JPH0768268B2 - バクテリオロドプシンを含有する紫膜の製法 - Google Patents
バクテリオロドプシンを含有する紫膜の製法Info
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- JPH0768268B2 JPH0768268B2 JP2174654A JP17465490A JPH0768268B2 JP H0768268 B2 JPH0768268 B2 JP H0768268B2 JP 2174654 A JP2174654 A JP 2174654A JP 17465490 A JP17465490 A JP 17465490A JP H0768268 B2 JPH0768268 B2 JP H0768268B2
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-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/215—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Halobacteriaceae (F)
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Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、バクテリオロドプシンを含有する紫膜の製法
に関する。
に関する。
バクテリオロドプシンは、ハロバクテリア例えばハロバ
クテリウム・ハロビウム（Halobacterium halobium）に
より形成される色素蛋白質である。これは、蛋白質部分
（バクテリオオプシン:Bacterioopsin）及び発色団（レ
チナール）よりなり、ハロバクテリアの細胞膜中に、い
わゆる紫膜（以後これをPMとも略記する）の形で存在す
る。バクテリオロドプシンは、PM中に、２次元結晶性で
六方格子の形で配置されている。その物理特性に基づ
き、バクテリオロドプシンは、ビオコンピュータ中で
（Biosystems1986,19,223−236参照）又は、光学的情報
作業におけるホログラフイ供給材料として（Biophysics
1985,30（５）、962〜967参照）使用できる。しかしな
がら、このためには、多量の紫膜を取得できることが必
要である。紫膜とバクテリオロドプシンを含有しない汚
染膜フラグメントとの僅かな物理的差異に基づき、紫膜
を汚染フラグメントから分離するのは困難である。
クテリウム・ハロビウム（Halobacterium halobium）に
より形成される色素蛋白質である。これは、蛋白質部分
（バクテリオオプシン:Bacterioopsin）及び発色団（レ
チナール）よりなり、ハロバクテリアの細胞膜中に、い
わゆる紫膜（以後これをPMとも略記する）の形で存在す
る。バクテリオロドプシンは、PM中に、２次元結晶性で
六方格子の形で配置されている。その物理特性に基づ
き、バクテリオロドプシンは、ビオコンピュータ中で
（Biosystems1986,19,223−236参照）又は、光学的情報
作業におけるホログラフイ供給材料として（Biophysics
1985,30（５）、962〜967参照）使用できる。しかしな
がら、このためには、多量の紫膜を取得できることが必
要である。紫膜とバクテリオロドプシンを含有しない汚
染膜フラグメントとの僅かな物理的差異に基づき、紫膜
を汚染フラグメントから分離するのは困難である。
D.エステルヘルト（Oesterhelt）、W.ステツケニウス
（Stoeckenius）によるネイチユア（Nature）1971,233,
149〜154もしくは、メソツズ・イン・エンツイモロジイ
（Methos in Enzymogy）1974,31,667〜678によれば、サ
ツカロース比重勾配0.5〜1.5Mもしくはサツカロース30
〜50重量％中で紫膜の遠心による製造を実施することは
公知である。B.M.ベツヒヤー（Becher）J.Y.カシム（ca
ssim）のプレパラテイブ・ビオケミストリイ（Preparat
ive Biochemistry）1975,5（２）,161〜178には、サツ
カロース45,40,38,36及び16重量％を有するサツカロー
ス段階的勾配液を用いる紫膜の遠心が記載されている。
（Stoeckenius）によるネイチユア（Nature）1971,233,
149〜154もしくは、メソツズ・イン・エンツイモロジイ
（Methos in Enzymogy）1974,31,667〜678によれば、サ
