JPH035551B2 - - Google Patents
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- Publication number
- JPH035551B2 JPH035551B2 JP58243453A JP24345383A JPH035551B2 JP H035551 B2 JPH035551 B2 JP H035551B2 JP 58243453 A JP58243453 A JP 58243453A JP 24345383 A JP24345383 A JP 24345383A JP H035551 B2 JPH035551 B2 JP H035551B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- lymphocytes
- hematoporphyrin
- esr
- cancer
- measuring
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01R—MEASURING ELECTRIC VARIABLES; MEASURING MAGNETIC VARIABLES
- G01R33/00—Arrangements or instruments for measuring magnetic variables
- G01R33/20—Arrangements or instruments for measuring magnetic variables involving magnetic resonance
- G01R33/60—Arrangements or instruments for measuring magnetic variables involving magnetic resonance using electron paramagnetic resonance
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Condensed Matter Physics & Semiconductors (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
［産業上の利用分野］
本発明は、被験者から取出されたリンパ球を用
いて実施される、癌罹病由来のリンパ球の測定方
法に関するものである。
いて実施される、癌罹病由来のリンパ球の測定方
法に関するものである。
［従来の技術］
急増しつつあるガンの診断法として最近脚光を
浴びてかたもものの１つに光感受性物質とレーザ
光線を用いた方法がある。これは、腫瘍に親和性
を有した光感受性物質を静脈内投与し、長時間か
けて腫瘍に蓄積させた後、レーザ光線を患部に照
射し、例えばレーザ光照射によつて光感受性物質
が発する蛍光を観察することによつて腫瘍を判別
するものである。
浴びてかたもものの１つに光感受性物質とレーザ
光線を用いた方法がある。これは、腫瘍に親和性
を有した光感受性物質を静脈内投与し、長時間か
けて腫瘍に蓄積させた後、レーザ光線を患部に照
射し、例えばレーザ光照射によつて光感受性物質
が発する蛍光を観察することによつて腫瘍を判別
するものである。
［発明が解決しようとする問題点］
ところが、この方法は生体内（in vivo）での
測定であり、蓄積までに３日間程度必要であり、
患者の苦痛はもちろんのこと多くの手間がかかつ
ていた。
測定であり、蓄積までに３日間程度必要であり、
患者の苦痛はもちろんのこと多くの手間がかかつ
ていた。
そこで、本発明者は、先にヘマトポルフイリン
が生体外に取出したリンパ球によつて摂取される
ことに着目し、生体外に取出したリンパ球にヘマ
トポルフイリンを添加し、リンパ球に含まれるラ
ジカルの量を電子スピン共鳴装置を用いて測定す
る測定方法を特願昭58−83651号として出願した。
本発明者は更に研究を重ね、ヘマトポルフイリン
よりもヘマトポルフイリン誘導体を用いた方がさ
らに良好な検定結果が得られることを見出した。
が生体外に取出したリンパ球によつて摂取される
ことに着目し、生体外に取出したリンパ球にヘマ
トポルフイリンを添加し、リンパ球に含まれるラ
ジカルの量を電子スピン共鳴装置を用いて測定す
る測定方法を特願昭58−83651号として出願した。
本発明者は更に研究を重ね、ヘマトポルフイリン
よりもヘマトポルフイリン誘導体を用いた方がさ
らに良好な検定結果が得られることを見出した。
［問題点を解決するための構成］
用いる癌罹病由来のリンパ球の測定方法を提供
するもので、被験者からのリンパ球にヘマトポル
フイリン誘導体を添加し、インキユベート後リン
