JPH0440660B2 - - Google Patents
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- JPH0440660B2 JPH0440660B2 JP57131378A JP13137882A JPH0440660B2 JP H0440660 B2 JPH0440660 B2 JP H0440660B2 JP 57131378 A JP57131378 A JP 57131378A JP 13137882 A JP13137882 A JP 13137882A JP H0440660 B2 JPH0440660 B2 JP H0440660B2
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は新規な光学活性オルガノシランをグラ
フトしたクロマトグラフ充填剤およびそれを用い
て不斉炭素に結合した−NH−基、−OCNH−基、
−OCO−基または−OH基を有する化合物の鏡像
体混合物を液体クロマトグラフイーにより分離
し、分析する方法に関するものある。 液体クロマトグラフイーにより、不斉炭素を有
する化合物の鏡像体混合物を直接分離、分析する
ための光学活性な化合物をグラフトした充填剤と
してはこれまでに例えば、Davankov等による光
学活性なプロリンをグラフトした充填剤を用いる
配位子交換による方法、Gil−Av等によるπ電子
不足の光学活性化合物をグラフトした充填剤を用
いる電荷移動錯体による方法、原等による光学活
性なＮ−アシル化アミノ酸をグラフトした充填剤
を用いるＮ−アシル化アミノ酸エステルやＮ−ア
シル化ジペプチドエステルの分離あるいはPirkle
等による光学活性な１−（９−アンスリル）トリ
フルオロエタノールをグラフトした充填剤を用い
る３，５−ジニトロベンゾイル化したアミノ酸、
アミン、オキシ酸、スルホキシド等の分離および
３，５−ジニトロベンゾイル化した光学活性なフ
エニルグリシンをグラフトした充填剤を用いる芳
香族アルコールの分離などが報告されている。 しかし、これらの方法は分離し得る化合物が狭
範囲のものに限定されたり、また、分離の程度が
小さかつたりさらにはグラフトした充填剤の製造
が困難で、再現性のある性能を持つ充填剤が得に
くかつたりして、いずれも実用的な充填剤とは言
い難い。 本発明者らはかかる状況のもとで分析し得る化
合物の適用範囲が広く、製造が比較的容易でしか
も化学的に安定で実用的なグラフトした充填剤の
開発を目標に鋭意検討を続けて来た結果、ヒドロ
キシル基をその表面に持つ無機担体に不斉炭素を
含む光学活性な第一菊酸またはα−（４−クロロ
フエニル）イソ吉草酸残基でアシル化された光学
活性なフエニグリシンをグラフトしたクロマトグ
ラフ充填剤が不斉炭素に結合した−NH−基、−
CONH−基、−OCO−基または−OH基を有する
化合物の鏡像体混合物の分離に優れた効果を示す
のみならず、通の化学反応で容易に製造し得るう
え、化学的にも安定であるなど極めて有な充填剤
であることを見出し、本発明に至つたものであ
る。 即ち本発明はヒドロキシル基をその表面に持つ
無機担体に、不斉炭素を含む光学活性な第一菊酸
またはα−（４−クロロフエニル）イソ吉草酸に
よりアシル化された光学活性なフエニルグリシン
とアミノアルキルシランを結合して成る光学活性
なオルガノシランがグラフトされているクロマト
グラフ充填剤およびそれを液体クロマトグラフイ
ーの固定相に用いて不斉炭素に結合した−NH−
基、−CONH基、−OCO−基または−OH基を有
する化合物の鏡像体混合物を分離し、分析する方
法を提するものである。 本発明についてさらに詳細に述べる。 本発明においてグラフトされているオルガノシ
ランとしては、例えば一般式〔〕 〔式中、R1，R2およびR3はアルキル基、アル
コキシル基、ヒドロキシル基またはハロゲン原子
より選ばれ、少なくとも１つはアルコキシル基ま
たはハロゲン原子である。ｎは２から４までの整
数である。Ａは光学活性な３−（２−メチル−１
−プロペニル）−２，２−ジメチル−１−シクロ
プロピル基または光学活性な１−（４−クロロフ
エニル）−イソブチル基である。＊は不斉炭素を
表わす〕で示される光学活性なＮ−アシル化フエ
ニルグリシンの誘導体を挙げることができる。ま
た、アミノアルキルシラン成分としてはω−アミ
ノアルキルアルコキシシランまたはω−アミノア
