JPH0344400A - バクテリオロドプシンを含有する紫膜の製法 - Google Patents
バクテリオロドプシンを含有する紫膜の製法Info
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- JPH0344400A JPH0344400A JP2174654A JP17465490A JPH0344400A JP H0344400 A JPH0344400 A JP H0344400A JP 2174654 A JP2174654 A JP 2174654A JP 17465490 A JP17465490 A JP 17465490A JP H0344400 A JPH0344400 A JP H0344400A
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Classifications
-
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- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/215—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Halobacteriaceae (F)
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
〔従来の技術〕
バクテリオロドプシンは、ノ飄ロバクチリア例えばハロ
バクテリウム・ノ１０ビウム（Ｈａｌｏｂａｃｔｅ−ｒ
ｉｕｍ ｈａｌｏｂｉｕｍ）によシ形成される色素蛋白
質である。これは、蛋白質部分（バクテリオオシシン：
Ｂａｃｔ、ｅｒｉｏｏｐｓｉｎ ）及び発色団（レチ
ナール）ようなシ、・・ロバクチリアの細胞膜中ば、い
わゆる紫膜（以後これをＰＭとも略記する）の形で存在
する。バクテリオロドプシンは、ＰＭ中に、２次元結晶
性で六方格子の形で配置されている。その物理特性に基
づき、バクテリオロドプシンは、ビオコンピュータ中で
（Ｂｉｏｓｙｓ シｅｍｓ１９８（Ｓ、１９．２２３−
２３６参照）又は、光学的情報作業にかけるホログラフ
ィ供給材料として（Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃｓ １９８５．
３０ （５）、９６２〜９６７参照）使用できる。し
かしながら、このためには、多量の紫膜を取得できるこ
とが必要である。紫膜とバクテリオロドプシンを含有し
ない汚染膜フラグメントとの僅かな物理的差異に基づき
、紫膜を汚染フラグメントから分離するのは困難である
。
バクテリウム・ノ１０ビウム（Ｈａｌｏｂａｃｔｅ−ｒ
ｉｕｍ ｈａｌｏｂｉｕｍ）によシ形成される色素蛋白
質である。これは、蛋白質部分（バクテリオオシシン：
Ｂａｃｔ、ｅｒｉｏｏｐｓｉｎ ）及び発色団（レチ
ナール）ようなシ、・・ロバクチリアの細胞膜中ば、い
わゆる紫膜（以後これをＰＭとも略記する）の形で存在
する。バクテリオロドプシンは、ＰＭ中に、２次元結晶
性で六方格子の形で配置されている。その物理特性に基
づき、バクテリオロドプシンは、ビオコンピュータ中で
（Ｂｉｏｓｙｓ シｅｍｓ１９８（Ｓ、１９．２２３−
２３６参照）又は、光学的情報作業にかけるホログラフ
ィ供給材料として（Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃｓ １９８５．
３０ （５）、９６２〜９６７参照）使用できる。し
かしながら、このためには、多量の紫膜を取得できるこ
とが必要である。紫膜とバクテリオロドプシンを含有し
ない汚染膜フラグメントとの僅かな物理的差異に基づき
、紫膜を汚染フラグメントから分離するのは困難である
。
Ｄ、エステルヘルド（○ｅｓ シｅｒｈｅｌ Ｌ） 、
Ｗ、ステクケニウス（Ｓ ｔｏｅｃｋｅｎｉｕｓ ）に
よるネイチュア（Ｎａ ｔｕｒｅ ）１９７１．２３３
．１４９〜１５４もしくは、メソツズ・イカエンツイモ
