JPH03505465A - グリコシル化されていないｔ―ＰＡの薬剤学的調整物及びその製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ｔ−ＰＡ　　ｐｒｏ安定化 ヒト組織−ブラスミノーゲンーアクチベータ（１−ＰＡ）は、凝血塊を溶解する 場合例えば心筋梗塞の場合に治療上大きな重要性を有する。ｔ−ＰＡは、プラス ミノーゲンを活性化してプラスミンにすることにより凝血塊を溶解する作用を有 する。更にプラスミンは、凝血した血液の蛋白質マトリックスの主成分であるフ ィブリンを溶かす。

天然のｔ−ＰＡは、多くの機能性ドメインＦ、Ｅ。

Ｋ１、Ｋ２及びＰから成っている。ドメインＰはプラスミノーゲンを分解してプ ラスミンにする作用をする蛋白質分解活性中心を有する。真核細胞及び原核細胞 中で、ｔ−ＰＡ又は種々のｔ−ＰＡ突然変異体（ここではドメインＦ、Ｅ、、Ｋ ｌ及びに２の１個以上が欠失している）の遺伝子工学的製造は、既に公知である 。この場合、原核生物からのｔ−ＰＡ−誘導体は、天然のｔ−ＰＡとは反対に、 グリコジル化されていない形で合成される。

更に、この糖分は、蛋白質の溶解性及び凝集に対して著しい影響を有することも 公知である（　Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃ−ｈｅｍ、２６３　（１９８８）　、８８ ３２〜８８３７）、ところで、グリコジル化されていないｔ−ＰＡは、グリコジ ル化されたｔ−ＰＡよりも著るしく劣悪な溶解性であることが判明した。

グリコジル化されていないｔ−ＰＡ（ｔ−ＰＡ　　ｐｒＯ）は、蛋白質の可溶化 のために通常用いられる緩衝液例えば５０１モル／ｌクエン酸ナトリウム、５０ １モル／Ｉ燐酸塩又は生理ＮａＣ１−溶液中に非常に劣悪にのみ溶ける。しかし ながら、治療的作用物質として使用するためには、少なくとも０．１ＭＵ／ｍＪ 有利に０．１Ｍ　Ｕ　／　ｍｌ−１０Ｍ　Ｕ　／　ｍｌの高い酵素活性を有する １−ＰＡ　　ｐｒｏが存在すべきである。この活性は、ＷＨＯ、ナショナル・イ ンスティチュート・フォア・バイオロジカル・スタンダーズ・アンド・コントロ ール（Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ　ｆｏｒ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ 　５ｔａｎｄａｒｄｓ　ａｎｄＣｏｎｔｒｏｌ；　ＺＧＭＡＬ４２　（１９８７ ）　、４７８〜４８６）に従って定義されている。

欧州特許（ＥＰ−Ａ）第０−２１７３７９号明細書から、原核生物からのｔ−Ｐ Ａの溶解性を、中性又は弱アルカリ性のアルギニン−処方物によって高めること は公知である。しかしながら、この方法の欠点は、ｔ−ＰＡ　　ｐｒｏの良好な 溶解性が非常に高いアルギニン濃度を用いてのみ達成されうろことである。

従って、本発明の課題は、０．１ＭＵ／＋＋ｌより大きい活性を有するｔ−ＰＡ 　　ｐｒｏを含有し、この際１−ＰＡ　　ｐｒｏは長時間にわたって安定である 薬剤学的調製物を開発することであった。

本発明のこの課題は、ｐＨ４，５〜６で最低０．ＩＭＵ　／　ｍｌの酵素活性を 有するグリコジル化されていないｔ−ＰＡの薬剤学的調製物により解決され、こ の際、この組成物は、クエン酸塩及び次の化合物：ａ）　アスコルビン酸 ｂ）　　ＥＤＴＡ Ｃ）　式： ％式％ ［式中Ｘは５ＯｓＨ，ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＯ２ＨＳＣＯ２Ｈ，Ｈ，ＮＨ２又はＯ Ｈであり、Ｒは−ｃｌ　−Ｃ９−アルキレン、０３〜Ｃ６−シクロアルキレン又 はベンジリデンであり、Ｒ１とＲ２は相互に無関係にＨ又はＣ１〜Ｃ３−アルキ ルである］のアミノ化合物 ｄ）　グアニジノ酪酸 ｅ）　ジメチルビグアニド ｆ）　アルギニン ｇ）　グルコサミン、フラクトース ｈ）　ピリミジンヌクレオシド及びピリミジンヌクレオチド ｉ）　ヒドロキシ−、ケト−及び／又は他のカルボキン基の１個以上で置換され たカルボン酸の群からの少なくとも１種を含有する。