ルキルハロゲノシランが好ましく、例えばγ−ア
ミノプロピルトリエトキシシラン、γ−アミノプ
ロピルトリクロロシランなどを挙げることができ
る。 本発明においてヒドロキシル基をその表面に持
つ無機担体としては、例えばシリカゲルなどのシ
リカ含有担体が好ましく、担体の形状は球状、破
砕状などいずれの形状でも差支えないが、高効率
のクロマトグラフ用カラムを得るためにはできる
だけ粒径の揃つた微細な粒子が好ましい。 本発明の新規なクロマトグラフ充填剤を調製す
るに際しては種々のグラフト方法が採用でき、例
えば以下のような方法が挙げられる。 その表面にヒドロキシル基を有する無機担体
にアミノアルキルシランを反応させ、無機担体
の表面にアミノアルキルシリル残基を導入し、
これに光学活性な第一菊酸またはα−（４−ク
ロロフエニル）イソ吉草酸残基でアシル化され
た光学活性なフエニルグリシンを反応させ、脱
水縮合させる方法。 より具体的にはその表面にヒドロキシル基を有
する無機担体に一般式〔〕 〔式中、R1、R2、R3、およびｎは前述と同
じ意味を有する。〕 で示されるアミノアルキルシランを既知の方法
により反応させ、無機担体の表面にアミノアル
キルシリル残基を導入し、次いでこれに一般式
〔〕 〔式中、Ａおよび＊は前述と同じ意味を有す
る。〕 で示される不斉炭素を有する光学活性なＮ−ア
シル化フエニルグリシン、例えばＮ−クリサン
テモイルフエニルグリシン、Ｎ−｛α−（４−ク
ロロフエニル）イソバレロイル｝フエニルグリ
シン等を反応せしめ、脱水縮合させることによ
り目的の充填物が得られる。なお上記一般式
〔〕に示す不斉炭素を有する光学活性なＮ−
アシル化フエニルグリシンは一般によく用いら
れる方法で合成でき、例えば第一菊酸またはα
−（４−クロロフエニル）イソ吉草酸をそれら
の酸クロリドとし、これに脱塩酸剤の存在下で
フエニグリシンを反応させることにより得られ
る。 光学活性なＮ−アシル化フエニルグリシンに
アミノアルキルシランを反応させて得られるオ
ルガノシランを、その表面にヒドロキシル基を
有する無機担体にグラフトする方法。 より具体的には前記一般式〔〕で示される
Ｎ−アシル化フエニルグリシンに一般式〔〕
で示されるアミノアルキルシランを反応させて
得られる一般式〔〕で示されるオルガノシラ
ンをシリカゲル等の無機担体にグラフトするこ
とにより目的の充填剤が得られる。 本発明によつて得られた光学活性なＮ−アシル
化フエニルグリシン残基を持つ充填剤は常法に従
つてクロマトグラフのカラムに充填され、液体ク
ロマトグラフイーの固定相として使用される。本
固定相を用いる液体クロマトグラフイーにおいて
適当な溶離条件、特に通常よくいられる順相分配
の条件を選ぶことにより、不斉炭素に結合した−
NH−基、−CONH−基、−OCO−基または−OH
基を有する化合物の鏡像体混合物の分離、分析が
分離能良く、かつ短時間に行なうことができる。 実施例 １ シリカゲル（粒径10μm、孔径60Å、表面積500
m2／ｇ）10gを減圧、130℃で４時間乾燥したの
ち、３−アミノプロピルトリエトキシシラン20g
を200mlの脱水トルエン溶かした液に加え、60℃
にて６時間撹拌する。反応物をろ過し、残留物を
アセトン100mlで洗い、乾燥して３−アミノプロ
ピルシリル化シリカゲル（APS）を得た。この
ものの元素分析値はＮ：1.20％、Ｃ：3.40％であ
り、これはシリカゲ1gに対し、３−アミノプロ
ピル基が約0.90ｍmolグラフトされたことに相当
する。 別に、Ｄ−フエニルグリシン10gを2N水酸化ナ
トリム液33mlに溶かし、エチルエーテル20mlを加
え、氷冷下で激しくかきまぜながら（＋）−トラ
ンス−菊酸クロリド15gおよび2N水酸化ナトリウ
ム液40mlを10〜15分おきに７回に分割して加え
る。さらに２時間室温で激しくかきまぜたのち反
応液をエチルエーテル50mlで２回洗い、6N塩酸
で酸性とし、生成する油状物を酢酸エチル100ml
で３回抽出する。抽出液を水100mlで２回洗い、
無水硫酸ナトリウムで脱水し、減圧下で濃縮した
のち酢酸エチル・ｎ−ヘキサン混液から再結晶
し、Ｎ−（＋）−トランス−クリサンテモイル−Ｄ
−フエニルグリシン15gを白色結晶として得た。 融点；76〜80℃ 旋光度；〔α〕20 D＝−38.8゜（ｃ＝２％、クロロホ
ルム） 元素分析値 炭素(%) 水素(%) 窒素(%) 計算値 71.74 7.70 4.65 実測値 71.58 7.65 4.58 次にこの化合物12gとＮ−ヒドロキシコハク酸
