JPH0343091A - 新規微生物を用いる発酵によるエリスリトールの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は新規微生物を用いる発酵によるエリスリトール
の製造方法に関し、更に詳細には、オーレオバシディウ
ム属に属する新規な人工変異株であるオーレオバシディ
ウムｓｐ、　５Ｎ−Ｇ４２菌株及び当該変異株を用いて
発酵性糖類をエリスリトールに変換することを特徴とす
る、新規微生物を用いる発酵によるエリスリトールの製
造方法に関する。

［従来の技術及び発明が解決しようとする課題］従来か
ら、キャンシダ属、デバリオ稟セス属。

トリボノブシス属、トルロプシス属、ハンゼヌラ属、モ
ニリエラ属、オーレオバシディウム属などに属する微生
物を利用して、発酵法によりグルコース、グリセリンな
どの糖類からエリスリトールを製造する方法は既に公知
となっている。

例えば、特公昭４７−４１５４９号公報には、キャンシ
ダ属、トリゴノブシス属に属する微生物を用いてグリセ
リンなどの発酵性糖類をエリスリトールに変換する方法
が記載されている。しかし、この方法では微生物の耐糖
性が低いために、主炭素源として使用される糖質濃度（
基質濃度）に限界があり、比較的低濃度で発酵を行う必
要があった。

また、特開昭６０−１１０２９５号公報などには、モニ
リエラ属に属する微生物を用いるエリスリトールの改良
製性が開示されている。この方法はエリスリトールへの
変換率が高く、微生物の耐糖性も高いという点で優れて
いるが、この微生物は泡の発生が著しく、通常使用され
る消泡剤では役に立たないため、高価なキサンタンガム
などを多量に添加する必要があり、そのために製造コス
トが高くなるという欠点がある。

更に、特開昭６１−３１０９１号公報には、本発明者ら
によりオーレオバシディウム属に属するオーレオパシデ
ィウムｓｐ、　５Ｎ−４５菌株（徴工研菌寄第７５９４
号）を用いてグルコースなどの発酵性糖類からエリスリ
トールを製造する方法が開示されている。この方法は、
比較的高濃度の糖質を用いてエリスリトールを製造する
ことを可能にするものであるが、培養液中の菌体生成量
に比べてエリスリトール収率が充分ではなく、また製造
条件であるｐＨの至適範囲が狭いなど、必ずしも満足の
いく方法とは言い難い。

［課題を解決するための手段］ 本発明者らは、上記したような従来方法の欠点を改良す
るために、オーレオバシディウム属に属する微生物の耐
糖性を高めるべく、微生物の改良について種々検討した
結果、沖縄県の澱粉工場内の土壌から分離された不完全
菌類のオーレオバシディウム属に属するオーレオバシデ
ィウムｓｐ。

５Ｎ−１２４Ａ菌株（徴工研菌寄第８７４５号）を親株
とし、これより得られた変異株であるオーレオバシディ
ウムｓｐ、　５Ｎ−Ｇ４２菌株が高いエリスリトール生
産能を有すると共に、高い耐粘性を獲得していること並
びに培養の際に泡を生成しないことを見出し、本発明に
到達したものである。

即ち、本発明はエリスリトール生産能を有し、菌体（細
胞〉が親水性、非凝集性であり、且つ液体培地中で好気
的に培養するとき実質的に泡を生成しないことを特徴と
するオーレオバシディウムｓｐ、　５Ｎ−Ｇ４２菌株を
用いて発酵性糖類な主炭素源として含む培地に接種し、
好気的に培養して培養液中にエリスリトールを生成蓄積
せしめ、これを採取することを特徴とする発酵によるエ
リスリトールの製造方法に関する。

本発明に関わるオーレオバシディウムｓｐ。

５Ｎ−Ｇ４２菌株は、親株であるオーレオバシディウム
ｓｐ、　５Ｎ−１２４＾菌株に、紫外線を照射した後、
引拳続きＮ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ″−ニトロソグ
アニジンなどの突然変異誘起剤を使用して処理すること
により誘発された新規変異株である。