ロゾイ（Ｍｅ ｂｈｏｓ ｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇＹ）
１９７４＝ ３１ 、６６７〜６７８によれば、サ
ッカロース比重勾配０．５〜１．５Ｍもしくはサッカロ
ース３０〜５０重量予中で紫膜の遠心による製造を実施
することは公知である。Ｂ、Ｍ、ベツヒヤー（Ｂｅｃｈ
ｅｒ） Ｊ 、Ｙ、カラム（ｃａｓｓｉｍ）のプレパラ
テイデ・ビオケミストリイ（Ｐｒｅｐａｒａ−ｔ、ｉｖ
ｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ） １９７５ ｅ ５
（２） ？ １６１〜１７８には、サッカロース４５
．４０，３８゜３６及び１６重量％を有するサッカロー
ス段階的勾配液を用いる紫膜の遠心が記載されている。
Ｗ、ステクケニウス（Ｓ ｔｏｅｃｋｅｎｉｕｓ ）に
よるネイチュア（Ｎａ ｔｕｒｅ ）１９７１．２３３
．１４９〜１５４もしくは、メソツズ・イカエンツイモ
ロゾイ（Ｍｅ ｂｈｏｓ ｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇＹ）
１９７４＝ ３１ 、６６７〜６７８によれば、サ
ッカロース比重勾配０．５〜１．５Ｍもしくはサッカロ
ース３０〜５０重量予中で紫膜の遠心による製造を実施
することは公知である。Ｂ、Ｍ、ベツヒヤー（Ｂｅｃｈ
ｅｒ） Ｊ 、Ｙ、カラム（ｃａｓｓｉｍ）のプレパラ
テイデ・ビオケミストリイ（Ｐｒｅｐａｒａ−ｔ、ｉｖ
ｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ） １９７５ ｅ ５
（２） ？ １６１〜１７８には、サッカロース４５
．４０，３８゜３６及び１６重量％を有するサッカロー
ス段階的勾配液を用いる紫膜の遠心が記載されている。
この勾配遠心にかける高い装置経費に基づき、例えば超
遠心が必要であシ、バクテリオロドプシンの所望量に関
連する変動性の規模拡大は不可能でアシ、これにより、
１操作当シの比較的少量のＰＭのみが単離される。
遠心が必要であシ、バクテリオロドプシンの所望量に関
連する変動性の規模拡大は不可能でアシ、これにより、
１操作当シの比較的少量のＰＭのみが単離される。
更ニ、サッカロース勾配液の製造及び得られＰＭからの
使用サッカロースの除去は、時間集中性の操作工程であ
る。
使用サッカロースの除去は、時間集中性の操作工程であ
る。
ａ）公知方法でハロバクテリアの細胞から細胞膜を取得
し、 ｂ）この細胞膜から紫膜を単離するために、ゲル濾過ク
ロマトグラフィを実施する ことよりなる。
し、 ｂ）この細胞膜から紫膜を単離するために、ゲル濾過ク
ロマトグラフィを実施する ことよりなる。
この細胞膜の製造のために、ハロバクテリア例えばハロ
バクテリウム・ハロビウムを公知方法で、紫膜形成に好
適な条件例えば培地の低−酸素含分及び光の条件下に培
養する（Ｄ、Ｏｅｓ シｅｒ−ｈｅｌｔ＋ Ｗ、５Ｌ
ｏｅｃｋｅｎｉｕｓ、 Ｍｅｔ、ｈｏｄｓ ｉ
ｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ１９７・４，３１，６６７
〜６７８参照）。適当な培養時間の後に、細胞を例えば
遠心によシ収獲する。得られる細胞から公知方法で細胞
膜を取得する。脱イオン水に対する透析及び引続く遠心
による細胞膜の収集を実施するのが有利である。引続き
この紫膜を含有する膜フラクションを有利に脱イオン水
で洗浄する。
バクテリウム・ハロビウムを公知方法で、紫膜形成に好
適な条件例えば培地の低−酸素含分及び光の条件下に培
養する（Ｄ、Ｏｅｓ シｅｒ−ｈｅｌｔ＋ Ｗ、５Ｌ
ｏｅｃｋｅｎｉｕｓ、 Ｍｅｔ、ｈｏｄｓ ｉ
ｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ１９７・４，３１，６６７
〜６７８参照）。適当な培養時間の後に、細胞を例えば
遠心によシ収獲する。得られる細胞から公知方法で細胞
膜を取得する。脱イオン水に対する透析及び引続く遠心
による細胞膜の収集を実施するのが有利である。引続き
