JPH0376572A - のう状体―樹枝状体菌根菌の増殖方法及びその装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明はのう状体−樹枝状体菌根菌（以下「ＶＡ菌根菌
」たいう）の増殖方法及びその装置に関する。

従来の技術 植物の根にカビやきのこなどの真菌類がついて、菌根を
形成するこεによる共生は自然界にきわめて多くみられ
る。その中でも、接合菌類であるアツギヶカビ科に属す
る６種類の内生菌（ジャイガスポーラ（Ｇｉｇａｓｐｏ
ｒａ　）　、スクテロスポーラ（Ｓｅｕｔｅｌｌｏｓｐ
ｏｒａ　）　、グロマス（Ｇｌｏｖａｕｓ）、アカウロ
スポーラ（Ａｅａｕｌｏｓｐｏｒａ　）　、スクレロシ
スチス（Ｓｅｌｅｒｏｅｙｓｔ、ｉｓ）　、ｘシト０フ
ｔスポーラ（Ｅｎｔｒｏｐｈｏｓｐｏｒａ　）　）が形
成するのう状体−樹枝状体（ＶＡ）菌根は、世界の被子
植物の８０％以上にみられることが知られている。

ＶＡ菌根菌の菌糸は比較的太いが、植物の細根や根毛よ
り細（て長く、また枝分かれしているため土壌中に広範
囲に伸長することができる。そして土壌中の水分や可溶
性的リン、カルシウム１、マグネシウムをはじめとする
ミネラルや窒素なごの栄養分を吸収し、その一部を共生
ずる植物に与える。したがって植物にＶＡ菌根が形成さ
れると、その植物は吸収する栄養分が増大し、乾燥や植
物病原菌に対する抵抗性が増し、施肥量を減少させ得る
と共に植物に耐乾燥性、耐病性を付与できる。

ＶＡ菌根菌を植物に接種し菌根を形成させるためには、
ＶＡ菌根菌を大量に培養する必要がある。

しかしＶＡ菌根菌は絶対数生菌であり、現在の技術では
純粋培養は不可能であるとされている。

これまでＶＡ菌根菌の培養に関する技術として、ＶＡ菌
根菌ε共生関係にある植物を大食培養する方法と、ＶＡ
菌根菌胞子が形成されやすい状態を作り出す方法とが提
案されている。

ＶＡ菌根菌ε共生関係にある植物の大量培養方法こして
は、ＶＡ菌根を形成した植物を栄養薄膜培養する方法（
特開昭５５−１１８３９０号公報）、双子葉植物の根を
形質転換し、ＶＡ菌根菌に感染させて大量培養する方法
（特開昭５９−９５８８３号公報）、ＶＡ菌根菌に感染
したアゼニック性菌根の根器官培養物を多孔性基体で増
殖および発育させる方法（特開昭６２−１９０２８号公
報）が知られている。

ＶＡ菌根菌用培地こしては、プレー粘土、または軽石等
の多孔性物質の吸着剤からなるものが知られている（特
開昭６０−２３７９８７号公報）。

ＶＡ菌根菌胞子の増殖方法としては、イモ類とＶＡ菌根
菌生長促進剤またはＶＡ菌根形成促進剤を吸着させた多
孔性両性イオン交換体とを含む培土にＶＡ菌根菌を接種
（２て培養するこε１こより、大量増殖する方法が知ら
れている（特開昭６３−８７９７３号公報）。

また、ＶＡ菌根の形成を容易ならしめる生態系を準備す
るために、針葉樹や広葉樹の炭化物に化学肥料または有
機質肥料を添加した炭化材を土壌に混入する方法が知ら
れている（特開昭６０−４９７１７号公報）。

発明が解決しようとする問題点 ＶＡ菌根菌の接種剤をつ（るにあたって、根の器官培養
や、形質転換した根の培養等の方法を採用すると、非常
に高額な費用がかかる。

一方、植物の栄養薄膜培養では、好水性の病原体が現わ
れるという著しい危険性が生じ、これらの病原体はいっ
たん根に付着すると共生体といっしょに蔓延する。

土壌を用いてＶＡ菌根菌を生産する場合には、土壌中に
広く胞子が分散しているため、これを収穫するには多大
な労力を必要とする。ＶＡ菌根菌の胞子が形成きれる場
所が土壌中の一部分に限られていれば、胞子の収穫が非
常に容易になるが、ＶＡ菌根菌抱子の形成場所を制御す
る方法は未だ知られていない。