パ球のみを分離し、分離したリンパ球に含まれる
ラジカル量を電子スピン共鳴装置を用いて定量測
定する、諸工程により成ることを特徴としてい
る。以下、図面を用いて本発明を詳述する。
するもので、被験者からのリンパ球にヘマトポル
フイリン誘導体を添加し、インキユベート後リン
パ球のみを分離し、分離したリンパ球に含まれる
ラジカル量を電子スピン共鳴装置を用いて定量測
定する、諸工程により成ることを特徴としてい
る。以下、図面を用いて本発明を詳述する。
［実施例］
ヘマトポルフイリン誘導体は、雑誌「臨床外
科」（Vol.37，No.4，pp.517−522，1982年４
月）、「Chest」（Vol.81，No.3，MARCH 1982）
等に紹介されているように、1960年にLipson等
によつて開発されたもので、例えば血液のヘモグ
ロビンより抽出された塩酸ヘマトポルフイリンを
酢酸と硫酸で処理することにより作成され、通常
８種類程度の成分が混在している。このヘマトポ
ルフイリン誘導体は、ヘマトポルフイリンと全く
同様に、光照射を受けるとπ−カチオンラジカル
を生成し、このラジカルを電子スピン共鳴装置
（ESR装置）で測定することができることを本発
明者は確認した。第１図は上記ラジカルのESR
スペクトルの測定例を示すもので、ｇ値は2.0015
である。第２図はヘマトポルフイリン誘導体のリ
ンパ球バツフア溶液約100μに光（紫外線）を
照射して測定したESRスペクトル強度（第１図
におけるピーク−ピーク値ｈ）と希釈濃度との関
係を示しており、高濃度領域に飽和現象が見られ
るものの、全体としてヘマトポルフイリン誘導体
濃度とESR信号強度との間には、ヘマトポルフ
イリンと全く同様に良好な直線関係が存在するこ
とが分る。尚、測定は、室温では感度が低下する
ため、−100℃の低温で行われている。
科」（Vol.37，No.4，pp.517−522，1982年４
月）、「Chest」（Vol.81，No.3，MARCH 1982）
等に紹介されているように、1960年にLipson等
によつて開発されたもので、例えば血液のヘモグ
ロビンより抽出された塩酸ヘマトポルフイリンを
酢酸と硫酸で処理することにより作成され、通常
８種類程度の成分が混在している。このヘマトポ
ルフイリン誘導体は、ヘマトポルフイリンと全く
同様に、光照射を受けるとπ−カチオンラジカル
を生成し、このラジカルを電子スピン共鳴装置
（ESR装置）で測定することができることを本発
明者は確認した。第１図は上記ラジカルのESR
スペクトルの測定例を示すもので、ｇ値は2.0015
である。第２図はヘマトポルフイリン誘導体のリ
ンパ球バツフア溶液約100μに光（紫外線）を
照射して測定したESRスペクトル強度（第１図
におけるピーク−ピーク値ｈ）と希釈濃度との関
係を示しており、高濃度領域に飽和現象が見られ
るものの、全体としてヘマトポルフイリン誘導体
濃度とESR信号強度との間には、ヘマトポルフ
イリンと全く同様に良好な直線関係が存在するこ
とが分る。尚、測定は、室温では感度が低下する
ため、−100℃の低温で行われている。
第３図は、ESR装置を用いて本発明にかかる
方法を実施する際の手順を示す流れ図であり、(1)
患者から採取した血液からリンパ球のみを例えば
遠心分離によつて取出し、(2)これを例えば0.005
モルのヘマトポルフイリン誘導体50μと混合
し、(3)37℃で約10分間インキユベートし、(4)
1500rpm.で５分間遠心分離してリンパ球のみ取
出して生理食塩水にて洗浄し、(5)洗浄後リンパ球
を300μの生理食塩水に浮遊させた状態でESR
装置に導入し、光（紫外線）を照射しつつ定量測
定を行う。
方法を実施する際の手順を示す流れ図であり、(1)
患者から採取した血液からリンパ球のみを例えば
遠心分離によつて取出し、(2)これを例えば0.005
モルのヘマトポルフイリン誘導体50μと混合
し、(3)37℃で約10分間インキユベートし、(4)
1500rpm.で５分間遠心分離してリンパ球のみ取
出して生理食塩水にて洗浄し、(5)洗浄後リンパ球
を300μの生理食塩水に浮遊させた状態でESR
装置に導入し、光（紫外線）を照射しつつ定量測
定を行う。
第４図は、第３図の手順に従つて測定した正常
健康者（下）と癌罹病（上）のリンパ球について
のESRスペクトルを夫々示す。癌罹病のリンパ
球が示す強度（ラジカル量）は、正常者のリンパ
球が示す強度の約４倍となつている。ヘマトポル
フイリンを用いる特願昭58−83651号の場合では、
２倍であつたから、ヘマトポルフイリン誘導体を
用いる本発明の方が差異が大きくなり、判別がよ
り正確になる。
健康者（下）と癌罹病（上）のリンパ球について
