JPH04208856A - 全血から血清又は血漿を分離する方法および器具 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

［０００１１

【産業上の利用分野］本発明は体液、例えば全血試料か
ら血清および血漿成分を簡便かつ効率的に分離・回収す
る方法及び器具に係わる。 ［０００２］本発明による方法及び器具は、緊急時の臨
床化学分析検査、ベツドサイド検査等リアルタイムな検
査をしなければならない際の全血試料からの血清及び血
漿成分の分離・回収に利用される。 ［０００３］ 【従来の技術】全血液からの血清又は血漿の分離は、従
来より、また今日においても遠心分離機による方法が採
られ、一般的になっている。一方、ドライケミストリ試
薬の進歩で、緊急検査、ベツドサイドの迅速検査に対応
できるよう、試薬自体の中に血清又は血漿が分離できる
機構が開発されてきている。 ［０００４］例えば、Ｖｏｇｅ　ｌらの米国特許第４，
４７７．５７５号にガラス繊維の血球分離部と試薬反応
部分とが一体化した試験紙の方法が開示されている。こ
れによれば全血数１０μｌから微量（数μｍ）の血清又
は血漿が分離でき、リアルタイムに測定値が得られると
なっている。また、Ｍｉ　ｌｅｓの日本特許公開昭和６
４年第２１３６２号に赤血球凝集活性を有するレクチン
と吸収性材料（親水性無機粉末、セルロース系材料等）
とを用いて吸収性マトリックスを作製し、これを用いて
、全血から血球成分と血清・血漿成分を分離する方法が
開示されている。しかし、後者については実際には血球
分離能が不十分であり、また実用化されていない。 ［０００５］

【発明が解決しようとする課題】従来技術（遠心分離機
による分離方法等）によれば、多数の検体を検査する大
病院などには好適であるが、小さな個人病院などでは、
このような遠心分離機は高価でほとんど有していなだめ
、数項目〜１０項目程度の基本検査するのもままならな
い状態であり、このような施設では全血のまま保存し、
その後臨床検査センター等に検査を外注しているのが現
状である。その結果、検査結果をリアルタイムに得るこ
とができず、時には数日かかってしまうこともある。ま
た、全血のまま保存することがら溶血等で、検査項目に
よっては、検査値に誤差を生ずることもあり、簡易分離
方法の開発が切望されていた。 ［０００６］また、Ｖｏｇｅｌらの米国特許第４，４７
７．５７５号に開示されている方法は血球分離部と試薬
反応部分とが一体化とした方法であり、この場合、分離
された血清・血漿成分も微量であり、当然のことながら
、他の検査項目に用いることは不可能である。この測定
システムが用意している検査項目以外は検査できないと
いう欠点を有している。 ［０００７］

【発明の目的】従って、本発明は体液、例えば全血から
数項目〜１０項目程度の検査に供せられる血清又は血漿
成分を迅速にかつ簡便な方法により分離・回収すること
に係わり、これによって、従来技術における上述の問題
点を解決することを目的としている。 ［０００８］

