JPH0360463B2 - - Google Patents
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- JPH0360463B2 JPH0360463B2 JP62269295A JP26929587A JPH0360463B2 JP H0360463 B2 JPH0360463 B2 JP H0360463B2 JP 62269295 A JP62269295 A JP 62269295A JP 26929587 A JP26929587 A JP 26929587A JP H0360463 B2 JPH0360463 B2 JP H0360463B2
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- culture
- rotifers
- chlorella
- day
- culture solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
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-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
- Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish
Landscapes
- Farming Of Fish And Shellfish (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、仔魚の餌として有用なシオミズツボ
ワムシを培養する方法に関するものである。
ワムシを培養する方法に関するものである。
近年、水産養殖業における天然種苗の確保が
年々難しくなつたため人口種苗の増産が求められ
ており、それにつれて種苗用餌料の需要も増大し
ている。餌料のなかでも仔魚のための初期餌料
は、適当なものがきわめて限られているから、良
質のものの安定供給に対する要望が強い。
年々難しくなつたため人口種苗の増産が求められ
ており、それにつれて種苗用餌料の需要も増大し
ている。餌料のなかでも仔魚のための初期餌料
は、適当なものがきわめて限られているから、良
質のものの安定供給に対する要望が強い。
初期餌料としてよく利用されるシオミズツボワ
ムシ（以下、ワムシという）は、従来、解放状態
の大型水槽で酵母やクロレラを餌にして培養され
てきた。しかしながら、このような従来の培養方
法においては、ワムシのほかに酵母やクロレラを
捕食する原生動物も繁殖するため餌の利用効率が
悪く、しかも、有害微生物が繁殖してワムシの安
定した増殖を阻害することが多いという問題があ
つた。このため、従来の培養法においては、到達
可能なワムシの最高培養密度はせいぜい100〜200
個体／ml培養液であり、飼育効率が悪かつた。加
えて、微生物汚染が生じ易い従来の培養法は、病
原微生物がワムシを経由して魚の病気を引き起こ
すことがあるという問題があつた。
ムシ（以下、ワムシという）は、従来、解放状態
の大型水槽で酵母やクロレラを餌にして培養され
てきた。しかしながら、このような従来の培養方
法においては、ワムシのほかに酵母やクロレラを
捕食する原生動物も繁殖するため餌の利用効率が
悪く、しかも、有害微生物が繁殖してワムシの安
定した増殖を阻害することが多いという問題があ
つた。このため、従来の培養法においては、到達
可能なワムシの最高培養密度はせいぜい100〜200
個体／ml培養液であり、飼育効率が悪かつた。加
えて、微生物汚染が生じ易い従来の培養法は、病
原微生物がワムシを経由して魚の病気を引き起こ
すことがあるという問題があつた。
微生物や原生動物による汚染の問題は、培養液
や餌をすべて無菌の状態に管理すれば解消するこ
とができ、その可能性は、昭和51年度春季水産学
会講演要旨集（講演番号214）に報告されている。
しかしながら、この無菌培養法も、無菌にするこ
とによるコスト上昇を吸収し得るほど餌の利用効
率向上による餌代低減はなく、また培養可能なワ
ムシ密度も、この種の生物に特有の、環境変化に
対する敏感さが障害になつて、無菌にするだけで
はほとんど改善されない。したがつて、この方法
によつても、利用し易い低廉な価格でワムシを提
供することは不可能であつた。
や餌をすべて無菌の状態に管理すれば解消するこ
とができ、その可能性は、昭和51年度春季水産学
会講演要旨集（講演番号214）に報告されている。
しかしながら、この無菌培養法も、無菌にするこ
とによるコスト上昇を吸収し得るほど餌の利用効
率向上による餌代低減はなく、また培養可能なワ
ムシ密度も、この種の生物に特有の、環境変化に
