JPH0349680A - マイクロバクテリウム突然変異株８５１ｒ、及び該株の利用による８５１栄養溶液の製造方法 - Google Patents
マイクロバクテリウム突然変異株８５１ｒ、及び該株の利用による８５１栄養溶液の製造方法Info
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- JPH0349680A JPH0349680A JP90183854A JP18385490A JPH0349680A JP H0349680 A JPH0349680 A JP H0349680A JP 90183854 A JP90183854 A JP 90183854A JP 18385490 A JP18385490 A JP 18385490A JP H0349680 A JPH0349680 A JP H0349680A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
ために該株を産生株として使用する工業的発酵方法と栄
養溶液の製造方法とに係る。
養溶液の製造方法とに係る。
免ｉへ毘艷
今日、人体により吸収され易い単細胞タンパク質を生産
するために工業的発酵で採用可能な微生物を選択するべ
く多くの方法が試みられている。
するために工業的発酵で採用可能な微生物を選択するべ
く多くの方法が試みられている。
本発明者はＳｅに富む単細胞タンパク質とビタミンＥ栄
養溶液とアンモニア耐性アゾトバクターを含む細菌肥料
とを製造するための方法を公表した。
養溶液とアンモニア耐性アゾトバクターを含む細菌肥料
とを製造するための方法を公表した。
この方法は従来の工業的発酵方法によりＺｎ，Ｓｅ及び
ビタミンに富む単細胞タンパク質溶液を生産するために
、アンモニア耐性と大気窒素を使用することが可能な窒
素固定能力とを有する培養アゾトバクターを提供する． 日 の び ・ 本発明の目的は、株８５１Ｒを産生株として使用し、株
８５１Ｒの培養と株８５１Ｒの増殖に適切な培地の設計
φ工業的発酵方法をｔ’４ｆｔすることである。
ビタミンに富む単細胞タンパク質溶液を生産するために
、アンモニア耐性と大気窒素を使用することが可能な窒
素固定能力とを有する培養アゾトバクターを提供する． 日 の び ・ 本発明の目的は、株８５１Ｒを産生株として使用し、株
８５１Ｒの培養と株８５１Ｒの増殖に適切な培地の設計
φ工業的発酵方法をｔ’４ｆｔすることである。
ダイズはタンパク質に富む食物の一種である。
することは困難である．しかしながら、株８５１Ｒの細
菌により消化後、ダイズタンパク質は単細胞タンパク質
栄養溶液に転換される．該栄養溶液は人？により容易に
消化されるタンパク質源であるのみならず、中枢神経系
を健康にし、生物の免疫増強、内分泌機能調節、老化防
止、ある種の癌細胞の増殖阻止の効果を有する一種の栄
養溶液を構成する． 本発明の微生物は微生物突然変異株８５１Ｒである。
菌により消化後、ダイズタンパク質は単細胞タンパク質
栄養溶液に転換される．該栄養溶液は人？により容易に
消化されるタンパク質源であるのみならず、中枢神経系
を健康にし、生物の免疫増強、内分泌機能調節、老化防
止、ある種の癌細胞の増殖阻止の効果を有する一種の栄
養溶液を構成する． 本発明の微生物は微生物突然変異株８５１Ｒである。
この株の主特徴はグラム陽性菌であり、非運動性であり
、硝酸塩還元能力を有しており、Ｂ■Ｓを生成すること
が可能であり、３０分間６３℃又は１５分間７２℃に加
熱した乳汁中で生存するという点にある．その葉状体（
微生物）は赤又は橙赤色である．しかしながら、その葉
状体の色は約３８℃でピンクに変わり、４０℃で無色に
変わる．特に、この株のＤＮ＾は特定のＲフラグメント
ＤＮ＾プローブで検出可能なＲフラグメントを含む。
、硝酸塩還元能力を有しており、Ｂ■Ｓを生成すること
が可能であり、３０分間６３℃又は１５分間７２℃に加
熱した乳汁中で生存するという点にある．その葉状体（
微生物）は赤又は橙赤色である．しかしながら、その葉
状体の色は約３８℃でピンクに変わり、４０℃で無色に
変わる．特に、この株のＤＮ＾は特定のＲフラグメント
ＤＮ＾プローブで検出可能なＲフラグメントを含む。
本発明は更に、単細胞タンパク質栄養溶液を生産するた
めに細菌を使用する工業的方法に係る。
めに細菌を使用する工業的方法に係る。
この方法では、本発明で培養した微生物株８５１Ｒを産
生株として使用し、ダイズ培地又は澱粉培地を産生培地
として使用する。
生株として使用し、ダイズ培地又は澱粉培地を産生培地
として使用する。
物突然変異株である。主な特徴はグラム陽性の桿体であ
り、非運動性であり、グリセロールラフィノース同化能
力をもち、硝酸塩還元能力をもち、■２Ｓ生成能力をも
ち、３０分間６３゜Ｃ又は１５分間７２℃に加熱した乳
汁中で生存することである。この葉状体は赤又は橙赤色
であり、葉状体の色は３８℃で薄くなり、４０′Ｃで無
色になる．特に、株のＤＮＡは特定のＲフラグメンｌ−
ＤＮ＾プローブで検出可能なＲＰａｒｋｌａｗｎ Ｄｒ
ｉｖｅ， Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ， Ｍａｒｙｌａｄ ２
０８５２に所在の＾ｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌ
ｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎに＾，Ｔ．Ｃ．Ｃ．寄
託番号５３９８１で寄託されたサンプルの本質的特徴を
有する。
り、非運動性であり、グリセロールラフィノース同化能
力をもち、硝酸塩還元能力をもち、■２Ｓ生成能力をも
ち、３０分間６３゜Ｃ又は１５分間７２℃に加熱した乳
汁中で生存することである。この葉状体は赤又は橙赤色
であり、葉状体の色は３８℃で薄くなり、４０′Ｃで無
色になる．特に、株のＤＮＡは特定のＲフラグメンｌ−
ＤＮ＾プローブで検出可能なＲＰａｒｋｌａｗｎ Ｄｒ
ｉｖｅ， Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ， Ｍａｒｙｌａｄ ２
０８５２に所在の＾ｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌ
ｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎに＾，Ｔ．Ｃ．Ｃ．寄
託番号５３９８１で寄託されたサンプルの本質的特徴を
有する。
８５１Ｒ株は微生物属の他の種から区別される明白な特
徴を有ずる。株８５１Ｒを産生株として適用し、本発明
で設計及び使用される窒素源含有培地を適用すると、ベ
プチド、種々の微量元素及びビタミン（培養液の分析報
告中に列挙）に富む単細胞タンパク質溶液を生産するこ
とができる。培養液中には２０種を越えるアミノ酸が含
まれる。この培養液１００ｚ１はアミノ酸５９３〜４１
７２Ｂ、ビタミンＥＯ．３〜１．Ｏｗｇ、ビタミン８０
．１〜０．３ｍｇ、ビタミンＰＩ”０．５〜１．Ｏｚｇ
