【発明の詳細な説明】[Detailed description of the invention]
本発明は半合成アミノ糖抗生物質として有用な
新規化合物である、2′，3′−ジデオキシカナマイ
シンＡに関する。
本発明者らは、アミノ配糖体抗生物質であるカ
ナマイシンＡのデオキシ誘導体について、これま
で研究を進めて3′−デオキシカナマイシンＡ，
3′，4′−ジデオキシカナマイシンＡ，2′−デオキ
シカナマイシンＡなどの合成に成功してきた（例
えば特開昭56−68698号，特開昭56−118098号，
特願昭56−113578号明細書参照）。
本発明者らは、カナマイシンＡの2′−位誘導体
について更に研究を進め、新規な誘導体としての
2′，3′−ジデオキシカナマイシンＡの合成を意図
して種々研究を重ねた結果、2′，3′−ジデオキシ
カナマイシンＡを合成することに成功し、しかも
この合成した新規化合物が種々の耐性菌に有効な
半合成アミン配糖体抗生物質であることを認め本
発明を完成した。
すなわち、本発明者らは、カナマイシンＡを出
発原料として用いて、これの2′位及び3′位のヒド
ロキシル基が遊離のまゝであるか又は2′，3′−デ
オキシ化に都合よく修飾されてあり且つ比較的反
応性のない５位ヒドロキシル基以外の4′，2″，
4″及び6″位のヒドロキシル基並びにすべてのアミ
ノ基が保護されてあるカナマイシンＡ保護誘導体
を巧みな手法で調製することに成功し、さらに該
保護体の2′位，3′位を化学反応に付して2′，3′−
ジデオキシ−2′−エノ−カナマイシンＡ保護誘導
体に導き、さらに還元反応に付して2′，3′−ジデ
オキシカナマイシンＡ保護誘導体に導き、次に常
法で脱護することによつて目的とする2′，3′−ジ
デオキシカナマイシンＡを合成することに成功し
た。
従つて、本発明は次式
で表わされる2′，3′−ジデオキシカナマイシンＡ
又はこれの酸付加塩を提供するものである。
本発明の2′，3′−ジデオキシカナマイシンＡは
白色粉末状の塩基性物質であり、その比旋光度は
〔α〕23 D＋114゜（c1.0，水），融点は148〜162℃であ
り、その元素分析の実測値はC44.08％，H7.33
％，N10.72％でその分子式（C18H36N4O9・H2O
として）に一致した。
本発明の2′，3′−ジデオキシカナマイシンＡは
通常、遊離塩基または水和物または炭酸塩として
得られるが、通常の方法により任意の無毒性酸付
加塩とすることができる。付加すべき酸としては
塩酸、硫酸、燐酸，硝酸などの無機酸、酢酸、リ
ンゴ酸、クエン酸、アスコルビン酸、メタンスル
ホン酸などの有機酸が用いられる。
2′，3′−ジデオキシカナマイシンＡの抗菌スペ
クトルは次の第１表に示すとおりであり、カナマ
イシンＡより耐性菌に対して高い抗菌力を示す。
マウスの静脈注射による急性毒性はいずれも
LD50値が100mg／Kg以上であり、諸種のグラム陽
性菌および陰性菌の感染症の治療に用いられる。
The present invention relates to 2',3'-dideoxykanamycin A, a novel compound useful as a semi-synthetic amino sugar antibiotic. The present inventors have conducted research on deoxy derivatives of kanamycin A, an aminoglycoside antibiotic, and have developed 3'-deoxykanamycin A,
We have succeeded in synthesizing 3',4'-dideoxykanamycin A, 2'-deoxykanamycin A, etc. (for example, JP-A-56-68698, JP-A-56-118098,
(See specification of Japanese Patent Application No. 113578/1983). The present inventors conducted further research on the 2'-position derivative of kanamycin A and identified it as a new derivative.
As a result of various research aimed at the synthesis of 2',3'-dideoxykanamycin A, we succeeded in synthesizing 2',3'-dideoxykanamycin A, and this new compound was found to be effective against various resistant bacteria. The present invention was completed based on the recognition that the semi-synthetic amine glycoside antibiotic is effective in the treatment of cancer. That is, we used kanamycin A as a starting material, with the hydroxyl groups at the 2' and 3' positions either remaining free or modified in a manner convenient for 2',3'-deoxylation. 4′, 2″, other than the 5-position hydroxyl group, which is
We succeeded in preparing a protected derivative of kanamycin A in which the hydroxyl groups at the 4″ and 6″ positions and all amino groups are protected, and further chemically reacted the 2′ and 3′ positions of the protected derivative. 2′, 3′−
A protected derivative of dideoxy-2'-eno-kanamycin A is obtained, which is further subjected to a reduction reaction to obtain a protected derivative of 2',3'-dideoxykanamycin A, and then deprotected by a conventional method to obtain the desired product. We succeeded in synthesizing 2',3'-dideoxykanamycin A. Therefore, the present invention has the following formula 2',3'-dideoxykanamycin A represented by
or an acid addition salt thereof. The 2',3'-dideoxykanamycin A of the present invention is a white powdery basic substance, with a specific optical rotation of [α] 23 D +114° (c1.0, water) and a melting point of 148-162°C. Yes, the actual value of elemental analysis is C44.08%, H7.33
%, N10.72% and its molecular formula (C 18 H 36 N 4 O 9・H 2 O
). The 2',3'-dideoxykanamycin A of the present invention is usually obtained as a free base or a hydrate or carbonate, but can be converted into any non-toxic acid addition salt by conventional methods. As the acid to be added, inorganic acids such as hydrochloric acid, sulfuric acid, phosphoric acid, and nitric acid, and organic acids such as acetic acid, malic acid, citric acid, ascorbic acid, and methanesulfonic acid are used. The antibacterial spectrum of 2',3'-dideoxykanamycin A is shown in Table 1 below, and it exhibits higher antibacterial activity against resistant bacteria than kanamycin A.
Acute toxicity due to intravenous injection in mice
It has an LD 50 value of 100 mg/Kg or more and is used to treat infections caused by various Gram-positive and -negative bacteria.
【表】
本発明の2′，3′−ジデオキシカナマイシンＡの
合成は、カナマイシンＡから出発するが、大別２
つのルートを経る製法で行われ得る。
その第１の製法は次のような工程から成る。先
づカナマイシンＡ（化合物）に対して水中で
NaOHの存在下にクロル炭酸エチルを作用させ
て、カナマイシンＡのすべてのアミノ基をエトキ
シカルボニル基で保護し（工程１）、さらにピリ
ジン中で塩化ベンゾイルを作用させて５位ヒドロ
キシル基以外のすべてのヒドロキシル基をベンゾ
イル基で閉塞し（工程２）、さらにピリジン中で
ヒドラジンヒドラートを作用させて2′位ヒドロキ
シル基から選択的にベンゾイル基を脱離させる
（工程３）（本出願人の出願人に係る特願昭56−
113578号明細書参照）。
これによつて、５位及び２位ヒドロキシル基以
外のすべてヒドロキシル基とすべてのアミノ基と
が保護されてあるカナマイシンＡ誘導体として、
3′，4′，2″，4″，6″−ペンタ−Ｏ−ベンゾイル−
テトラ−Ｎ−エトキシカルボニルカナマイシンＡ
（化合物）が調製される。
