JPH04190781A - 細胞電気処理チャンバー - Google Patents
細胞電気処理チャンバーInfo
- Publication number
- JPH04190781A JPH04190781A JP2324135A JP32413590A JPH04190781A JP H04190781 A JPH04190781 A JP H04190781A JP 2324135 A JP2324135 A JP 2324135A JP 32413590 A JP32413590 A JP 32413590A JP H04190781 A JPH04190781 A JP H04190781A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cell
- cells
- electrode
- chamber
- movable electrode
- Prior art date
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- Pending
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- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、細胞電気処理チャンバー、特に、細胞に直流
電圧を印加することにより細胞処理を行うためのチャン
バーに関する。
電圧を印加することにより細胞処理を行うためのチャン
バーに関する。
農業、林業、水産、畜産及び医学等の分野において、細
胞を電気的に融合する電気融合法が採用されている。ま
た、細胞に遺伝子導入を行う場合においても、同様に電
気的手法が確立されている。
胞を電気的に融合する電気融合法が採用されている。ま
た、細胞に遺伝子導入を行う場合においても、同様に電
気的手法が確立されている。
このような細胞電気処理に用いられるチャンバーは、一
般に、チャンバー本体と、チャンバー本体内に配置され
た１対の対向電極とを有している。
般に、チャンバー本体と、チャンバー本体内に配置され
た１対の対向電極とを有している。
また、対向電極には、交流電圧印加用の交流電源及び直
流電圧印加用の直流電源が接続されている。
流電圧印加用の直流電源が接続されている。
たとえば電気融合を行う際には、まずチャンバー本体内
に細胞を含む懸濁液を導入する０次に、対向電極間に交
流電圧を印加する。すると、細胞が液中を泳動し、細胞
同士が接触する。これにより、バールチェーンが形成さ
れる０次に、対向電極間に直流電圧を印加し細胞融合を
行う。
に細胞を含む懸濁液を導入する０次に、対向電極間に交
流電圧を印加する。すると、細胞が液中を泳動し、細胞
同士が接触する。これにより、バールチェーンが形成さ
れる０次に、対向電極間に直流電圧を印加し細胞融合を
行う。
前記従来のチャンバーにおいては、対向電極間に交流電
圧を印加するための交流電源が必要である。このため、
処理装置全体が高価になる。また、特に粘着性の高い細
胞を用いた場合において、細胞がチャンバー本体底壁上
に付着すると交流電圧を印加しても細胞が泳動できない
場合がある。この結果、細胞同士を接触させることがで
きず、バールチェーンの形成が困難となる。
圧を印加するための交流電源が必要である。このため、
処理装置全体が高価になる。また、特に粘着性の高い細
胞を用いた場合において、細胞がチャンバー本体底壁上
に付着すると交流電圧を印加しても細胞が泳動できない
場合がある。この結果、細胞同士を接触させることがで
きず、バールチェーンの形成が困難となる。
本発明の目的は、細胞処理を安価かつ確実に行える細胞
電気処理チャンバーを提供することにある。
電気処理チャンバーを提供することにある。
本発明に係る細胞電気処理チャンバーは、チャンバー本
体と、対向電極と、第１及び第２捕捉部とを備えている
。
体と、対向電極と、第１及び第２捕捉部とを備えている
。
前記チャンバー本体は、処理すべき第１及び第２の細胞
を含む液を収容するものである。前記対向電極は、チャ
ンバー本体内に設けられ、各細胞に直流電圧を印加する
ための固定電極及び可動電極から構成されている。前記
第１捕捉部は、可動電極が設けられるとともに、第１の
細胞を捕捉するための凹部を有する移動自在なものであ
る。前記第２捕捉部は、固定電極上に固定され、第２の
細胞を捕捉するための切欠きを有するものである。
を含む液を収容するものである。前記対向電極は、チャ
ンバー本体内に設けられ、各細胞に直流電圧を印加する
ための固定電極及び可動電極から構成されている。前記
第１捕捉部は、可動電極が設けられるとともに、第１の
細胞を捕捉するための凹部を有する移動自在なものであ
る。前記第２捕捉部は、固定電極上に固定され、第２の
細胞を捕捉するための切欠きを有するものである。