本発明におけるｔ−ＰＡ　　ｐｒｏとは、アミノ酸−３（Ｇｌｙ）　〜＋　１　 （Ｓｅｔ）で開始し、５２７　（ｐ　ｒ　。

）で終るｔ−ＰＡである（Ｎｏ＋ａｅｎｋｌａｔｕｒ　ｎａｃｈ　Ｈａｒｒｉｓ 。

Ｐｒｏｔｅｉｎ　　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、Ｂａｎｄｌ　　（１９８７）　　 、４４９〜４５８）ｏ　ｔ−ＰＡ　　ｐｒｏは国際特許（ＷＯ）第８７１０２６ ７３号明細書に記載の方法で得られる。

ｔ−ＰＡ　　ｐｒｏの可溶化のためには、クエン酸塩緩衝液が特に好適である。

クエン酸イオンの濃度は、最低５鳳モル／ｌ特に５〜１００属モル／ｌであるべ きであり、特に５０諺モル／！のクエン酸イオンの濃度が有利である。添加され る化合物の塩基度に応じて、ｐＨ−億を特にＨＣＩ又は塩基例えばＮａＯＨ又は ＫＯＨを用いて調節する。

意外にも、グリコジル化されていないｔ−ＰＡの他の緩衝液例えば燐酸塩緩衝液 中での溶解性は、同じイオン濃度及び同じｐＨ−値で著るしく低いことが確認さ れた。アルカリ性クエン酸塩溶液のｐＨ−値をＨＣＩで調節する即ち、組成物が なお付加的にクロリドイオンを含有することが好適であると立証された。即ち、 意想外にクロリドイオンの存在では、ｔ−ＰＡｐｒｏの高濃度の溶液は、例えば ホスフェートイオンの存在の場合よりも著るしく安定である。酸性クエン酸塩溶 液のｐＨ−値は、通例は、Ｎ　ａｏ　Ｈを用いて調節される。本発明による組成 物にとって４．５〜６．５のｐＨ値特に６のｐＨ−値が好適である。

本発明による組成物を得るために、アミノ化合物として次のものを使用するのが 有゛利である：タウリン、４−アミノブタノール−１，５−アミノペンタノール −１，６−アミノへキサノール−１，１，９−ジアミノノナン、１．８−ジアミ ノオクタン、１．７−ジアミノへブタン、１．６−ジアミツヘキサン、１．５− ジアミノペンタン、１．４−アミノブタン、１．３−アミノプロパン、リシン、 オルニチン、８−アミノオクタン酸、７−アミノへブタン酸、ε−アミノカプロ ン酸、δ−アミノバレリアン酸、γ−アミノ酪酸、トラネキサム酸又はｐ−アミ ノメチル安息香酸。タウリン及び類縁化合物の有利な濃度は、０．１〜０．５モ ル／Ｉ特に０．１〜０．３モル／！である。４−アミノブタノール−１，５−ア ミノペンタノール−１，６−アミノへキサノール−１，１，９−ジアミノノナン 、１゜８−ジアミノオクタン、１．７−ジアミノへブタン、１．６−ジアミツヘ キサン、１．５−ジアミノペンタン、１．４−ジアミノブタン又は１．３−ジア ミノプロパンを１０〜１００厘モル／ｌで使用するのが有利である。リジン、オ ルニチン、８−アミノオクタン酸、７−アミツヘブタン酸、ε−アミノカプロン 酸、δ−アミノバレリアン酸、γ−アミノ酪酸、トラネキサム酸又はｐ−アミノ メチル安息香酸を０．５〜２０票モル／ｌ特に有利に１〜１０講モル／ｌで使用 するのが有利ヒドロキシ−、ケト−及び／又は他のカルボキシ基の１個以上で置 換されているカルボン酸として、例えばリンゴ酸、乳酸、フマル酸又はオキソグ ルタル酸を使用する。これら物質は、有利に、１真モル／ｌ〜１０００Ｍモル／ １特に有利に１０〜５００票モル／Ｉで使用される。

グアニジノ酪酸又はアルギニンは、有利に１０〜２００■モル／ｌ特に有利に５ ０〜１００富モル／ｌで使用される。ジメチルビグアニドは、５０〜４００翼モ ル／ｌ特に１００〜３００冨モル／Ｉの濃度を有する。

ＥＤＴＡは、有利に１〜１００諺モル／ｌで、特に有利に１０〜１００．モル／ ｌで使用される。アスコルビン酸は、有利に０．１〜１モル／１特に有利に０． ２〜０．３モル／１で使用される。

