JPH03500210A - 冠動脈性心臓病の治療および診断のための方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 冠動脈性心臓病の治療および診断のための方法発明の分野 本発明は冠動脈性心臓病の治療および予防に使用される方法および薬剤に関し、 また、診断および心筋梗塞になる危険性を検出するための方法に関する。

発明の背景 心筋梗塞においては、冠動脈中の血栓が心筋の虚血と部分的製置を引起す、狭心 病でに、患者は虚血と局部的疼痛症状を引起す冠動脈の慢性硬化（アテローム性 動脈硬化症）に罹る。狭心症または心筋梗塞になる危険性を増大すると一般に知 られているいくつかの因子がある。

これらは、例えば、高典圧、喫煙、および血液中のＨＤＬコレステロール１量２ ＞１低くＬＤＬコレステロール含量が高いことである。

今日では、心筋梗塞の危険性は、例えば血液中の全コレステロールドＨＤＬおよ ヒＬＤＬコレスｆロールヲ測定スることで検出される。

最近では、心筋梗塞の患者は、例えば血栓溶解剤で、またβ−ブロッカ−剤、カ テコールアミン、ニトログリセリンのような血管作用性薬剤で、またはジギタリ スのような心臓作用性薬剤で治療される。患者にとって特に危険なことは最初の 梗塞から二、三日以内に起る再度の梗塞である。近時、これは主として抗凝固剤 や上記の薬剤で防せごうとされている。

最近の心筋梗塞の予防には、食事や喫煙の習慣を変えることや、β−ブロッカ− 剤およびコレステロール代謝に影響を与える薬剤によることが含まれる。

また、循環または組織の沈着の免疫複合体が慢性冠動脈性心臓病および急性心筋 梗塞の発現に病原的役割を持つと示唆されている（フェスト　ジー、ソンデー　 イー。

セキリー　ジェイ、ナナイ　アイ、ゲレ　ニス、血管疾患における循環性免疫複 合体の存在に関する研究、アテロスクレロシス　１９７８年：２８巻：　１８１ −１９０頁。

Ｆｉｉｓｔ　Ｇ、　５ｚｏｎｄｙ　Ｅ、　５ｅｋｅｌｙ　Ｊ、　Ｎａｎａｉ　Ｉ 、　Ｇｅｒｍ　Ｓ、　５ｔｕｄｉｅｓｏｎ　ｔｈｅ　ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ　ｏ ｆ　ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ　ｉｍｍｕｎｅ　ｃｏｍｐｌｅｘｅｓｉｎ　ｖａｓ ｃｕｌａｒ　ｄｉｓｅａｓｅｓ、　Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ　１９７８ 　：　２８　：１８１−１９０　：ファレル　シー、ブロス　ビー、二一ルセｙ 　エイチ、ドハティー　エイチ、ルンドマン　ティー、スベハグ　ニス−イー、 急性心筋梗塞患者における循環性免疫複合体の検索、スカンジナン　ジャーナル 　オプイムノロジ−１９７７年＝６巻：　１２３３−１２４０頁。

Ｆａｒｒｅｌ　Ｃ，Ｂｌｏｔｈ　Ｂ、Ｎ１ｅｌｓｅｎ　Ｈ，Ｄｏｕｇｈｍｒｔｙ 　Ｈ，ＬｕｎｄｍｓｓｎＴ、　Ｓｖｅｈｍｇ　Ｓ−Ｅ、　Ａ　５ｕｒｖｅｙ　ｆ ｏｒ　ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ　ｉｍｍｕｎｅｃｏｍｐｌｅｘｅｓ　ｉｎ　ｐａ ｔｒｅｎ口ｗｉｔｈ　ａｃｕｔｅ　ｍｙｏｃｉｒｄｉａｌ　１ｎｆａ−ｒｃｔｉ ｏｎ、５ｃａｎｄ、Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１９７７：６：１２５３−１２４ ０；クリステア　エイ、リース　エイチ、ニクレスキエ　エフ、ベデレニュ　デ ィー、ブレキ晶　アール、心臓病ニおける循環性免疫複合体の性質、イムノロジ ー　レター１９８６年＝１３巻：４５−４９頁、Ｃｒｉｓｔｅｍ　Ａ、　Ｒｅｅ ｓ　Ｈ。

Ｎ１ｃｕｌｅｓｃｕ　Ｆ、　Ｂｅｄｅｌｅｍｎｕ　Ｄ、　Ｖｌａｉｃｕ　Ｒ，Ｃ ｈａｒａｃｔｅｒｉｇａｔｉ　−ｏｎ　ｏｆ　ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ　ｉｍｍ ｕｎｅ　ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ　ｉｎ　ｈｅａｒｔ　ｄｉ畠ｅａ−ｓｅ、　Ｉｍｍ ｕｎｏｌ、Ｌｅｔｔ、　１９８４：　１３：４５−４９　）、免疫複合体は、補 体によって活性化され、炎病、血小板凝集および血管痙輩を起す化学走性でアナ フラキシー性分解産物を放出するととによって作用すると考えられている。免疫 複合体の存在は心筋梗塞後の患者の５０乃至６０チに認められている。しかしな がら、現在までの所、免疫複合体の抗原は、傷害後の組織自己抗原と関連してい るものであろうという以外に知られていない。

心筋梗塞は長い間、主要な死因のひとつであった。また、急性梗塞は比較的若い 人に予期せずに起り、これがこの病気を特に有害なものとしている。このため既 に以前から心筋梗塞の犠牲の可能性をスクリーニングし、また冠動脈性心臓病の 治療と予防のための方法が早く必要とされてきた。

発明の要約 近時、クラミジア感染が冠動脈性心臓病の発病に有意な投書を果していることが 見い出された。特にクラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ　）　ＴＷＡＲ感染が意味 を持つ。

本発明によれば、心筋梗塞は、しばしば、起っているかもしれないクラミジア感 染を治療することによって防ぐことができる。これは、特にクラミジアに有効な 抗生物質を投与することによって可能になる。他方、クラミジア感染は主として ワクチン投与によって予防できる。

心筋梗塞の危険性を防ぐためにも、全身免役（ｓｙ＠ｔｅｍｉｃｉ薗ｕｎｉｔｙ ）が十分であろう。

心筋梗塞になったばかシの患者の治療において、クラミジア感染があるかどうか の検出を行うこともできる。

もし起っているかもしれないクラミジア感染を治療すれば、回復中に新たに梗塞 を起す危険を大巾に減少させることができる。この第二の梗塞は非常に危険なこ とが多い。

発明の詳細な説明 クラミジアは偏性細胞内グラム陰性細菌である。これは現在１での所、二つの種 に分けられている：クラミジれる。後者のいろいろなものが混った種にはいわゆ るＴＷＡＲ株が含まれる（グレイストン　ジェイティー、クオ　シーシー、ワン グ　エスピー、アルドマン　ジェイ、急性呼吸器感染で分離された新規なりラミ ジアシタシ株ＴＷＡＲ１ニエーイングランド　ジャーナル　オブ　タデ４フフ３ １５巻：１６１頁、１９８６年、Ｇｒａｙｓｔｏｎ−、ＪＴ、　Ｋｕ。

