JPH04210998A - ペプチド誘導体による消化管の内皮イオン分泌の抑制 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

［０００１］

【産業上の利用分野】本発明は消化管の内皮からのイオ
ン分泌を抑制するペプチド誘導体に関する。これらのペ
プチド誘導体は下痢特にカルチノイド（癌様腫）症候群
、炎症性の腸の病気、及びＶ　Ｉ　Ｐｏｍａと関連した
下痢の治療に有用である。 ［０００２］

【従来の技術】ソマトスタチンはある種の下垂体腺腫、
島腺腫、グルカゴツマ（ｇｌｕｃａｇｏｎｏｍａ）カル
シノイド症候群、及び脈管活性小腸ペプチド分泌腫瘍（
Ｖ　Ｉ　Ｐｏｍａ）ならびに種々の他の症状を有する患
者の治療に有用であることが報告されてきた。しかしソ
マトスタチン療法は主としてこの天然のペプチドの非常
に短い血清半減期の為に限られたものであった。最近合
成のペプチドであるオクトレオチドアセテートが開発さ
れた。この化合物は天然のソマトスタチンの生物活性の
多くを有しているが、その制限の多くを克服している。 オクトレオチドは下痢に関連したカルシノイド症候群及
びＶＩＰｏｍａの治療に於ける用途に対しＵＳＦＤＡか
ら認められている。 ソマトスタチン及びその類似体の使用はソマトスタチン
様の試薬がインシュリン、グルカゴン、膵臓ポリペプチ
ド、ガストリン、胃液抑制ペプチド、モチリン、ニュロ
テンシン、セクレチン、コレシストキニン、膵臓トリプ
シン、及び膵臓のアミラーゼの分泌の抑制、脂肪吸収の
減少、及び炭水化物吸収の遅れを含めた多くの種類の生
理学的な活性を有しているという事実のために難しい。 　（エム、デイ−、カップ及びビー、エル、エルスタッ
ド、Ｃ１１ｎｉｃａｌ　Ｐｈａｒｍａｃｙ　８：　２５
５−２７３　（１９８９））。 ［０００３］

【発明が解決しようとする課題】その活性がより選択的
な物質が望ましい。 ［０００４］　ノイロペプチドＹは腸の内皮細胞のクロ
ライドイオンの正味の吸収を生じること（グー。ニー、
ヒユーベル、及びケイ、ニス、レンクイスト、Ｊ、　Ｐ
ｈａｒｍａｃｏｌ、　＆　Ｅｘｐ、　Ｔｈｅｒ、　２３
８：　１６７−１６９（１９８６）及びエイチ、エム、
コックス等、Ｊ、　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　３９８：　
６５−８０（１９８８））　　；そして、分泌促進剤で
生じるクロライドの輸送の抑制を生じることが知られて
いる（エイチ、エム、コックス及び工乙ダブリュ、クス
ベルトＰｆｌｕｇｅｒｓ　Ａｒｃｈ、　４１３：　３８
−４２　（１９８８））。ＩＰの場合は、ＮＰＹはＶＩ
Ｐによって誘発されるであろうｃＡＭＰ生産を抑制する
ことによってＶＩＰの作用を抑制すると考えられる（エ
イ、エル、セルビン等、Ｅｎ：　ｄｏｃ　ｒ　ｉｎｏ　
ｌｏｇｙ、１２４：　６９２−７００（１９８９））　
、この効果を生体内で達成する為のノイロペプチドＹ自
身の使用は、ノイロペプチドＹの血管での影響の為に難
しい。この特許に記載されている類似体は腸に対する選
択的な作用を有しており、もともとあるホルモンの血管
での悪影響がほとんど無いか全く無い。 ［０００５］

【課題を解決する手段】本発明者はノイロペプチドＹ受
容体に対するアゴニスト活性を有すると前に報告されて
いるある種のペプチド誘導体が消化管の内皮から分泌さ
れるイオンの抑制も行なうことを発見した。そのような
化合物は、下痢、特にカルシノイド症候群及びＶＩＰｏ
ｍａと関連した下痢の処置に有益である。 ［０００６］式