、Ｓｅ１．０−５．０ｐｐｍ， Ｚｎ１０〜２０ｐｐ＋
ａ．Ｍｏ５．０−１０ｐｐｍ、Ｃｏ５．（１〜１０ｐｐ
ｕ＋， Ｍｎ５〜１５ｐｐｍ及びＣｕ３．Ｏ・〜ＬＯｐ
ｐａ＋を含有する。
徴を有ずる。株８５１Ｒを産生株として適用し、本発明
で設計及び使用される窒素源含有培地を適用すると、ベ
プチド、種々の微量元素及びビタミン（培養液の分析報
告中に列挙）に富む単細胞タンパク質溶液を生産するこ
とができる。培養液中には２０種を越えるアミノ酸が含
まれる。この培養液１００ｚ１はアミノ酸５９３〜４１
７２Ｂ、ビタミンＥＯ．３〜１．Ｏｗｇ、ビタミン８０
．１〜０．３ｍｇ、ビタミンＰＩ”０．５〜１．Ｏｚｇ
、Ｓｅ１．０−５．０ｐｐｍ， Ｚｎ１０〜２０ｐｐ＋
ａ．Ｍｏ５．０−１０ｐｐｍ、Ｃｏ５．（１〜１０ｐｐ
ｕ＋， Ｍｎ５〜１５ｐｐｍ及びＣｕ３．Ｏ・〜ＬＯｐ
ｐａ＋を含有する。
本発明で調合及び使用される培地の重量組成を以下に示
す。
す。
１．ダイズ培地
ダイズ粉末 ５〜１０％又はダイズ
乳 〈ダイズ重量として計算） ５〜２０％？は種々
の豆類ゲーキ、 ヒマワリ種子ケーキ 酵母エキス又は酵母粉末 ＣａＣＯ３ Ｋ２ＲＰＯ． ＭｇＳＯ４ ＮａＣ Ｉ Ｎａ２Ｍｏｂ． Ｎａ２ＳｅＯ− ＺｎＳＯ， ＣｏＣ ｌ■ ２．澱粉培地 澱粉を含む生材料 （サツマイモ、ジャガイモ等） 又は澱粉を含む乾燥材料 （トウモロコシ粉末等〉 酵母エキス Ｋ．ＨＰＯ． ５〜１０％ ０．０２〜０．５％ ０．０５〜０．５％ ０、０２〜０．２％ ０．０１〜０．０８％ ０．０１〜Ｏ．ＯＳ％ ５．０〜５０ｐｐｍ １，５〜１０ｐｐｍ ２．５〜５０ｐｐｎ＋ ２．５〜２０ｐｐｍ １０〜２０％ １〜１０％ ０、０４〜０．０８％ ０．０５〜０．１％ ＭｇＳ０４ ０．０
２ 〜０．０４％ＣａＣＯｚ
０．０５〜０．５％ＮａＣＩ
０．０２〜０．０４％Ｎａ
Ｊｏ０４ １０− ２
０ｐｐ＋Ｉ１Ｎａ２ＳｅＯｚ
１．５〜２０ｐｐｍＺｎＳＯ４２，５〜２０ｐ
ｐ＋ｎ ＣＯＣ１２ ５〜２０
ｐｐｍ人体に必要な適量の他の＠量元素を上記培地に加
えてもよい。元素の量は１．５〜１００ｐｐｍの範囲で
ある． 株８５１Ｒの利用により栄養溶液を生産するための方法
は、撹拌器及びガストランスファーを備える慣用の槽型
発酵器で曝気培養する段階を含み、必要に応じて発酵器
は培養物を均質１ヒするために培養物を振盪するように
構戒してもよく、更に、培養期間中に細菌及び他の微生
物の酸素要求に応えるために枦過済無菌空気で培養物を
曝気するようにしてもよい．産生株として使用される８
５１Ｒ株は本発明で調製される培地で増殖する。３段階
培養（第１、第２及び第３種子培養）後、その葉状体を
予め加圧滅菌した産生培地に接種し、３６〜６４時間イ
ンキユベートする。培養期間中、無菌空気を培地に通し
、曝気速度１：０．５〜１．Ｏｖｖｍ，撹拌速度１８０
〜２６０ｒｐｍ、培養温度２８〜４ ０ ’Ｃとする。
乳 〈ダイズ重量として計算） ５〜２０％？は種々
の豆類ゲーキ、 ヒマワリ種子ケーキ 酵母エキス又は酵母粉末 ＣａＣＯ３ Ｋ２ＲＰＯ． ＭｇＳＯ４ ＮａＣ Ｉ Ｎａ２Ｍｏｂ． Ｎａ２ＳｅＯ− ＺｎＳＯ， ＣｏＣ ｌ■ ２．澱粉培地 澱粉を含む生材料 （サツマイモ、ジャガイモ等） 又は澱粉を含む乾燥材料 （トウモロコシ粉末等〉 酵母エキス Ｋ．ＨＰＯ． ５〜１０％ ０．０２〜０．５％ ０．０５〜０．５％ ０、０２〜０．２％ ０．０１〜０．０８％ ０．０１〜Ｏ．ＯＳ％ ５．０〜５０ｐｐｍ １，５〜１０ｐｐｍ ２．５〜５０ｐｐｎ＋ ２．５〜２０ｐｐｍ １０〜２０％ １〜１０％ ０、０４〜０．０８％ ０．０５〜０．１％ ＭｇＳ０４ ０．０
２ 〜０．０４％ＣａＣＯｚ
０．０５〜０．５％ＮａＣＩ
０．０２〜０．０４％Ｎａ
Ｊｏ０４ １０− ２
０ｐｐ＋Ｉ１Ｎａ２ＳｅＯｚ
１．５〜２０ｐｐｍＺｎＳＯ４２，５〜２０ｐ
ｐ＋ｎ ＣＯＣ１２ ５〜２０
ｐｐｍ人体に必要な適量の他の＠量元素を上記培地に加
えてもよい。元素の量は１．５〜１００ｐｐｍの範囲で
ある． 株８５１Ｒの利用により栄養溶液を生産するための方法
は、撹拌器及びガストランスファーを備える慣用の槽型
発酵器で曝気培養する段階を含み、必要に応じて発酵器
は培養物を均質１ヒするために培養物を振盪するように
構戒してもよく、更に、培養期間中に細菌及び他の微生
物の酸素要求に応えるために枦過済無菌空気で培養物を
曝気するようにしてもよい．産生株として使用される８
５１Ｒ株は本発明で調製される培地で増殖する。３段階
培養（第１、第２及び第３種子培養）後、その葉状体を
予め加圧滅菌した産生培地に接種し、３６〜６４時間イ
ンキユベートする。培養期間中、無菌空気を培地に通し
、曝気速度１：０．５〜１．Ｏｖｖｍ，撹拌速度１８０
〜２６０ｒｐｍ、培養温度２８〜４ ０ ’Ｃとする。
インキュベーションの終了後、培養ブロスを加圧滅菌し
、採取する。次に、培養液を直接パッケージングして製
品とするが、種々の必要に応じ、異なる処理方法により
種々の製品が得られる。沈殿及び１５０００ｒｐ＋Ｉ１
、圧力−０．２〜−０．４人ｇ／ｃＩＩ１２で遠心分Ｎ
後、培養液からコーラ型の飲料を製造することができる
。濃縮後、培養液は濃縮栄養物になる．オーブン乾燥又
はスプレー乾燥後、培養液は粉末形態となり、これを更
に処理してカプセル又はタブレットとすることもできる
．スプレー乾燥の場合、入口温度は８０℃〜３００℃、
出口温度は６０℃〜１２０゜Ｃである．培養液を水及び
卵の代わりに小麦粉に加え、パン及びケーキ又は他の食
品を焼くことができる．培養液を化粧品の製造に使用す
ることもできる。
、採取する。次に、培養液を直接パッケージングして製
品とするが、種々の必要に応じ、異なる処理方法により
種々の製品が得られる。沈殿及び１５０００ｒｐ＋Ｉ１
、圧力−０．２〜−０．４人ｇ／ｃＩＩ１２で遠心分Ｎ
後、培養液からコーラ型の飲料を製造することができる
。濃縮後、培養液は濃縮栄養物になる．オーブン乾燥又
はスプレー乾燥後、培養液は粉末形態となり、これを更
に処理してカプセル又はタブレットとすることもできる
．スプレー乾燥の場合、入口温度は８０℃〜３００℃、
出口温度は６０℃〜１２０゜Ｃである．培養液を水及び
卵の代わりに小麦粉に加え、パン及びケーキ又は他の食
品を焼くことができる．培養液を化粧品の製造に使用す
ることもできる。
８５１栄養溶液は老化防止効果、体質改善、肝臓及び胃
を良好な状態に維持する効果を有する。以下、実験によ
り発明を詳細に説明する．及腹Ｌ ゛ 体重１７．８±１．７５ｇのオスＫｕｎｍｉｎｇ産マウ
スを使用し、体重にしたがって数群に分けた．各群を１
０匹から構戒した．試験マウスに１３日間連続して水道
水の代わりに８５１栄養溶液（８５１ＮＳと省略）を与
え、１４日目に絶食させた。次に、これらの試験マウス
の半数に８５１ＮＳでなく水道水を与えた。試験マウス
の残りの半数には引き続き８５１栄養溶渣を飲用させ、
午後４時にＣＣＩ．を腹腔内投与した．対照群のマウス
には８５１ＮＳでなく水道水を与え且つ１４日目にバラ
フィン油（ＣＣＩ．溶剤）を腹腔内投与した以外は、試