以下に、本変異株の菌学的性質を示す。

１、培地上の生育状況 ｌ）顕微鏡的所見 栄養細胞の大きさ　（※１）４〜７×４〜１５μ栄養細
胞の形状　　（※１）菌糸および酵母様の単胞、卵形等
の形状 を示す。

栄養細胞の増殖法　（※１）　菌糸及び酵母様細胞の多
極出芽 菌糸体　　　　（※２）　真性菌糸を形威し、先端及び
側面に全骨 芽型分生子を多数生 ずる。

（註）※ＩＹＭ寒天培地２７℃、５日間培養※２ポテト
グルコース寒天によるスライド培養 ２）寒天斜面　（※３） 生　　　育　　　　　　　良　　　好 心　　態　　　　　表面は平滑状 光　　　沢　　　　　　　　無　　−し色　　調　　　
　　日数の経過に伴い白色からウスい黄黒色のコロニー
に 変化する。

（註）※３ＹＭ寒天培地 ３）液体培養　（※４） 表面生育　　　　　厚い皮膜形成 濁　　　度　　　　　　　　透　　　明沈　　　査　　
　　　　　　犬 （註）※４ＹＭ液体培地 ２、子のう胞子の形成 ポテトグルコース寒天培地　　形成せずコーンミール寒
天培地　　　　形成せずＹＭ寒天培地　　　　　　　　
形成せずニンジンエキス寒天培地　　　形成せずＶ６寒
天培地　　　　　　　　形成せず３、生理学的性質 酸素要求性　　　　　　　　　好気的 生育温度　　　　　　　　　　約４０℃まで最適生育温
度　　　　　　　　３５〜３７℃生育ｐＨ２，５〜１０
．０ 最適生育ｐ）！　　　　　　　　　　４．０〜７．０Ｋ
ＮＯｊ資化性　　　　（※５）　　　有　　リ（Ｎ）１
４）　２５０４　ｋＲ化性　（※５）　　　有　　り尿
素の分解　　　　　　　　　無　　しゼラチンの液化　
　　　　　　無　　しカロチノイドの生成　　　　　無
　　しファーストブルーＢ発色試験　無　　し有機酸の
生成　　　　　　　　無　　しデンプン様物質の生成　
　　　無　　しビタミンの要求性　（※５）　　　有　
　リグルコース濃度　（※６）５０％生育　柵６０％生
育　廿 食塩濃度　　　　（※７）２％生育　＋１０％生育 （註）※５　Ｗｉｃｋｅｒｈａｍの合成培地を用いたＪ
、Ｌｏｄｄｅｒらの方法により判定 ※６寒天培地 ※７液体培地 ４、糖の発酵性 グルコース ラクトース ガラクトース メリビオース シュクロース ラフィノース マルトース Ｄ−アラビノース キシロース トレハロース イヌリン ５、糖、有機酸等の資化性 グルコース Ｄ−キシロース ガラクトース エリスリトール Ｄ−アラビノース し−アラビノース （※５） Ｄ−リボース シュクロース Ｌ−ラムノース マルトース エタノール メタノール セロビオース サリシン Ｌ−ソルボース リビトール ガラクチトール グリセロール トレハロース ラクトース メリビオース Ｄ−マンニトール ラフィノース メレヂトース α−メチル−Ｄ−グルコシド イヌリン イノシトール 可溶性デンプン ＤＬ−乳酸　　　　　　　　　　− コハク酸 クエン酸 Ｄ−グルシトール　　　　　　＋ グルクロン酸 アルブチン　　　　　　　　　＋ ｐ−グルコサミン（Ｈ（Ｒ） ２−ケトグルコン酸　　　　　十 ５−ケトグルコン酸　　　　　十 上記の如き菌学的性質を有する本菌株は、オーレオバシ
ディウムｓｐ、　５Ｎ−１２４Ａ菌株を親株として変異
したものであり、且つ親株に近似した性質を有している
ことから、オーレオバシディウム属に属する新規な変異
株であると判断し、オーレオバシディウムｓｐ、　５Ｎ
−６４２菌株とし命名した。

