JPH0383933A

JPH0383933A - サイトカインの内在及び／又は産生に関係する疾患状態の治療に使用する薬剤

Info

Publication number: JPH0383933A
Application number: JP22014489A
Authority: JP
Inventors: Uii Tan In; イン・ウイー・タン
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1989-08-25
Filing date: 1989-08-25
Publication date: 1991-04-09

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】本発明は、サイ１−カイン（ｃｙｔｏｋｉｎｅ）の内在
及び／又は産生に関係する疾患状態の治療、特に感冒及
び流行性感冒様症状の治療に関する。

インターフェロンの作用を抑制できる化合物は、アクチ
ノマイシンＤ、即ちインターフェロンに誘導された遺伝
子の転写を阻害する公知の転写阻害剤と、インターフェ
ロンによって誘導される効果の発現に必要なタンパク質
の翻訳を阻害する通常のタンパク質台底阻害剤とを除い
てはほとんど知られていない、上記ＲＮ＾及びタンパク
質合成の阻害剤は一般的に宿主に対して非特異的及び毒
性であるので、インターフェロンの作用を阻害する物質
を探求することが望まれる。

Ｐｏｔｔａｔｈｉｌらは、脂肪酸シクロオキシゲナーゼ
の阻害剤がインターフェロンによって誘導される抗ウィ
ルス状態の生成を抑制すると報告した。脂肪酸シクロオ
キシゲナーゼの経路は細胞に対するインターフェロンの
作用発現に関与するので、インドメタシン及びオキシフ
ェニルブタシンのごとき脂肪酸シクロオキシゲナーゼ阻
害剤が１０．Ｈの量でインターフェロン作用を阻害する
と提案した。

しかしながら、この仮説は幾つかの研究グループによっ
て論議されたが、上記阻害剤がインターフェロン誘導抗
ウィルス状態を抑制するという知見を立証することは不
可能であった（Ｓａｒｋａｒ及びＧｕｐｔａ、Ｔａｋａ
ｏｋ　ｉら並びに後述の表１参照）。

５ａｒｋａｒ及びＧｕｐｔａは、インターフェロン活性
が１０００−を越える高濃度のインドメタシン若しくは
イブプロフェンでしか抑制され得ないことを示した。し
かしながら、両薬剤は上記濃度では細胞内の総合的なタ
ンパク質及びＲＮ＾合或合皮害し始める。更に本発明者
らは、ヒト包皮線維芽細胞並びにマウスＬ及び＾９４［
胞においてインドメタシン（３００ｕＭ）若しくはオキ
シフェニルブタシン（５０ｕＭ）がインターフェロン誘
導抗ウィルス状態に及ぼす阻害効果を全く測定できなか
ったく表１）、即ち、シクロオキシゲナーゼのインター
フェロン作用への関与に関わる提案は現時点では立証さ
れていないそれでもインターフェロン作用を仲介する上でのアラキ
ドン酸代謝の役割は幾つがのグループによって研究され
たが、その関与を支持する明らかな証拠はない、インタ
ーフェロンを用いて処理した細胞中でアラキドン酸代謝
が変化すること（Ｆｕｓｅら、Ｙａｒｏｎら、Ｅｌｄｏ
ｒら、Ｎ１ｅｌｓｅｎら）はリンフ才力インの炎症作用
におけるそれらの役割を暗示する。しかしながら、これ
らの知見と矛盾する報告もあるＣＰｏｔｔａｔｈｉｌら
、Ｄｏｒｅ−Ｄｕｆｆｙら、５ａｒｋａｒ及びＧｕｐｔ
ａ、　Ｔａｋａｏｋｉら〉。

同様にＥｌｌｉｏｔらは、グルココルチコイドホルモン
がヒトαインターフェロンと相乗作用的に作用してＤａ
ｕｄ　ｉ細胞のインターフェロンに対する感受性を増強
すると報告した。しかしながら、このインターフェロン
作用におけるホスホリパーゼ＾２の関与も立証されてい
ない。

本発明者らは、ヒト■型インターフェロン（α及びβイ
ンターフェロン〉の抗ウィルス活性と公知のリンフ才力
イン、γインターフェロン若しくは■型インターフェロ
ンの抗ウィルス活性とを抑制できる数種の化合物を発見
した。前記化合物及びそれらの誘導体は、リンフ才力イ
ンの内在及び／又は産生に関係する疾患状態を治療する
ために使用することができる。

本発明は、サイトカインの内在及び／又は産生に関係す
る疾患状態の治療に使用するための医薬剤の製造におい
て、サイトカインのサイトカインに対する細胞レセプタ
への結合に干渉できるアラキドン酸若しくはその類似体
を使用する。