ツカロース比重勾配0.5〜1.5Mもしくはサツカロース30
〜50重量％中で紫膜の遠心による製造を実施することは
公知である。B.M.ベツヒヤー（Becher）J.Y.カシム（ca
ssim）のプレパラテイブ・ビオケミストリイ（Preparat
ive Biochemistry）1975,5（２）,161〜178には、サツ
カロース45,40,38,36及び16重量％を有するサツカロー
ス段階的勾配液を用いる紫膜の遠心が記載されている。
この勾配遠心における高い装置経費に基づき、例えば超
遠心が必要であり、バクテリオロドプシンの所望量に関
連する変動性の規模拡大は不可能であり、これにより、
１操作当りの比較的少量のPMのみが単離される。
遠心が必要であり、バクテリオロドプシンの所望量に関
連する変動性の規模拡大は不可能であり、これにより、
１操作当りの比較的少量のPMのみが単離される。
更に、サツカロース勾配液の製造及び得られたPMからの
使用サツカロースの除去は、時間集中性の操作工程であ
る。
使用サツカロースの除去は、時間集中性の操作工程であ
る。
本発明の課題は、バクテリオロドプシン含有紫膜の製法
であり、これは ａ） 公知方法でハロバクテリアの細胞から細胞膜を取
得し、 ｂ） この細胞膜から紫膜を単離するために、ゲル濾過
クロマトグラフイを実施する ことよりなる。
であり、これは ａ） 公知方法でハロバクテリアの細胞から細胞膜を取
得し、 ｂ） この細胞膜から紫膜を単離するために、ゲル濾過
クロマトグラフイを実施する ことよりなる。
その際、ａ）で得られた細胞膜の水性粒子懸濁液をゲル
濾過クロマトグラフィ上に装入し、カラムからの水性流
出液を用いて紫膜を粒子懸濁液として取得する。
濾過クロマトグラフィ上に装入し、カラムからの水性流
出液を用いて紫膜を粒子懸濁液として取得する。
この細胞膜の製造のために、ハロバクテリア例えばハロ
バクテリウム・ハロビウムを公知方法で、紫膜形成に好
適な条件例えば培地の低い酸素含分及び光の条件下に培
養する（D.Oesterhelt.W.Stoeckenius,Methods in Enzy
mology1974,31,667〜678参照）。適当な培養時間の後
に、細胞を例えば遠心により収穫する。得られる細胞か
ら公知方法で細胞膜を取得する。脱イオン水に対する透
析及び引続く遠心による細胞膜の収集を実施するのが有
利である。引続きこの紫膜を含有する膜フラクシヨンを
有利に脱イオン水で洗浄する。
バクテリウム・ハロビウムを公知方法で、紫膜形成に好
適な条件例えば培地の低い酸素含分及び光の条件下に培
養する（D.Oesterhelt.W.Stoeckenius,Methods in Enzy
mology1974,31,667〜678参照）。適当な培養時間の後
に、細胞を例えば遠心により収穫する。得られる細胞か
ら公知方法で細胞膜を取得する。脱イオン水に対する透
析及び引続く遠心による細胞膜の収集を実施するのが有
利である。引続きこの紫膜を含有する膜フラクシヨンを
有利に脱イオン水で洗浄する。
この細胞膜フラクシヨンを本発明の方法で、クロマトグ
ラフイカラム（有利に2.106〜109、殊に107〜109の分子
量に関する排除限界を有するゲル濾過質が充填されてい
る）にかけ、有利に水（これは特に0.05〜５μS/cm、殊
に0.1〜1.0μS/cmの有利な比導電率及び有利に6.0〜7.5
殊に6.3〜6.7のpH値を示す）を用い、有利に１〜30℃殊
に４〜10℃の温度で溶離させる。
ラフイカラム（有利に2.106〜109、殊に107〜109の分子
量に関する排除限界を有するゲル濾過質が充填されてい
る）にかけ、有利に水（これは特に0.05〜５μS/cm、殊
に0.1〜1.0μS/cmの有利な比導電率及び有利に6.0〜7.5
殊に6.3〜6.7のpH値を示す）を用い、有利に１〜30℃殊
に４〜10℃の温度で溶離させる。
このクロマトグラフイカラムの長さ及び直径は任意に変
えることができ、精製すべき細胞膜の量と関連する。例
えば細胞膜10〜100mgの量に対しては、長さ50〜100cm及
び直径1.5〜5cmのカラムが効を奏する。
えることができ、精製すべき細胞膜の量と関連する。例
えば細胞膜10〜100mgの量に対しては、長さ50〜100cm及
び直径1.5〜5cmのカラムが効を奏する。
使用すべき分離剤の量は、有利に精製すべき細胞膜1mg
当り５〜15ml、殊に９〜11ml/mgである。
当り５〜15ml、殊に９〜11ml/mgである。
溶離速度は、有利に0.25〜16cm/h殊に0.5〜6cm/hであ