のESRスペクトルを夫々示す。癌罹病のリンパ
球が示す強度（ラジカル量）は、正常者のリンパ
球が示す強度の約４倍となつている。ヘマトポル
フイリンを用いる特願昭58−83651号の場合では、
２倍であつたから、ヘマトポルフイリン誘導体を
用いる本発明の方が差異が大きくなり、判別がよ
り正確になる。
また、着目したスペクトルピークと標準試料に
よる基準ピーク（第４図に於けるＲ）との距離に
基づいてｇ値を求める周知の計算法に従い、第４
図のリンパ球が示すESR信号のｇ値を求めると、
第４図の２つの信号とも2.006となる。第１図に
示したヘマトポルフイリン誘導体から派生したπ
カチオンラジカルのESRスペクトルはｇ値が
2.0015であつたから、リンパ球が示すESR信号は
πカチオンラジカルに由来するものではない。た
だし、測定されているラジカルがどのような物質
に由来するものであるかは不明である。
よる基準ピーク（第４図に於けるＲ）との距離に
基づいてｇ値を求める周知の計算法に従い、第４
図のリンパ球が示すESR信号のｇ値を求めると、
第４図の２つの信号とも2.006となる。第１図に
示したヘマトポルフイリン誘導体から派生したπ
カチオンラジカルのESRスペクトルはｇ値が
2.0015であつたから、リンパ球が示すESR信号は
πカチオンラジカルに由来するものではない。た
だし、測定されているラジカルがどのような物質
に由来するものであるかは不明である。
第５図は、正常健康者21名、癌患者26名、膠原
病患者５名から採取した血液について、第３図の
手順で測定した測定結果を示す。各測定結果は、
測定時に混入した一定量の標準試料による基準ピ
ーク（第４図におけるＲ）のピーク−ピーク値hr
との比のかたちで相対強度値とし表わしている。
第５図から、癌患者のリンパ球は相対強度が0.8
以上を示すのに対し、癌ではない正常健康者及び
膠原病患者のリンパ球はそれ以下の値を示す。従
つて、本発明の鑑別テストによれば、あるレベル
を境界線として癌患者のリンパ球か否かを検定す
ることが可能であることが分る。しかも、ヘマト
ポルフイリンを用いる特願昭58−83651号の方法
では、境界線付近で多少癌患者と正常健康者の値
がオーバーラツプする部分が存在したが、本発明
ではそのようなオーバーラツプがなくなり、癌に
かかつているか否かを更に明確に判別することが
可能となつた。
病患者５名から採取した血液について、第３図の
手順で測定した測定結果を示す。各測定結果は、
測定時に混入した一定量の標準試料による基準ピ
ーク（第４図におけるＲ）のピーク−ピーク値hr
との比のかたちで相対強度値とし表わしている。
第５図から、癌患者のリンパ球は相対強度が0.8
以上を示すのに対し、癌ではない正常健康者及び
膠原病患者のリンパ球はそれ以下の値を示す。従
つて、本発明の鑑別テストによれば、あるレベル
を境界線として癌患者のリンパ球か否かを検定す
ることが可能であることが分る。しかも、ヘマト
ポルフイリンを用いる特願昭58−83651号の方法
では、境界線付近で多少癌患者と正常健康者の値
がオーバーラツプする部分が存在したが、本発明
ではそのようなオーバーラツプがなくなり、癌に
かかつているか否かを更に明確に判別することが
可能となつた。
尚、混入する標準試料の量によつて基準ピーク
の強度が変わるので、相対強度値も変わる。従つ
て、正常健康者と癌患者との相対強度値での比較
は、同じ量の標準試料を混入して行わなければな
らないことは言うまでもない。
の強度が変わるので、相対強度値も変わる。従つ
て、正常健康者と癌患者との相対強度値での比較
は、同じ量の標準試料を混入して行わなければな
らないことは言うまでもない。
［効果］
以上詳述した如く、本発明によればヘマトポル
フイリン誘導体を用いることによりヘマトポルフ
イリンを用いる場合よりも更に正確な測定方法が
実現される。
フイリン誘導体を用いることによりヘマトポルフ
イリンを用いる場合よりも更に正確な測定方法が
実現される。
第１図はヘマトポルフイリン誘導体のESRス
ペクトルの測定例を示す図、第２図はヘマトポル
フイリン誘導体濃度とESRスペクトル相対強度
との関係を示す図、第３図はESR装置を用いて
本発明にかかる方法を実施する際の手順を示す流
れ図、第４図は第３図の手順に従つて測定した正
常健康者（下）と癌患者（上）のリンパ球につい
てのESRスペクトルを示す図、第５図は、正常
健康者21名、癌患者26名、膠原病患者５名から採
取した血液について第３図の手順で測定した測定
結果を示す図である。
ペクトルの測定例を示す図、第２図はヘマトポル
フイリン誘導体濃度とESRスペクトル相対強度
との関係を示す図、第３図はESR装置を用いて
本発明にかかる方法を実施する際の手順を示す流