グルコサミン及びフラクトースは、有利に１〜５００真モル／１特に有利に１０ 〜３００冨モル／Ａ！で使用される。

ピリミジンヌクレオシド及びピリミジンヌクレオチドとしては、例えばチミジン 、シトシン及びウリジンもしくは相応するヌクレオチドが好適である。これらは 、有利に１〜３００厘モル／Ｉ特に有利に１０〜３００１Ｉモル／ｌの濃度で使 用される。

更に、本発明の目的物は、付加的に１個以上のアミノ酸殊にヒスチジンを含有す る本発明の組成物である次に、本発明により特に有利な一連の調製物を挙げる。

１処方物は、クエン酸−Ｎ　ａ　／　Ｎ　ａ　ＯＨ（ｐ　Ｈ６）５０露モル／ｌ 及びタウリン０．１〜０．３モル／ｌを含有する。クエン酸ナトリウム（ｐＨ６ ）５０ｍモル／ｌ及びアスコルビン酸０．３モルｌを含有する処方物も有利であ る。

更に、クエン酸−Ｎａ／ＭＣＩ（ｐＨ６）５０ｍモル／ｌ及び７−アミツヘブタ ン酸、８−アミノオクタン酸、ｐ−アミノメチル安息香酸、ε−アミノカプロン 酸、δ−アミノバレリアン酸、γ−アミノ酪酸、ドアラネキサム酸、リジン又は オルニチン１〜１０諺モル／１を含有する処方物が有利である。

更に、クエン酸Ｎａ／ＨＣ１（ｐＨ６，０）５０＋＋モル／ｌ及びグアニジノ酪 酸又はアルギニン５０〜１００禦モル／ｌを含有する処方物も特に有利である。

クエン酸Ｎａ　（ｐＨ６）５０ｍモル／ｌ及びＥＤＴＡ１０〜１００譚モル／ｌ を含有する処方物も有利である。更に、もう１つの処方物は、クエン酸Ｎａ／Ｈ ＣＩ（ｐＨ６）５０ｍモル／Ｉｔ及びジメチルビグアニド３００票モル／ｌを含 有する。

もう１つの処方物は、クエン酸Ｎａ／ＨＣＩ（ｐＨ６）５０鳳モル／ｌ及びチミ ジン、シトシン又はウリジン１０〜３００１モル／ｌを含有する。更にもう１つ の処方物は、クエン酸Ｎａ／ＨＣＩ　　（ｐＨ６）５０箇モル／ｌ及び４−アミ ノブタノール−１，５−アミノペンタノール−１，６−アミノへキサノール−１ ，１，９−ジアミノノナン、１．８−ジアミノオクタン、１．７−ジアミノへブ タン、１−６−ジアミツヘキサン、１．５−ジアミノペンタン、１．４−ジアミ ノブタン又は１．３−ジアミノプロパン１０〜１００諷モル／！を含有する。も う１つの処方物は、クエン酸Ｎ　ａ　／　ＨＣ１（ｐＨ６）５０ｉ＋モル／ｌ及 びフラクトース又はグルコサミン１０〜３００冨モル／ｌを含有する。

更に、もう１つの処方物は、クエン酸Ｎａ　（ｐＨ６）５０ｍモル／ｌ及びリン ゴ酸、乳酸、フマル酸又は２−オキソゲルタール酸１０〜５００厘モル／ｌを含 有する。

前記化合物のいくつかとクエン酸塩との組合せも、ｔ−ＰＡ−活性を有する蛋白 質の非常に良好な溶解性に作用する。

更に、作用物質としてのｔ−ＰＡ活性を有する蛋白質をベースとする溶液として の又は前記の作用物質及び場合により他の薬剤学的に認容性の添加物、助剤、担 持剤及び充填剤を有する凍結乾燥物としての医薬品も本発明の目的物である。

本発明による薬剤学的調製物は、有利に、注射液、注入液として使用される。こ のことは、本発明による組成を有する注射用の溶液を提供することにより実施す ることができる。しかしながら、凍結乾燥物の形での薬剤学的調製物を提供する ことも可能である。これは自体公知の注射目的に好適な薬剤又は溶液で復元され る。注射用媒体として、注射液において慣用の添加物例えば安定剤、溶解助剤、 緩衝液及び等張添加物例えば生理用ＮａＣ１−濃縮物を含有する水を使用するの が有利である。このような添加物は、例えば、マンニット、酒石酸塩−又はクエ ン酸塩−緩衝液、エタノール、錯形成剤例えばエチレンジアミン四酢酸及びこれ らの無害の塩並びに高分子量のポリマー例えば粘度調節用の液状ポリエチレンオ キサイドである。注射液用の液体担持物質は滅菌され、有利にアンプル中に充填 されているべきである。