また、培土中に炭類を添加する場合には、その有効な添
加場所が不明であるために、ポットあるいは圃場全体に
均一に添加する方法をこらざるを得ず、栽培コストの上
昇を引き起こすとεもに、これを過剰に添加した場合に
は培土のｐ　Ｈ変化をもたらし、植物に悪影響を与える
。またこれ迄ＶＡ菌根菌種の培土添加物に対する嗜好性
については、報告されていない。

本発明はＶＡ菌根菌を容易に且つ大量に増殖きせ得る方
法及び装置を提供しようとするものである。

問題点を解決するための手段 本発明は粒径が約Ｏ０１〜１ｍｍの粒度小なる細粒培土
εこれより粒径の大なる粗粒培土とを深さ方向の界面に
於て接触せしめて充填して形成される培土に、のう状体
−樹枝状体菌根菌を感染さぜた植物を栽培し、該菌根菌
胞子を細粒培土に選択的に形成せしめ、胞子の形成され
た細粒培土を回収することを特徴とするのう状体−樹枝
状体菌根菌の増殖方法に係るものである。

本発明者の研究によるε約０．１〜１ｍａｉの粒径の細
粒培土εこれより粒度の大なる粗粒培土とを深さ方向の
界面に於て接触せしめて充填した培土にＶＡ菌根菌を感
染させた植物を栽培する乏、植物の根は粗粒培土側で選
択的に伸長してＶＡ菌根菌との菌根を形成し、逆に胞子
は細粒培土側に選択的に形成され、ＶＡ菌根菌を効率的
に増殖及び収穫できることが見出された。本発明によれ
ば菌根菌胞子が細粒培土側に選択的に形成されるから、
細粒培土のみを回収し、必要に応じそれから胞子を採集
することによ、す、容易に且つ効率的にＶＡ菌根菌を増
殖させるここができる。

本発明に於て使用される培土は植物の成長に適したもの
であればいずれでもよいが、ふるい分けにより粒度調整
がし易い埴土、埴壌土、壌土、砂壌土等が好ましく、殊
に植物の栽培中に団粒が破壊され難いもの及び鹿沼土、
８向上、赤玉上等の多孔性のものが好ましい。これら培
土をふるい分けして細粒培土巳これ上り粒径の大なる粗
粒培土とにする。細粒培土の粒径は約０．］〜１．ａｍ
の範囲にある必要があり、斯かる粒径を有することによ
ってＶＡ菌根菌胞子を細粒培土側に選択的に形成せしめ
ることが可能さなる。細粒培土のより好ましい粒径は約
０．３〜０．７■である。粗粒培土の粒径は細粒培土よ
り大であればよく広い範囲に亘り得るが、植物の根を選
択的に粗粒培土側に形成せしめ且つ植物の良好なる生育
を図る為に約１〜５開の範囲の粒径、殊に約１〜２ｍｍ
の範囲の粒径を有するのが好ましい。

粗粒培土は細粒培土に対し約０゜５〜３倍容量となる割
合で用いるのが好ましい。粗粒培土の比率がこれをこえ
て太き（なるに従い粗粒培土中のＶＡ菌根菌胞子濃度が
増大する傾向があり、また逆に上記比率をこえて小さく
なるに従い細粒培土中の菌根菌胞子の濃度が低下する傾
向があるのみならず根が伸長できる培土量が減少し、植
物の成長が阻害される虞が生ずる。

本発明に於ては上記細粒培土と粗粒培土とを深さ方向の
界面に於て接触させて充填し植物栽培用培地とする。こ
こで深さ方向の界面は垂直方向の界面及び水平方向に対
し傾斜する界面を包含する。

水平方向に対し傾斜する界面は水平方向に対し約４５°
以上の角度で傾斜する界面であることが望ましい。

本発明に於てＶＡ菌根菌としては、ＶＡ菌根を形成させ
る菌であればいずれでもよいが、ジャイガスポーラ（Ｇ
ｉｇａｓｐｏｒａ　）　、スクテロスポーラ（Ｓｅｕｔ
ｅｌｌｏｓｐｏｒａ　）　ｓグロマス（Ｇｌｏｍｕｓ）
　ｓアカウロスポーラ（Ａｅａｕｌｏｓｐｏｒａ　）　
、スフレ０シスチス（Ｓｅｌｅｒｏｅｙｓｔｉｓ）　、
エントロフォスポーラ（Ｅｎｔｒｏｐｈｏｓｐｏｒａ　
）属に属する菌が用いられる。

