JPH0356498A - 血液調節ペプチド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、血液調節（ｈｅｍｏｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ）
活性を有しており、造血を刺激するため、およびウィル
ス性、真菌類性および細菌性感染症を治療するために使
用することができる新規ペプチドに関する。

（従来の技術） コロニー形成促進因子、インターフェロンおよび様々な
タイプのペプチドのような種々の調節メノセンジャーお
よび修飾因子によって、骨髄造血の調節が為される。メ
トカーフ（Ｍｅｔｃａｌｒ），　セル（Ｃｅｌｌ），　
４３：５　（１９８５）　；バセルガ・アール（Ｂａｓ
ｅｒｇａＲ．）、フォア・ピー（Ｆｏａ　Ｐ．）、メト
カーフ・ディー（Ｍｅｔｃａｌｆ　Ｄ．）、ポリ・イー
イー（Ｐｏｌｌｉ　ＥＥ）（ｅｄｓ），バイオロジカル
・レギュレーション・オブ・セル・ら，ジャーナル・オ
ブ・セルーラー・フィジオロジ−（Ｊ．Ｃｅｌｌ　Ｐｈ
ｙｓｉｏｌ．）　１２８：５０１　（１９８６），　　
ゾウンボス（Ｚｏｕｍｂｏｓ）ら，　Ｐｒｏｙｒ．Ｈｅ
ｍａｔ．　　１：３４１および１４：２０！　（１９８
６）　；ウェルナ−（Ｖｅｒｎｅｔ）ら，イクスベリエ
ンチア（Ｅｘｐｅｒｉｅｎｔｉａ）　４２：５２＋　（
１９８６）参．ｐ＜７。２０年前、リトマ（Ｒｙｔｏｍ
ａａ）およびキビエニミ（Ｋｉｖｉｅｎｉｅｍｉ）セル
・ティシュー・キ不ノト（ＣｅｌｌＴｉｓｓｕｅ　Ｋｉ
ｎｅｔ）　１：３２９−３４０　（１９６８）　：リト
マ（Ｒｙｔｏｍａａ＞　ラ＋　　コントロール・オブ・
セルーラー・グロウス・イン・アダルト・オーガニズム
スＯｒｇａｎｉｓｓｓ）　ｐｐ　１０６−１３８　（１
９６７）には、成熟顆粒球（顆粒球性カローン）の抽出
物がカバーガラス培養におけるラット骨髄造血細胞増殖
を特に抑制することが報告された。その後、彼らは、３
，　０　０　０ダルトン以下の分子量を有する因子が移
植可能なラット顆粒球性白血病を後退させることができ
、同様に、ヒトにおいて白血病細胞の成長を遅らせるこ
とができることを示した。パウコビッツ（Ｐａｕｋｏｖ
ｉｔｓ）とその他の者は、ラノト骨髄細胞から同様の因
子を抽出し、それが骨髄細胞のトリチウムチミジン摂取
を抑制することを示した。パウコビッツ・ダブリュ・ア
ール（Ｐａｕｋｏｖｉｔｓ　Ｗ．Ｒ．）＋セル・ティシ
ュー・キネット（Ｃｅｌｌ　Ｔｉｓｓｕｅ　Ｋｉｎｅｔ
）４：５３９−５４７　（１９７１）　；ナトウールホ
ルシュ（Ｎａｔｕｒｆｏｒｓｃｈ）　３？：１２９７　
（１９８２）参照。ｌ９７９年に、ボール（Ｂｏｌｔ）
ら，アクタ・ヘマトロジカ（ＡｃｔａＨａｅ＋ｎａｔｏ
ｌｏｇｉｃａ）　６：ｌ３０　（１９７９）は、培養に
おいてヒト骨髄細胞へのラット顆粒球抽出物の抑制効果
を示し、多くの他の研究者は、Ｍｔ．類動物骨髄細胞か
らのこの粗顆粒球抽出物がインビトロでｇ−ＣＦＵＣお
よび／またはｇｍ−ＣＦＵＣの発達を抑制することを示
した。

この生物学的薬物を顆粒球性力ローンと称し、これは、
この理論学的概念に従って、それを分〆必すると同じ組
織において作用する細胞増殖の内因性抑制因子であった
。粗抽出物から得た該物質は、種特異性はないが組織特
異性が高いことがわかった。さらに、非毒性であり、可
逆性の活性を有することがわかった。

ｌ９８２年には、下記構造： ｐＧｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓを有する合
成血液調節ペンタペプチドが、インビトロおよびインビ
ボの両方で、骨髄造血細胞に対して選択的抑制効果を有
し、主な効果が骨髄造血幹細胞（Ｃ　Ｆ　Ｕ−ｇｉ）に
対してであると思われると報告された。パウコビノツ（
Ｐａｕｋｏｖｉｔｓ）ら，ツァイトシュリフト・エフ・
ナトゥールホルシュング（Ｚ．Ｎａｔｕｒｆｏｒｓｃｈ
）　３７：ｌ２９７　（１９８２）および米国特許第４
，　４９９，　０８１号参照。このベプチドは、骨髄抽
出物において少量が見いだされる自然に生起する顆粒球
形成抑制因子の類似物である。造血、特に顆粒球形成を
抑制することによって、ペプチドは、静態細胞が細胞分
割を始めることを防止しようとし、その結果、細胞毒性
抗癌薬によって攻撃され易くなる。細胞毒性薬を用いて
、治療における保護的機能を提供することに加えて、ベ
ブチドは、骨髄造血系に関する癌細胞の増殖、すなわち
骨髄球性白血病を抑止するのに使用することもできる。

ｌ９８７年には、レラム（Ｌａｅｒｕｉ）らは、このペ
プチドの酸化生戊物がジスルフィド架橋基によって形成
される二量体（ＨＰ−５）であることを報告した。この
二ｆｆｉ体は、インビト口でヒトおよびマウスＣＦＵ−
ｇｍの両方のコロニー形戊を強く刺激しかつインピボで
マウス骨髄造血細胞を調節するモノマーとは反対の効果
を有する。これは、欧州特許出願第８７３０９８０６．
　５号に開示されている。

該二量体は、組織反応を抑制する免疫抑制治療によって
、すなわち骨髄移植手術において、骨髄磯能を抑制され
た患者を含む、骨髄損傷、顆粒球減少症および再生不良
性貧血を含む低減された骨髄造血活性に冒されている患
者における骨髄漬血を刺激するのに有用であると報告さ
れている。該化合物は、腫瘍性およびウィルス性疾患に
関する細胞増殖抑制性化学的治療および放射線治療の後
、骨髄のより迅速な再生を促進するのに使用することも
できる。これらは、患者が骨髄欠損の後の免疫応答不全
による重篤な感染症を有する場合に特に有用なものであ
る。

ＨＰ−５二量体におけるジスルフィド結合の存在は、モ
ノマーがインピボで可能な代謝産物であることを示唆し
ている。モノマーが造血を抑制するので、骨髄造血を刺
激するためにインビボで使用する場合、ＨＰ−５二量体
の安定性は、決定的である。安定な二量体の同定は、こ
の潜在する問題を除くと思われる。

（発明が解決しようとする課題） 本発明は、血液調節活性を有しており、造血を刺激し、
細菌性、ウィルス性および真菌類性疾患を治療するのに
使用することができる、下記式（Ｉ）として示すペプチ
ドを提供するものである。

これらのべブチドは、外科手術的に生じる骨髄抑圧（ｍ
ｙｅｌｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ）、エイズ（ＡＩＤＳ
）、先天性脊髄形戊異常症、骨髄および藩官の移植のよ
うな種々の臨床学的状況によって生じる細胞数の低下を
有する患者における白血球の回復において；感染症によ
る白血球減少症を有する患者の保護において；重度のや
けどの患者の治療において、そして、いくつかの細胞周
期特異性抗ウィルス薬（ｃｅｌｌ−ｃｙｃｌｅ　ｓｐｅ
ｃｉｆｉｃ　ａｎｔｉｖｉｒａｌ　ａｇｅｎｔｓ）によ
って見られる骨髄抑圧の改善において有用である。

このペプチドは、免疫抑圧された患者および“正常な”
患者の両方において、ウィルス性、真菌類性および細菌
性の感染症、特に、カンジダおよびヘルペスの治療にお
いても有用である。

これらの化合物は、米国特許第４，　４９９．　０８ｊ
号のモノマーと一緒に使用して、骨髄細胞における高い
活性および低い活性の交互に起こるピークを提供し、従
って、造血の自然の日周期（ｃｉｒｃａｄｉａｎｒｈｙ
ｔｈｍ）を大きくすることができる。この方法では、細
胞増殖抑制治療によって、低い骨髄活性の期間が与えら
れ、従って、骨髄損傷の危険性が低減するが、連続する
活性のピークによって、再生が促進されるであろう・。

本発明は、式（１）で示される化合物および医薬的に許
容される担体からなる医薬組或物を提供するものでもあ
る。

また、本発明は、必要とする動物に、式（Ｉ）で示され
る化合物の有効量を投与することからなるヒトを含む動
物の骨髄造血系を刺激する方法を提供するものでもある
。

本発明は、必要とする動物に、式（１）で示される化合
物の有効量を投与することからなるヒトを含む免疫抑圧
された動物および正常な動物においてウィルス性、真菌
類性および細菌性感染症を治療する方法を提供するもの
でもある。

（課題を解決するための手段） 本発明のべブチドは、式： ［式中、 Ｙ，およびＹ，は、独立してＣＨ，またはＳであり； Ｘは、０、１２、３または４であり； ｍは、０、ｌまたは２であり； ｎは、０，１または２であり； Ａは、ピログルタミン酸、プロリン、グルタミン、チロ
シンまたはグルタミン酸であり；Ｂは、グルタミン酸、
チロシンまたはアスパラギン酸であり； Ｃは、グルタミン酸、チロシンまたはアスパラギン酸で
あり； Ｄは、リシン、アルギニン、チロシン、Ｎメチルアルギ
ニン、ジアミノヘキシン酸またはカルボキシアミドまた
はそのヒドロキシメチル誘導体であり； Ｅは、グルタミン酸、アスパラギン酸、チロシンまたは
ペプチド結合である。

ただし、 Ｙ１およびＹ，がＳである場合、Ｘが２、３または４で
あり、ｍおよびｎが１であるか；Ｙ１およびＹ，がＣＨ
，である場合、Ｘが０１１または２であり、ｍおよびｎ
がＯであるか；Ｙ，がＳでありかつＹ，がＣＨ，である
場合、ｘｈ＜Ｏであり、ｎが１であるか： Ｙ，がＳでありかつＹ１がＣＨ，である場合、ＸがＯで
あり、ｍがｌである。］ で示される化合物またはその医薬的に許容される塩であ
る。

また、本発明は、該化合物の医薬的に許容される塩萬合
体をも含む。式（１）において、Ａは、ピログルタミン
酸、プロリン、グルタミン、チロシンまたはグルタミン
酸に対応するアミノ酸残基の末端アミ７基からなってい
る。同様に、Ｄは、リシン、アルギニン、チロシン、Ｎ
−メチルアルギニン、ジアミノヘキシン酸またはカルボ
キシアミドまたはそのヒドロキシメチル誘導体に対応す
るアミノ酸残基の末端カルボキシル基からなっている。