ＣＣ，Ｗａｎｇ　Ｓｒ、　Ａｌｔｍａｎ　Ｊ、　Ａ　ｎｅｗ　Ｃｈｌａｒｎｙｄ ｉｍ　ｐｓｉｔｔｓｓｃｉ　−１ｔｒａｉｎ、　ＴｗＡＲ，１ｓｏｌａｔｅｄ　 ｉｎ　ａｃｕｔｅ　ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ　ｔｒａｃｔｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ 、　Ｎ、Ｅｎｇｌ、　Ｊ、　Ｍｅｄ、　３１５　：　１６１．１９８６　）　、 　Ｌかしながら、極〈最近、ＴＷＡＲ株は非常に特異的な構造的および生化学的 特徴を持っているので完全に新しいクラミジア種の地位を与えようという提案が なされた（クオシーシー、チェノ　エイチェイテ、ワンプ　エスピー、グレイス トン　ジエイ　ティー、ＴＷＡＲと呼ぶ新しい一群のクラミジア　シタシ株の同 定、ジャーナル　オプクリニカル　マイクロバイオロジー２４巻：　１０３４頁 、１９８６年、Ｋｕｏ　ＣＣ，ＣｈｅｌｌＨＨ，Ｗａｎｇ　ＳＰ、　Ｇｒａｙｇ ｔｏｎ　ＪＴ。

１９８６　：キャンベル　エルエイ、クオ　シーク−、クレイストン　ジェイ　 ティー、制限エンドヌクレアーゼ分析およびＤＮＡ−ＤＮＡハイブリダイゼイシ 曹ンによる特異的生物としての新しいクラミジア　ＴＷＡＲの性質、ジャーナル 　オプ　クリニカル　マイクロバイオロジー２５巻：　１？１ｆ頁、１９８７年 、　Ｃａｍｐｂｅｌｌ　ＬＡ、　Ｋｕｏ　ＣＣ，Ｇｒａｙ−ｓｔｏｎ　ＪＴ、　 Ｃｈｍｒｏｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｎｅｗ　Ｃｈｌａｍｙｄｉ ａａｇｅｎｔ、　ＴＷＡＲ，ａｓ　ｍ　ｕｎｉｑｕｅ　ｏｒｇａｎｉｓｍ　ｂｙ 　ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｅｎｄｏｎｕｃｌｅａｓｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｎ ｄ　ＤＮＡ−ＤＮＡ　ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ。

Ｊ、ＣｌｉｎＭｉｃｒｏＣ１１ｎ　２５：１９１１．１９８７；　チ　イーワイ 、クオ　シーシー、グレイストン　ジェイティー、クラミジア　スピーシズ　Ｔ ＷＡＲ株の基本小体における特異的微細構造、ジャーナル　オブ　バクテリオク ジ−１６９４：３フ５フ頁、１９８７年、Ｃｈｉ　ＥＹ、　Ｋｕｏ　ＣＣ，Ｇｒ ｉｙｓｔｏｎ　ＪＴ。

Ｕｎｉｑｕｅ　ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｉｎ　Ｔｈｅ　ｅｌｅｗｅｎｔ ａｒｙ　ｂｏｄｙ　ｏｆＣｈｌａｍｙｄｉａ　ｓｐ、　５ｔｒａｉｎ　ＴＷＡＲ ，Ｊ、　Ｂａｃｔ　ｅｙ　１６９　：　３７５７゜１９８７：コックス　アール 、クオ　シーシー、グレイストン　ジェイティー、キャンベル　エルエイ、クラ ミジア　スピーシーズ゛Ｉ”ＷＡＲ株のクラミジア　トラコマティスおよびクラ ミジア　シタシに対するデオキシリポ核酸関連性、インターナシ璽ナル　ジャー ナル　オプ　クステマティック　バクテリオロジ−３８％；、−：　：２６５頁 、１９８８年、Ｃｏｘ　Ｒ，Ｋｕｏ　ＣＣ，Ｇｒａｙｓｔｏｎ　ＪＴ、　Ｃａｍ −ｐｂｅｌｌ　ＬＡ、　Ｄｅｏｘｙ−ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃ　ａｃｉｄ　ｒｅ ｌａｔｅｄｎｅｓｓ　ｏｆ５８：２６５，１９８８）、クラミジア　ニエーモニ エが提案された新しい名前である（グレイストン　ジェイ　ティー、クオ　シー シー、キャンベン　エルエイ、ワングエスビー、クラミジア　スビーシズ　ＴＷ ＡＲ株に対してクラミジア　ニエーモニエ新種、インターナシ璽ナル　ジャーナ ル　オブ　クステマティック　パクテリオロジー１９８９年：３９巻：８８−９ ０頁、Ｇｒｉｙｓｔｏｎ　ＪＴ、　Ｋｕ。

ＣＣ，Ｃａｍｐｂｅｌｌ　ＬＡ、　Ｗｉｎｇ　ＳＰ、　Ｃｈｌｉｍｙｄｉｉ　ｐ ｎｅｕｍｏｎｉａｅ　ｓｐ。

ｎｏｖ、　ｆｏｒ　Ｃｈｌ＠ｍｙｄｉａ　ｓｐ、　５ｔｒａｉｎ　ＴＷＡＲ，Ｉ ｎｔ、　Ｊ、　Ｓｙｓｔｅｍ。

Ｂａｃｔ　１９８９　：５９　：８８−９０　）。

研究によｆｉＴＷＡＲクラミジアの特異な性質が明らかになった。生育は困難で 、現在までの所、ＨｅＬａ　２２？が最良の細胞系と知られている。試料は一７ ０℃で保存するために段階的に凍結しなければならない、培養にはＤＥＡＥ−デ キストラン処理、高速遠心力およびシクロヘキシミド存在下、３５℃での保温が 必要である。封入体を３日月に螢光上ツクローナル抗体で染色する。予備スクリ ーニングにおいては、群特異的クローンに使用できるが、分離株がＴＷＡＲ株で ある最終的証明は種特異的モノクローンを使うことか必要である０分離株の細胞 培養への適応には長い過程が必要で、卵黄サックでのブラインド　パッセージを 要することが多く、これでＴＷＡＲ株は比較的容易に生育するが、一般に胚を殺 すことはない。

得られ九分険株は、最初の分離の時期や地理的分離源に無関係に、性質解明試験 で同じように挙動する。これらは共通のクラミジアのリボ多糖（ＬＰＳ）抗原を 持っていてサルファ剤に耐性であるが、クラミジア　シタシ（Ｃ。

ダイゼイシ嘗ンパメーンにより容易に区別できる。プラスミドは思い出されて匹 ない、電子顕微鏡検索で、クラはシア封入において典型的な基本小体（ＥＢ）− 網状体（ＲＢ）サイクルを示すが、ＴＷＡＲクラミジアのＥＢは緩んだ外膜とし ばしば小体を含む大きな外賓空間を持つ特異的な梨型構造を示す。

新種が提案された最終的基準は前に記した二つのクラミジア種と明らかなりＮＡ ホモロジーを持っていないことて支持されている。

すべてのクラミジアはヒトおよび動物にいくつかの感染症を引起す、クラミジア 　トラコマティス（Ｃ，ｔｒａｃｈ−国では性病の最も一般的な原因である。ク ラミジア　シに、ヒトに呼吸器感染を引起す、ＴＷＡＲクラミジアはヒトのいた る所にいる病原体であることが分つてお夛、今までの所、呼吸器感染、特に肺炎 と関連づけられている（サイク　ビー、ワンプ　エスピー、クリーモラ　エム、 プランダー　イー、ルサネ／　イー、クラミジア　シタシ異状株による軽度の肺 炎の流行、ジャーナル　オブイン７エクシャス　ディジークズ１５１巻＝８３２ 頁、１９８５年、５ａｉｋｋａ　Ｐ、　Ｗａｎｇ　ＳＰ、−Ｋｌｅｅｍｏｌｃ　 Ｍ、　Ｂｒａｎｄｃｒ　Ｅ。