対する敏感さが障害になつて、無菌にするだけで
はほとんど改善されない。したがつて、この方法
によつても、利用し易い低廉な価格でワムシを提
供することは不可能であつた。
本発明の目的は、初期餌料としてのワムシの培
養における上述のような問題点を解決し、良質の
ワムシを安価に培養し得る方法を提供することに
ある。
養における上述のような問題点を解決し、良質の
ワムシを安価に培養し得る方法を提供することに
ある。
上記目的を達成することに成功した本発明のワ
ムシ培養法は、餌として無菌のクロレラを用いる
無菌培養法を採用し、そのさい、少なくとも
1.0／日の比増殖速度を維持するのに必要な量の
クロレラを上記比増殖速度を維持するのに必要な
培養液中密度で投与することにより上記比増殖速
度以上の比増殖速度でワムシをその個体数が
2000／ml培養液以上になるまで増殖させ、その
後、培養液よりワムシを採取することを特徴とす
るものである。
ムシ培養法は、餌として無菌のクロレラを用いる
無菌培養法を採用し、そのさい、少なくとも
1.0／日の比増殖速度を維持するのに必要な量の
クロレラを上記比増殖速度を維持するのに必要な
培養液中密度で投与することにより上記比増殖速
度以上の比増殖速度でワムシをその個体数が
2000／ml培養液以上になるまで増殖させ、その
後、培養液よりワムシを採取することを特徴とす
るものである。
ここで比増殖速度とは、培養中のワムシの増殖
速度の指標であつて、24時間経過する間のワムシ
密度の増加から次式により計算される値である。
速度の指標であつて、24時間経過する間のワムシ
密度の増加から次式により計算される値である。
比増殖速度〔／日〕＝2.30×（logX2−logX1）
ただし、式中X1は任意に選ばれた基準時点に
おけるワムシ密度、X2は基準時点から24時間後
のワムシ密度である。
おけるワムシ密度、X2は基準時点から24時間後
のワムシ密度である。
この方法において、餌とする無菌のクロレラ
は、たとえばAgr.Biol.Chem.、38（１）、９〜18
（1974）に記載されているタンク培養法により容
易に得ることができる。クロレラには海産のもの
と淡水産のものとがあるが、本発明においてはそ
れらのいずれを用いてもよい。本発明が目的とす
る高密度培養は、餌としてクロレラを用いること
により初めて可能になるが、クロレラの一部（多
くても半分量以下）は、他の餌たとえば酵母で代
替することができる。酵母を併用する場合におけ
る酵母としては、毒性を有しないものであればい
ずれの属に属するものでも使用できるが、通常
は、パン酵母（Saccharomyces cerevisie）が、
入手も容易であり好ましい。クロレラや酵母は、
生きているもののほうが、ワムシによく摂取され
また培養液を汚染しにくいので好ましいが、一部
は、死んだものであつてもよい。
は、たとえばAgr.Biol.Chem.、38（１）、９〜18
（1974）に記載されているタンク培養法により容
易に得ることができる。クロレラには海産のもの
と淡水産のものとがあるが、本発明においてはそ
れらのいずれを用いてもよい。本発明が目的とす
る高密度培養は、餌としてクロレラを用いること
により初めて可能になるが、クロレラの一部（多
くても半分量以下）は、他の餌たとえば酵母で代
替することができる。酵母を併用する場合におけ
る酵母としては、毒性を有しないものであればい
ずれの属に属するものでも使用できるが、通常
は、パン酵母（Saccharomyces cerevisie）が、
入手も容易であり好ましい。クロレラや酵母は、
生きているもののほうが、ワムシによく摂取され
また培養液を汚染しにくいので好ましいが、一部
は、死んだものであつてもよい。
培養に用いる培養液は、常法により滅菌してお
くことを除けば、特殊なものである必要はなく、
たとえば人工海水をベースとする次のような組成
のものを使用することができる。
くことを除けば、特殊なものである必要はなく、
たとえば人工海水をベースとする次のような組成
のものを使用することができる。
NaCl 10〜25ｇ／
MgCl2・6H2O 0.5〜３ｇ／
CaCl2・2H2O 0.1〜0.3ｇ／
ビタミンB12 10〜20μｇ／
温 度 25〜35℃
PH 6.5〜7.5
無菌培養液で無菌的に培養するワムシは、最
初、無菌処理した卵の形で培養液に導入する。卵
を無菌化するには、卵を洗剤水溶液で洗つた後、
次亜塩素酸ソーダ、抗生物質等で処理する。
初、無菌処理した卵の形で培養液に導入する。卵
を無菌化するには、卵を洗剤水溶液で洗つた後、
次亜塩素酸ソーダ、抗生物質等で処理する。
培養液に最初投入するワムシの卵の量に制限は
ない。しかしながら、ワムシの卵は無制限に採取
できるものではないから、一般的には、10〜50
