 ml of 50 mM phosphate buffer, pH 7.0) were placed in a 50 ml Erlenmeyer flask and incubated at room temperature for 1 hour, 120 strokes, 4
After immobilizing the enzyme on the carrier while shaking at a cm width, filtration is performed, the activity in the obtained filtrate is measured, and the affinity between the enzyme and the carrier is determined using the following formula. Added enzyme activity - Enzyme activity in filtrate / Added enzyme activity x 100 The purity of the enzyme used to determine affinity is not necessarily absolute, but preferably the specific activity is
Use one with 30IU/mg protein or more.
The affinity between the enzyme and the carrier was determined at a lower level than the enzyme activity/carrier weight ratio for industrial use, but it is important as a measure of the affinity between the enzyme and the carrier. That is, the present inventors have found that when an immobilized enzyme exhibits a high expression activity toward a substrate at a high enzyme activity/carrier weight ratio, it also exhibits a high value for the above-mentioned affinity. Regarding this affinity, as mentioned above, 80
% or more, but in the case of a carrier for maltotetraose-producing amylase, it is preferably 95% or more, and in the case of a carrier for maltopentaose-producing amylase, it is preferably 80% or more. These values depend on the origin and specific activity of the enzyme used. Here, expression activity is defined as follows. Since the absolute value of the activity expressed by the immobilized enzyme varies greatly depending on the usage conditions, the following measurement conditions were set for determination. i.e. immobilized enzyme 10
mg (Wet) to 0.5 ml of 10 mM phosphate buffer (PH7.0) (in a 50 ml Erlenmeyer flask), mix well, and then add 10 w/v% soluble starch (Merck
Add 5.0 ml of (manufactured by) and perform an enzyme reaction at 40°C for 10 minutes with a reciprocating shaker at 120 strokes/min and shaking at a width of 4 cm to remove the reducing sugars produced.
The expressed activity was determined by measurement using the Somogyi-Nelson method. Note that 1 unit means the amount of enzyme that cleaves 1 μmol of glucoside bonds per minute. The carrier used in the present invention must further satisfy the following conditions. In other words, the specific surface area of pores with a pore diameter of 100 Å or more in the carrier is
It is necessary that the area is 20 to 300 m 2 /g, preferably 40 to 200 m 2 /g. When the specific surface area exceeds 300 m 2 /g, the strength of the carrier becomes weak, which is not preferable. In addition, in the case of a carrier for maltotetraose-producing amylase, it is further desirable that the specific surface area of pores having a pore diameter of 400 Å or more is 3 to 100 m 2 /g, preferably 5 to 50 m 2 /g. Here, the specific surface area is a value measured by mercury porosimetry. It is not sufficient to satisfy only one of the above conditions, and only one that satisfies all of the conditions at the same time exhibits high reactivity toward the substrate. The porous carrier used in the present invention can be made of any material or manufacturing method as long as it satisfies the above characteristics, but it is usually a phenolic adsorption resin, a styrene-based carrier, etc.
