JPH0717504B2

JPH0717504B2 - 血栓症予防及び治療用組成物

Info

Publication number: JPH0717504B2
Application number: JP4694486A
Authority: JP
Inventors: 祐二稲田
Original assignee: 美浜久春
Priority date: 1985-03-09
Filing date: 1986-03-04
Publication date: 1995-03-01
Anticipated expiration: 2010-03-01
Also published as: JPS6213A

Description

【発明の詳細な説明】本発明は、ビタミンＡ又はそのエステルとビタミンＣを
有効成分とする血栓症予防および治療用組成物に関す
る。

脳血管疾患及び心疾患、例えば脳出血、脳血栓、脳硬
塞、心不全及び心筋硬塞は、血液凝固、線溶系の低下に
よる血栓の形成と深い係りがある。従来、これらの血栓
症の予防及び治療には、凝固系を抑制させる薬剤として
ヘパリン、クマリン誘導体が用いられ、線溶系を抗進さ
せる薬剤としてウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ等の
酵素製剤が開発されているが、抗原性、発熱性、持続性
が短い等の問題がある。

本発明者は、血栓を構成するフイブリンを溶解するプラ
スミンは、血管内皮細胞から生成するプラスミノゲン賦
活物質がプラスミノゲンに作用して生成することに着目
し、プラスミノゲン賦活物質の生成を促進する物質を探
索した結果、ビタミンＡ又はそのエステルとビタミンＣ
とを併用すると、両者の相剰作用により多量のプラスミ
ノゲン賦活物質が血管内皮細胞から放出されることを見
い出し、本発明をなした。

ビタミンＡ（レチノール）は夜盲症等の、またビタミン
Ｃ（Ｌ−アスコルビン酸）は壊血病等の医薬として用い
られているが、血栓症の予防・治療効果については知ら
れていない。

ビタミンＡのエステルとしては、アセテート、ラウレー
ト、パルミテート、ステアレート等があげられるが、C
₁₂〜C₁₈の飽和脂肪酸とのエステルが好ましい。

本発明の血栓症予防及び治療剤は、ビタミンＡ又はその
エステルとビタミンＣをそれ自体又は医薬上許容される
担体と配合して経口又は非経口用の製剤として投与され
る。経口用製剤には、散剤、錠剤、顆粒剤、カプセル
剤、液剤、乳剤、シロツプ剤が含まれる。また非経口用
製剤には、注射剤、点滴剤、座剤等が例示できる。用い
うる賦形剤としては、例えば水、エタノール、乳糖、で
んぷん、デキストリン、燐酸カルシウム、炭酸カルシウ
ム、珪酸アルミニウム、酸化マグネシウム、ステアリン
酸マグネシウム、乾燥水酸化アルミニウム等が用いられ
る。

投与量は、患者の年令、病状等により異なるが、成人に
ビタミンＡとして１万〜10万IU/日及びビタミンC50〜10
00mg/日が用いられる。

以下に本発明の試験例を示し、説明する。

試験例１新鮮な牛頸動脈をと殺場から得、頸動脈を切開して内皮
細胞層をけずりとる方法で内皮細胞を得た。この血管内
皮細胞を、牛胎児血清を10％、ストレプトマイシン（50
mg/ml）及びペニシリン（50単位/ml）を添加したイーグ
ルの最小必須培地を入れたペトリ皿内で37℃で５％CO₂
恒温槽中で培養した。この培養内皮細胞を、上記と同じ
培地にエタノールに溶かした所定量のビタミンＡ及びビ
タミンＣを添加した培地で、ペトリ皿中で一世代培養し
た。培養後、培地を除き、内皮細胞を血清を含まないイ
ーグルの最小必須培地で洗い、次いで血清を含まない同
じ培地で37℃で８時間孵置して、内皮細胞から遊離され
たプラスミノゲン賦活物質を含む内皮細胞検体液を調製
し、−20℃で保存した。

この検体液のプラスミノゲン賦活活性を測定するための
フイブリン懸濁液は次のようにして製造した。0.1mlの3
0μＭフイブリン単量体溶液をpH5.3の1M臭化ナトリウム
−0.05M酢酸緩衝液中に溶かし、フイブリン塊を形成さ
せるため、2mlの100g/lのアラビアゴム、3mlの0.5Mイミ
ダゾール緩衝液（pH7.5）及び25mlの5mMリン酸−0.15M
Nacl緩衝液（pH7.5）の混合液を加えた。この液を20kHz
で30分超音波処理して微細粒子のフイブリン懸濁液を製
造し、４℃で保存した。