本発明では、まず、チャンバー本体内の固定電極及び可
動電極の間に処理すべき第１及び第２の細胞を含む液を
入れる０次に、可動電極が設けられた第１捕捉部を移動
させて、その凹部により第１の細胞を捕捉する。そして
、第１捕捉部をさらに移動させることにより、第１の細
胞を第２の細胞とともに固定電極側に移動させ、第１捕
捉部側の可動電極と固定電極との間に各細胞を配列させ
る。このとき、第１捕捉部の凹部には第１の細胞が捕捉
されており、また固定電極上に固定された第２捕捉部の
切欠き内には第２の細胞が捕捉されている。この状態か
ら第１捕捉部を第２捕捉部側にさらに接近させることに
より、第１の細胞を第２の細胞に圧接させる。
動電極の間に処理すべき第１及び第２の細胞を含む液を
入れる０次に、可動電極が設けられた第１捕捉部を移動
させて、その凹部により第１の細胞を捕捉する。そして
、第１捕捉部をさらに移動させることにより、第１の細
胞を第２の細胞とともに固定電極側に移動させ、第１捕
捉部側の可動電極と固定電極との間に各細胞を配列させ
る。このとき、第１捕捉部の凹部には第１の細胞が捕捉
されており、また固定電極上に固定された第２捕捉部の
切欠き内には第２の細胞が捕捉されている。この状態か
ら第１捕捉部を第２捕捉部側にさらに接近させることに
より、第１の細胞を第２の細胞に圧接させる。
次に、対向電極間に直流電圧を印加することにより、細
胞に電気融合等の電気処理が施される。
胞に電気融合等の電気処理が施される。
この場合には、第１及び第２捕捉部を用いて各細胞を接
触させるので、対向電極間に交流電圧を印加する必要が
なく、これにより装置全体を安価に構成でき、細胞処理
を安価に行える。また、処理すべき各細胞が第１及び第
２捕捉部の凹部及び切欠き内に捕捉された状態で細胞同
士が接触するので、電気処理を確実に行える。
触させるので、対向電極間に交流電圧を印加する必要が
なく、これにより装置全体を安価に構成でき、細胞処理
を安価に行える。また、処理すべき各細胞が第１及び第
２捕捉部の凹部及び切欠き内に捕捉された状態で細胞同
士が接触するので、電気処理を確実に行える。
第１図及び第２図は本発明の一実施例を示している。
これらの図において、スライドガラス１上には、ケース
（チャンバー本体）２が配置されている。
（チャンバー本体）２が配置されている。
ケース２は、スライドガラス１上に接着剤等で固定され
ている。ケース２は、角孔２ａを中央部に有している。
ている。ケース２は、角孔２ａを中央部に有している。
この角孔２ａ内には、固定電極３が固定されている。固
定電極３は、ケース２の外部に設けられた端子４に電気
的に接続されている。
定電極３は、ケース２の外部に設けられた端子４に電気
的に接続されている。
また、固定電極３の側壁上には、絶縁性のプレート５が
装着されている。このプレート５には、上下方向（第１
図の紙面直角方向）に延びるスリン）５ａが形成されて
いる。このスリット５ａは、処理すべき細胞同士を接触
させる際に一方の細胞を捕捉するためのものである。
装着されている。このプレート５には、上下方向（第１
図の紙面直角方向）に延びるスリン）５ａが形成されて
いる。このスリット５ａは、処理すべき細胞同士を接触
させる際に一方の細胞を捕捉するためのものである。
スライドガラスｌ上においてケース２の側方には、支持
台６が配置されている。この支持台６及びケース２を貫
通してロッド７がスライド自在に設けられている。ロッ
ド７の長手方向中央部にはねじ７ａが形成されている。
台６が配置されている。この支持台６及びケース２を貫
通してロッド７がスライド自在に設けられている。ロッ
ド７の長手方向中央部にはねじ７ａが形成されている。
また、ケース２と支持台６の間には、１１ｉｆｆナツト
８が設けられている。
８が設けられている。
この調節ナツト８は、ロッド７のねじ部７ａに螺合して
いる。この調節ナツト８を回転させることにより、ロッ
ド７が前進または後退する。また、ケース２上には、ロ
ックナツト９が設けられている。このロックナツト９は
、ケース２の上部に形成された雌ねじ２ｂ内に螺合して
おり、ロッド７を所望位置に位置決めするためのもので
ある。
いる。この調節ナツト８を回転させることにより、ロッ
ド７が前進または後退する。また、ケース２上には、ロ
ックナツト９が設けられている。このロックナツト９は
、ケース２の上部に形成された雌ねじ２ｂ内に螺合して
おり、ロッド７を所望位置に位置決めするためのもので
ある。
ロッド７の先端には、上下方向に伸びる支持部ｌＯが設
けられており、この支持部１０を介してガラス製のラッ
パ（捕捉部）１１が設けられている。このラッパ１１は
、第３図に示すように、先端部１２がラッパ状に形成さ
れている。このラッパ状先端部１２は、凹部１２ａを先
端に有している。また、ラッパ１１内には、長手方向に