【課題を解決するための手段及び方法】本発明者らは、
血球分離素材としてガラス繊維での血球分離能を鋭意研
究したところ、ガラス繊維単独では微量（数１０μＩ程
度）の全血液から数ｌＬｌの血清または血漿を分離する
には適当であるが、数項目〜１０項目程度の検査に供す
る血清又は血漿量１００〜数百ＩＬ１程度を得るには、
分離中に溶血現象を起こし易く、困難であることがわか
った。しかしながら、ポリアクリルエステル誘導体の特
に、ポリアクリル酸ブチル（以下ＰＢＡと略す）、ポリ
アクリル酸メチル（以下ＰＭＡと略す）またはポリアク
リル酸エチル（以下ＰＥＡと略す）及びポリエチレング
リコール（以下ＰＥＧと略す）を含有したガラス繊維を
用いた場合、約１ｍｌの全血から数百μｍの血清または
血漿が容易に数分以内に分離できることを、また加えて
レクチン含浸層を設けることにより、より効率的に分離
できることを見出だして本発明を完成するに至った。 ［０００９１本発明は、血球分離層（〜１）単独、ある
いはレクチン含浸層（〜２）の２層が一体化したカラム
やフィルターによる方法及び器具で、ガラス繊維に分離
促進剤として、ポリアクリルエステル誘導体とポリエチ
レングリコールを含有する血球分離層を有することを特
徴としている。 ［００１０１ポリアクリル工ステル誘導体としては、Ｐ
ＢＡ及びＰＭＡまたはＰＥＡが適しており、またＰＥＧ
との混合重量比として、　（１０〜１２）：　　（１〜
４）：（１〜４）で、総計含有量が２〜３％である時、
血球分離能が良好である。 ［００１１］　　（〜１）の血球分離層の上に設ける　
（〜２）のレクチン含浸層に用いる血球凝集剤としては
、血液型非特異性のレクチンであればいかなるものでも
良く、その濃度は０．０１〜０．００５％の微量で十分
な効果があった。使用できるレクチンは、例えば、Ａｂ
ｒｕｓ　　　ｐｒｅｃａｔｏｒｉｓ　　（アプリン、ト
ウアズキ）、Ｂａｕｈｈｉｎｉａ　　ｐｕｒｐｕｒｅａ
（モクワンジユ）、Ｃａｒａｇａｎａ　　ａｒｂｏｒｅ
ｓｃｅｎｓ（シベリア豆）、Ｃｏｄｉｕｍ　　ｆｒａｇ
ｉｌｅ　　（海緑藻）、Ｃｏｎｃａｎａｖａ　ｌ　ｉｎ
　　Ａ　（タチナタ豆）、Ｇｌｙｃ　ｉｎｅ　　ｍａｘ
　（大豆）、Ｌａｔｈｙｒｕｓｏｄｏｒａｔｕｓ　　（
スィートピー）Ｌｅｎｓ　　ｃｕｌｉｎａｒｉｓ（レン
ズ豆）、Ｌｉｍｕｌｕｓ　　ｐｏｌｙｐｈｅｍｕｓ（カ
ブトガニ）、Ｌｙｃｏｐｅｒｓ　ｉｃｏｎｅｓｃｕｌｅ
ｎｔｕｍ　　（トマト）、Ｍａｃ　ｌｕｒａｐｏｍｉｆ
ｅｒａ（オセージオレンジ）、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ　
　ｇａｌｌｉｓｅｐｔｉｃｕｍ、Ｐｅｒｓｅａｕ　　ａ
ｍｅｒｉｃａｎａ（アボガド）、ＰｈａＳｅＯｌｕｓ　
　ｃｏｃｃｉｎｅｕｓ　　（ベニバナインゲンハナササ
ゲ）、Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ　　Ｖｕｌｇａｒｉｓ　　（
赤インゲン豆）、Ｐｈｙｔｏｌａｃｃａａｍｅｒ　１ｃ
ａｎａ（アメリカヤマゴボウ）、Ｐｉｓｕｍ　　ｓａｔ
ｉｖｕｍ（エンドウ豆）、Ｐｓｏｐｈｏｃａｒｐｕｓ　
　ｔｅｔｒａｇｏｎｏｌｏｂｕｓ　　（ウィングピーシ
）、Ｒｉｃｉｎｕｓ　　ｃｏｍｍｕｎｉｓ　　（ヒマ）
、Ｓｏｌａｎｕｍ　　ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ（ジャガイモ
）、Ｔｒｉｔｉｃｕｍｖｕｌｇａｒｉｓ　　（コムギ麦
芽）、Ｖｉｃｉａ　　ｆａｂａ（ソラ豆）、Ｖｉｇｎａ
ｒａｄｉａｔａ　（緑豆）、ｖｉ　ｓｃｕｍ　　ａ　ｌ
ｂｕｍ　（ヨーロッパヤドリギ）、Ｗｉｓｔｅｒｉａ　
　ｆｌｏｒｉｂｕｎｔａ（フジ）などである。以下、本
発明に係る実施例で、更に詳細に説明する。 ［００１２］