イミド4.6gを脱水テトラヒドロフン100mlに溶か
し、氷冷して激しくかきまぜながら、ジシクロヘ
キシルカルボジイミド8.3gを脱水テトラヒドロフ
ラン20mlに溶かして30分間で滴加する。氷冷下で
２時間さらに室温３時間撹拌したのち析出物をろ
過して除き、溶媒を減圧留去する。残留物を酢酸
エチル150mlに溶かし、水50mlで２回洗い、無水
硫酸ナトリウムで脱水し、減圧下で濃縮したのち
酢酸エチル・ｎ−ヘキサン混液から再結晶し、式 で示される化合物12gを白色結晶として得た。 融 点；80〜85℃ 旋光度；〔α〕20 D＝122.9゜（ｃ＝２％、クロロホル
ム） 元素分析値 炭素(%) 水素(%) 窒素(%) 計算値 66.32 6.58 7.03 実測値 66.53 6.31 6.99 次いで、この化合物6gをとり、前記アミノプ
ロピルシリル化シリカゲル（APS）3gを脱水テ
トラヒドロフラン30mlに懸濁させ、減圧下だ十分
に脱気した液に加え、室温で５時間、ついで50℃
で５時間ゆるやに撹拌する。室温まで放冷したの
ちテトラヒドロフラン30mlで３回、ついでメタノ
ール30mlで２回、さらにエチエーテル30ml２回洗
い、乾燥してＮ−（＋）−トランス−クリサンテモ
イル−フエニルグリシンをグラフトした目的の充
填剤を得た。このものの元素分析値はＮ：1.74
％、Ｃ：13.3％であり、これはシリカゲル1gに対
し、Ｎ−（＋）−トランス−クリサンテモイル−Ｄ
−フエニルグリシンが約0.53ｍmolグラフトされ
たことを示す。このようにして得られた充填剤を
内径４mm、長さ30cmのステンレス製カラムにスラ
リー充填し、次の条件で（±）−１−（４−クロロ
フエニル）−４，４−ジメチル−２−（１，２，４
−トリアゾール−１−イル）−１−ペンテン−３
−オールを分析し、図−１のクロマトグラムを得
た。 温度：室温 移動相：ヘキサン／１，２−ジクロルエタン／
エタノール（350：40：４） 流量：1.0ml／分 検出器：紫外線吸収計（波長 254nm） 図−１中、ピーク番号(1)（−）−１−（４−クロ
ロフエニル）−４，４−ジメチル−２−（１，２，
４−トリアゾール−１−イル）−１−ペンテン−
３−オール、(2)は（＋）−１−（４−クロロフエニ
ル）−４，４−ジメチル−２−（１，２，４−トリ
アゾール−１−イル）−１−ペンテン−３−オー
ルの各ピークである。(1)のピークが溶出するまで
に要する時間は約14分、分離係数は1.22、(1)と(2)
のピークの面積比は50：50であつた。 実施例 ２ （＋）−α−（４−クロロフエニル）イソ吉草酸
17.0gをｎ−ヘキサン・トルエン混液（６：１）
70mlに溶かし、ジメチルホルムア９mgを加えて40
℃に加温する。これに塩化チオニル11.5gを１時
間で滴下し、40℃で５時間撹拌したのち室温、減
圧下で溶媒を留去し、（＋）−α−（４−クロフエ
ニ）イソ吉酸クロリド約17.5gを得る。 Ｄ−フエニルグリシン9.5gを2N水酸化ナトリ
ウム液32mlに溶かし、エチルエーテル20mlを加
え、氷冷下に激しくかきまぜながら前述の（＋）
−α−（４−クロロフエニル）イソ吉草酸クロリ
ド約17.5gおよび2N水酸化ナトリウム液35mlを10
〜15分おきに７回に分割して加え、さらに２時間
室温で激しくきまぜたのち反応液をエチルエーテ
ル50mlで２回洗い、6N塩酸で酸性とし、生成す
る油状物を酢酸エチル100mlで３回抽出する。抽
出液を水100mlで２回洗い無水硫酸ナトリウムで
脱水後減圧下で溶媒を留去する。残留物にｎ−ヘ
キサン200mlを加え撹拌、洗浄したのち下層をと
り減圧下で溶媒を留去し、式 で示される化合物21gを得た。 融点；68〜70℃ 旋光度；〔α〕20 D＝−105.2゜（ｃ＝2.2％、テトラ
ヒドロフラン） 元素分析値 炭素(%) 水素(%) 窒素(%) 塩素(%) 計算値 65.99 5.83 4.05 10.25 実測値 65.49 5.99 3.79 10.41 次いで、この化合物4gをとり、脱水テトラヒ
ドロフラン40mlに溶かし、氷冷下撹拌しながら１
−エトキシカルボニル−２−エトキシ−１，２−
ジヒドロキノリン3.2gを加えて、氷冷下、１時間
撹拌したのち、実施例１で得られた３−アミノプ
ロピルシリル化シリカゲル（APS）2.5gを加え、
減圧下で十に脱気したのち、室温でゆるやに１昼
夜撹拌する。反応物をテトラヒドロフラン30mlで