本明細書では、ペプチドを記載するために、当技術分野
において一般に用いられる略語および記号を使用する。

ｐＧｌｕ＝　　ピログルタミン酸、 Ｐｒｏ＝　　ブロリン、 Ｇｉｎ　　＝　　グルタミン、 Ｇｌｕ　　＝　　グルタミン酸、 −　Ａｓｐ　　＝　　アスパラギン酸、Ｌｙｓ　　ニ　
リシン、 Ａｒｇ＝　　アルギニン、 Ｃｙｓ　　＝　　システイン、 Ｔｙｒ　　−　　チロシン、 Ｓｕｂ　　−　ジアミノスベリン酸、 Ｈｎａ＝　　ジアミノヘキシン酸、 Ｐｉｍ＝　　ジアミノピメリン酸、 Ａｄｐ　　−　ジアミ／アジピン酸。

慣用の表示に従って、アミ／末端は左側であり、カルボ
キシ末端は右側である。全てのキラルアミノ酸は、Ｄま
たはＬ絶対配置であってよい。

アミノ末端は、アシル化によって保護されてもよい。こ
のような保護基としては、ｔ−ブトキ／カルボニル（ｔ
−Ｂｏｃ）、Ｃ　Ｈ．，Ｃ　ＯおよびＡｒ−ＣＯ（Ａｒ
＝ベンジル）が挙げられる。

Ｃ一末端は、天然アミノ酸の場合のようなカルＯ １１ ボキシまたはカルボキシアミド（−ＣＮＨ，）もしくは
ヒドロキシメチル（−ＣＨ，−ＯＨ）であってよい。

好ましい化合物は、Ｙ，およびＹ，がＣＨ，であり、Ｘ
が１または２であるか、ＡがｐＧｌｕであり、ＢがＧｌ
ｕであり、ＣがＡｓｐであり、ＤかＬｙｓであり、Ｅが
ペプチド結合であり、キラルアミノ酸かＬ絶対配置であ
る化合物である。

特に好ましい化合物は、 および である。

本発明の化合物、二重体がジスルフィド架橋基ではなく
炭素一炭素結合を含んでいる架橋基によって結合してい
る点で従来技術の化合物とは異なる。

炭素一炭素結合は、インビボで容易に開裂せず、従って
、欧州特許出願第８７３０９８０６．　５号の化合物よ
りもインピボでより安定である。

本発明のべブチドは、メリフィールド （Ｍｅｒｒｉｒｉｅｌｄ）．　　ジャーナル・オブ・ア
メリカン・ケミカル・ソサイエティ（Ｊ．　Ａｍ．　Ｃ
ｈｅｍ．　Ｓｏｃ．　），　８５．２１４９　（１９６
４）の固相技術によって製造されるか、または当技術分
野で公知の溶液法を成功裏に用いることができる。ジェ
イ・エム・スチュワート（Ｊ．Ｍ．　Ｓｔｅｗａｒｔ）
およびジェイ・ディー・ヤング（Ｊ．Ｄ．Ｙｏｕｎｇ）
＋　“ソリッド・フェース・ベプチド・シンセシス（Ｓ
ｏｌｉｄ　Ｐｈａｓｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｓｙｎｔｈｅ
ｓｉｓ）″，ビース・ケミカル・カンパニー（Ｐｉｅｒ
ｃｅ　Ｃｈｅｎ＋ｉｃａｌＣｏｍｐａｎｙ）ｒ　　口ツ
クフオード，イリノイ（１９８４）またはエム・ボダン
スキ−（Ｍ．　Ｂｏｄａｎｓｋｙ），　　ワイ・エイ・
クラウサー（Ｙ．＾．　Ｋｌａｕｓｅｒ）およびエム・
エイ・オンデッテイ（Ｍ．Ａ．Ｏｎｄｅｔｔｉ），　”
ペプチド・シンセシス（Ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｓｙｎｔｈｅ
ｓｉｓ）”，ジョーン・ウイリー・アンド・サンズ・イ
ンコーポレイテッド（ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ　＆　Ｓｏｎ
ｓ　Ｉｎｃ．），　　ニューヨーク，ニューヨーク　（
１９７６）に一般的に記載されているペプチド合成方法
は、本発明のべブチドを製造するのに使用することがで
き、本明細書に引用して記載する。

各アミノ酸またはベプチドは、ペプチドの技術分野にお
いて公知であるように、適当に保護されている。例えば
、アミ７基の、特にα一位での保護のためには、フルオ
レニルメトキシカルボニル基（　Ｆ　＋Ｉｌｏｃ）また
はｔ−ブトキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）基が好ましい
。適当に置換されたカルボベンジルオキ７基は、リシン
のε−アミノ基およびＡｓｐおよびＧｌｕの、各々βお
よびγカルボキシ基に関するベンジル基に関して使用す
ることができる。カルボベンジルオキシ保護基の適切な
置換は、クロロ、ブロモ、ニトロまたはメチルによるオ
ルトおよび／またはパラ置換であり、保護基の反応性を
変えるために用いられる。ｔ−Ｂｏｃ基以外の保護基は
、穏やかな酸処理によって除去されないものが最も好都
合である。これらの保護基は、接触水素添加のような方
法、当技術分野において公知であるアンモニアまたはＨ
Ｆ水溶演中のナトリウム処理法によって除去される。

固相法を用いる場合、ペプチドは、逐次、カルボキシ末
端から出発し、ベブチドのアミノ末端に向かって作用さ
れながら構築される。固相合成は、米国特許第４，　２
４４，　９４６号に一般的に開示されている如きベンズ
ヒドリルアミン樹脂（ＢＨＡ）、メチルベンズヒドリル
アミン樹脂（ＭＢＨＡ）もしくはクロロメチル樹脂（Ｃ
　Ｍ　Ｒ　）、またはフェニルアセトアミドメチル樹脂
（ＰＡＭ）のような適当な樹脂に保護されたアミノ酸の
Ｃ末端を共有的に結合することによって開始される。生
成ペプチドのカルボキシ末端がカルボキシアミドである
場合は、ＢＨＡまたはＭＢＨＡ支持樹脂を使用する。生
成ペプチドのカルボキシ末端がカルボキシ基である場合
は、一般的にＣＭＲまたはＰａｎ樹脂を用いるが、これ
は、カルボキシアミドまたはエステルを生成するために
も使用することができる。

α−アミノ基における保護基は、穏やかな酸処理（すな
わち、トリフルオロ酢酸）によって除去される。Ｙ，お
よび／またはＹ，がＳでな＜ＣＨ．である化合物につい
て、ジーＢｏｃ（ジアミノジカルボン酸）は、適切なカ
ノブリング剤を使用して樹脂上の２つのアミノ酸とカノ
プリングされる。如何なる遊離カルボキシル基もＤの適
切な保護誘導体ニよってアミド化される。当技術分野に
おいて公知の適切な脱保護、中和およびカノブリングサ
イクルを用いて、所望のべブチドが形成されるまで、中
間体を単離せずに、逐次、アミノ酸を添加する。次いで
、完全なベブチドは、如何なる状態においても、担持樹
脂から脱保護されるか、および／またはスブリットする
。

ＨＦまたはＨＢｒ／酢酸によるペプチド支持樹脂の処理
によって、樹脂からペプチドがスプリットされ、カルボ
ン酸のようなカルボキシ末端アミノ酸を生戊する。

エステルが望まれる場合は、トリエチルアミンの存在下
、ＣＭＲまたはＰａｗ樹脂を、メチル、エチル、プロビ
ル、ブチルまたはべ冫ジルアルコールのような適切なア
ルコールで処理して、樹脂からベブチドを開裂し、直接
、エステルを生成する。

本発明のべブチドのエステルは、カルボン酸前駆体から
慣用的な方法によって製造することもできる。代表的に
は、カルボン酸は、酸触媒の存在下、アルコールで処理
される。他方、カルボン酸を、酸ハロゲン化物のような
活性化されたアシル中間体に転換し、好ましくは塩基の
存在下、アルコールで処理することができる。

支持樹脂からペプチドを開裂する好ましい方法は、アニ
ソールまたはジメトキシベンゼンのような適当な陽イオ
ン捕捉剤の存在下、無水ＨＦによってペプチド支持樹脂
を処理することである。この方法は、同時に、硫黄原子
を保護するチオアルキル基以外の全ての保護基を除去し
、樹脂からペプチドをスブリットする。この方法でＣＭ
ＲおよびＰａｗ樹脂から加水分解されたべブチドは、カ
ルボン酸であり、ＢＨＡ樹脂からスブリットしたものは
、カルボキシアミドとして得られる。

ペプチドの末端アミ７基の変形は、当技術分野において
一般的に公知であるようなアルキル化またはアシル化に
よって行われる。これらの変形は、ペプチドに結合され
る前にアミノ酸によって、または合成され、末端アミ７
基が遊離された後であり、保護基が除去される前にペプ
チドによって、行うことができる。

代表的には、４級アミンの存在下、アシルのハロゲン化
物、無水物または対応するアルキルもしくはアリル酸の
活性化エステルを用いて遊離アミ７基によってアシル化
を行う。モノアルキル化は、リチウムまたはシアノホウ
水素化ナトリウムのような穏やかな還元剤の存在下、適
当な脂肪族アルデヒドまたはケトンによるアミ７基の還
元的アルキル化によって、最も都合よく行われる。ジア
ルキル化は、塩基の存在下、過剰量のハロゲン化アルキ
ルによってアミ！基を処理することによって行うことが
できる。

ペプチドの溶液合戊は、アミド結合を形成するために使
用される慣用の方法を用いて行われる。

代表的には、遊離カルボキシル基を有する保護ｔ−Ｂｏ
ａアミノ酸は、所望によって１−ヒドロキシベンゾチア
ゾール（ＨＯＢＴ）またはジメチルアミノビリシン（Ｄ
ＭＡＰ）のような触媒の存在下、Ｎ，Ｎ’−ジシクロへ
キシルカルボジイミド（ＤＣＣ）のような適切な力，プ
リング剤を使用して遊離アミノ基を有する保護アミノ酸
とカンプリングされる。保護ｔ−Ｂｏａ−アミノ酸の遊
離力ルボキシルの活性化エステル、無水物または酸ハロ
ゲン化物の形戊のような他の方法、およびその後の、所
望によって塩基の存在下における保護アミノ酸の遊離ア
ミンとの反応も適切である。例えば、保護Ｂｏｃ−アミ
ノ酸またはペプチドを、Ｎ−メチルモノレホリン、ＤＭ
ＡＰ（ジメチルアミノピリシン）またはトリアルキルア
ミンのような塩基の存在下、塩化メチレンまたはテトラ
ヒドロフラン（ＴＨＦ）のような無水溶媒中、クロロギ
酸イソブチルで処理して、“活性化無水物”を形成し、
その後、これを他の保護アミノ酸またはペプチドの遊離
アミンと反応させる。これらの方法によって形成された
べブチドをアミノまたはカルボキシ末端で慣用的な方法
を使用して這択的に脱保護し、同様の方法を使用して他
のべブチドまたはアミノ酸とカップリングする。ペプチ
ドが完全である場合、パラジウムまたはプラチナ触媒の
存在下での水素添加、アンモニア水溶ｌｆＬ、フッ化水
素酸水溶岐またはアルカリ水溶液中でのナトリウムによ
る処理によるのような、前記のように保護基を除去する
ことができる。