【実施例】血清・血漿分離用カラムの作製東洋濾紙製ガ
ラス繊維ＧＢ１００Ｒをポリアクリル酸ブチル、ポリア
クリル酸メチル及びポリエチレングリコールを重量比で
１２：２：１で含有させた２、５％メタノール溶液に含
浸させ後、乾燥したものを細かく粉砕し、内径７ｍｍ高
さ３０ｍｍの円柱状カラムに１０ｍｍ充填し、次に、そ
の上にＧｌｙｃ　ｉｎｅｍａｘ　（大豆）の０．０１％
レクチン生理食塩液を含浸させ、室温で約１時間乾燥さ
せた本州製紙製不織布キノクロスに７０を同じ大きさに
カットし、重ねて、ミニカラムを作製した。 ［００１３１次に実施例で作製したミニカラムを用い、
実際に分離した血清または血漿中の成分量が従来の遠心
分離法で行った場合のそれと差があるかをみるため、以
下の試験を行った。 ［００１４］試験例１ 血清グルコース測定 濃度の異なる３種類の検体を用い、一方を遠心分離にて
血清分離を行ない（方法（〜１））、他方は本発明の血
清分離カラムを用いて、血清分離を行ない（方法（〜２
））、市販の試薬（酵素法）により、双方のグルコース
濃度を測定した。その結果を表１に示す。結果は以下表
に示すごとく、 得られた。 分離法の差はみられず、 良好な結果が ＊ １００１５］ 表１ 回　数　　検体　■　　　　　　検体　ＩＩ　　　　　
　検体　ＩＩＩ方法〜１　方法〜２　方法〜１　方法〜
２　方法〜１　方法〜２単位：ｍｇ／ｄｉ 試験例２ 血清３−ヒドロキシ酪酸測定 濃度の異なる３種類の検体を用い、一方を遠心分離にて
血清分離を行ない（方法（〜１））、他方は本発明の血
清分離カラムを用いて、血清分離を行ない（方法（〜※
※２））、市販の試薬（酵素法）により、双方の３−ヒ
ドロキシ酪酸濃度を測定した。その結果を表２に示す。 結果は以下表に示すごとく、分離法の差はみられず、良
好な結果が得られた。 表２ 回　数　検体　Ｉ　　　　　　検体　ＩＩ　　　　　　
検体　ＩＩＩ方法〜１　方法〜２　方法〜１　方法〜２
　方法〜１　方法〜２単位：μｍｏｌ／１ 試験例３ 濃度の異なる３種類の検体を用い、一方を遠心分離にて
血清分離を行ない（方法（〜１））、他方は本発明の血
清分離カラムを用いて、血清分離を行ない（方法（〜★
★２））、市販の試薬（酵素法）により、双方の３−ヒ
ドロキシ酪酸濃度を測定した。その結果を表３に示す。 結果は以下表に示すごとく、分離法の差はみられず、良
好な結果が得られた。 表３ 回　数　検体　Ｉ　　　　　　検体　ＩＩ　　　　　　
検体　ＩＩＩ方法〜１　方法〜２　方法〜１　方法〜２
　方法〜１　方法〜２１　　１０．５　１０．９　１７
．２　１７．８　３３．１　３３．４２　　１０．６　
１０．９　１７．２　１８．１　３３．０　３３．６単
位：ｍｇ／ａｌ ［００１６］

【発明の効果】数項目〜１０項目程度の検査に供する多
量の血液を血清又は血漿に採血と同時に簡便器具を用い
て分離する方法は分離中に溶血現象を起こすため、これ
まで実用化されてはいない。本発明はポリアクリルエス
テル誘導体、特にポリアクリル酸ブチル、ポリアクリル
酸メチルまたはポリアクリル酸エチル及びポリエチレン
グリコールを特定の比で含有したガラス繊維を用いた分
離層を設置し、また加えてレクチン含浸層を設けること
驕☆により採取血液の溶血を防止し、約１ｍｌの全血か
ら数百μｌの血清または血漿が容易に数分以内に分離で
きる効率的な分離方法及び器具を提供するものである。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明による一実施例を示す真空自動採血、血
清分離器具全形図（分離型）

【図２】本発明による一実施例を示す真空自動採血、血
清分離器具断面図（分離型）

【図３】本発明による一実施例を示す真空自動採血、血
清分離器具断面図（一体型）

【図４】本発明による一実施例を示す真空自動採血、血
清分離器具断面図（一体型）

【図５】本発明による一実施例を示す手動採血、血清分
離器具全形図

【符号の説明】

１〜注射釦 ２〜ガラスまたは樹脂性（真空）採血管３〜両両瞳台針 ４〜両両極台劃保持具 ５〜ガラスまたは樹脂性（真空）分門血Ｉへ採取管ａ〜
本発明■ｍ清分離素＋４設置カラムまたはフィルタ一部
ｌ〕〜ゴｊ１または非通気性樹脂からなる栓Ｃ〜・吸引
ピペット ｄ〜１１〜射器