４回、ついでメタノール30mlで２回、さらにエチ
ルエーテル30mlで２回洗い乾燥してＮ−｛（＋）−
α−（４−クロロフエニル）イソバレロイル｝−Ｄ
−フエニルグリシンをグラフトした目的の充填剤
を得た。このものの元素分析値はＮ：1.26％、
Ｃ：8.72％で、これはシリカゲル1gに対し、Ｎ−
｛（＋）−α−（４−クロロフエニル）イソバレロイ
ル｝−Ｄ−フエニルグリシンが約0.34ｍmolグラ
フトされたことを示す。 このようにして得られた充填剤を内径４mm、長
さ25cmのステンレス製カラムにスラリー充填し、
次の条件でＮ−３，５−ジニトロベンゾイル−
（Ｒ、Ｓ）−１−シクロヘキシルエチルアミンを分
析し、図−２のクロマトグラムを得た。 温度：室温 移動相：ｎ−ヘキサン／１，２−ジクロルエタ
ン／エタノール（100：20：１） 流量：1.0ml／分 検出器：紫外線吸収計（波長：254nm） 図−２中、ピーク番号(1)はＮ−３、５−ジニト
ロベンゾイル−(S)−１−シクロヘキシルエチルア
ミン、(2)はＮ−３、５−ジニトロベンゾイル−(R)
−１−シクロヘキシルエチルアミンの各ピークで
ある。(1)のピークが溶出するまでに要する時間は
約10分、分係数は1.20、(1)と(2)のピークの面積比
は50：50であつた。 比較例 夫々、実施例１，２において得られた本発明に
なるＮ−（＋）−トランス−クリサンテモイル−Ｄ
−フエニルグリシンをグラフトしたシリカゲル
（以下CHR−PHG−Siと略す）、Ｎ−｛（＋）−α
−（４−クロロフエニル）イソバレロイル｝−Ｄ−
フエニルグリシンをグラフトしたシリカゲル（以
下CPI−PHG−Siと略す）および特開昭56−1350
号公報実施例１に従つて製造したＮ−ホルミル−
Ｌ−バリンをグラフトしたシリカゲル（以下
FVAと略す）を内径４mm、長さ25cmのステンレ
ス製カラムにスラリー充填し、次の条件で以下の
化合物の鏡像体を分析し各々の分離能を比較した
結果、第１表に示すように本発明になる充填剤は
FVAに比べてＮ−３，５−ジニトロベンゾイル
化したアミノ酸エステル、Ｎ−アシル化アミン、
カルボン酸アニリドの鏡像体の分離に優れた性能
を発揮した。 温度：室温 流量：1.0ml／min 検出器：紫外線吸収計（波長：254nm） 【表】
フトしたクロマトグラフ充填剤およびそれを用い
て不斉炭素に結合した−NH−基、−OCNH−基、
−OCO−基または−OH基を有する化合物の鏡像
体混合物を液体クロマトグラフイーにより分離
し、分析する方法に関するものある。 液体クロマトグラフイーにより、不斉炭素を有
する化合物の鏡像体混合物を直接分離、分析する
ための光学活性な化合物をグラフトした充填剤と
してはこれまでに例えば、Davankov等による光
学活性なプロリンをグラフトした充填剤を用いる
配位子交換による方法、Gil−Av等によるπ電子
不足の光学活性化合物をグラフトした充填剤を用
いる電荷移動錯体による方法、原等による光学活
性なＮ−アシル化アミノ酸をグラフトした充填剤
を用いるＮ−アシル化アミノ酸エステルやＮ−ア
シル化ジペプチドエステルの分離あるいはPirkle
等による光学活性な１−（９−アンスリル）トリ
フルオロエタノールをグラフトした充填剤を用い
る３，５−ジニトロベンゾイル化したアミノ酸、
アミン、オキシ酸、スルホキシド等の分離および
３，５−ジニトロベンゾイル化した光学活性なフ
エニルグリシンをグラフトした充填剤を用いる芳
香族アルコールの分離などが報告されている。 しかし、これらの方法は分離し得る化合物が狭
範囲のものに限定されたり、また、分離の程度が
小さかつたりさらにはグラフトした充填剤の製造
が困難で、再現性のある性能を持つ充填剤が得に
くかつたりして、いずれも実用的な充填剤とは言
い難い。 本発明者らはかかる状況のもとで分析し得る化
合物の適用範囲が広く、製造が比較的容易でしか
も化学的に安定で実用的なグラフトした充填剤の
開発を目標に鋭意検討を続けて来た結果、ヒドロ
キシル基をその表面に持つ無機担体に不斉炭素を
含む光学活性な第一菊酸またはα−（４−クロロ
フエニル）イソ吉草酸残基でアシル化された光学
活性なフエニグリシンをグラフトしたクロマトグ
ラフ充填剤が不斉炭素に結合した−NH−基、−
CONH−基、−OCO−基または−OH基を有する
化合物の鏡像体混合物の分離に優れた効果を示す
のみならず、通の化学反応で容易に製造し得るう