Ｒｕ５ａｎｅｎ　Ｅ、　Ａｎ　ｅｐｉｄｅｍｉｃ　ｏｆ　ｍ１ｌｄ　ｐｎｅｕｍ ｏｎｉａ　ｄｕｅ　ｔｏ　ａｎｕｎｕｓｕａｌ　５ｔｒａｉｎ　ｏｆ　Ｃｈｌａ ｍｙｄｉｅ　ｐｅｉｔｔａｃｉ、　Ｊ、　Ｉｎｆｅｃ　Ｄｉｓ１５１　：　８５ ２，１９８５：クリーモラ　エム、サイク　ピー、ピサコルビ　アール、ワンプ 　エスピー、グレイストンジェイティー、フィンランドの軍隊訓練者における新 クラミジア微生物、ＴＷＡ　Ｒにより引起される肺炎の流行、ジャーナル　オブ 　インフェクシャス　ディジークズ１５フ巻：２３０頁、１９８８年、Ｋｌｅｅ ｍｏｌｍ　Ｍ、　５ａｉｋｋｕ　Ｐ。

Ｖｉｓａｋｏｒｐｉ　Ｒ，Ｗｉｎｇ　Ｓｒ、　Ｇｒａｙｓｔｏｎ　ＩＴ、　Ｅｐ ｉｄｅｍｉｃｓ　ｏｆｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ　ｃａｕｓｅｄ　ｂｙ　ＴＷＡＲ， ａ　ｎｅｗ　Ｃｈｌａｍｙｄｉａ　ｏｒｇａ−ｎｉｓｍ、ｉｎ　ｍｉｌｌｉｔｍ ｒｙ　ｔｒａｉｎｅ＠ｓ　ｉｎ　Ｆｉｎｌａｎｄ、Ｊ　ＩｎｆｅｃｔＤｉ＠１５ ７：２３０，１９８８；グレイストン　ジェイティー、ワンプ　エスピー、クオ 　シーシー、アルドマン　ジェイ、マリ−ティー、モルドルスト　ジー、ＴＷＡ Ｒ呼吸器感染における臨床所見、ディー　オリニル等線クラミジアル　インフェ クシッンズ、３５７頁、ケンブリッジユニバーシティ−プレス、ケンブリッジ　 １９８４年、Ｇｒａｙｓｔｏｎ　ＪＴ、Ｗａｎｇ　Ｓｒ、Ｋｕｏ　ＣＣ，Ａｌｔ ｍａｎ　Ｊ、Ｍａｒｒｉｅ　Ｔ。

Ｍｏｒｄｈｏｒｓｔ　Ｃ，Ｃ１１ｎｉｃａｌ　ｆｉｎｄｉｎｇｓ　ｉｎ　ＴＷＡ Ｒｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｔｒａｃｔ　１ｎｆｅｃｔｉｏｎｓ、Ｉｎ　：Ｄ　０ ｒｉｅｌ　ｅｔ　ａｌ、ｅｄｓ、、Ｃｈｌａｍｙ−ｄｉａｌ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏ ｎｓ、ｐｓｓ７．Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ　Ｕｎｉｎｅｒｓｉｔｙ　Ｐｒｅｓｓ。

Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ　１９８６　；　マリ−ディージエイ、グレイストン　ジェ イティー、ワンプ　エスピー、クオ　シーク−、クラミジア　ＴＷＡＲ株と関連 する肺炎、アナロス　オプインターナル　メディシン　１０６巻：５０７頁、１ ９８７年、Ｍｉｒｒｉｅ　ＴＪ、　Ｇｒａｙａｔｏｎ　ＪＴ、　Ｗａｎｇ　Ｓｒ 、　Ｋｕｏ　ＣＣ，Ｐｎｅｕｍｏｎｉａａ＠５ｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈ ｅ　ＴＷＡＲ５ｔｒａｉｎ　ｏｆ　Ｃｈｌａｍｙｄｉｍ。

ＡｎｎｌｎｔＭｅｄｌＯ？：５０７．１９８７：ｚ７−ｒｙ　エム　７−ル、サ イク　ビー、クリーモラ　エム、ビサコルビアール、クオ　シーシー５．グレイ ストン　ジェイティー、軍隊の肺炎流行中の軽度で症状の無いクラミジア゛Ｉ” ＷＡＲ呼吸器感染、クラミジア　リサーチ　！　グロシーディングズ　オプ　フ ァースト　シンポジエム　オブ　ヨーロピアン　ソサイエティー　フォア　クラ ミジア　リサーチ　５６頁、アルムクピスト　アンド　ピクセル　ストック＊　 ＃　Ａ　１９８８年、Ｅｋｍａｎ　ＭＲ，５ａｉｋｋｕ　Ｐ、　Ｋｌｅｅ−ｍｏ ｌａ　Ｍ、　Ｖｉｓａｋｏｒｐｉ　Ｒ，Ｋｕｏ　ＣＣ，Ｇｒａｙｓｔｏｎ　ＪＴ 、　Ｍｉｌｄ　ａｎｄａｓｙｍｐｔｏｍｍｔｉｃ　ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ　１ ｎｆｅｃｔｉｏｎｓ　ｗｉｔｈ　４ＴＷＡＲｄｕｒｉｎｇ　！ｌ　ｍ１ｌｌｉｔ ｉｒｙ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａ　ｅｐｉｄｅｍｉｃ、　Ｉｎ　：Ｃｂｌａｍｙｄｉ ａ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｉ、　Ｐｒｏｃ、　Ｉｓｔ　５ｙｒｎｐ　Ｅｕｒｏｐｅ ａｍ　５ｏｃｆｏｒ　Ｃｈｌａｍｙｄｉａ　Ｒｅｓ、　ｐ、　５６．　Ａｌｍｙ ｖｉｓｔ　＆Ｗｉｋｓｅ１１．　Ｓｔｏｃｋ−ｈｏ１ｍ１９８８）。

クラミジアＴＷＡＲ（Ｃｌａｍｙｄｉａ　ＴＷＡＲ）感染は診断が難しい、細胞 培養による微生物の分離は容易ではない。

ＴＷＡＲ感染の病因診断で現在最も信頼できる方法ＦｉＴＷＡＲ抗体に対する微 量免疫螢光法である（ワンプ　エスピー、グレイストン　ジェイティー、　ＴＷ ＡＲ生物についての微量免疫螢光血清学的研究、「クラミジアシ　インフェクシ 嘗ンズ」ディー　オリエル等ｉｉ　１９８６年：　５２９−５２頁、ケンブリッ ジ　ユニバージティー　プレス、ＷａｎｙＳＰ、　Ｇｒａｙｅｔｏｎ　ＪＴ、　 Ｍｉｃｒｏｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｓｅｒｏｌｏ−ｇｉｅａｌ 　５ｔｕｄｉｅｓ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ＴＷＡＲｏｒｇａｎｉｓｍ、　Ｉ（１− Ｃｈｌａ　−ｍｙｄｉａｌ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　’　ｅｄ、　Ｄ、　０ｒｉｅ ｌ　ｅｔ　ａｌ、　１９８６　：　３２９−３２．　Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ　Ｕｎ ｉｖ、　Ｐｒｅｓｓ　）ａ微量免疫螢光を使って、呼吸器病原としてのＴＷＡ　 Ｒ株の役割が報告されている。補体固定試験（ＣＦ）およびクラミジアＬＰＳと 交差反応することが分りているＲｅ　−ＬＰＳを使った酵素イムノアッセイをＴ ＷＡ　Ｒ感染の血清学的診断に使用できる。しかし、この二つの方法は、すべて のクラミジア種に共通のＬＰＳに対する抗体を測定するため、すべてのクラミジ ア感染を拾う。