【手続補正書】

【提出日】平成４年３月２日

【手続補正１】

【補正対象項目名】明細書

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正内容】

【古類名】　　　明細書

【発明の名称】　血清・血漿針一方法

【特許請求の範囲】

【請求項１】ポリアクリルニスデル誘導体及びポリエチ
レンゲリコールを含有するガラス繊維材をもって構成し
た血球分離層からなるフィルターに全血試料を希釈する
ことなく透過させることにより全血から血清・血漿成分
を分離させる血清・血漿分離方法。

【請求項２】ポリアクリルエステル誘導体及びポリエチ
レングリコールを含有するガラス繊維材をもって構成し
た血球分離層と、不織布等の繊維質基材にレクチンを含
浸させたレクチン含浸層とからなるフィルターに全血を
、試料を希釈することなく透過させることにより全血か
ら血清・血漿成分を分離させる血清・血漿分離方法。

【請求項３】血球分離層のガラス繊維は平均直径が、０
．５〜２．５μｍである請求項１又は２に記載の血清・
血漿分離方法。

【請求項４】ガラス繊維に含有するポリアクリルエステ
ル誘導体が、ａ、ポリアクリル酸ブチル、ｂ、ポリアク
リル酸メチル及び／又はＣ，ポリアクリル酸エチルであ
り、これらのの総計含有量が２〜３％で、その際のそれ
らの重量比が、ａ：ｂ：ｃ＝（１０〜１２）：　（１〜
４）：　　（１〜４）の範囲内にあることを特徴とする
請求項１，２又は３に記載の血清・血漿分離方法。

【請求項５】レクチン含浸層に用いる素材が、不織布、
ガラス繊維、セルロース等の繊維材であり、レクチン含
浸層に用いるレクチンが、アプリン、トウアズキ、モク
ワンジユ、シベリア豆、海緑藻、タチナタ豆、大豆、ス
ィートピー、レンズ豆、カブトガニ、トマト、オセージ
オレンジ、アボガド、ベニバナインゲンハナササゲ、類
インゲン豆、アメリカヤマゴボウ、エンドウ豆、ウィン
グビーン、ヒマ、ジャガイモ、コムギ麦芽、ソラ豆、ヨ
ーロッパヤドリギ、フジからなる群より選択される血液
型非特異性レクチン及びこれらの混合物であることを特
徴とする請求項１〜４又は５に記載の血清・血漿分離方
法・

【発明の詳細な説明】

［０００１１

【産業上の利用分野］本発明は体液、例えば全血試料か
ら血清及びけ血漿成分を簡便かつ効率的に分離・回収す
る方法に係わる。 ［０００２］本発明による方法は、緊急時の臨床化学分
析検査、ベツドサイド検査等リアルタイムな検査をしな
ければならない際の全血試料からの血清及び血漿成分の
分離・回収に利用される。 ［０００３］ 【従来の技術】全血液からの血清又は血漿の分離は、従
来より、又今日においても遠心分離機による方法が採ら
れ、一般的になっている。一方、ドライケミストリ試薬
の進歩で、緊急検査、ベツドサイドの迅速検査に対応で
きるよう、試薬自体の中に血清又は血漿が分離できる機
構が開発されてきている。 ［０００４］例えば、ボーゲル（■ｏｅｌ）らの米国特
許第４．４７７．５７５号明細書にガラス繊維の血球分
離部と試薬反Ｌコニ部分とが一体化した試験紙の方法が
開示されている。これによれば全血数１０μｌから微量
（数μｌ）の血清又は血漿が分離でき、リアルタイムに
測定値が得られるとなっている。また、マイルス（Ｍｉ
ｌｅｓ）の特回照６４二２１３６２号」に赤血球凝集活
性を有するレクチンと、吸収性材料（親水性無機粉末セ
ルロース系材料等）とを用いて吸収性マトリックスを作
製し、これを用いて全血から酊球成分と血清・血漿成分
を分離する方法が開示されている。 ［０００５］