即ち、宿主の内在サイトカインが宿主へ及ぼす不本意な
副作用に対抗するためにアラキドン酸及びその類似体を
使用することができる。かかる効果についてはいくつか
論議がある（Ｂｌｏｏ＋＊、　Ｄｕｆｆｙ、ＭｅＰｈｅ
ｒｓｏｎ及びＴａｎ、　Ｈａｙｄｅｎら（ａ）、５ｃｏ
ｔｔら並びに＾ｂｄｉら〉が、本発明者らは、少なくと
も数種の現存の化合物において、例えばリンフ才力イン
及び特にインターフェロンのごときサイトカインの抗ウ
ィルス活性を抑制する上でのそれらの作用メカニズムが
インターフェロンレセプタのレベルで仲介され、インタ
ーフェロンの細胞への結合を変化させることを見いだし
た。

インターフェロンは、その宿主に及ぼす影響が感冒の疾
患状態と密接に関係するサイトカインの一例である（Ｓ
ｃｏｔｔら、Ｈａｙｄｅｎら（ａ））、これが、インタ
ーフェロンは有効な抗ウィルス物質であるにもかかわら
ず感冒及び流行性感冒の治療の薬剤として臨床で使用さ
れない理由である（Ｄｏｕｇｌａｓら、Ｈａｙｄｅｎら
（ｂ））、　Ｌかしながらアラキドン酸及びその類似体
はインターフェロンの細胞作用を効率的に抑制するので
、どれでも単独で又は組み合わせて感冒若しくはインフ
ルエンザ（流行性感冒）に冒された患者の望ましくない
症状及び不快感を緩和するために使用することができる
。

本発明においてアラキドン酸の類似体とは、サイトカイ
ンのサイトカインに対する細胞レセプタへの結合に干渉
できる化合物のことである。サイトカインはリンフ才力
インと考えてもよい、サイトカインは一般的にはＩ型若
しくは■型インターフェロンである。好ましくは類似体
は、実施例１に記述した実験方法によれば少なくとも５
０％、より好ましくは少なくとも８０％若しくは少なく
とも９０％のインターフェロン誘導抗ウィルス状態のパ
ーセント阻害を与えることができるべきである。

本発明に使用し得る種類の化合物は、一価（−塩基性〉
の多不飽和脂肪酸、並びにそれらの医薬的に許容可能な
塩、Ｃ，−Ｃ，アルキルエステル、アミド及びモノ−若
しくはジー（Ｃ，−Ｃ，アルキル）アミドである。典型
的には脂肪酸は１４〜２４個の炭素原子、例えば１８〜
２２個の炭素原子、最も好ましくは２０個の炭素原子を
有する。カルボキシ基は末端カルボキシ基である。

酸は典型的には直鎖酸である。塩はすｌ・リウム塩とす
ることができる。酸は最高４つ、例えば３若しくは４つ
の非共役不飽和炭素−炭素結合を含むことができる。こ
れらの結合は二重若しくは三重結合であるか、または酸
は両方の組み合わせを含んでもよい。適当な化合物は、
５．８，１１．１４−エイコサテトラエン酸くアラキド
ン酸）、５，８，１１．１４−エイコサテトライン酸、
５，８．１１−エイコサトリイン酸、リノール酸、γ−
リルン酸、ジホモ−γ−リルン酸、アドレン酸（ａｄｒ
ｅｎｉｃ　ａｃｉｄ）及びこれらの誘導体である。

本発明に使用し得る他の化合物は、シス−１−アセチル
−４−＋４−［２−（２，４−ジクロルフェニル）−２
−イミダゾール−１−イルメチル−１，３−ジオキソラ
ン−４−イルメトキシ〕フェニル）−ピペラジン（ケト
コナゾール（Ｋｅｔｏｃｏｎａｚｏｌｅ））　；４，４
’ｌＺ、３−ジメチルテトラメチレン）ビス（ベンゼン
−１，２−ジオール）（ノルジヒドログアイアレチン酸
〉；及びクエルセチン：Ｒ並びに適当であるならばこれらの医薬的に許容可能な塩
である。

典型的には、類似体は１種以上の細胞リポキシゲナーゼ
及びシクロオキシゲナーゼの阻害剤でもあり、−収約に
は、例えば細胞膜に変化を生じさせることによって■型
及び■型インターフェロンのごときサイトカインのよう
な配位子の結合に干渉する化合物である。これらは疎水
性及び親油性であって、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳ
Ｏ）及びエチルアルコールといった有機溶剤中に溶解し
得る。

しかしながら塩を形成することで水溶性の誘導体をＰＩ
製することができる。

アラキドン酸及びその類似体は、ウィルス性疾患、例え
ば感冒及び流行性感冒様症状を治療するための抗ウィル
ス物質の阻害剤として本発明に使用される。アラキドン
酸は、宿主の炎症過程に関係すると考えられている中ｒ
ｒｆｉ体の産生に至る生化学経路における前駆体である
。しかしながら、ここで要求されるような臨床上の薬剤
としての作用態様は、感染細胞に抗ウィルス状態が成立
した後にインターフェロンが細胞に及ぼす作用を制限す
る能力を含む。抗ウィルス状態は、細胞がインターフェ
ロンに暴露されてから数分内に開始する。