り、この際０〜５バールの過圧殊に０〜500mバールの過
圧範囲で操作するのが有利である。
り、この際０〜５バールの過圧殊に０〜500mバールの過
圧範囲で操作するのが有利である。
粒径20〜150μｍ殊に40〜105μｍのゲル濾過材料を使用
するのが有利である。
するのが有利である。
本発明により使用されるゲル濾過材料は、従来もゲル濾
過のために使用されていたものである。架橋された又は
されていないデキストラン、アガロース誘導体又は、オ
リゴエチレングリコール、グリシジルメタクリレート及
びペンタエリスリトールジメタクリレートのコポリマー
を使用するのが有利である。
過のために使用されていたものである。架橋された又は
されていないデキストラン、アガロース誘導体又は、オ
リゴエチレングリコール、グリシジルメタクリレート及
びペンタエリスリトールジメタクリレートのコポリマー
を使用するのが有利である。
特に有利なゲル濾過材料は、セフアクリル（Sephacry
l）S1000（これはFirma Pharmacia A B,Uppsala.Schwed
en社の登録商標である）、ビオゲル（BioGel）A150m
（これは、Firma BioRad Laboratories.Richmond.Kalif
ornia.USA社の登録商標である）及びフラクトゲル（Fra
ctogel）TSK HW75（これは、Firma Merck.Darmstadt.BR
D社の登録商標である）である。
l）S1000（これはFirma Pharmacia A B,Uppsala.Schwed
en社の登録商標である）、ビオゲル（BioGel）A150m
（これは、Firma BioRad Laboratories.Richmond.Kalif
ornia.USA社の登録商標である）及びフラクトゲル（Fra
ctogel）TSK HW75（これは、Firma Merck.Darmstadt.BR
D社の登録商標である）である。
例 １（比較例） ハロバクテリウム・ハロビウムの細胞ペースト13gをNaC
l250g/、MgSO4・7H2O 20g/、クエン酸三ナトリウム
3g/及びKCl2g/からなる溶液90mlで再懸濁させ、デ
ソキシリボヌクレアーゼ5mgを加え、１時間撹拌した。
この細胞懸濁液を引続き16時間脱イオン水に対して透析
させた。透析物を7600ｑで10分間遠心し、膜の製造のた
めの上澄みを38000ｑで30分間遠心した。得られた膜沈
殿物を比導電率0.1μS/cmを有する水80mlで洗浄し、改
めて38000ｑで遠心する。PM20mgを含有する沈殿を脱イ
オン水3mlに入れ、サツカロース含有率30〜50（w/v）％
の各28mlの量のサツカロース比重勾配液を合計５個以上
に装入した。この比重勾配液を次いで100000ｑで16時間
超遠心により遠心した。次いでこの比重勾配液を分別
し、PM含有フラクシヨンを集め、２培量の脱イオン水で
稀釈した。稀PM懸濁液を、38000ｑで30分間遠心し、得
られるPMsを再度脱イオン水100mlで洗浄し、改めて3800
0ｑで30分間遠心した。これから得られる沈殿を少量の
脱イオン水中に入れた。PM14mgを得ることができた。
l250g/、MgSO4・7H2O 20g/、クエン酸三ナトリウム
3g/及びKCl2g/からなる溶液90mlで再懸濁させ、デ
ソキシリボヌクレアーゼ5mgを加え、１時間撹拌した。
この細胞懸濁液を引続き16時間脱イオン水に対して透析
させた。透析物を7600ｑで10分間遠心し、膜の製造のた
めの上澄みを38000ｑで30分間遠心した。得られた膜沈
殿物を比導電率0.1μS/cmを有する水80mlで洗浄し、改
めて38000ｑで遠心する。PM20mgを含有する沈殿を脱イ
オン水3mlに入れ、サツカロース含有率30〜50（w/v）％
の各28mlの量のサツカロース比重勾配液を合計５個以上
に装入した。この比重勾配液を次いで100000ｑで16時間
超遠心により遠心した。次いでこの比重勾配液を分別
し、PM含有フラクシヨンを集め、２培量の脱イオン水で
稀釈した。稀PM懸濁液を、38000ｑで30分間遠心し、得
られるPMsを再度脱イオン水100mlで洗浄し、改めて3800
0ｑで30分間遠心した。これから得られる沈殿を少量の
脱イオン水中に入れた。PM14mgを得ることができた。
例 ２ ハロバクテリウム・ハロビウムの細胞ペースト35gをNaC
l250g/、MgSO4・7H2O 20g/、クエン酸三ナトリウム
3g/及びKCl2g/からなる溶液270mlで再懸濁させ、デ
ソキシリボヌクレアーゼ15mgを加え、１時間撹拌した。