個／ml培養液程度とし、培養槽内での増殖により
個体数を増やすのが有利である。
ない。しかしながら、ワムシの卵は無制限に採取
できるものではないから、一般的には、10〜50
個／ml培養液程度とし、培養槽内での増殖により
個体数を増やすのが有利である。
培養液には、培養中、除菌処理した空気または
酸素を0.05〜0.1VVM（Volume培養液・min.）程
度通して酸素を補給する。
酸素を0.05〜0.1VVM（Volume培養液・min.）程
度通して酸素を補給する。
無菌的に行う本発明の培養法は、他の微生物等
の増殖を抑える観点からの温度、PH、酸素量等の
調整は不要であり、培養条件をワムシの増殖に最
適のものとすることができる。
の増殖を抑える観点からの温度、PH、酸素量等の
調整は不要であり、培養条件をワムシの増殖に最
適のものとすることができる。
本発明の培養法が従来の無菌培養法と比べて特
に異なる点は、培養開始後の、前述のような培養
管理方法にあり、それは、本発明者らによる次の
ような新規な知見に基づくものである。
に異なる点は、培養開始後の、前述のような培養
管理方法にあり、それは、本発明者らによる次の
ような新規な知見に基づくものである。
すなわち、ワムシを高密度で培養しようとする
場合においては、培養液中に存在する餌のクロレ
ラの量がワムシの増殖に大きな影響を及ぼす。ク
ロレラの量がおよそ（0.5〜1.0）×107個／ml培養
液の水準に維持されるとき、ワムシは活発に増殖
し、ワムシ密度は指数関数的に増加し続けるが、
クロレラがそれより多くても少なくても、ワムシ
は増殖をほとんど停止し、成育するだけとなる。
増殖が進むとワムシの個体数の増加に比例してク
ロレラ摂取量は増加するから、引き続き増殖させ
るためには単位時間当りのクロレラ投与量を増や
す必要があるが、クロレラの上記好適密度は維持
されなければならない。一旦増殖が停滞した培養
は、その後に給餌条件を改善しても好結果を与え
ない。
場合においては、培養液中に存在する餌のクロレ
ラの量がワムシの増殖に大きな影響を及ぼす。ク
ロレラの量がおよそ（0.5〜1.0）×107個／ml培養
液の水準に維持されるとき、ワムシは活発に増殖
し、ワムシ密度は指数関数的に増加し続けるが、
クロレラがそれより多くても少なくても、ワムシ
は増殖をほとんど停止し、成育するだけとなる。
増殖が進むとワムシの個体数の増加に比例してク
ロレラ摂取量は増加するから、引き続き増殖させ
るためには単位時間当りのクロレラ投与量を増や
す必要があるが、クロレラの上記好適密度は維持
されなければならない。一旦増殖が停滞した培養
は、その後に給餌条件を改善しても好結果を与え
ない。
本発明においては、上記知見に基づき比増殖速
度を少なくとも1.0／日、好ましくは1.3／日以上
に保ち得る給餌条件を採用して短時日に2000個
体／ml培養液以上のワムシ密度に到達させる。そ
のために必要な具体的給餌条件は、投与するクロ
レラの種類や培養液の状態によつても多少異なる
が、典型的には、培養液中のクロレラ密度が常に
約1.0×107個／ml培養液をこえないようにしなが
ら、１日あたりワムシ個体数の約１万倍〜約２万
倍の細胞数のクロレラを分割投与する（したがつ
て、１回の投与量を制限し、ワムシ密度の増加に
応じて投与頻度を高くすることになる。）。
度を少なくとも1.0／日、好ましくは1.3／日以上
に保ち得る給餌条件を採用して短時日に2000個
体／ml培養液以上のワムシ密度に到達させる。そ
のために必要な具体的給餌条件は、投与するクロ
レラの種類や培養液の状態によつても多少異なる
が、典型的には、培養液中のクロレラ密度が常に
約1.0×107個／ml培養液をこえないようにしなが
ら、１日あたりワムシ個体数の約１万倍〜約２万
倍の細胞数のクロレラを分割投与する（したがつ
て、１回の投与量を制限し、ワムシ密度の増加に
応じて投与頻度を高くすることになる。）。
上述のようなクロレラ投与条件を維持した場
合、ワムシ密度が約4000個体／ml培養液になるま
では、上記好適比増殖速度を維持するのは容易で
ある。それ以上の高密度領域では、最適給餌条件
を維持しても比増殖速度の低下が避けられない
が、それでも、最高約１万個体／ml培養液に達す
るまで、ワムシの増殖を続けさせることができ
る。
合、ワムシ密度が約4000個体／ml培養液になるま
では、上記好適比増殖速度を維持するのは容易で
ある。それ以上の高密度領域では、最適給餌条件
を維持しても比増殖速度の低下が避けられない
が、それでも、最高約１万個体／ml培養液に達す
るまで、ワムシの増殖を続けさせることができ
る。
ワムシ密度が2000個体／ml培養液以上になつた
後、適当な段階で培養を打ち切り、プランクトン
ネツト等を用いてワムシを収穫する。培養を打ち
切る時期は任意であるが、本発明の培養法の特長