【発明が解決しようとする課題】従来技術（遠心分離機
による分離方法等）によれば、多数の検体を検査する大
病院等には好適であるが、小さな個人病院等では、この
ような遠心分離機は高価でほとんど設置されていないた
め、数項目〜１０項目程度の基本検査するのもままなら
ない状態であり、このような施設では全血のまま保存し
、その後臨床検査センター等の外部の検査機関に検査を
依頼しているのが現状である。その結果、検査結果をリ
アルタイムに得ることができず、時には数日かかってし
まうこともある。また、全血のまま保存することから溶
血等で、検査項目によっては、検査値に誤差を生ずるこ
ともあり、簡易分離方法の開発が切望されていた。 ［０００６］また、ポーゲルらの米国特許第４，４７７
．５７５号に開示されている方法は血球分離部と試薬反
応部分とが一体化した試験片を使用する方法であり、こ
の場合、分離された血清・血漿成分も微量であり、当然
のことながら、他の検査項目に用いることは不可能であ
る。この測定システムが用意している検査項目以外は検
査できないという欠点を有している。更にマイルスの特
開昭６４−２１３６２号公報に示されている方法は、実
際には血球分離能が不充分であり、実用化もされていな
い。 ［０００７］このような従来の各種問題にかんがみ、本
発明は体液、例えば全血から数項目〜１０項目程度の検
査に供せられる血清又は血漿成分を迅速に、かつ簡便な
方法により分離・回収することができる方法の堤供を目
的としてなされたものである。 ［０００８］

【課題を解決するための手段及び作里】本発明者らは、
血球分離素材としてガラス繊維での血球分離能を鋭意研
究したところ、ガラス繊維単独では微量（数１０μｍ程
度）の全血液から数μｌの血清又は血漿を分離するには
適当であるが、数項目〜１０項目程度の検査に供する血
清・血漿量１００〜数百μｍ程度を得るには、分離中に
溶血現象を起こし易く、困難であることがわかった。し
かしながら、ポリアクリルエステル誘導体の特に、ポリ
アクリル酸ブチル（以下ＰＢＡと略す）、ポリアクリル
酸メチル（以下ＰＭＡと略す）又はポリアクリル酸エチ
ル（以下ＰＥＡと略す）及びポリエチレングリコール（
以下ＰＥＧと略す）を含有したガラス繊維を用いた場合
、約１ｍｌの全血から数百μｌの血清又は血漿が容易に
数分以内に分離できることを、また加えてレクチン含浸
層を設けることにより、より効率的に分離できることを
見出だして本発明を完成するに至った。 ［０００９］然して、本発明の要旨とする構成は、ポリ
アクリルエステル誘導体及びポリエチレングリコールを
含有するガラス繊維材をもって構成した血球分離層から
なるフィルターに全血試料を希釈することなく透過させ
ることにより全血から血清・血漿成分を分離させる血清