本菌株は、工業技術院微生物工業技術研究所に「微生物
受託番号　徹工研菌寄第８９４０号」として寄託されて
いる。

このように、本発明に係わるオーレオバシディウムｓｐ
、　５Ｎ−Ｇ４２菌株は、親株であるオーレオバシディ
ウムｓｐ、　５Ｎ−１２４Ａ菌株の菌学的性Ｘ（特願昭
６１−２１０６６９号参照）に近似しているが、硝酸塩
の資化性が弱く、尿素非分解性及び炭素源の資化性など
で若干具なる性質を有しており、また親株に比較して耐
特性が高い点（後記試験例１参照）、液体培地で好気的
に培養したとき実質的に泡を生成しない点並びに菌体（
細胞）が親木性であり、且つ非凝集性である点（後記試
験例２参照）及び平板寒天培地で静置培養したときのコ
ロニーの形態（後記試験例３参照）においても相違を有
している。

以下に、本発明に係わるエリスリトールの製造方法につ
いて述べるが、本発明の中で用いる％は特にことわりの
ない限り容量（Ｗ／Ｖ）％で示した。

本発明における培養は、通常液体培地を用いて好気的条
件下に攪拌培養により実施されることが望ましい。

当該液体培地の主炭素源としてはグルコース。

フルクトース、シュクロースなどの糖質が使用されるが
、これらの糖質の培地中における量的割合としては１０
〜５５％、好ましくは２０〜５０％の範囲で添加使用さ
れる。窒素源としては微生物により利用可能な窒素化合
物、例えば酵母エキス、ペプトン、麦芽エキス、カザミ
ノ酸、コーンスチープリカーなどが使用される。また、
培地に加える無機塩類としては、例えば硫酸第一鉄、塩
化カリウム、塩化ナトリウム、リン酸二水素カリウム、
水酸化カルシウムなどの塩類が使用される。更に、必要
に応じて酵母の生育に必要な各種の有機物。

無機物あるいは通常用いられる消泡剤などを添加するこ
とができる。

培養は、前記組成からなる液体培地に微生物菌体を直接
接種するか、又は別に前培養によって得られる種培養液
を接種して行われる。この種培養液の調製は、例えば常
法により斜面培養した菌をグルコース３３．５％、コー
ンスチーブリカ−４，５％を含むｐＨ４〜６の液体培地
に１白金耳接種して３４〜３６℃の温度で２〜４日間培
養することにより行われる。

培養温度は微生物が生育しうる範囲内、即ち３０〜３８
℃で行われるが、好ましくは３５〜３７℃の範囲である
。

また、培地のｐＨは４〜９、好ましくは４〜７の範囲で
調節される。

培養期間は使用する培地の種類及び主炭素源である糖質
の濃度により異なるが、通常４〜８日間程度である。

本発明における培養は、培地の栄養源が最大限に利用さ
れ、且つ培養液中のエリスリトールの生成量が最高に達
した時点で培養を終了させることが望ましい。

なお、培養液中のエリスリトール生成量はガスクロマト
グラフィー、高速液体クロマトグラフィーなどの周知の
方ｌ去を用いて速やかに測定することができる。

かくして、培養液中に蓄積−されたエリスリトールは、
常法に従って培養液中から分離される。即ち、斯かる場
合に当該分野において通常使用されている周知の手段、
例えばろ過、遠心分離、イオン交換又は吸着クロマトグ
ラフィー、溶媒抽出、・蒸留、結晶化などの操作が必要
に応じて適宜組み合わせて用いられる。−例を挙げれば
、培養液からろ過、遠心分離などによって菌体を除去し
、次いでこの液を活性炭で処理して着色物質などを除き
、更にイオン交換樹脂により脱イオンした後、液を濃縮
してシロップとする０次に、このシロップからエリスリ
トール結晶化して分離する。エリスリトールを分離した
後の母液中にグリセリンが含まれている場合には、これ
を更に減圧蒸留により精製してグリセリンを得ることが
できる。