具体的にはジャイガスポーラ・マルガリータ（Ｇｉｇａ
ｓｐｏｒａ　ｍａｒｇａｒｉｔａ　）　、スクテロスポ
ーラ・グレガリア、（Ｓｅｕｔｅｌｌｏｓｐｏｒａ　ｇ
ｒｅｇａｒｉａ）　、グロマス◆ファシキュラツム（Ｇ
ｌｏｍｕｓ　ｆａｓｅｉｅｕｌａｔｕｍ）、及びグロマ
ス・エツニカツム（Ｇｌｏｍｕｓｅｔｕｒｘｉｅｕｔｕ
ｍ）等があげられるが、これらに特に限定するわけでは
ない。

本発明に於て共生植物は、ＶＡ菌根菌が共生する植物で
あればいずれでもよいが、クローバ−アルファルファ等
の見料植物、とうもろこし、イモ類等の穀類、キュウリ
、トマト、レタス等の野菜、バラ、カーネーション、菊
等の観賞用植物などがあげられる。これらの植物は、粒
径の異なる培土と培土の境界又は粗粒培土に播種Ｉ、て
或は植物を植栽して栽培するのが好ましい。なお、培土
と培土の境界にスクリーン等の仕切体を設置した状態で
植物を栽培する場合には、境界付近の粗粒培土に植物を
播種又は植栽するのが好ましい。

本発明者の研究によると、ＶＡ菌根菌胞子が選択的に形
成される細粒培土に多孔性炭化物及び／又は植物残渣を
添加すると、胞子の形成が顕著に促進されるが、粗粒培
土にこれらを添加しても有意性が発現されないことが見
出された。従って本発明によれば多孔性炭化物及び／又
は植物残渣は細粒培土にのみ添加され、それにより添加
量の削減と培土のｐＨ変化を最小限に抑制できる。

また本発明者の研究によれば菌根菌種に上り上記培土添
加物に対する嗜好性が異なり、ジャイガスポーラ属及び
スクテロスポーラ属に属する菌株には多孔性炭化物が適
しており、一方グロマス属に属する菌株には植物残渣が
適していることが認められた。従って使用するＶＡ菌根
菌株の種類に応じて適当な添加物を選択使用するここが
可能さなる。

多孔性炭化物としては６種の多孔性炭化物を使用できる
。その代表的なものとしてはたεえば木炭、樹皮炭、お
がくず炭、やしから炭、植物残渣炭等を挙げるこεがで
き、これらは１抽又は２抽以上を使用できる。これら多
孔性炭化物の添加量は約１〜１０％（ｖ／ｖ）、好まし
くは約］、５〜５％（Ｖ／Ｖ）が装置である。これ以上
、多孔性炭化物の添加量を増加さぜるε土壌のｐＨが変
わり、植物の生育に悪影響を及ぼす。またこれ以下では
、添加の効果が少ない。なお、多孔性炭化物の粒径は約
０．　１〜３．０開が好ましい。また植物残渣としては
各種の植物残渣を使用できる。

その代表的なものεしては植物の茎や芽の断片、種子の
皮等を挙げることができ、たとえばとうもろこしの芽、
大豆の芽、ねぎ類の芽、むぎわら、いねわら、もみがら
等がある。これらは１種又は２種以上を使用できる。な
おこれらの植物残渣の使用に際しては植物病原菌による
感染や、目的としないＶＡ菌根菌による感染を避けるた
め、まえもって滅菌処理するのが好ましい。植物残渣の
添加量は約〕〜１０％（ｖ／ｖ）　、好ましくは約３〜
７％（Ｖ／Ｖ）が適量である。これ以上、植物残渣の添
加量を増加させると、培土に粒径差をつけた効果が少な
くなり、またこれ以下にする巳、植物残渣添加の効果が
少ない。なお、植物残渣の大きさは、長径が約０．１〜
８！１ｌＩｆｌが好ましい。

植物にＶＡ菌根菌を感染させる際には、種々の方法を採
り得るが例えば種子の下方１〜５ＣＩＩｌのεころにＶ
Ａ菌根菌の胞子、菌糸、ＶＡ菌根菌に感染した植物根等
を接種する方法を採り得る。また、これらの接種源を種
子の下方に接種する代わりに、粗粒培土全体に接種源を
分散させても良いし、種子の発芽後に根の近傍にこれら
の接種源を接種してもよい。またＶＡ菌根菌を予め感染
させた植物を植栽して栽培するこεもできる。　この様
にＶＡ菌根菌を接種して感染きせた植物又は予め感染さ
せた植物の栽培は通常約２〜４カ月間行なう。