引続き、この細胞懸濁液を脱イオン水に対して16時間透
析させた。透析物を7600ｑで10分間遠心し、膜製造用上
澄みを38000ｑで30分間遠心した。得られた膜沈殿物
を、比導電率0.1μS/cm及びpH6.7を有する水240mlで洗
浄し、改めて38000ｑで遠心した。PM80mgを含有するこ
の沈殿を前記の純度及びpH値を有する水7ml中に入れ、
比導電率0.1μS/cm及びpH6.7の水で平衡化されたセフア
クリルS1000の充填された長さ75cm及び直径5.0cmのカラ
ム上に装入した。溶離は、５℃で１時間当り2cmの溶離
速度で実施した。PM−含有フラクシヨンを集め、PMを38
000ｑで30分間の遠心することにより取得した。紫膜60m
gを得ることができた。この膜の光学的スペクトルは、
バクテリオロドプシンのそれと一致し、汚染物を認める
ことはできなかつた。
l250g/、MgSO4・7H2O 20g/、クエン酸三ナトリウム
3g/及びKCl2g/からなる溶液270mlで再懸濁させ、デ
ソキシリボヌクレアーゼ15mgを加え、１時間撹拌した。
引続き、この細胞懸濁液を脱イオン水に対して16時間透
析させた。透析物を7600ｑで10分間遠心し、膜製造用上
澄みを38000ｑで30分間遠心した。得られた膜沈殿物
を、比導電率0.1μS/cm及びpH6.7を有する水240mlで洗
浄し、改めて38000ｑで遠心した。PM80mgを含有するこ
の沈殿を前記の純度及びpH値を有する水7ml中に入れ、
比導電率0.1μS/cm及びpH6.7の水で平衡化されたセフア
クリルS1000の充填された長さ75cm及び直径5.0cmのカラ
ム上に装入した。溶離は、５℃で１時間当り2cmの溶離
速度で実施した。PM−含有フラクシヨンを集め、PMを38
000ｑで30分間の遠心することにより取得した。紫膜60m
gを得ることができた。この膜の光学的スペクトルは、
バクテリオロドプシンのそれと一致し、汚染物を認める
ことはできなかつた。
例 ３ 例２と同様に実施するが、カラムクロマトグラフイにお
ける溶離速度は１時間当り5.7mlであつた。カラムクロ
マトグラフイで90％の収率に相当する紫膜72mgを得るこ
とができた。
ける溶離速度は１時間当り5.7mlであつた。カラムクロ
マトグラフイで90％の収率に相当する紫膜72mgを得るこ
とができた。
例 ４ ハロバクテリウム・ハロビウムの細胞ペースト14gをNaC
l 250g/、MgSO4・7H2O 20g/、クエン酸三ナトリム
ム3g/及びKCl 2g/からの溶液90mlで再懸濁させ、デ
ソキシリボヌクレアーゼ5mgを加え、１時間撹拌した。
この細胞懸濁液を引続き脱イオン水に対して16時間透析
させた。透析物を7600ｑで10分間遠心し、膜製造用の上
澄みを38000ｑで30分間遠心させた。得られた膜沈殿物
を比導電率0.1μS/cmを有する水80mlで洗浄し、改めて3
8000ｑで遠心した。PM20mgを含有する沈殿を前記純度及
びpH値の水2.5ml中に入れ、比導電率0.1μS/cm及びpH値
6.6を有する水で平衡化されたセフアクリルS1000の充填
された長さ60cm及び直径2.5cmのカラムに装入した。５
℃で溶離速度4.6cm/hで溶離を行なつた。PM含有フラク
シヨンを集め、このPMを38000ｑで30分間の遠心により
取得した。紫膜15mgを得ることができた。この膜の光学
スペクトルは、バクテリオロドプシンのそれと一致し、
汚染物を認めることができなかつた。
l 250g/、MgSO4・7H2O 20g/、クエン酸三ナトリム
ム3g/及びKCl 2g/からの溶液90mlで再懸濁させ、デ
ソキシリボヌクレアーゼ5mgを加え、１時間撹拌した。
この細胞懸濁液を引続き脱イオン水に対して16時間透析
させた。透析物を7600ｑで10分間遠心し、膜製造用の上
澄みを38000ｑで30分間遠心させた。得られた膜沈殿物
を比導電率0.1μS/cmを有する水80mlで洗浄し、改めて3
8000ｑで遠心した。PM20mgを含有する沈殿を前記純度及
びpH値の水2.5ml中に入れ、比導電率0.1μS/cm及びpH値
6.6を有する水で平衡化されたセフアクリルS1000の充填
された長さ60cm及び直径2.5cmのカラムに装入した。５
℃で溶離速度4.6cm/hで溶離を行なつた。PM含有フラク
シヨンを集め、このPMを38000ｑで30分間の遠心により
取得した。紫膜15mgを得ることができた。この膜の光学
スペクトルは、バクテリオロドプシンのそれと一致し、
汚染物を認めることができなかつた。
例 ５ 実施例は例４に相当したが、この際クロマトグラフイを