この保護誘導体をピリジン中でスルホニル化
剤、例えば塩化メシルと反応させて2′位ヒドロキ
シル基をスルホニル化例えばメシル化し（工程
４）、得られた2′−Ｏ−メシル体（化合物）を
メタノール−ジオキサン中でアルカリアルコラー
ト（例えばナトリウムメチラート）で処理する
（工程５）と、2′−メチルスルホニルオキシ基と
3′−ベンゾイルオキシ基とに作用してエポキシド
環が形成され（エポキシ化）且つ同時に他の位置
のすべてのＯ−ベンゾイル基が脱離され、これに
よつて2′，3′−アンヒドロ−2′−エピ−テトラ−
Ｎ−エトキシカルボニルカナマイシンＡが形成さ
れる。これを再びピリジン中で塩化ベンゾイルと
反応させて（工程６）、５位ヒドロキシル基以外
のすべてのヒドロキシル基をベンゾイル化して
2′，3′−アンヒドロ−4′，2″，4″，6″−テトラ−
Ｏ−ベンゾイル−2′−エピ−テトラ−Ｎ−エトキ
シカルボニルカナマイシンＡ（化合物）に導く。
次にこの2′−エピ化合物に対してヨウ化アルカ
リ、例えばヨウ化ナトリウムをアセトン中で加熱
下に作用させる（工程７）と、エポキシド環は開
環して3′位がヨウ化された化合物として、4′，2″，
4″，6″−テトラ−Ｏ−ベンゾイル−3′−デオキシ
−2′，3′−ジ−エピ−3′−ヨード−テトラ−Ｎ−
エトキシカルボニルカナマイシンＡ（化合物）
が生成される。この化合物に対してピリジン中で
４−ジメチルアミノピリジン及び塩化メシルをト
リエチルアミンの存在に作用させる（工程８）
と、2′−エノ化が起り、4′，2″，4″，6″−テトラ
−Ｏ−ベンゾイル−2′，3′−ジデオキシ−2′−エ
ノ−テトラ−Ｎ−エトキシカルボニルカナマイシ
ンＡ（化合物）が生成される。この2′−エノ体
をアルカリ・アルコラート例えばメタノール中の
ナトリウムメチラートで処理する（工程９）と、
Ｏ−ベンゾイル基が脱離される。さらにこの脱ベ
ンゾイル体を水酸化ナトリウム水溶液で処理する
（工程10）と、Ｎ−エトキシカルボニル基が脱離
されて脱保護が完了する。これにより、2′，3′−
ジデオキシ−2′−エノカナマイシンＡ（化合物）
（これは新規化合物である）が生成される。これ
を水中で酸化白金，パラジウム，等の水添触媒存
在下に水素で還元する（工程11）と、目的の2′，
3′−ジデオキシカナマイシンＡ（化合物）が得
られる。
上記の第１の製法の概要を次のチヤートで図示
する。
但し、図中でCbeはエトキシカルボニル基，Bz
はベンゾイル基，Msはメシル基（すなわちメチ
ルスルホニル基）を表わす。
上記の第１の製法において、カナマイシンＡの
アミノ基を保護するためのエトキシカルボニル基
を導入する反応の工程１も、ベンゾイル基を保護
するためのヒドロキシル基に導入する反応の工程
２も慣用の保護法で実施できる。2′−Ｏ−ベンゾ
イル基を選択的に脱離させるヒドラジン−ピリジ
ン処理のための工程３の実施法の詳細は特願昭56
−113578号細書に記載されてある。
更に、化合物の2′−ヒドロキシル基をスルホ
ニル化する工程４においては、スルホニル化試薬
としては、メシルクロライドの他、トシルクロラ
イド，ベンジルスルホニルクロライドが使用でき
る。溶媒として、ピリジンの他、トリエチルアミ
ン（スルホニル化試薬の２〜10倍モル量で用い
る）を含むジクロルメタンの使用が可能である。
スルホニル化は温度条件が−10〜80℃で反応は進
行するが、好ましくは15〜30℃である。
化合物の2′，3′位のエポキシ化を行う工程５
については、低級アルカノールとアルカリ金属例
えばナトリウムまたはカリウムのアルコラートを
化合物の５〜20倍モルの量で使用する。溶媒と
しては低級アルカノールまたは低級アルカノール
とテトラヒドロフラン，ジオキサン，DMF等が
使用でき、温度条件は０〜50℃が好ましい。脱保
護されたヒドロキシル基のＯ−保護化を再び行な
う工程６では、ベンゾイルクロライド，アセチル
クロライド，無水安息香酸，無水酢酸等を原料の
５〜15倍モルの量で使用する。溶媒としてはピリ
ジン，トリエチルアミン／ジクロルメタン（トリ
エチルアミンは試薬の２〜10倍モルの量）が使用
でき、温度条件は−10〜60℃が好ましい。
得られた化合物の3′位のヨード化を行う工程
７では、沃化試薬として、ヨウ化ナトリウム、ヨ
ウ化カリウム等が化合物の４〜10倍モルの量で
使用できる。このとき、酸触媒として、ギ酸，Ｈ
―（CH2）o−CO2H（ｎ＝１〜４）などの低級脂肪
酸または、低級脂肪酸とそのナトリウム塩よりな
る緩衝剤を使用するのが好ましい。溶剤として
は、アセトン，テトラヒドロフラン，ジオキサ
ン，ジメチルホルムアミドが使用でき、温度条件
は50〜120℃が好ましい。
得られた化合物の2′−エノ化を行う工程８で
は、４−ジメチルアミノピリジン（化合物の
0.2〜３倍モルの量），４−ジメチルアミノピリジ
ン（化合物の0.2〜３倍モルの量）とトリエチ
ルアミン（化合物の1.5〜３倍モルの量）等の
塩基の存在下にメシルクロリド，ベンジルスルホ
ニルクロリド，トシルクロリド，トリフルオロメ
チルスルホニルクロリド（化合物の３〜７倍モ
ルの量）等のクロライドを反応させる。塩基は必
ずしも必要ない。溶媒としてはピリジンが用いら
れ、温度条件は10〜120℃（塩基を用いない時は
90〜120℃）が好ましい。
得られた化合物からＯ−脱保護する工程９で
は、反応剤として低級アルカノールとアルカリ金
属アルコラート例えばナトリウムまたはカリウム
のアルコラート（化合物の３〜７倍モルの量）
を使用し、温度条件は０〜50℃が好ましい。
続いてＮ−脱保護化の工程10では、水酸化ナト
リウム，水酸化カリウム，水酸化バリウム（化合
物のＯ−脱保護体の30〜100倍モルの量）の水
溶液を作用させる。温度は80〜100℃で行うのが
好ましい。
得られた化合物の還元の工程11では、2′−エ
ノである二重結合の水素付加が行われ、これは酸
化白金の存在下に水素（水素圧は常圧〜３気圧）
で実施される。温度条件は10〜50℃が好ましい。
水素添加によつて化合物の二重結合が飽和さ
れ、2′，3′−ジデオキシカナマイシンＡを生成す
る。
2′，3′−ジデオキシカナマイシンＡの第２の製
法は次の如き工程から成る。
すなわち、カナマイシンＡに対して水中で約１
モル比のベンジルオキシカルボニル・クロライド
を作用させてカナマイシンＡの6′位アミノ基を選
択的に保護する（工程１）（Carbohydrate
Research，89巻91〜101頁（1981）参照）。次に、
得られた6′−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルカナ
マイシンＡに対してピリジン中で約３モル比のト
シルクロライドを作用させ、これによつて残余の
アミノ基をトシル基で保護する（工程２）（前出
Carbohydrate Research参照）と、6′−Ｎ−ベン
ジルオキシカルボニル−１，３，3″−トリ−Ｎ−
トシルカナマイシンＡ（化合物）を調製でき
る。
この化合物の4″位及び6″位のヒドロキシル
基２個を同時に保護するために、4″，6″−Ｏ−ベ
ンジリデン化を行う（工程３）。この際のベンジ
リデン基の導入はベンズアルデヒドジメチルアセ
タールをｐ−トルエンスルホン酸の存在下に作用
させるか又はベンズアルデヒドを塩化亜鉛の存在
下に作用させるか等の既知の手法で行い得る。こ
れによつて6′−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−
4″，6″−Ｏ−ベンジリデン−１，３，3″−トリ−
Ｎ−トシル−カナマイシンＡ（化合物Ｘ）が生成
される。
この化合物ＸをDMF中で水素化ナトリウムで
処理理する（工程４）と、4′−ヒドロキシル基と
6′−ベンジルオキシカルボニルアミノ基とが互に
反応して4′，6′−カルバメート環を生成し、これ
によつて4′，6′−Ｏ，Ｎ−保護化が達せられる。
この際、4″，6″−Ｏ−ベンジリデン−6′−Ｎ：
4′−Ｏ−カルボニル−１，３，3″−トリ−Ｎ−ト
シルカナマイシンＡ（化合物XI）が生成される。
化合物XIに対して、2′位及び3′位のヒドロキシ
ル基を選択的に閉塞するために、制御された反応
条件下で例えばジクロロメタン中で１，１−ジメ
トキシシクロヘキサンを作用させる（工程５）
と、2′，3′−Ｏ−シクロヘキシリデン化が行わ
れ、4″，6″−Ｏ−ベンジリデン−6′−Ｎ：4′−Ｏ
−カルボニル−2′，3′−Ｏ−シクロヘキシリデン
−１，３，3″−トリ−Ｎ−トシルカナマイシンＡ
（化合物XII）が生成される。
次に化合物XIIに対して、2″−ヒドロキシル基を
保護するために無水酢酸でアセチル化を行う（工
程６）と、2″−Ｏ−アセチル−4″，6″−Ｏ−ベン
ジリデン−6′−Ｎ：4′−Ｏ−カルボニル−2′，
3′−Ｏ−シクロヘキシリデン−１，３，3′−トリ
−Ｎ−トシルカナマイシンＡ（化合物）が生
成される。
更に、化合物における閉塞された2′位，
3′位のヒドロキシル基を遊離させるために80％酢
酸水溶液で加水分解させる（工程７）と、2′，
3′−Ｏ−シクロヘキシリデン基が脱離されて2″−
Ｏ−アセチル−4″，6″−Ｏ−ベンジリデン−6′−
Ｎ：4′−Ｏ−カルボニル−１，３，3′−トリ−Ｎ
−トシルカナマイシンＡ（化合物）が生成さ
れる。
この化合物の2′位，3′位のヒドロキシル基
をトリフルオロメチルスルホニル化するためにピ
リジン中で無水トリフルオロメチルスルホニル
（CF3SO2）2と反応させる（工程８）と、2″−Ｏ−
アセチル−4″，6″−Ｏ−ベンジリデン−6′−Ｎ：
4′−Ｏ−カルボニル−2′，3′−ジ−Ｏ−トリフル
オロメチルスルホニル−１，３，3″−トリ−Ｎ−
トシルカナマイシンＡ（化合物）が生成され
る。
更に化合物をDMF中でイミダゾールの存
在下にヨウ化アルカリ金属で処理すると2′−エノ
化が行われる（工程９）。これによつて、2″−Ｏ
−アセチル−4″，6″−Ｏ−ベンジリデン−6′−
Ｎ：4′−Ｏ−カルボニル−2′，3′−ジデオキシ−
2′−エノ−１，３，3″−トリ−Ｎ−トシルカナマ
イシンＡ（化合物）が生成される。この化合
物を酸化白金触媒の存在下に水素で還元する
（工程10）と、2′−エノである二重結合は水素添
加されて2″−Ｏ−アセチル−4″，6″−Ｏ−ベンジ
リデン−6′−Ｎ：4′−Ｏ−カルボニル−2′，3′−
ジデオキシ−１，３，3″−トリ−Ｎ−トシルカナ
マイシンＡ（化合物）が生成される。
化合物をTHF中で水酸化アルカリで処理
すると、4′，6′−カルバメート環が開裂されると
共に2″−Ｏ−アセチル基も脱離され（工程11），
4″，6″−Ｏ−ベンジリデン−2′，3′−ジデオキシ
−１，３，3″−トリ−Ｎ−トシルカナマイシンＡ
（化合物）が生成される。
この化合物から保護基をすべて脱離させる
ために液体アンモニア中でアルカリ金属で処理す
る（工程12）と、トシル基と4″，6″−Ｏ−ベンジ
リデン基とが一挙に除去されて目的の2′，3′−ジ
デオキシカナマイシンＡが得られる。