最後に、本発明の薬剤学的調製物の製造のためにｔ−ＰＡ　　ｐｒｏを使用する ことも本発明に包含される次の実施例で、本発明の具体的な実施を更に説明する 。

精製ｔ−ＰＡ　　ｐｒｏ　（０，５モル／ｌアルギニン／Ｈ３ＰＯ４、ｐＨ７， ２中に溶解）をＹＭ−１０膜（＾ａ＋１−ｃｏｎ）を通す限外濾過により濃縮さ せる。この濃縮物（活性：　２．４　ＭＵ／ｍｌ）各１ｍｊ’を第１表に記載の 緩衝液に対して透析させる。試料の遠心の後に、澄明な上澄み中で酵素活性を測 定する。

この酵素活性を容量単位（Ｍ　Ｕ　／　ｍｌ）として、かつ総活性をＭＵとして 記載する。

ここで、ｔ−ＰＡ−活性の測定は、慣用方法で色原性基質の分解により測定する ことができる（Ｈ，ＬｉｌｌＺＧＩＭＡＬ４２　（１９８７）　、４７８〜４８ ６）。

単位Ｕは、ＷＨＯナショナル・インスティチュート・フォア・バイオロジカル・ スタンダーズ・アンド・コントロールの定義による活性の単位である。

緩　　衝　　液　　　　　　　　　　　　ＭＵ／諺ｊ　　　　ＭＵ５０寓モルｌ ！クエン酸Ｎａ／　Ｎａ０ｔｌ、ｐＨ６０，３４０，２００，３モル／！タウリ ン ５０ｓモル１ｉクエン酸Ｎａ／　ＨＣＩ、ｐＨ６０，１２０，０７０，３モル／ ＡＩフラクトース ５０薦モル／ｌクエン酸Ｎａ／　ＮａＯＨ１ｐｔ！６　　　０．３４　　０．１ ８０．３モルノ！アスコルビン酸 ５０薦モル／ｌクエン酸Ｎａ／　ＨＣＩ、ｐＨ６０，２１０，２８１θモル／ｌ ε−アミノカプロン酸 ５０ｍモル／ｌクエン酸Ｎａ／　ＨＣＩ、ｐＨ６０，１７０，１０００諷モル／ Ｉリシン ５０ｍモル／ｌクエン酸Ｎａ／　ＨＣＩ、ｐＨ６０，２６０，３６１０肩モル／ ｌトラネキサム酸 ５９ｍモ／し／１クエン酸Ｎａ／　ＨＣＩ、ｐＨ６、０，２４０，３３１０調モ ル／ｌｐ−アミノメチル安息香酸５０真モル／Ｉクエン酸Ｎａ／　ＨＣＩ、ｐＨ ６、１，２０１，５００，３肩モル／Ｉジメチルビグアニド ０、０５ｍｏｌ＃　）リス／）ＩｃＩ、ｐＨ７，２０，０１０，θ１５０ｓ＋モ ル／ｌ　ＮＨ４ＨＣＯ３０，０５０，０４５０婁モル／！クエン酸Ｎａ／　ＨＣ Ｉ、ｐＨ６０，１７０，２３１０厘モル１１　δ−アミノバレリアン酸５０■モ ル／１クエン酸Ｎａ／　ＨＣＬｐＨ６ｏ、　２７　　０．２０１０菖モル１１　 γ−アミノ酪酸 ５０ｍ％）Ｌｔ／Ｉクエン酸Ｎａ／　ＢＣＩ、ｐＨ６０，２００，２７１０ｍモ ル／１４７−アミツヘブタン酸５０ｍモル／ｌクエン酸Ｎａ／　ｆｆｃｌ、ｐＨ ６０，１９０，２１５０寓モルｌ！アルギニン ５０薦モル／Ｉｔクエン酸Ｎａ／　ＨＣＩ、ｐＨ６０，１６０，１９５０薦モル ／ｌグアニジノ酪酸 ５０薦モル／ｌクエン酸Ｎａ／　ＨＣＩ、ｐＨ６０，１００，１２１０諷モル／ ＩＩ　ＥＤＴＡ ５０薦モル／ｌクエン酸Ｎａ／　Ｎａ０ＨＳｐＨ６０，１８０，２２５０寓モル ／ｌ　ＥＤＴＡ ５０薦モル／ｌクエン酸Ｎａ／　ＮａＯＨ，ｐＨ６０，２６０，２９１００ｍモ ル／ｌ　ＥＤＴＡ ５０薦モル／Ｉｔクエン酸Ｎａ／　ＨＣｌ５ｐＨ６０，２９０，３７５０ｍモル ／１１．６ジアミノヘキサン５０寓モル／１クエン酸Ｎａ／　ＨＣｌ５ｐＨ６０ ，２９０，３６５０麿モル／Ｉｔ　５−アミノペンタノール５０薦モル／ｌクエ ン酸Ｎａ／　ＨＣＩ、ｐＨ６０，２７０，２８０，３真モル／！グルコサミン ５０薦モル／ｌクエン酸Ｎａ／　ＨＣｌ５ｐＨ６０，１６０，２１０，１厘モル ／ｌチミジン ５０薦モル／ｌクエン酸Ｎａ／　ＨＣｌ、ｐＨ６０，０７０，０９５Ｑ＋ｗモ／ し／ｌ　Ｎａ２ＨＰＯ４／Ｂ５ＰＯ４，ｐＨ６０，０２０，０３５０１１モル／ １クエン酸Ｎａ／　ＮａＯＨ１ｐＨ６０，１９０，１９０，３票モル／ｌフマル 酸 要　　　約　　　書 クエン酸塩及び次の化合物： ａ）　アスコルビン酸 ｂ）　　ＥＤＴＡ Ｃ）式： ％式％ ［式中Ｘ１ｔＳＯ３ＨＳＣＨ（Ｎｌ２）−ＣＯ２Ｈ，Ｃ０２Ｈ％Ｈ％ＮＨ２又は ＯＨＴあり、Ｒｌｔ−Ｃ，〜ｃ９−アルキレン、０３〜Ｃ６−シクロアルキレン 又はベンジリデンであり、Ｒ１及びＲ２は相互に無関係にＨ又は０１〜Ｃ３−ア ルキルである］のアミノ化合物 ｄ）　グアニジノ酪酸 ｅ）　ジメチルビグアニド ｆ）　アルギニン ｇ）　グルコサミン、フラクトース ｈ）　ピリミジンヌクレオシド及びピリミジンヌクレオチド ｉ）　ヒドロキシ−、ケト−及び／又は他のカルボキシ基の１個以上で置換され たカルボン酸よりなる群からの少なくとも１種を含有し、最低０．１Ｍ　Ｕ　／ 　ｍｌの酵素活性及び４．５〜６のｐＨ値を有する、グリコジル化されていない ｔ−ＰＡの薬剤学的調製物並びにグリコジル化されていないｔ−ＰＡを作用物質 として含有する医薬品及びその製法。