10℃で実施した。紫膜18mgを得ることができ、これはカ
ラムクロマトグラフイで80％の収率に相当した。
10℃で実施した。紫膜18mgを得ることができ、これはカ
ラムクロマトグラフイで80％の収率に相当した。
例 ６ 実施法は例４に相当したが、この際水の比導電率は0.8
μS/cmでありpH値は6.5であつた。PM16mgが得られ、こ
れはカラムクロマトグラフイで82％の収率に相当した。
μS/cmでありpH値は6.5であつた。PM16mgが得られ、こ
れはカラムクロマトグラフイで82％の収率に相当した。
例 ７ 実施法は例４に相当したがセフアクリルS1000で充填さ
れた長さ80cm及び直径25cmのカラムでクロマトグラフイ
にかけた。紫膜15mgを得ることができ、これは、カラム
クロマトグラフイで85％の収率に相当した。
れた長さ80cm及び直径25cmのカラムでクロマトグラフイ
にかけた。紫膜15mgを得ることができ、これは、カラム
クロマトグラフイで85％の収率に相当した。
例 ８ 実施法は例４に相当したが分離剤として、メルク社（Fi
rma Merck.Darmstadt.BRD）のTSK HW75を使用した。紫
膜17mgを得ることができた。カラムクロマトグラフイで
の収率は60％であつた。
rma Merck.Darmstadt.BRD）のTSK HW75を使用した。紫
膜17mgを得ることができた。カラムクロマトグラフイで
の収率は60％であつた。
例 ９ 実施法は例４に相当したが、溶離液としてpH6.5の燐酸
塩緩衝液50μｍを使用した。紫膜18mgが得られた。収率
は85％であつた。
塩緩衝液50μｍを使用した。紫膜18mgが得られた。収率
は85％であつた。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．Ｖｏ ｌ．31（1974）Ｐ．667−678
Claims (1)
- 【請求項１】ハロバクテクアの細胞からバクテリオロド
プシンを含有する紫膜を製造する場合に、 ａ） 公知方法でハロバクテクアの細胞の細胞膜を取得
し、 ｂ） この細胞膜から紫膜を単離するために、ゲル濾過
クロマトグラフィを実施し、この際、ａ）で得られた細
胞膜の水性粒子懸濁液をゲル濾過クロマトグラフィ上に
装入し、カラムからの水性流出液を用いて紫膜を粒子懸
濁液として取得することを特徴とする、バクテリオロド
プシンを含有する紫膜の製法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3922133A DE3922133A1 (de) | 1989-07-05 | 1989-07-05 | Verfahren zur herstellung von purpurmembran enthaltend bacteriorhodopsin |
| DE3922133.4 | 1989-07-05 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0344400A JPH0344400A (ja) | 1991-02-26 |
| JPH0768268B2 true JPH0768268B2 (ja) | 1995-07-26 |
Family
ID=6384366
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2174654A Expired - Lifetime JPH0768268B2 (ja) | 1989-07-05 | 1990-07-03 | バクテリオロドプシンを含有する紫膜の製法 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5079149A (ja) |
| EP (1) | EP0406850B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0768268B2 (ja) |
| DE (2) | DE3922133A1 (ja) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE4130380A1 (de) * | 1991-09-12 | 1993-03-18 | Consortium Elektrochem Ind | Purpurmembran-zubereitungen mit erhoehter holographischer beugungseffizienz |