上記の第２の製法の概要を次のチヤートで図示
する。
但し図中でＺはベンジルオキシカルボニル基，
Tsはトシル基，Acはアセチル基，Tfはトリフル
オロメチルスルホニル基を示す。
上記の第２の製法において、カナマイシンＡの
6′−アミノ基を保護するためのベンジルオキシカ
ルボニル基を導入する反応の工程１も、他のアミ
ノ基にトシル基を導入する反応の工程２も、既知
の手法で実施できる。
更に、工程３における4″，6″−Ｏ−ベンジリデ
ン化のためにはベンズアルデヒドジメチルアセタ
ールとｐ−トルエンスルホン酸，あるいはベンズ
アルデヒドと塩化亜鉛を作用させる。溶媒とし
て、ジメチルホルムアミドが用いられ、温度条件
は10〜30℃が好ましい。工程４における4′，6′−
カルバメート化のためには、水素化ナトリリウム
が化合物の５〜15倍モルの量で反応され、溶媒
としてはジメチルホルムアミドを使い、温度条件
は10〜40℃が好ましい。工程５における2′，3′−
Ｏ−シクロヘキシリデン化では、１，１−ジメト
キシシクロヘキサンが作用され、そのとき、トリ
フルオロ酢酸，トリクロル酢酸，ｐ−トルエンス
ルホン酸等の酸触媒とモレキユラーシーブス4A
または5A等の脱メタノール剤が存在させられる。
溶媒としてはジメチルホルムアミド，ジクロルメ
タン−ジメチルホルムアミド混合溶媒が使用され
る。
工程６における2″−Ｏ−アセチル化では、無水
酢酸，アセチルクロリドが使用されるが、無水安
息香酸、ベンゾイルクロリド（化合物XIIの２〜10
倍モル）を用いてベンゾイル化しても2″−Ｏ−保
護が達成できる。2″−Ｏ−アシル化（アセチル
化）用の溶媒としては、ピリジン，トリエチルア
ミン／ジクロルメタン（トリエチルアミンは化合
物XIIの２〜10倍モル）が使用でき、温度条件は10
〜50℃が好ましい。
工程７における2′，3′−Ｏ−脱保護化のために
は、50〜90％酢酸水，0.2〜1.0％トリフルオロ酢
酸またはトリクロロ酢酸が適当であり、温度条件
は20〜50℃が好ましい。
工程８において2′位と3′位のヒドロキシル基の
トリフルオロメチルスルフオニル化のためには、
無水トリフロロメタンスルホニル，トリフロロメ
タンスルホニルクロリド（化合物の３〜10倍
モル）が使用できる。溶媒としてはピリジンが適
当で、温度条件は−10〜30℃が好ましい。
工程９における2′−エノ化のためにはヨウ化ナ
トリウム，ヨウ化カリウム，ヨウ化ナトリウムま
たはヨウ化カリウム／イミダゾール，ヨウ化ナト
リウムまたはヨウ化カリウム／亜鉛（ヨウ化ナト
リウム，ヨウ化カリウムは化合物の50〜100
倍モル，イミダゾールは化合物の３〜10倍モ
ル）を反応させる。温度条件は80〜120℃が好ま
しい。
工程10における還元反応は、酸化白金の存在下
に水素（水素圧は常圧〜５気圧）で行われ、溶媒
はテトラヒドロフラン，ジオキサン，メタノール
またはこれらの含水系が使用できる。
工程11における4′，6′−カルバメート環の開裂
による脱保護化のためには、水酸化ナトリウム，
水酸化カリウム，水酸化バリウムを用いて加水分
解が行われる。この際、溶媒として、含水のテト
ラヒドロフラン，ジオキサン，ジメトキシエタン
（溶媒：H2O＝２：１の含水系）が適当で、温度
条件は20〜70℃である。
工程12においては、化合物のアミノ基と水
酸基から脱保護するためアルカリ金属例えばナト
リウムまたはカリウムで液体アンモニア中で既知
の手法で処理する。温度条件は−70〜−40℃が適
当である。こうして、目的の2′，3′−ジデオキシ
カナマイシンＡが生成される。
次に実施例によつて本発明を説明する。実施例
１は第１の製法により、実施例２は第２の製法に
より本発明の目的化合物を合成する例を示す。
実施例 １
(1) テトラ−Ｎ−エトキシカルボニルカナマイシ
ンＡの生成（工程１）
カナマイシンＡ硫酸塩40ｇを2N−NaOH水溶
液400mlとメタノール200mlとの混液にとかし、そ
の溶液中にクロル炭酸エチル69mlを滴下し、室温
下で４時間撹拌した。析出物を過し水洗後、乾
燥した。収量45.7ｇ（86％）
m.p.266〜267℃（分解）
〔α〕25 D＋48.3゜（e0.5，DMF）
元素分析 計算値（C30H52N4O19）：
C46.62，H6.80，N7.25％
実測値：C45.92，H6.79，N7.05％
(2) ヘキサ−Ｏ−ベンゾイル−テトラ−Ｎ−エト
キシカルボニルカナマイシンＡの生成（工程
２）
前項(1)で得たテトラ−Ｎ−エトキシカルボニル
カナマイシンＡの7.73ｇのピリジン200ml溶液に
塩化ベンゾイル12.2mlを加え、５℃で一夜放置し
てＯ−ベンゾイル化を行つた。水１mlを加えた
後、溶媒を減圧留去し、残渣に酢酸エチル300ml
を加え、水洗後、飽和重曹水で洗い最後に水洗を
２回した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥した後
減圧濃縮し、表題化合物13.6ｇ（97.3％）を得
た。
m.p.195〜215℃
〔α〕25 D＋100.7℃（C0.9，CHCl3）
元素分析 計算値（C72H76N4O25）：
C61.87，H5.49，N4.01％
実測値：C61.78，H5.42，N3.87％
(3) 3′，4′，2″，4″，6″−ペンタ−Ｏ−ベンゾイ
ル−テトラ−Ｎ−エトキシカルボニル−カナマ
イシンＡ（化合物）の生成（工程３）
前項(2)の生成物の42ｇをピリジン60mlにとかし
た溶液にヒドラジンヒドラート0.48mlを加え、室
温下に一夜放置して2′−Ｏ−ベンゾイル基を選択
的に脱離する反応を行つた。アセトン２mlを加え
た後、溶媒を、減圧留去し、残渣に酢酸エチル
150mlを加えた。水洗後、1N−KHSO4水溶液で
洗い、次いで飽和重曹水で洗い、最後に２回水洗
した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後溶媒を
減圧留去して、粗物質3.8ｇを得た。これをシリ
カゲル（75ｇ）クロマトグラフイで精製し、表題
物質2.6ｇ（67％）を得た。
m.p.193〜202℃
〔α〕25 D＋85.5゜（c.1.0，CHCl3）
元素分析 計算値（C65H72N4O24）：
C60.35，H5.62，N4.33％
実測値：C59.41，H5.51，N4.32％
(4) 3′，4′，2″，4″，6″−ペンタ−Ｏ−ベンゾイ
ル−2′−Ｏ−メチルスルホニル−テトラ−Ｎ−
エトキシカルボニルカナマイシンＡ（化合物）
の生成（工程３）
前項(3)の生成物の（3.0ｇ，2.32ミリモル）を
ピリジン（30ml）に溶解し、塩化メシル（0.63
ml，8.08ミリモル）を加え、室温で１時間撹拌す
る。水（0.2ml）を加えた後、溶媒を減圧下に留
去し、残留物を酢酸エチル100mlに溶解する。こ
れを水洗（50ml×１），飽和重曹水（50ml），水洗
（50ml×２）した後、硫酸マグネシウムで乾燥し、
溶媒を減圧下に留去する。得られる粗物質をシリ
カゲルクロマトグラフイーで精製（ワコーゲルＣ
−200 60ｇ，CHCl3：CH3OH＝50：１）すると
表題化合物（2.98ｇ，93.7％）が得られる。
m.p.167〜178℃
〔α〕24 D＋101.7゜（c.1.0，CHCl3）
NMR（CDCl3）δ：2.7（3H，ｓ，−SO2CH3）7.2
〜8.2（25H，ｍ，C6H5CO−）
元素分析（C66H74N4O26S）：
計算値 C57.79，H5.45，N4.09，S2.33％
実測値 C57.82，H5.44，N4.01，S2.39％
(5) 2′，3′−アンヒドロ−4′，2″.4″，6″−テト
ラ
−Ｏ−ベンゾイル−2′−エピ−テトラ−Ｎ−エ
トキシカルボニルカナマイシン（化合物）の
生成（工程５〜６）
前項(4)の化合物の（2.84ｇ，2.07ミリモル）
をメタノール（60ml），ジオキサン（60ml）の混
液に溶解し、ナトリウムメチラート（28％メタノ
ール溶液，４ml，20.7ミリモル）を加え、室温下
に18時間撹拌する。氷冷下に1N−塩酸で中和し
た後、溶媒を減圧下に留去する。残留物をピリジ
ン（100ml）に溶解し、塩化ベンゾイル（2.5ml，
21.5ミリモル）を加え、室温下に60分間撹拌す
る。水（0.5ml）を加えた後、溶媒を減圧下に留
去し、残留物を酢酸エチル（70ml）に溶解する。
これを水洗（50ml×１），飽和重曹水（50ml×
２），水洗（50ml×２）した後、硫酸マグネシウ
ムで乾燥する。溶媒を留去して得られた残留物
（2.42ｇ）をシリカゲルクロマトグラフイー（ワ
コーゲルＣ−200 50ｇ，CHCl3：CH3OH＝50：
１）で分離精製すると表題化合物（1.98ｇ，82
％）が得られた。
m.p.133〜146℃
〔α〕20 D＋74.5゜（c1.0，CHCl3）
元素分析（C58H66N4O22）：
計算値 C59.47，H5.69，N4.78％
実測値 C59.66，H5.71，N4.56％
(6) 4′，2″，4″，6″−テトラ−Ｏ−ベンゾイル−
3′−デオキシ−2′，3′−ジ−エピ−3′−ヨード
−テトラ−Ｎ−エトキシカルボニルカナマイシ
ンＡ（化合物）の生成（工程７）
前項(5)の化合物の（1.85ｇ，1.58ミリモル）
をアセトン（45ml）に溶解し、ヨウ化ナトリウム
（1.36ｇ，9.07ミリモル），酢酸（1.26ml）を加え、
撹拌還流下に８時間反応させる。放冷後、溶媒を
減圧下に留去し、残留物を酢酸エチル（70ml）に
溶解する。これを水洗（50ml×２）し、硫酸マグ
ネシウムで乾燥する。溶媒を留去して得られた残
留物（2.0ｇ）をシリカゲルクロマトグラフイー
（ワコーゲルＣ−200 50ｇ，CHCl3：CH3OH＝
45：１）で分離精製すると表題化合物Ｖ（1.54ｇ，
75％）が得られた。
m.p.150〜155℃
〔α〕20 D＋33.0゜（c0.8，CHCl3）
元素分析（C58H67N4O22I）：
計算値 C53.61，H5.21，N4.31，I9.78％
実測値 C53.46，H5.20，N4.23，I10.01％
(7) 4′，2″，4″，6″−テトラ−Ｏ−ベンゾイル−
2′，3′−ジデオキシ−2′−エノ−テトラ−Ｎ−
エトキシカルボニルカナマイシンＡ（化合物）
の生成（工程８）
前項(6)の化合物の（1.0ｇ，0.77ミリモル）
をピリジン（20ml）に溶解し、４−ジメチルアミ
ノピリジン（90mg，0.74ミリモル），トリエチル
アミン（１ml），塩化メシル（0.3ml，3.8ミリモ
ル）を加えて、室温下に５時間撹拌する。これを
氷水（50ml）に投入し、析出物を酢酸エチル（70
ml）で抽出する。有機層を1N−硫酸水素カリウ
ム溶液（50ml），水洗（50ml），飽和重曹水（20
ml），水洗（50ml×２）した後、硫酸マグネシウ
ムで乾燥する。溶媒を留去して得られた残留物
（0.85ｇ）をシリカゲルクロマトグラフイー（ワ
コーゲルＣ−200 20ｇ，CHCl3：CH3OH＝50：