え、化学的にも安定であるなど極めて有な充填剤
であることを見出し、本発明に至つたものであ
る。 即ち本発明はヒドロキシル基をその表面に持つ
無機担体に、不斉炭素を含む光学活性な第一菊酸
またはα−（４−クロロフエニル）イソ吉草酸に
よりアシル化された光学活性なフエニルグリシン
とアミノアルキルシランを結合して成る光学活性
なオルガノシランがグラフトされているクロマト
グラフ充填剤およびそれを液体クロマトグラフイ
ーの固定相に用いて不斉炭素に結合した−NH−
基、−CONH基、−OCO−基または−OH基を有
する化合物の鏡像体混合物を分離し、分析する方
法を提するものである。 本発明についてさらに詳細に述べる。 本発明においてグラフトされているオルガノシ
ランとしては、例えば一般式〔〕 〔式中、R1，R2およびR3はアルキル基、アル
コキシル基、ヒドロキシル基またはハロゲン原子
より選ばれ、少なくとも１つはアルコキシル基ま
たはハロゲン原子である。ｎは２から４までの整
数である。Ａは光学活性な３−（２−メチル−１
−プロペニル）−２，２−ジメチル−１−シクロ
プロピル基または光学活性な１−（４−クロロフ
エニル）−イソブチル基である。＊は不斉炭素を
表わす〕で示される光学活性なＮ−アシル化フエ
ニルグリシンの誘導体を挙げることができる。ま
た、アミノアルキルシラン成分としてはω−アミ
ノアルキルアルコキシシランまたはω−アミノア
ルキルハロゲノシランが好ましく、例えばγ−ア
ミノプロピルトリエトキシシラン、γ−アミノプ
ロピルトリクロロシランなどを挙げることができ
る。 本発明においてヒドロキシル基をその表面に持
つ無機担体としては、例えばシリカゲルなどのシ
リカ含有担体が好ましく、担体の形状は球状、破
砕状などいずれの形状でも差支えないが、高効率
のクロマトグラフ用カラムを得るためにはできる
だけ粒径の揃つた微細な粒子が好ましい。 本発明の新規なクロマトグラフ充填剤を調製す
るに際しては種々のグラフト方法が採用でき、例
えば以下のような方法が挙げられる。 その表面にヒドロキシル基を有する無機担体
にアミノアルキルシランを反応させ、無機担体
の表面にアミノアルキルシリル残基を導入し、
これに光学活性な第一菊酸またはα−（４−ク
ロロフエニル）イソ吉草酸残基でアシル化され
た光学活性なフエニルグリシンを反応させ、脱
水縮合させる方法。 より具体的にはその表面にヒドロキシル基を有
する無機担体に一般式〔〕 〔式中、R1、R2、R3、およびｎは前述と同
じ意味を有する。〕 で示されるアミノアルキルシランを既知の方法
により反応させ、無機担体の表面にアミノアル
キルシリル残基を導入し、次いでこれに一般式
〔〕 〔式中、Ａおよび＊は前述と同じ意味を有す
る。〕 で示される不斉炭素を有する光学活性なＮ−ア
シル化フエニルグリシン、例えばＮ−クリサン
テモイルフエニルグリシン、Ｎ−｛α−（４−ク
ロロフエニル）イソバレロイル｝フエニルグリ
シン等を反応せしめ、脱水縮合させることによ
り目的の充填物が得られる。なお上記一般式
〔〕に示す不斉炭素を有する光学活性なＮ−
アシル化フエニルグリシンは一般によく用いら
れる方法で合成でき、例えば第一菊酸またはα
−（４−クロロフエニル）イソ吉草酸をそれら
の酸クロリドとし、これに脱塩酸剤の存在下で
フエニグリシンを反応させることにより得られ
る。 光学活性なＮ−アシル化フエニルグリシンに
アミノアルキルシランを反応させて得られるオ
ルガノシランを、その表面にヒドロキシル基を
有する無機担体にグラフトする方法。 より具体的には前記一般式〔〕で示される
Ｎ−アシル化フエニルグリシンに一般式〔〕
で示されるアミノアルキルシランを反応させて
得られる一般式〔〕で示されるオルガノシラ
ンをシリカゲル等の無機担体にグラフトするこ
とにより目的の充填剤が得られる。 本発明によつて得られた光学活性なＮ−アシル
化フエニルグリシン残基を持つ充填剤は常法に従
つてクロマトグラフのカラムに充填され、液体ク
ロマトグラフイーの固定相として使用される。本
固定相を用いる液体クロマトグラフイーにおいて
適当な溶離条件、特に通常よくいられる順相分配
の条件を選ぶことにより、不斉炭素に結合した−
NH−基、−CONH−基、−OCO−基または−OH
基を有する化合物の鏡像体混合物の分離、分析が
分離能良く、かつ短時間に行なうことができる。 実施例 １ シリカゲル（粒径10μm、孔径60Å、表面積500
m2／ｇ）10gを減圧、130℃で４時間乾燥したの