を十分生かすには、約3000〜5000個体／ml培養液
またはそれ以上になるまで増殖させることが望ま
しい。
後、適当な段階で培養を打ち切り、プランクトン
ネツト等を用いてワムシを収穫する。培養を打ち
切る時期は任意であるが、本発明の培養法の特長
を十分生かすには、約3000〜5000個体／ml培養液
またはそれ以上になるまで増殖させることが望ま
しい。
以下、実施例を示して本発明を説明する。
実施例 １
ワムシの複相単性生殖卵（amictic egg）を下
記の方法で無菌化処理した後、下記条件の20培
養槽で孵化させ、引き続き培養した。
記の方法で無菌化処理した後、下記条件の20培
養槽で孵化させ、引き続き培養した。
無菌化処理：複相単性生殖卵を0.1％中性洗剤水
溶液で洗浄した後、0.02％のNaClO水溶液に入
れ、直ちに人工海水中に移し、洗浄した。その
後、抗生物質（ストレプトマイシン、ペニシリ
ン）に18時間浸漬後、再び人工海水で洗浄し
た。
溶液で洗浄した後、0.02％のNaClO水溶液に入
れ、直ちに人工海水中に移し、洗浄した。その
後、抗生物質（ストレプトマイシン、ペニシリ
ン）に18時間浸漬後、再び人工海水で洗浄し
た。
培養液：
NaCl 15.0ｇ／
MgCl2・6H2O 1.0ｇ／
CaCl2・2H2O 0.15ｇ／
ビタミンB12 10μｇ／
PH 6.5
温 度 30℃
通気量：0.05VVM
餌：無菌培養した淡水産クロレラ（クロレラ・レ
ギユラリスＳ−50、生きているもの） 給餌方法：１回のクロレラ投与量（細胞数）を、
培養液１mlにつき１×107個とする。ただし、
培養開始日は0.5×107個／mlとした。また、１
日あたりのクロレラ投与量を、培養開始後のワ
ムシ密度の上昇に応じて次のとおりとした。培養開始後日数 分割投与回数 投与量／日 初 日 １回 0.5×107個 ２日目 １回 １×107個 ３日目 ２回 ２×107個 ４日目 ４回 ４×107個 ５日目 ６回 ６×107個 ６日目 ６回 ６×107個 上記投与方法を採用した場合、培養液中のクロ
レラ密度は最大でも1.0×107個／ml培養液を越え
ない。比較例として、１回のクロレラ投与量を制
限せず、ワムシ密度の上昇に応じて上記１日当た
りのクロレラ投与量を１日１回にまとめて投与す
る実験および１日当たりのクロレラ投与量を0.5
×107個以上にはしない実験も行なつた。
ギユラリスＳ−50、生きているもの） 給餌方法：１回のクロレラ投与量（細胞数）を、
培養液１mlにつき１×107個とする。ただし、
培養開始日は0.5×107個／mlとした。また、１
日あたりのクロレラ投与量を、培養開始後のワ
ムシ密度の上昇に応じて次のとおりとした。培養開始後日数 分割投与回数 投与量／日 初 日 １回 0.5×107個 ２日目 １回 １×107個 ３日目 ２回 ２×107個 ４日目 ４回 ４×107個 ５日目 ６回 ６×107個 ６日目 ６回 ６×107個 上記投与方法を採用した場合、培養液中のクロ
レラ密度は最大でも1.0×107個／ml培養液を越え
ない。比較例として、１回のクロレラ投与量を制
限せず、ワムシ密度の上昇に応じて上記１日当た
りのクロレラ投与量を１日１回にまとめて投与す
る実験および１日当たりのクロレラ投与量を0.5
×107個以上にはしない実験も行なつた。
培養経過を第１図に示す。図中、矢印はクロレ
ラの投与時期を示す。また、破線で示した部分は
比較実験の経過を示し、数字はクロレラ投与量を
標準１回投与量（１×107個）に対する倍数で示
したものである。
ラの投与時期を示す。また、破線で示した部分は
比較実験の経過を示し、数字はクロレラ投与量を
標準１回投与量（１×107個）に対する倍数で示
したものである。
この培養におけるワムシの比増殖速度は培養３
日目まで1.3〜1.5／日のほぼ一定値に維持され、
培養３日目におけるワムシ密度は3800個体／ml培
養液であつた。一方、必要な比増殖速度を維持で
きなかつた比較例の場合、ワムシ密度は培養５日
目においても1000個体／ml培養液にとどまつた。
日目まで1.3〜1.5／日のほぼ一定値に維持され、
培養３日目におけるワムシ密度は3800個体／ml培
養液であつた。一方、必要な比増殖速度を維持で
きなかつた比較例の場合、ワムシ密度は培養５日
目においても1000個体／ml培養液にとどまつた。
上述のように、本発明のワムシ培養法はクロレ
ラを餌とする無菌培養法において給餌方法に着目
した独特の培養管理法を採用してワムシの指数関
数的増殖を続けさせ、それにより、従来の培養で
は到底考えられなかつたような高密度培養を短時
日で達成するものである。
ラを餌とする無菌培養法において給餌方法に着目
した独特の培養管理法を採用してワムシの指数関
数的増殖を続けさせ、それにより、従来の培養で