この紫膜を含有する膜フラクションを有利に脱イオン水
で洗浄する。
この細胞膜フラクションを本発明の方法で、クロマトグ
ラフィカラム（有利に２．１０’〜１０９ 殊に１０７
〜１０９の分子量に関する排除限界を有するゲル濾過物
質が充填されている）にかけ、有利に水（これは特に０
．０５〜５μＳ／□□□、殊に０．１〜１．０μＳ／ｃ
ＩＩＬの有利な比導電率及び有利に６．０〜７．５殊に
６．３〜６．７の一値を示す）を用い、有利に１〜３０
℃殊に４〜１００Ｃの温度で溶離させる。
ラフィカラム（有利に２．１０’〜１０９ 殊に１０７
〜１０９の分子量に関する排除限界を有するゲル濾過物
質が充填されている）にかけ、有利に水（これは特に０
．０５〜５μＳ／□□□、殊に０．１〜１．０μＳ／ｃ
ＩＩＬの有利な比導電率及び有利に６．０〜７．５殊に
６．３〜６．７の一値を示す）を用い、有利に１〜３０
℃殊に４〜１００Ｃの温度で溶離させる。
このクロマトグラフィカラムの長さ及び直径は任意に変
えることができ、精製すべき細胞膜の量と関連する。例
えば細胞膜１０〜１００■の量に対しては、長さ５０〜
１ｏｏｃＴＬ及び直径１．５〜５ｃｍのカラムが効を奏
する。
えることができ、精製すべき細胞膜の量と関連する。例
えば細胞膜１０〜１００■の量に対しては、長さ５０〜
１ｏｏｃＴＬ及び直径１．５〜５ｃｍのカラムが効を奏
する。
使用すべき分離剤の量は、有利に精製すべき細胞膜１Ｔ
ｎｇ当り５〜１５ｍｊ、殊に９〜１１Ｔｎｔ／ｍ９であ
る。
ｎｇ当り５〜１５ｍｊ、殊に９〜１１Ｔｎｔ／ｍ９であ
る。
溶離速度は、有利に０．２５〜１６ｃＩＩＬ／ｈ殊に０
．５〜６ｃ１ｎ／ｈであシ、この際０〜５バールの過圧
殊に０〜５００ｍバールの過圧範囲で操作するのが有利
である。
．５〜６ｃ１ｎ／ｈであシ、この際０〜５バールの過圧
殊に０〜５００ｍバールの過圧範囲で操作するのが有利
である。
粒径２０〜１５０μｍ殊に４０〜１０５μｍのゲル濾過
材料を使用するのが有利である。
材料を使用するのが有利である。
本発明により使用されるゲル濾過材料は、従来もゲル濾
過のために使用されていたものである。架橋された又は
されていないデキストラン、アガロース誘導体又は、オ
リゴエチレングリコール、グリシジルメタクリレート及
びペンタエリスリトールジメタクリレートのコポリマー
を使用するのが有利である。
過のために使用されていたものである。架橋された又は
されていないデキストラン、アガロース誘導体又は、オ
リゴエチレングリコール、グリシジルメタクリレート及
びペンタエリスリトールジメタクリレートのコポリマー
を使用するのが有利である。
特に有利なゲル濾過材料は、セファクリル（Ｓｅｐｈａ
ｃｒｙｌ） Ｓ １０００ （これはＦｉｒｍａ Ｐｈ
ａｒ−ｍａｃｉａ Ａ Ｂ 、 Ｕｐｐｓａｌａ、 Ｓ
ｃｈｗｅｄｅｎ社の登録商標である）、ビオデ＃ （Ｂ
ｉｏ（）ｅｌ） Ａ Ｉ ５０ ｍ （これは、Ｆｉｒ
ｍａ ＢｉｏＲａｄ Ｌａｂｏｒａｔ、ｏｒｉｅｓ、Ｒ
ｉｃｈｍｏｎｄ、Ｋａｌｉｆｏｒｎｉａ、 ＵＳＡ社の
登録商標である）及びフラクトｌ’ ル（Ｆｒａｃｂｏ
ｇｅｌ） ＴＳＫ ＨＷ ７５ （これは、Ｆｉｒｍａ
Ｍｅｒｃｋ、 ＤａｒｍｓＦＪａｄｔ、 ＢＲＤ社の
登録商標である）である。
ｃｒｙｌ） Ｓ １０００ （これはＦｉｒｍａ Ｐｈ
ａｒ−ｍａｃｉａ Ａ Ｂ 、 Ｕｐｐｓａｌａ、 Ｓ
ｃｈｗｅｄｅｎ社の登録商標である）、ビオデ＃ （Ｂ
ｉｏ（）ｅｌ） Ａ Ｉ ５０ ｍ （これは、Ｆｉｒ
ｍａ ＢｉｏＲａｄ Ｌａｂｏｒａｔ、ｏｒｉｅｓ、Ｒ
ｉｃｈｍｏｎｄ、Ｋａｌｉｆｏｒｎｉａ、 ＵＳＡ社の
登録商標である）及びフラクトｌ’ ル（Ｆｒａｃｂｏ
ｇｅｌ） ＴＳＫ ＨＷ ７５ （これは、Ｆｉｒｍａ
Ｍｅｒｃｋ、 ＤａｒｍｓＦＪａｄｔ、 ＢＲＤ社の
登録商標である）である。
例 １（比較例）
ハロバクテリウム・ハロビウムの細、抱ペースト １
３ ｇ ｔ−ＮａＣ１２５０ｇ ／ｆｆｌ 、Ｍｔｓ
ｏ、−７７Ｈ２Ｏ２０／１３、クエンぼ５ナトリウム３
ｇ／−ｅ及びＫｃ１２ｇ／−ｅからなる溶液９Ｑｒｎｌ