脱保護の後、最終ベブチドが塩基性基を含む場合、酸付
加塩を製造することができる。ベプチドの酸付加塩は、
適当な溶媒中、標準的な方法で、親の化合物および塩酸
、臭化水素酸、硫酸、リン酸、酢酸、マレイン酸、コハ
ク酸またはメタンスルホン酸のような過剰量の酸から製
造することができる。酢酸塩形は、特に有用である。最
終ペプチドが酸性基を含む場合、陽イオン塩を製造する
ことができる。代表的には、親の化合物を、適当な陽イ
オンを含んでいるヒドロキシド、カルボネートまたはア
ルコキシドのような過剰量のアルカリ試薬で処理する。

医薬的に許容される塩の中に存在する陽イオンとしては
、Ｎ１、Ｋ゛、Ｃａ”およびＮＨ．゜のような陽イオン
が挙げられる。Ｎ１およびＮＨ．゜が特に好ましい。

一般的に、刺激効果を及ぼすために、０．１〜１０ｌ９
の投薬範囲内、例えば、１日につき体重７０ｋ９当たり
１〜５肩９の範囲で注射によってまたは経口的にヒト患
者に本発明のべブチドを投与することができ、注入また
は同様の技術による投与の場合、投与量は、体重７０＆
ｇ当たり３０〜３００ｌ９の範囲内であり、例えば、６
日間にわたって約１００ｍ９であってよい。原則的には
、患者の細胞外液中、約１０”Ｍ−１　０−５Ｍのペプ
チドの濃度を得るのが望ましい。

また、本発明は、活性戊分として、１またはそれ以上の
前記定義の式（１）で示される化合物を含有し、かつ医
薬的に許容される担体または賦形剤を含有する医薬組成
物を提供するものである。本発明の組底物は、例えば、
経口、鼻腔内、非経口または直腸内投与用に適した形態
である。

本明細書において使用する場合、“医薬的に”という用
語は、本発明の獣医学的適用を含む。

これらのべブチドは、被包されるか、錠剤に打錠される
か、または経口投与用エマルジョンもしくはシロップの
形態に調製される。医薬的に許容される固体または液体
担体を添加して、該組戊物を増強または安定化するか、
または該組戊物を容易に調製することができる。液体担
体としては、ンロノプ、落花生油、オリーブ油、グリセ
リン、食塩水および水が挙げられる。固体担体としては
、デンプン、ラクトース、硫酸カルシウムニ水和物、白
土（ｔｅｒｒａ　ａｌｈａ）、ステアリン酸マグネシウ
ム、もしくはステアリン酸、タルク、ペクチン、アラビ
アゴム、寒天またはゼラチンが挙げられる。該担体とし
ては、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン
酸グリセリルのような持続放出性物質のみ、またはワノ
クスと一緒のものが挙げられる。固体担体の量は変化す
るが、好ましくは、投薬ユニｙトにつき約２０ｍ９〜約
１９の間が好ましい。医薬的な調製物は、錠剤形態に関
しては、必要な場合には、ミル、混合、顆粒化、および
圧縮を、ゼラチン硬カプセル形態に関しては、ミル、混
合および充填を含む慣用の製薬学的方法に従って製造さ
れる。液体担体を使用する場合、調製剤は、シロソプ、
エリキシル、エマルジョンマタハ水性もしくは非水性懸
祠液の形態である。このような液体製剤は、直接経口役
与するか、ゼラチン軟カプセルに充填することができる
。器官特異性担体系を使用することもできる。

本発明のべブチドまたはその誘導体を含む別の医薬組成
物は、非経口投与用の溶液または凍結乾燥粉末として製
剤化することができる。粉末は、使用前に、適当な希釈
剤または他の医薬的に許容される担体の添加によって再
調製することができる。液体製剤は、一般に、緩衝化溶
？皮、等張溶液、水溶液である。好適な希釈剤としては
、通常の等張食塩水、水または緩衝化した酢酸ナトリウ
ムもしくは酢酸アンモニウム水溶液中の標ｉｆ８５％デ
キストロースである。このような製剤は、特に、非経口
投与に特に適しているが、経口投与用に使用するが、ま
たは計量された投与量の吸入用吸入器または噴霧器中に
入れることができる。ポリビニルビロリドン、ゼラチン
、ヒドロキシセルロース、アラビアゴム、ポリエチレン
グリコール、マンニトール、塩化ナトリウムまたはクエ
ン酸ナトリウムのような賦形剤を添加するのが望ましい
。

直腸内投与に関して、本発明のべブチドの粉砕粉末と、
ココアバター、グリセリン、ゼラチンまたはポリエチレ
ング，リコールのような賦形剤と混合して、坐剤に或形
する。粉砕粉末は、油状調製物、ゲル、クリームまたは
エマルジョンと混合し、緩衝化または非緩衝化され、経
皮パッチ（ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ　ｐａｔｃｈ）を介
して投与される。

同様に、鼻腔内スプレイは、水溶液中で製剤化し、エア
ロゾルブロベラントを有するスブレイ容器中に入れるか
、または手動圧縮によって得られる。１またはいくつか
の活性成分を含有するカプセルは、例えば、ラクトース
またはソルビトールのような不活性担体と活性成分とを
混合し、該混合物をゼラチンカプセルに充填することに
よって調製される。

本発明の化合物を含有する投薬ユニットは、式（１）で
示されるペプチドまたはその塩の０．１〜ｌＯＲ９、例
えば１〜５叶を含有するのが好ましい。

また、本発明は、対象（患者）に前記医薬組或物の有効
量を投与することからなる骨髄造血の刺激方法を提供す
るものである。

さらに、本発明は、必要とする動物に前記医薬組成物の
有効量を投与することからなる免疫抑制された動物また
は正常な動物においてウィルス性、真菌類性および細菌
性感染症を治療する方法を提供するものである。

以下の試験によって、式（１）で示される化合物の生物
学的活性を示す。

基質細胞（ｓｔｒｏｍａｌ　ｃｅｌｌｓ）によるコロニ
ー形成促進活性の誘発 ヒト骨髄基質細胞菌株、Ｃ６を、ＲＰＭＩ〜１６４０培
地および５％ＦＢＳ中、プラスチック製組織培養皿中で
、増殖して群を形成する。実験の前日に、この培地を、
血清を添加していないＤＭＥＭに変える。これらの培養
物に、化合物を１時間添加し、次いで該培養物を洗浄す
る。培地を新しいＤＭＥＭと代え、細胞を３７６Ｃ，５
％ＣＯ，で２４時間インキユベートする。２４時間後、
Ｃ６細胞培養上清を回収し、無ｍａ過し、下記造血コロ
ニー形成促進活性（ＣＳＡ）の存在について検査できる
まで、凍結させる。

軟寒天検査 ルイス（　Ｌ　ｅｗｉｓ）ラットから骨髄細胞を得る。

これを、血清を含有しないＤＭＥＭ中１０＠細胞／ｍＱ
に調節する。以下のものを使用する単一層寒天系を使用
する：栄養に富んだＤＭＥＭ（ＮａＨＣＯ，、ピルベー
ト、アミノ酸、ビタミン、およびＨＥＰＥＳ緩衝液）；
０．３％バクト（　Ｂ　ａｃｔｏ）寒天、および２０％
ルイスラット血清。これに、ラット骨髄細胞（最終濃度
＝１０５細胞／叶）と一緒に上記によって得られたＣ６
細胞菌株上清の希釈液（１０〜２．５％）を添加する。

寒天プレートを３７゜Ｃ、５％ＣＯ，で７〜８日間イン
キユベートする。増殖する骨髄細胞のコロニー（ＣＦＵ
−Ｃ）を顕微鏡を用いて計数する。数えた寒天コロニー
の数はＣ６骨髄基質細胞菌株上浦内に存在するＣＳＡの
量に比例する。

第１表 感染の前７日間、Ｂａｌｂ／ｃマウスに、化合物ＩＯお
よびｉ　ｎ９／　ｋ９の投与量で０．２Ｒ（ｌを、１日
１度、腹腔内注射する。対照マウスには、希釈緩衝液、
ＤＰＢＳおよび熱不活性化した０．５％正常マウス血清
の混合液０．２Ｒ（ｌを注射する。

各後足肉Ｉｆ（ｐａｄ）に、ＰＢＳ　　Ｏ．０５ｉＣに
墾濁した５．　Ｏ　Ｘ　１　０　５／ｐｆｕを注射する
ことによって、マウスを単純庖疹ウィルス（菌株ＭＳ）
に感染させる。該マウスに、瀕死（食物または水を得る
ことができない）になるまで化合物または対照注射液を
与え続ける。一般的に、感染の後、約８日で、後足の麻
痺が生じる。脳炎が生じるまで、麻痺が進行する。

他方、膣経路によってウィルスを接種する。ＭＳ−ＮＡ
Ｐ菌株の５．　Ｏ　ｘ　ｌ　Ｏ　’／ｐｆｕを含有する
綿栓をマウスの膣に挿入する。

ウィルコキシン（Ｗｉｌｃｏｘｉｎ）試験を用いて、対
照グループと対比して処置したグループにおいて、生存
数の有意な増加が見られるか否かを測定する。

恋ｙ）ｆ塊壓 カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃ
ａｎｓ）菌株Ｂ３１１ａを使用する。この菌株は、通過
させ、次いで、−７０℃で凍結されたマウスであった。

Ｂ　３　１　１’ａは、５．　０〜８．　Ｏ　Ｘ　１　
０　’ｃｆｕ／マウスの範囲内の免疫抑制されたマウス
に対して、およびｔ．ｏ〜２．ｏｘ　ｌｏ５ｃｆｕ／マ
ウスの範囲の正常マウスに関して毒性である。カンジダ
の凍結貯蔵による試料を、サブローデキストロース傾斜
培地上で増殖させ、次いで、１８時間、５０Ｒ（ｌのサ
ブローブロスの振盪培地に移した。細胞を３回洗浄し、
次いで、血球計数板によって計数し、メチレン染料排除
によって生存数を確認した。生存数の計数を、接種物上
で行い、数を確認した。

カンジダに感染した全てのマウス（Ｂａｌｂ／ｃ）を、
食塩水０．２１Ｑに懸濁した細胞によって静脈内感染さ
せた。いくつかのマウスを、３００ラッドの放射線によ
って致死以下に脊髄抑圧する。毎日、放射の後の最初の
２時間、陽性対照として、動物に化合物ＣＳＦまたは賦
形剤を注射する。放射および治療開始後７日目に、静脈
内投与によってカンジダ・アルビカンスによって、該マ
ウスを攻撃する。これは、ほぼ、正常マウスに対するＬ
Ｄ？Ｓを表すことに注意する。他の研究では、マウスを
免疫抑制しない。これらの研究において、マウスは、放
射されたマウスと同一の方法で感染の後７日目に治療を
開始する。両モデルにおいて、マウスを瀕死になるまで
従わせ、変化は、ウイルコキシン試験を使用して比較さ
れた生存数である。

