JPH0386844A - アレスリン光学異性体混合物の光学分割 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、アレスリン光学異性体混合物の光学分割、特
にアレスリンを特定の充填剤を使用した液体クロマトグ
ラフィーにより光学分割する方法に関する。

（従来の技術） アレスリンは、菊酸とアレスロロンの間で形成された次
式で示されるエステルであって、合成ピレスロイド系殺
虫剤として著名である：ζ式市 水けｚ客岸登原￥を男子 ） 菊酸には（＋）−シス、（−）−シス、（＋）−トラン
スおよび（−）−）ランス型の４種の異性体が存在し、
アレスロロンには（＋）体および（−）体の２種の異性
体が存在し、その結果、アレスリンには合計８種の異性
体が存在する。これら８種の異性体は互いにその生理活
性を異にしており、例えばアレスリンの殺虫効力は（＋
）−トランス型の菊酸と（＋）型アレスロロンの間のエ
ステルが最大である。このため、アレスリンの光学分割
による高活性化が種々試みられており、既に光学活性な
アレスリンが市販されている。従って、アレスリンの光
学異性体の分析は品質管理上、また効力評価上必須であ
り、正確な分析法の開発が必要とされてきている。

しかしながら、これまでアレスリンの光学異性体をクロ
マトグラフィーにより直接分離した報告は、僅かにＣａ
ｙ　ｌｅｙら（Ｇ、Ｒ，Ｃａｙｌｅｙ　ａｎｄ　Ｂ、Ｗ
、　Ｓｉｍｐｓｏｎ；　Ｊ、　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ、
、　３５６（１９８６）１２３−１３４）や土井ら（土
井侃、阪上重幸；第４８回分析化学討論会講演要旨集、
（１９８７）１５−１６）によるＮ−（３，５ジニトロ
ベンゾイル）−Ｄ−フェニルグリシンをグラフトした固
定相を用いて行う例があるだけであり、この方法ではア
レスリンの８種の光学異性体すべてを分離することはで
きず、部分的分離が達成されるにすぎない。

それ故、現在のところ、アレスリンの８種の光学異性体
の分析は、まずアレスリンをアルカリで加水分解して菊
酸とアレスロロンを得、菊酸については村野の方法（Ａ
、　Ｍｕｒａｎｏ　：　Ａｇｒｉｃ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃ
ｈｅｍ、　。

３８、２２０３（１９７２））やリケットの方法（Ｆ、
Ｅ、　Ｒｉｃｋｅｔｔ：＾ｎａｌｙｓｔ、　９８．８８
７（１９７３））のよう、に光学活性なアルコールやア
ミンを脱水縮合させ、ジアステレオマーとして分析する
か、天井の方法（Ｎ、Ｏｉ　ｅｔ　ａｌ：Ｊ、　Ｃｈｒ
ｏｍａｔｏｇｒ、、　２３９，４９３（１９８２））の
ように菊酸にアミンを作用させて酸アミドとし、光学活
性な固定相を用いるガスクロマトグラフィーにより分離
、分析しており、アレスロロンについては堀場の方法（
Ｍ、　Ｈｏｒｉｂａ　ｅｔ　ａｌ：　Ａｇｒｉｃ、　Ｂ
ｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、、　４１゜２００３（１９７７）
、　Ｍ、　Ｈｏｒｉｂａ　ｅｔ　ａｌ：　Ａｇｒｉｃ、
　ＢｉｏｌＣｈｅｍ、　、　４６．２８１（１９８２）
）のようにＮ−トリフルオロアセチル−し−プロリルク
ロリドを作用させ、ジアステレオマーエステルとして分
析するか、イソシアン酸イソプロピルを作用させ、ウレ
タンとして光学活性な固定相を用いるガスクロマトグラ
フィーにより分離、分析している。しかし、これらの方
法は、光学純度の高い光学活性な試薬を必要とし、操作
が頻雑で長時間を要し、しかも加水分解〜エステル化ま
たはアミド化反応の際の異性化など問題が多い方法であ
る。

（発明が解決しようとする問題点） アレスリンの８種の光学異性体を分離し、分析するのに
、加水分解後、酸およびアルコールをそれぞれジアステ
レオマー誘導体にして行う方法は光学純度の高い光学活
性な試薬が必要であり、操作が頻雑で長時間を要する。

また、加水分解〜誘導体化反応の際の異性化などが、分
析データのばらつきや片寄りの原因となる。これに対し
てクロマトグラフィーにより、アレスリンの光学異性体
を直接分離する方法は、光学活性試薬を必要としないし
、操作も極めて簡単で、短時間に測定でき、分析データ
のばらつきや片寄りの原因となる異性化などをひきおこ
す前処理も必要としない。しかしながら、８種の光学異
性体それぞれを重なることなく分離できる適切な光学活
性固定相を必要とするが、現在までそのような適切な光
学活性固定相は見い出されていない。