１）で分離精製すると表題化合物（0.65ｇ，73
％）が得られた。
m.p.151〜158℃（dec）
〔α〕22 D＋77.5（c0.8，CHCl3）
元素分析（C58H66N4O21）
計算値 C60.30，H5.77，N4.85％
実測値 C60.11，H5.76，N4.80％
(8) 2′，3′−ジデオキシ−2′−エノ−カナマイシ
ンＡ（化合物）の生成（工程９〜10）
前項(7)の化合物の（500mg，0.43ミリモル）
をメタノール（10ml）に溶解し、ナトリウムメチ
ラート（28％メタノール溶液0.3ml，1.5ミリモ
ル）を加え、室温下に30分間静置する。溶媒を減
圧下に留去し、得られた残留物に水（５ml），水
酸化ナトリウム（1.5ｇ）を加える。これを100℃
で３時間撹拌し、放冷後、水（100ml）を加え、
濃塩酸を加えて中和する。これをアンバーライト
CG−50（NH+ 4型20ml，0.3N−アンモニア水溶液）
で分離精製すると表題化合物（135mg，70％）
が得られた。
m.p.165〜173℃
〔α〕22 D＋106.4゜（c0.7，H2O）
NMR（D2O）δ：6.00（1H，ｄ，Ｊ＝10Hz，3′−
Ｈ），
5.82（1H，ｍ，2′−Ｈ），
5.43（1H，ｍ，1′−Ｈ），
5.00（1H，ｄ，Ｊ＝４Hz，1″−Ｈ）
3.45（1H，ｑ，Ｊ＝４，10Hz Ｈ−2″），
2.96（1H，ｔ，Ｊ＝10Hz，Ｈ−3″）
元素分析（C18H34N4O9・H2O）
計算値 C46.14，H7.76，N11.96％
実測値 C46.25，H7.77，N11.82％
(9) 2′，3′−ジデオキシカナマイシンＡ（化合物
）の生成（工程11）
前項(8)の化合物の（100mg，0.22ミリモル）
を水（５ml）に溶解し、酸化白金（10mg）を加
え、室温常圧下に３時間、接触還元を行う。不溶
物を去し、液をアンバーライトCG−50
（NH+ 4型３ml，0.3N−アンモニア水）で精製する
と表題化合物（84mg，83％）が得られた。
m.p.148〜162℃
〔α〕23 D＋114゜（c1.0，水）13
C−NMR（D2O中，PD10で測定）：
1″−Ｃ 100.9(ppm) １−Ｃ 51.4
1′−Ｃ 98.8 ３−Ｃ 50.1
６−Ｃ 88.8 6′−Ｃ 42.6
４−Ｃ 86.1 ２−Ｃ 36.5
５−Ｃ 75.6 3′−Ｃ 29.3
5′−Ｃ 73.0 2′−Ｃ 26.8
2″−Ｃ 72.8
5″−Ｃ 72.7
4″−Ｃ 70.2
4′−Ｃ 67.7
6″−Ｃ 61.1
3″−Ｃ 55.1
実施例 ２
(1) 6′−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−4″，
6″−Ｏ−ベンジリデン−１，３，3″−トリ−Ｎ
−トシルカナマイシンＡ（化合物）の製造
（工程１〜３）
6′−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−１，３，
3″−トリ−トシルカナマイシンＡ（化合物）を
Carbohydrate Research，89巻91−101，（1981）
の方法によりカナマイシンＡから調製し、これの
1.58ｇ（1.46ミリモル）を無水Ｎ，Ｎ−ジメチル
ホルムアミド（DMF）８mlに溶解し、ベンズア
ルデヒド・ジメチルアセタール0.27ml（1.2モル
比）とパラトルエンスルホン酸・一水塩55mgを加
え、室温で反応させた。７時間後、ベンズアルデ
ヒド・ジメチルアセタール0.13ml（0.6モル比）
を追加した。30時間後、氷冷した飽和炭酸水素ナ
トリウム水320mlにいれた。生じた白沈を取し、
水で洗い、さらにエチルエーテルで洗い、得られ
た物質を乾燥して、1.60ｇの淡黄色固体として表
題化合物Ｘを得た。
〔α〕23 D−22゜（c0.5，テトラヒドロフラン）
元素分析値 C54H64N4O19S3として
計算値 C55.47，H5.52，N4.79，S8.23％
実測値 C55.30，H5.49，N4.84，S8.28
(2) 4″，6″−Ｏ−ベンジリデン−6′−Ｎ；4′−Ｏ
−カルボニル−１，３，3″−トリ−Ｎ−トシル
カナマイシンＡ（化合物XI）の製造（工程４）
前項の化合物Ｘの4.65ｇ（3.98ミリモル）を無
水DMF93mlに溶解し、０℃，窒素雰囲気下に、
80％の油性水酸化ナトリウム1.72ｇ（９倍モル）
を加え、激しく撹拌しながら１時間０℃で反応さ
せた後、さらに室温で１晩反応させた。０℃下に
25％酢酸水14.8ml（NaHに対して1.7倍モル）を
加え、減圧濃縮した。残渣に水を加えて、形成さ
れた固体を、取し、水洗し、乾燥した。さらに
エチルエーテルで洗浄後、乾燥して表題化合物XI
を3.97ｇ得た。
〔α〕22 D−43゜（c1.0，アセトン）
元素分析値 C47H56N4O18S3として
計算値 C53.20，H5.32，N5.28，S9.07％
実測値 C52.85，H5.39，N5.26，S8.81
(3) 4″，6″−Ｏ−ベンジリデン−6′−Ｎ；4′−Ｏ
−カルボニル−2′，3′−シクロヘキシリデン−
１，３，3″−トリ−Ｎ−トシルカナマイシンＡ
（化合物XII）の製造（工程５）
前項の化合物XIの3.97ｇ（3.74ミリモル）を無
水DMF20mlに溶解させ、無水ジクロルメタン400
ml，１，１−ジメトキシシクロヘキサン10.8ml
（20倍モル）を加え、10分間加熱還流させた後、
トリフロロ酢酸2.1ml（５倍モル）を加え、モレ
キユラーシーブ5Aを還流途中に入れた装置をつ
けて還流を６時間続けた。反応後、減圧濃縮し、
残渣を氷冷した飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に
入れ、生じた沈澱を取した。この沈澱をエチル
エーテル、さらに水でよく洗い、乾燥し、表題化
合物XIIを淡黄色固体として、4.15ｇを得た。
〔α〕23 D−33゜（c0.6，アセトン）
元素分析値 C53H64N4O18S3として
計算値 C55.78，H5.65，N4.91，S8.43％
実測値 C55.47，H5.77，N4.88，S8.30
(4) 2″−Ｏ−アセチル−4″，6″−Ｏ−ベンジリデ
ン−6′−Ｎ；4′−−Ｏ−カルボニル−2′，3′−
Ｏ−シクロヘキシリデン−１，３，3″−トリ−
Ｎ−トシルカナマイシンＡ（化合物）の製
造（工程６）
前項の化合物XIIの5.26ｇ（4.6ミリモル）を無
水ピリジン105mlに溶解し、０℃にて無水酢酸4.8
ml（10倍モル）を加え、室温に戻して、１晩反応
させた。反応液を大量の飽和炭酸水素ナトリウム
水溶液中にいれ、生じた白色沈澱を取し、乾燥
して5.52ｇの粗生成物を得た。これをシリカゲル
クロマトグラフイー（ワコーゲルＣ−200，展開
系，クロロホルム：アセトン＝10：７→10：８→
10：９使用）により精製し、3.51ｇの表題化合物
をガラス状固体として得た。
〔α〕22 D＋40゜（c1.0，アセトン）
元素分析値 C55H66N4O19S3として
計算値 C55.82，H5.62，N4.73，S8.13％
実測値 C55.47，H5.75，N4.75，S7.92
(5) 2″−Ｏ−アセチル−4″，6″−Ｏ−ベンジリデ
ン−6′−Ｎ；4′−Ｏ−カルボニル−１，３，
3″−トリ−Ｎ−トシルカナマイシンＡ（化合物
）の製造（工程７）
前項の化合物の1.88ｇ（1.59ミリモル）に
80％酢酸水38mlを加え、懸濁液を激しく撹拌しな
がら、40℃で3.5時間反応させ、反応液を、大量
の飽和炭酸水素ナトリウム水溶液中にいれ、生じ
た沈澱を取し、水洗し、乾燥して粗生成物1.44
ｇを得た。これをシリカゲルクロマトグラフイー
（ワコーゲルＣ−200，展開系クロロホルム：アセ
トン＝１：１→１：２→アセトン）で精製し、表
題化合物の0.99ｇをガラス状固体として得
た。
〔α〕23 D−8゜（c1.0，アセトン）
元素分析値 C49H58N4O19S3として
計算値 C53.35，H5.30，N5.08，S8.72％
実測値 C53.34，H5.21，N5.13，S8.66
(6) 2″−Ｏ−アセチル−4″，6″−Ｏ−ベンジリデ
ン−6′−Ｎ；4′−Ｏ−カルボニル−2′，3′−ジ
−Ｏ−トリフルオロメチルスルホニル−１，
３，3″−トリ−Ｎ−トシルカナマイシンＡ（化
合物）の製造（工程８）
前項の化合物の887mgを無水ピリジン17.7
mlに溶解し、０℃窒素雰囲気下に、無水トリフロ
ロメタンスルホニル，1.13ml（比重1.68として8.4
倍モル）を加え、０℃で４時間反応させた。反応
液を氷冷した飽和炭酸水素ナトリウム水溶液にい
れ、生じた沈澱を取，水洗し、乾燥して、1.01
ｇの表題化合物を淡黄色固体として得た。
〔α〕23 D−32゜（c1.0，アセトン）
元素分析値 C51H56N4O23S5F6として
計算値 C44.80，H4.13，N4.10，S11.73％
実測値 C44.94，H4.32，N4.21，S11.42
(7) 2″−Ｏ−アセチル−4″，6″−Ｏ−ベンジリデ
ン−6′−Ｎ；4′−Ｏ−カルボニル−2′，3′−ジ
デオキシ−2′−エノ−１，３，3″−トリ−Ｎ−
トシルカナマイシンＡ（化合物）の製造
（工程９）
前項の化合物の60mg，無水ヨウ化ナトリウ
ム600mg，イミダゾール20.9mg（７倍モル）に無
水DMF1.2mlを加え、100℃で激しく撹拌しなが
ら45分間反応させた。（１〜２分で均一になる。）
熱いうちに反応液にクロロホルム12mlを加え、有
機層をとり減圧濃縮し、残渣を得た。これをクロ
ロホルムで抽出し、クロロホルム層を順次、
0.1Mチオ硫酸ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素
ナトリウム水溶液、水で洗浄し、芒硝乾燥後、濃
縮乾固して、表題化合物をガラス状固体とし
て47mg得た。
(8) 2″−Ｏ−アセチル−4″，6″−Ｏ−ベンジリデ
ン−6′−Ｎ；4′−Ｏ−カルボニル−2′，3′−ジ
デオキシ−１，３，3″−トリ−Ｎ−トシルカナ
マイシンＡ（化合物）の製造（工程10）
酸化白金21.2mgにTHF−水（２：１）２mlを
加え、水素圧３Kg／cm2下に30分間振とうして、触
媒を活性化した。これに前項の化合物の100
mgを加え、水素圧3.5Kg／cm2の水素下に振とうし
て、45分間反応させた。反応液を過し、液を
濃縮乾固し、表題化合物の96mgをガラス状固
体として得た。
〔α〕23 D＋10゜（c1.0，アセトン）
元素分析値 C49H58N4O17S3として
計算値 C54.94，H5.46，N5.23，S8.98％
実測値 C54.58，H5.54，N5.02，S8.70
(9) 4″，6″−Ｏ−ベンジリデン−2′，3′−ジデオ
キシ−１，３，3″−トリ−Ｎ−トシルカナマイ
シンＡ（化合物）の製造（工程11）
前項の化合物の178mgにTHF−3N−
NaOH（２：１）3.6mlを加え（２層になる。）撹
拌しながら50℃で2.5時間反応させた。反応液を