以下に実施例を挙げ、本発明をさらに詳細に説明する。

該実施例は、本発明の範囲を限定するものではなく、本
発明の化合物の製造方法および使用方法を示すものであ
る。

該実施例において、全ての温度は摂氏である。

アミノ酸分析は、ジオネックス・オートイオン（Ｄｉｏ
ｎｅｘ　Ａｕｔｏｉｏｎ）　ｌ　０　０によって行われ
た。ペプチド含有量分析は、アミノ酸分析に基づいた。

ＦＡＢ質量分析は、高速原子衝撃を使用するＶＧＺ　Ａ
　Ｂ質量分析によって行った。使用する略語は、以下の
通りである： Ａｒｇ＝　アルギニン、 Ａｓｐ＝アスパラギン酸、 Ｌ−Ｂｏａ　＝　ｔｅｒｔ−プチルオキシカルボニル、
Ｂｚ＝　ベンジル、 ＣＱ−Ｚ　＝　ｐ−９口口カルポベンジルオキシカルボ
ニル ＜２＝カルボベンジルオキシカルボ ニル） ＤＣＣ　−　ジシクロへキシルカルボジイミド、ＤＩＥ
Ａ　−　ジイソブ口ビルエチルアミン、ＥＤＣ　＝　（
Ｎ一エチルーＮ’−（３−ジメチルアミノプロビル）カ
ルボジイミド、 Ｇｌｕ＝　　グルタミン酸、 ｐ−Ｇｌｕ＝　　ビログルタミン酸、 Ｔｙｒ＝チロシン、 Ｈｎａ＝　ジアミノヘキシン酸、 ＨＯＢＴ　＝　　ヒドロキシベンゾトリアゾール、Ｌｙ
ｓ＝　　リシン、 ＮＭＰ　＝　Ｎ−メチル−２−ピロリジノン、Ｐｒｏ＝
　プロリン、 ＧＩｎ＝　　グルタミン、 Ｃｙｓ＝　　システイン、 Ｓｕｂ＝ ＮＨ−ＣＨ−Ｃｏ ＮＨ−ＣＨ−Ｃｏ （Ｃ　Ｈ　，）． ＮＨ−ＣＨ−Ｃｏ （ジアミノスベリ ン酸） Ａｄｐ　＝　　ＮＨ−ＣＨ−Ｃｏ （Ｃ　Ｈ　ｔ’）ｔ ＮＨ−ＣＨ−Ｃｏ Ｎ−ＭｅＡｒｇ＝Ｎ−メチルアルギニン、Ｐｒｃ＝　　
ビスＢＯＣ−Ｓ，Ｓ’−　１．３−プロパンジイルシス
テイン、 Ｅｔｃ＝　　ビスＢＯＣ−Ｓ，Ｓ’−　１．２−エタン
ジイルシステイン、 Ｂｕｃ−　　ビスＢＯＣ−Ｓ，Ｓ’−１．４−ブタンジ
イルシステイン。

（実施例） 実施例ｌ ｔ　　ＢＯＣ　　Ｌｙｓ（ＣＩ２　　Ｚ）　　Ｏ　　Ｃ
Ｈｔ−Ｐａｔａレジン（０．６３ミリモル／９）をベツ
クマン（Ｂｅｃｋｍａｎ）　９　９　０　　Ｂ　合戊器
にかけた。脱保護工程において、塩化メチレン（Ｃ　Ｈ
　＊Ｃ　Ｑｔ）中で４０％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）
を用いてｔ−Ｂｏｃ基を除去した。トリフルオロ酢酸塩
をｌＯ％ＤＩＥＡ／ＣＨ，Ｃｌ２，によって中和した。

２１ＩＭＤＣＣおよびＨＯＢＴを使用して２ｘＭ　ジー
ＢＯＣ２．６−ジアミノビメリン酸（７８０１１Ｆ）を
カップリングした。室温で２時間、ＣＨｖｃ（ｈ　１　
５１ＱおよびＤＭＦｌＯｘｌ２の混合液中でカップリン
グを行った。カイザー（Ｋａｉｓｅｒ）試験を使用して
、カップリングをモニターした。如何゛なる残存遊離カ
ルボキシル基をも、ＣＨ，Ｃｌ２，／ＤＭＦ（１　５／
ｌ　Ｏ）２５Ｒｒｌ中で３ｘＭ　Ｈ−Ｌｙｓ（Ｚ）−０
Ｂｚ−ＨＣ（！（１．６５ｇ）および３１ＭＤＣＣおよ
び３ｘＭＨＯＢＴを使用することによって２回アミド化
した。

カップリングの２時間後、該樹脂をＣＨ．Ｃｌ２，１５
３！１２で２回、ＤＭＦ１５ｘＱで２回、ＭｅＯＨ／Ｃ
Ｈ．Ｃム（１：ｌ）１５村で２回、最後にＣＨ．Ｃム　
１５３１＋２で２回洗浄した。４０％ＴＦＡ／ＣＨ．Ｃ
Ｑ，を使用するｔ−Ｂｏａの脱保護およびｌ０　％　Ｄ
　Ｉ　Ｅ　Ａ　／　Ｃ　Ｈ　ｔ　Ｃ　Ｑ　ｔを使用する
中和の後、２ＪＩＭ　Ｂｏａ−Ａｓｐ＜Ｂｚｌ）　（０
．　６　４　６９）および２肩Ｍ　ＤＣＣおよび２ＪＩ
ＭＨＯＢＴを添加し、ＣＨ．Ｃｆｆ，／ＤＭＦ（１　５
／ｌＯ）２５ｘＱ．中で２時間カップリングした。次い
で、該樹脂を前記洗浄工程にかけた。ＣＨｔＣＩ２ｔ／
ＤＭＦ（１　５／１　０）２５村中で２ｉＭ　Ｂｏｃ−
Ｇｌｕ（Ｂｚｌ）（０．６　７　４ｇ）、２友Ｍ　ＤＣ
Ｃおよび２肩Ｍ　ＨＯＢＴをカップリングする前に、脱
保護工程および中和工程を繰り返した。洗浄、脱保護お
よび中和工程の後、樹脂を洗浄工程にかける前に２時間
、ＣＨ．Ｃ（ｔ．／ＤＭＦ（１５／１０）２ＢｘＱ中で
２１Ｍ　ｐＧｌｕ（０．２５８９）、２ｉＭＤｅｃおよ
び２１ＭＨＯＢＴをカップリングした。カップリングの
完了をカイザー試験によってモニターし、各工程で唯一
のカップリングが必要とされた。合成が完了した後、樹
脂を乾燥し、計量した。収量：　１．２９。

ベプチド樹脂（１．２９）を開裂装置に充填し、１５゜
Ｃで２時間、フノ化水素酸（ＨＦ）ｌＯ＋Ｑおよびアニ
ソールｌ．ｗｌ２を使用して開裂した。減圧下でＨＦの
除去後、樹脂とベプチドの混合物をエーテルで広範囲に
洗浄し、水酢酸（３０ｊｌｌ２）中でペプチドを抽出し
た。ロータベープ（ｒｏｔａｖａｐ）によって、該抽出
物からほとんどの酸を除去し、残留物を水で希釈し、凍
結乾燥した。酢酸抽出物は粗ペプチド８１０ｏを有して
いた。

酢酸抽出物から得た粗ペプチド（８０１ｌ９）を、調製
用Ｃ−１８カラムを用いてさらに精製した。予め平衡化
した（０．１％Ｔ　Ｆ　Ａ／Ｈ　．０中で）カラムに通
した。８０％アセトニトリル、２０％Ｈ，０および０．
１％ＴＦＡの線形勾配液を使用して、該ペプチドを溶離
した。

３つの異性体を一緒に溶出した（８．５２分）。

これらを、３０％（Ｃ　Ｈ　．Ｃ　Ｎ中０．１％ＴＦＡ
）、７０％（Ｈ　．０中Ｏ．ｌ％ＴＦＡ）〜８０％（Ｃ
Ｈ，ＣＮ中０．１％ＴＦＡ）、２０％（Ｈ　，Ｏ中０．
１％ＴＦＡ）の勾配液を使用し、流速１．ＦＭ！／分で
３５分間かけて、Ｃ−１８カラムによって分離した。

以下の画分が流出した： 画分１：１８．６９分、 画分２：１９．６８分、 画分３：２２．９５分。

アミノ酸分析の結果は、以下の通りであった：アミノ酸
分析　　　　　　観察 Ｇｌｕ　　　　　　　　　１，９９ Ａｓｐ　　　　　　　　　１．０ Ｌｙｓ　　　　　　　　　１．０５ ビスアミノピメリン酸　　Ｎ．Ｄ．。

質量分析＝　１　１　５　７．　５　（Ｍ十Ｈ）”。

の合成： アール・ナット（Ｒ．　Ｎｕｔｔ）の方法［ジャーナル
・オブ・オーガニツク・ケミストリ−（Ｊ．　Ｏｒｇ．
　Ｃｈｅｔ　）４５Ｌ　３０７８，　１９８０）を使用
して、ビスーＢＯＣ（１，ｌ）ジアミノスベリン酸（Ｓ
ｕｂ）を合成した。

塩化メチレン（ＣＨ，（Ｊ２）１　０ｍＱに２ｘＭ　Ｂ
ｏａ−　Ｓ　ｕｂ（８　０　８　１９）、４ｚＭ　Ｌｙ
ｓ−（ε−Ｚ）−Ｃ○ＯＢｚ−ＨＣ１２（１．５６９）
および４ｘＭＨＯＢＴ（０．６１３９）を溶解し、該溶
液を、水／アセトン浴を用いて−１５℃に冷却した。４
ｘＭ　ジイソブロビルエチルアミン（Ｄ　Ｉ　Ｅ　Ａ）
（０．　６　９　２　＊Ｑ’）を添加し、次いで、水可
溶性カルボジイミド（ＥＤＣ）０．７７２９（４ｘＭ）
を添加した。１時間の撹拌の後、混合物を室温に温めた
。３時間後、塩化メチレンを蒸発させ、残留物を酢酸エ
チル２００ｚｊに溶解した。該溶液を、まずＩＮ　ＨＣ
ｌ２で、次いで、ＩＮ　ＮａＯＨ，ＮａＣＱ飽和溶液お
よび水で洗浄した。該洗浄を３回繰り返した。各洗浄液
は約ｔｏｏｘｃであった。有機層をＭｇＳＯ．で乾燥し
、蒸発させた。ＢＯＣ−Ｓｕｂ−（ε−Ｚ）Ｌｙｓ−Ｃ
○ＯＢｚ（収率７９％）１．８６９を得、如何なる精製
も行わないでさらに使用した。