で再懸濁させ、シンキシリボヌクレアーゼ５ｒｎ９を加
え、１時間攪拌した。この細胞懸濁液を引続き１６時間
脱イオン水に対して透析させた。透析物を７６００ｑで
１０分間遠心し、膜の製造のための上澄みを３８０００
ｑで３０分間遠心した。
３ ｇ ｔ−ＮａＣ１２５０ｇ ／ｆｆｌ 、Ｍｔｓ
ｏ、−７７Ｈ２Ｏ２０／１３、クエンぼ５ナトリウム３
ｇ／−ｅ及びＫｃ１２ｇ／−ｅからなる溶液９Ｑｒｎｌ
で再懸濁させ、シンキシリボヌクレアーゼ５ｒｎ９を加
え、１時間攪拌した。この細胞懸濁液を引続き１６時間
脱イオン水に対して透析させた。透析物を７６００ｑで
１０分間遠心し、膜の製造のための上澄みを３８０００
ｑで３０分間遠心した。
得られた膜沈殿物を比導電率０．１μｓ／ｃ！ｎを有す
る水８Ｑｒｎｌで洗浄し、改めて３８０００ｑで遠心す
る。ｐＭ２０１ｎ９を含有する沈殿を脱イオン水３ ｒ
ｎｌ中に入れ、サッカロース含有率５０〜５０ＣＷ／Ｖ
）％（Ｄ 各２８ ｍｌ量のサッカロース比重勾配液合
計５個上に装入した。この比重勾配液を次いで１０００
００ｑで１６時間超遠心によシ遠心した。次いでこの比
重勾配液を分別し、ＰＭ含有フラクションを集め、２倍
量の脱イオン水で稀釈した。稀ＰＭｇ濁液を、３８００
０ｑで３０分間遠心し、得られるＰＭｓを再度読イオ：
’７に１００ｍで洗浄し、改めてり８０００（１で３０
分間遠心し、、た。これから得られる沈殿を少量の脱イ
オン水中に入れた。ＰＭ１４”９を得ることができた。
る水８Ｑｒｎｌで洗浄し、改めて３８０００ｑで遠心す
る。ｐＭ２０１ｎ９を含有する沈殿を脱イオン水３ ｒ
ｎｌ中に入れ、サッカロース含有率５０〜５０ＣＷ／Ｖ
）％（Ｄ 各２８ ｍｌ量のサッカロース比重勾配液合
計５個上に装入した。この比重勾配液を次いで１０００
００ｑで１６時間超遠心によシ遠心した。次いでこの比
重勾配液を分別し、ＰＭ含有フラクションを集め、２倍
量の脱イオン水で稀釈した。稀ＰＭｇ濁液を、３８００
０ｑで３０分間遠心し、得られるＰＭｓを再度読イオ：
’７に１００ｍで洗浄し、改めてり８０００（１で３０
分間遠心し、、た。これから得られる沈殿を少量の脱イ
オン水中に入れた。ＰＭ１４”９を得ることができた。
例 ２
ハロバクテリウム・ハロピウムの細胞ペースト ３ ５
５”！ｒＮａｃｔ ２ ５ ０ ｇ ／ ｌｚ
％ＳＯｖ ７Ｈ２０２０９／ｌ、クエン酸三ナトリウム
３ｇ／／ｌ及びＫＣｌ２ｇ／ｌからなる溶液２７０ｄで
再懸濁させ、デソキシリボヌクレアーゼ１５ｍ９を加え
、１時間遺拌した。引続き、この細胞懸濁液を脱イオン
水に対して１６時間透析させた。透析物を７６００ｑで
１０分間遠心し、膜製造用上澄みを３８０００ｑで３０
分間遠心した。得られた膜沈殿物を、比導電率Ｑ、１ｔ
ｔＳ／ｃｍ及びｐ）ｌ ６．７を有する水２４０ｄで洗
浄し、改めて３８０００（１で遠心した。ＰＭ８０ｒｎ
９を含有するこの沈殿を前記の純度及び−値を有する水
７−中に入れ、比導電率０．１μＳ／ｃＩｎ及び−６，
７の水で平衡化されたセファクリル３１０００の充填さ
れた長さ７ＳｃＩｒ１及び直径５．０αのカラム上に装
入した。
５”！ｒＮａｃｔ ２ ５ ０ ｇ ／ ｌｚ
％ＳＯｖ ７Ｈ２０２０９／ｌ、クエン酸三ナトリウム
３ｇ／／ｌ及びＫＣｌ２ｇ／ｌからなる溶液２７０ｄで
再懸濁させ、デソキシリボヌクレアーゼ１５ｍ９を加え
、１時間遺拌した。引続き、この細胞懸濁液を脱イオン
水に対して１６時間透析させた。透析物を７６００ｑで
１０分間遠心し、膜製造用上澄みを３８０００ｑで３０
分間遠心した。得られた膜沈殿物を、比導電率Ｑ、１ｔ
ｔＳ／ｃｍ及びｐ）ｌ ６．７を有する水２４０ｄで洗
浄し、改めて３８０００（１で遠心した。ＰＭ８０ｒｎ
９を含有するこの沈殿を前記の純度及び−値を有する水
７−中に入れ、比導電率０．１μＳ／ｃＩｎ及び−６，
７の水で平衡化されたセファクリル３１０００の充填さ
れた長さ７ＳｃＩｒ１及び直径５．０αのカラム上に装
入した。
溶離は、５°Ｃで１時間当シ２ｃＩｎｏ溶離速度で実施
した。ＰＭ−含有フラクションを集め、ＰＭｔ−３８０