アラキドン酸及びその類似体は、インターフェロン活性
のうちの流行性感冒様症状を引き起こす原因となる部分
のアテニュエーターとして本発明に使用される。

−ａ的にウィルス感染においては、インターフェロンが
宿主＃ｉ御の第一線を構成して抗体応答が第二線である
と認識されているが、これは検証されてはいない。正常
な人であれば感冒及び流行性感冒は生命にかかわる疾患
ではない、即ち、一般に正常な人のための感冒を処置す
る適当な方法は、療することである。この概念は、アラ
キドン酸及び他の化合物が、これらの化合物自体は当該
疾患に対して効果的でないにしても、池のサイトカイン
の不本意な効果に対抗して患者の症状を緩和するために
使用され得る他の疾患状態に対しても適用することがで
きる。

本発明は更に、有効量のアラキドン酸若しくはその類似
体を患者に投与することからなる、リンフ才力インのご
ときサイトカインの内在及び／又は産生と関係する疾患
状態の患者を治療する方法を提供する。

アラキドン酸若しくはその類似体は疾患状態を緩和する
ために使用することができる。症状は治療され得るし、
宿主、特にヒトの疾患状態は除去され得る。アラキドン
酸若しくはその類似体の１つは、サイトカインが宿主内
に生起する望ましくない効果、例えば体癌、倦怠感、完
熟及び流行性感冒様症状を阻害するために使用すること
ができる。それぞれの化合物は適当な投与量及び処方で
、単独にまたはサイトカイン若しくは１種以上の他の抗
ウィルス剤と一緒に使用することができる。

アラキドン酸若しくはその類似体の１つは、本発明に使
用するためには、更に医薬的に許容可能なキャリヤ（担
体）若しくは希釈剤を含有する医薬的組成物の形態にす
ることができる。当業者には公知の通常のキャリヤ及び
希釈剤を使用することができる。該組成物は、点鼻薬、
鼻孔スプレーパルサム、クリーム若しくは錠剤の形態に
することができる。

アラキドン酸若しくはその類似体は典型的には鼻孔スプ
レー若しくは点鼻薬又はバルサム若しくはクリームの形
態で局所投与することができるし、或いは経口投与を選
択することもできる。患者に与えられるアラキドン酸若
しくはその類似体の投与量は、治療中の疾患の状態や患
者の体調といった種々の要因に依存する。しがしながら
鼻孔投与では、アラキドン酸若しくはその類似体は、投
与量０．５〜５−当たり濃度１〜１０００ｍＭで投与さ
れ得る。

経口投与では１回当たりアラキドン酸若しくはその類似
体０．５〜１５０呵を投与することができる。また、投
与は１日当たり１〜４回適宜行なうことができる。

以下、実施例によって本発明を説明する。また２つの参
照例も与える。

フェロン　びマウスＬ　し　は＾９　　にお（るマウス
インターフェロンによる　ウィルス状　　導ヒト線維芽
細胞、マウスＬ若しくは＾９細胞を９６ウエルマイクロ
テスト■プレートのウェル内で集密になるまで戒長させ
た。それぞれのマイクロウェル内の集密的細胞単層を、
１０％ウシ胎児血清及び表中の濃度の化合物を含む戒長
く増殖）培地、又はコントロール実験であって１０％ウ
シ胎児血清を含むが該化合物は含まない成長培地２００
１．１１中で３７℃で６時間インキュベートした０次い
でヒト若しくはマウス細胞を、それぞれヒトα若しくは
マウスインターフェロン１０００１．Ｕ、／ｍｉ’を順
次２倍に希釈した調製液Ｚｏｏ、１を用いて１時間イン
キュベートした。こうしてインターフェロン処理した細
胞を水泡性口内炎ウィルスにＭ、Ｏ，１，＝　１で感染
させた。

これらの化合物によるインターフェロン誘導抗ウィルス
状態の阻害をコントロール細胞と比較し、％阻害として
評価した。この結果を表１に示す。

虹における％阻害における％阻害における％阻害インドメタシン　測定不可能　　測定不可能　　測定不
可能（５０μＨ〉インドメタシン　測定不可能　　　Ｎ、Ｄ、　　　　　
　Ｎ、Ｄ。

（３００μＮ〉オキシフェニル　測定不可能　　測定不可能　　　　２
５％本ブタシン（５０μＭ）Ｎ、Ｄ、＝未測定本この阻害の程度は阻害として評価するには低すぎた。

その理由は、インターフェロンの抗ウィルス分析が２５
％までの差を区別するのに充分な感度でなかったからで
ある。

９６ウエルマイクロテスト■プレート内で集密になるま
で成長させたヒト線維芽細胞を、１０％ウシ胎児血清及
び１００１．Ｕ、／ｍ１ヒトαインターフェロンを含む
成長培地２００μｌ中で３７℃でインキュベートした。

