JPH0361653B2 - - Google Patents

Description

請求の範囲 １ 下記式 Ｈ−Ｌ−Met（O₂）−Ｌ−Glu−Ｌ−His−Ｌ−
Phe−Ｄ−Lys−Ｌ−Phe−OH で表わされるペプチド、又はそのエステル、アミ
ド、酸付加塩若しくは金属錯体からなる軸索再生
刺激剤。

明細書 本発明は軸索再生を促進する手段としてのある
種のペプチドの用途に関する。

神経線維に対する損傷は、通常その神経部分の
変質を生起させ、この変質はその傷害部分を越え
て遠方に広がりうる。この所謂ワレリアン変質
（Wallerian degeneration）は最終的には標的器
官を完全に鈍感ならしめうる。核周囲部細胞体中
に造られた軸索によつて運ばれた物質は神経損傷
部位に集まり、この部位に於てこれらの物質が腫
脹を生起させる。

約３日の遅延の後に、神経損傷部位又は腫脹部
位に新しい枝（branch）が現れる。関連する変
質神経の完全な回復が達成されるまで、これらの
枝は、変質神経組織の未だに無傷でいる基底層を
利用して１日に約３〜４mmの速さで成長する。

驚くべきことに、体内に発生する蛋白質又はペ
プチツドの成分又は断片とならないある種のペプ
チドを投与すると、軸索再生という自然に起る変
化を明らかに刺激し且つ促進することができ、そ
の結果可成り短時間のうちに関連する変質神経を
完全に回復させることが可能になることが判明し
た。

これらのペプチドは式 Ｈ−Ｌ−Met（O₂）−Ｌ−Glu−Ｌ−His−Ｌ−
Phe−Ｄ−Lys−Ｌ−Phe−OH で示されるペプチド及びこれらのペプチドの機能
性誘導体（すなわち官能性誘導体）でありうる。

この場合の機能性誘導体は、 ａ メチルエスチル、エチルエステル、プロピル
エステル、イソプロピルエステル、ブチルエス
テル又はイソ−ブチルエステル等のＣ−未端脂
肪族エステル（１〜６個のＣ原子）、 ｂ Ｃ−未端アミド又はモノ−メチル置換アミド
又はジメチル−置換アミド、 ｃ 医薬上許容しうる酸附加塩、及び ｄ 関連するペプチツドと金属、好ましくは亜鉛
の難溶性塩、酸化物又は水酸化物とを接触させ
ることによつて得られた金属錯体を意味する。

後者のペプチド−金属錯体は体内で錯体からペ
プチツドを徐々に放出するので、このペプチドの
持続活性が達成される。

式の上記ペプチド及びこれらの機能性誘導体
は、精神薬理学的ペプチド、更に詳しくは条件
（回避）行動の消去を遅らせるペプチドとして公
知である。これらのペプチドは米国特許第
3842064号、第4110322号及び第4104371号に記載
されている。

既に上記に於て簡潔に指摘したように、当該ペ
プチドが損傷によつて変質された神経の再生を刺
激するために、これらのペプチドは神経系の特定
部分の損傷及び生じた変質部を介して、この変質
した神経系によつて促進される感覚運動機能又は
筋肉機能を利用できないか又はほんの一部しか利
用し得ない患者に投与するのに極めて適合してい
る。

特に、これは外科手術を受けた患者、交通事故
の被害者又は凍傷の症状のみられる患者に適用し
うる。

しかしながら、神経は単に機械的損傷によつて
損われるだけでなく、アルコール嗜癖、中毒、薬
物の過剰服用等の他の原因も神経組織に対して傷
害を生起させうる。このような場合にも、当該ペ
プチツドを使用することができる。

本発明のペプチドを皮下注射により投与（Ｓ／
Ｃ applikation）する場合には、亜鉛錯体にす
るのが好ましい。

更に、当該ペプチドを用いる特別の利点はこれ
らのペプチドを経口的に摂取することができる点
である。通常、（比較的長い）ペプチドは注入
（坐剤）又は鼻腔内（鼻へのスプレーによつて）
への注入によつてのみ適用されうるものが殆んど
である。この新規な用途に対してこのペプチドを
投与しうる用量は１日に１Kgの体重当り0.1μg〜
10mgの間で種々変えることができる。