クラミジアは心臓血管系病原として望められ、また種の□伸性心臓病にも関係し ている。クラミジア　トラフマチイス（Ｃｔｒａｃｈｏｒｎａｔｉｓ　）　（グ レイストン　ジェイティー、モルドルスト　シーエイチ、ワンプ　エスピー、ク ラミジア　トラフマチイス感染と関連する小児時期心筋炎ジャーナル　オブ　ア メリカン　メディカル　アソシエイシ■ン　１９８１年：２４６巻２８２５−２ ７頁、ＧｙａｙｓｔｏｎＪＴ、　Ｍｏｒｄｈｏｒａｔ　ＣＨ，Ｗａｎｇ　ＳＰ、 　Ｃｈｉｌｄｈｏｏｄ　ｍｙｏｃａｒｄｉｔｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔ ｈ　Ｃｈｌａｒｎｙｄｉｓｉ　ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ　量ｎｆｅｃｔｉｏｎ。

ＪＡＭＡ　１９８１，２４６　：　２８２５−２７　：　リンゲル　アールイー 、ブレノナ−ジェイティー、レンネルス　エムビー、ファング　ニスダブリ為− 、ワンプ　エスピー、グレイストン　ジェイティー、バーマン　エムエイ　クラ ミジア　トラフマチイス　心筋炎の血清学的証拠、ペディアトリクス　１９８２ 年＝７０巻：５４−５６頁、Ｒ３ｎｇｅｌ　ＲＥ、　Ｂｒｅｎｏｅｒ　ＪＴ、　 Ｒｅｎｎｅｌｓ　ＭＢ、　Ｈｕａｎｇ　ＳＷ、　ＷｉｎｇＳＰ、　Ｇｒｅｙｓｔ ｏｎ　ＪＴ、　Ｂｅｒｍｍｎ　ＭＡ、　Ｓｅｒｏｌｏｇｉｃ　ｅｖｉｄｅｔ＋ｅ ｅ　ｆｏｒｃｉ）（グイモック　アイダブリニー、ローノン　ジエイエム、マク レケン　ダブリ、−ジェイ、ロス　シーエイシー、オーム病と関連した心筋炎ブ リティッシェ　ジャーナル　オブ　クリニカル　プラクト　１９７１年：２５巻 ：　２４０−４２頁、Ｄｙｍｏｃｋ　（Ｗ、　Ｌａｗｓｏｎ　ＪＭ、　ＭａｃＬ ｅｎｎａｎＷＪ、　Ｒｏｓｓ　ＣＡＣ，Ｍｙｏｃａｒｄｉｔｉｓ　ａｓｓｏｃｉ ａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｐｓｉｔｔａ−ｃｏｓｉｓ、　Ｂｒ１ｔ　Ｊ　Ｃ１１ｎ　 Ｐｒａｃｔ　１９７１　；２５　：２４０−４２　；　）−マス　ディージエイ ビー、マクドナルド　ピーシエイ、ファウラー　ジェイ　エム、誤診−オウム摘 心筋炎プラクシｗ　＝　７　１９７７年：２１８巻：３９４−９８頁；　Ｔｈｏ ｍａｓＯＪＢ、　ＭａｃＤｏｎａｌｄ　ＰＪ、　Ｆｏｗｌｅｒ　ＪＭ、　Ｍｉｓ ｔａｋｅｎ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ−ｐｓｉｔｔａｃｏｓｉｓ　ｍｙｏｃａｒｄｉ ｔｉｓ、　Ｐｒａｃｔｉｏｎｅｅ　１９７７　；　２１８：３９４−９８）両方 と関連する心筋炎に関する報告がある。

心内膜炎が両種によって起される感染に関係して示されており、（論説、クラミ ジア心内膜炎、ランセット１９８０年：　ｉ　：　１３２．　Ｅｄｉｔｏｒｉａ ｌ、　Ｃｈｌａｍｙｄｉａｌ　ｅｎｄｏｃａｒｄｉ　−ｔ　ｉｌ、　ＬＩＩｌｌ Ｃｅｔ　１９８０　＊　ｉ　：　１３２　：　７７　／デフ　ヘル、ＦＦ−７ジ エイ　エム、ワタナクナコルン　シー、メネフィーエムジー、ロング　エイチデ ィー、ティータ−アールクラミジア　トラフマチイス心内膜炎、アメリカンハー ト　ジャーナル　１９７８年：９５巻：　ｂ２ｙ−ｓｂ。

ｖａｎ　ｄｅｒ　Ｂｅ１−Ｋａｈｎ　ＪＦｉ’Ｌ、　Ｗａｔａｎａｋｕｎａｋｏ ｒｎ　Ｃ，Ｍｅｔ＋ｅｆｅｅ　ＭＧ。

Ｌｏｎｇ　ＨＤ、　Ｄｉｅｔｅ　Ｒ，Ｃｈｌａｍｙｄｉａ　ｔｒａｃｈｏｍａｔ ｉｓ　ｅｎｄｏｃａｒｄｉ−ｔｉｓ、　Ａｒｎｅｒ　Ｈｅａｒｔ　Ｊ　１９７８ 　Ｈ２Ｓ：６２７−５６　）、またクラミジア　シタシ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ　 ｐｓｉｔｔａｃｉ　）で引き起される主要な動脈塞栓症も記載されている（プロ メイジ　ディー、ジェフリー　ディージエイ、フィリップ　ジー、クラミジア感 染における塞栓症症状、ジャーナル　オブインフェクシｌン　１９８０年：２巻 ：　１５１−５ｔ頁、Ｂｒｏｍａｇｅ　Ｄ、　Ｊｅｆｆｒｉｅｓ　ＤＪ、　Ｐｂ １ｌｌｉｐ　Ｇ、　Ｅｍｂｏｌｉｃ　ｐｈｅｎｏ　−ｍｅｎａ　ｉｎ　ｃｈｌａ ｍｙｄｉｍｌ　１ｎｆｅｃｔｉｏｎ、　Ｊ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　１９８０　； ２　：　１５１−５９　）、その上、原発心筋病とはびこったクラミジア感染の 疫学的関連さえもすでに１９６７年に示されている（サラトン　ジーシー、モリ セイ　アールエイ、トビン　ジェイアール、アンダーノン　ティーオー、シタコ シスーりンホグラニエローマ　ベネルム群（クラミジアシー）による感染の血清 学的証拠を持つ６膜および心筋病、サーキエレイシ胃ン　１９６７年：３６巻： ８３〇−３８頁、５ｕｔｔｏｎ　ＧＣ，Ｍｏｒｒｉａｓｅｙ　ＲＡ、　Ｔｏｂｉ ｎ　ＪＲ，Ａｎｄｅｒ−ｓｏｎ　ＴＯ，Ｐｅｒｉｃａｒｄｉａｌ　ａｎｄ　ｍｙ ｏｃａｒｄｉｍｌ　ｄｉｓｅａｓｅ　ａｓｓｏｃｉ　−ａｔｅｄ　ｗｉｔｓ　ｓ ｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ　ｅｖｉｄｅｎｃｅ　ｏｆ　１ｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｂｙ　 ａｇｅ−ｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｓｉｔｔａｃｏｇｉｓ−１ｙｍｐｈｏｇｒａ ｎｕｌｏｒｎａ　ｖｅｎｅｒｕｍｇｒｏｕｐ　（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｃｅａ　） 、　Ｃ１ｒｃｕｌａｔｉｏｎ　１９６７　；　Ｓ　６　：８５０・−３８：　サ ラトン　ジーシー、デマキス　ジェイエイ、アンダーノン　ティーオー、モリセ イ　アールエイ、原発性心筋病および呼吸器感染後におけるクラミジア（オーム 病−ＬＧＶ病因）感染のイリノイにおける散在性発生の血清学的証拠、アメリカ ン　ハート　ジャーナル１９７１年：８１巻：　５９７−６０７．５ｕｔｔｏｎ 　ＧＣ，Ｄｅｍａｋｆ　ＪＡ。