次いで、前記処理が線維芽細胞に抗ウィルス状態を与え
たかどうかテストするために、細胞を水泡性口内炎ウィ
ルスにＭ、Ｏ，１，＝　１で感染させた。この結果を表
２に示す。（−）記号は抗ウィルス状態の不在を表し、
〈＋〉記号は抗ウィルス状態の存在を表し、（±〉記号
はウィルス感染に対して一部耐性を示すことを表す。

轟ユへの暴露時間　　　　　　抗ウィルス状態０分１５分　　　　　　　　　　　　士３０分　　　　　　　　　　　　＋６０分　　　　　　　　　　　　十インーフェロンののヒト包皮の組織片から一部ヒト細胞培養を誘導し、ヒト
組織培！！！細胞としてｉｎ　ｖｉｔｒｏ保存した。

インターフェロン誘導の抗ウィルス状態はインターフェ
ロン処置の特徴的な細胞応答であるので、この調査にお
けるアッセイとして使用した。アッセイは、Ｔａｎがヒ
ト細胞に適合させたようなＡｒＩＩＩｓｔｒｏｎｇ法に
従った。

ヒト包皮線維芽細胞を、前記したように９６ウエルマイ
クロテスト■プレート内で集密になるまで成長させた（
Ｔａｎ）、この細胞を、Ｃ０２インキユベータ内の、イ
ーグルの最小培地と必要量の抗生物質、グルタミン及び
重炭酸ナトリウムとで構成される成長培地中に維持した
。Ｍ胞を、１％若しくはｌＯ％ウシ胎児血清と、アラキ
ドン酸、５，８，１１．１４−エイコサテトライン酸、
５，８．１１−エイコサトリイン酸、ケトコナゾール、
ノルジヒドログアイアレチン酸及びクエルセチン５０μ
Ｈとを含む成長培地に６時間Ｊ％　Ｎ　シた。但しコン
トロールは前記化合物を含まない。

次いで細胞の所与のインターフェロン製剤の抗ウィルス
活性について分析した。洗浄した細胞を、１０００１、
ＩＪ、／ｍＮヒトαインターフェロンを順次希釈（２倍
）した調製液Ｚｏｏ、ｌ中で３７℃で１時間インキュベ
ートした０次いでインターフェロンを取り除き、細胞を
水痘性口内炎ウィルスに８．０．１＝　１で感染させた
。インターフェロン誘導抗ウィルス状態の阻害を対応す
るコントロール細胞と比較し、％阻害として評価した。

この結果を表３に示す。

この結果は、アラキドン酸、５．８．１１．１４−エイ
コサテトライン酸及び５，８．１１−エイコサトリイン
酸、並びにケトコナゾール、ノルジヒドログアイアレチ
ン酸及びクエルセチンがインターフェロンの作用を９０
％以上阻害したことを示す、アラキドン酸、５．８，１
１．１４−エイコサテトライン酸及びケトコナゾールは
、細胞の３　［ＩＩ　］−ウリジン取り込みを一部阻害
し細胞膜変化を誘導するが、細胞タンパク質台底全部を
阻害することはない。

衆旦化合物抗ウィルス状態の％阻害ヒトミインターフェロン　　ヒトβインター７エａン　
　ヒトγイシターフェａシアラキドンａ＊（５０ｕＭ） ≧９０ ≧９０ ≧８０５．８，１１．１４−エイコサテトライン酸＊　（５０，Ｍ） ≧９０ ≧９０ ≧８０ｓ、ａ、ｔｔ−エイコサ１−リイン酸車（５０μＮ〉 ≧９ＯＮ、Ｄ。

Ｎ、Ｄ。

ノルジヒトログアイアレチン酸＊本（５０μＭ） ≧９０ ≧９ＯＮ、Ｄ。

ケトコナゾール車車（１００ｕＭ） ≧９０ ≧９ＯＮ、Ｄ。

クエルセチフ本車（５０ｕＭ）Ｎ、Ｄ、＝未測定本＝１％ウシ胎児血清木本＝１０％ウシ胎児血清ＯＮ、Ｄ。

Ｎ、Ｄ。

血清濃度を１％から１０％に高くし且つ阻害剤の濃度を
高くした場合のアラキドン酸及び５，８，１１゜１４−
エイコサテトライン酸の阻害作用に及ぼす効果を調査す
るために、前記方法を繰り返した。この結果を表４に示
す、血清濃度を高くするとアラキドン酸及びその類似体
の阻害効果は低くなるが、アラキドン酸若しくは５，８
，１１．１４−エイコサテトライン酸の濃度を更に高く
することによって対抗し得る。テストした濃度及びそれ
に伴なう血清濃度では、アラキドン酸及びその類似体を
用いても全般的な細胞毒性は見られなかった。