当該ペプチドは実験用動物モデルについてテス
トされた。メスのアルビノウイスター系ラツト
（Albino Wistar Rats）（体重130〜150ｇ）につ
いて、付加筋肉を切り裂くことによつて右の坐骨
神経を露出させた。次に傷口を閉鎖し且つ縫合す
る前に、止血鉗子を用いて露出された神経束を坐
骨切痕に対して6m／ｍ遠方で押しつぶした。

この操作〔これは、体重mg当り0.08mlのハイプ
ノルム（hypnorm）麻酔をかけて行つた〕の直
後に、ラツトはテストされるべきペプチド又はプ
ラシーボを用いて皮下注射され、この注射は48時
ごとに繰返された。対照ラツトは見かけの
（sham）手術にかけられた。この場合、坐骨神経
を露出させたけれども損傷を与えられなかつた。
次に、対照ラツトはプラシーボ（賦形剤）を用い
て皮下処置された。これらの皮下注射はラツトの
頚部皮膚皺襞中に行われた。

損傷の完全な回復と生ずる神経再生とが、ラツ
トの右脚の感覚運動機能を左脚と比較するテスト
によつて測定された。

このテストの間で、次の注射の直前に、足裏を
48時ごとに最大３秒間47℃の加熱空気流に曝し
た。このようにして、ラツトがこの３秒の期間内
にラツトの右足を引つ込めたかどうか（イエス／
ノー判定基準）を決定することによつてテスト結
果が得られた。この期間中、左足はそれぞれの場
合に（通常１〜1.5秒のうちに５引つ込められた。

更に、神経損傷部から各種の距離にある脛骨神
経について、損傷を生じた後各種の時間に、組織
の切開が行われた。再生神経中の新しく形成され
た有髄軸索を着色によつて目に見えるようにし、
軸索の数を決定した。

双方のテストに於て、48時間当りラツト１匹当
り1μgと10μgの用量で当該ペプチドを投与する
と、プラシーボによる処置と比較した場合、変質
神経系の回復が可成り促進された。

例えば、 (a) 生理食塩溶液中に溶解して、又は (b) 燐酸亜鉛−ペプチド懸濁液（生理食塩溶液と
等張であり、PHは７〜８である）として皮下に
投与されたペプチド Ｈ−Ｌ−Met（O₂）−Ｌ
−Glu−Ｌ−His−Ｌ−Phe−Ｄ−Lys−Ｌ−
Phe−OH は、48時間当り1μg／ラツトの用量
では平均10％で感覚運動機能の回復を刺激し、
48時間当り10μg／ラツトの用量では平均15％
で感覚運動機能の回復を刺激する。

該ペプチドの毒性は、LD₅₀で表わすと下記
のとおりである； マウスに静脈内投与： 130−160mg／Kg マウスに経口投与： ＞2000mg／Kg ラツトに静脈内投与： 360mg／Kg ラツトに経口投与： ＞2000mg／Kg 実施例 １ 注射用懸濁液は 30μgのＨ−Met（O₂）−Glu−His−Phe−Ｄ−
Lys−Phe−OH、 1.5mgの亜鉛、 0.63mgのNa₂HPO₄・2H₂O、 3.5mgのNaCl、 10mgのベンジルアルコール から成る。

２ 100mgの錠剤は 7.5mgのＨ−Met（O₂）−Glu−His−Phe−Ｄ−
Lys−Phe−OH、 １mgのタルク、 0.5mgのステアリン酸マグネシウム、 2.5ｇのカルボキシメチルセルロース、 20mgの殿粉、 68.5mgのラクトース、 から成る。

３ 7.5mgのＨ−Met（O₂）−Ala−Ala−Ala−Ｄ
−Lys−Phe−Gly−Ｄ−Lys−Pro−Val−Gly
−Lys−Lys−OH を含む類似の錠剤が調製された。

４ 22.3mgのＨ−Met（O₂）−Glu−His−Phe−Ｄ
−Lys−Phe−OH、 153.4mgのマンニトール、 7.4mgのポビドン、 1.8ｇのステアリン酸マグネシウム を含む硬質ゼラチンカプセル。