れ図、第４図は第３図の手順に従つて測定した正
常健康者（下）と癌患者（上）のリンパ球につい
てのESRスペクトルを示す図、第５図は、正常
健康者21名、癌患者26名、膠原病患者５名から採
取した血液について第３図の手順で測定した測定
結果を示す図である。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 被験者から取出されたリンパ球にヘマトポル
フイリン誘導体を添加し、 (b)インキユベート後リンパ球のみを分離し、(c)
分離したリンパ球に含まれるラジカル量を電子ス
ピン共鳴装置を用いて定量測定する、 諸工程より成る癌罹病由来のリンパ球の測定方
法。 ２ 分離したリンパ球に光をあて、電子スピン共
鳴装置により定量測定を行う特許請求の範囲第１
項記載の癌罹病由来のリンパ球の測定方法。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24345383A JPS60135765A (ja) | 1983-12-23 | 1983-12-23 | 癌罹病由来のリンパ球の測定方法 |
| US06/608,996 US4696905A (en) | 1983-05-13 | 1984-05-10 | Method for diagnosing cancer using ESR |
| DE198484105337T DE125651T1 (de) | 1983-05-13 | 1984-05-11 | Verfahren zum nachweis von krebszellen. |
| EP84105337A EP0125651B1 (en) | 1983-05-13 | 1984-05-11 | A method for detecting cancerous cells |
| DE8484105337T DE3483493D1 (de) | 1983-05-13 | 1984-05-11 | Verfahren zum nachweis von krebszellen. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24345383A JPS60135765A (ja) | 1983-12-23 | 1983-12-23 | 癌罹病由来のリンパ球の測定方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60135765A JPS60135765A (ja) | 1985-07-19 |
| JPH035551B2 true JPH035551B2 (ja) | 1991-01-25 |
Family
ID=17104109
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24345383A Granted JPS60135765A (ja) | 1983-05-13 | 1983-12-23 | 癌罹病由来のリンパ球の測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60135765A (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62182663A (ja) * | 1985-10-23 | 1987-08-11 | Nippon Mejifuijitsukusu Kk | 放射性金属標識癌診断剤 |
| JP2010054305A (ja) * | 2008-08-27 | 2010-03-11 | Tohoku Denshi Sangyo Kk | 癌罹病の検定に使用するデータの収集方法 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS59208460A (ja) * | 1983-05-13 | 1984-11-26 | Jeol Ltd | 癌罹病に由来する細胞からの高ラジカルの発生を検知する方法 |
| JPS6025452A (ja) * | 1983-07-23 | 1985-02-08 | Supeshiaru Refuarensu Lab:Kk | 罹癌患者由来のリンパ球の測定方法 |
-
1983
- 1983-12-23 JP JP24345383A patent/JPS60135765A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS60135765A (ja) | 1985-07-19 |
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