化合物アラキドン酸く５０μＭ）アラキドン酸（５０，Ｍ）アラキドン酸（３００ｕＭ）５．８，１１．１４−エイコサテトラインｅｉ（５０ｕＭ）５．８．１１．１４−エイコサテトライン酸（５０，Ｍ）５．８，１１．１４−エイコサテトライン酸（２００ｕＭ）衣１む（ｉるウシ胎１１１１１１％１０％１０％１％１０％１０％さｈた抗ウィルス状聾のｚｌ害 ≧９０ ≧９０ ≧９０ ≧９０９６ウエルマイクロテスト■プレート内で成長させたヒ
ト線維芽細胞を、１％ウシ胎児血清とアラキドン酸５０
ＩＪＭとを含む成長培地を用いて最高６時間までインキ
ュベートした６次いで細胞のヒトαインターフェロン誘
導抗ウィルス状態の阻害について分析した。この結果を
第１図に示す、これらの結果は、アラキドン酸が数分内
にインターフェロン誘導抗ウィルス状態を阻害すること
を示す。

更に、９６ウエルマイクロテスト■プレート内で成長さ
せたヒＩ・線維芽細胞を、１％ウシ胎児血清とアラキド
ン酸５０−とを含む成長培地を用いて６時間インキュベ
ートした。細胞を１％ウシ胎児血清を含む成長培地２０
０−で２回洗浄してほとんどのアラキドン酸を除去し、
１％ウシ胎児血清を含む成長培地を用いて３７℃で０．
５．１．２若しくは２４時間再インキュベートしてから
、ヒトαインターフェロン誘導抗ウィルス状態の阻害調
査に使用した。この結果を第２図に示す、これらは、ア
ラキドン酸による阻害が時間とともに退行することを示
す。

３：　　　　　　のメ　ニズムのインターフェロンのヒト細胞への結合を放射性ヨウ素で
標識したヒトαインターフェロンを用いて分析した。標
識配位子が分解されておらずに生物学的に活性であるこ
とを確認するために、使用前に１５■標識ヒトαインタ
ーフエロンの生物学的活性について検定し、且つドデシ
ル硫酸ナトリウム（ＳＯＳ）−ポリアクリルアミドゲル
電気泳動によって分析した。そして標識配位子を、既存
文献（Ｔｈｏｗｐｓｏｎら、Ｂｒａｎｃａ及びＢａｇｌ
ｉｏｎｉ、並びにＥｐｓｔｅｉｎら）にあるようにヒト
線維芽細胞との結合調査に使用した。

この調査結果を第３図〜第６図に結合データの５ｃａＬ
ｃｈａｒｄプロツトとして表した。細胞を成長培地で２
回洗浄してほとんどの脂肪酸を除去してから、１２５■
−ヒトαインターフェロンのそれらのレセプタに対する
結合を測定した。Ｂ及びＦはそれぞれ結合及び遊ＷＩＩ
２Ｓ■−ヒトαインターフェロンの濃度である。ヒト細
胞は以下の成長培地に暴露したニー第３図＝１％ウシ胎児血清とアラキドン酸５０．Ｍ（
ム）若しくは５，８，１１．１４−エイコサテトライン
酸５０μＭ（口〉とを含む成長培地、または１％ウシ胎
児血清のみ含む成長培地（■）；一第４図＝１０％ウシ胎児血清及びアラキドン酸ナトリ
ウム３００μＨを含む成長培地（■）、または１０％０
％ウシ胎清のみを含む成長培地（口〉ニー第５図＝１０
％ウシ胎児血清及び５，８，１１．１４−エイコサテト
ライン酸２００．Ｍを含む成長培地（■〉、またはｌＯ
％ウシ胎児血清のみ含む成長培地（ロ）、並びに一第６図＝１０％ウシ胎児血清とノルジヒドログアイア
レチン酸１０μＭ（ロ）若しくは５０μＭ（■）とを含
む成長培地、及び１０％０％ウシ胎清のみを含む成長培
地（ム）。

１％ウシ胎児血清を含む成長培地中にアラキドン酸若し
くは５，８，１１．１４−エイコサテトライン酸が存在
すると、インターフェロンのそのレセプタに対する結合
定数を変化させ（第３図及び第４図）、インターフェロ
ンレセプタを約３０〜６０％低く規制する（第４図及び
第５図）、　１．５９　ｘ　１０−”　Ｈと評価された
インターフェロンのヒト線維芽細胞に対する結合のに、
は、１％ウシ胎児血清の存在下にそれぞれアラキドン酸
若しくは５，８，１１．１４−エイコサテトライン酸３
３．Ｍで処理した細胞では３．７０　ｘ　１Ｏ−ＩＯＨ
及び３．２５　ｘ　１０−１０Ｍに増加した（第３図）
。

細胞を、１０％０％ウシ胎清を含む成長培地中でアラキ
ドン酸ナトリウム若しくは５，８，１１．１４−エイコ
サテトライン酸で処理した場合、インターフェ及び５，
８，１１．１４−エイコサテトライン酸の濃度をそれぞ
れ３００．８及び２００μＮまでに高める必要がある。