減圧濃縮し、残渣をダウエツクス50W×２（NH+ 4
型）レジン10mlにて、メタノール−3Nアンモニ
ア水（２：：１）で展開し、溶出したニンヒドリ
ン陽性部分を合わせて、濃縮乾固し、表題化合物
の166.7mgを得た。
(10) 2′，3′−ジデオキシカナマイシンＡ（化合物
）の製造（工程12）
前項の化合物の166.7mgを−50℃の液体ア
ンモニア15mlに溶解し、金属ナトリウム0.2ｇを
加え、１時間放置した後、反応液に１％の水を含
むTHF水を加えて、残留のナトリウムを除き、
温度を徐々に室温まで上昇させて、アンモニアを
留去せしめた。残渣をダウエツクス50W×２
（NH+ 4型）レジンカラムにつめ、1Nアンモニア
水で溶出し、ニンヒドリン活性部分を集め、濃縮
乾固し、表題化合物の63.4mgを得た。
〔α〕23 D＋114゜（c1.0，水）
融点 148〜162℃
元素分析値 C18H36N4O9・H2Oとして
計算値 C44.35，H4.44，N10.89％
実測値 C44.08，H7.33，N10.72
ペーパークロマトグラフイー（Toyo紙No.50，
ブタノール：ピリジン：水：酢酸＝６：４：３：
１，下降法64時間展開）にてRfカナマイシン
A2.0である。[Table] The synthesis of 2',3'-dideoxykanamycin A of the present invention starts from kanamycin A.
It can be manufactured using two routes. The first manufacturing method consists of the following steps. First, against kanamycin A (compound) in water.
All amino groups of kanamycin A were protected with ethoxycarbonyl groups by the action of ethyl chlorocarbonate in the presence of NaOH (step 1), and all amino groups other than the hydroxyl group at the 5-position were protected by the action of benzoyl chloride in pyridine. The hydroxyl group is blocked with a benzoyl group (Step 2), and the benzoyl group is selectively removed from the 2'-position hydroxyl group by the action of hydrazine hydrate in pyridine (Step 3). Patent application related to 1982-
113578). As a result, as a kanamycin A derivative in which all hydroxyl groups other than the 5-position and 2-position hydroxyl groups and all amino groups are protected,
3′, 4′, 2″, 4″, 6″-penta-O-benzoyl-
Tetra-N-ethoxycarbonylkanamycin A
(compound) is prepared. This protected derivative is reacted with a sulfonylating agent such as mesyl chloride in pyridine to sulfonylate the 2'-position hydroxyl group, such as mesylation (step 4), and the resulting 2'-O-mesyl form (compound) is converted into methanol- Treatment with an alkali alcoholate (e.g. sodium methylate) in dioxane (step 5) converts the 2'-methylsulfonyloxy group into
3'-benzoyloxy group to form an epoxide ring (epoxidation) and at the same time all O-benzoyl groups at other positions are eliminated, thereby forming 2',3'-anhydro-2 ′-epi-tetra-
N-ethoxycarbonylkanamycin A is formed. This is again reacted with benzoyl chloride in pyridine (step 6) to benzoylate all hydroxyl groups except for the 5-position hydroxyl group.
2′,3′-anhydro-4′,2″,4″,6″-tetra-
This leads to O-benzoyl-2'-epi-tetra-N-ethoxycarbonylkanamycin A (compound). Next, when an alkali iodide, such as sodium iodide, is applied to this 2'-epi compound in acetone while heating (step 7), the epoxide ring opens and a compound in which the 3' position is iodized is formed. As, 4′, 2″,
4″,6″-tetra-O-benzoyl-3′-deoxy-2′,3′-di-epi-3′-iodo-tetra-N-
Ethoxycarbonylkanamycin A (compound)
is generated. This compound is treated with 4-dimethylaminopyridine and mesyl chloride in pyridine in the presence of triethylamine (Step 8)
, 2′-enolation occurs, and 4′,2″,4″,6″-tetra-O-benzoyl-2′,3′-dideoxy-2′-eno-tetra-N-ethoxycarbonylkanamycin A ( Treatment of the 2'-eno form with an alkali alcoholate such as sodium methylate in methanol (step 9) produces
The O-benzoyl group is eliminated. Further, when this debenzoyl product is treated with an aqueous sodium hydroxide solution (step 10), the N-ethoxycarbonyl group is eliminated and the deprotection is completed. This gives 2′, 3′−
Dideoxy-2'-enokanamycin A (compound)
(which is a new compound) is produced. When this is reduced with hydrogen in water in the presence of a hydrogenation catalyst such as platinum oxide, palladium, etc. (step 11), the desired 2′,
3'-dideoxykanamycin A (compound) is obtained. The outline of the first manufacturing method described above is illustrated in the following chart. However, in the figure, Cbe is an ethoxycarbonyl group, Bz
represents a benzoyl group, and Ms represents a mesyl group (ie, a methylsulfonyl group). In the first production method described above, both step 1 of the reaction to introduce an ethoxycarbonyl group to protect the amino group of kanamycin A and step 2 of the reaction to introduce the hydroxyl group to protect the benzoyl group are carried out using conventional protection methods. It can be implemented by law. Details of the implementation method of step 3 for the hydrazine-pyridine treatment to selectively eliminate the 2'-O-benzoyl group can be found in Japanese Patent Application No. 1983.
-It is stated in the specification of No. 113578. Furthermore, in step 4 of sulfonylating the 2'-hydroxyl group of the compound, as the sulfonylating reagent, tosyl chloride and benzylsulfonyl chloride can be used in addition to mesyl chloride. In addition to pyridine, dichloromethane containing triethylamine (used in a molar amount 2 to 10 times that of the sulfonylation reagent) can be used as a solvent.