００ｑで３０分間の遠心することにより取得した。紫膜
６０Ｔｎ９を得ることができた。
した。ＰＭ−含有フラクションを集め、ＰＭｔ−３８０
００ｑで３０分間の遠心することにより取得した。紫膜
６０Ｔｎ９を得ることができた。
この膜の光学的スペクトルは、バクテリオロドプシンの
それと一致し、汚染物を認めることはできなかった。
それと一致し、汚染物を認めることはできなかった。
例 ろ
例２と同様に実施するが、カラムクロマトグラフィに訃
ける溶離速度は１時間当Ｆ）５．７ｍｌであった。カラ
ムクロマトグラフィで９０％の収率に相当する紫膜７２
即を得ることができた。
ける溶離速度は１時間当Ｆ）５．７ｍｌであった。カラ
ムクロマトグラフィで９０％の収率に相当する紫膜７２
即を得ることができた。
例 ４
ハロバクテリウム・ハロビウムの細胞ペースト １ ４
ｆｊ ｅＮａｃｔ ２ ５ ０ ｇ ／ ｌ
Ｘ ＭｇＳＯ４・ ７７Ｈ２Ｏ２０／ｌ、クエン酸三ナ
トリウム３ｊｊ／ｌ及ＵＫｃｌ ２ ｇ ／ ｌ カｃ
：ｙノｍｒＬ９ ａｉテ再懸濁させ、シンキシリボヌク
レアーゼ５ｒｎ９ｆ：加え、１時間攪拌した。この細胞
ＷＡ／Ｉｌ液を引続き脱イオン水に対して１６時間透析
させた。透析物を７６００ｑで１０分間遠心し、膜製造
用の上澄みを３８０００ｑで３０分間遠心させた。得ら
れた膜沈殿物を比導電率０．１μｓ／ｃｒｎを有する水
８Ｑ ｍｌで洗浄し、改めて３８０００ｑで遠心した。
ｆｊ ｅＮａｃｔ ２ ５ ０ ｇ ／ ｌ
Ｘ ＭｇＳＯ４・ ７７Ｈ２Ｏ２０／ｌ、クエン酸三ナ
トリウム３ｊｊ／ｌ及ＵＫｃｌ ２ ｇ ／ ｌ カｃ
：ｙノｍｒＬ９ ａｉテ再懸濁させ、シンキシリボヌク
レアーゼ５ｒｎ９ｆ：加え、１時間攪拌した。この細胞
ＷＡ／Ｉｌ液を引続き脱イオン水に対して１６時間透析
させた。透析物を７６００ｑで１０分間遠心し、膜製造
用の上澄みを３８０００ｑで３０分間遠心させた。得ら
れた膜沈殿物を比導電率０．１μｓ／ｃｒｎを有する水
８Ｑ ｍｌで洗浄し、改めて３８０００ｑで遠心した。
ＰＭ２０ｍ９を含有する沈殿を前記純度及び−値の水２
．５ｍｌ中に入れ、比導電率０．１μＳ／ｃｒｎ及び−
値６．６を有する水で平衡化されたセフアク・リル８１
０００の充填された長さ６００ｍ及び直径２．５ｃｍの
カラムに装入した。５°Ｃで溶離速度４．６ｃ１ｎ／
ｂで溶離を行なった。ＰＭ含有７ラクシヨンを集め、こ
のＰＭを３８０００ｑで３０分間の遠心によシ取得した
。紫膜１５ｒｎ９を得ることができた。
．５ｍｌ中に入れ、比導電率０．１μＳ／ｃｒｎ及び−
値６．６を有する水で平衡化されたセフアク・リル８１
０００の充填された長さ６００ｍ及び直径２．５ｃｍの
カラムに装入した。５°Ｃで溶離速度４．６ｃ１ｎ／
ｂで溶離を行なった。ＰＭ含有７ラクシヨンを集め、こ
のＰＭを３８０００ｑで３０分間の遠心によシ取得した
。紫膜１５ｒｎ９を得ることができた。
この膜の光学スペクトルは、バクテリオロドゾを
シンのそれと一致し、汚染物蝶認めることができなかっ
た。
た。
例 ５
実施法は例４に相当したが、この際クロマトグラフィを
１０℃で実施した。紫膜１８■を得ることができ、これ
はカラムクロマトグラフイで８０％の収率に相当した。
１０℃で実施した。紫膜１８■を得ることができ、これ
はカラムクロマトグラフイで８０％の収率に相当した。
率は０，８μＳ／ｃＩ！１であシー値は６．５であった
。
。
ｐＭ１６＋９が得られ、これはカラムクロマトグラフィ
で８２％の収率に相当した。
で８２％の収率に相当した。
例 ７
実施法は例４に相当したが七７アクリル８１００口で充
填された長さ８０傭及び直径２５鼾のカラムでクロマト
グラフィにかけた。紫膜１！Ｉｌｌを得ることができ、
これは、カラムクロマトグラフィで８５′多の収率に相
当した。
填された長さ８０傭及び直径２５鼾のカラムでクロマト
グラフィにかけた。紫膜１！Ｉｌｌを得ることができ、
これは、カラムクロマトグラフィで８５′多の収率に相
当した。
例 ８
実施法は例４に相当したが分離剤として、メルク社（Ｆ
ｉｒｍａ Ｍｅｒｃｋ、 Ｄａｒｍｓｔ、ａｄＬ、ＢＲ