Ａｎｄｅｒｓｏｎ　Ｔｏ、　Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ　Ｒ，Ａ、　Ｓｅｒｏｌｏｇｉ ｃａｌ　ｅｖｉｄｅｎｃｅｏｆ　ａ　５ｐｏｒａｄｉｃ　ｏｕｔｂｒｅａｋ　ｉ ｎ　ｌ１ｌｉｎｏｉｓ　ｏｆ　１ｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｂｙＣｈｌａｍｙｄｉａ＋ 　（ｐｓｉｔｔａｃｉｓｉｓ　−ＬＧＶ　ａｇｅｎｔ　）　ｉｎ　ｐｕｔｉｅｎ ｔｓｗｉｔｈ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｍｙｏｃｍｒｄｉａｌ　ｄｉｓｅａｓｅ　ａｎ ｄ　ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｄｉｓｅａｓｅ、　Ａｍｅｒ　Ｈｅａｒｔ　Ｊ　１ ９７１　：８１：５９７−６０７　）。

今や、クラミジア、特にクラミジアＴＷＡＲ（Ｃｈ）ａｍｙｄｉｓＴＷＡＲ）は 冠動脈性心臓病、特に急性梗塞と関係があることがわかった。慢性心臓病および 梗塞におけるクラミジアＴＷＡＲ（Ｃｈｌａｒｎｙｄｉａ　ＴＷＡＲ）の示唆さ れる病原機構は次の通りである： ＴＷＡＲで引起された呼吸器感染後に、何人かの人は慢性ＴＷＡＲ感染を起し、 その際、細菌が肺らるいは心臓血管系の細網内皮組織系の細胞内に存在している 。クラミジアは（ＬＰＳ）のような成分を脱ざ拾て、これは感染細胞から放出さ れる。血液中に存在するクラミジアＬＰＳに対する抗体は循環するＬＰＳと結合 して免疫複合体を形成し、この複合体が更に血管内皮で炎症反応を高め、冠動脈 性心臓病につながる。心筋梗塞の急性相では、血清中のＬＰＳに対する抗体レベ ルは非常に低く、免疫複合体の存在を示唆し、梗塞の後では、十分なＬＰＳに対 する抗体反応が認められ、組織に沈着した免疫複合体の放出、または免疫複合体 からの抗体の放出、またＦｉＬＰＳに対する実際の反応を示唆する。

巣にクラミジアの関与する他の未だ未知の型のものもあると信じられている。

したがって、クラミジアに有効な薬剤による慢性クラミジア感染を治療すること により、慢性冠動脈性心臓病をなおすことができる。一方、クラミジア成分の炎 症効果に対して有効な薬剤を使った治療によって心筋梗塞が予防できる。

クラミジア（対して好適な薬剤は、例えばテトラサイクリン、エリスロマイシン 、リファンピシンおよびフルオａキル７である。現在の所、慢性クラミジア感染 症を治療する最良のものは知られていない、テトラサイクリンやエリスロマイシ ンで正しく治療した後に感染再発や再活性化がしばしば見られる。慢性クラミジ ア感染を除くには、抗生物質または異る抗生物質の組合せによるより長い治療と （Ｊａ１間までの）、よシ高用量が明らかに必要でるる。

本発明によシ、患者における心臓梗塞の危険性をスクリーニングすることもでき る。この方法は、血液、喀痰、胸水、尿、気管支鏡または気管支肺胞洗滌による 試料、または心臓、血管内皮、膵臓、肝臓またに肺からの生検試料をと９、クラ ミジア、ＬＰＳまたは膜蛋白のようなりラミシア成分、またにクラミジアまたは クラミジア抗体の誘導により宿主細胞が産生じた物質が存在するかどうかについ てその試料を試験することからなる。好適な方法は、培養分離、酵素イムノアッ セイ、ラジオイムノアッセイまたは螢光イムノアッセイのような同相または液体 イムノアッセイ、免役螢光法のような免疫化学的方法、組織学的および免疫組織 学的染色法、電子顕微鏡法、免疫電子顕微鏡法またＦｉ核酸ハイプリダイゼイシ ョンでｂる。この方法は心筋梗塞および冠動脈性心臓病の診断にも使用できるし 、急性心筋梗塞または冠動脈性心臓病の患者のモニターおよび治療にも使用でき る。

病気は、例えば、脳梗塞または血管塞栓病でろってよい。

本発明の一面によれば、ワクチンを製造し、予防に使用することができる。

慢性冠動脈性心臓病および心筋梗塞とクラミジアの関連患者および対照 患者を２つの群に分けた。急性心筋梗塞（ＡＭＩ）群は、急性心筋梗塞でおると してヘルシンキ大学中央病院（Ｈｅｌｓｉｎｋｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｃｅ ｔ＋ｔｒａｌ　Ｈｏ５ｐｉｔａｌ　）に入院した４０人の連続した若年および中 年の男性から成る。これに含まれる規準Ｆｉ＝男性（５０才以下）、ヘルシンキ 在住またＦｉＭぐ近くの住人で、入院前４８時間以内に症状が出現、心電図（Ｅ ＣＧ）での典型的変化および血清クレアチニンホスホキナーゼＭＢ−アイソザイ ム活性の上昇によって急性心筋梗塞の証明があるもの。患者の平均年令に４４． ５才（５４−５０才の範囲）。

慢性冠動脈性心臓病（ＣＣ）ＴＤ　）群は狭心性の重篤な慢性症状のために冠動 脈血管造影でその病院に入院した３０人の連続した男性患者からなる。研究に組 込む前６ケ月以内に急性心筋梗塞を起した患者は除外した。すべての患者はＡＭ Ｉ群と同じ地域に住んでおり、すべてが臨床的にも血管造影的にも慢性冠動脈性 心臓病とされた。平均年令Ｆ１４１才（２８乃至５０才の範囲）であった。

対照は、患者２同じ地域でヘルシンキ市の会式の住民記録からコンビエータによ るランダム板取で募集した４１人の健康な男性であった。勧誘した人の６０４が 参加に同意した。許否した最も多い理由は時間がないことであった。病歴が陰性 であり正常の休息ＥＣＧから判断して、対照はいずれも冠動脈性心臓病のいかな る徴候も症状も持っていなかった。高血圧のためにベータブロッカ−剤で治療さ れた男性を除き、すべての者が慢性病もなく、または治療されていなかった。対 照は患者と同じ年令範囲（３０乃至５０、平均年令３９．１才）を表わすように 選択し、急性心筋病のインデックス　ケースの承認後２乃至４週間に１回、連続 的に診察にくるようにめられた。

２人のＡＭＩ患者を除き（１人は死亡し、１人は脱落した）、すべての人から、 承認時と４週間後に抗体検査のための血清試料を採取した。更に承認後３ケ月し て第三の試料ｔ−ＡＭ　１患者から得た。

微量−免疫螢光（微量−ＩＦ）試験 単にＴＷＡＲ抗原（ＡＲ−５９，ワシントン　リサーチファンデージ曹ン、シア トル、ワシントン州、アメリカ合衆国、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ　Ｒｅ５ｅａｒｃ ｈ　Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ、　５ｅａｔｔｌｅ。

ＷＡ、　Ｕ、　Ｓ、　Ａ、から得た）のみを使う、ワング　アンドグレイストン ＣＷＡＮＧ　＆　ＧＲＥＩＳＴＯＮ　）の微量−！Ｆ分析の簡便法を使ってクラ ミジアＴＷＡＲ抗体を測定した（ワング　エスピー、プレイストン　ジェイティ ー、新しいマイクロタイター間接免疫螢光法における性器ＴＲＩＣ。