は到底考えられなかつたような高密度培養を短時
日で達成するものである。
したがつて、本発明によれば、餌であるクロレ
ラや培養装置の利用効率がよくなるだけでなく、
培養液からのワムシの採取も簡単になることによ
り、安価なワムシの大量生産が可能になる。ま
た、短期間にきわめて高い密度までワムシを増殖
させてしまうことにより、かりに微生物汚染の機
会があつても大事には至らずにすむという利点も
ある。したがつて本発明は、仔魚の初期餌料とし
て従来よりも良質のワムシを従来よりも安価に且
つ大量に利用することを可能にし、水産養殖業の
発展に貢献するところきわめて大なものである。
ラや培養装置の利用効率がよくなるだけでなく、
培養液からのワムシの採取も簡単になることによ
り、安価なワムシの大量生産が可能になる。ま
た、短期間にきわめて高い密度までワムシを増殖
させてしまうことにより、かりに微生物汚染の機
会があつても大事には至らずにすむという利点も
ある。したがつて本発明は、仔魚の初期餌料とし
て従来よりも良質のワムシを従来よりも安価に且
つ大量に利用することを可能にし、水産養殖業の
発展に貢献するところきわめて大なものである。
第１図は本発明の実施例における培養経過を示
すグラフである。
すグラフである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 餌として無菌のクロレラを用いる無菌培養法
を採用し、そのさい少なくとも1.0／日の比増殖
速度を維持するのに必要な量のクロレラを上記比
増殖速度を維持するのに必要な培養液中密度で投
与することにより上記比増殖速度以上の比増殖速
度でシオミズツボワムシをその個体数が2000／ml
培養液以上になるまで増殖させ、その後、培養液
よりシオミズツボワムシを採取することを特徴と
するシオミズツボワムシの培養方法。 ２ クロレラの50％未満を酵母で代替する特許請
求の範囲第１項記載の培養法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62269295A JPH01112933A (ja) | 1987-10-27 | 1987-10-27 | シオミズツボワムシの培養方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62269295A JPH01112933A (ja) | 1987-10-27 | 1987-10-27 | シオミズツボワムシの培養方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01112933A JPH01112933A (ja) | 1989-05-01 |
| JPH0360463B2 true JPH0360463B2 (ja) | 1991-09-13 |
Family
ID=17470358
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62269295A Granted JPH01112933A (ja) | 1987-10-27 | 1987-10-27 | シオミズツボワムシの培養方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH01112933A (ja) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0339021A (ja) * | 1989-07-07 | 1991-02-20 | Marino Fuooramu Nijiyuuichi | ワムシの連続培養法 |
| JP2668107B2 (ja) * | 1993-09-18 | 1997-10-27 | 財団法人福岡県栽培漁業公社 | ワムシ類の高密度大量培養法 |
| JP2005143329A (ja) * | 2003-11-12 | 2005-06-09 | Japan Science & Technology Agency | 動植物プランクトンの無菌化方法及び当該無菌化方法を用いたワムシの培養方法 |
| CN111066694B (zh) * | 2019-12-26 | 2021-12-10 | 上海市水产研究所（上海市水产技术推广站） | 一种长江刀鲚半咸水苗种培育方法 |
-
1987
- 1987-10-27 JP JP62269295A patent/JPH01112933A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH01112933A (ja) | 1989-05-01 |
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