得られるに、は、同時に得られるコントール細胞のに一
＝　１．９９　ｘ　１Ｏ−ＩＯＮ及び１．４４　ｘ　１
０−”　Ｍと比較してそれぞれ２．４０　ｘ　１０−”
　Ｍ及び３．１７　ｘ　１Ｏ−ＩＯＮである（第４図及
び第５図）、更に、ノルジヒドログアイアレチン酸で処
理した細胞のに、は、２．１７　ｘｌｏ−１°Ｍから３
．３８　ｘ　１０−１０Ｍに増大すると推定される（第
６図）。

処理した細胞のに４値の増加は配位子（インターフェロ
ン）の阻害剤処理した細胞に対するレセプタへの結合が
減少することを示唆する。ノルジヒドログアイアレチン
酸は前記レセプタを有意に低く規制するようには見えな
い、これらのデータは、アラキドン酸、５．８，１１．
１４−エイコサテトライン酸、アラキドン酸ナトリウム
及びノルジヒドログアイアレチン酸は配位子（インター
フェロン）のそれらのレセプタに対する結合を低下さ￥
ビインターフェロンが細胞に及ぼす誘導効果を阻害する
ことができることを示唆する。

４：６１６　　　　のインターフェロン誘導細胞をイン
ターフェロンで処理すると幾つかの遺伝子が転写される
。そのうちの１つが６／１６遺伝子である０本発明者ら
は、ヒトインターフェロンに刺激された細胞内の６／１
６遺伝子転写に及ぼすアラキドン酸及び５，８，１１．
１４−エイコサテトライン酸の効果を調査した。正常な
ヒト線維芽細胞を１％ウシ胎児血清（レーンｌ及び２）
、１％ウシ胎児血清とＥＴＹ＾５０μＭ（レーン３及び
４）若しくはアラキドン酸３０ｐＭ（レーン５及び６）
とを含むＨＥＭ培地で６時間インキュベートした８次い
で、細胞を１％ウシ胎児血清（レーン１．３及び５〉若
しくはｔｏ　ｉ、ｕ。

／Ｉ１１ヒトαインターフェロン（レーン２．４及び６
）を含む成長培地で２時間インキュベートした。それぞ
れの処理から得られた合計２０μｇのＲＮＡをホルムア
ルデヒドアガロースゲル上で電気泳動し、Ｐコ２標１６
／１６ｃＤＮ＾に対してハイブリッド形式させるノザン
プロット法を行なった。

この結果を第７図に示す、予想した通り、この遺伝子の
転写は強力に阻害される。この結果は、アラキドン酸類
がインターフェロンレセプタを低く規制し、インターフ
ェロンのそのレセプタへの結合に影響してインターフェ
ロン誘導遺伝子が発現しないことを示す結果と一致して
いる。

１↓乙の丈献１實Ｉ＋昌＾明省中ぜて！１羽Ｊ社ｒマ旬
のでめる。

Ａｂｄｉ、Ｅ、Ａ、、ＫａｍｉｔｏｍＯ，Ｖ、Ｊ、、Ｍ
ｃＰｈｅｒｓｏｎ、　　丁、Ａ、、ｘｏｎｒａｄ、Ｍ、
Ｗ、。

Ｉｎｏｕｅ、　Ｍ、　　ａｎｄ　Ｔａｎ、　Ｙ、Ｈ，（
１９８６１Ｃ１１ｎ、　　Ｉｎｖｅｓｔ、　Ｍｅｄ、　
　９．　３３−４０゜Ｂｌｏｏｍ、Ｍ。

＋１９８７１　５ｃｉｅｎｃｅ　２３５，１５４−１５
５゜Ｂｒａｎｃａ、　Ａ、Ａ、　　ａｎｄ　ａａｇｌｉ
ｏｎｉ、　　Ｃ。

（１９８１）Ｎａｔｕｒｅ　２９４，７６Ｆｌ−７７０
゜Ｄｏｒｅ−Ｄｕｆｆｙ、Ｐ、、Ｐｅｒｒｙ、Ｗ、ａｎ
ｄ　Ｋｕｏ、Ｈ−Ｈ。

Ｉｍｍｕｎｏｌ、＋１９７９１　２３２−２３９゜＋１
９８３１　　Ｃｅ１ｌ。

Ｄｏｕｇｌａｓ、　Ｒ，Ｍ、、　Ｍｏｏｒｅ、　Ｂ、Ｗ
、、　Ｍｉｌｅｓ、　）１．Ｂ、、　Ｄａｖｉｅｓ、　
　Ｌ、、Ｍ、。

Ｇｒａｈａｍ、Ｎ、Ｍ、）１．、　　Ｒｙａｎ、Ｐ、、
Ｗｏｒｓｗｉｃｋ、　　Ｄ、Ａ、　　ａｎｄ　八１ｂｒ
ａｃｈＪ（１９８６１Ｎｅｗ　Ｅｎｇ、Ｊ、Ｍｅｄ、３
１４．６５−７０゜Ｊ、Ｋ。