４ＮＨＣｉ２−ジオキサンにＢ　Ｏ　Ｃ　−　Ｓ　ｕｂ
　−　Ｌ　ｙｓ（５　−　Ｚ）−Ｃｏｏ　Ｂｚ（　１．
　８９）を３０分間溶解し、次いで、蒸発乾固した。残
留物をエーテルで洗浄し、一晩乾燥した。塩酸塩をＣＨ
，Ｃ４．３０ＩＱに溶解し、ＢＯＣＡｓｐ−（β−Ｏ　
Ｂｚ）（　１．　２　９　２９）を添加した。該溶液を
ーｌ５℃に冷却し、ＨＯＢＴＯ．６１３９、ＤＩＥＡ　
０．５５４ｊｌｌ２およびＥＤＣ　Ｏ．７７２９を添加
した。２時間撹拌した後、混合物を室温に温めた。１８
時間（一晩）の後、反応混合物を処理した。ＣＨｔＣＩ
２ｇを蒸発させ、残留物を酢酸エチル２００１１２に溶
解した。該溶液をＩＮ　ＨＣＱ，　ＩＮ　ＮａＯＨ，　
ＮａＣＩ２飽和溶液、および水で洗浄した（該洗浄を３
回繰り返した。各洗浄液は約１００ｘｉ２であった）。

ＭｇＳＯ．で有機層を乾燥し、蒸発させた。ＢＯＣ−Ａ
ｓｐ−（βＯＢｚ）−Ｓｕｂ−Ｌｙｓ−（ｇ−Ｚ）ＣＯ
ＯＢｚ　１．９９（収率７３％）。このペプチドは、如
何なる精製をも行わないでさらに使用した。

Ｃ．ＢＯＣ−Ｇｌｕ−（７−ＯＢＺ）　Ａｓｐ　　（β
−ＯＢｚ）Ｓｕｂ−Ｌｙｓ−（ｇ−Ｚ）ＣＯＯＢｚ．の
合戊：４Ｎ　ＨＣｆ２ジオキサンｌ５ＲＱにＢＯＣ−（
β一ＯＢｚ）　Ａｓｐ−Ｓ．ｕｂ−（ｇ−Ｚ）　　Ｌｙ
ｓ−ＣＯＯＢｚ．１．８９を溶解した。１５分後、溶媒
を除去し、残留物をエーテルで洗浄し、乾燥した。塩酸
塩をＮ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）１　５ｚＱに溶解
した。該溶液を−１５℃に冷却し、４ｚＭＢＯＣＧｌｕ
（γ−ＯＢｚ）（１．３’３８）、ＤｒＥＡ　　Ｏ．２
０４ｚＱ，ＥＤＣ　Ｏ．７７２９およびＨＯＢＴ　Ｏ６
１２９を添加した。該混合物を室温に徐々に温めながら
一晩撹拌した。冷却したＮａＣＱ飽和溶液中１０％Ｎｔ
１２ＣＯｓ　ｌＱを含有するフラスコに、該反応混合物
を加えた。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、減圧乾燥した
。ＢＯＣ−（７−ＯＢＺ）ＧＩＬＩ一（β−ＯＢｚ）Ａ
ｓｐ−Ｓｕｂ−（５−Ｚ）Ｌｙｓ−ＣｏＯＢｚ（１．３
９）を得、如何なる精製をも行わないでさらに使用した
。収率：６８％。

４Ｎ　ＨＣＱジオキサンｌ５抑にＢＯＣ−（γＯＢｚ）
　Ｇｌｕ−（β−ＯＢｚ）Ａｓｐ−Ｓｕｂ−（ε−Ｚ）
Ｌｙｓ−ＣＯＯＢｚ　１．２ｇを溶解した。１５分後、
溶媒を除去し、残留物をエーテルで洗浄し、乾燥した。

塩酸塩をＮＭＰ１５ｊｌ１２に溶解した。該溶戚を＝ｌ
５゜Ｃに冷却し、４　ｘＭ　ｐｙｒｏ　−　Ｇ　ｌｕ（
ｐＧ　ｌｕ）　（０．　５　１　６９）、ＤＩＥＡ　Ｏ
．１０６ｊｌｅ、ＥＤＣ　　Ｏ．１１２９およびＨＯＢ
Ｔ　　Ｏ．６１２９を添加した。該混合物を室温に徐々
に温めながら一晩撹拌した。冷却したＮａＣＱ飽和溶液
中１０％Ｎ　ａｔ　Ｃ　Ｏ　３１　Ｑを含有するフラス
コに、該反応混合物を加えた。沈殿物を濾過し、水で洗
浄し、減圧乾燥した。ｐＧｌｕ−（７−ＯＢｚ）　Ｇｌ
ｕ−（β−ＯＢｚ）Ａｓｐ−Ｓｕｂ−（５−Ｚ）Ｌｙｓ
−ＣＯＯＢｚ　（０．８３０９）を得、如何なる精製も
行わないでさらに使用した。収率：６９％。

Ｅ．　ｐＧ１ｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｓｕｂ−Ｌｙｓ−Ｃ
ＯＯＨの合成： Ｏ′Ｃで、ＨＦ５ｍ＋１２／アニソールｌ．５ｊｌｌ！
を用いて、ｐＧｌｕ−（７−ＯＢｚ）　Ｇｌｕ−（β−
ＯＢｚ）ＡＳｐ−Ｓｕｂ−＜ｅ−Ｚ）Ｌｙｓ−ＣＯＯＢ
ｚ　（０．２００９）を脱保護した。ＨＦを除去し、ベ
ブチドを二一テルと０．ＩＮ酢酸の間で分配した。水性
層を洗浄し、凍結乾燥した。ｐＧｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ
−Ｓｕｂ．−Ｌｙｓ−ＣＯＯＨ　　Ｏ．０８９９を得た
。このペプチド２０財を、アイソクラチック条件（１０
％アセトニトリル、９０％水および０．１％トリフルオ
ロ酢酸、流速５　．　６　ｍ（１／分）を用いて、Ｃ１
８ブレプ・ビアデク（ｐｒｅｐ　Ｖｙａｄｅｃ）カラム
によって精製した。ＦＡＢ質量分折：Ｍ＋Ｈ＝　１　１
　７　１．４。

アミノ酸分析：Ａｓｐ（１．０）、Ｇｌｕ（２．　１　
９）、Ｌｙｓ（１．０１）、ＳｕｂＮ．Ｄ．。ＨＰＬＣ
：Ｃｌ８ビアデク０．２３Ｘ２５ｊｌｍ分析カラムによ
る保持時間＝７．Ｏｌ分［流速Ａ＝水中０．１％ＴＦＡ
およびＢ＝アセトニトリル中０．１％ＴＦＡのＯ％〜８
０％Ｂ勾配液１．５３Ｉ１２］。

実施例３ （ｐＧ　Ｉｕ　−　Ｇ　１ｕ−Ａ　ｓｐ）ｔ　−　Ｌ　
ａｎ　−　（Ｌ　ｙｓ）ｔの製造［Ｌａｎ＝　ランチオ
ニン（ＳＣＨ．ＣＨ（ＮＨ．）ＣｏＯＨ］ べ，クマン９９０合成装置の反応容器にｔＢ　Ｏ　Ｃ　
−　Ｌｙｓ（Ｃｌ２　　Ｚ　）　　Ｃ　Ｈ　＊　Ｐ　Ａ
Ｍ（０　．　６　３＊Ｍ／ｇ）０．５９を入れた。塩化
メチレン中４０％ＴＦＡを用いて、ｔ−ＢＯＣ基を除去
した。トリフルオロ酢酸塩を１０％Ｄ　Ｉ　ＥＡ／ＣＨ
，ＣＱ，によって中和した。室温で、Ｃ　Ｈ　！　Ｃ　
Ｑ　ｔ　１　５　ｘＱおよびＤＭＦ　　’ＬｏｊＩ（ｌ
中４貢Ｍ　ＤＣＣおよびＨＯＢＴを用いて、２ｘＭ　ビ
スＢＯ’Ｃランチオニンをカップリングした。カイザー
試験を用いて、カップリングをモニターした。ＣＨ．Ｃ
ム／ＤＭＦ（１５／１０）２５ｘｆｆ中で３ｘＭ　Ｈ−
Ｌｙｓ−０−Ｂｚ−ＨＣｌ２および３ＲＭＤＣＣおよび
｝｛ＯＢＴを用いて、如何なる遊離残存カルボキシル基
をもアミド化した。

カップリング樹脂をＣＨ＊Ｃ（ｂ、３０％ＭｅＯＨ−Ｃ
Ｈ．ＣＱｔおよびＣＨｔＣｌ２ｔ（２５ｘｌ２×３）テ
広範囲に洗浄した後、標的ペプチドにおいて残存するア
ミノ酸（Ａｓｐ，　Ｇｌｕ，　ｐＧｌｕ）と一緒に脱保
護、中和およびカップリングのサイクルを繰り返した。

各カップリングに関して、４ｘＭの各アミノ酸、ＤＣＣ
およびＨＯＢＴを用いた。カイザー試験を用いて各カッ
プリングをモニターした。合戊の完了の後、樹脂を乾燥
し、計量した。

ペプチド樹脂を開裂装置に充填し、−１５℃で２時間、
フッ化水素酸（ＨＦ）１０ｘ＋２およびアニソールＩＲ
Ｑを用いて開裂した。ＨＦの除去後、樹脂をエーテルで
広範囲に洗浄し、ペプチドを水酢酸（３０１２）で抽出
した。ロータベーブでほとんどの酢酸を除去し、残留物
を水で希釈し、凍結乾燥した。ＨＰＬＣによって精製し
た後、ペプチドを得た。

実施例４ （Ｐｒｏ−Ａｓｐ−ＡＳｐ）！−Ｓｕｂ−（Ｌｙｓ）ｔ
の調製ｔ−ＢＯＣ−Ｌｙｓ（Ｃ（−Ｚ）−ＣＨｔ　Ｐａ
ｍ（０．６３１Ｍ／９）０．５９をベックマン９９０　
合戊装置の反応容器に充填した。塩化メチレン中４０％
ＴＦＡを用いて、ｔ−ＢＯＣ基を除去した。１０％Ｄ　
Ｉ　Ｅ　Ａ／Ｃ　Ｈ　，ＣＱ．によってトリフルオロ酢
酸塩を中和した。室温で、Ｃ　Ｈ　ｔ　Ｃ　Ｑ　ｔ　ｌ
　５　ｚＩ２およびＤＭＦ１０１１２中、４ｘＭＤＣＣ
およびＨＯＢＴを用いて、２１１Ｍ　ビスＢＯＣジアミ
ノスベリン酸をカップリングした。カイザー試験を用い
て、カップリングをモニターした。ＣＨｔＣｆ２，／Ｄ
ＭＦ（１５／　ｌ　Ｏ）２　５ｙｔＱ中、３ｉＭ　Ｈ−
Ｌｙｓ−０−Ｂｚ・ＨＣｌ２および３濁Ｍ　ＤＣＣおよ
びＨＯＢＴを用いて、如何なる遊離残存カルボキシル基
をもアミド化した。カップリングの後、ＣＨ．Ｃｇ２、
３０％ＭｅＯＨ−ＣＨｔＣＱ＊およびＣＨ，Ｃｃ．およ
びＣＩ｛，Ｃム（２５１ＲＸ３）で、該樹脂を広範囲に
洗浄した。標的ペプチド中の残存するアミノ酸（　Ａ　
ｓ　ｐ　ｓ　Ａ　ｓ　ｐおよびＰ　ｒｏ）と一緒に脱保
護、中和およびカップリングのサイクルを繰り返した。