手続補正書（自発） 特許庁長官殿　　　　　　　　　　　平成３年８月ｊ”ｉ日１、事件の表示 ＰＣＴ／ＥＰ　　９０１０２２５１ 、発明の名称 グリコジル化されていないｔ−ＰＡの薬剤学的調整物及びその製法 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 名　称　ベーリンガー　マンハイム　ゲゼルシャフト　ミツト　ベシュレンクテ ル　ハフラング ４、代理人 住所　〒１００　　東京都千代田区丸の内３丁目３番１号新東京ビルヂング　５ ５３号　　電話（３２１６）５０３１−５番６、補正の対象 明細書及び請求の範囲 ７、補正の内容 （１）明細書第１頁第２行の発明の名称ｒｔ−ＰＡ　ｐｒ。

安定化」を「グリコジル化されていないｔ−ＰＡの薬剤学的調整物及びその製法 」と補正する。

請　　求　　の　　範　　囲 １、　最低０．１ＭＵ／ｍｉ’の酵素活性及びｐＨ値４．５〜６を有するグリコ ジル化されていないｔ−ＰＡの薬剤学的調製、物において、これは、クエン酸塩 及び次の化合物： ａ）　アスコルビン酸 ｂ）　　ＥＤＴＡ Ｃ）　式： ％式％ ［式中Ｘは５０３ＨＳＣＨ（Ｎｌ２）　−Ｃ０２Ｈ１ＣＯ２Ｈ，Ｈ，Ｎｌ２又は ＯＨであり、Ｒｌ；！　Ｃ１〜Ｃ９−アルキレン、０３〜Ｃ６−シクロアルキレ ン又はベンジリデンでありＲ１及びＲ２は相互に無関係にＨ又はｃｌ−ｃ３−ア ルキルである］のアミノ化合物ｄ）グアニジノ酪酸ｅ）　ジメチルビグアニド ｆ）　アルギニン ｇ）　グルコサミン、フラクトース ｈ）　ピリミジンヌクレオシド及びピリミジンヌクレオチド ｉ）　ヒドロキシ−、ケト−及び／又は他のカルボキシ基の１個以上で置換され たカルボン酸 よりなる群からの少なくとも１種を含有することを特徴とする、最低０．１ＭＵ ／の酵素活性を有するグリコジル化されていないｔ−ＰＡの薬剤学的調製物。