（問題点を解決するための手段） 本発明者らは、アレスリンの８種の光学異性体を何らの
前処理をすることなく、液体クロマトグラフィーによっ
て直接分離できるような適切な充填剤を求めて研究を重
ねた結果、光学活性な１−（α−ナフチル）エチルアミ
ンと光学活性なｔｅｒｔ　−ロイシンがカルボニル基を
介してそれぞれのアミノ基の部位で結合してなる尿素誘
導体をグラフトした固定相がこの目的に適合する事実を
見いだした。上記固定相を充填剤として使用した液体ク
ロマトグラフィーにより、アレスリンの光学異性体混合
物は直接かつ良好にそれぞれの光学異性体に分離される
ので、光学異性体の混合比の分析を簡単かつ正確に行う
ことができ、また各光学異性体の純品を容易に取得する
ことができる。

本発明者らは、先に、光学活性なアミンと光学活性なア
ミノ酸がカルボニル基を介してそれぞれのアミノ基部位
でグラフトした固定相が、液体クロマトグラフィーによ
り光学異性体混合物の光学分割を行う際の充填剤として
適していることを見い出したく特開昭５９−６１７７６
号、同昭６０−６８６２号、同昭６０−１５５９６８号
）。しかしながら、それら固定相の全てが必ずしも多種
類の光学異性体混合物の分離に適用出来るわけではなく
、特にアレスリンのように８種にも及ぶ多種の光学異性
体が混在している場合、それらを各々に分離出来る充填
剤を見い出すためには、多数の試行錯誤的実験が必要で
ある。

本発明において充填剤として使用する固定相は、光学活
性な１−（α−ナフチル）エチルアミンと光学活性なｔ
ｅｒｔ−ロイシンがカルボニル基を介してそれぞれのア
ミノ基の部位で結合してなる尿素誘導体をグラフトした
ものである。グラフト化は一般にアミノアルキルシラン
、特にω−アミノアルキルアルコ牛クジシランたとえば
ω−アミノプロピルトリエトキシシラン）やω−アミ／
アル牛ルハロゲノシラン（たとえばω−アミノプロピル
トリクロロシラン）を介して行うのが好ましい。従って
、担体に結合されるべきグラフト体の好ましい例は、次
式で示されるオルガノシランである：（式中、Ｒ１、Ｒ
２およびＲ３は同一または相異なり、低級アルキル基、
低級アルコキシル基、ヒドロキシル基またはハロゲン原
子を表し、少なくとも１つは低級アルコキシル基または
ハロゲン原子である。ｎは２〜４の整数を表し、＊Ｉ、
＊２は両方とも不斉炭素原子を表すが、＊１がＳ配置の
ときは＊２もＳ配置を表し、＊１がＲ配置のときは＊２
もＲ配置を表す。）。

グラフト化が行われる担体は、ヒドロキシル基をその表
面に持つ無機担体、たとえばシリカゲルのようなシリカ
含有担体が好ましい。担体の形状は球状、破砕状などい
ずれの形状でも差し支えないが、高効率の充填剤を得る
ためには、出来るだけ粒径の揃った微細な粒子が好まし
い。

特に好ましい充填剤の具体例としては、Ｎ　−［（Ｓ）
−１−（α−ナフチル）エチルアミノカルボニル］　　
（Ｓ）　　ｔｅｒｔ〜ロイシンがω−アミ／プロピルシ
ランを介してグラフトされたシリカゲルを挙げることが
できる。

充填剤の調製に際しては、天井らの方法（Ｊ。

Ｌｉｑ、　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ、、　９．５１１（１
９８６））を応用することが出来、たとえばω−アミノ
アルキルシランをあらかじめシリカゲルにグラフトし、
これにＮ〜［（Ｓ）−１−（α−ナフチル）エチルアミ
ノカルボニル］　　（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ロイシンを脱水
ｍ＝により結合させる。

上記の如く調製された充填剤は、常法に従ってクロマト
グラフ用のカラムに充填され、液体クロマトグラフィー
の固定相として使用される。

ｉ＆　体クロマトグラフィーに際し、適当な溶離条件、
特に通常よ〈用い４れる侑相分Ｖの名作ｚ１弱ぶことに
より、アレスリンの８種の光学異性体混合物の分離、分
析を分離能良く、かつ短時間に行うことができる。

以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、本
発明はこれらの実施例に限定されるものではない。

実施例Ｉ Ｌ　（Ｓ　）−ｔｅｒｔ　−ロイシン２．６ｇにＩＮ水
酸化ナトリウム水溶液２２ｘ（ｌを加えて溶かし、これ
にテトラヒドロフラン２ｙ（ｌを加えた後、室温にて撹
拌しなカラ（Ｓ）　−１−（α−ナフチル）エチルイソ
シアネーｌ−４，０９を加え、その後４時間室温で撹拌
した。