［実施例］ 次に、本発明を試験例及び実施例により詳しく説明する
。

以下に、本発明に係わるオーレオバシディウムｓｐ、　
５Ｎ−Ｇ４２菌株の特性を、親株であるオーレオバシテ
ィウムｓｐ、　５Ｎ−１２４Ａ菌株と比較した。

試験例１（耐糖性試験） ・方　法 酵母エキス（Ｄｉｆｃｏ社製）１．０％（ｗ／ｖ％を示
す。以下、同じである。）、グルコース２２．０〜４５
．０％を含む培地を５００ｍＪ）容の三角フラスコにそ
れぞれ入れ、１２０℃で１５分間蒸気滅菌を行った。

冷後、培地ｐ）ｌを５．５に調整し、これに種培養液６
％を接種した後、３０℃、１８０ｒｐＬ１１で７日間回
転培養を行った。

・結　果 次頁Ｃ対消費グルコース当たりのエリスリトール収率を
示した。

表から明らかなように、親株であるオーレオバシディウ
ムｓｐ、　５Ｎ−１２４Ａ菌株は、培地のグルコース濃
度が３３．５％以下ではエリスリトールへの変換率が３
６．５〜３８．３％で良好な変換率を示すが、グルコー
ス濃度が３９．５％以上になると、グルコース濃度の上
昇に伴って急激な変換率の低下が認められた。

これに対し、本発明の変異株であるオーレオバシディウ
ムｓｐ、　５Ｎ−０４２菌株は、培地のグルコース濃度
が３９．５％を越えてもエリスリトールへの変換率の低
下が認められず、グルコース濃度が４５．０％になると
親株に比べ約２．３倍のエリスリトール収率が認められ
た。

試験例２（発泡性、凝集性及び親水性試験）・方　法 酵母エキス１．０％、グルコース３３．５％を含む培地
を試験管に入れ、１２０℃で１５分間蒸気滅菌を行った
。冷後、培地ｐＨを５．５に調整し、これに種培養液６
％を接種した後、３０℃、５日間振盪培養を行った。培
養終了後、１０〜１５分間静置して泡の生成状態及び菌
体（細胞）の凝集状態を観察した（発泡性、凝集性）。

引き続き、培養液と同量のベンゼンを加えて強く攪拌し
た後、約３０分間静置して菌体（細胞）のベンゼン層へ
の移行状態を観察した（親水性）。

・結　果 親株であるオーレオパシディウムｓｐ、　５Ｎ−１２４
Ａ菌株は、液体培地で好気的に培養したとき著しい発泡
を示し、攪拌（振盪）を停止した後も泡は長時間消失し
なかった。また、培養液中の菌体（細胞）は、攪拌を停
止すると速やかに凝集して沈殿を生じた。

これに対し、本発明の変異株であるオーレオバシディウ
ムｓｐ、　５Ｎ−Ｇ４２菌株は上記と同一の条件で培養
しても発泡が全く認められず、攪拌（振盪）を停止して
も菌体の凝集は生じなかった。

また、上記と同一条件で培養した親株と本発明の変異株
の各培養液に、適量のベンゼンを加えてベンゼン−水２
層系としたとき、親株の菌体はベンゼン層に移行し、水
層には何も残らないが、本を岨のを里埒の藺住は仝て７
に層ｒ１１′主０−ベンゼン層には全く移行しなかった
。

試験例３（形態観察） ・方　法 酵母エキス１．０％、グルコース、３３．５％、寒天ｔ
、Ｓ％から成る平板寒天培地に、白金線を用いて菌株を
接種した後、３０℃、５日間静置培養し、コロニーの形
態を観察した。

・結　果 親株であるオーレオバシディウムｓｐ、　５Ｎ−１２４
Ａ菌株は、平板寒天培地上で表面がシワ状のコロニーを
生ずるが、本発明の変異株であるオーレオバシディウム
ｓｐ、　５Ｎ−６４２菌株は表面が平滑状のコロニーを
生じ、外観上著しく相違している。