２、７ミノ化合物は、タウリン、４−アミノブタノール−１，５−アミノペンタ ノール−１，６−アミノへキサノール−１，１，９−ジアミノノナン、１．８− ジアミノオクタン、１．７−ジアミノへブタン、１．６−ジアミツヘキサン、１ ．５−ジアミノへブタン、１．４−アミツブクン、１．３−アミノプロパン、リ ジン、オルニチン、８−アミノオクタン酸、７−アミノへブタン酸、ε−アミノ カプロン酸、δ−アミノバレリアン酸、γ−アミノ酪酸、トラネキサム酸又はｐ −アミノメチル安息香酸であることを特徴とする請求の範囲第１項記載の薬剤学 的調製物。

３、　ヒドロキシ−、ケト−及び／又は他のカルボキシ基の１個以上で置換され たカルボン酸は、リンゴ酸、乳酸、フマル酸又は２−オキソゲルタール酸である ことを特徴とする請求の範囲第１項に記載の薬剤学的調製物。

４、　付加的に１種以上のアミノ酸を含有することを特徴とする請求の範囲第１ 項に記載の薬剤学的調製物。

５、　クエン酸塩濃度は、５〜１００ｍモル／任あることを特徴とする請求の範 囲第１項から第４項のいずれか１項に記載の薬剤学的調製物。

６、　付加的にクロリドイオンを含有することを特徴とする請求の範囲第１項か ら第５項までのいずれか１項に記載の薬剤学的調製物。

７、　クエン酸Ｎａ　（ｐＨ６）５０ｓ＋モル／ｌ及びアスコルビン酸０．１〜 １モル／吐含有することを特徴とする請求の範囲第１項に記載の薬剤学的調製物 。

８、　クエン酸Ｎａ　（ｐＨ）５０＋モル／ｌ及びＥＤとする、請求の範囲第１ 項に記載の薬剤学的調製物。

９、　クエン酸Ｎａ　（ｐＨ６）５０ｍモル／ｌ及びタウリン０．５モル／ｌを 含有することを特徴とする請求の範囲第１項に記載の薬剤学的調製物１０、クエ ン酸Ｎａ／ＨＣｌ（ｐＨ６）５０ｍモル／ｌ及びリジン、オルニチン、８−アミ ノオクタン酸、７−アミノへブタン酸、ε−アミノカプロン酸、δ−アミノバレ リアン酸、γ−アミノ酪酸、トラネキサム酸又はｐ−アミノメチル安息香酸０． ５〜２０１モル／ｌを含有することを特徴とする請求の範囲第１項に記載の薬剤 学的調製物。

１１６　　クエン酸Ｎａ／ＨＣＩ（ｐＨ６）５０ｇ＋モル／ｌ及び４−アミノブ タノール−１，５−アミノペンタノール−１，６−アミノへキサノール−１，１ ，３−ジアミノプロパン、１．４−ジアミノブタン、１．５−ジアミノペンタン 、１，６−ジアミツヘキサン、１．７−ジアミノペンタン、１．８−ジアミノオ クタン又は１．９−ジアミノノナンを１０〜１００Ｎモル／Ｑ含有することを特 徴とする請求の範囲第１項に記載の薬剤学的調製物。

１２、クエン酸Ｎａ／ＨＣＩ（ｐＨ６）５０＋モル／ｌ及びグアニジノ酪酸又は アルギニン１０〜２００１モル／任含有することを特徴とする請求の範囲第１項 に記載の薬剤学的調製物。

１３、クエン酸Ｎ　ａ　／　ＨＣｌ　５０　ｍモル／ｌ及びジメチルビグアニド ５０〜４００翼モル／Ａ＋を含有することを特徴とする請求の範囲第１項に記載 の薬剤学的調製物。

１４、クエン酸Ｎａ／ＨＣｌ（ｐＨ６）５０ｍモ／し／ｌ及びグルコサミン又は フラクトース１〜５００ｍモル／吐含有することを特徴とする請求の範囲第１項 に記載の薬剤学的調製物。

１５、クエン酸Ｎａ／ＨＣ１（ｐＨ６）５０ｍモル／ｌ及びチミジン、シトシン 又はウリジン１〜３００冨モル／Ｌ濠含有することを特徴とする請求の範囲第１ 項に記載の薬剤学的調製物。