Porous synthetic resins such as divinylbenzene-based adsorption resins, triazine-based adsorption resins, acrylic ester-based adsorption resins, and weakly basic anion exchange resins are used. More specifically, the product name of Duolite resin (manufactured by Diamond Shamlok Co., Ltd.) is “S-
761", "S-762", "ES-771", "ES-8610", etc.; product names of diamond ion resin (manufactured by Mitsubishi Chemical Industries, Ltd.) "HP-10", "HP-20", "HP-50", "SP
-206”, etc.; Amberlite resin (Roam,
(manufactured by And Haas) product name "XAD-7",
Examples include "XAD-8". In addition, there is no particular restriction on the particle size of the porous carrier as long as the expression activity is high, but it is usually 0.05 to 1.5
mm, more preferably 0.2 to 1.0 mm. A small particle size is a favorable factor for enzyme immobilization and expression activity, but if it is too small, pressure loss may occur when the immobilized enzyme is packed into a reactor and starch liquefaction liquid is supplied to it. This is inconvenient for driving due to the large size. On the other hand, if the particle size is too large, it is not efficient for enzyme immobilization and expression activity. In addition, enzymes from malitotriose-producing amylase to maltohexaose-producing amylase are targeted by the present invention, and various methods can be used to immobilize the enzymes, but the most common method is as described above. In this method, the enzyme is dissolved in an appropriate buffer solution, the oxygen solution is mixed with the carrier, and the mixture is stirred. Next, solid/liquid separation is performed by an operation such as filtration, and the obtained immobilized enzyme is washed with an appropriate buffer. As the buffer solution, phosphate buffer (PH6-7),
Tris-HCl buffer (PH7-9) or distilled water is preferably used. The amount of enzyme immobilized varies depending on the enzyme used, its specific activity, the type of carrier, etc., but is usually 1 to 40 mg, preferably 2 to 15 mg of protein per gram of carrier. When the amount of enzyme immobilized is less than 1 mg of protein per gram of carrier, the immobilization rate is high and it can be efficiently immobilized, but the absolute value of the expression activity is small and the yield of the target component is low. On the other hand, if the immobilized amount is more than 40 mg of protein per gram of carrier, the immobilization rate during enzyme immobilization will decrease, which will not only result in poor enzyme usage efficiency, but also decrease the proportion used for expression activity. , undesirable. [Example] Next, the present invention will be explained in detail with reference to Examples. Example 1 An immobilized enzyme was obtained using maltotetraose-generating amylase (originating from Pseudomonas stotzeri, specific activity 80.8 IU/mg protein) as the enzyme and using the carrier shown in Table 1. . In other words, 100 IU of enzyme is added to 0.2 g of carrier at pH
7.0 50mM phosphate buffer to 2.0ml
The enzyme was immobilized on the carrier by placing it in a ml Erlenmeyer flask and shaking at room temperature for 1 hour at 120 straws and 4 cm width. Next, filter this to remove the filtrate,
Furthermore, the immobilized enzyme was obtained by washing thoroughly with 10 mM phosphate buffer (PH7.0) until the protein no longer flows out. The affinity of this immobilized carrier was measured by the method described above, and the activity expressed by the immobilized enzyme was also measured. The results are shown in Table 1 together with the specific surface area of the carrier. [Table] Comparative Example 1 An immobilized enzyme was obtained in the same manner as in Example 1 except that a carrier with insufficient affinity was used. The measurement results are shown in Table 2. Comparative Example 2 An immobilized enzyme was obtained in the same manner as in Example 1, except that a carrier with insufficient physical property of specific surface area was used.
The measurement results are shown in Table 3. [Table] [Table] Anion exchange resin 〓A−374〓 99.3
6 6 3
Example 2 Maltopentaose-producing amylase (originating from Bacillus licheniformis, specific activity
The same procedure as in Example 1 was conducted except that 40.9.IU/mg protein) was used. In addition, the expression activity is 40
Measured at °C. The results are shown in Table 4. [Table] Comparative Example 3 An immobilized enzyme was obtained in the same manner as in Example 2 except that a carrier with insufficient affinity was used. The measurement results are shown in Table 5. [Table] Comparative Example 4 An immobilized enzyme was obtained in the same manner as in Example 2, except that a carrier with insufficient physical properties such as specific surface area was used.
The measurement results are shown in Table 6. [Table] [Table] Usage example Pack 10 g of the immobilized enzyme (carrier "ES-8610") obtained by the method shown in Example 1 into a column reactor.
20w/v% soluble starch (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.)
It was supplied to the column reactor at a temperature of 40° C. at LHSV (liquid hourly space velocity) of 1.0 hr −1 . The operation results are shown in Figure 1. As is clear from the figure, we have confirmed that it can be operated stably for over 1500 hours, and the purity of maltotetraose in the product excluding the substrate is 80 to 90%.
We were able to obtain a product of high purity. [Effects of the Invention] According to the present invention, maltooligosaccharide-producing amylase is efficiently solidified, and the activity per weight of the immobilized enzyme is sufficiently high. Moreover, this activity is retained for a long time. Therefore, by using this immobilized enzyme, maltooligosaccharides can be produced industrially.
【図面の簡単な説明】[Brief explanation of drawings]
第１図は固定化酵素を使用したときの経過時間
とマルトテトラオースの相対活性を示すものであ
る。
FIG. 1 shows the elapsed time and relative activity of maltotetraose when using immobilized enzyme.