プラスミノゲン賦活活性は次の方法により測定した。上
記により製造した700μｌのフイブリン懸濁液と100μｌ
の0.7単位のプラスミノゲンの混液に、前記の内皮細胞
検体液200μｌを加え、37℃で保温し、フイブリン懸濁
液の濁度の減少を比濁計で測定した。標準曲線は、検体
液の代りに0.005-0.08単位のウロキナーゼを用いた以外
は同様にして20％濁度が減少する値から作成した。検体
液中のプラスミノゲン賦活活性は、20％濁度が減少する
値を標準曲線と比較し、10⁸内皮細胞当りのウロキナー
ゼ換算単位で示した。

ビタミンＡ及びビタミンＣをそれぞれ単独で、あるいは
同時に添加して培養した内皮細胞を、８時間孵置して得
られた検体液のプラスミノゲン賦活活性は、第１表に示
すとおりである。

ビタミンＡのみをその添加量を変えて培養した場合、ビ
タミンＡの添加量を増加させるとプラスミノゲン賦活活
性が増加し、10μＭ以上の高濃度では無添加の約10倍の
高レベルで一定値を示した。

一方、ビタミンＣのみをその添加量を変えて培養した場
合、ビタミンＣ約100μＭ以上の添加により、プラスミ
ノゲン賦活物質の放出量は、無添加の約２倍のレベルで
一定値を示した。

しかるに、ビタミンＡとビタミンＣとを同時に添加した
場合、まずビタミンＣの添加量を50μＭに固定し、ビタ
ミンＡの量を変えて培養した場合、ビタミンＡの添加量
を増加させるとプラスミノゲン賦活活性はそれに伴い増
加し、ビタミンA10μＭとビタミンC50μＭを併用した場
合では、ビタミンC50μＭのみ添加した場合の約15倍、
また無添加の場合の約25倍という非常に高い活性値を示
した。

また、ビタミンＡの添加量を10μＭに固定しビタミンＣ
の量を変えて培養した場合、ビタミンＣの添加量を増加
させると、プラスミノゲン賦活活性はそれに伴ない増加
し、ビタミンA10μＭとビタミンC150μＭを併用した場
合では、ビタミンA10μＭのみを添加した場合の約４
倍、また無添加の場合の約33倍と、プラスミノゲン賦活
物質の放出量は飛躍的に増大した。

また、ビタミンＡパルミテート10μＭとビタミンC150
μＭとの併用についても同様に試験し、第２表に示すよ
うにプラスミノーゲン賦活物質の放出量は大巾に増加し
た。

上記試験例１から、ビタミンＡ又はそのエステルとビタ
ミンＣの併用は明らかに相剰効果を示し、プラスミノゲ
ン賦活物質を多量に放出することがわかる。

試験例２ビタミンA1000IU及びビタミンC30mgを含むエタノール１
％溶液1mlを体重約3kgの雌うさぎの耳静脈に注射した。
経時的に2mlずつの血液を耳静脈より採り、血清中のフ
イブリノゲン量とフイブリン分解産物であるFDP量を、
それぞれ分光学的方法（Clim.Chem.,24,351,1978）及び
市販FDPキツトを用いて定量した。その結果、血中フイ
ブリノゲン量は時間の経過と共に減少し、一方FDP量は
逆に増加し、両者は逆の相関が成立した。即ち、６時間
後には、血中のフイブリノゲン量は平常時から約30％減
少し、FDP量は平常時の10倍の15μg/mlの高い値を示し
た。

上記試験例から明らかなように、本発明の血栓症予防及
び治療剤は、血管内皮細胞を刺激してプラスミノゲン賦
活物質を生産させ、これを細胞外に放出して線溶系を活
性化することによつて、血栓の形成を予防又はフイブリ
ン塊の融解を促進して治療する効果が顕著であり、従来
の酵素製剤と比べて抗原性の恐れもなく優れている。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ビタミンＡ又はそのエステルとビタミンＣ
を有効成分とする血栓症予防及び治療用組成物。