実施例１（変異株の造成） オーレオバシディウムｓｐ、　５Ｎ−１２４Ａ菌株を酵
母エキス０．５％、グルコース２２％の培地で２日間前
培養したものを１００倍稀釈し、３０ｃｍの距離から１
５Ｗの紫外線ランプ（東芝殺菌灯ｒＧＬＩＪ　）を４０
分間照射する。これを稀釈後、寒天培地（酵母エキス１
．０％、グルコース３３．５％、寒天１．５％）に塗布
し、生育してくるものを選抜した。

次に、上記処理で選抜した菌株を再び２０分間紫外線照
射し、同様にして生育してくるものを選抜した。

更に、上記処理で選抜した菌株を１　ｍｇ／ｍｌ濃度の
Ｎ−メチル−Ｎ′−二トローＮ′−ニトロソグアニジン
で３０分間処理し、同様社して生育してくるものを選抜
して、変異株であるオーレオバシディウムｓｐ、　５Ｎ
−Ｇ４２菌株（ＦＥＲＭ　Ｐ−８９４０）を得ｋ。

実施例２ 生生１蓋旦１１ グルコース３３．５％、酵母エキス１．０％ｌ′Ｊｓ天
１．５％から成る斜面培地にオーレオバシディウムｓｐ
、　５Ｎ−０４２菌株（ＦＥＲＭ　Ｐ−８９４０）の菌
体を塗布し、３５℃で２〜３日間静置培養する。

次に、グルコース２０％、コーンスチーブリカー（玉子
コーンスターチ■製）１．６％を含む液体培地（ｐ）１
４．０）　ＩＳＯｍＮを入れた５０００容の三角フラス
コに上記培養菌体を１白金耳植菌し、３５℃で３日間培
養を行い、更に、この培養液９ｍｊを同様の液体培地１
５０ｆｌｌＪを入れた５０Ｏｅｊ容の三角フラスコに接
種し３５℃で３日間振盪培養することにより調製した。

本培養 グルコース２０．０％およびコーンスチープリカ−１，
６％を含む培地１５ｆｔを３０ｆｔ容の発酵槽に入れ、
消泡剤（「シリコーンＫＳ−６６Ｊ信越化学■製）３０
０ｐｐｍを加えたのち、１２０℃で２０分間蒸気滅菌す
る。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐＨを４．０
に調整したのち、これにオーレオパシデイウムｓｐ、　
５Ｎ−Ｇ４２菌株（ＦＥＲＭ　Ｐ−８９４０）の種培養
液６％を加え、温度３５℃、通気量０．２Ｓｖｖｉ＋　
％回転数２３Ｏｒｐｍの条件で７日間培養を行った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収率
は４９，３％、グリセリン収率は２．２％であった。

次に、この培養液の一部をとり、遠心分離により菌体を
除去し、更に活性炭による脱色およびイオン交換樹脂Ｃ
ＩＲＡ−４１０：　ＩＲ−１２０Ｂ　−２：　１　’）
辷よる脱塩を行った。溶出液を糖濃度５０％以上に濃縮
し、徐冷することによフて結晶を得、更に、この結晶を
水に溶解した後、同様の方法によって再結晶を行った。

得られた多面体様の白色結晶はされやかな甘味を有し、
その融点は１２１　ｔであった。更に、液体クロマトグ
ラフィー、ガスクロマトグラフィー旋光度及び核磁気共
鳴スペクトル等の測定を行った結果、上記結晶はエリス
リトールと同定された。

実施例３ グルコース２０．０％およびコーンスチープリカ−１，
６％を含む培地１５ＪＺを３０ｊ２容の発酵槽に入れ、
消泡剤３００ｐｐｍを加えたのち、１２０℃で２０分間
蒸気滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐ
＋を４．０に調整したのち、上記培地と同一組成の培地
を用いて実施例２の方法に従い調製したオーレオバシデ
ィウムｓｐ、　５Ｎ−６４２菌株（ＦＥＲＭＰ−８！１
４０）＜７３　ｉｍ　協春清６０Ａ　ｌ；ｆ加ｆｆ１−
温ｆｆ３５℃、通気量０．５０ｖｖｍ　、回転数２３０
ｒｐ−の条件で７日間培養を行った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収率
は４９．２％、グリセリン収率は１．２％であった。