各カップリングのために、４＊Ｍアミノ酸、ＤＣＣおよ
びＨＯＢＴを用いた。カイザー試験を用いて各カップリ
ングをモニターした。合戊の完了の後、樹脂を乾燥し、
計量した。

ペプチド樹脂を開裂装置に充填し、−１５℃で２時間、
フッ化水素酸（ＨＦ）ｌｏｘｆｆおよびアニソール１１
１２を用いて開裂した。ＨＦの除去後、該樹脂をエーテ
ルで広範囲に洗浄し、ベプチドを水酢酸（３０ｍ＋２）
で抽出した。ロータベープによってほとんどの酢酸を除
去し、残留物を水で希釈し、凍結乾燥した。ＨＰＬＣに
よって精製した後、ベプチドを得た。

実施例５ （ｐＧ　ｌｕ　−　Ａｓｐ　−　Ａｓｐ），　−　Ｐ　
ｉｍ−（Ｌｙｓ）ｚの調製ベックマン９９０合成装置の
反応容器にＢＯＣ−Ｌｙｓ（ＣＩ２−Ｚ）−ＣＨ，ＰＡ
Ｍ（０．６３ｉＭ／ｉＪ）０．５９を充填した。塩化メ
チレン中４０％ＴＦＡを用いてｔ−ＢＯＣ基を除去した
。１０％ＤＩＥＡ／ＣＨ．ＣＣ．によってトリフルオ口
酢酸塩を中和した。室温で、ＣＨ，ＣＱ，１５ｘｉ２お
よびＤＭＦＩＯＲ（ｌ中、４ｌＭＤＣＣおよびＨＯＢＴ
を用いて、２１１Ｍ　ビスＢＯＣビメリン酸をカップリ
ングした。

カイザー試験を用いて力，ブリングをモニターした。Ｃ
　Ｈ　＊ＣＱ−／　ＤＭ　Ｆ　（　１　５／　ｌ　Ｏ　
）　２　Ｓ　ｚＱ中、３１Ｍ　Ｈ−Ｌｙｓ−０−Ｂｚ−
ＨＣＱ，および３ｘＭＤＣＣおよびＨＯＢＴを用いて、
如何なる遊離残存カルボキシル基をもアミド化した。力
ノブリングの後、該樹脂を、ＣＨ．Ｃｌ２．、３０％Ｍ
ｅＯＨ−ＣＨ＊ＣｈおよびＣＨｔＣ＋２ｔ（２５ｘｌ２
×３）で広範囲に洗浄した。標的ペプチド中の残存する
アミノ酸（Ａｓｐ，　Ａｓｐおよびｐ−Ｇｌｕ）と一緒
に、脱保護、中和および力ｙプリングのサイクルを繰り
返した。

各カップリングのために４ｘＭアミノ酸、ＤＣＣおよび
ＨＯＢＴを用いた。カイザー試験を用いて、各カップリ
ングをモニターした。合戊が完了した後、該樹脂を乾燥
し、計量した。開裂装置にペプチド樹脂を充填し、−１
５℃で２時間、フフ化水素酸（ＨＦ）ｌｏｇ（２および
アニソールｌｘｄを用いて開裂した。ＨＦの除去の後、
該樹脂をエーテルで広範囲に洗浄し、ペプチドを氷酢酸
（３０ｄ）で抽出した。ロータベーブでほとんどの酢酸
を除去し、残留物を水で希釈し、凍結乾燥した。ＨＰＬ
Ｃによって精製した後、ペプチドを得た。

実施例６ （　Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ）＊　−　Ｐｉｇ−（Ａｒ
ｇ−ＣＯＮＨ．）ｔ空盈舅 ベックマン９９０　合成装置の反応容器にＢＯＣ−Ｔｏ
ｓ　Ａｒｇ−ＢＨＡ（０．５１Ｍ／９）０．５１Ｆを充
填した。塩化メチレン中４０％ＴＦＡを用いてＢＯＣ基
を除去した。１０％Ｄ　［　ＥＡ／ＣＨ，Ｃ（２２によ
ってトリフルオロ酢酸塩を中和した。室温で、ＣＨ．Ｃ
Ｑ２１５村およびＤＭＦ１０ｍｌ２中、２１ＭＤＣＣお
よびＨＯＢＴを用いて１＋Ｍ　ピスＢＯＣピメリン酸を
カソプリングした。カイザー試験を用いてカップリング
をモニターした。ＣＨ．Ｃｆ２．／ＤＭＦ（１　５／１
　０）２５ｘｒｌ中、３ＪＩＭＨ−Ｌｙｓ−ＯＢｚ−Ｈ
Ｃ１，および：３＋ＭＤＣＣおよびＨＯＢＴを用いて、
如何なる遊離残存カルボキシル基をもアミド化した。力
，プリングの後、該樹脂を、ＣＨ，（Ｊ．、３０％Ｍｅ
Ｏ　Ｈ　−　Ｃ　Ｈ　！Ｃ　ＱｔおよびＣＨｔＣｌ２ｔ
＜２５０×３）で広範囲に洗浄した。標的ペプチド中の
残存するアミノ酸（Ａｓｐ，　Ｇｌｕおよびｐ−Ｇｌｕ
）と一緒に脱保護、中和およびカノプリングのサイクル
を繰り返した。各カップリングのために３ｘＭアミノ酸
、ＤＣＣおよびＨＯＢＴを用いた。カイザー試験を用い
て各カイザーをモニターした。合成が完了した後、該樹
脂を乾燥し、計量した。

開裂装置にペプチド樹脂を充填し、−１５゜Ｃで２時間
、フソ化水素酸（ＨＦ）１０ｚｌ２およびアニソールｌ
Ｒｌ２を用いて開裂した。ＨＦの除去の後、該樹脂をエ
ーテルで広範囲に洗浄し、ベプチドを水酢酸（３０＊Ｃ
）で抽出した。ロータベーブでほとんどの酢酸を除去し
、残留物を水で希釈し、凍結乾燥した。ＨＰＬＣによっ
て精製した後、ペプチドを得た。

実施例７ 類似物： 手動式振盪容器にＢＯＣ−Ｌｙｓ（Ｃｌ２−Ｚ）−０一
レジン［ペニンスラ・ラブズ（Ｐｅｎｉｎｓｕｌａ　Ｌ
ａｂｓＲ）、置換０．４９ｍＭ／９］２９を充填した。

脱保護および中和の後、５０％Ｎ−メチル−２−ピロリ
ジノン（ＮＭＰ）およびジクｏ　ｏ　メ９　７（ＤＣＭ
）２　５ｘＱ中、４ｘＭ　ジシクロへキシルカルボジイ
ミド（ＤＣＣ）（８２４１９）および４１Ｍｌ−ヒドロ
キシベンゾトリアゾール・水和物（ＨＯＢＴ）（６　１
２＊ｇ）ヲ用イて２ＪＩＭ　ジーＢＯＣジアミノスベリ
ン酸（８０８Ｒ９）を樹脂にカノプリングした。反応を
一晩進行させ、次いで、１　０ｘＭ　Ｈ−Ｌｙｓ　（Ｚ
）−０Ｂｚ−ＨＣ（！（４．０６９）、ｌＱｉＭ　ジイ
ソフロビルエチルアミン（Ｄ　Ｉ　ＥＡ）（１．２９９
）、ｌＱｉＭＤＣＣ（２．０６９）およびｌＱｘＭ　Ｈ
ＯＢＴ（１．５３９）を添加した。２時間後、ＮＭＰ／
ＤＣＭ（１　：１）中１０％無水酢酸を用いて未反応ア
ミノ基をキャップした。得られたＢ　Ｏ　Ｃ　−　Ｓ　
ｕｂ　−　Ｌ　ｙｓ一樹脂の約１八を別の反応容器に移
した。樹脂を含む主たる画分を画分■と命名し、少ない
画分を画分■と命名する。標準的な脱保護、中和および
カップリングサイクルを用い、画分■において、樹脂に
ＢＯＣ−Ｔｙｒ（Ｂｒ−Ｚ）、ＢＯＣ−Ａｓｐ（ＯＢｚ
）、ＢＯＣ−Ｇｌｕ（ＯＢｚ）およびｐ−Ｇｌｕをカッ
プリングした。５ｉＭアミノ酸、ＤＣＣおよびＨＯＢＴ
を用いた。ＮＭＰ／ＤＣＭ（１／１）２５村中でカップ
リングを行い、カイザー試験を用いて完了をモニターし
た。画分Ｉにおいて、樹脂に５１ＭＢＯＣ−Ａｓｐ（Ｏ
Ｂｚ）をカップリングした。得られたＢＯＣ−Ａｓｐ−
Ｓｕｂ−Ｌｙｓ樹脂の稲を別の容器に移した（画分■）
。残存する樹脂を画分■と命名する。標準的な脱保護、
中和およびカップリングサイクルを用いて、画分■にお
いて、樹脂にＢＯＣ−Ｔｙｒ　（Ｂｒ−Ｚ）、ＢＯＣ−
Ｇｌｕ（ＯＢｚ）およびｐ−Ｇｌｕをカップリングした
。５１Ｍ　アミノ酸、ＤＣＣおよびＨＯＢＴを用いた。

ＮＭＰ／ＤＣＭ（１／１）２５ｘＱ中でカップリングを
行い、カイザー試験を用いて完了についてモニターした
。主な画分く画分■）において、樹脂に５ｘＭＢＯＣ−
Ｇ　ｌｕ（Ｏ　Ｂ　ｚ）をカップリングした。この樹脂
の１八を別の容器に移し、５ｘＭｐ−ＧｌｕをｐＧ１ｕ
−Ｇｌｕ−　Ａ　ｓｐ　−　Ｓ　ｕｂ　−　Ｌ　ｙｓ−
レジンの合成において得られたこの画分（画分■）とカ
ップリングした。５ｍＭ　ＢＯＣＴｙｒ（Ｂｒ−Ｚ）を
主な画分（画分■）にカップリングし、該樹脂をさらに
半分に分けた。

該朗脂の半分をそのまま用い、該樹脂の他の半分（画分
■）を５１Ｍ！）−Ｇｌｕとカップリングして、ｐ　−
　Ｇ　ｌｕ　−　Ｔ　ｙｒ　−　Ｇ　ｌｕ　−　Ａ　ｓ
ｐ　−　Ｓ　ｕｂ　−　Ｌ　ｙｓ−レジンを合成した。

反応計画は以下のとおりである。

これらの樹脂ペプチドを脱保護し、０゜Ｃで１時間ＨＦ
／アニソールを用いて開裂した。粗ペプチド（約１　０
　０　１９）を、水／０６１％トリフルオロ酢酸（Ｔ　
Ｆ　Ａ）、およびアセトニトリル／０．０１％ＴＦＡ緩
衝液系を用いて、Ｃ−１８ビダク２．５ＣＩＸ３０ｃｍ
調製用力ラムによって精製した。