Ｄｕｌ！ｆ、Ｇ。

（１９８５）Ｎａｔｕｒｅ　３１３，３５２−３５３゜
Ｅｌｄｏｒ、Ａ、、Ｆｒｉｄｍａｎ、Ｒ，、Ｖｌｏｄａ
ｖｓｋ、Ｘ、、ＨＹ−ＡＭ、Ｅ、Ｆｕｋｓ、Ｚ、ａｎｄ
Ｐａｎｅｔ　Ａ、（１９８４）Ｊ、Ｃ１１ｎ、Ｉｎｖｅ
ｓｔ、７３，２５１−２５７゜Ｅｌｌｉｏセ、に、Ｒ，
、Ｐｒ１ｎｃｌｅｒ、　Ｇ、Ｌ、、υｒｂａ　、シ１．
Ｊ、＾ｎｄ　Ｆａｌｔｙｎｅｋ、　Ｃ，Ｒ。

（１９１］８）　Ｊ、　Ｃｅ１ｌ　ｐｈｙｓｉｏｌ、　
　１３４．　８５−９２゜Ｅｐｓｔｅｉｎ、　Ｃ９Ｊ、
、　ＭｃＭａｎｕｓ、　Ｎ、Ｈ，、Ｅｐｓｔｅｉｎ、　
Ｌ、Ｂ、、　Ｂｃａｎｃａ、　Ａ、Ａ、。

ｏ’Ａｌｅｓｓａｎｄｒｏ、　Ｓ、Ｂ、　Ａｎｄ　Ｂａ
ｇｌｉｏｎｉ、　Ｃ，＋１９８２１　Ｂｉｏｃｈｅｍ、
　Ｂｉｏｐｈｙｓ。

Ｒｅｓ、Ｃｏｍｍ、１０７．１０６０−１０６６゜Ｆｕ
ｓｅ、Ａ、Ｍａｈｍｕｄ。

３２０９−３２１４゜Ｌ　ａｎｄ　　Ｋｕｗａｔａ、Ｔ。

（１９７８１Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ。

４２゜Ｈａｙｄｅｎ、　　Ｆ、Ｇ、、　Ｍｉｌｌｓ、　Ｓ、Ｅ
、　ａｎｄ　Ｊｏｈｎｓ、　Ｅ、Ｍ。

Ｄｉｓ、１４８，９１４−９２１．ｆａｎ。

１１９８３）Ｊ。

！ｎｆｅｃｔ。

Ｈａｙｄｅｎ、　Ｆ、Ｇ、、　Ａｌｂｒｅｃｈｔ、　Ｊ
、ｘ、、　Ｋａｉｓｅｒ、　Ｄ、Ｌ、、　ａｎｄ　Ｇｗ
ａｌセｎｅｙ。

Ｊ、Ｍ、　　＋１９８６１　Ｎｅｗ　Ｅｎｑ、　Ｊ、　
Ｍｅｄ、　３１４．７１−７５　（ｂｌ。

Ｋａｎｔｏｒ、Ｔ、Ｇ。

（１９８７１Ａｍ、Ｊ、Ｍｅｄ、８３．２−５゜ＭＣＰ
ｈｅｒＳＯｎ、　　丁、Ａ、ａｎｄ　Ｔａｎ、Ｙ、Ｈ。

６５．７５−７９゜（１９８０１Ｊ、Ｎａｔｌ、Ｃａｎｃｅｒ　Ｘｎ５ｔ。

Ｎｅ１ｌｓｅｎ、　Ｏ，Ｈ，、ε１ｍｇｒｅｅｎ、　Ｊ
、　ａｎｄ　Ａｈｎｆｅｌｔ−Ｒｏｎｎｅ、　Ｘ。

Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ　　１２，１６９−１７９゜
Ｐｏヒｔａｔｈｉｌ、　　Ｒ，、Ｃｈａｎｄｒａｂｏｓ
ｅ、　　Ｋ、Ａ、、　　Ｃｕａｔｒｅｃａｓａｓ、　　
Ｐ、、　　ａｎｄ　　Ｌａｎｇ。

Ｄ、Ｊ、　　（１９８０１，Ｐｒｏｃ、　　Ｎａヒ１．
　　Ａｅａｄ、　　Ｓｃｉ、　　υＳ八　１７７、　５
４３？−５４４０゜５ａｒｋａｒ、　　Ｆ、ｏ、、　　
ａｎｄ　Ｇｕｐヒａ、　　５．Ｌ。

＋１９８２）、　Ｖｉｒｏｌｏｇｙ　１２３．４４８−
４５１゜ＳｃｏヒＥ、　　Ｇ’、Ｍ、　　５ｅｃｈｅｒ
、　　Ｄ、Ｓ、、　　Ｆｌｏｗｅｒｓ、　　Ｄ、、　　
Ｂａｔｅ、　　１．、　　Ｃａｎｔｅｌｌ。