リンホグラニ島ローマ　ベネルム、および関連生物間の免疫学的関係、アメリカ ン　ジャーナル　オン　オフタ／ｌ／　４　ｏジー１９７０年ニア０巻：　５６ ７−７４．ＷａｎｇＳＰ。

Ｇｒｅｙｓｔｏｎ　ＪＴ、　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉ ｐ　ｂｅｔｗｅｅｎｇｅｎｉｔａｌ　ＴＲＩＣ，ｌｙｍｐｈｏｇｒａｎｎｌｏｒ ｎｍ　ｖｅｎｅｒｕｍ、　ａｔ＋ｄ　ｒｅｌａｔｅｄｏｒｇａｎｉｅｍ　ｉｎ　 ｍ　ｎｅｗ　ｍ１ｃｒｏｔｉｔｅｒ　１ｎｄｉｒｉｅｃｔ　ｉｍｍｕｎｏｆｌｕ ｏ−ｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｍｅｔｈｏｄ、　Ａｒｎ　Ｊ　Ｏｐｈｔｂａｌｍｏｌ　 １９７０　；　７０　：　３４７−７４〕。

ヒト免疫グロブリンに対するフルオレッセインーインチオシアネート標識コンジ ュゲート（λ−鎮脣異的、カルスタッド、オースチン、アメリカ合衆国、Ｋａｌ ｌｅｓｔａｄ。

Ａｕ５ｔｉｎ、　Ｕ、　Ｓ、　Ａ、　ｉ　ｔｓ−’Ｊｌｋ％異的、ダコバット、 チンマーク、Ｄａｋｏｐａｔｔ、　Ｄｅｎｍａｒｋ　：　ａ−鎖特異的、オリオ ンディアグノスティックス、フィンランド、０ｒｉｏｎ　Ｄｉａｇ　−ｎｏｓｔ ｆｃｓ、　Ｆｉｎｌａｎｄ　）を対比染色としてのアミドシアワルツと共に用い た。血清を１：８から始めて２１！希釈で滴定し、陽性の限界タイターを１＝３ ２と考えた（ワングエスビー、グレイストン　ジェイティー、ＴＷＡＲ生物につ いての微量免疫螢光血清研究、「クラミジア感染」ディーオリール等編、１９８ ６年：　３２９−５２頁、ケンブ’Ｊ　ｙジ　ユニバーシティ　プレス、Ｗａｎ ｇ　ＳＰ、　ＧｒｅｙｓｔｏｎＪＴ、　Ｍｉｃｒｏｉｒｒｒｎｕｎｏｆｌｔ＋ｏ ｒｅｓｅｅａｃｅ　ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ　ｓｔｕｄｉｅｓｗｉｔｈ　ｔｈｅ 　ＴｗＡＲｏｒｇａｎｉｓｍ、　Ｉｎ　＠Ｃｈｌａｍｙｄｉｍｌ　Ｉｎｆｅｃｔ ｉ　−ｏｎｓ　’、ｅｄ、ＤＯｒｉｅｌ　ｅｔ　ａｌ、　１９８６；５２？−４ ２゜Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ　Ｕｎｉｔ、　Ｐｒｅｓｓ　）　ｅクラミジア　リボ多 糖に対する抗体測定のための酵素−イムノアッセイ（ＬＰＳ−ＥＩＡ） この方法の詳細と確認は以前に記載されている（プオラッカイネン　エム、サイ クビー、レイノネン　エム、ヌ茅ミネン　エム、メクレ　ビーエイチ、小児にお けるクラミジア肺炎およびその血清診断、ジャーナル　オブイン７エクシャス　 ディジージズ　１９８４年：１４９巻：　５９８−６０４頁、Ｐｕｏｌａｋｋｍ ｉｎｅｎ　Ｍ、　５ａｉｋｋｕ　Ｐ、　ＬｅｉｎｏｎｅｎＭ、　Ｎｕｒｍｉｎｅ ｎ　Ｍ、　Ｍｉｋｅｌｊ”ＰＲ，Ｃｈｌａｍｙｄｉａｌ　ｐｕｅｕｒｎｏｎｉｔ ｉｓａｎｄ口ｓ　ｓｅｒｏｄｉａｇｎｏｓｉｉ　ｉｎ　１ｎｆａｎｔｓ、　Ｊ　 Ｉｎｆｅｃ　Ｄｉｓ１９８４　：　１４？　：５９Ｂ−６０４ン、簡単には、抗 原はクラミジア群抗原に相当することが示されている（ヌルネンエム、レイノネ ン　エム、サイク　ピー、メクレ　ビーエイチ、クラミジアの族特異的抗原：腸 内細１のリボ多糖への類似、サイエンス　１９８３年；２２０巻：１２７８−８ １頁：　Ｎｕｒｍｉｎｅｎ　Ｍ、　Ｌｅｉｎｏｎｅｎ　Ｍ、　５ａｉｋｋｕ　Ｐ 　、　Ｍ：１ｋｅｌｉｒＰＨ，Ｔｈｅ　ｇｅｎｕｓｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｕｔｉ ｇｅｎ　ｏｆ　Ｃｈｌａｍｙｄｉａ　：Ｒｅｓｅｍｂｌａｎｃｅ　ｔｏ　ｔｈｅ 　１ｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｏｆ　ｅｎｔｅｒｉｃｂａｃｔｅｒ ｉａ、　５ｃｉｅｎｃｅ　１９８５　；　２２０　：　１２７９−８１　）場内 ａＷのコア欠損変異株からのＬＰＳであった（サルモネラ　ミネソタ、Ｓｘｌｍ ｏｎｅｌｌａ　ｍ１ｎｅｓｏｔａのＲｅ−ＬＰＳ、カルビオケム、アメリカ合衆 国、Ｃａｌｂｉｏｅｈｅｍ、Ｕ、　Ｓ、　Ａ）。

ヒトのＩｇＧ、ＴｇＭおよびＩｇＡに対するアルカリ　ホスファターゼ標識コン ジュゲートをオリオン　ダイアグノスティックス　０ｒｉｏｎ　Ｄｉｍｇｎｏｓ ｔｉｃｓ　（ニスブー　フィンランドＥｓｐｏｏ　Ｆｉｎｌａｎｄ　）から得た 。タイターをＯＤ値ＣＬＳを与える最高希釈として表わした。

統計検定 試料比率をイエーツ（Ｙａｔｅｓ’　）の補正をしたカイ二乗検定で比較した。

最小推定期待値が５以下の時はフィック＋　−（Ｆｉｓｈｅｒ’　ｓ　）のｎ密 検定を使った。

ＴＷＡＲＩＦ＝抗体 両患者群は対照群より有意に多くのＩｇＧおよびＩｇＡ抗体を持っていた（第１ 表）。

≧１＝５２のタイターのＩｇＧ抗体での感染率は対照の２４７４１に比較してＡ ＭＩ群で５５／４０　（ｐ（ｃＬ０５　）およびＣＣＨＤ群で２６７５０　（ｐ （α０１）であった、それぞれの幾何平均タイター（ＧＭＴ）は２４５．７２． ５および７＆４であった。患者群は対照より有意に高いＴＷＡＲ物に対するＩｇ Ｇタイター（≧１２８）をも持っていた（６／４１に対して２０／４０おｊび１ ４／３０．ｐ（（ＬＯＯＯ７）。