ち、３−アミノプロピルトリエトキシシラン20g
を200mlの脱水トルエン溶かした液に加え、60℃
にて６時間撹拌する。反応物をろ過し、残留物を
アセトン100mlで洗い、乾燥して３−アミノプロ
ピルシリル化シリカゲル（APS）を得た。この
ものの元素分析値はＮ：1.20％、Ｃ：3.40％であ
り、これはシリカゲ1gに対し、３−アミノプロ
ピル基が約0.90ｍmolグラフトされたことに相当
する。 別に、Ｄ−フエニルグリシン10gを2N水酸化ナ
トリム液33mlに溶かし、エチルエーテル20mlを加
え、氷冷下で激しくかきまぜながら（＋）−トラ
ンス−菊酸クロリド15gおよび2N水酸化ナトリウ
ム液40mlを10〜15分おきに７回に分割して加え
る。さらに２時間室温で激しくかきまぜたのち反
応液をエチルエーテル50mlで２回洗い、6N塩酸
で酸性とし、生成する油状物を酢酸エチル100ml
で３回抽出する。抽出液を水100mlで２回洗い、
無水硫酸ナトリウムで脱水し、減圧下で濃縮した
のち酢酸エチル・ｎ−ヘキサン混液から再結晶
し、Ｎ−（＋）−トランス−クリサンテモイル−Ｄ
−フエニルグリシン15gを白色結晶として得た。 融点；76〜80℃ 旋光度；〔α〕20 D＝−38.8゜（ｃ＝２％、クロロホ
ルム） 元素分析値 炭素(%) 水素(%) 窒素(%) 計算値 71.74 7.70 4.65 実測値 71.58 7.65 4.58 次にこの化合物12gとＮ−ヒドロキシコハク酸
イミド4.6gを脱水テトラヒドロフン100mlに溶か
し、氷冷して激しくかきまぜながら、ジシクロヘ
キシルカルボジイミド8.3gを脱水テトラヒドロフ
ラン20mlに溶かして30分間で滴加する。氷冷下で
２時間さらに室温３時間撹拌したのち析出物をろ
過して除き、溶媒を減圧留去する。残留物を酢酸
エチル150mlに溶かし、水50mlで２回洗い、無水
硫酸ナトリウムで脱水し、減圧下で濃縮したのち
酢酸エチル・ｎ−ヘキサン混液から再結晶し、式 で示される化合物12gを白色結晶として得た。 融 点；80〜85℃ 旋光度；〔α〕20 D＝122.9゜（ｃ＝２％、クロロホル
ム） 元素分析値 炭素(%) 水素(%) 窒素(%) 計算値 66.32 6.58 7.03 実測値 66.53 6.31 6.99 次いで、この化合物6gをとり、前記アミノプ
ロピルシリル化シリカゲル（APS）3gを脱水テ
トラヒドロフラン30mlに懸濁させ、減圧下だ十分
に脱気した液に加え、室温で５時間、ついで50℃
で５時間ゆるやに撹拌する。室温まで放冷したの
ちテトラヒドロフラン30mlで３回、ついでメタノ
ール30mlで２回、さらにエチエーテル30ml２回洗
い、乾燥してＮ−（＋）−トランス−クリサンテモ
イル−フエニルグリシンをグラフトした目的の充
填剤を得た。このものの元素分析値はＮ：1.74
％、Ｃ：13.3％であり、これはシリカゲル1gに対
し、Ｎ−（＋）−トランス−クリサンテモイル−Ｄ
−フエニルグリシンが約0.53ｍmolグラフトされ
たことを示す。このようにして得られた充填剤を
内径４mm、長さ30cmのステンレス製カラムにスラ
リー充填し、次の条件で（±）−１−（４−クロロ
フエニル）−４，４−ジメチル−２−（１，２，４
−トリアゾール−１−イル）−１−ペンテン−３
−オールを分析し、図−１のクロマトグラムを得
た。 温度：室温 移動相：ヘキサン／１，２−ジクロルエタン／
エタノール（350：40：４） 流量：1.0ml／分 検出器：紫外線吸収計（波長 254nm） 図−１中、ピーク番号(1)（−）−１−（４−クロ
ロフエニル）−４，４−ジメチル−２−（１，２，
４−トリアゾール−１−イル）−１−ペンテン−
３−オール、(2)は（＋）−１−（４−クロロフエニ
ル）−４，４−ジメチル−２−（１，２，４−トリ
アゾール−１−イル）−１−ペンテン−３−オー
ルの各ピークである。(1)のピークが溶出するまで
に要する時間は約14分、分離係数は1.22、(1)と(2)
のピークの面積比は50：50であつた。 実施例 ２ （＋）−α−（４−クロロフエニル）イソ吉草酸
17.0gをｎ−ヘキサン・トルエン混液（６：１）
70mlに溶かし、ジメチルホルムア９mgを加えて40
℃に加温する。これに塩化チオニル11.5gを１時
間で滴下し、40℃で５時間撹拌したのち室温、減
圧下で溶媒を留去し、（＋）−α−（４−クロフエ
ニ）イソ吉酸クロリド約17.5gを得る。 Ｄ−フエニルグリシン9.5gを2N水酸化ナトリ