験群と同一の飼料を与えた。
を良好な状態に維持する効果を有する。以下、実験によ
り発明を詳細に説明する．及腹Ｌ ゛ 体重１７．８±１．７５ｇのオスＫｕｎｍｉｎｇ産マウ
スを使用し、体重にしたがって数群に分けた．各群を１
０匹から構戒した．試験マウスに１３日間連続して水道
水の代わりに８５１栄養溶液（８５１ＮＳと省略）を与
え、１４日目に絶食させた。次に、これらの試験マウス
の半数に８５１ＮＳでなく水道水を与えた。試験マウス
の残りの半数には引き続き８５１栄養溶渣を飲用させ、
午後４時にＣＣＩ．を腹腔内投与した．対照群のマウス
には８５１ＮＳでなく水道水を与え且つ１４日目にバラ
フィン油（ＣＣＩ．溶剤）を腹腔内投与した以外は、試
験群と同一の飼料を与えた。
ＣＣ．４対照群のマウスに同一飼料を与え且つ水道水を
飲用させた。それらの動物を絶食させ、午後にＣＣＩ＜
（１．８７ｍｍｏｌ／ＡＩＦ）を腹腔内投与した。
飲用させた。それらの動物を絶食させ、午後にＣＣＩ＜
（１．８７ｍｍｏｌ／ＡＩＦ）を腹腔内投与した。
１５日目に動物を殺し、肝臓サンプルを調製した．Ｒｉ
ｒｏｓｈｉ Ｏｈａｋａｗａ（旧ｒｏｓｈｉ Ｏｂａｋ
ａｗａ ｅｔ ａｔ、＾ｎａｌ．Ｂｉｏｃｌ＋ｅｍ．
９５ ：３５１−３５８． １９７９）の方法にしたが
って肝臓のＭ［）八を検出し、１，１，３．３−テトラ
メ１−キシプロパン〈日本ＴＣＩ製品、Ｅ．Ｐ．グレー
ド）を過酸化脂質の検出用標準サンプルとして使用し、
スペクト口フォトメーターを使用して８０＾の吸光度を
検出した。ＭＤ＾含有量を肝ＴｉＡｇ当たりｎｍｏ Ｉ
として表す．データを統計的に分析した．結果は次の通
りであった。
ｒｏｓｈｉ Ｏｈａｋａｗａ（旧ｒｏｓｈｉ Ｏｂａｋ
ａｗａ ｅｔ ａｔ、＾ｎａｌ．Ｂｉｏｃｌ＋ｅｍ．
９５ ：３５１−３５８． １９７９）の方法にしたが
って肝臓のＭ［）八を検出し、１，１，３．３−テトラ
メ１−キシプロパン〈日本ＴＣＩ製品、Ｅ．Ｐ．グレー
ド）を過酸化脂質の検出用標準サンプルとして使用し、
スペクト口フォトメーターを使用して８０＾の吸光度を
検出した。ＭＤ＾含有量を肝ＴｉＡｇ当たりｎｍｏ Ｉ
として表す．データを統計的に分析した．結果は次の通
りであった。
この結果、８５１栄簑溶液は所定の条件で老化防止に有
用な強い抗過酸化脂質活性を有することが判明した． 丸艷２Ｌ麹Ｌ監 体重１５〜２４９のオスＫｕｎａ＋ｉｎｇ産マウスを使
用し、数群に分けた．マウスに水、チョウセンニンジン
、Ｎｅｓｔｌｅ粉ミルク及び８５１ＮＳを夫々与えた。
用な強い抗過酸化脂質活性を有することが判明した． 丸艷２Ｌ麹Ｌ監 体重１５〜２４９のオスＫｕｎａ＋ｉｎｇ産マウスを使
用し、数群に分けた．マウスに水、チョウセンニンジン
、Ｎｅｓｔｌｅ粉ミルク及び８５１ＮＳを夫々与えた。
８５１ＮＳ群のマウスは水道水の代わりに８５１ＮＳ（
５〜ｆｈｌｌ日）を４日間与えた． 対照群のマウスには水道水を４日間与えた。
５〜ｆｈｌｌ日）を４日間与えた． 対照群のマウスには水道水を４日間与えた。
Ｎｅｓｔｌｅ粉ミルク群のマウスには水道水の代わりに
０、Ｏｌ％Ｎｅｓｔｌｅ粉ミルクを４日間与えた。
０、Ｏｌ％Ｎｅｓｔｌｅ粉ミルクを４日間与えた。
天然のチョウセンニンジンをスライス状に細分し、沸騰
水に約３時間浸漬し、その後、弱く加熱しながら１５分
間に２回沸騰させて濃度０．００１％とし、これを水道
水の代わりにマウスに４日間与えた。
水に約３時間浸漬し、その後、弱く加熱しながら１５分
間に２回沸騰させて濃度０．００１％とし、これを水道
水の代わりにマウスに４日間与えた。
ＷａＢ Ｙｕｎ−ｍｕｏ（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｒ
Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２：４６
−４８． １９８５）の方法に従って遊泳試験を実施し
た。
Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２：４６
−４８． １９８５）の方法に従って遊泳試験を実施し
た。
結果を以下に示す。
この結果、８５１栄養溶液はマウスの遊泳時間を大幅に
延ばし、マウスの体格を改善することが判明した。
延ばし、マウスの体格を改善することが判明した。
Ｘ量』ユ” ＦＣＣに る
使用済み培養液の廃棄後、良好な繁殖状態の胃癌細胞（
ＦＣＣ）を０，０２％ＥＤＴ＾で消化し、１５％ウシ血
清を含有する１６４０培地で洗浄した．生存細胞をトリ
プトファンブルーで計数し、総容量１ｉ＋ｌ（Ｉ Ｘ
１０’／ｌ１）中で３７℃で２４時間培養した．次に細
胞を洗浄し、８５１ＮＳ（０．２ｚｆｆｉ／ｉ１）を含
有する同一培地で培養した。対照群の細胞を容量１ｚｆ
ｆｉの培地（１５％ウシ血清を含有する１６４０培地１
ｏｓｅ及び８５１ＮＳ２ｚｉ’）で３７℃で２４時間培
養した。各群のウェルは２つずつ用意した．次に、使用
済み培地を廃棄した。０．０２％ＥＯＴＡＱ．！ＩｆＲ
１及び１・リプ１・ファンブル一〇．Ｌｉ＆を加え、生
存細胞を計数した。
ＦＣＣ）を０，０２％ＥＤＴ＾で消化し、１５％ウシ血
清を含有する１６４０培地で洗浄した．生存細胞をトリ
プトファンブルーで計数し、総容量１ｉ＋ｌ（Ｉ Ｘ
１０’／ｌ１）中で３７℃で２４時間培養した．次に細
胞を洗浄し、８５１ＮＳ（０．２ｚｆｆｉ／ｉ１）を含
有する同一培地で培養した。対照群の細胞を容量１ｚｆ
ｆｉの培地（１５％ウシ血清を含有する１６４０培地１
ｏｓｅ及び８５１ＮＳ２ｚｉ’）で３７℃で２４時間培
養した。各群のウェルは２つずつ用意した．次に、使用
済み培地を廃棄した。０．０２％ＥＯＴＡＱ．！ＩｆＲ
１及び１・リプ１・ファンブル一〇．Ｌｉ＆を加え、生
存細胞を計数した。
抑制率＝し二一×１００％
ｌ１
？及びｎ２は夫々対照群及び試験群における生存細胞の
数である。
数である。
この結果、胃癌細胞に対する８５１ＮＳの平均抑制率は
３０％であることが判明した。
３０％であることが判明した。
１■Ｅｕｌｏｔｅｓｅｒａｓｓｕｓに
Ｅｕｐｌｏｔｅｓ ｃｒａｓｓｕｓは海水中で生存する
単細胞生物である．細胞齢は無性生殖世代により表され
、１０００〜１５００の範囲である． Ｅｕｐｌｏｔｅｓ ｃｒａｓｓｕｓｉ胞の老化はある種
の代謝変化に関係する．これらの変化のうちで細胞分裂
速度の低下は細胞老化の最も顕著な特徴のひとつである
．１０％の８５１ＮＳを含有する海水中で細胞を培養す
ると、Ｅｕｐｌｏｔｅｓ ｃｒａｓｓｕｓ細胞の分裂速
度は著しく増加した．培養期間中の５日間の細胞分裂速
度（世代７日）を以下に示す。
単細胞生物である．細胞齢は無性生殖世代により表され
、１０００〜１５００の範囲である． Ｅｕｐｌｏｔｅｓ ｃｒａｓｓｕｓｉ胞の老化はある種
の代謝変化に関係する．これらの変化のうちで細胞分裂
速度の低下は細胞老化の最も顕著な特徴のひとつである
．１０％の８５１ＮＳを含有する海水中で細胞を培養す
ると、Ｅｕｐｌｏｔｅｓ ｃｒａｓｓｕｓ細胞の分裂速
度は著しく増加した．培養期間中の５日間の細胞分裂速