孔１１ａが形成されている。この孔１１ａ内には、可動
電極１３が設けられている。可動電極１３は、孔１１ａ
内に固定されており、ラッパ１１と一体的に移動し得る
。また、可動電極１３には貫通孔１３ａが形成されてい
る。この貫通孔１３ａ内には、中空パイプ１５が嵌入し
ている。中空バイブ１５の他端にはチューブ１６が装着
されている。このチューブ１６．中空パイプ１５を介し
て外部から空気の出し入れを行うことにより、ラッパ状
先端部１２の凹部１２ａ内に細胞２０が捕捉（吸引ホー
ルド）される。一方、ロッド７の他端には、端子１４が
設けられている。可動電極１３は、この端子１４に電気
的に接続されている。また、各端子４及び１４は、図示
しない直流電源に接続されている。
けられており、この支持部１０を介してガラス製のラッ
パ（捕捉部）１１が設けられている。このラッパ１１は
、第３図に示すように、先端部１２がラッパ状に形成さ
れている。このラッパ状先端部１２は、凹部１２ａを先
端に有している。また、ラッパ１１内には、長手方向に
孔１１ａが形成されている。この孔１１ａ内には、可動
電極１３が設けられている。可動電極１３は、孔１１ａ
内に固定されており、ラッパ１１と一体的に移動し得る
。また、可動電極１３には貫通孔１３ａが形成されてい
る。この貫通孔１３ａ内には、中空パイプ１５が嵌入し
ている。中空バイブ１５の他端にはチューブ１６が装着
されている。このチューブ１６．中空パイプ１５を介し
て外部から空気の出し入れを行うことにより、ラッパ状
先端部１２の凹部１２ａ内に細胞２０が捕捉（吸引ホー
ルド）される。一方、ロッド７の他端には、端子１４が
設けられている。可動電極１３は、この端子１４に電気
的に接続されている。また、各端子４及び１４は、図示
しない直流電源に接続されている。
次に、上述のチャンバーを用いて細胞融合を行う場合に
ついて説明する。
ついて説明する。
細胞融合に用いられる細胞を第３図中央部に示す。第３
図において、この細胞２０は、透明体２１内に卵子２２
を有している。また、透明体２１内の囲卵腔２３内には
、精子２４が入れられている。なお、透明体２１として
は、人工のカプセルを用いるようにしてもよい。
図において、この細胞２０は、透明体２１内に卵子２２
を有している。また、透明体２１内の囲卵腔２３内には
、精子２４が入れられている。なお、透明体２１として
は、人工のカプセルを用いるようにしてもよい。
細胞融合を行う際には、まず、ケース２内にバッファ液
を入れ、次に固定電極２及び可動電極３０間に細胞２０
を入れる。この状態から、調節ナツト８を回してロッド
７を前進させ、ラッパ１１先端の凹部１２ａで細胞２０
を捕捉する。また、このとき、キャピラリーや針等を用
いて細胞２０の向きを変え、卵子２２が凹部１２ａ側に
配置されるようにする。そして、チューブ１６．中空バ
イブ１５を介して外部からエアーの出し入れを行うこと
により、細胞２０の捕捉（吸引ホールド）を行う。なお
、この作業は、スライドガラスｌの背面側から顕微鏡２
５（第２図）で観察しつつ行う。細胞２０が凹部１２ａ
に捕捉された状態からさらにラッパ１１を前進させ、細
胞２０を固定電極２側へ移動させる。そして、精子２４
とともに透明体２１及び卵子２２の一部をプレート５の
切欠き５ａ内に挿入させる。これにより、細胞２０が第
３図に示すように変形し、透明体２１内で卵子２２が精
子２４に圧接し、卵子２２及び精子２４の接触状態を得
ることができる。
を入れ、次に固定電極２及び可動電極３０間に細胞２０
を入れる。この状態から、調節ナツト８を回してロッド
７を前進させ、ラッパ１１先端の凹部１２ａで細胞２０
を捕捉する。また、このとき、キャピラリーや針等を用
いて細胞２０の向きを変え、卵子２２が凹部１２ａ側に
配置されるようにする。そして、チューブ１６．中空バ
イブ１５を介して外部からエアーの出し入れを行うこと
により、細胞２０の捕捉（吸引ホールド）を行う。なお
、この作業は、スライドガラスｌの背面側から顕微鏡２
５（第２図）で観察しつつ行う。細胞２０が凹部１２ａ
に捕捉された状態からさらにラッパ１１を前進させ、細
胞２０を固定電極２側へ移動させる。そして、精子２４
とともに透明体２１及び卵子２２の一部をプレート５の
切欠き５ａ内に挿入させる。これにより、細胞２０が第
３図に示すように変形し、透明体２１内で卵子２２が精
子２４に圧接し、卵子２２及び精子２４の接触状態を得
ることができる。
この状態から、固定電極２及び可動電極３の間に外部直
流電源からの直流高電圧を印加する。この結果、点接触
状態にあった卵子２２及び精子２４が融合し、細胞融合
が実現される。
流電源からの直流高電圧を印加する。この結果、点接触
状態にあった卵子２２及び精子２４が融合し、細胞融合
が実現される。
このように、本実施例では、交流電圧を印加することな
く細胞の接触状態を得ることができるので、交流電源が