ウム液32mlに溶かし、エチルエーテル20mlを加
え、氷冷下に激しくかきまぜながら前述の（＋）
−α−（４−クロロフエニル）イソ吉草酸クロリ
ド約17.5gおよび2N水酸化ナトリウム液35mlを10
〜15分おきに７回に分割して加え、さらに２時間
室温で激しくきまぜたのち反応液をエチルエーテ
ル50mlで２回洗い、6N塩酸で酸性とし、生成す
る油状物を酢酸エチル100mlで３回抽出する。抽
出液を水100mlで２回洗い無水硫酸ナトリウムで
脱水後減圧下で溶媒を留去する。残留物にｎ−ヘ
キサン200mlを加え撹拌、洗浄したのち下層をと
り減圧下で溶媒を留去し、式 で示される化合物21gを得た。 融点；68〜70℃ 旋光度；〔α〕20 D＝−105.2゜（ｃ＝2.2％、テトラ
ヒドロフラン） 元素分析値 炭素(%) 水素(%) 窒素(%) 塩素(%) 計算値 65.99 5.83 4.05 10.25 実測値 65.49 5.99 3.79 10.41 次いで、この化合物4gをとり、脱水テトラヒ
ドロフラン40mlに溶かし、氷冷下撹拌しながら１
−エトキシカルボニル−２−エトキシ−１，２−
ジヒドロキノリン3.2gを加えて、氷冷下、１時間
撹拌したのち、実施例１で得られた３−アミノプ
ロピルシリル化シリカゲル（APS）2.5gを加え、
減圧下で十に脱気したのち、室温でゆるやに１昼
夜撹拌する。反応物をテトラヒドロフラン30mlで
４回、ついでメタノール30mlで２回、さらにエチ
ルエーテル30mlで２回洗い乾燥してＮ−｛（＋）−
α−（４−クロロフエニル）イソバレロイル｝−Ｄ
−フエニルグリシンをグラフトした目的の充填剤
を得た。このものの元素分析値はＮ：1.26％、
Ｃ：8.72％で、これはシリカゲル1gに対し、Ｎ−
｛（＋）−α−（４−クロロフエニル）イソバレロイ
ル｝−Ｄ−フエニルグリシンが約0.34ｍmolグラ
フトされたことを示す。 このようにして得られた充填剤を内径４mm、長
さ25cmのステンレス製カラムにスラリー充填し、
次の条件でＮ−３，５−ジニトロベンゾイル−
（Ｒ、Ｓ）−１−シクロヘキシルエチルアミンを分
析し、図−２のクロマトグラムを得た。 温度：室温 移動相：ｎ−ヘキサン／１，２−ジクロルエタ
ン／エタノール（100：20：１） 流量：1.0ml／分 検出器：紫外線吸収計（波長：254nm） 図−２中、ピーク番号(1)はＮ−３、５−ジニト
ロベンゾイル−(S)−１−シクロヘキシルエチルア
ミン、(2)はＮ−３、５−ジニトロベンゾイル−(R)
−１−シクロヘキシルエチルアミンの各ピークで
ある。(1)のピークが溶出するまでに要する時間は
約10分、分係数は1.20、(1)と(2)のピークの面積比
は50：50であつた。 比較例 夫々、実施例１，２において得られた本発明に
なるＮ−（＋）−トランス−クリサンテモイル−Ｄ
−フエニルグリシンをグラフトしたシリカゲル
（以下CHR−PHG−Siと略す）、Ｎ−｛（＋）−α
−（４−クロロフエニル）イソバレロイル｝−Ｄ−
フエニルグリシンをグラフトしたシリカゲル（以
下CPI−PHG−Siと略す）および特開昭56−1350
号公報実施例１に従つて製造したＮ−ホルミル−
Ｌ−バリンをグラフトしたシリカゲル（以下
FVAと略す）を内径４mm、長さ25cmのステンレ
ス製カラムにスラリー充填し、次の条件で以下の
化合物の鏡像体を分析し各々の分離能を比較した
結果、第１表に示すように本発明になる充填剤は
FVAに比べてＮ−３，５−ジニトロベンゾイル
化したアミノ酸エステル、Ｎ−アシル化アミン、
カルボン酸アニリドの鏡像体の分離に優れた性能
を発揮した。 温度：室温 流量：1.0ml／min 検出器：紫外線吸収計（波長：254nm） 【表】
図−１及び図−２はそれぞれ実施例１および２
において得られたクロマトグラムであり、縦軸は
強度を横軸は保持時間を表す。
において得られたクロマトグラムであり、縦軸は
強度を横軸は保持時間を表す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 一般式〔〕 〔式中、R1、R2およびR3はアルキル基、アル
コキシル基、ヒドロキシル基またはハロゲン原子
より選ばれ、少なくとも１つはアルコキシル基ま
たはハロゲン原子である。ｎは２から４までの整
数である。Ａは光学活性な３−（２−メチル−１
−プロペニル）−２，２−ジメチル−１−シクロ
プロピル基または光学活性な１−（４−クロロフ