度（世代７日）を以下に示す。
上表から明らかなように、Ｅｕｐｌｏｔｅｓ ｃｒａｓ
ｓｕｓ［胞の分裂速度は海水培地が１０％の８５１ＮＳ
を含有するとき１．ｌ１〜ｌ．６７倍増加した．８５１
ＮＳを細胞に食菌すると細胞代謝は改善された． 培地が１０％の８５１栄養溶液を含有するとき、老化し
たＥｕｐｌｏｔｅｓ ｃｒａｓｓｕｓ細胞（Ｚｏｏ世代
齢〉の分裂速度は１．４倍（０．３３〜０．７９世代／
日）増加した．この結果、８５１栄養溶液は老化した細
胞の代謝を改善できることが判明した． １，材料： １（ｕｎｍｉｎｇ産マウスをＦｕｊｉａｎ Ｍｅｄｉｃ
ａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅの動物センターから入手した。８
５１栄養溶液のバッチ番号は０６である。
ｓｕｓ［胞の分裂速度は海水培地が１０％の８５１ＮＳ
を含有するとき１．ｌ１〜ｌ．６７倍増加した．８５１
ＮＳを細胞に食菌すると細胞代謝は改善された． 培地が１０％の８５１栄養溶液を含有するとき、老化し
たＥｕｐｌｏｔｅｓ ｃｒａｓｓｕｓ細胞（Ｚｏｏ世代
齢〉の分裂速度は１．４倍（０．３３〜０．７９世代／
日）増加した．この結果、８５１栄養溶液は老化した細
胞の代謝を改善できることが判明した． １，材料： １（ｕｎｍｉｎｇ産マウスをＦｕｊｉａｎ Ｍｅｄｉｃ
ａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅの動物センターから入手した。８
５１栄養溶液のバッチ番号は０６である。
２，方法：
Ｉ２匹の妊娠中のＫｕｎｍｉｎｇ産マウスに標準飼料及
び水道水を別々に与えた。分娩後、１２匹のマウスを対
照群と８５１ＮＳ群とにランダムに分けた。吸乳時に同
産（同じ親から産まれた）の新生マウスを計量した。対
照及び８５１ＮＳ群の母親及び新生マウスに吸乳期間中
及び離乳がら１５日後に夫々標準飼料又は８５１ＮＳを
含有する飼料を与えた．次に、同産の新生マウスを計量
した。新生マウスの眼球がら証液サンプルを採取した。
び水道水を別々に与えた。分娩後、１２匹のマウスを対
照群と８５１ＮＳ群とにランダムに分けた。吸乳時に同
産（同じ親から産まれた）の新生マウスを計量した。対
照及び８５１ＮＳ群の母親及び新生マウスに吸乳期間中
及び離乳がら１５日後に夫々標準飼料又は８５１ＮＳを
含有する飼料を与えた．次に、同産の新生マウスを計量
した。新生マウスの眼球がら証液サンプルを採取した。
新生マウスの体重増加
及び白血球分類は次の通りであった．
級１己Ｌｖ』］乙
ｌ．結果：
１．１
第１表は新生マウスの体重変化を示す．１．２
第２表は新生マウスの白血球分化に及ぼす８５１ＮＳの
効果を示す． Δ２衆：妓ａ圭ｌｌ■ ２．考察 ８５１栄養溶液は２０種を越えるアミノ酸、数種のビタ
ミン及び微量元素を含有する生物工学産物であった。結
果から明らかなように、８５１栄養溶液は新生マウスの
リンパ球の値を著しく増加させ、従って、８５１ＮＳは
新生マウスの造血機能を刺激及び改善し得ることが判明
した。
効果を示す． Δ２衆：妓ａ圭ｌｌ■ ２．考察 ８５１栄養溶液は２０種を越えるアミノ酸、数種のビタ
ミン及び微量元素を含有する生物工学産物であった。結
果から明らかなように、８５１栄養溶液は新生マウスの
リンパ球の値を著しく増加させ、従って、８５１ＮＳは
新生マウスの造血機能を刺激及び改善し得ることが判明
した。
更に結果として、８５Ｒ４Ｓは新生マウスの体重を増加
することができ、８５１ＮＳは新生マウスの発育を増進
する成分を含むことが判明した。
することができ、８５１ＮＳは新生マウスの発育を増進
する成分を含むことが判明した。
４艷Ｌ マウスの の に る？セ住■
舶Ｒ１Ｌ １．材料 体重４２〜４４ｇのｕＩ雄のＫｕｎｍｉｎｇ産マウスを
ＦｕｊｉａｎＭｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅの動物セ
ンターから入手した。
舶Ｒ１Ｌ １．材料 体重４２〜４４ｇのｕＩ雄のＫｕｎｍｉｎｇ産マウスを
ＦｕｊｉａｎＭｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅの動物セ
ンターから入手した。
８５１ＮＳ、４Ｎ ＩＣ＋及び０．１％インドメタシン
を使用した． ２．方法 ２．１マウスの胃粘膜の亜慢性損傷モデルの作成８匹の
マウスをランダムに２群に分けた．対照群のマウスには
正規食塩水を１日１回経口投与した．試験群のマウスに
は４８ ＨＣＩ又は０．１％インドメタシンを交互にｌ
日１回２日間（経口）投与した．これらのマウスに通常
の飼料及び水道水を与えた．１０日後、マウスを殺した
．胃を取り出し、水洗した，対照群の胃粘膜はつやのあ
る赤色を示したが、試験群の胃粘膜はつやがなく、色が
薄く、膨張していた．胃腔に固定用の１０％中性ホルマ
リンを充填し、バラフィンワックスでセクションに分け
、ＩＩＥ染色で染色した。胃粘膜を顕微鏡で検査した処
、粘膜の内皮は薄くなり、腐食したケラチン物質で覆わ
れ、胃腺には腐食した壊死が敗在していることが判明し
た．対照群には顕著な変化は認められなかった．上記方
法は亜慢性損傷のモデルとなり得ることが確認された。
を使用した． ２．方法 ２．１マウスの胃粘膜の亜慢性損傷モデルの作成８匹の
マウスをランダムに２群に分けた．対照群のマウスには
正規食塩水を１日１回経口投与した．試験群のマウスに
は４８ ＨＣＩ又は０．１％インドメタシンを交互にｌ
日１回２日間（経口）投与した．これらのマウスに通常
の飼料及び水道水を与えた．１０日後、マウスを殺した
．胃を取り出し、水洗した，対照群の胃粘膜はつやのあ
る赤色を示したが、試験群の胃粘膜はつやがなく、色が
薄く、膨張していた．胃腔に固定用の１０％中性ホルマ
リンを充填し、バラフィンワックスでセクションに分け
、ＩＩＥ染色で染色した。胃粘膜を顕微鏡で検査した処
、粘膜の内皮は薄くなり、腐食したケラチン物質で覆わ
れ、胃腺には腐食した壊死が敗在していることが判明し
た．対照群には顕著な変化は認められなかった．上記方
法は亜慢性損傷のモデルとなり得ることが確認された。
２、２マウスの胃粘膜の亜慢性損傷に対する８５１ＮＳ
の治療効果 ３０匹のマウスを対照群と８５１群とにランダムに分け
、上記方法に従ってＨＣＩ又はインドメタシンを交互に
１０日間投与した．これらの２群のマウスに夫々標準飼
料又は８５１を含有するＩＩＩｒｉｌ料を１０口間与え
、ＨＣＩ又はインドメタシンの投与を停止してからも７
日間飼料を与え続けた．次にマウスを殺した。上記方法
に従って胃粘膜の変化を試験した。
の治療効果 ３０匹のマウスを対照群と８５１群とにランダムに分け
、上記方法に従ってＨＣＩ又はインドメタシンを交互に
１０日間投与した．これらの２群のマウスに夫々標準飼
料又は８５１を含有するＩＩＩｒｉｌ料を１０口間与え
、ＨＣＩ又はインドメタシンの投与を停止してからも７
日間飼料を与え続けた．次にマウスを殺した。上記方法
に従って胃粘膜の変化を試験した。
髭匙えＬ１色
対照及び８５１群の間の胃粘膜の形態に顕著な差異は認