実施例４ グルコース２０．０％およびコーンスチーブリカ−１，
６％を含む培地１５１を３０文容の発酵槽に入れ、消泡
剤３００ｐｐｍを加えたのち、１２０℃で２０分間蒸気
滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐＨを
４．０に調整したのち、上記培地と同一組成の培地を用
いて実施例２の方法に従い調製したオーレオパシディウ
ムｓｐ、　５Ｎ−Ｇ４２菌ｉ　（ＦＥＲＭＰ−８９４０
）の種培養液６％を加え、温度３５℃、通気量０．７５
ｖｖｍ　、回転数２３０ｒｐｍの条件で７日間培養を行
った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収率
Ｃ±４６−５％、グリセリンＵｖｍｔ士２．７％であっ
た。

実施例５ グルコース２０．０％およびコーンスチープリヵ−１，
６％を含む培地１５ｊ２を３（ＩＱ容の発酵槽に入れ、
消泡剤３００ｐｐｍを加えたのち、１２０　ｔで２０分
間蒸気滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地の
ｐＨを４．０に調整したのち、上記培地と同−組成の培
地を用いて実施例２の方法に従い調製したオーレオバシ
ディウムｓｐ、　５Ｎ−Ｇ４２菌株（ＦＥＲＭＰ−８９
４０）の種培養液６％を加え、温度３５℃、通気量１．
００ｖｖｍ　、回転数２３０ｒｐａ＋の条件で７日間培
養を行った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収率
は４１．８％、グリセリン収率は１．４％であった。

実施例６ グルコース３３．５％およびコーンスチーブリヵ−４，
４７％を含む培地５角を７角容の発酵槽に入れ、消泡剤
３００ｐｐｍを加えたのち、１２０　ｔで２０分間蒸気
滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐＨを
４．２に調整したのち、上記培地と同一組成の培地を用
いて実施例２の方法に従い調製したオーレオバシディウ
ムｓｐ、　５Ｎ−Ｇ４２菌株（ＦＥＲＭＰ−８９４０）
の種培養液６％を加え、温度３５℃、通気量０．２５ｖ
ｖｍ　、回転数５００ｒｐｍの条件で５日間培養を行っ
た。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収率
は３９．７％、グリセリン収率は７．９％であった。

実施例７ グルコース３９．５％およびコーンスチーブリヵ−４，
０％を含む培地５℃を７１Ｌ容の発酵槽に入れ、消泡剤
３００ｐｐｍを加えたのち、１２０　ｔで２０分間蒸気
滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐ）ｌ
を４．２に調整したのち、上記培地と同一組成の培地を
用いて実施例２の方法に従い調製したオーレオバシディ
ウムｓｐ、　５Ｎ−Ｇ４２菌株（ＦＥＲＭＰ−８９４０
）の種培養液６％を加え、温度３５℃、通気量０．２５
ｖｖ１１．回転数５００ｒｐｍの条件で６日間培養を行
った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収率
は３８．６％、グリセリン収率は９．５％であった。

実施例８ グルコース３９．５％およびコーンスチーブリカ−５，
３％を含む培地５２を７角容の発酵槽に入れ、消泡剤３
００ｐｐｍを加えたのち、１２０　ｔで２０分間蒸気滅
菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐＨを４
．２に調整したのち、上記培地と同一組成の培地を用い
て実施例２の方法に従い調製したオーレオバシディウム
ｓｐ、　５Ｎ−Ｇ４２菌株（ＦＥＲＭＰ−８９４０）の
種培養液６％を加え、温度３５℃、通気量０．２５ＶＶ
Ｏ１、回転数５００ｒｐｍの条件で５日間培養を行った
。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養７夜中のエリスリトール収
率は３７．５％、グリセリン収率は７．２％であった。