エニル）−イソブチル基である。＊は不斉炭素を
表わす〕で示される光学活性なオルガノシラン
が、ヒドロキシル基をその表面に持つ無機担体に
グラフトされているクロマトグラフ充填剤。 ２ ヒドロキシル基をその表面に持つ無機担体が
シリカゲルである特許請求の範囲第１項に記載の
クロマトグラフ充填剤。 ３ 上記一般式〔〕においてR1、R2およびR3
がエトキシ基で、ｎが３である特許請求の範囲第
１項または第２項に記載のクロマトグラフ充填
剤。 ４ 上記一般式〔〕においてR1、R2およびR3
がClで、ｎが３である特許請求の範囲第１項また
は第２項に記載のクロマトグラフ充填剤。 ５ 一般式〔〕 〔式中、R1、R2およびR3はアルキル基、アル
コキシル基、ヒドロキシル基またはハロゲン原子
より選ばれ、少なくとも１つはアルコキシル基ま
たはハロゲン原子である。ｎは２から４までの整
数である。Ａは光学活性な３−（２−メチル−１
−プロペニル）−２，２−ジメチル−１−シクロ
プロピル基または光学活性な１−（４−クロロフ
エニル）−イソブチル基である。＊は不斉炭素を
表わす〕で示される光学活性なオルガノシラン
が、ヒドロシキル基をその表面に持つ無機担体に
グラフトされているクロマトグラフ充填剤を用い
て、不斉炭素に結合した−NH−基、−CONH−
基、−OCO−基または−OH基を有する化合物の
鏡像体混合物を分離し、分析することを特徴とす
る液体クロマトグラフイー分析法。 ６ ヒドロキシル基をその表面に持つ無機担体が
シリカゲルであるクロマトグラフ充填剤を用いる
特許請求の範囲第５項記載の分析法。 ７ 上記一般式〔〕においてR1、R2およびR3
がエトシキ基で、ｎが３であるクロマトグラフ充
填剤を用いる特許請求の範囲第５項または第６項
記載の分析法。 ８ 上記一般式〔〕においてR1、R2およびR3
がCl基で、ｎが３であるクロマトグラフ充填剤を
用いる特許請求の範囲第５項または第６項記載の
分析法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57131378A JPS5920852A (ja) | 1982-07-27 | 1982-07-27 | 光学活性なアシル化アミノ酸をグラフトしたクロマトグラフ充填剤およびそれを用いる鏡像体混合物の分析法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57131378A JPS5920852A (ja) | 1982-07-27 | 1982-07-27 | 光学活性なアシル化アミノ酸をグラフトしたクロマトグラフ充填剤およびそれを用いる鏡像体混合物の分析法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5920852A JPS5920852A (ja) | 1984-02-02 |
| JPH0440660B2 true JPH0440660B2 (ja) | 1992-07-03 |
Family
ID=15056541
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57131378A Granted JPS5920852A (ja) | 1982-07-27 | 1982-07-27 | 光学活性なアシル化アミノ酸をグラフトしたクロマトグラフ充填剤およびそれを用いる鏡像体混合物の分析法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5920852A (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS627934A (ja) * | 1985-07-03 | 1987-01-14 | Hitachi Ltd | 可変容量式タ−ボチヤ−ジヤ |
| JP2538618B2 (ja) * | 1987-10-13 | 1996-09-25 | 昭二 原 | 分離剤 |
-
1982
- 1982-07-27 JP JP57131378A patent/JPS5920852A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5920852A (ja) | 1984-02-02 |
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