・血漿分離方法（請求項１）ある。 ［００１０１なお上記フィルターには、血球分離層と合
せて不織布等の繊維質基材にレクチンを含浸させたレク
チン含浸層を一体に設けてもよい（請求項２）。 ［００１１１ポリアクリル工ステル誘導体としては、Ｐ
ＢＡ、ＰＭＡ及び／又はＰＥＡが適しており、またＰＥ
Ｇとの混合重量比として、　（１０〜１２）：（１〜４
）　　：　　（１〜４）で、総計含有量が２〜３％であ
るとき、血球分離能が良好である（請求項４）。 ［００１２］レクチン含浸層に用いる血球凝集剤として
は、血液型非特異性のレクチンであればいかなるもので
も良く、その濃度は０．０１〜０．００５％の微量で十
分な効果があった。使用できるレクチンは、例えばアプ
リン、トウアズキ（Ａｂｒｕｓ　ｐｒｅｃａｔｏｒｉｓ
）　　、モクワンジユ（Ｂａｕｈｈｉｎｉａ　ｐｕｒｐ
ｕｒｅａ）　　、シベリア豆（Ｃａｒａｇａｎａ　ａｒ
ｂｏｒｅｓｃｅｎｓ）　、海緑藻（Ｃｏｄｉｕｍ　ｆｒ
ａｇｉｌｅ）　　、タチナタ豆（Ｃ。 ｎｃａｎａｖａｌｉｎ　Ａ）　、大豆（Ｇｌｙｃｉｎｅ
　ｍａｘ）、スィートピー（ＩＬａｔｈｙｒｕｓ　ｏｄ
ｏｒａｔｕｓ）、レンズ豆（Ｌｅｎｓ　ｃｕｌｉｎａｒ
ｉｓ）、カブトガニ（Ｌｉｍｕｌｕｓ　ｐｏｌｙｐｈｅ
ｍｕｓ）　　、トマト（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ　ｅ
ｓｃｕｌｅｎｔｕｍ）、オセージオレンジ（Ｍａｃ　ｆ
ｕｒ　ａ　ｐｏｍｉ　ｆｅｒａ）、アボガド（Ｍｙｃｏ
ｐｌａｓｍａ　ｇａｌ　１ｉｓｅｐｔｉｃ　ｕｍ　、　
Ｐｅｒｓｅａｕ　ａｍｅｒｉｃａｎａ）、ベニバナイン
ゲンハナササゲ（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ　Ｃｏｃｃ　１ｎ
ｅｕｓ　）、赤インゲン豆（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ　Ｖｕ
ｌｇａｒｉｓ）、アメリカヤマゴボウ（Ｐｈｙｔｏｌａ
ｃｃａａｍｅｒｉｃａｎａ　）、エンドウ豆（Ｐｉｓｕ
ｍ　ｓａｔｉｖｕｍ）　　、ウィングビーン（Ｐｓｏｐ
ｈｏｃａｒｐｕｓ　ｔｅｔｒａｇｏｎｏｌｏｂｕｓ）　
、ヒマ（Ｒｉｃｉｎｕｓ　ｃｏｍｍｕｎｉｓ　）、ジャ
ガイモ（Ｓｏｌａｎｕｍ　ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ）　、コ
ムギ麦芽（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ　ｖｕｌｇａｒｉｓ）、ソ
ラ豆（Ｖｉｃｉａ　ｆａｂａ）、緑豆（Ｖｉｇｎａｒａ
ｄｉａｔａ）　、ヨーロッパヤドリギｆｆｉｓｃｕｍ　
ａｌｂｕｍ）、フジ（Ｗｉｓｔｅｒｉａ　ｆｌｏｒｉｂ
ｕｎｔａ）等である。　（請求項５）。 ［００１３］