これにＩＮ水酸化ナトリウム水溶肢ＬＯｘ（ｌおよび水
１５ｘ（ｌを加えたのち、この水層をクロロポルム２ｈ
（１で２回洗い、次いで１０％塩酸を滴下し、ｐＨを３
．５に調節した。析出した結晶を水７０村で３回洗い、
ろ過してよく水をきったのち、結晶を減圧乾燥して、Ｎ
−［（Ｓ）−１−（α−ナフチル）エチルアミノカルボ
ニル］−（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ロイシン４．１９を得たー Ｍ点：　　１５５〜１６１’Ｃ（分解）［α］乙’：＋
７．９°（Ｃ＝　１．００．　　メタノール元素分析（
Ｃ１＠Ｈ□Ｎ、Ｏ，として）Ｃ（％）　　Ｈ（％）　　
　Ｎ（％） 実測値　　６９．０７　　　７．４５　　　８．４９計
算値　　６９．４９　　　７Ｊ７　　　８．５３次に、
この化合物４９を脱水テトラヒドロフラン４０Ｈに溶か
し、水冷したのち、Ｎ−エトキシカルボニル−２−エト
牛シ＝１，２−ジヒドロキノリン３．２９を加えて、０
℃で１時間撹拌した。これに、ω−アミノプロピルシリ
ル化した高速液体クロマトグラフ用シリカゲル（粒径５
μｌ、孔径１２０人）４．７９を加え、減圧で脱気した
のち、室温で７時間撹拌した。反応液をフィルターでろ
過し、得られたシリカゲル担体をフィルター上でテトラ
ヒドロフラン、メタノール、クロロホルムそしてヘキサ
ンの順で充分洗い、減圧乾燥して、Ｎ　−［（Ｓ　）−
ｉ（α−ナフチル）エチルアミノカルボニルコ（Ｓ）　
　ｔｅｒｔ−ロイシンがω−アミノプロピルシリル基を
介してグラフトされた目的の充填剤を得た。このものの
元素分析値はＮ　：　１．６９％、Ｃ：９゜０６％であ
った。

このようにして得られた充填剤を内径４．ｗｊ！、長さ
２５ｃｍのステンレス製カラムにスラリー充填し、この
充填したカラム２本を直列につなぎ、次の条件で（±）
−３−アリル−２−メチル−４−オキソシクロベント−
２−エニル　（±）−シス／トランス−クリサンナメー
ト（アレスリン）を分析し、第１図のクロマトグラムを
得た。

温度二室温 移動相：へ牛サン／１．２−ジクロロエタン／エタノー
ル（５００：３０：０．１５）流量：　０．８ｘＱ／　
ｌｌｌ１ｎ 検出″ａ：紫外線吸収計（波長２３０ｎｍ）第１図中、
ピーク番号（１）は（＋）−３−アリル−２−メチル−
４−オキソシクロベント−２−エニル　（＋）−シスー
クリサンテメート（（＋）、　（＋）−シス体と略す。

以下、他の異性体についても同様に略す。）、（２）は
（＋）、　（−）−シス体、（３）は（＋）、（＋）−
ｈランス体、（４）は（＋）、　（−）−１−ランス体
、（５）は（−）、（＋）−シス体、（６）は（−）。

（−）−シス体、（７）は（−）、　（＋）−）ランス
体、そして（８）は（−）、（−）−トランス体の各ピ
ークである。（１）のピークが溶出するまでに要する時
間は約３４分、（１）と（６）の両ピークの分離係数は
１．３０、面積比は５１：４９、（２）と（５）の両ピ
ークの分離係数は１．１４、面積比は５０：５０、（３
）と（８）の両ピークの分離係数は１．２９、面積比は
５０：５０、（４）と（７）の両ピークの分離係数は１
．１７、面積比は４９：５１であった。また、隣接する
各ピークの分離係数は、（１）と（２）から順に１．０
７．１．０４、■、０５、ｌ。

０５．１．０７．１．０５および１．０５であった。

【図面の簡単な説明】

第１図は実施例１において得られたクロマトグラムであ
り、縦軸は強度を、横軸は保持時間を表わす。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、光学活性な１−（α−ナフチル）エチルアミンと光
   学活性なｔｅｒｔ−ロイシンがカルボニル基を介してそ
   れぞれのアミノ基の部位で結合してなる尿素誘導体をグ
   ラフトしたことを特徴とする、アレスリン光学異性体混
   合物を光学分割するための液体クロマトグラフィー用充
   填剤。 ２、前記尿素誘導体をオルガノシロキサンを介してグラ
   フトしたことを特徴とする、特許請求の範囲第１項記載
   の充填剤。 ３、前記尿素誘導体をシリカゲルにグラフトしたことを
   特徴とする、特許請求の範囲第１項または第２項記載の
   充填剤。 ４、アレスリン光学異性体混合物を液体クロマトグラフ
   ィーにより光学分割するに当たり、充填剤として光学活
   性な１−（α−ナフチル）エチルアミンと光学活性なｔ
   ｅｒｔ−ロイシンがカルボニル基を介してそれぞれのア
   ミノ基の部位で結合してなる尿素誘導体をグラフトした
   固定相を使用することを特徴とする、アレスリン光学異
   性体混合物の光学分割法。