められなかった．８５１群の胃の前部の粘膜は対照群よ
りもやや薄かった．結果として、８５１は胃粘膜の損傷
の回復に有益であることが判明した。
められなかった．８５１群の胃の前部の粘膜は対照群よ
りもやや薄かった．結果として、８５１は胃粘膜の損傷
の回復に有益であることが判明した。
１．方法
ラットを対照及び８５１群にランダムに分け、夫々標準
飼料及び８５１を含有する飼料（８ｉ＋ｆｆｉ／ラット
）を与えた。全ラットに十分な水道水を与え．１５日後
、全ラットを１４日間絶食させ、１日１回の割合で２日
間インドメタシン（２．５ｉ＋ｙ／ラット）を皮下投与
した．２回目の注射から１８時間後、ラットを殺し、胃
を試験した。
飼料及び８５１を含有する飼料（８ｉ＋ｆｆｉ／ラット
）を与えた。全ラットに十分な水道水を与え．１５日後
、全ラットを１４日間絶食させ、１日１回の割合で２日
間インドメタシン（２．５ｉ＋ｙ／ラット）を皮下投与
した．２回目の注射から１８時間後、ラットを殺し、胃
を試験した。
症え丈Ｌ｛炙
ｌ．結果
胃粘膜の急性出血の数及び程度：対照群では６匹のマウ
ス、８５１群では４匹の′マウスの胃粘膜の出血が斑状
、縞状又は伸長状態で局所的に制限された。対照群の１
匹のラットに胃粘膜の拡散出血が発生した。胃粘膜の出
血点の株は対照群で６〜ｌ２カ所、８５１群で２〜８カ
所であった．対照群の胃粘膜の出血の数は８５１群より
も著しく多数であった。
ス、８５１群では４匹の′マウスの胃粘膜の出血が斑状
、縞状又は伸長状態で局所的に制限された。対照群の１
匹のラットに胃粘膜の拡散出血が発生した。胃粘膜の出
血点の株は対照群で６〜ｌ２カ所、８５１群で２〜８カ
所であった．対照群の胃粘膜の出血の数は８５１群より
も著しく多数であった。
２．考察
結果から明らかなように、インドメタシンで誘導した胃
粘膜の出血はラッ１・に８５ＩＮＳを１５日間与えた場
合に阻止された。
粘膜の出血はラッ１・に８５ＩＮＳを１５日間与えた場
合に阻止された。
１．材料
体重１４０ 〜２２ｈのｌ’ｌｉｓｔａｒ産ラット２２
匹（オス１０匹及びメスｌ２匹）をＦｕｊｉａｎ Ｍｅ
ｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅの動物センターから入手し
た．ＣＣＩ．分析グレードは精製落花生油で濃度４０％
に希釈した， ８５１ＮＳ、寒天ゲル（Ｓｈａｎｇｈａ
ｉ Ｃｈｅ＋ｓｉｃａｌ Ａｇｅｎｔ ！４ａｎｕｆａ
ｃｔｏｒｙの製品〉及びＬＥＢ多用途電気泳動装置を使
用した．２．方法 ２２匹のラットをランダムに対照群（ｎ＝６）、ＣＣＩ
．群（ｉｉ＝８）及びＣＣＩ４＋８５１群（ロー８）の
３群に分けた．ＣＣＩ．及びＣＣｌ．＋８５１群のラッ
トにはＣＣｌ．（０．１瀧Ｕ１００ｇ）を１週間に２回
（３日おき）の割合で５週間皮下投与した．対照及びＣ
ＣＩ．群のラットには標準飼料を与えた．ＣＣＩ，＋８
５１群のラットには８５１ＮＳを含有する飼料（８ｚＵ
ラット．７日）を与えた．全ラットに５週間十分な水道
水及び飼料を与えた， ＣＣｌ４の最終投与から５日後
に、腋窩静脈から血液を採取した，血清を集め、肝機能
を検出した， ＬＥＢ電気泳動装置を使用して血清タン
パク質の電気泳動を実施した．肝臓の病理変化を試験し
た． 艶４ＬＬ１東 １．結果： １．１ラットＳＧＰＴ ＣＣＩ．で したラットのＳＧＩ’Ｔ亦 に ぼ ８５１ＮＳ 京ｐ１は対照群に比較、ｐ２はＣＣＩ．群に比較．１．
２これらの群の間でチモール濁り試験（ＴＴＴ）及び硫
酸亜鉛濁り試＠（ＺｎＴＴ）に顕著な差異は認められな
かった． １．３肉眼による肝臓観察：対照群の肝臓嚢の色及びつ
やは正常であった．肝臓嚢はつやがあった．ＣＣＩ．群
のラットの肝臓嚢は水様変性（ｗａｔｅｒｙｄｅｇｅｎ
ｅｒａｔｉｏｎ）をけう肝臓の形態変化に従い薄茶色で
つやがなかった．ＣＣＩ．＋８５１群のラットの肝臓形
態はＣＣＩ．群よりも良好であったが、対照群よりは劣
った。
匹（オス１０匹及びメスｌ２匹）をＦｕｊｉａｎ Ｍｅ
ｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅの動物センターから入手し
た．ＣＣＩ．分析グレードは精製落花生油で濃度４０％
に希釈した， ８５１ＮＳ、寒天ゲル（Ｓｈａｎｇｈａ
ｉ Ｃｈｅ＋ｓｉｃａｌ Ａｇｅｎｔ ！４ａｎｕｆａ
ｃｔｏｒｙの製品〉及びＬＥＢ多用途電気泳動装置を使
用した．２．方法 ２２匹のラットをランダムに対照群（ｎ＝６）、ＣＣＩ
．群（ｉｉ＝８）及びＣＣＩ４＋８５１群（ロー８）の
３群に分けた．ＣＣＩ．及びＣＣｌ．＋８５１群のラッ
トにはＣＣｌ．（０．１瀧Ｕ１００ｇ）を１週間に２回
（３日おき）の割合で５週間皮下投与した．対照及びＣ
ＣＩ．群のラットには標準飼料を与えた．ＣＣＩ，＋８
５１群のラットには８５１ＮＳを含有する飼料（８ｚＵ
ラット．７日）を与えた．全ラットに５週間十分な水道
水及び飼料を与えた， ＣＣｌ４の最終投与から５日後
に、腋窩静脈から血液を採取した，血清を集め、肝機能
を検出した， ＬＥＢ電気泳動装置を使用して血清タン
パク質の電気泳動を実施した．肝臓の病理変化を試験し
た． 艶４ＬＬ１東 １．結果： １．１ラットＳＧＰＴ ＣＣＩ．で したラットのＳＧＩ’Ｔ亦 に ぼ ８５１ＮＳ 京ｐ１は対照群に比較、ｐ２はＣＣＩ．群に比較．１．
２これらの群の間でチモール濁り試験（ＴＴＴ）及び硫
酸亜鉛濁り試＠（ＺｎＴＴ）に顕著な差異は認められな
かった． １．３肉眼による肝臓観察：対照群の肝臓嚢の色及びつ
やは正常であった．肝臓嚢はつやがあった．ＣＣＩ．群
のラットの肝臓嚢は水様変性（ｗａｔｅｒｙｄｅｇｅｎ
ｅｒａｔｉｏｎ）をけう肝臓の形態変化に従い薄茶色で
つやがなかった．ＣＣＩ．＋８５１群のラットの肝臓形
態はＣＣＩ．群よりも良好であったが、対照群よりは劣
った。
１．４顕微鏡による肝臓観察：対照群では弱い水様変性
を示す１匹を除く５匹のラットの肝臓組，＊ｉ造は正常
であった， ＣＣＩ．群の８匹のラットは顕著な肝臓水
様変性を示した．肝小葉の外側部分の血漿は拡散又は集
中した網状アレオシス（ａｒｅｏｓｉｓ）を示した．肝
小葉の中心部分の細胞は正常なものと変性したものがあ
った．脂肪変性した肝細胞は散在又は集中しており、水
様変性細胞から区別することは困難であった．ＣＣｌ．
＋８５１群の６匹のラットの肝臓はＣＣＩ．群のラット
よりも水様変性が少なく、他の２匹のラットはＣＣＩ．
群と同一程度の水様変性を示した。ラットの肝臓組織変
化は肝機能Ｓ（；ＰＴの結果に従った。これは全群のラ
ットＳＧＩ’Ｔの結果が信頼できることを意味する。
を示す１匹を除く５匹のラットの肝臓組，＊ｉ造は正常
であった， ＣＣＩ．群の８匹のラットは顕著な肝臓水
様変性を示した．肝小葉の外側部分の血漿は拡散又は集
中した網状アレオシス（ａｒｅｏｓｉｓ）を示した．肝
小葉の中心部分の細胞は正常なものと変性したものがあ
った．脂肪変性した肝細胞は散在又は集中しており、水
様変性細胞から区別することは困難であった．ＣＣｌ．
＋８５１群の６匹のラットの肝臓はＣＣＩ．群のラット
