JPH0358329B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は24位にエチル基又はエチリデン基を有
する植物ステリンを有効成分とする血栓症予防及
び治療剤に関する。 血栓症は、生体の血管又は心臓の腔内におい
て、血液が局所的に凝固して血栓を形成し、循環
障害を引きおこして脳卒中や心筋硬塞等の重大な
疾患の原因となる。血栓形成にあずかる因子とし
て血液の凝固性の亢進があり、血小板の増加、血
小板凝集性の上昇、諸種凝固因子の増量、抗凝固
因子及び線溶系の低下などに伴つてみとめられ
る。血栓症の予防・治療には血液の凝固性を低下
させる薬剤としてヘパリン、クマリン誘導体等が
用いられ、また近年血栓を積極的に融解して血流
の改善を計る血栓溶解剤としてプラスミノーゲン
賦活作用を有するウロキナーゼ、ストレプトキナ
ーゼ等の酵素製剤が開発されたが、抗原性、発熱
性、持続性が短い等の問題がある。 本発明者は、血栓の融解に係る線溶系の活性化
において、フイブリン可溶化の働きをするプラス
ミンは、血管内皮細胞から生成するプラスミノゲ
ン賦活物質がプラスミノゲンに作用して生成する
ことに着目し、プラスミノゲン賦活物質の生成を
促進する物質を鋭意検索した結果、或る種の植物
ステリンの存在下で多量のプラスミノゲン賦活物
質が血管内皮細胞から放出されることを見い出
し、本発明をなした。 本発明の24位にエチル基又はエチリデン基を有
する植物ステリンとしては、 式 の基本構造を有するステリンにおいて、次表の構
造式を有する化合物があげられる。 【表】 【表】 これら化合物のエステル、例えばアセテート、
ベンゾエート、脂肪酸エステルも使用できる。上
記植物ステリンは公知であり、大豆、小麦、綿
実、褐藻等に広く含まれており、植物油脂をケン
化して、不ケン化物から通常の方法で分離、精製
することにより得られる。 本発明の血栓症予防及び治療剤は、植物ステリ
ンを単独又は医薬上許容される担体と配合して経
口又は非経口用の製剤として投与される。経口用
製剤には、散剤、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、液
剤、乳剤、シロツプ剤が含まれる。また非経口用
製剤には、注射剤、点滴剤、座剤等が例示でき
る。用いうる賦形剤としては、例えば水、エタノ
ール、乳糖、でんぷん、デキストリン、燐酸カル
シウム、炭酸カルシウム、珪酸アルミニウム、酸
化マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、乾
燥水酸化アルミニウム等が用いられる。 投与量は、患者の年令、病状等により異なる
が、注射用製剤の場合には有効成分として成人に
10〜500mg／日、好ましくは50〜250mg／日が用い
られる。 以下に本発明の試験例を示し、説明する。 試験例 １ 新鮮な牛頚動脈をと殺場から得、頚動脈を切開
して内皮細胞層をけずりとる方法で内皮細胞を得
た。この血管内皮細胞を牛胎児の血清を10％、ス
トレプトマイシン（50ｍcg／ml）及びペニシリ
ン（50単位／ml）を添加したイーグルの最小必須
培地を入れたペトリー皿内で、37℃で、５％CO₂
恒温槽中で培養した。この培養内皮細胞を、上記
と同じ培地にエタノールに溶かした所定量の植物
ステリンを添加した培地（エタノール最終濃度１
％）で、ペトリー皿中で１世代培養した。培養
後、培地を除き、内皮細胞を血清を含まないイー
グルの最小必須培地で洗い、次いで血清を含まな
い同じ培地で37℃６時間培養して、内皮細胞から
遊離させたプラスミノーゲン賦活物質を含む検体
液を調製し、−20℃で保存した。 この検体液のプラスミノーゲン賦活活性を測定
するためのフイブリン懸濁液は次のようにして製
造した。0.1mlの30μMフイブリン単量体溶液をPH
5.3の1M NaBr−0.05M酢酸緩衝液中に溶かし、