ＦＡＢ／ＭＳ　　　　　アミノ酸分析寞（Ｍ＋Ｈ）　　
Ａｓｐ　　　Ｇｌｕ　　　ＳｕｂＬｙｓ 本かっこ内の数字は、理論比を示す。実験比はＬｙｓに
対して測定した。

実施例８ メタノール３１１Ｑを乾燥アンモニアで飽和シ、メ タノール０．５ｍ（中ＢＯＣ−システイン０．５９を添
加し、次いで、．１．３−ジブロモプロパン０．３５Ｒ
Ｑを添加した。ｌＯ分後、メタノール０．５ｘＱに入れ
たＢＯＣ−システイン０．５９をさらに添加した。４．
５時間後、溶媒を蒸発し、油状残留物を水に溶解した。

溶液のｐＨを９に調節し、溶液をエーテルで抽出した。

水性層をｐＨ２に酸性化し、酢酸エチルで抽出した。有
機層を乾燥し、蒸発し、ビスＢＯＣ−Ｓ，Ｓ−１．３−
プロパンジイルシステイン１．１２９を得た。如何なる
精製も行わないで該アミノ酸を使用した。ＦＡＢ／ＭＳ
Ｍ＋Ｈ＝４６９。

ｂ）（ｐＧｌｕＧ１ｕＡｓｐ）＊Ｐｒｃ（Ｌｙｓ）ｔの
調製手動式振盪器にＢＯＣ−Ｌｙｓ樹脂（０．５３ｇ、
置換０．６３１Ｍ／９）を充填し、脱保護および中和サ
イクルノ後、ＮＭＰ／ＤＣＭ（１／１）１　０ｘＱ中、
１１Ｍ　ＤＣＣ（２０６ｕ）およびＩｚＭＨＯＢＴ（１
５３１９）を用いて、ピスＢＯＣ−Ｓ，Ｓ’−　１．３
プロパンジイルシステイン（２９０ｍｇ、０．６１Ｍ）
をカップリングした。２時間後、該樹脂をＮＭＰおよび
ＤＣＭで洗浄し、２ｘＭ　Ｈ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−Ｏ　Ｂ
ｚ（７　６　５ｘｙ）を添加し、次いで、ＮＭＰ／ＤＣ
Ｍ（１／１）４ｊＩＱ中、１．５ＲＭ　ＤＣＣ（３９０
次９）およびｌ．５ｊ＋Ｍ　ＨＯＢＴ（２３０１９）を
添加した。

１８時間後、該樹脂をＮＭＰおよびＤＣＭ２０１（！を
用いて洗浄した。ＢＯＣ−Ａｓｐ（ＯＢｚ）、ＢＯＣ−
Ｇｌｕ（ＯＢｚ）およびｐ−Ｇｌｕのカップリングのた
めに、通常の脱保護および中和およびカップリングサイ
クルを繰り返した。ｌＲＭアミノ酸、ＤＣＣおよびＨＯ
ＢＴを用いた。Ｎ　Ｍ　Ｐ　／　Ｄ　Ｃ　Ｍ　（　１／
１）Ｆｌ２中でカップリングを行った。カイザー試験を
用いてカップリングの完了をモニターした。

得られた樹脂ペプチド（４１６ｍｔ）を脱保護し、００
Ｃで２時間、アニソール０．５１１１１２およびＨＦ８
ｘＱを用いて開裂した。ＨＦを蒸発し、ペプチド樹脂混
合物をエーテルで洗浄し、氷酢酸で抽出した。

凍結乾燥の後、粗ペプチド１３０ｘｙを得た。粗ペプチ
ド（６１．５１１９）を、アセトニトリルー水（０．１
％ＴＦＡ）緩衝液系を用いてＣ１８ピダク調製用カラム
によって精製した。純ペプチド１６．５１１９を得た。

ＦＡＢ／ＭＳ：Ｍ＋８　　１２４９．３アミノ酸分析 Ａ！Ｉｐ　２．０（２） Ｇｌｕ　　４．２８（４） Ｄｐｃ　　１．１４ Ｌｙｓ　　１．９６（２） 実施例９およびＩＯ ピスＢＯＣ−Ｓ，Ｓ’−１．３−プロパンジイルシステ
イン（　Ｐ　ｒｃ）の製造方法に従って、ビスＢＯＣ−
Ｓ，Ｓ’−１．２−エタンジイルシステイン（Ｅｔｃ）
およびビスＢＯＣ−Ｓ．Ｓ’−　１．４−ブタンジイル
システイン（　Ｂ　ｕｃ）を製造した。

（ｐＧ１ｕＧ１ｕＡｓｐ）．Ｐｒｃ（Ｌｙｓ）＊の製造
方法に従って、（ｐＧ　ｌｕＧ　１ｕＡｓｐ）＊Ｅ　ｔ
ｃ（Ｌｙｓ）ｔ３　０　ｘ９および（ｐＧ１ｕＧｌｕＡ
ｓｐ），Ｂｕｃ（Ｌｙｓ）ｔｌ　７ｉ＋９を製造した。

実施例ｌ１ （ｐＧ　ｌｕ　−　Ｇ　ｌｕ　−　ＡｓＰ）ｔｓ　ｕｂ
（Ｎ　−ＭｅＡ　ｒｇ）ｔの合或ヒドロキシメチル樹脂
０．　５９（０．　４　５ｓｅｑ／９）をＤＣＭ（５ｊ
＋Ｑ）に懸濁し、Ｑ，５ｍＭ　ＢＯＣ−ＮＭｅ　Ａｒｇ
（２　２　１　ｍｇ）、０．５ｍＭ　ジメチルアミノピ
リシン（６１ｕ）およびＱ，５ｘＭ　ＤＣＣ（１０３１
１ｇ）と反応させた。アシル化樹脂をＤＣＭ（３Ｘ）、
ＮＭＰ（３Ｘ）、およびＤＣＭ（４Ｘ）で洗浄した。

ＤＣＭ２０１１２中、フェニルイソシアナート０．５村
を用いて未反応ヒドロキシ基をキャップした。

該樹脂をＤＣＭおよびＮＭＰで完全に洗浄した。

４０％ＴＦＡ／ＤＣＭを用いてＢＯＣ基を除去した。０
．０５ｉＭ　ＤＣＭ（２０．２３！９）中ｌＯ％ＤＩＥ
Ａで中和した後、０．　１　２　５１Ｍ　ＤＣＣ（２　
５．７　１９）および０．ｌ　２５ｉＭ　ＨＯＢＴ（１
　９．Ｄ９）を用いてＢＯＣ−ｓｕｂをカップリングし
た。７２時間後、該樹脂をＮＭＰおよびＤＣＭで洗浄し
た。

ＢＯＣ−Ａｓｐ（ＯＢｚ）、ＢＯＣ−Ｇｌｕ（ＯＢｚ）
およびｐ−Ｇｌｕのカップリングのために、通常の脱保
護、中和およびカップリングサイクルを繰り返した。ｌ
ｉＭアミノ酸、ＤＣＣおよびＨＯＢＴを用いた。ＮＭＰ
／ＤＣＭ（１／ｌ）ＳＲｆｆ中でカップリングを行った
。カイザー試験を用いてカップリングの完了をモニター
した。得られた樹脂ペプチド（４８１ｙ）を脱保護し、
０℃で２時間、アニソール０．５村およびＨＦ１０ｍｌ
２を用いて開裂した。

ＨＦを蒸発させ、ベプチド樹脂混合物をエーテルで洗浄
し、氷酢酸で抽出した。凍結乾燥の後、粗ペプチドｌ２
．５Ｌ９を得た。粗ベブチド（６１９）を、アセトニト
リルー水（０．　１％ＴＦＡ）緩衝液系を用いてＣ−１
８ビダク調製用カラムによって精製した。純ペプチド２
．２Ｍ９を得た。

実施例１２ （ｐＧ１ｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ）ｔ　Ｓｕｂ（Ｈｎａ）＊
の合成ヒドロキシメチル樹脂０．　５９（０．　４　５
ｍｅｑ／９）をＤＣＭ（５１１２）に懸濁し、２，Ｎ−
ＢＯＣ−６，Ｎ−Ｚ−２．６　　ジアミノ−４−ヘキシ
ン酸（Ｈｎａ）１２　６　１９（０．　３　３　５　ｚ
Ｍ）、ジメチルアミノピリシン（ＤＭＡＰ）４０叶（０
．３３５）、ＤＣＣ６９１９（０．３３５）およびＨＯ
ＢＴ５０即（０．　３　３　５）と反応した。該アシル
化樹脂をＤＣＭ（３Ｘ）、ＮＭＰ（３×〉、およびＤＣ
Ｍ（４Ｘ）で洗浄した。ＤＣＭ２ＯＲＱ中、フェニルイ
ソシアナート０．５ＪＩｌ２を用いて、未反応のヒドロ
キシ基をキャップした。該樹脂をＤＣＭおよびＮＭＰで
完全に洗浄した。．４０％ＴＦＡ／ＤＣＭを用いてＢＯ
Ｃ基を除去した。

ＤＣＭ中１０％ＤＩＥＡで中和した後、ＢＯＣ−Ｓ　ｕ
ｂ４　４　１９＜Ｏ　．　ｌ　ｌ　ＩＭ）を、ＤＣＣ５
０ｆｆ？（０．２２１Ｍ）および１｛Ｏ　Ｂ　Ｔ　３　
３．　６ｉ＋９（０．　１　１　ｍＭ）を用いてカップ
リングした。１６時間後、該樹脂をＮＭＰおよびＤＣＭ
を用いて洗浄した。ＢＯＣＡ　ｓｐ（Ｏ　Ｂ　ｚ）、Ｂ
ＯＣ−Ｇｌｕ（ＯＢｚ）およびｐ−Ｇ　ｌｕのカップリ
ングのために通常の脱保護および中和およびカップリン
グを繰り返した。ｌ１１Ｍアミノ酸、ＤＣＣおよびＨＯ
ＢＴを用いた。ＮＭＰ／ＤＣＭ（１／１）５ｘ（２中で
カップリングを行った。カイザー試験を用いてカップリ
ングの完了をモニターした。得られた樹脂ペプチド（６
０８ｍ？）を脱保護し、０℃で２時間、アニソール０．
６ｙｔ（ｌおよびＨＦ１０ｍ（２を用いて開裂した。Ｈ
Ｆを蒸発させ、ペプチド樹脂混合物をエーテルで洗浄し
、氷酢酸で抽出した。凍結乾燥の後、粗ベプチド９３．
７解を得た。アセトニトリルー水（０．ｌ％ＴＦＡ）緩
衝液系を用いて、Ｃ−１８ビダク調製用カラムによって
粗ペプチド（２０．６ｇｙ）を精製した。純ペプチド７
．５．１９を得た。アミノ酸分析およびＦＡＢ−ＭＳに
よって構造を確認した。