The sulfonylation reaction proceeds at a temperature of -10 to 80°C, preferably 15 to 30°C. Step 5 of epoxidizing the 2′ and 3′ positions of the compound
For this purpose, a lower alkanol and an alcoholate of an alkali metal such as sodium or potassium are used in an amount of 5 to 20 times the molar amount of the compound. As the solvent, lower alkanol or lower alkanol and tetrahydrofuran, dioxane, DMF, etc. can be used, and the temperature condition is preferably 0 to 50°C. In Step 6, in which O-protection of the deprotected hydroxyl group is carried out again, benzoyl chloride, acetyl chloride, benzoic anhydride, acetic anhydride, etc. are used in an amount of 5 to 15 times the mole of the starting material. Pyridine, triethylamine/dichloromethane (the amount of triethylamine is 2 to 10 times the mole of the reagent) can be used as the solvent, and the temperature condition is preferably -10 to 60°C. In Step 7 of iodizing the 3'-position of the obtained compound, sodium iodide, potassium iodide, etc. can be used as an iodizing reagent in an amount of 4 to 10 times the molar amount of the compound. At this time, formic acid, H
It is preferable to use a buffer consisting of a lower fatty acid such as -(CH 2 ) o -CO 2 H (n=1 to 4) or a lower fatty acid and its sodium salt. As the solvent, acetone, tetrahydrofuran, dioxane, dimethylformamide can be used, and the temperature condition is preferably 50 to 120°C. In step 8, 2'-enoation of the obtained compound is carried out by converting 4-dimethylaminopyridine (of the compound into
mesyl chloride, benzylsulfonyl, etc. A chloride such as chloride, tosyl chloride, trifluoromethylsulfonyl chloride (an amount of 3 to 7 times the mole of the compound) is reacted. A base is not necessarily required. Pyridine is used as the solvent, and the temperature conditions are 10 to 120℃ (when no base is used)
90-120°C) is preferred. In step 9 of O-deprotection from the obtained compound, a lower alkanol and an alkali metal alcoholate such as sodium or potassium alcoholate (3 to 7 times the molar amount of the compound) are used as reactants.
The temperature condition is preferably 0 to 50°C. Subsequently, in step 10 of N-deprotection, an aqueous solution of sodium hydroxide, potassium hydroxide, and barium hydroxide (30 to 100 times the molar amount of the O-deprotected form of the compound) is reacted. The temperature is preferably 80 to 100°C. In Step 11 of the reduction of the obtained compound, hydrogenation of the 2'-eno double bond is performed, which is performed by adding hydrogen in the presence of platinum oxide (hydrogen pressure is normal pressure to 3 atm).
It will be carried out in The temperature condition is preferably 10 to 50°C.
Hydrogenation saturates the double bonds of the compound, producing 2',3'-dideoxykanamycin A. The second method for producing 2',3'-dideoxykanamycin A consists of the following steps. That is, approximately 1% of kanamycin A in water
The 6' amino group of kanamycin A is selectively protected by the action of a molar ratio of benzyloxycarbonyl chloride (Step 1) (Carbohydrate
Research, Vol. 89, pp. 91-101 (1981)). next,
The obtained 6'-N-benzyloxycarbonylkanamycin A is treated with tosyl chloride in a molar ratio of about 3 in pyridine, thereby protecting the remaining amino groups with tosyl groups (step 2). Out
(see Carbohydrate Research) and 6′-N-benzyloxycarbonyl-1,3,3″-tri-N-
Tosylkanamycin A (compound) can be prepared. In order to simultaneously protect the two hydroxyl groups at the 4'' and 6'' positions of this compound, 4'',6''-O-benzylidene formation is performed (Step 3). The benzylidene group can be introduced by a known method such as using benzaldehyde dimethyl acetal in the presence of p-toluenesulfonic acid or benzaldehyde in the presence of zinc chloride. This gives 6'-N-benzyloxycarbonyl-
4″,6″-O-benzylidene-1,3,3″-tri-
N-tosyl-kanamycin A (compound X) is produced. When this compound X is treated with sodium hydride in DMF (step 4), the 4'-hydroxyl group
The 6'-benzyloxycarbonylamino groups react with each other to form a 4',6'-carbamate ring, thereby achieving 4',6'-O,N-protection.
At this time, 4″,6″-O-benzylidene-6′-N:
4′-O-carbonyl-1,3,3″-tri-N-tosylkanamycin A (compound XI) is produced. Hydroxyl groups at the 2′ and 3′ positions of compound XI are selectively 1,1-dimethoxycyclohexane is acted upon, e.g. in dichloromethane, under controlled reaction conditions for occlusion (step 5).
, 2′,3′-O-cyclohexylidene is carried out to form 4″,6″-O-benzylidene-6′-N:4′-O
-Carbonyl-2',3'-O-cyclohexylidene-1,3,3''-tri-N-tosylkanamycin A
(Compound XII) is produced. Next, Compound XII is acetylated with acetic anhydride to protect the 2″-hydroxyl group (Step 6), resulting in -N: 4'-O-carbonyl-2',
3'-O-cyclohexylidene-1,3,3'-tri-N-tosylkanamycin A (compound) is produced. Furthermore, the occluded 2′ position in the compound,
Hydrolysis with 80% acetic acid aqueous solution to release the hydroxyl group at the 3′ position (step 7) results in 2′,
The 3′-O-cyclohexylidene group is eliminated and the 2″-
O-acetyl-4″,6″-O-benzylidene-6′-
N: 4'-O-carbonyl-1,3,3'-tri-N
- Tosylkanamycin A (compound) is produced. In order to trifluoromethylsulfonylate the 2'- and 3'-position hydroxyl groups of this compound, it is reacted with anhydrous trifluoromethylsulfonyl (CF 3 SO 2 ) 2 in pyridine (Step 8), and 2''-O −
Acetyl-4″,6″-O-benzylidene-6′-N:
4'-O-carbonyl-2',3'-di-O-trifluoromethylsulfonyl-1,3,3''-tri-N-
Tosylkanamycin A (compound) is produced. Further treatment of the compound with alkali metal iodide in the presence of imidazole in DMF results in 2'-enolation (step 9). By this, 2″-O
-acetyl-4″,6″-O-benzylidene-6′-
N: 4'-O-carbonyl-2',3'-dideoxy-
2'-eno-1,3,3''-tri-N-tosylkanamycin A (compound) is produced. When this compound is reduced with hydrogen in the presence of a platinum oxide catalyst (step 10), 2'- The eno double bond is hydrogenated to 2″-O-acetyl-4″,6″-O-benzylidene-6′-N:4′-O-carbonyl-2′,3′-
Dideoxy-1,3,3″-tri-N-tosylkanamycin A (compound) is produced. When the compound is treated with alkali hydroxide in THF, the 4′,6′-carbamate ring is cleaved and the 2 ″-O-acetyl group is also removed (step 11),
4″,6″-O-benzylidene-2′,3′-dideoxy-1,3,3″-tri-N-tosylkanamycin A
(compound) is produced. When this compound is treated with an alkali metal in liquid ammonia to remove all protecting groups (step 12), the tosyl group and 4'',6''-O-benzylidene group are removed at once, resulting in the desired 2 ',3'-dideoxykanamycin A is obtained. The outline of the above-mentioned second manufacturing method is illustrated in the following chart. However, in the figure, Z is a benzyloxycarbonyl group,
Ts represents a tosyl group, Ac represents an acetyl group, and Tf represents a trifluoromethylsulfonyl group. In the second manufacturing method above, kanamycin A
Step 1 of the reaction for introducing a benzyloxycarbonyl group to protect the 6'-amino group and Step 2 of the reaction for introducing a tosyl group into another amino group can be carried out by known methods. Furthermore, for 4'',6''-O-benzylidene formation in step 3, benzaldehyde dimethyl acetal and p-toluenesulfonic acid, or benzaldehyde and zinc chloride are allowed to react. Dimethylformamide is used as the solvent, and the temperature condition is preferably 10 to 30°C. 4', 6'- in step 4
For carbamate formation, sodium hydride is reacted in an amount of 5 to 15 times the molar amount of the compound, dimethylformamide is used as a solvent, and temperature conditions are preferably 10 to 40°C. 2', 3'- in step 5
In O-cyclohexylidene, 1,1-dimethoxycyclohexane is reacted with an acid catalyst such as trifluoroacetic acid, trichloroacetic acid, p-toluenesulfonic acid and molecular sieves 4A.
Or a demethanol agent such as 5A is present.
Dimethylformamide and a dichloromethane-dimethylformamide mixed solvent are used as the solvent. In the 2″-O-acetylation in step 6, acetic anhydride and acetyl chloride are used, but benzoic anhydride and benzoyl chloride (2 to 10 of compound
2″-O-protection can also be achieved by benzoylation using 2″-O-acylation (acetylation).Solvents for 2″-O-acylation (acetylation) include pyridine, triethylamine/dichloromethane (triethylamine is compound 10 times the mole) can be used, and the temperature conditions are 10
~50°C is preferred. For 2',3'-O-deprotection in step 7, 50-90% aqueous acetic acid, 0.2-1.0% trifluoroacetic acid or trichloroacetic acid is suitable, and temperature conditions are preferably 20-50°C. . For trifluoromethylsulfonylation of the hydroxyl groups at the 2′ and 3′ positions in step 8,
Trifluoromethanesulfonyl anhydride and trifluoromethanesulfonyl chloride (3 to 10 times the mole of the compound) can be used. Pyridine is suitable as the solvent, and the temperature condition is preferably -10 to 30°C. For the 2'-enolation in step 9, sodium iodide, potassium iodide, sodium iodide or potassium iodide/imidazole, sodium iodide or potassium iodide/zinc (sodium iodide, potassium iodide are 50-100
3 to 10 times the mole of the compound for imidazole). The temperature condition is preferably 80 to 120°C. The reduction reaction in step 10 is carried out in the presence of platinum oxide using hydrogen (hydrogen pressure is normal pressure to 5 atm), and the solvent may be tetrahydrofuran, dioxane, methanol, or a water-containing system thereof. For deprotection by cleavage of the 4′,6′-carbamate ring in step 11, sodium hydroxide,
Hydrolysis is performed using potassium hydroxide and barium hydroxide. At this time, suitable solvents include hydrous tetrahydrofuran, dioxane, and dimethoxyethane (solvent: hydrous system with H 2 O=2:1), and the temperature conditions are 20 to 70°C. In step 12, the amino and hydroxyl groups of the compound are deprotected by treatment with an alkali metal such as sodium or potassium in liquid ammonia using known techniques. The appropriate temperature condition is -70 to -40°C. In this way, the desired 2',3'-dideoxykanamycin A is produced. Next, the present invention will be explained with reference to Examples. Example 1 shows an example in which the target compound of the present invention is synthesized by the first production method, and Example 2 shows an example in which the target compound of the present invention is synthesized by the second production method. Example 1 (1) Production of tetra-N-ethoxycarbonyl kanamycin A (Step 1) 40 g of kanamycin A sulfate was dissolved in a mixture of 400 ml of 2N-NaOH aqueous solution and 200 ml of methanol, and 69 ml of ethyl chlorocarbonate was added dropwise into the solution. The mixture was stirred at room temperature for 4 hours. The precipitate was filtered, washed with water, and then dried. Yield 45.7g (86%) mp266-267℃ (decomposition) [α] 25 D +48.3゜ (e0.5, DMF) Elemental analysis Calculated value (C 30 H 52 N 4 O 19 ): C46.62, H6 .80, N7.25% Actual value: C45.92, H6.79, N7.05% (2) Production of hexa-O-benzoyl-tetra-N-ethoxycarbonylkanamycin A (Step 2) In the previous section (1) To a solution of 7.73 g of the obtained tetra-N-ethoxycarbonylkanamycin A in 200 ml of pyridine was added 12.2 ml of benzoyl chloride, and the mixture was left at 5° C. overnight to effect O-benzoylation. After adding 1 ml of water, the solvent was distilled off under reduced pressure and 300 ml of ethyl acetate was added to the residue.