不要となり、装置全体を安価に構成できる。これにより
、細胞融合を安価に行える。
く細胞の接触状態を得ることができるので、交流電源が
不要となり、装置全体を安価に構成できる。これにより
、細胞融合を安価に行える。
また、ラッパ１１先端の凹部１２ａ及びプレート５の切
欠き５ａにより各細胞を捕捉した状態で細胞同士の接触
が行われるので、細胞同士を確実に接触でき、細胞融合
が確実に行える。さらに、可動電極１３を固定電極２へ
接近させ電極間隔を狭めた状態で電気融合を行うので、
各電極間に印加する直流電圧が低くて済み、これにより
直流電源を小型化でき、細胞融合を一層安価に行える。
欠き５ａにより各細胞を捕捉した状態で細胞同士の接触
が行われるので、細胞同士を確実に接触でき、細胞融合
が確実に行える。さらに、可動電極１３を固定電極２へ
接近させ電極間隔を狭めた状態で電気融合を行うので、
各電極間に印加する直流電圧が低くて済み、これにより
直流電源を小型化でき、細胞融合を一層安価に行える。
なお、前記実施例では、細胞融合を行う場合を例にとり
説明したが、本発明は、遺伝子導入を行う場合にも同様
に適用できる。
説明したが、本発明は、遺伝子導入を行う場合にも同様
に適用できる。
本発明に係る細胞電気処理チャンバーは、上述のような
対向電極と、第１及び第２捕捉部とを備えている。した
がって、本発明によれば、細胞処理を安価かつ確実に行
える。
対向電極と、第１及び第２捕捉部とを備えている。した
がって、本発明によれば、細胞処理を安価かつ確実に行
える。
第１図は本発明の一実施例の平面概略図、第２図はその
■−■断面概略図、第３図は細胞融合処理を説明するた
めの図である。 ２・・・ケース（チャンバー本体）、３・・・固定電極
、１３・・・可動電極、１１・・・ラッパ、１２ａ・・
・凹部、５・・・プレート、５ａ・・・切欠き。 特許出願人 株式会社島津製作所 代理人 弁理士 小 野 由己男
■−■断面概略図、第３図は細胞融合処理を説明するた
めの図である。 ２・・・ケース（チャンバー本体）、３・・・固定電極
、１３・・・可動電極、１１・・・ラッパ、１２ａ・・
・凹部、５・・・プレート、５ａ・・・切欠き。 特許出願人 株式会社島津製作所 代理人 弁理士 小 野 由己男
Claims (1)
- （１）処理すべき第１及び第２の細胞を含む液を収容す
るチャンバー本体と、 前記チャンバー本体内に設けられかつ前記各細胞に直流
電圧を印加するための固定電極及び可動電極から構成さ
れた対向電極と、 前記可動電極が設けられるとともに、前記第１の細胞を
捕捉するための凹部を有する移動自在な第１捕捉部と、 前記固定電極上に固定され、前記第２の細胞を捕捉する
ための切欠きを有する第２捕捉部と、を備えた細胞電気
処理チャンバー。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2324135A JPH04190781A (ja) | 1990-11-26 | 1990-11-26 | 細胞電気処理チャンバー |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2324135A JPH04190781A (ja) | 1990-11-26 | 1990-11-26 | 細胞電気処理チャンバー |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04190781A true JPH04190781A (ja) | 1992-07-09 |
Family
ID=18162529
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2324135A Pending JPH04190781A (ja) | 1990-11-26 | 1990-11-26 | 細胞電気処理チャンバー |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH04190781A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004504022A (ja) * | 2000-07-14 | 2004-02-12 | ユニバーシティ オブ サウス フロリダ | 電気融合チャンバ |
-
1990
- 1990-11-26 JP JP2324135A patent/JPH04190781A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004504022A (ja) * | 2000-07-14 | 2004-02-12 | ユニバーシティ オブ サウス フロリダ | 電気融合チャンバ |
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