この栽培期間が終了した後、潅水をやめて植物を枯死さ
せ、形成したＶＡ菌根菌胞子を含む細粒培土を収穫する
。あるいは、約２〜４カ月後に植物を生かしたままでＶ
Ａ菌根菌胞子を含む細粒培土を収穫し、その空隙に新し
い細粒培土を充填して植物の栽培及び胞子の増殖を継続
してもよい。

細粒培土を収穫する際には、先端が鋭利になった鋼板等
の切断具を挿入して二種の培土にまたがって伸長する根
を切断し、培土を分離するεよい。

あるいは、培土と培土の境界に耐腐食性のスクリーンを
設置１．た状態で植物を栽培し、培土を収穫する際にそ
のスクリーンを引き抜くことにより植物根を切断し、培
土を分離してもよい。また、耐腐食性のスクリーンでで
きた容器に粗粒培土を充填し、その周囲に細粒培土を挿
入して植物を栽培し、収穫時に粗粒培土の入った容器を
引き上げ容器を形成するスクリーンで根を切断するこε
によって二種の培土を分離してもよい。なお、スクリー
ンを設置する際には、そのスクリーンを二重にしておく
と根の切断が容易になる。

使用するスクリーンの目開きは、植物の細根が通過でき
る範囲で、しかも培土を分離した際に培土がこぼれ落ち
にくい範囲であればよい。具体的には、目の開きが約０
．　５ｍ１１１から約２＋ｎｍの範囲が好ましい。

収穫した培土はそのままＶＡ菌根菌接種剤と１゜て使用
することもできるが、より高濃度のＶＡ菌根菌胞子が必
要なときには、一般的な胞子の分離法を採用するこεが
できる。この場合にも、最初のＶＡ菌根菌胞子濃度が高
いため、通常の培土から胞子を回収するのに比べてはる
かに少ない労力で胞子を回収することができる。一般的
な胞子の分離方法には、湿式ふるい分は法［Ｇｅｒｄｅ
ｍａｎｎ　。

Ｊ、Ｗ、　　二　Ｍｙｃ、、　　４７．　６１９　　　
（１９５５）　　、　　Ｇｅｒｄｅｍａｎｎ　　、　　
Ｊ。

Ｗ、　＆　Ｎ１ｅｏｌｓｏｎ　、　Ｔ、Ｈ，：　Ｔｒａ
ｎｓ、Ｂｒ、Ｍｙｅｏｌ、Ｓｏｅ、　。

４６、２３５　　（１９６３）　）　　・比重液浮遊法
（Ｏｈｍｓ、　Ｒ，Ｅ、　：Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏ
ｇｙ、　４７．７５１　　（１９５７）　）やその改良
法（Ｍｏｓｓｅ、　Ｂ、　＆　Ｊｏｎｅｓ　、　Ｇ、Ｗ
、　：　Ｔｒａｎｓ、Ｂｒ、Ｍｙｅｏｌ。

Ｓｏｃ　、、５１．８０４　　（１９６８）　、　Ｆｕ
ｒｌａｎ、　Ｖ、　＆　Ｆｏｒｔｉｎ。

Ｊ、Ａ、　：　Ｎａｔｕｒａｌｉｓｔｅ　Ｃａｎａｄｉ
ａｎ、　１０２　、６６３　（１，９７５）。

Ｆｕｒｌａｎ、　Ｖ、ｅｔ、ａｌ　　：　Ｔｒａｎｓ、
Ｂｒ、Ｍｙｅｏｌ、Ｓｏｅ、　、　７５゜３３６　　（
１９８０）　）などがある。

本発明方法を実施する為の装置は、のう状体−樹枝状体
菌根菌を感染さぜた植物を栽培して菌根菌を増殖させる
装置であって、約０゜１〜１＋＋ａの粒径の粒度小なる
細粒培土を収容する細粒培土収容部と上記細粒培土上り
粒径の大なる粗粒培土を収容する粗粒培土収容部とを深
さ方向の界面に於て隣接させて備えると共に、上記界面
に細粒培土と粗粒培土との混合を防止し且つ細粒培土回
収時に栽培植物の根を切断するための仕切体を着脱可能
に設置らたことにより特徴付けられる。