【実施例】次に本発明の実施例を図面について説明す＊
＊盃。 ａ）血球分離層材料の作製 線維化されたガラス１　に、メタノール１０ｍ１中にポ
リアクリル酸ブチル２４ｍ　、ポリアクリル酸メチル４
ｍ　及びポリエチレングリコール２ｍ　を溶かし込んだ
溶液を吹付け、適当なサイズの形状、シート状、破砕小
片状、柱状、筒状等に加工し、１００度Ｃで乾燥して作
製した。 ｂ）血清・血漿分離用カラムの作製 上記で作製した破砕小片状材料を図１に示すように内径
７ｍｍ高さ３０ｍｍの円筒状のカラム１内に１０ｍｍ充
填して血球分離層２を形成し、その上に大豆　１　ｃｉ
ｎｅ　ｍａｘ）の０．０１％レクチン生理食塩液を含浸
させ、室温で約１時間乾燥させた株式会社本州製紙製造
の不織布「キノクロスに７０Ｊ　　（商標）を同じ大き
さ（内径７ｍｍ）にカットし、重ねてレクチン含浸層３
を一体化させてフィルター４としたミニカラムを作製し
た。 ［００１４］　　なお、ポリアクリル酸ブチル、ポリア
クリル酸メチル及びポリエチレングリコールを含有させ
ずに作製したミニカラムを別途調製して、全血５００μ
ｍから血清又は血漿が分離できるか否かを目視によって
判定したところ、ポリアクリル酸ブチル、ポリアクリル
酸メチル及びポリエチレングリコールを含有せしめて調
製したカラムに著しい分離能が認められた。一方、ポリ
アクリル酸ブチル、ポリアクリル酸メチル及びポリアク
リルグリコールを含有しないカムは分離能なしと判断し
た。 ［００１５］次に実施例で作製したミニカラムを用い、
実際に分離した血清又は血漿中の成分量が従来の遠心分
離法で行った場合のそれと差があるかをみるため、以下
の試験を行った。 一〇−試験例１ 血清グリコース測定 濃度の異なる３種類の検体を用い、一方を遠心分離機に
て血清分離を行い（方法〜１）、他方は上記ミニカラム
を用いて血清分離を行い（方法〜２）、市販の試薬（酵
素法）により、双方のグルコース濃度を測定し、その結
果を表１に示した。結果は以下表に示す如く分離法の差
はみられず、良好な結果が得られた。 ［００１６］ 表１ 回数　　　　検体Ｉ　　　　　　　　検体ＩＩ　　　　
　　　検体ＩＩＩ方法〜１　方法〜２　　方法〜１　方
法〜２　　方法〜１　方法〜２単位：ｍｇ／ｄｌ ｄ）試験例２ 血清３−ヒドロキシ酪酸測定 濃度の異なる３種類の検体を用い、 一方を遠心分離にて※ ※血清分離を行い（方法〜１）、他方は本発明の血清分
離カラムを用いて血清分離を行い（方法〜２）、市販の
試薬（酵素法）により、双方の３−ヒドロキシ酪酸濃度
を測定し、その結果を表２に示した。結果は以下表に示
す如く分離法の差はみられず、良好な結果が得られた。 　　＊”［００１７］ 表２ 回数　　　検体Ｉ　　　　　　　　検体Ｉｒ　　　　　
　　検体ＩＩＩ方法〜１　方法〜２　　方法〜１　方法
〜２　　方法〜１　方法〜２単位：μｍｏｌ／１ ｅ）試験例３ 総胆汁酸測定 濃度の異なる３種類の検体を用い、一方の遠心分離にて
血清分離を行い（方法〜１）、他方は本発明の血清分離
カラムを用いて血清分離を行い（方法〜２）、市販の※
※拭薬（酵素法）により、双方の総胆汁酸濃度を測定し
、その結果を表３に示した。結果は以下表に示す如く、
分離法の差はみられず、良好な結果が得られた。 ［００１８］ 表３ 回数　　　　検体Ｉ　　　　　　　　検体ＩＩ　　　　
　　　検体ＩＩＩ方法〜１　方法〜２　　方法〜１　方
法〜２　　方法〜１　方法〜２１　１０．５　１０．９
　　１７．２　１７．８　　３３．１　３３．４２　１
０．６　１０．９　　１７．２　１８．１　　３３．０
　３３．６単位：ｍｇ／ｄｌ ｆ）血清・血漿分離器具 図２に示すようにガラス製のピペット１０内に前述と同
じ組成の血球分離層２とレクチン含浸層３とを一体化さ
せたフィルター４を収容する。また吸引ポンプとして注
射器１１を使用する。 ［００１９］このように構成される器具の使用に際して
は、ピペット１０を注射器１１の先端に装着し、ピペッ
ト先端を採血容器１２内の全血１３内に挿入し、注射器
１１のピストンｌｌａを引いて吸引させる。これによっ
て全血１３はピペット１０内に吸い上げられ、フィルタ
ー４を透過することによって血球成分が除かれ、血清・
血漿成分１４が注射器１１内に吸引される。 ［００２０１なお、予め全血を注射器１１内に吸引して
おき、これをピペット１０内に押し出してもよい。 ［００２１１またピペット１０は、図４に示すようにフ
ィルタ一部分を太径に成形したものでもよい。 ［００２２１ 【発明の効果］上述したように、数項目〜１０項目程度
の検査に供する多量の血液を血清又は血漿に採血と同時
に簡便器具を用いて分離する方法は分離中に溶血現象を
起こすため、これまで実用化されてはいなかったが、本
発明はポリアクリルエステル誘導体、特にポリアクリル
酸ブチル、ポリアクリル酸メチル及びポリアクリル酸エ
チル、及びボレエチレングリコールを特定の比で含有し
たガラス繊維を用いた分離層を設置し、また加えてレク
チン含浸層を設けることにより採取血液の溶血を防止★
★し、約１ｍｌの全血から数百μｌの血清又は血漿が容
易に数分以内に分離できる効率的な分離方法を提供する
ものである。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明方法における試験例に使用したカラムの
構造を示す断面図である。