was added, washed with water, washed with saturated sodium bicarbonate solution, and finally washed twice with water. The organic layer was dried over sodium sulfate and concentrated under reduced pressure to obtain 13.6 g (97.3%) of the title compound. mp195~215℃ [α] 25 D +100.7℃ (C0.9, CHCl 3 ) Elemental analysis Calculated value (C 72 H 76 N 4 O 25 ): C61.87, H5.49, N4.01% Actual value : C61.78, H5.42, N3.87% (3) 3′,4′,2″,4″,6″-penta-O-benzoyl-tetra-N-ethoxycarbonyl-kanamycin A (compound) Production (Step 3) Add 0.48 ml of hydrazine hydrate to a solution of 42 g of the product from (2) above in 60 ml of pyridine, and leave it at room temperature overnight to selectively remove the 2'-O-benzoyl group. After adding 2 ml of acetone, the solvent was distilled off under reduced pressure, and the residue was diluted with ethyl acetate.
Added 150ml. After washing with water, it was washed with a 1N-KHSO 4 aqueous solution, then with a saturated sodium bicarbonate solution, and finally washed twice with water. After drying the organic layer over magnesium sulfate, the solvent was distilled off under reduced pressure to obtain 3.8 g of a crude substance. This was purified by chromatography on silica gel (75 g) to yield 2.6 g (67%) of the title material. mp193~202℃ [α] 25 D +85.5゜ (c.1.0, CHCl 3 ) Elemental analysis Calculated value (C 65 H 72 N 4 O 24 ): C60.35, H5.62, N4.33% Actual value : C59.41, H5.51, N4.32% (4) 3', 4', 2'', 4'', 6''-penta-O-benzoyl-2'-O-methylsulfonyl-tetra-N-
Ethoxycarbonylkanamycin A (compound)
Formation (Step 3) The product (3.0 g, 2.32 mmol) of the previous section (3) was dissolved in pyridine (30 ml), and mesyl chloride (0.63 mmol) was dissolved in pyridine (30 ml).
ml, 8.08 mmol) and stirred at room temperature for 1 hour. After adding water (0.2 ml), the solvent is distilled off under reduced pressure and the residue is dissolved in 100 ml of ethyl acetate. After washing with water (50ml x 1), saturated sodium bicarbonate solution (50ml), and water (50ml x 2), drying with magnesium sulfate,
The solvent is removed under reduced pressure. The resulting crude material was purified by silica gel chromatography (Wako Gel C
-200 60g, CHCl3 : CH3OH =50:1) to give the title compound (2.98g, 93.7%). mp167～178℃ [α] 24 D +101.7° (c.1.0, CHCl 3 ) NMR (CDCl 3 ) δ: 2.7 (3H, s, −SO 2 CH 3 ) 7.2
~8.2 (25H, m, C 6 H 5 CO−) Elemental analysis (C 66 H 74 N 4 O 26 S): Calculated value C57.79, H5.45, N4.09, S2.33% Actual value C57. 82, H5.44, N4.01, S2.39% (5) 2′,3′-anhydro-4′,2″.4″,6″-tetra-O-benzoyl-2′-epi-tetra- Production of N-ethoxycarbonylkanamycin (compound) (Steps 5-6) (2.84 g, 2.07 mmol) of the compound of the previous section (4)
Dissolve in a mixture of methanol (60 ml) and dioxane (60 ml), add sodium methylate (28% methanol solution, 4 ml, 20.7 mmol), and stir at room temperature for 18 hours. After neutralizing with 1N hydrochloric acid under ice cooling, the solvent was distilled off under reduced pressure. The residue was dissolved in pyridine (100 ml) and benzoyl chloride (2.5 ml,
21.5 mmol) and stirred at room temperature for 60 minutes. After adding water (0.5 ml), the solvent is evaporated under reduced pressure and the residue is dissolved in ethyl acetate (70 ml).
Wash this with water (50ml x 1), and saturated sodium bicarbonate water (50ml x 1).
2) After washing with water (50ml x 2), dry with magnesium sulfate. The residue (2.42 g) obtained by distilling off the solvent was subjected to silica gel chromatography (Wakogel C-200 50 g, CHCl 3 :CH 3 OH=50:
Separation and purification using 1) yielded the title compound (1.98 g, 82
%)was gotten. mp133-146℃ [α] 20 D +74.5゜ (c1.0, CHCl 3 ) Elemental analysis (C 58 H 66 N 4 O 22 ): Calculated value C59.47, H5.69, N4.78% Actual value C59.66, H5.71, N4.56% (6) 4′, 2″, 4″, 6″-tetra-O-benzoyl-
Production of 3'-deoxy-2',3'-di-epi-3'-iodo-tetra-N-ethoxycarbonylkanamycin A (compound) (Step 7) (1.85 g, 1.58 mmol of the compound of the previous section (5)) )
Dissolve in acetone (45 ml), add sodium iodide (1.36 g, 9.07 mmol) and acetic acid (1.26 ml),
React for 8 hours under stirring and reflux. After cooling, the solvent was distilled off under reduced pressure, and the residue was dissolved in ethyl acetate (70 ml). Wash this with water (50 ml x 2) and dry with magnesium sulfate. The residue (2.0 g) obtained by distilling off the solvent was subjected to silica gel chromatography (Wakogel C-200 50 g, CHCl 3 :CH 3 OH=
Separation and purification using 45:1) yielded the title compound V (1.54 g,
75%) was obtained. mp150~155℃ [α] 20 D +33.0゜ (c0.8, CHCl 3 ) Elemental analysis (C 58 H 67 N 4 O 22 I): Calculated value C53.61, H5.21, N4.31, I9 .78% Actual value C53.46, H5.20, N4.23, I10.01% (7) 4′, 2″, 4″, 6″-Tetra-O-benzoyl-
2',3'-dideoxy-2'-eno-tetra-N-
Ethoxycarbonylkanamycin A (compound)
Formation of (Step 8) (1.0 g, 0.77 mmol) of the compound of the previous section (6)
was dissolved in pyridine (20 ml), 4-dimethylaminopyridine (90 mg, 0.74 mmol), triethylamine (1 ml) and mesyl chloride (0.3 ml, 3.8 mmol) were added, and the mixture was stirred at room temperature for 5 hours. This was poured into ice water (50 ml), and the precipitate was collected in ethyl acetate (70 ml).
ml). The organic layer was washed with 1N potassium hydrogen sulfate solution (50 ml), water (50 ml), and saturated sodium bicarbonate solution (20 ml).
ml), washed with water (50 ml x 2), and then dried with magnesium sulfate. The residue (0.85 g) obtained by distilling off the solvent was subjected to silica gel chromatography (Wakogel C-200 20 g, CHCl 3 :CH 3 OH=50:
Separation and purification using 1) yielded the title compound (0.65g, 73
%)was gotten. mp151~158℃ (dec) [α] 22 D +77.5 (c0.8, CHCl 3 ) Elemental analysis (C 58 H 66 N 4 O 21 ) Calculated value C60.30, H5.77, N4.85% Actual measurement Value C60.11, H5.76, N4.80% (8) Production of 2',3'-dideoxy-2'-eno-kanamycin A (compound) (Steps 9-10) 500 mg, 0.43 mmol)
Dissolve in methanol (10 ml), add sodium methylate (0.3 ml of 28% methanol solution, 1.5 mmol), and let stand at room temperature for 30 minutes. The solvent was distilled off under reduced pressure, and water (5 ml) and sodium hydroxide (1.5 g) were added to the resulting residue. This at 100℃
Stir for 3 hours, leave to cool, add water (100ml),
Neutralize by adding concentrated hydrochloric acid. This is amber light
CG-50 (NH + 4 type 20ml, 0.3N-ammonia aqueous solution)
The title compound (135 mg, 70%) was isolated and purified using
was gotten. mp165-173℃ [α] 22 D +106.4゜ (c0.7, H 2 O) NMR (D 2 O) δ: 6.00 (1H, d, J = 10Hz, 3'-
H), 5.82 (1H, m, 2′-H), 5.43 (1H, m, 1′-H), 5.00 (1H, d, J=4Hz, 1″-H) 3.45 (1H, q, J= 4,10Hz H-2″), 2.96 (1H, t, J=10Hz, H-3″) Elemental analysis (C 18 H 34 N 4 O 9・H 2 O) Calculated value C46.14, H7.76, N11.96% Actual value C46.25, H7.77, N11.82% (9) Production of 2',3'-dideoxykanamycin A (compound) (Step 11) Preparation of the compound (100 mg, 0.22 mmol)
was dissolved in water (5 ml), platinum oxide (10 mg) was added, and catalytic reduction was carried out at room temperature and normal pressure for 3 hours. Remove the insoluble matter and pour the liquid into Amberlite CG-50.