第１図乃至第３図は上記本発明装置の好ましい１実施態
様を示すもので、図に於て栽培容器（１）は細粒培土収
容部（２）、！：：粒培土収容部（３）とを備え、再収
容部（２）、（３）は垂直方向の界面で隣接して設けら
れている。

上記隣接界面には再収容部（２）、（３）を区分する仕
切板（４ａ）が溝（５）により着脱可能に装着されてい
る。上記仕切板（４ａ）の下端には必要に応じ根を切断
する為の刃を設けても良い。

（６）及び（７）は各培土収容部（２）及び（３）の下
端に開口可能に設けられた培土取出用底蓋である。

第３図の装置は、第１図に示された１対の細粒培土収容
部（２）と粗粒培土収容部（３）を複数対連結させたも
ので、６対の細粒培土収容部（２）と粗粒培土収容部（
３）とが垂直方向に界面に於て仕切板（４８）を介して
隣接する様に連結されている。仕切板（４ａ）は案内溝
（５）により着脱内在に装着きれている。第３図の他の
符号の意味は第１図と同じである。

第１図及び第３図の装置に於て細粒培土収容部（２）に
粒径的０．１〜１ｍｍの細粒培土を必要に応じ多孔性炭
化物及び／又は植物残渣と混合して充填し、粗粒培土収
容部（３）にこれより粒径の大なる粗粒培土を入れた後
、仕切板（４ａ）を引き抜き、細粒培土ε粗粒培土との
界面又は粗粒培土にＶＡ菌根菌の胞子、菌糸、ＶＡ菌根
菌に感染した植物根あるいはそれらで作られたＶＡ菌根
菌接種剤を接挿し、その上に植物の種子を播種する。

あるいは先に述べたように、植物の種子が発芽した後、
根の近傍にそれらを接種してもよいし、播種する前に接
種源を粒径の粗い培土全体に分散させてもよい。

栽培した植物は、発芽から約２〜４カ月後に潅水を中止
して枯死させる。その後、仕切板（４ａ）を案内溝（５
）に沿って挿入して根を切断し、底蓋（６）をはずして
細粒培土を収穫する。さらに底蓋（７）をはずして粗粒
培土を回収する。粗粒培土中にはＶＡ菌根菌胞子や菌糸
、あるいはＶＡ菌根菌に感染した植物根が含まれている
ので、次回栽培時の接柿源εして、あるいは培土として
再利用するここも可能である。しかしながらこの場合に
は、植物の老廃物の蓄積や、植物病原菌の増殖、いわゆ
る連作障害に注意する必要がある。

植物を枯死させずに、発芽から約２〜４カ月後に植物を
生かしたままの状態で分離板（４ａ）を挿入して根を切
断し、底蓋（６）をはずして細粒培土を収穫してもよい
。この場合には、再度底蓋（６）を設置ｊ−１細粒培土
収容部（２）に細粒培土を充填し仕切板（４ａ）を引き
抜いて植物の栽培を継続する。斯くして植物の細根や、
ＶＡ菌根菌の外生菌糸が再び細粒培土側に伸長し、細粒
培土側にＶＡ菌根菌の胞子が再生産される。そして植物
の寿命がくるまで継続的にＶＡ菌根菌の胞子を多量に含
んだ培土を収穫することかできる。

第４図乃至第６図は本発明方法を実施する為の装置の他
の好ましい１例である。第４図は細粒培土収容部（２）
、！：籾粗粒東上収容部３）の１対からなる容器であり
、第６図はこれらを複数対並べた装置である。第４図及
び第６図の装置に於ては仕切体εして脱着可能な耐腐食
性の二重スクリーン（４ｂ）及び（４ｃ）が用いられて
いる。上記点を除いては第１図乃至第３図に示した装置
ε同様であって、同一符号は同一の意味を有する。

本装置によれば第１図角型第３図に説明したと同様にし
てＶＡ菌根菌に感染された植物が栽培される。但し二重
スクリーン（４ｂ）及び（４ｃ）は細粒培土収容部（２
）ε粗粒培土収容部（３）との界面に据置１７たままで
栽培される。胞子の形成された細粒培土を回収するにあ
たって、一方のスクリーン（４ｂ）を引抜き根を切断し
、底蓋（６）から細粒培土を回収する。他は第１図乃至
第３図につき説明したε同様である。