ＩｇＡの感染率は対照の３／４１に対してＡＭＩ群でＮ／４Ｇ。

ＣＣｔＩＤ群で１０／３０　（ｐ（ａｏ００４　）であり、そのＧＭＴはそれぞ れ４２．ＩＬ７および１＆２であった０両方のマーカー、上昇したＩｇＧとＩｇ Ａの感染率を組合せると、有意水準はｐ（１０００１（対照の７７４１に対して ２７／４０と１５／３０　）ｅ　ＩｇＭ抗体は見い出せなかった。

ＥＩＡ抗体 大部分の患者はＲｅ−ＬＰＳに対するＩｇＧまたはＩｇＡ抗体を持たず、そのＩ ｇＭ抗体レベルは対照に比較して低かった。ＡＭＩの患者の２６７５９は４週間 間隔を置いて得た第一回と第二回の血清試料の間で顕著なＲｅ−ＬＰＳへのＩｇ Ｍ抗体反応を示した。この反応は幾分低いがＩｇＧとＩｇＡ抗体くも見られた。

抗体タイターは第三回の血清試料では低下した。対の血清試料でＲｅ−ＬＰＳに 対する血清転換をＣＣＨＯ患者は誰も示さず、また、対照は１人だけが示した（ 第１表）。

第　１　表 患者および対照群におけるクラミジアＴＷＡＲに対するＩｇＧまたはＩｇＡタイ ターの上昇およびＲｅ−ＬＰＳ抗原を便りた酵素イムノアッセイ（ＥＩＡ）Ｋお ける対にした血清間の有意な（≧３−倍）血清転換の存在ＡＭＩ＝急性心筋梗塞 ＣＣＨＤ　＝慢性冠動脈性心臓病 有意差 ＡＭＩ　ＣＣＨＤ　対照　ＡＭＩ対ＡＭ１対（巖４０）（巖３０）（巖４１）　 ＣＣＨＤ　対照ＴＷＡＲＩｇＧ　３４　２６　２５　ｎｓ＊　ｒ：Ｌ０２≧３２ ＴＷＡＲＩｇＧ　２０　１４　６　ｎｓ　ｒＬ０００７≧１２８ ＴＷＡＲＩｇＧ　７ｆＬ７９　７１Ｌ７９　５Ａ４２　ｎｓ　（ＬＯＯＯ２ＧＭ Ｔ　＊＊ ＴＷＡＲＩｇＡ　１８　１１　４　ｎｓ　（１０００４≧！１２ ＴＷＡＲＩｇＡ　２ｒＬ３９　１７．９６　１ａ６７　ｎａ　（ＬＯＯＯ８ＭＴ ＴＷＡＲＩｇＧ／Ａ　２７　１５　７　！ＩＩ　α００００１≧１２８ル３２ Ｒｅ−ＬＰＳ　ＥＩＡ ≧３−倍上昇　２６１５９　Ｇ／３０　１／４１　（１００００１α００００１ ＊＝有意差なしくｐ＞Ｌ１０５） 本＊＝幾何平均タイター 抗原としてＴＷＡＲ基本小体（ｅｌｅｍｅｎｔａｒｙ　ｂｏｄｉｅｓ　）　を使 りた微量免疫螢光分析は、この血清学的に特異な新しいクラミジア種に対して特 異的な抗体をｉｌｌ定するための信頼できる方法でろる（ワンプ　エスピー、グ レイストン　ジェイティー、「クラミジア感染」ディー　オリーＡ／等編　１９ ８６年：　５２９−５２頁、ケンブリッジ　ユニバージティー　プレス、Ｗａｎ ｇ　ＳＰ、　Ｇｒｅｙｓｔｏｎ　ＪＴ、　Ｉ！１−Ｃｈｌａｍｙｄｉａｌ　Ｉｎ ｆｅｃｔｉｏｎｓ　−ｅｄ、　Ｄ、　０ｒｉｅｌ　ｅｔ　ａｌ−１９８６：　３ ２９−３２．　Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ　Ｕｎｉｖ　Ｐｒｅｓｓ　：クオ　シーシー 、チェノ　エイチ　ェイチ、ワンプ　エスピー、グレイストン　ジェイティー、 　ＴＷＡＲと呼ぶクラミジア　シタシ株の新しい群の同定、ジャーナル　オブ　 クリニカルマイクロバイオロジー　１９８６年：２４巻：５０３４−５７頁、Ｋ ｕｏ　ＣＣ，Ｃｈｅｎ　ＨＨ，Ｗａｎｇ　ＳＰ、　Ｇｒｅｙｓｔｏｎ　ＪＴ、　 Ｉｄｅｎｔｉｆｉ　−ｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｎｅｗ　ｇｒｏｕｐ　ｏｆ　Ｃ ｈｌａｍｙｄｉ鳳ｐｓｉｔｔａｃｉ　５ｔｒａｉｎ＠ｃａｌｌｅｄ　ＴＷＡＲ， Ｊ　ＣｌｉｎＭｉｃｒｏＣ１１ｎ　１９８６：２４：１０３４−３７）、卵黄の うまたは組織培養から調製したクラミジア群抗原標品に存在する組織脂質で汚染 されることを避けるために、クラミジアＬＰＳと一つの炭化水素エピトープを共 有する知られるＲｅ−ＬＰＳ抗原をＥＩＡに使用する（ヌルノネン　エム、レイ ノネン　エム、サイク　ピー、メケレ　ビーエイチ、サイエンス　１９８５年： ２２０巻：　１２７９−８１頁、Ｎｕｒｍｉｎｅｎ　Ｍ、　Ｌｅｉｎｏｎｅｎ　 Ｍ、　５ａｉｋｋｕＰ、Ｍｌｋｅｌ：ｆ　ＰＨ，５ｃｉｅｎｃｅ　１９８３　； 　２２０　：　１２７９−８１　；論説鳥起原ではないオーム病、ランセラ）　 １９８４年：ｉｉ：４４２−４３　頁、Ｅｄｉｔｏｒｉａｌ　、ＰｓｉｔＬａｃ ｏｓｉｓ　ｏｆ　ｎｏｎ　−ａｖｉａｎ　ｏｒｉｇｉｎ、Ｌａｎｃｅｔ　１９８ ４　；　ｉｉ　：４４２−４５　）、Ｒｅ−ＬＰＳ抗原に対する抗体反応は放血 病および腎孟腎炎のような腸内細菌感染には見られない、Ｒｅ−ＬＰＳに陽性の 抗体反応を微量−ＩＦによシクラミジア起原であることを確認した。したがって 、使用したこれらの異る型の試験を使った抗体所見はクラミジア感染の診断であ ると考えられる。

クラミジア　ＴＷＡＲｔｆ広く流行する病気としてフィンランドで起ることが知 られており、これは軍隊環境で都合よく監視されている。この流行により、フィ ンランド成人男子国民の半分近くが認められるクラミジアＴＷＡ　Ｒに対するＩ ｇＧ抗体を持っておシ、これは他の先進国においても典屋的状況である０本研究 において血清は１９８３年から１９８５年に集められた。ＴＷＡ　Ｒ流行はフィ ンランドで１９８５年に始まり、このクラミジアに対する低タイター（≧５２） 抗体の感染率が６５％で、対照におけるＩｇＧまたはＩｇＡ抗体の上昇がわずか であることは流行中の抗体状況によく合致する。しかし、慢性冠動脈性心臓病お よび急性心筋梗塞患者は予測より高い感染率を持ち、また、コンビエータ一対照 よりＴＷＡＲクラミジアに対する抗体タイターが有意に高い。