よりも水様変性が少なく、他の２匹のラットはＣＣＩ．
群と同一程度の水様変性を示した。ラットの肝臓組織変
化は肝機能Ｓ（；ＰＴの結果に従った。これは全群のラ
ットＳＧＩ’Ｔの結果が信頼できることを意味する。
１．５ラット血清タンパク質の電気泳動：各群から２つ
の血清サンプルを電気泳動に使用した．結果はこれらの
群に差異がないことを示した．これらの結果から、ＣＣ
Ｉ．で誘導した肝臓損傷はラットの血清タンパク質に変
化をもたらさないことが判明した。
の血清サンプルを電気泳動に使用した．結果はこれらの
群に差異がないことを示した．これらの結果から、ＣＣ
Ｉ．で誘導した肝臓損傷はラットの血清タンパク質に変
化をもたらさないことが判明した。
１、６体重増加： ＣＣｌ．＋８５１群のラットの体重
増加は他の群よりも大きかったが、これらの群の間に統
計的に顕著な差異は認められなかった（ｐ＞０．０５）
． ２．考察 肉眼及び顕微鏡によりラット血清ＳＧＰＴ及び形態変化
を検査した結果、８５ｌはＣＣＩ，で誘導した亜慢性肝
臓損傷に対して予防及び治療効果を示すことが判明した
． １．材料 Ｋｕｎｍｉｎｇ産マウスをＦｕｊｉａｎ動物センターか
ら入手した． を使用した． Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅの ８５１ＮＳ（バッチ番号０６） ２．方法 同一種のオスマウスと交尾させ、予め妊娠していると見
なされる（膣血栓を有する）Ｋｕｎｍｉｎｇ産メスマウ
ス２７匹を対照群及び８５１群にランダムに分けた．対
照群のマウスには標準飼料を与え、８５１群のマウスに
は８５１を含有する飼料を与えた．全マウスに水道水を
与えた．７匹のマウスを各群がらランダムに抽出し、腹
部の肥大がら妊娠していること、を確認後、上記方法に
より別々に飼料を与えた．同産の新生マウスを出産日及
び２０日間吸乳後に計量した．新生及び吸乳中のマウス
の体重及び外観を検査した． 級五Ｒ９１４ ． ｌ．結果 １ ．Ｒ １新生マウス（出産直後）の体重に及ぼす８
５１ＮＳの効果 ３表：新生マウスの体重に ぼ ｌの効果 本対照群と比較． １．２ 吸乳期のマウスの体重に及ぼす８５１ＮＳの効果を第４
表に示す。
増加は他の群よりも大きかったが、これらの群の間に統
計的に顕著な差異は認められなかった（ｐ＞０．０５）
． ２．考察 肉眼及び顕微鏡によりラット血清ＳＧＰＴ及び形態変化
を検査した結果、８５ｌはＣＣＩ，で誘導した亜慢性肝
臓損傷に対して予防及び治療効果を示すことが判明した
． １．材料 Ｋｕｎｍｉｎｇ産マウスをＦｕｊｉａｎ動物センターか
ら入手した． を使用した． Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅの ８５１ＮＳ（バッチ番号０６） ２．方法 同一種のオスマウスと交尾させ、予め妊娠していると見
なされる（膣血栓を有する）Ｋｕｎｍｉｎｇ産メスマウ
ス２７匹を対照群及び８５１群にランダムに分けた．対
照群のマウスには標準飼料を与え、８５１群のマウスに
は８５１を含有する飼料を与えた．全マウスに水道水を
与えた．７匹のマウスを各群がらランダムに抽出し、腹
部の肥大がら妊娠していること、を確認後、上記方法に
より別々に飼料を与えた．同産の新生マウスを出産日及
び２０日間吸乳後に計量した．新生及び吸乳中のマウス
の体重及び外観を検査した． 級五Ｒ９１４ ． ｌ．結果 １ ．Ｒ １新生マウス（出産直後）の体重に及ぼす８
５１ＮＳの効果 ３表：新生マウスの体重に ぼ ｌの効果 本対照群と比較． １．２ 吸乳期のマウスの体重に及ぼす８５１ＮＳの効果を第４
表に示す。
１．３外観、食事能力及び一般活動に異常な現象は践察
されなかった． ２．考察 ２．１第３表から明らかなように、メスマウスに妊娠期
間中に８５１ＮＳを与えると８５１ＮＳはマウス胎児の
体重増加を促進することができた（ｐ＜ ０．０１）。
されなかった． ２．考察 ２．１第３表から明らかなように、メスマウスに妊娠期
間中に８５１ＮＳを与えると８５１ＮＳはマウス胎児の
体重増加を促進することができた（ｐ＜ ０．０１）。
２．２第４表から明らかなように、メスマウスに授乳期
間中に８５１ＮＳを与えると８５１ＮＳは吸乳中のマウ
スの体重増加を促進することができた＜ｐ＜ ０．０５
）。
間中に８５１ＮＳを与えると８５１ＮＳは吸乳中のマウ
スの体重増加を促進することができた＜ｐ＜ ０．０５
）。
２．３結果から明らかなように、メスマウスに妊娠から
授乳まで４０日間８５１ＮＳを与えたとき、異常発生（
例えば胎児奇形〉及び逆効果は観察されながった． 以下、本発明の実施例を非限定的に説明する．及東燵Ｌ この調製には２．５ｔ容の槽形発酵器を使用した。
授乳まで４０日間８５１ＮＳを与えたとき、異常発生（
例えば胎児奇形〉及び逆効果は観察されながった． 以下、本発明の実施例を非限定的に説明する．及東燵Ｌ この調製には２．５ｔ容の槽形発酵器を使用した。
種子発酵器は０．５ｔ容とした。粗材料の装入量は４０
％であり、ダイズ粉末５％、酵母エキス０．０４％、Ｋ
ｌｌ２Ｐ０． ０．０５％、ＭｇＳＯ． ０．０２％、
ＣａＣＯｓ ０．０２％、ＮａＣｌ Ｏ．０２％、Ｎａ
２ＭｏＯｉ １０ｐｐｍ、Ｎａ２ＳｅＯ． ２．５ ｐ
ｐ（ＺｎＳＯ． １０ｐｐｍ、ＣｏＣｌ２２．５ｐｐｍ
及び水を含有する産生培地として５％ダイズ培地を採用
した。接種材料の量は１％であり、種子発酵器は２１、
細胞齢は２４時間（第１種子培養一第２種子培養一第３
種子培養、２４時間インキユベートした培養物を接種材
料として使用）、培養温度は３０℃とし、撹拌速度２６
０ｒｐｓｅ、曝気速度１：０．ａＶＶ鴎とした．培養物
のインキュベーションは４５時間持続した．インキュベ
ーションの終了後、培養物を加圧滅菌し、アセンブリラ
インを通してびんに詰め、その後、再び加圧滅菌して最
終製品とした． 培養液１００ｚ１は乾燥材 料３．７％、 タンパク質２．０６％、 脂質０．２３％、 炭水 化物 ０．７５％、 ビタミン及び無機塩を含有していた（第５表）． この調製には８ｔ容の槽形発酵器を使用した。粗材料の
装入量は４０％とした．すなわち、培地の量を３．２ｔ
とした．１０％ダイズ乳を採用した。培地はダイズ３２
０＆，、酵母エキス１ ．２８ｋ９、κＨ２ＰＯ． ｉ
．ｅ．ｆＩ、？８ＳＯ４ ６４０ｙ− ＣａＣＯｓ
６４０ｇ、ＮａＣＩ ６４０１Ｉ， ＮＩ１２ＭＯ
０４３２１Ｆ， ＮａｚＳｅＯ＊ ８ｇ、ＺｎＳＯ＋
３２ｙ、ＣｏＣｌ■８ｇ及び水を含有するものとした．
接種材料の量は１％、細胞齢は２４時間（第１種子培養
、第２種子培養及び第３種子培養、２４時間インキユベ
ートした培養物を接種材料として使用）とした．培養温
度３０゜Ｃ．撹拌速度２２０ｒｐｍ、曝気速度１ ：０
．８ｖｖｍとした．種子発酵器でインキュベーションの
終了後、接種材料を８１容槽形発酵器に接種し、培養温
度３０℃、撹拌速度２２Ｇｒｐ論、曝気速度１：０．８
ｖｖｍとした。４８時間後にインキュベーションを終了
し、培養液を加圧滅菌し、アセンブリラインを通してび
んに詰め、再び加圧滅菌して最終製品を得た。培養液１