【３】 〔式中Ｘ１はＬｅｕ、　Ｉｌｅ、　Ｍｅｔ、　Ｎｌｅ、
　Ｖａｌであり、Ｘ２はＬｅｕ、　Ｉｌｅ、　Ｍｅｔ、
　Ｎｌｅ、Ｖａｌであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は
それぞれ独立に水素及び（Ｃ＋〜Ｃ４）アルキルから選
択され、Ｔｎは（Ｃ２〜Ｃ１ｏ）アシル、（０１〜Ｃ４
）アルキルであり、ＴｃはＯＲ’又はＮＨＫ’であり、
ここでＲ′は水素又は（Ｃ＋〜Ｃ４）アルキルであり、
θは構造式−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ　　ＣＯ２−の基であ
り、ここでｎは１〜１１の整数であり、Ｘは結合である
か、又は式 ％式％） （５） （ （） Ｃ（＝０）−１及び−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（＝０）−Ｎ（Ｈ）
−であり、ここでＲ５とＲ６はそれぞれ独立に水素及び
（Ｃ＋〜Ｃ４）アルキルからなる群から選ばれ、ｍは１
〜３の値の整数である〕のペプチド誘導体、又は製薬上
受入れられるその塩は、消化管の内皮からのイオンの分
泌を抑制し、下痢、特にカルシノイド症候群及びＶ　Ｉ
　Ｐｏｍａと関連した下痢の治療に有用である。 ［０００７］アミノ酸類の以下の一般的な略字が本明細
書を通じて使用されている。 Ａｌａ−アラニン Ｖａｌ−バリン Ｌｅｕ−ロイシン １１ｅ−イソロイシン Ｐｒｏ−プロリン Ｍｅｔ−メチオニン ５ｅｔ−セリン Ｔｈｒ−スレオニン Ｃｙｓ−システィン ｃｙｓ−旧システィン Ｔｙｒ−チロシン Ａｓｎ−アスパラギン Ａｓｐ−アスパラギン酸 Ｌｙｓ−リシン Ａｒｇ−アルギニン Ｈｉｓ−ヒスチジン Ｇｌｕ−グルタメート Ｎ１ｅ−ノルロイシン Ａｏｃ　−８−アミノオクタン酸 ＃　　　　ＮＨ２ ［０００８］アルキル基は、直鎖状、分枝状、又は環式
アルキル基、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプ
ロピル、ブチル、イソブチル、第三ブチル、ペンチル、
イソペンチル、第二ペンチル、シクロペンチル、ヘキシ
ル、イソヘキシル、シクロヘキシル、及びシクロペンチ
ルメチルを包含するものとして扱われる。２−１０個の
炭素原子のアシル基は、基当たり１又は２個のカルボニ
ル部分をもった直状、分枝状、環式、飽和及び不飽和ア
シル基、例えばアセチル、ベンゾイル、サクシニル、マ
レイル、及びグルタリルを包含するものとして扱われる
。アミノ末端アミノ酸のアミノ基が二つのアルキル又は
アシル基で置換されているペプチドも本発明のペプチド
の範囲内にあると考えられる。 ［０００９］グリシンを例外として天然アミノ酸類はキ
ラル炭素原子を含有する。他に特定的に注意がなければ
、本明細書で引用される光学活性アミノ酸類はＬ−配置
のものである。注目されるのは、式１ペプチドのアミノ
末端から８個目のα−アミノ酸のα−炭素原子に対応す
る炭素原子は、環化できるようにＤ−立体配置でなくて
はならない。この炭素原子はＪＩＤｌ＋で示される。 ［００１０］式１のポリペプチド類は任意の無毒性の有
機酸又は無機酸と薬学的に受は入れられる塩類を形成で
きる。適当な塩類を形成する無機酸類の例は塩酸、臭化
水素酸、硫酸及び燐酸、並びにオルト燐酸−水素ナトリ
ウムと硫酸水素カリウムのような酸金属塩類を包含する
。 適当な塩類を形成する有機酸の例はモノ、ジ、及びトリ
カルボン酸類を包含する。このような酸類の例は、例え
ば酢酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、
コハク酸、ゲルタール酸、フマール酸、リンゴ酸、酒石
酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、ヒドロキ
シマレイン酸、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸、フェニ
ル酢酸、桂皮酸、サリチル酸、２−フェノキシ安息香酸
、及びメタンスルホン酸と２−ヒドロキシェタンスルホ
ン酸のようなスルホン酸類である。カルボキシ末端部分
の塩類は、任意適当な無機又は有機塩基とともに形成さ
れる無毒性カルボン酸塩類を包含する。例示的には、こ
れらの塩類はアルカリ金属、例えばナトリウムとカリウ
ム；アルカリ土類金属、例えばカルシウムとマグネシウ
ム；アルミニウムを含めた第１ＩＩＡ族の軽金属；及び
有機第一級、第二級及び第三級アミン類、例えばトリエ
チルアミンを含めたトリアルキルアミン類、プロ力イン
、ジベンジルアミン、１−エテナミン、Ｎ、Ｎ”−ジベ
ンジルエチレンジアミン、ジヒドロアビエチルアミン、
Ｎ−（低級）アルキルピペリジン、及びその他任意適当
なアミンを包含する。 ［００１１］化合物類の任意の一般群の場合と同様、あ
る基が好ましい。本発明者はＸｌがイソロイシンである
式１ペプチド誘導体類を好ましいとする。本発明者はＸ
２がイソロイシンである式１ペプチド誘導体類も好まし
いと考える。特に好ましいのはＸｌとＸ２が各々イソロ
イシンである式１のペプチド誘導体である。またＴｃが
ＮＨ２である、そしてθがＡｏｃであるペプチド誘導体
も好ましい。 またＲ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４がそれぞれ水素であり、
Ｘが５−８−基である化合物も好ましい。最も好ましい
式１のペプチド誘導体は式２のペプチド誘導体である。