フイブリン塊を形成させるため、２mlの100ｇ／
のアラビアゴム、３mlの0.5Mイミダゾール緩
衝液（PH7.5）及び25mlの５ｍＭリン酸−0.15M
NaCl緩衝液（PH7.5）の混合液を加えた。この液
を20KHzで30分超音波処理して微細粒子のフイブ
リン懸濁液を製造し、４℃で保存した。 プラスミノーゲン賦活活性は次の方法により測
定した。上記により製造した700μのフイブリ
ン懸濁液と100μの0.7ユニツトのプラスミノゲ
ンの混液に、前記の内皮細胞検体液200μを加
え、37℃で保温し、フイブリン懸濁液の濁度の減
少を比濁計で測定した。標準曲線は検体液の代り
に0.005−0.08ユニツトのウロキナーゼを用いた
以外は同様にして20％濁度が減少する値から作成
した。検体液中のプラスミノゲン賦活活性は、20
％濁度が減少する値を標準曲線と比較し、10⁷内
皮細胞当りのウロキナーゼ換算ユニツトで示し
た。 シトステリン又はフイコステリン25μMを添加
して培養した内皮細胞を２時間、４時間及び６時
間培養して得られた検体液のプラスミノーゲン賦
活活性は第１表に示すとおりである。 【表】 第１表から、シトステリン又はフイコステリン
を添加して培養した内皮細胞からは培養時間の増
加と共に顕著な量のプラスミノーゲン賦活物質が
放出されたが、同時に試験したコレステリン及び
５−アンドロステン−3β−オールを添加して培
養した内皮細胞からはプラスミノーゲン賦活物質
の放出は認められなかつた。 次に、シトステリンの添加量を変えて培養した
内皮細胞を６時間培養して得られた検体液のプラ
スミノーゲン賦活活性は第２表に示すとおりであ
る。 【表】 第２表から、シトステリンを20μM以上添加し
て培養した内皮細胞では、プラスミノゲン賦活活
性が増加し、50μM以上の高濃度では無添加の約
10倍の高レベルで一定値を示した。 試験例 ２ シトステリン10mgをDMF40μに溶かし、これ
に0.8mlの生理食塩水を加えた後、超音波処理を
して懸濁液を調製した。この懸濁液0.8mlを体重
約３Kgの雌うさぎの耳静脈に注射した。経時的に
２mlずつの血液を耳静脈より採り、血清中のフイ
ブリノゲン量とはフイブリン分解産物である
FDP量を、それぞれ分光学的方法（Clim.Chem.、
24、351、1978）及び市販FDPキツトを用いて定
量した。その結果を第３表に示す。 【表】 第３表から、シトステリン投与後の血中フイブ
リノゲン量は時間の経過と共に減少し、一方
FDP量は逆に増加し、両者は逆の相関が成立し
た。即ち、６時間後には、血中のフイブリノゲン
量は平常時から約20％減少し、FDP量は平常時
の８倍の12.8μｇ／mlの高い値を示した。そして
６時間以後は上述のレベルから徐々に減少し、約
72時間後には元のレベルに戻つた。 上記試験例から明らかなように、本発明の血栓
症予防及び治療剤は、血管内皮細胞を刺激してプ
ラスミノゲン賦活物質を生産させ、これを細胞外
に放出して線溶系を活性化することによつて、血
栓の形成を予防又はフイブリン塊の融解を促進し
て治療する効果が顕著であり、従来の酵素製剤と
比べて抗原性の恐れもなく、かつ効果が長時間持
続する点で優れている。 実施例 １ シトステリン100mgをエタノール３mlに溶解し、
アンプルに注入、滅菌して注射剤を得る。本剤は
使用時リドカイン0.3％注射液と混用して投与す
る。 実施例 ２ フイコステリン20部、乳糖2.5部及びCMC−
Na1部を混合し、PVA溶液を加えて頚粒を製造
し、これにステアリン酸マグネシウム少量を加え
て打錠し、１錠中にフイコステリン50mgを含む錠
剤を得る。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 24位にエチル基又はエチリデン基を有する植
   物ステリンを有効成分とする血栓症予防及び治療
   剤。