１６、　　クエン酸ナトリウム（ｐＨ６）５０鳳モル／ｌ及びリンゴ酸、乳酸、 フマル酸又は２−オキソゲルタール酸０．００１〜１モル／Ｌ季含有することを 特徴とする請求の範囲第１項に記載の薬剤学的調製物。

１７、クエン酸ナトリウム（ｐＨ６）５０ｍモル／ｌ及び請求の範囲第１項に記 載の群ａ）〜ｉ）からの物質の組み合せを含有することを特徴とする請求の範囲 第１項に記載の薬剤学的調製物１８、作用物質としてのｔ−ＰＡ活性を有する蛋 白質よりなる医薬品において、請求の範囲第１項から第１７項に記載の組成物が 、場合により慣用の薬剤学的添加物、助剤又は／及び担持剤と一緒に含有するこ とを特徴とする医薬品。

１９、請求の範囲第１項から第１８項までに記載の薬剤学的調製物を製造するた めに、グリコジル化されていないｔ−ＰＡを請求の範囲第１項に記載の群ａ）〜 ｉ）からの物質少なくとも１種と共に、適当な薬剤学的な適用形に変じることを 特徴とする、薬剤学的調製物の製法。

２０、薬剤学的適用形は、注射液又は凍結乾燥物であることを特徴とする請求の 範囲第１９項に記載の方法。

国際調査報告 ｍ−ｍｍ−ｍ−−１ａｅｓｈｕ、　ＰＣＴ／ＥＰ　９０１０２２５１国際調査報 告

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．最低０．１ＭＵ／ｍｌの酵素活性及びｐＨ値４．５〜６を有するグリコシル 化されていないｔ−ＰＡの薬剤学的調製物において、これは、クエン酸塩及び次 の化合物： ａ）アスコルビン酸 ｂ）ＥＤＴＡ ｃ）式： Ｒ１Ｒ２Ｎ−Ｒ−Ｘ ［式中ＸはＳＯ３Ｈ、ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｈ、Ｈ、ＮＨ２又はＯ Ｈであり、Ｒは−Ｃ１〜Ｃ９−アルキレン、Ｃ３〜Ｃ６−シクロアルキレン又は ベンジリデンであり、Ｒ１及びＲ２は相互に無関係にＨ又はＣ１〜Ｃ３−アルキ ルである］のアミノ化合物 ｄ）グアニジノ酪酸 ｅ）ジメチルビグアニド ｆ）アルギニン ｇ）グルコサミン、フラクトース ｈ）ピリミジンヌクレオシド及びピリミジンヌクレオチド ｉ）ヒドロキシ−、ケト−及び／又は他のカルボキシ基の１個以上で置換された カルボン酸よりなる群からの少なくとも１種を含有することを特徴とする、最低 ０．１ＭＵ／の酵素活性を有するグリコシル化されていないｔ−ＰＡの薬剤学的 調製物。 ２．アミノ化合物は、タウリン、４−アミノブタノール−１、５−アミノペンタ ノール−１、６−アミノヘキサノール−１、１，９−ジアミノノナン、１，８− ジアミノオクタン、１，７−ジアミノヘプタン、１，６−ジアミノヘキサン、１ ，５−ジアミノヘプタン、１，４−アミノブタン、１，３−アミノプロパン、リ ジン、オルニチン、８−アミノオクタン酸、７−アミノヘプタン酸、ε−アミノ カプロン酸、δ−アミノバレリアン酸、γ−アミノ酪酸、トラネキサム酸又はｐ −アミノメチル安息香酸であることを特徴とする、請求の範囲第１項記載の薬剤 学的調製物。 ３．ヒドロキシ−、ケト−及び／又は他のカルボキシ基の１個以上で置換された カルボン酸は、リンゴ酸、乳酸、フマル酸又は２−オキソグルタール酸であるこ とを特徴とする、請求の範囲第１項に記載の薬剤学的調製物。 ４．付加的に、１種以上のアミノ酸を含有することを特徴とする、請求の範囲第 １項に記載の薬剤学的調製物。 ５．クエン酸塩濃度は、５〜１００ｍモル／ｌ有利に５０ｍモル／ｌであること を特徴とする、請求の範囲第１項から第４項のいずれか１項に記載の薬剤学的調 製物。 ６．付加的にクロリドイオンを含有することを特徴とする、請求の範囲第１項か ら第５項までのいずれか１項に記載の薬剤学的調製物。 ７．クエン酸Ｎａ（ｐＨ６）５０ｍモル／ｌ及びアスコルビン酸０．１〜１モル ／ｌ有利に０．２〜０．３モル／ｌを含有することを特徴とする、請求の範囲第 １項に記載の薬剤学的調製物。 ８．クエン酸Ｎａ（ｐＨ）５０ｍモル／ｌ及びＥＤＴＡ１〜２００５モル／ｌ有 利に１０〜１００ｍモル／ｌを含有することを特徴とする、請求の範囲第１項に 記載の薬剤学的調製物。 ９．クエン酸Ｎａ（ｐＨ６）５０ｍモル／ｌ及びタウリン０．５モル／ｌ有利に ０．１〜０．３モル／ｌを含有することを特徴とする、請求の範囲第１項に記載 の薬剤学的調製物。 １０．クエン酸Ｎａ／ＨＣｌ（ｐＨ６）５０ｍモル／ｌ及びリジン、オルニチン 、８−アミノオクタン酸、７−アミノヘプタン酸、ε−アミノカプロン酸、δ− アミノバレリアン酸、γ−アミノ酪酸、トラネキサム酸又はｐ−アミノメチル安 息香酸０．５〜２０ｍモル／ｌを含有することを特徴とする、請求の範囲第１項 に記載の薬剤学的調製物。 １１．クエン酸Ｎａ／ＨＣｌ（ｐＨ６）５０ｍモル／ｌ及び４−アミノブタノー ル−１、５−アミノペンタノール−１、６−アミノヘキサノール−１、１，３− ジアミノプロパン、１，４−ジアミノブタン、１，５−ジアミノペンタン、１， ６−ジアミノヘキサン、１，７−ジアミノペンタン、１，８−ジアミノオクタン 又は１，９−ジアミノノナン１０〜１００ｍモル／ｌを含有することを特徴とす る、請求の範囲第１項に記載の薬剤学的調製物。 １２．クエン酸Ｎａ／ＨＣｌ（ｐＨ６）５０ｍモル／ｌ及びグアニジノ酪酸又は アルギニン１０〜２００ｍモル／ｌ有利に５０〜１００モル／ｌを含有すること を特徴とする、請求の範囲第１項に記載の薬剤学的調製物。 １３．クエン酸Ｎａ／ＨＣｌ５０ｍモル／ｌ及びジメチルビグアニド５０〜４０ ０ｍモル／ｌ有利に１００〜３００ｍモル／ｌを含有することを特徴とする、請 求の範囲第１項に記載の薬剤学的調製物。 １４．クエン酸Ｎａ／ＨＣｌ（ｐＨ６）５０ｍモル／ｌ及びグルコサミン又はフ ラクトース１〜５００ｍモル／ｌ有利に１０〜３００ｍモル／ｌを含有すること を特徴とする、請求の範囲第１項に記載の薬剤学的調製物。 １５．クエン酸Ｎａ／ＨＣｌ（ｐＨ６）５０ｍモル／ｌ及びチミジン、シトシン 又はウリジン１〜３００ｍモル／ｌ有利に１０〜３００ｍモル／ｌを含有するこ とを特徴とする、請求の範囲第１項に記載の薬剤学的調製物。 １６．クエン酸ナトリウム（ｐＨ６）５０ｍモル／ｌ及びリンゴ酸、乳酸、フマ ル酸又は２−オキソグルタール酸０．００１〜１モル／ｌ有利に０．０１〜０． ５モル／ｌを含有することを特徴とする、請求の範囲第１項に記載の薬剤学的調 製物。 １７．クェン酸ナトリウム（ｐＨ６）５０ｍモル／ｌ及び請求の範囲第１項に記 載の群ａ）〜ｉ）からの物質の組み合せを含有することを特徴とする、請求の範 囲第１項に記載の薬剤学的調製物。 １８．作用物質としてのｔ−ＰＡ活性を有する蛋白質よりなる医薬品において、 請求の範囲第１項から第１７項に記載の組成物が、場合により慣用の薬剤学的添 加物、助剤又は／及び担持剤と一緒に含有することを特徴とする医薬品。 １９．請求の範囲第１項から第１８項までに記載の薬剤学的調製物を製造するた めに、グリコシル化されていないｔ−ＰＡを請求の範囲第１項に記載の群ａ）〜 ｉ）からの物質少なくとも１種と共に、適当な薬剤学的な適用形に変じることを 特徴とする、薬剤学的調製物の製法。 ２０．薬剤学的適用形は注射液又は凍結乾燥物であることを特徴とする、請求の 範囲第１９項に記載の方法２１．請求の範囲第１項から第１８項に記載の薬剤学 的調製物の製造のために、グリコシル化されていないｔ−ＰＡを使用すること。