Purification by (3 ml of NH + 4 form, 0.3 N aqueous ammonia) gave the title compound (84 mg, 83%). mp148～162℃ [α] 23 D +114° (c1.0, water) 13 C-NMR (measured in D 2 O, PD10): 1″-C 100.9 (ppm) 1-C 51.4 1′-C 98.8 3-C 50.1 6-C 88.8 6'-C 42.6 4-C 86.1 2-C 36.5 5-C 75.6 3'-C 29.3 5'-C 73.0 2'-C 26.8 2''-C 72.8 5''-C 72.7 4″-C 70.2 4′-C 67.7 6″-C 61.1 3″-C 55.1 Example 2 (1) 6′-N-benzyloxycarbonyl-4″,
6″-O-benzylidene-1,3,3″-tri-N
-Production of tosylkanamycin A (compound) (steps 1 to 3) 6'-N-benzyloxycarbonyl-1,3,
3″-tritosylkanamycin A (compound)
Carbohydrate Research, vol. 89, 91-101, (1981)
prepared from kanamycin A by the method of
Dissolve 1.58 g (1.46 mmol) in 8 ml of anhydrous N,N-dimethylformamide (DMF), add 0.27 ml of benzaldehyde dimethyl acetal (1.2 molar ratio) and 55 mg of p-toluenesulfonic acid monohydrate, and react at room temperature. Ta. After 7 hours, 0.13 ml of benzaldehyde dimethyl acetal (0.6 molar ratio)
Added. After 30 hours, the mixture was poured into 320 ml of ice-cooled saturated sodium bicarbonate water. Remove the white precipitate that has formed,
Washing with water and ethyl ether and drying the resulting material gave the title compound X as 1.60 g of a pale yellow solid. [α] 23 D −22゜ (c0.5, tetrahydrofuran) Elemental analysis value C 54 H 64 N 4 O 19 Calculated value as S 3 C55.47, H5.52, N4.79, S8.23% Actual value C55 .30, H5.49, N4.84, S8.28 (2) 4″, 6″-O-benzylidene-6′-N; 4′-O
-Production of carbonyl-1,3,3″-tri-N-tosylkanamycin A (compound XI) (Step 4) 4.65 g (3.98 mmol) of the compound Under,
1.72g (9 times mole) of 80% oily sodium hydroxide
was added and reacted at 0° C. for 1 hour with vigorous stirring, and then further reacted at room temperature overnight. below 0℃
14.8 ml of 25% aqueous acetic acid (1.7 times the mole of NaH) was added, and the mixture was concentrated under reduced pressure. Water was added to the residue and the solid formed was collected, washed with water and dried. After further washing with ethyl ether and drying, the title compound XI
3.97g of was obtained. [α] 22 D −43° (c1.0, acetone) Elemental analysis value C 47 H 56 N 4 O 18 Calculated value as S 3 C53.20, H5.32, N5.28, S9.07% Actual value C52 .85, H5.39, N5.26, S8.81 (3) 4″, 6″-O-benzylidene-6′-N; 4′-O
-Carbonyl-2',3'-cyclohexylidene-
1,3,3″-tri-N-tosylkanamycin A
Production of (Compound XII) (Step 5) 3.97 g (3.74 mmol) of Compound
ml, 1,1-dimethoxycyclohexane 10.8ml
(20 times the mole) and heated under reflux for 10 minutes,
2.1 ml (5 times the mole) of trifluoroacetic acid was added, and reflux was continued for 6 hours using a device in which molecular sieve 5A was inserted during reflux. After the reaction, concentrate under reduced pressure,
The residue was poured into an ice-cooled saturated aqueous sodium hydrogen carbonate solution, and the resulting precipitate was collected. This precipitate was thoroughly washed with ethyl ether and then water, and dried to obtain 4.15 g of the title compound XII as a pale yellow solid. [α] 23 D −33° (c0.6, acetone) Elemental analysis value C 53 H 64 N 4 O 18 Calculated value as S 3 C55.78, H5.65, N4.91, S8.43% Actual value C55 .47, H5.77, N4.88, S8.30 (4) 2″-O-acetyl-4″, 6″-O-benzylidene-6′-N; 4′--O-carbonyl-2′, 3′−
O-cyclohexylidene-1,3,3″-tri-
Production of N-tosylkanamycin A (compound) (Step 6) 5.26 g (4.6 mmol) of Compound
ml (10 times the mole) was added, the temperature was returned to room temperature, and the mixture was allowed to react overnight. The reaction solution was poured into a large amount of saturated aqueous sodium bicarbonate solution, and the resulting white precipitate was collected and dried to obtain 5.52 g of a crude product. This was subjected to silica gel chromatography (Wako Gel C-200, developing system, chloroform:acetone = 10:7 → 10:8 →
10:9) to give 3.51 g of the title compound as a glassy solid. [α] 22 D +40゜ (c1.0, acetone) Elemental analysis value C 55 H 66 N 4 O 19 Calculated value as S 3 C55.82, H5.62, N4.73, S8.13% Actual value C55. 47, H5.75, N4.75, S7.92 (5) 2″-O-acetyl-4″, 6″-O-benzylidene-6′-N; 4′-O-carbonyl-1,3,
Production of 3″-tri-N-tosylkanamycin A (compound) (Step 7) Add 1.88 g (1.59 mmol) of the compound in the previous section to
Add 38 ml of 80% aqueous acetic acid, react the suspension at 40°C for 3.5 hours with vigorous stirring, pour the reaction solution into a large amount of saturated aqueous sodium bicarbonate solution, collect the resulting precipitate, wash with water, Dry crude product 1.44
I got g. This was purified by silica gel chromatography (Wako Gel C-200, developing system chloroform:acetone = 1:1→1:2→acetone) to obtain 0.99 g of the title compound as a glassy solid. [α] 23 D −8゜ (c1.0, acetone) Elemental analysis value C 49 H 58 N 4 O 19 Calculated value as S 3 C53.35, H5.30, N5.08, S8.72% Actual value C53 .34, H5.21, N5.13, S8.66 (6) 2″-O-acetyl-4″,6″-O-benzylidene-6′-N; 4′-O-carbonyl-2′,3 '-di-O-trifluoromethylsulfonyl-1,
Production of 3,3″-tri-N-tosylkanamycin A (compound) (Step 8) 887 mg of the compound in the previous section was mixed with 17.7 mg of anhydrous pyridine.
ml of anhydrous trifluoromethanesulfonyl (8.4 as specific gravity 1.68) under nitrogen atmosphere at 0°C.
twice the mole) and reacted at 0°C for 4 hours. The reaction solution was poured into an ice-cooled saturated aqueous sodium hydrogen carbonate solution, and the resulting precipitate was collected, washed with water, and dried to give a concentration of 1.01
g of the title compound was obtained as a pale yellow solid. [α] 23 D −32° (c1.0, acetone) Elemental analysis value Calculated value as C 51 H 56 N 4 O 23 S 5 F 6 C44.80, H4.13, N4.10, S11.73% Actual measurement Value C44.94, H4.32, N4.21, S11.42 (7) 2″-O-acetyl-4″, 6″-O-benzylidene-6′-N; 4′-O-carbonyl-2′ ,3'-dideoxy-2'-eno-1,3,3''-tri-N-
Production of tosylkanamycin A (compound) (Step 9) Add 1.2 ml of anhydrous DMF to 60 mg of the compound in the previous section, 600 mg of anhydrous sodium iodide, and 20.9 mg (7 times the mole) of imidazole, and react at 100°C for 45 minutes with vigorous stirring. I let it happen. (It will become uniform in 1 to 2 minutes.)
12 ml of chloroform was added to the reaction solution while it was hot, and the organic layer was taken and concentrated under reduced pressure to obtain a residue. Extract this with chloroform, and sequentially remove the chloroform layer.
The mixture was washed with a 0.1 M aqueous sodium thiosulfate solution, a saturated aqueous sodium bicarbonate solution, and water, dried with sodium sulfate, and then concentrated to dryness to obtain 47 mg of the title compound as a glassy solid. (8) 2″-O-acetyl-4″,6″-O-benzylidene-6′-N; 4′-O-carbonyl-2′,3′-dideoxy-1,3,3″-tri-N -Production of tosylkanamycin A (compound) (Step 10) 2 ml of THF-water (2:1) was added to 21.2 mg of platinum oxide, and the catalyst was activated by shaking for 30 minutes under a hydrogen pressure of 3 Kg/ cm2 . . This is added to 100% of the compound in the previous section.
mg was added thereto, and the mixture was shaken under hydrogen pressure of 3.5 Kg/cm 2 and allowed to react for 45 minutes. The reaction solution was filtered, and the solution was concentrated to dryness to obtain 96 mg of the title compound as a glassy solid. [α] 23 D +10゜ (c1.0, acetone) Elemental analysis value C 49 H 58 N 4 O 17 Calculated value as S 3 C54.94, H5.46, N5.23, S8.98% Actual value C54. 58, H5.54, N5.02, S8.70 (9) 4″,6″-O-benzylidene-2′,3′-dideoxy-1,3,3″-tri-N-tosylkanamycin A (compound ) (Step 11) Add THF-3N- to 178mg of the compound in the previous section.
3.6 ml of NaOH (2:1) was added (two layers formed) and the mixture was reacted at 50°C for 2.5 hours with stirring. The reaction solution was concentrated under reduced pressure, and the residue was purified by Dowex 50W x 2 (NH + 4
10 ml of resin was developed with methanol-3N aqueous ammonia (2::1), and the eluted ninhydrin-positive portions were combined and concentrated to dryness to obtain 166.7 mg of the title compound. (10) Production of 2',3'-dideoxykanamycin A (compound) (Step 12) 166.7 mg of the compound in the previous section was dissolved in 15 ml of liquid ammonia at -50°C, 0.2 g of sodium metal was added, and the mixture was left for 1 hour. After that, add THF water containing 1% water to the reaction solution to remove residual sodium.
The temperature was gradually raised to room temperature to distill off the ammonia. Dowex the residue 50W x 2
The mixture was loaded into a (NH + 4 type) resin column and eluted with 1N ammonia water, and the ninhydrin active portion was collected and concentrated to dryness to obtain 63.4 mg of the title compound. [α] 23 D +114° (c1.0, water) Melting point 148-162°C Elemental analysis value Calculated value as C 18 H 36 N 4 O 9・H 2 O C44.35, H4.44, N10.89% Actual measurement Value C44.08, H7.33, N10.72 Paper chromatography (Toyo paper No.50,
Butanol:pyridine:water:acetic acid=6:4:3:
1. Rf kanamycin in descending method (64 hour development)
It is A2.0.