００ｊｆは、アスパラキン酸５４３ｍｇ、グル９ ミン
ｖｉ７１０ｍｇ、セリン１６０Ｂ、グリシン２８０ｍｇ
、ヒスチジン６５ｍｇ、アルギニン２２６ｕ、スレオニ
ン２３２ＪｌｌＦ、アラニン３５９ｉｇ、ブロリン１２
６＋Ｂ、チロシン１０ｆＢ、バリン２８３ｉ＋ｇ、メチ
オニン５３旬、イソロイシン２６２Ｂ、ロイシン３０９
１Ｉｌ？、フェニルアラニン１４８ＪＩＩＦ、リジン２
１２Ｂ、シスチン３８瀧９、合計４１７２ｚｇを含有し
ていた。
％であり、ダイズ粉末５％、酵母エキス０．０４％、Ｋ
ｌｌ２Ｐ０． ０．０５％、ＭｇＳＯ． ０．０２％、
ＣａＣＯｓ ０．０２％、ＮａＣｌ Ｏ．０２％、Ｎａ
２ＭｏＯｉ １０ｐｐｍ、Ｎａ２ＳｅＯ． ２．５ ｐ
ｐ（ＺｎＳＯ． １０ｐｐｍ、ＣｏＣｌ２２．５ｐｐｍ
及び水を含有する産生培地として５％ダイズ培地を採用
した。接種材料の量は１％であり、種子発酵器は２１、
細胞齢は２４時間（第１種子培養一第２種子培養一第３
種子培養、２４時間インキユベートした培養物を接種材
料として使用）、培養温度は３０℃とし、撹拌速度２６
０ｒｐｓｅ、曝気速度１：０．ａＶＶ鴎とした．培養物
のインキュベーションは４５時間持続した．インキュベ
ーションの終了後、培養物を加圧滅菌し、アセンブリラ
インを通してびんに詰め、その後、再び加圧滅菌して最
終製品とした． 培養液１００ｚ１は乾燥材 料３．７％、 タンパク質２．０６％、 脂質０．２３％、 炭水 化物 ０．７５％、 ビタミン及び無機塩を含有していた（第５表）． この調製には８ｔ容の槽形発酵器を使用した。粗材料の
装入量は４０％とした．すなわち、培地の量を３．２ｔ
とした．１０％ダイズ乳を採用した。培地はダイズ３２
０＆，、酵母エキス１ ．２８ｋ９、κＨ２ＰＯ． ｉ
．ｅ．ｆＩ、？８ＳＯ４ ６４０ｙ− ＣａＣＯｓ
６４０ｇ、ＮａＣＩ ６４０１Ｉ， ＮＩ１２ＭＯ
０４３２１Ｆ， ＮａｚＳｅＯ＊ ８ｇ、ＺｎＳＯ＋
３２ｙ、ＣｏＣｌ■８ｇ及び水を含有するものとした．
接種材料の量は１％、細胞齢は２４時間（第１種子培養
、第２種子培養及び第３種子培養、２４時間インキユベ
ートした培養物を接種材料として使用）とした．培養温
度３０゜Ｃ．撹拌速度２２０ｒｐｍ、曝気速度１ ：０
．８ｖｖｍとした．種子発酵器でインキュベーションの
終了後、接種材料を８１容槽形発酵器に接種し、培養温
度３０℃、撹拌速度２２Ｇｒｐ論、曝気速度１：０．８
ｖｖｍとした。４８時間後にインキュベーションを終了
し、培養液を加圧滅菌し、アセンブリラインを通してび
んに詰め、再び加圧滅菌して最終製品を得た。培養液１
００ｊｆは、アスパラキン酸５４３ｍｇ、グル９ ミン
ｖｉ７１０ｍｇ、セリン１６０Ｂ、グリシン２８０ｍｇ
、ヒスチジン６５ｍｇ、アルギニン２２６ｕ、スレオニ
ン２３２ＪｌｌＦ、アラニン３５９ｉｇ、ブロリン１２
６＋Ｂ、チロシン１０ｆＢ、バリン２８３ｉ＋ｇ、メチ
オニン５３旬、イソロイシン２６２Ｂ、ロイシン３０９
１Ｉｌ？、フェニルアラニン１４８ＪＩＩＦ、リジン２
１２Ｂ、シスチン３８瀧９、合計４１７２ｚｇを含有し
ていた。
及東鰹よ
実施例２に記載した方法により調製した栄養溶液を、乾
燥ミルクの製造に通常使用されているスプレードライヤ
ーにより乾燥し、８５１栄養粉末を得た．スプレードラ
イヤーの入口温度は８０゜Ｃ、出口温度は６０℃とした
。８５１栄養溶液０．８１から乾燥粉末２０．４ＡＦＩ
を得、これを更に処理してカプセル状にした．カプセル
１包は乾燥粉末０．２８ｇを含み、又は澱粉８０Ａ，及
び蜂蜜１０Ａ９とから調合して顆粒調製物とした． Ｘ韮』しｋ 慣用の発酵方法により調製した８５１栄養溶液を１５０
０ｏｒｐｍで遠心分離し、沈殿を得た。こうして、８５
１栄養溶液１ｔから上清９６０ｋｇを得た。果汁５００
＆ｇを加えることにより８５１果汁コーラを調製し、蜂
蜜４０ｋｇを加えることにより８５１蜂蜜コーラを調製
した．上記上清に香味料を加え、必要に応じて異なる味
の種々の８５１飲料を調製することもできる。
燥ミルクの製造に通常使用されているスプレードライヤ
ーにより乾燥し、８５１栄養粉末を得た．スプレードラ
イヤーの入口温度は８０゜Ｃ、出口温度は６０℃とした
。８５１栄養溶液０．８１から乾燥粉末２０．４ＡＦＩ
を得、これを更に処理してカプセル状にした．カプセル
１包は乾燥粉末０．２８ｇを含み、又は澱粉８０Ａ，及
び蜂蜜１０Ａ９とから調合して顆粒調製物とした． Ｘ韮』しｋ 慣用の発酵方法により調製した８５１栄養溶液を１５０
０ｏｒｐｍで遠心分離し、沈殿を得た。こうして、８５
１栄養溶液１ｔから上清９６０ｋｇを得た。果汁５００
＆ｇを加えることにより８５１果汁コーラを調製し、蜂
蜜４０ｋｇを加えることにより８５１蜂蜜コーラを調製
した．上記上清に香味料を加え、必要に応じて異なる味
の種々の８５１飲料を調製することもできる。
ｌ隨燵ｉ
慣用の発酵方法により調製した８５１栄養溶液を遠心分
離した．上清を膜蒸発器又は真空回転蒸発器により濃縮
し、８５１濃縮栄養物を得た。蒸発後、上清０．５Ｌか
ら濃縮栄養物１００Ａ９を得た．蜂蜜ｔｏｅ，，を添加
後、濃縮栄養物を開放容易なキャップを有する小びんに
充填した。この栄養物は経口摂取するのに都合よい．
離した．上清を膜蒸発器又は真空回転蒸発器により濃縮
し、８５１濃縮栄養物を得た。蒸発後、上清０．５Ｌか
ら濃縮栄養物１００Ａ９を得た．蜂蜜ｔｏｅ，，を添加
後、濃縮栄養物を開放容易なキャップを有する小びんに
充填した。この栄養物は経口摂取するのに都合よい．
Claims (9)
- （１）植物タンパク質、特にダイズタンパク質を単細胞
タンパク質に転換する能力を有しており、グラム陽性菌
であり、非運動性であり、Ｈ＿２Ｓを生成することが可
能であり、硝酸塩還元陽性であり、３０分間６０℃又は
１５分間７２℃に加熱時に乳汁中で生存し、赤又は橙赤
色の葉状体であり、該葉状体の色が３８℃でピンクに変
わり、４０℃で無色に変わり、株のＤＮＡが特定のＲフ
ラグメントＤＮＡプローブにより検出可能なＲフラグメ
ントを含む特徴を有するマイクロバクテリウム突然変異
株８５１Ｒ。 - （２）米国、１２３０１ Ｐａｒｋｌａｗｎ Ｄｒｉｖ
ｅ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，Ｍａｒｙｌａｄ ２０８５２
に所在のＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ
ＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎにＡ．Ｔ．Ｃ．Ｃ．寄託番号５３
９８１で寄託されたサンプルの本質的特徴を有するマイ
クロバクテリウム突然変異株８５１Ｒ。 - （３）細菌を使用することにより単細胞タンパク質栄養
溶液を製造するための方法であって、産生株としてマイ
クロバクテリウム突然変異株８５１Ｒを使用し、発酵に
より８５１Ｒ栄養溶液を生産するための産生培地として
ダイズ粉末培地又は澱粉培地を使用することを特徴とす
る方法。 - （４）培養液から単細胞タンパク質を採取するためにオ