第７図は本方法を具体化した別の好ま１７い１例である
。第７図は栽培容器０．）の中に、耐腐蝕性のスゲリー
ン（４ｄ）で形成した粗粒培土収納容器（８）を−個又
は複数個載置する。容器（８）の内部には粗粒培土を充
填し、容器（８）の外側に必要に応じて多孔性炭化物及
び／又は植物残渣を混入１７た細粒培土を充填する。そ
（７て、第１０図乃至第３図につき説明したε同様に］
７てＶＡ菌根菌で感染さぜた植物を栽培する。細粒培土
の回収は容器（８）を引き上げて根を切断し、栽培容器
（１）に残された細粒培土を収穫することにより威され
る。

図面には細粒培土収容部（２）中に３個の容器（８）を
配したものを示したが、容器（８）の数は任意に増減で
きることは言う迄もない。

本発明方法は、図示の装置の如くポット栽培に準する増
殖容器においてその効果が顕著であるが、増殖容器に準
じてコンクリ−ｈや鉄板等で区分した圃場に於ても十分
使用し得る方法である。

発明の効果 本発明によれば、ＶＡ菌根菌の胞子を選択的に細粒培土
に形成せしめることができ容易に且つ大量にＶＡ菌根菌
を増殖させるここが可能となる。

また本発明によれば胞子の形成さ朴る細粒培土に多孔性
炭化物及び／又は植物残渣を添加して胞子の形成を促進
させることができ、添加量の削減と培土のｐＨ変化を最
小に抑制できる。

更に本発明によれば菌根菌種の培土添加物に対する嗜好
性の差異を利用してジャイガスポーラ属及びスクテロス
ポーラ属に属する菌株に多孔性炭化物を、グロマス属に
属する菌株に植物残渣を夫々用いることにより、各属の
菌株を効率良く増殖させることが可能となる。

実施例 以下に実施例を挙げ本発明をより具体的に説明する。本
発明がこれら実施例に限定されるものでないことは言う
迄もない。

実施例１ １　／　５０００　ａワグネルポットの向かって右半分
にエチレンオキザイドガスにより滅菌処理した粗い粒径
の芝の目上（粒径的１〜２ｍｆｆり、左半分に同じくエ
チレンオキザイドガスに、Ｊ″、り滅菌処理した細かい
粒径の芝の目上（粒径的Ｏ０１〜０、　５ｍｍ）を１　
＋　１．　（容量）の比率で入れ、アルファルファを栽
培した。なお対照こして、滅菌処理１７た粗い粒径の芝
の目上（粒径的１〜２ｍ−と細かい粒径の芝の目土（粒
径的０．１〜０．　５ｍｍ）を１：１の容量比で混合し
た培土を岡じ大きさのワグネルポットに充填し、アルフ
ァルファを栽培した。

アルファルファ種子は容器の中央に播種し、その下３〜
４ｃｍのところにジャイガスポーラ・マルガリータの胞
子を３０個接種した。なお、両方のポットに化成肥料（
窒素二リン：カリ＝？８　：　８　：５）を３ｇずつ添
加し、さらに根粒細菌（ＲｂｙｚｏｂｉｕＩＩＩｌｌｅ
ｌｆｌｏｔｉ）の懸濁液（ＯＤ＝２．０）を２１１１Ｑ
接種した。ポットは温室内に置き、適宜潅水を行ない３
力月間栽培した。

その後潅水を中止してアルファルファを枯死させ、栽培
していた土壌をサンプリングし、各々の土壌中のＶＡ菌
根菌胞子数を散見た。粒径差をつけた培土では、粗い土
壌中に土壌１００ｅｅあたり５０個、細かい土壌中には
土壌１００ｃｃあたり２５０個のＶＡ菌根菌胞子が確認
された。・一方、粒径差をつけない培土では、土壌１０
０ｃｃあた０１２０個のＶＡ菌根菌胞子が確認された。

すなわち、土壌に粒径差をつけることにより、細かい粒
径の土壌中にＶＡ菌根菌の胞子が大量に形成されること
が確認された。

実施例２ １　／　５０００　ａワグネルポットの向かって右半分
にエチレンオキサイドガスにより滅菌処理した粗い粒径
の赤玉土（粒径的］、〜２＋１１１１）、左半分に同じ
くエチレンオキサイドガスにより滅菌処理した細かい粒
径の赤玉土（粒径的０．５〜１．０Ｉｌｌｆｆｌ）を入
れ、大豆を栽培した。大豆の種子はポットの中央に播種
し、その下３〜４ｃＩ＋１のところにスキュテロスポー
ラ・グレガリアの胞子を３０個接種した。