【図２】本発明に係る器具の一実施例の使用状態の断面
図である。

【図３】本発明に係る器具の他の実施例を示す断面図で
ある。

【符号の説明】

２　血球分離層 ３　レクチン含浸層 ４　フィルター １０　ピペット １１　注射器 １１ａ　　ピストン １３　全血 １４　血清・血漿成分

【手続補正２】

【補正対象項目名】図面

【補正対象項目名】全図

【補正方法】変更

【補正内容】

【図１】

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】血球分離層単独か、あるいはレクチン含浸
   層と一体化したカラムあるいはフィルターを用いること
   を特徴とする、全血試料を希釈することなく全血から血
   球成分と血清又は血漿成分を効率的に分離・回収する方
   法。
2. 【請求項２】血球分離層が、ポリアクリルエステル誘導
   体及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含有するガ
   ラス繊維であり平均直径が、０．５〜２．５μｍである
   事を特徴とする請求項１記載の全血から血球成分と血清
   又は血漿成分を効率的に分離・回収する方法。
3. 【請求項３】ガラス繊維に含有するポリアクリルエステ
   ル誘導体が、ポリアクリル酸ブチル、ポリアクリル酸メ
   チルまたはポリアクリル酸エチルであり、ａ（ポリアク
   リル酸ブチル）、ｂ（ポリアクリル酸メチルまたはポリ
   アクリル酸エチル）、ｃ（ポリエチレングリコール）の
   総計含有量が２〜３％で、その際のそれらの重量比が、
   ａ（１０〜１２）：ｂ（１〜４）：ｃ（１〜４）の範囲
   内にある事を特徴とする請求項１〜２記載の全血から血
   球成分と血清又は血漿成分を効率的に分離・回収する方
   法。
4. 【請求項４】レクチン含浸層に用いる素材が、不織布、
   ガラス繊維、セルロースであり、レクチン含浸層に用い
   るレクチンが、 Ａｂｒｕｓｐｒｅｃａｔｏｒｉｓ（アプリン、トウアズ
   キ） Ｂａｕｈｈｉｎｉａｐｕｒｐｕｒｅａ（モクワンジユ）
   Ｃａｒａｇａｎａａｒｂｏｒｅｓｃｅｎｓ（シベリア豆
   ） Ｃｏｄｉｕｍｆｒａｇｉｌｅ（海緑藻） ＣｏｎｃａｎａｖａｌｉｎＡ（タチナタ豆）Ｇｌｙｃｉ
   ｎｅｍａｘ（大豆） Ｌａｔｈｙｒｕｓｏｄｏｒａｔｕｓ（スイートピー）Ｌ
   ｅｎｓｃｕｌｉｎａｒｉｓ（レンズ豆） Ｌｉｍｕｌｕｓ　ｐｏｌｙｐｈｅｍｕｓ（カブトガニ）
   Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ（トマ
   ト） Ｍａｃｌｕｒａｐｏｍｉｆｅｒａ（オセージオレンジ）
   ＭｙｃｏｐｌａｓｍａｇａｌｌｉｓｅｐｔｉｃｕｍＰｅ
   ｒｓｅａｕａｍｅｒｉｃａｎａ（アボガド）Ｐｈａｓｅ
   ｏｌｕｓｃｏｃｃｉｎｅｕｓ（ベニバナインゲンハナサ
   サゲ） ＰｈａｓｅｏｌｕｓＶｕｌｇａｒｉｓ（赤インゲン豆）
   Ｐｈｙｔｏｌａｃｃａａｍｅｒｉｃａｎａ（アメリカヤ
   マゴボウ） Ｐｉｓｕｍｓａｔｉｖｕｍ（エンドウ豆） Ｐｓｏｐｈｏｃａｒｐｕｓｔｅｔｒａｇｏｎｏｌｏ−ｂ
   ｕｓ（ウィングビーン） Ｒｉｃｉｎｕｓｃｏｍｍｕｎｉｓ（ヒマ） Ｓｏｌａｎｕｍｔｕｂｅｒｏｓｕｍ（ジャガイモ）Ｔｒ
   ｉｔｉｃｕｍｖｕｌｇａｒｉｓ（コムギ麦芽）Ｖｉｃｉ
   ａｆａｂａ（ソラ豆） Ｖｉｓｃｕｍａｌｂｕｍ（ヨーロッパヤドリギ）Ｗｉｓ
   ｔｅｒｉａｆｌｏｒｉｂｕｎｔａ（フジ）からなる群よ
   り選択される血液型非特異性レクチンおよびこられの混
   合物であることを特徴とする請求項１〜６記載の方法。
5. 【請求項５】接種用注射針、真空採血管、接合針、分離
   血清収容のための真空採取管から構成される真空自動採
   血用注射器あるいは採血用注射器具内に請求項１〜６記
   載の血球分離層（〜１）単独、あるいはレクチン含浸層
   （〜２）の２層が一体化した素材をカラムあるいはフィ
   ルター様に設置してなる血清又は血漿の直接分離用器具
   。