に。

ａｎｄ　Ｔｙｒｅｌｌ、Ｄ、八、Ｊ。

（１９８１１Ｂｃ、Ｍｅｄ、Ｊ、２８２，０４５−１３
４８゜Ｔａｋａｏｋｉ、　Ｍ、、　Ｙａｍａｓｈｉｔａ
、　Ｙ、、　　Ｋｏｉｋｅ、　　Ｋ、　ａｎｄ　Ｍａｔ
ｓｕｄａ、　　Ｓ。

（１９８８）、Ｊ、Ｉｆｎ、Ｒｅｓ、８，７２７−７３
３゜Ｔａｎ、Ｙ、Ｈ・＋１９７５１　Ｎａｔｕｒｅ　２５３，２８０−２８２
゜Ｔｈｏｍｐｓｏｎ、　Ｍ、Ｒ，、Ｚｈａｎｇ、　　ｚ
、＋　　ｒｏｕｒｎｉｅｒ＋　Ａ、　　ａｎｄ　Ｔａｎ
、　ｙ、）ｌ。

ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、２６０，５６３−５６１゜ｙ
ａｒｏｎ、　Ｍ、、　　Ｙａｒｏｎ、　　Ｌ、　Ｇｕｒ
ａｒｉ−Ｒｏｔｍａｎ、　　Ｄ、、　　Ｒｅｖｅｌ、　
Ｍ、、　　Ｌｉｎｄｅｒ。

）１．Ｒ，ａｎｄ　Ｚｏｔ、Ｖ、（１９７７１Ｎａｔｕ
ｃｅ　２６７．４５７−４５９゜

【図面の簡単な説明】

第１図及び第２図は実施例２のヒト線維芽細胞における
アラキドン酸によるインターフェロン誘導抗ウィルス状
態の阻害の経時変化の測定結果のグラフ、第３図〜第６
図は実施例３のヒト線維芽細胞におけるヒトインターフ
ェロン結合データの５ｃａｔｃｈａｒｄプロツ１〜のグ
ラフ、第７図は実施例４の６／１６１１伝子のインター
フェロン誘導転写に及ぼすアラキドン酸及び５，８，１
１．１４−エイコサテトライン酸の効果の試験結果を示
す図である。 ≠４丸々　　　イン・ライ−・ｙ／士１１人　　ルイス０ゾ／％Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ＩＦＮ−ｉｎｄｕｃｅ
ｄ　ＡＶ　５ｔａｔｅ％１ｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　
ＩＦＮ−ｉｎｄｕｃｅｄ　ＡＶ　５ｔａｔｅ（ｕｎｉｔ
ｓ／ｍｌ）（ｕｎｉｔｓ　／ｍｌｌ手続補正書（方式）２、発明の名称サイトカインの内在及び／又は産生に関係する疾患状態
の治療に使用する薬剤３、補正をする者事件との関係氏名

Claims

【特許請求の範囲】

（１）サイトカインの内在及び／又は産生に関係する疾
患状態の治療に使用する薬剤であって、サイトカインの
サイトカインに対する細胞レセプタへの結合に干渉でき
るアラキドン酸若しくはその類似体を含有する薬剤。
（２）前記サイトカインが I 型若しくはII型のインタ
ーフェロンである請求項１に記載の薬剤。
（３）前記類似体が少なくとも５０％のインターフェロ
ン誘導抗ウィルス状態のパーセント阻害を与え得る請求
項２に記載の薬剤。
（４）一価の多不飽和脂肪酸または、その医薬的に許容
可能な塩、Ｃ＿１−Ｃ＿４アルキルエステル、アミド又
はモノ−若しくはジ（Ｃ＿１−Ｃ＿４アルキル）アミド
を含有する請求項１から３のいずれか一項に記載の薬剤
。
（５）５，８，１１，１４−エイコサテトラエン酸、５
，８，１１，１４−エイコサテトライン酸、５，８，１
１−エイコサトリイン酸、リノール酸、γ−リノレン酸
、ジホモ−γ−リノレン酸、アドレン酸、シス−１−ア
セチル−４−｛４−［２−（２，４−ジクロルフェニル
）−２−イミダゾール−１−イルメチル−１，３−ジオ
キソラン−４−イルメトキシ］フェニル｝−ピペラジン
；４，４’−（２，３−ジメチルテトラメチレン）ビス
（ベンゼン−１，２−ジオール）；及び▲数式、化学式
、表等があります▼ 並びに適当であるならばこれらの医薬的に許容可能な塩
から選択される化合物を含有する請求項１から３のいず
れか一項に記載の薬剤。
（６）感冒及び流行性感冒に類似する症状の治療に使用
する請求項１から５のいずれか一項に記載の薬剤。