一次のＴＷＡＲ感染は主にＩｇＭ反応、遅延ＩｇＧ反応および弱いか、または認 められないＩｇＡ反応で特徴づけられ、一方、二次の感染はＩｇＭ反応がなく、 急速なＩｇＧおよびＩｇＡ反応で特徴づけられる６本研究における患者は高く安 定したＩｇＧおよびＩｇＡタイターを持ち、微量−ＩＦ試験でＩｇＭ抗体が認め られない、すべてを総合すると、ＣＣ）ＩＤとＡＭＩ患者に見られる抗体所見に 慢性ＴＷＡＲクラミジア感染を示唆している。Ｒｅ−ＬＰＳ　ＥＩＡでの異常反 応に更に冠動脈性心臓病にクラミジアが関与することを示す、この確立された危 険因子に反対はないが、この思いがけない関連に冠動脈性心臓病の予防、治療お よび診断に別な基礎を提供する。

患者および対照 ＡＭＩ患者群は１９８５年および１９８６年に急性心筋梗塞でヘルシンキ大学中 央病院（Ｈｅ１ｓｉｎｋｉ　ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＣｅｎｔｒａｌ　Ｈｏ５ｐｉ ｔａｌ　）に入院した４４人の連続した若年、中年および老年の男女からなる。

採用の規準は：ヘルシンキまたは直ぐ近くの住人で、入院の前３６時間以内に病 状が発現し、ＥＣＧの典型的変化と血清クレアチニンホスホキナーゼＭＢ−アイ ンザイム活性上昇によって急性心筋梗塞の証明がされているものである。

対照は、患者と同じ地域からのヘルシンキ市の公式住民記録からコンビエータに よるランダム抜取で募集した４４人の健康な男女であった。陰性の病歴と正常な 休息ＥＣＧから判断して、対照のいずれも冠動脈性心臓病のいかなる徴候または 症状も持つていなかった。対照は患者と同じ年令範囲を表わすように選択し、連 続的に検査にくるように招かれた。免疫複合体測定のための血清試料を承認時と ４週間後に採取した。

ＣＣＨＤ患者群は、１９８５年および１９８６年の血管造影でＣＣＨＤと診断さ れたヘルシンキからの１０４人の若年、中年および老年の男女からなっていた。

ＬＰＳ−免疫複合体の検出 Ａ、９６穴ＥＩＡプレートをクラミジアＬＰＳに対するマウスモノクローナル抗 体で被覆した。このモノクローナル抗体はクラミジアＬＰＳＫ％異的なＫＤＯ− トリサツカライド単位と反応し、Ｒｅ−ＬＰＳまたはアシネトバクタ−（Ａｃ１ ｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ　）　Ｌ　Ｐ　Ｓと反応しない。

１０嘔胎仔コウシ血清を含むＰＢＳで１：１００および１　：　１０００に希釈 した血清試料を穴に加え、３７℃で２時間保温する。洗浄後、ＰＢＳ−胎仔コウ シ血清で希釈したアルカリホスファターゼ複合抗ヒトＩｇＭまたはＩｇＧを加え 、３７℃で２時間保温する。再び洗浄後、基質のジェタノールアミン緩衝液、ｐ Ｈ＆０、ＩＪ中ノバラニトロフェニル　ホスフェートＩ　Ｗ９ヲＸＫ７１ＴＩえ 、＋３７℃で３０分間反応させた後、４０５閣波長で光学密度（０，Ｄ、　）値 を測定した。クラミジア特異的免疫抗体の童をＥＩＡタイターで表現した：最高 血清希釈はＩＩＬ２の０．Ｄ、値を与える。

Ｂ、９６穴ＥＩＡプレートをヒトＩｇＭに対するマウスモノクローナル抗体（μ −鎖特異的）で複機した。方法ＡＫおけると同様に希釈した血清試料を穴に加え た。

反応させ、洗浄した後、アルカリホスファターゼ複合のクラミジアＬＰＳに対す るモノクローナル抗体を加え、方法Ａにおけると同様にＥＩＡ操作を続行した。

結果 患者の大部分について血清中にクラミジアＬＰＳ−含Ｍ免疫複合体が認められた 。結果を第２表に示す。

第２表、血清中におけるクラミジアＬＰＳ特異モノクローナル抗体と反応性の免 役複合体の存在 ＡＭＩ Ｉｇ−クラス　患者　値　対照　値　ＣＣＨＤＩｇＭ−複合体　２４／４４　（ １１０００５６／４４　（ＬＯ２５３５／１０４（５５係）　（１４％）　（３ ４％） ＩｇＧ−複合体　４／４４　有意差なし１／４４　α００２５　２６／１０４（ ５チ）　（３係）　（２５％） 全複合体　２６／４４　（α０００１７／４４　α０００１　５３／１０４（５ ９％）　（１６繋）　（５１チ） 患者血ｆ＃におけるクラミジアＬＰＳの検出血清についてクラミジアＬＰＳの存 在を、市販のクラミジアＬＰＳ用クラミジア抗原検出キットを使い、キットに含 まれる希釈用緩衝液で１乃至８倍希釈して調べた（　ＩＤＥＩＡＴＭ、ボストン −七ルテック　デアアグノスティックス　リミテッド　ｘロウ、英尻、Ｂｏｓｔ ｏｎ−ＣｅｌｌｔｅｃｈＤｉａｇｔｉｏｓｔｉｃｓ　Ｌｔｄ−、Ｓｌｏｕｇｈ、 　ＵＫ　）、　Ａ　Ｍ　１患者血清の５７１９（２６％）にＬＰＳが検出され、 調べた１９人の対照血清のいずれにも検出されなかった。

ＡＭＩ患者にクラミジアＬＰＳ免疫複合体またはＬＰＳが認められたことａ、Ａ ＭＩとクラミジア感染の関連が確認されることである。加えて、免疫複せ体が存 在することは、更にクラミジアＬＰＳがＡＭＩ−？ＣＣＨＤの病因や発展に重要 な役割をはたしていることが示唆される。

国際調査報告 □＾噛−−−・ＰＣＴ／ｒ１８９／Ｄｏユ２２

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. １．クラミジアまたはクラミジアの炎症効果に有効な薬剤の治療的に活性な量を 投与することからなる患者にかける冠動脈性心臓病の治療または予防のための方 法。
2. ２．クラミジアがクラミジアＴＷＡＲ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ　ＴＷＡＲ）てある 請求の範囲第１項記載の方法。
3. ３．患者の試料を採取し、その試料についてクラミジアまたはクラミジア抗体在 を検査することからなる患者における心臓梗塞の危険性のスクリーニング法。
4. ４．患者の試料を採取し、その試料についてクラミジアまたはクラミジア抗体の 存在をを検査することからなる患者における心筋梗塞および冠動脈性心臓病の診 断に使用される方法。
5. ５．患者の試料を採取し、その試料についてクラミジアまたはクラミジア抗体の 存在を検査することからなる急性心筋梗塞または冠動脈性心臓病患者の治療の監 視のために使用される方法。
6. ６．試料についてクラミジアの多糖またはクラミジアの成分を含む免疫複合体の 存在を検査する請求の範囲第３項から第５項のいずれかに記載の方法。
7. ７．病気が脳梗塞または血管塞栓病である請求の範囲第１項から第６項までのい ずれかに記載の方法。
8. ８．調製品がクラミジアに有効な薬剤の治療的に活性な量を含むことを特徴とす る、患者における冠動脈性心臓病の治療または予防に使用される医薬調製品。
9. ９．クラミジアに有効な薬剤の治療的に活性な量を医薬的に許容できるキャリヤ ーと混合することを特徴とする、患者において冠動脈性心臓病の治療または予防 に使用される医薬調製品の調製方法。
10. １０．冠動脈性心臓病または心筋梗塞の予防に使用され、クラミジアに対して免 疫を誘導することを特徴とするワクチン。