Ｄ）の’ｒｓＫＨＷ ７５を使用した。紫膜１７ηを得
ることができた。カラムクロマドグ５フイでの収率は６
０％であった。
ｉｒｍａ Ｍｅｒｃｋ、 Ｄａｒｍｓｔ、ａｄＬ、ＢＲ
Ｄ）の’ｒｓＫＨＷ ７５を使用した。紫膜１７ηを得
ることができた。カラムクロマドグ５フイでの収率は６
０％であった。
例 ９
実施法は例４に相当したが、溶離液として−６，５の燐
酸塩緩衝液５ μｍを使用した。
酸塩緩衝液５ μｍを使用した。
紫膜
８ｒｎ９が得られた。
収率は８
優であった。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、ハロバクテリアの細胞からバクテリオロドプシンを
含有する紫膜を製造する場合に、ａ）公知方法でハロバ
クテリアの細胞の細胞膜を取得し、 ｂ）この細胞膜から紫膜を単離するために、ゲル濾過ク
ロマトグラフィを実施することを特徴とする、バクテリ
オロドプシンを含有する紫膜の製法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3922133A DE3922133A1 (de) | 1989-07-05 | 1989-07-05 | Verfahren zur herstellung von purpurmembran enthaltend bacteriorhodopsin |
| DE3922133.4 | 1989-07-05 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0344400A true JPH0344400A (ja) | 1991-02-26 |
| JPH0768268B2 JPH0768268B2 (ja) | 1995-07-26 |
Family
ID=6384366
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2174654A Expired - Lifetime JPH0768268B2 (ja) | 1989-07-05 | 1990-07-03 | バクテリオロドプシンを含有する紫膜の製法 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5079149A (ja) |
| EP (1) | EP0406850B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0768268B2 (ja) |
| DE (2) | DE3922133A1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100461906B1 (ko) * | 2001-09-12 | 2004-12-14 | 비케이비 주식회사 | 할로박테리움 속 미생물을 이용한 박테리오로돕신의제조방법 |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE4130380A1 (de) * | 1991-09-12 | 1993-03-18 | Consortium Elektrochem Ind | Purpurmembran-zubereitungen mit erhoehter holographischer beugungseffizienz |
| DE4300649C2 (de) * | 1993-01-08 | 2000-05-25 | Fzb Biotechnik Gmbh | Herstellung von strahlungsempfindliche Biomoleküle enthaltendem Material |
| US5518858A (en) * | 1994-05-26 | 1996-05-21 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Commerce | Photochromic compositions and materials containing bacteriorhodopsin |