上記のポットを１９０個準備し、多孔性炭化物として木
炭、植物残渣としてもみがらを用いて表−１に示す実験
区を設定して、各条件１０ポツトずつ栽培を行なった。

なお、すべてのポットに化成肥料（窒素二リン：カリ−
８８８：　５）を３ｇずつ添加し、さらにすべてのポッ
トに根粒細菌（Ｒｈｙｚｏｂｉｕｍ　ｊａｐｏｎｉｅｕ
ｍ　）の懸濁液（０Ｄ−２，０）を２−ずつ接種した。

ポットは温室内に置き適宜潅水を行なった。

実験開始後婬カ月目に潅水を中止し大豆を枯死させた。

そして各ポットの土壌を粒径の粗いものこ細かいものを
別々にサンプリングし、各々の土壌中のＶＡ菌根菌胞子
数を数えた。その結果を表−２に示す。

表−２に示したように、木炭を粒径の細かい土壌中に１
〜１０％（Ｖ／ｖ）、特に１゜５〜５％（Ｖ／Ｖ）添加
したポットで胞子形成の促進がみられた。なお、大きな
粒径の土壌中に木炭を添加しても、胞子形成数の増加は
ほとんどみられなかった。

表−１実験条件 表−２ＶＡ菌根菌胞子数 実施例３ １１５０００ａワグネルポツトの向かって右半分にエチ
レンオキサイドガスにより滅菌処理した粗い赤玉土（粒
径的１〜２ｍｍ）、左半分に同じくエチレンオキサイド
ガスにより滅菌処理した細かい赤玉土（粒径的０．１〜
０．　５ｍｍ）を入れ、大豆を栽培した。大豆の種子は
ポットの中央に播種し、その下３〜４ｃｒｓのところに
グロマス・ファシキュラツムの胞子を４０個接種した。

上記のポットを１００個準備し、表−３に示す実験区を
設定し、各条件１０ボツトずつ栽培を行なった。なお、
すべてのポットに化成肥料（窒素二リン：カリ＝８：８
：５）を３ｇずつ添加し、さらにすべてのポットに根粒
細菌（Ｒｈｙｚｏｂｉｕｍｊａｐｏｎｉｅｕｍ　）の懸
濁液Ｃ０Ｄ−２，０）を２ｍＱずつ接種した。ポットは
温室内に置き適宜潅水を行なった。

実験開始後福カ月日に潅水を中止し大豆を枯死させた。

そして各ポットの土壌を４粒径の粗いものと細かいもの
と別々にサンプリングし、各々の土壌中のＶＡ菌根菌胞
子数を数えた。その結果を表−４に示す。

表−４に示したように、もみがらを粒径の細かい土壌中
に１〜１０％（ｖ　／　ｖ　）特に３〜７％（Ｖ／Ｖ）
添加したポットで胞子形成の促進がみられた。

表−３ 実験条件 表−益 ＶＡ菌根菌胞子数 実施例４ 第４図に示す容量３．８Ｌ　（細粒培土収容部（２）−
１，８Ｌ、粗粒培土収容部（３）−２、ＯＬ）のＶＡ菌
根菌の増殖・収穫装置に、オートクレーブで滅菌処理し
た粒径の粗い芝の目±（粒径的１〜２１１１１１１）と
、同じくオートクレーブにより滅菌処理した粒径の細か
い芝の目上（粒径的０、　１〜０．　５ｍａ＋）をそれ
ぞれ１．６Ｌ及び１．４４Ｌ入れアルファルファを栽培
した。アルファルファの種子の下方３〜４ｃＩ１１のε
ころには、スクテロスポーラ・グレガリアの胞子を３０
個接種し、さらに根粒細菌（Ｒｈｙｚｏｂｉｕｍ　ｍｅ
ｌｉｌｏｔｉ）の懸濁液（ＯＤ＝２．０）を２１１ＩＱ
接種した。また、粒径の細かい芝の目上の中には、木炭
を５％（Ｖ／Ｖ）の比率で混入した。アルファルファに
は適宜水を与え、４力月間栽培した。

その後、ステンレス製のスクリーンを引き上げて根を切
断し粒径の細かい方の芝の目上を収穫し、得られた胞子
数を数えたεころ土壌１００ｅｅあたり４２０個、粒径
の細かい芝の目上全体で約６０００個の胞子が存在した
。これは実験開始時に接種した胞子数の２００倍に相当
する。そして両度粒径の細かい芝の目上を培土収容部（
２）に１．４４Ｌ入れアルファルファの栽培を継続した
。