| DE4300649C2 (de) * | 1993-01-08 | 2000-05-25 | Fzb Biotechnik Gmbh | Herstellung von strahlungsempfindliche Biomoleküle enthaltendem Material |
| US5518858A (en) * | 1994-05-26 | 1996-05-21 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Commerce | Photochromic compositions and materials containing bacteriorhodopsin |
| IL118715A0 (en) * | 1996-06-24 | 1996-10-16 | Louis Aharon | Optically computing mathematical functions of importance in imaging with a photochromic film |
| US6140012A (en) * | 1998-05-11 | 2000-10-31 | Bend Research, Inc. | Bacteriorhodopsin preparations having increased information storage times |
| DE19945798C1 (de) * | 1999-09-24 | 2000-10-26 | Fraunhofer Ges Forschung | Verfahren zur Gewinnung von Bakteriorhodopsin |
| KR100461906B1 (ko) * | 2001-09-12 | 2004-12-14 | 비케이비 주식회사 | 할로박테리움 속 미생물을 이용한 박테리오로돕신의제조방법 |
| RU2303977C2 (ru) * | 2005-07-22 | 2007-08-10 | Евгений Петрович Гребенников | Способ получения липосомальных препаратов |
| JP5893010B2 (ja) | 2010-06-18 | 2016-03-23 | ウー‐ニカ テクノロギー アーゲー | バクテリオロドプシンを含む製剤を基板に塗布する方法、およびこの方法により製造される製品 |
| EP3012784B1 (de) | 2014-10-24 | 2017-02-15 | Actilor Intellectual Asset AG | Selektiv optisch auslesbarer Datenträger |
-
1989
- 1989-07-05 DE DE3922133A patent/DE3922133A1/de not_active Withdrawn
-
1990
- 1990-04-17 US US07/510,605 patent/US5079149A/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-07-03 JP JP2174654A patent/JPH0768268B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1990-07-05 EP EP90112805A patent/EP0406850B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1990-07-05 DE DE90112805T patent/DE59004588D1/de not_active Expired - Lifetime
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ＭｅｔｈｏｄｓＥｎｚｙｍｏｌ．Ｖｏｌ．３１（１９７４）Ｐ．６６７−６７８ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0406850A1 (de) | 1991-01-09 |
| US5079149A (en) | 1992-01-07 |
| EP0406850B1 (de) | 1994-02-16 |
| DE59004588D1 (de) | 1994-03-24 |
| JPH0344400A (ja) | 1991-02-26 |
| DE3922133A1 (de) | 1991-01-17 |
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