| IL118715A0 (en) * | 1996-06-24 | 1996-10-16 | Louis Aharon | Optically computing mathematical functions of importance in imaging with a photochromic film |
| US6140012A (en) * | 1998-05-11 | 2000-10-31 | Bend Research, Inc. | Bacteriorhodopsin preparations having increased information storage times |
| DE19945798C1 (de) * | 1999-09-24 | 2000-10-26 | Fraunhofer Ges Forschung | Verfahren zur Gewinnung von Bakteriorhodopsin |
| RU2303977C2 (ru) * | 2005-07-22 | 2007-08-10 | Евгений Петрович Гребенников | Способ получения липосомальных препаратов |
| JP5893010B2 (ja) | 2010-06-18 | 2016-03-23 | ウー‐ニカ テクノロギー アーゲー | バクテリオロドプシンを含む製剤を基板に塗布する方法、およびこの方法により製造される製品 |
| EP3012784B1 (de) | 2014-10-24 | 2017-02-15 | Actilor Intellectual Asset AG | Selektiv optisch auslesbarer Datenträger |
-
1989
- 1989-07-05 DE DE3922133A patent/DE3922133A1/de not_active Withdrawn
-
1990
- 1990-04-17 US US07/510,605 patent/US5079149A/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-07-03 JP JP2174654A patent/JPH0768268B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1990-07-05 EP EP90112805A patent/EP0406850B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1990-07-05 DE DE90112805T patent/DE59004588D1/de not_active Expired - Lifetime
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| METHODS ENZYMOL=1974 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100461906B1 (ko) * | 2001-09-12 | 2004-12-14 | 비케이비 주식회사 | 할로박테리움 속 미생물을 이용한 박테리오로돕신의제조방법 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0406850A1 (de) | 1991-01-09 |
| US5079149A (en) | 1992-01-07 |
| EP0406850B1 (de) | 1994-02-16 |
| JPH0768268B2 (ja) | 1995-07-26 |
| DE59004588D1 (de) | 1994-03-24 |
| DE3922133A1 (de) | 1991-01-17 |
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