３ケ月後再びステンレス性の網を引き上げて根を切断し
粒径の細かい方の芝の目土を収穫し、得られた胞子数を
数えたところ土壌１００ｅｅあたり３７０個、粒径の細
かい芝の０土全体で約５３００個の胞子が存在した。

【図面の簡単な説明】

第１図乃至第７図は本発明装置の好ましも１実施態様例
を説明するものであり、第１図はその１例を示す斜視図
、第２図は同平面図、第３図は第１図装置の複数対を連
結した装置の斜視図、第４図は他の１例を示す斜視図、
第５図は同平面図、第ら図は第４図装置の複数対を連結
した装置の斜視図、第７図は他の１例を示す斜視図であ
る。 図に於て各符号の意味は以下の通りである。 （１）・・・植物栽培容器 （２）・・・細粒培土収容部 （３）・・・粗粒培土収容部 （４ａ）・・・仕切板 （４ｂ）及び（４Ｃ）・・・二重スクリーン（４ｄ）・
・・スクリーン （５）・・・案内溝 （６）・・・底蓋 （７）・・・底蓋 （８）・・・粗粒培土収納容器 第６図 （以　上） 第７図 第 １ 図

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）粒径が約０．１〜１ｍｍの粒度小なる細粒培土と
   これより粒径の大なる粗粒培土とを深さ方向の界面に於
   て接触せしめて充填して形成される培土に、のう状体−
   樹枝状体菌根菌を感染させた植物を栽培し、該菌根菌胞
   子を細粒培土に選択的に形成せしめ、胞子の形成された
   細粒培土を回収することを特徴とするのう状体−樹枝状
   体菌根菌の増殖方法。（２）細粒培土の粒径が約０．３
   〜０．７ｍｍの範囲にある請求項１記載の方法。 （３）粗粒培土の粒径が約１〜５ｍｍの範囲にある請求
   項１記載の方法。 （４）粗粒培土の粒径が約１〜２ｍｍの範囲にある請求
   項３記載の方法。 （５）植物が細粒培土と粗粒培土との界面又は粗粒培土
   に於て栽培される請求項１記載の方法。 （６）細粒培土と粗粒培土との界面又は粗粒培土にのう
   状体−樹枝状体菌根菌を接種し且つ植物種子を播種して
   菌根菌を感染させた植物を栽培する請求項５記載の方法
   。 （７）菌根菌胞子が形成された回収細粒培土から胞子を
   採集する請求項１記載の方法。 （８）のう状体−樹枝状体菌根菌がジャイガスポーラ属
   、スクテロスポーラ属及びグロマス属に属する１種であ
   る請求項１記載の方法。 （９）のう状体−樹枝状体菌根菌がジャイガスポーラ・
   マルガリータ、スクテロスポーラ・グレガリア、グロマ
   ス・ファシキュラツム及びグロマス・エツニカツムから
   選ばれた１種である請求項１記載の方法。 （１０）細粒培土に多孔性炭化物及び／又は植物残渣を
   添加する請求項１記載の方法。 （１１）細粒培土に多孔性炭化物を添加して、ジャイガ
   スポーラ属又はスクテロスポーラ属に属する菌根菌を増
   殖させる請求項１０記載の方法。 （１２）細粒培土に植物残渣を添加してグロマス属に属
   する菌根菌を増殖させる請求項１０記載の方法。 （１３）のう状体−樹枝状体菌根菌を感染させた植物を
   栽培して菌根菌を増殖させる装置であって、約０．１〜
   １ｍｍの粒径の粒度小なる細粒培土を収容する細粒培土
   収容部と上記細粒培土より粒径の大なる粗粒培土を収容
   する粗粒培土収容部とを深さ方向の界面に於て隣接させ
   て備えると共に、上記界面に細粒培土と粗粒培土との混
   合を防止し且つ細粒培土回収時に栽培植物の根を切断す
   るための仕切体を着脱可能に設置したことを特徴とする
   のう状体−樹枝状体菌根菌の増殖装置。 （１４）上記仕切体が耐腐食性のスクリーンである請求
   項１３記載の装置。 （１５）上記スクリーン状仕切体が二重のスクリーンか
   ら成り、植物の生育期間中細粒培土と粗粒培土との界面
   に据置され細粒培土回収時に何れか一方のスクリーンを
   抜き取って植物の根を切断し得るものである請求項１４
   記載の装置。 （１６）スクリーンで形成された容器状の粗粒培土収容
   部の１乃至複数個を細粒培土収容部内に設置した請求項
   １４の装置。