実施例９ グルコース３９．５％およびコーンスチーブリヵ−６，
６％を含む培地５ｉｌを７角容の発酵槽に入れ、消泡剤
３００ｐｐｍを加えたのち、１２０　’＋？：で２％分
間蒸気滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地の
ｐＨを４．２に調整したのち、上記培地と同一組成の培
地を用いて実施例２の方法に従い調製したオーレオバシ
ディウムｓｐ、　５Ｎ−Ｇ４２菌株（ＦＥＲＭＰ−８９
４０）の種培養液６％を加え、温度３５℃、通気量０．
２５ｖｖ＋ｎ　、回転数５００ｒｐｍの条件で４日間培
養を行った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収率
は３７．１％、グリセリン収率は４．８％であった。

実施例１０ グルコース４５．０％およびコーンスチーブリ力−６，
０％を含む培地１！［を３０ｆｌ容の発酵槽に入れ、消
泡剤３００ｐｐｍを加えたのち、１２０　’Ｃで２０分
間蒸気滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地の
ｐＨを４゜０に調整したのち、上記培地と同一組成の培
地を用いて実施例２の方法に従い調製したオーレオバシ
ディウムｓｐ、　５Ｎ−Ｇ４２菌株（ＦＥＲＭＰ−８９
４０）の種培養液６％を加え、温度３５℃、通気量０．
２５ｖｖｍ　、回転数２３０ｒｐ１１の条件で８日間培
養を行った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収率
は３７．３％、グリセリン収率は４．５％であった。

実施例１１ シュクロース３３．５％およびコーンスチーブリカ−４
，５％を含む培地５ｆｌを７Ｊ２容の発酵槽に入れ、消
泡剤３００ｐｐｍを加えたのち、１２０℃で２０分間蒸
気滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐＨ
を４．１に調整したのち、上記培地と同一組成の培地を
用いて実施例２の方法に従い調製したオーレオパシディ
ウムｓｐ、　５Ｎ−Ｇ４２菌株の種培養液６％を加え、
温度３５℃、通気量０．２５ｖｖ＊　、回転数５００ｒ
ｐｍの条件で６日間培養を行っｋ。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、シュクロース
は完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収
率は４１．９％、グリセリン収率は７．４％であった。

実施例１２ シュクロース３９．５％およびコーンスチープリカ−５
，３％を含む培地５ｊ２を７ｊ２容の発酵槽に入れ、消
泡剤３００ｐｐｍを加えたのち、１２０℃で２０分間蒸
気滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地の９Ｈ
を４．１に調整したのち、上記培地と同一組成の培地を
用いて実施例２の方法に従い調製したオーレオバシディ
ウムｓｐ、　５Ｎ−Ｇ４２菌株（ＦＥＢＭＰ−８９４０
）の種培養液６％を加え、温度３５℃、通気量０．２５
ｖｖｍ　、回転数５００ｒｐｍの条件で６日間培養を行
った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、シュクロース
は完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収
率は４２．４％、グリセリン収率は５．８％であった。

実施例１３ シュクロース４５６０％およびコーンスチープリカ−６
，０％を含む培地５ｆｌを７℃容の発酵槽に入れ、消泡
剤３００ｐｐｍを加えたのち、１２０℃で２０分間蒸気
滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐＨを
４．１に調整したのち、上記培地と同一組成の培地を用
いて実施例２の方法に従い調製したオーレオパシディウ
ムｓｐ、　５Ｎ−Ｇ４２菌株（ＦＥＲＭＰ−８９４０）
の種培養液６％を加え、温度３５℃、通気量０．２５ｖ
ｖｍ　、回転数５０Ｏｒｐｍ＋の条件で６日間培養を行
った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、シュクロース
は完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収
率は４１．７％、グリセリン収率は３．８％であった。

［発明の効果］ 本発明の新規微生物であるオーレオバシディウ′ムｓｐ
、　５Ｎ−６４２菌株は、耐糖性、耐熱性に優れ、エリ
スリトール生産能が高く、しかも発酵培養時に泡の発生
が極めて少ないので、工業的に利用する上で大変都合の
良いものである。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−Ｇ４２菌株を
   、発酵性糖類を主炭素源として含む培地に接種し、好気
   的に培養して培養液中にエリスリトールを生成蓄積せし
   め、これを採取することを特徴とする発酵によるエリス
   リトールの製造方法。