ーブン乾燥噴霧処理を使用し、培養液を精製するために
濃縮処理を使用することを特徴とする請求項３に記載の
方法。 - （５）ダイズ粉末５〜１０重量％又はダイズ乳（ダイズ
重量として計算）５〜２０重量％又は種々の豆類ケーキ
、ヒマワリ種子ケーキ５〜１０重量％、酵母エキス又は
酵母粉末０．０２〜０．５重量％、ＣａＣＯ＿３０．０
５〜０．５重量％、Ｋ＿２ＨＰＯ＿４０．０２〜０．２
重量％、ＭｇＳＯ＿４０．０１〜０．０８重量％、Ｎａ
Ｃｌ０．０１〜０．０８重量％、Ｎａ＿２ＭｏＯ＿４５
〜５０重量ｐｐｍ、Ｎａ＿２ＳｅＯ＿３１．５〜１０重
量ｐｐｍ、ＺｎＳＯ＿４２．５〜５０重量ｐｐｍ及びＣ
ｏＣｌ＿２２．５〜５０重量ｐｐｍを含有する、請求項
１に記載の株８５１Ｒの培地。 - （６）澱粉を含む生材料（サツマイモ、ジャガイモ等）
１０〜２０重量％又は澱粉を含む乾燥材料（トウモロコ
シ粉末等）１〜１０重量％、酵母エキス０．０４〜０．
０８重量％、ＣａＣＯ＿３０．０５〜０．５重量％、Ｋ
＿２ＨＰＯ＿４０．０５〜０．１重量％、ＭｇＳＯ＿４
０．０２〜０．０４重量％、ＮａＣｌ０．０２〜０．０
４重量％、Ｎａ＿２ＭｏＯ＿４１０〜２０重量ｐｐｍ、
Ｎａ＿２ＳｅＯ＿３１．５〜２０重量ｐｐｍ、ＺｎＳＯ
＿４５〜２０重量ｐｐｍ及びＣｏＣｌ＿２５〜２０重量
ｐｐｍを含有する、請求項１に記載の株８５１Ｒの培地
。 - （７）窒素源を含む培地でマイクロバクテリウム突然変
異株８５１Ｒによる発酵により生産される栄養溶液。 - （８）溶液が老化防止効果、体質改善効果、癌細胞増殖
抑制効果、生物の造血刺激及び改善効果、胃粘膜損傷回
復効果、胃粘膜の急性出血に対する治療作用、肝臓損傷
に対する治療作用並びに産褥体質の回復効果を有するこ
とを特徴とする請求項７に記載の８５１Ｒ栄養溶液。 - （９）株８５１Ｒの細菌又は８５１栄養溶液から製造さ
れる一連の製品。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN89104615A CN1023409C (zh) | 1989-07-11 | 1989-07-11 | 一种营养液的生产方法 |
| CN89104615.1 | 1989-07-11 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0349680A true JPH0349680A (ja) | 1991-03-04 |
| JP2613664B2 JP2613664B2 (ja) | 1997-05-28 |
Family
ID=4855628
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2183854A Expired - Lifetime JP2613664B2 (ja) | 1989-07-11 | 1990-07-11 | マイクロバクテリウム突然変異株８５１ｒ、及び該株の利用による８５１栄養溶液の製造方法 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
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| CN (1) | CN1023409C (ja) |
| AU (1) | AU624690B2 (ja) |
| CA (1) | CA2012278C (ja) |
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|---|---|---|---|---|
| HU218045B (hu) | 1991-06-03 | 2000-05-28 | Innovi N.V. | Eljárás szelénben gazdag adalékanyag előállítására |
| CN1101471C (zh) * | 2000-05-26 | 2003-02-12 | 黑龙江省轻工科学研究院 | 大豆蛋白活性肽的制作方法 |
| US7472891B2 (en) | 2006-01-30 | 2009-01-06 | Michael D. Schram | Bollard assembly |
| CN102719369B (zh) * | 2011-06-14 | 2013-12-04 | 广西中烟工业有限责任公司 | 一株微生物菌株及其应用 |
| US20140302171A1 (en) * | 2011-10-12 | 2014-10-09 | For Days Co., Ltd | Cysteine Peptide-Containing Health Drink |
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|---|---|---|---|---|
| US4920052A (en) * | 1988-02-05 | 1990-04-24 | Miles Inc. | Process for producing glucose isomerase |
-
1989
- 1989-07-11 CN CN89104615A patent/CN1023409C/zh not_active Expired - Fee Related
-
1990
- 1990-03-15 CA CA002012278A patent/CA2012278C/en not_active Expired - Fee Related
- 1990-03-22 AU AU52100/90A patent/AU624690B2/en not_active Ceased
- 1990-05-15 GB GB9010885A patent/GB2233666B/en not_active Expired - Fee Related
- 1990-07-11 JP JP2183854A patent/JP2613664B2/ja not_active Expired - Lifetime
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU624690B2 (en) | 1992-06-18 |
| CN1023409C (zh) | 1994-01-05 |
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| GB9010885D0 (en) | 1990-07-04 |
| GB2233666B (en) | 1993-08-04 |
| JP2613664B2 (ja) | 1997-05-28 |
| CA2012278A1 (en) | 1991-01-11 |
| GB2233666A (en) | 1991-01-16 |
| CN1042376A (zh) | 1990-05-23 |
| CA2012278C (en) | 1998-06-02 |
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