ＦＡＢ／ＭＳ：　　Ｍ＋Ｈ　　１１６３アミノ酸分析 Ａｓｐ　　２．０（２） Ｇｌｕ　　４．０　１（４） Ｓｕｂ　　２．０１（１） Ｈｎａ　　１．４４（２） 実施例ｌ３ 酸の合或 アール◆ナット（Ｒ．　Ｎｕｔｔ）の方法［ジャーナル
・オブ・オーガニック・ケミストリ−（Ｊ．　Ｏｒｇ．
　Ｃｈｅｗ）４５．　３０７８，　１９８０］を用いて
、ビスーＢＯＣ　　２，５（Ｓ，Ｓ）ジアミノアジピン
酸を合成した。メタノール２４０ｍｌ２およびピリシン
８０ｊｌ７２の混合液に、ＮａＯＣＨ＊ｌ　９２１１９
およびＢＯＣ−Ａｓｐ（ＯＢｚ）５７．５６９を添加し
た。溶液をホモジニアスにして、反応混合液をＯ℃に冷
却した。プラチナ電極を用いて、電流（１００ボルト）
約１．５アンペアを反応混合液に流した。溶液の温度を
１５℃〜２５℃に維持した。出発物質の消失の後、ＴＬ
Ｃ（クロロホルム：メタノール：酢酸／９５：４：１）
を行った。５時間後、反応を停止した。ロータベープに
よって溶媒を除去した。油状の茶色の残留物を酢酸メチ
ル１５０に溶解した。該溶液を室温で１８時間放置した
。濾過によって沈殿物を除去し、濾液を蒸発させた。ビ
スＢＯＣ　　２．５　　ジアミノスベリン酸（６１．７
９）の粗ジベンジルエステルを得た。粗生成物６１ｙを
、ヘキサンを充填したシリカゲルカラムにかけた。該カ
ラムを、逐次、ヘキサン中ｌＯ％、２０％、２５％およ
び３０％酢酸エチルで溶離した。画分をＴＬＣによって
分析した。所望の生成物を含有する画分をプールし、ロ
ータベープによって溶媒を除去した。精製した生成物（
３．７８９）を真空乾燥した。ジベンジルエステル３ｇ
をメタノール１２０ｘｆｆに溶解し、１０％Ｐｄ／木炭
３７８１９を用いてパー（　Ｐ　ａｒｒ）装置中で水素
添加した。５時間で水素添加を終了した。

該溶液を濾過し、濾液をロータベーブで濃縮した。

クロロホルムで充填されたカラム上でフラッシュシリカ
ゲルクロマトグラフィーを用いて、粗ビスＢＯＣ　　２
．５−ジアミノアジピン酸を精製した。

該カラムを、逐次、９８：２：０．１、９　８　：２　
：Ｑ．５、９５：４：１、９０：８：２、８５：１０：
５および７０：２０＋１０のクロロホルム、メタノール
および酢酸で溶離した。所望の生戊物を含有する画分を
プールし、ロータベープで濃縮し、残留物を真空乾燥し
た（１．０７ｙ）。生成物の構造をＮＭＲおよび質量分
析データを用いて確認した。

ｂ）（ｐＧ１ｕＧｌｕＡｓｐ）ｔＡｄｐ（Ｌｙｓ）＊の
合成ＢＯＣ−Ｌｙｓ　（Ｃｌ２−Ｚ）−ＰＡＭ樹脂（０
．６３ｉＭ）０．５９を手動式振盪器に入れた。塩化メ
チレン中４０％ＴＦＡを用いてＢＯＣ基を除去した。

トリフルオロ酢酸塩を１０％Ｄ［　ＥＡ／ＤＣＭによっ
て中和した。２１Ｍ　ビスＢＯＣ　　２．５　　ジアミ
ノアジビン酸（　Ａ　ｄｐ）を、ＤＣＭ１５ｉ１２およ
びＮＭＰｌ５ｉ＋＆中、４ｘＭＤＣＣおよびＨＯＢＴを
用いてカノプリングした。ＤＣＭ／ＮＭＰ（１／ｌ）３
０ｆｆ＆中、３１Ｍ　Ｈ　　Ｌｙｓ（Ｚ）−０Ｂｚおよ
び３ｘＭＤｃｃおよびＨＯＢＴを用いて、如何なる遊離
カルボキシル基をもアミド化した。カップリングの後、
該樹脂をＤＣＭ，ＮＭＰで広範囲に洗浄した。標的ペプ
チド中の残存するアミノ酸（ＡＳＰ％ＧｌｕおよびｐＧ
１ｕ）と一緒に脱保護、中和およびカップリングのサイ
クルを繰り返した。各カップリングのために４１Ｍの各
アミノ酸、ＤＣＣおよびＨＯＢＴを用いた。カイザー試
験を用いて、各カソプリングの完了をモニターした。合
成が終了した後、該樹脂ペプチドを開裂装置に入れ、−
１５゜Ｃで２時間、ＨＦ１０＊Ｑおよびアニソールｌ村
を用いて開裂した。ＨＦの除去後、該樹脂をエーテルで
広範囲に洗浄し、水酢酸でペプチドを抽出した。

ロータベーブによってほとんどの酢酸を除去し、残留物
を水で希釈し、凍結乾燥した。ＨＰＬＣによる精製の後
、所望のペプチドを得た。

Claims (14)

【特許請求の範囲】
1. （１）式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） ［式中、 Ｙ＿１およびＹ＿２は、独立してＣＨ＿２またはＳであ
   り； ｘは、０、１、２、３または４であり； ｍは、０、１または２であり； ｎは、０、１または２であり； Ａは、ピログルタミン酸、プロリン、グルタミン、チロ
   シンまたはグルタミン酸であり；Ｂは、グルタミン酸、
   チロシンまたはアスパラギン酸であり； Ｃは、グルタミン酸、チロシンまたはアスパラギン酸で
   あり； Ｄは、リシン、アルギニン、チロシン、Ｎ−メチルアル
   ギニン、ジアミノヘキシン酸またはカルボキシアミドま
   たはそのヒドロキシメチル誘導体であり； Ｅは、グルタミン酸、アスパラギン酸、チロシンまたは
   ペプチド結合である。 ただし、 Ｙ＿１およびＹ＿２がＳである場合、ｘが２、３または
   ４であり、ｍおよびｎが１であるか； Ｙ＿１およびＹ＿２がＣＨ＿２である場合、ｘが０、１
   または２であり、ｍおよびｎが０であるか；Ｙ＿１がＳ
   でありかつＹ＿２がＣＨ＿２である場合、ｘが０であり
   、ｎが１であるか； Ｙ＿２がＳでありかつＹ＿１がＣＨ＿２である場合、ｘ
   が０であり、ｍが１である。］ で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。
2. （２）Ｙ＿１およびＹ＿２がＣＨ＿２である請求項（１
   ）記載の化合物。
3. （３）ｘが１または２である請求項（２）記載の化合物
   。
4. （４）Ｙ＿１がＳである請求項（１）記載の化合物。
5. （５）Ｙ＿１およびＹ＿２がＳである請求項（１）記載
   の化合物。
6. （６）Ａがピログルタミン酸であり、Ｂがグルタミン酸
   であり、Ｃがアスパラギン酸であり、Ｄがリシンであり
   、Ｅがペプチド結合である請求項（３）記載の化合物。
7. （７）（ｐＧｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ）＿２−Ｐｉｍ−（
   Ｌｙｓ）＿２である請求項（１）記載の化合物。
8. （８）（ｐＧｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ）＿２−Ｓｕｂ−（
   Ｌｙｓ）＿２である請求項（１）記載の化合物。
9. （９）（Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ）＿２Ｓｕｂ（Ｌｙｓ
   ）＿２、（ｐＧｌｕ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ）＿２Ｓ
   ｕｂ（Ｌｙｓ）＿２、（ｐＧｌｕ−Ｇｌｕ−Ｔｙｒ−Ａ
   ｓｐ）＿２Ｓｕｂ（Ｌｙｓ）＿２、（ｐＧｌｕ−Ｇｌｕ
   −Ａｓｐ−Ｔｙｒ）＿２Ｓｕｂ（Ｌｙｓ）＿２、（ｐＧ
   ｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ）＿２Ｓｕｂ（Ｎ−ＭｅＡｒｇ）
   ＿２、（ｐＧｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ）＿２Ｓｕｂ（ＨＮ
   Ａ）＿２、（ｐＧｌｕ−ＧｌｕＡｓｐ）＿２Ｐｒｃ（Ｌ
   ｙｓ）＿２、（ｐＧｌｕＧｌｕＡｓｐ）＿２Ｅｔｃ（Ｌ
   ｙｓ）＿２、（ｐＧｌｕＧｌｕＡｓｐ）＿２Ｂｕｃ（Ｌ
   ｙｓ）＿２からなる群から選択された請求項（１）記載
   の化合物。
10. （１０）薬物として使用するための請求項（１）〜（９
    ）のいずれか１つに記載の化合物。
11. （１１）請求項（１）〜（９）のいずれか１つに記載の
    化合物および医薬的に許容される担体を含有することを
    特徴とする医薬組成物。
12. （１２）ａ）保護アミノ酸をカップリングして、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、 Ｙ＿１およびＹ＿２は、独立してＣＨ＿２またはＳであ
    り： ｘは０、１、２、３または４であり； ｍは０、１または２であり； ｎは０、１または２であり； Ａは、ピログルタミン酸、プロリン、グルタミン、チロ
    シンまたはグルタミン酸であり；Ｂは、グルタミン酸、
    チロシンまたはアスパラギン酸であり； Ｃは、グルタミン酸、チロシンまたはアスパラギン酸で
    あり； Ｅは、グルタミン酸、アスパラギン酸、チロシンまたは
    ペプチド結合である。 ただし、 Ｙ＿１およびＹ＿２がＳである場合、ｘが２、３または
    ４であり、ｍおよびｎが１であるか； Ｙ＿１およびＹ＿２がＣＨ＿２である場合、ｘが０、１
    または２であり、ｍおよびｎが０であるか；Ｙ＿１がＳ
    でありかつＹ＿２がＣＨ＿２である場合、ｘが０であり
    、ｎが１であるか； Ｙ＿２でありかつＹ＿１がＣＨ＿２である場合、ｘが０
    であり、ｍが１である。 ［Ｄ′］は、クロロメチル、メチルベンズヒドリルアミ
    ン、ベンズヒドリルアミンまたはフェニルアセトアミド
    メチル樹脂であるか、あるいはＤ（リシン、アルギニン
    、チロシン、Ｎ−メチルアルギニン、ジアミノヘキシン
    酸またはカルボキシアミドまたはそのヒドロキシメチル
    誘導体）である。］ で示される適当に保護された化合物を形成し、ｂ）如何
    なる保護基をも除去し、必要に応じて、樹脂からペプチ
    ドを開裂し、そして、 ｃ）所望によって、その医薬的に許容される塩を形成す
    る ことを特徴とする請求項（１）記載の式（ I ）で示さ
    れる化合物の製造方法。
13. （１３）骨髄造血系を刺激するための薬物の製造におけ
    る請求項（１）記載の式（ I ）で示される化合物また
    はその医薬的に許容される塩の使用。
14. （１４）ウィルス性、真菌類性および細菌性感染症の治
    療用薬物の製造方法における請求項（１）記載の式（
    I ）で示される化合物またはその医薬的に許容される塩
    の使用。