【化４】 ［００１２］本発明のタンパク類は当業者に容易に知ら
れる種々の手順によって調製できる。このような手順は
固体相逐次手順を包含する。固体相逐次手順は自動化ペ
プチド合成機の使用など、確立された自動化方法を用い
て実施できる。使用の樹脂支持体はペプチド類の固相調
製にこの技術で慣用的に使用される任意適当な樹脂であ
り、好ましくは０．５ないし約３％のジビニルベンゼン
で架橋されたポリスチレンであって、これを、ｐ−メチ
ルベンズヒドリルアミン又はベンズヒドリルアミン誘導
体へ変換するか（Ｃ末端アミド）、又はクロロメチル化
又はヒドロキシメチル化させ、初めに導入されたα−ア
ミノ保護アミノ酸とのエステル形成用の位置を提供する
（Ｃ末端アルキルアミド及びエステルを生じるため）。 ［００１３］ヒドロキシメチル樹脂の一例は、ポダンス
ズキ（Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ）ら、Ｃｈｅｍ、　Ｉｎｄ、
　（Ｌｏｎｄｏｎ）　３８巻１５９７−９８頁（１９６
６年）に記述されている。クロロメチル化樹脂は、バイ
オラド研究所（カリフォルニア州すッチモンド）から市
販されており、このような樹脂の調製はスチュワート（
Ｓｔｅｗａｒｔ）ら、「固体相ペプチド合成」（フリー
マン社、サンフランシスコ、１９６９年）第１章１−６
頁に記述されている。保護されたアミノ酸はギシン（Ｇ
ｉｓｉｎ）、Ｈｅ１ｖ、　Ｃｈｅｍ、　Ａｃｔａ。 ５６巻１４７６頁（１９７３年）の手順によって樹脂に
結合させることができる。樹脂に結合された多くの保護
アミノ酸が市販されている。−例として、カルボキシ末
端がＴｈｒ残基である場合の本発明のポリペプチドをつ
くるには、ベンジル化ヒドロキシメチル化フェニルアセ
トアミドメチル（ＰＡＭ）樹脂へ結合された第三ブチロ
キシカルボニル（Ｂｏｃ）保護されたＴｈｒが使用可能
であり、市販されている。 ［００１４］樹脂支持体へのα−アミノ保護アミノ酸の
カップリング後、保護基は塩化メチレン中のトリフルオ
ロ酢酸、トリフルオロ酢酸のみ、又はジオキサン中のＨ
ＣＩを使用するなどの任意適当な手順を用いて除去され
る。脱保護は、０℃と室温の間の温度で実施される。特
定的なα−アミノ保護基の除去用のその他の標準的開裂
試薬及び条件を使用できる。α−アミノ保護基の除去後
、その他のアミノ保護アミノ酸類は所望の順序で段階的
に結合される。その代わりに、樹脂支持されたアミノ酸
配列とのカップリングに先立って、複数のアミノ酸基を
溶液法によって結合させることができる。 （００１５］ポリペプチド配列へ導入される各アミノ酸
と共に使用されるα−アミノ保護基は、この技術で知ら
れた任意のこのような保護基でありうる。考えられるα
−アミノ保護基の部類としては以下のものがある。（１
）アシル型保護基、例えばホルミル、トリフルオロアセ
チル、フタリル、トルエンスルホニル（トシル）、ベン
ゼンスルホニル、ニトロ−フェニルスルフェニル、トリ
チルスルフェニル、０−ニトロフェノキシアセチル、及
びα−クロロブチリル；（２）芳香族ウレタン型保護基
、例えばベンシロキシカルボニル及び置換ベンジロキシ
カルボニル、例えばｐ−クロロベンジロキシカルボニル
、ｐ−ニトロベンジルカルボニル、ｐ−ブロモベンジロ
キシカルボニル、ｐ−メトキシベンジロキシ力ルポニル
、１−（ｐ−ビフェニリル）１−メチルエトキシカルボ
ニル、α、α−ジメチルー３，５−ジメトキシベンジロ
キシカルボニル、ペンズヒドリロキシ力ルボニル、及び
９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）；　
　（３）脂肪族ウレタン保護基、例えば第三ブチロキシ
カルボニル（Ｂｏｃ）、ジイソプロピルメトキシカルボ
ニル、イソプロビロキシカルボニル、エトキシカルボニ
ル及びアリロキシカルボニル；（４）シクロアルキルウ
レタン型保護基、例えばシクロペンチロキシカルボニル
、アダマンチロキシカルボニル、及びシクロへキシロキ
シカルボニル；（５）フェニルチオカルボニルのような
チオウレタン型保護基；（６）トリフェニルメチル（ト
リチル）及びベンジルのようなアルキル型保護基；及び
（７）トリメチルシランのようなトリアルキルシラン基
。好ましいαアミノ保護基は第三ブチロキシカルボニル
又はＦｍｏｃである。 ［００１６］適当なカップリング試薬の選択はこの技術
の範囲内にある。付加アミノ酸がＧｌｎ、　Ａｓｎ又は
Ａｒｇの場合の特に適したカップリング試薬は、Ｎ、　
Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミドと１−ヒドロキシ
ベンゾトリアゾールである。これらの試薬の使用はニト
リル及びラクタムの形成を予防する。その他のカップリ
ング剤は（１）カルボジイミド（例えＬｆＮ、Ｎ’−ジ
シクロへキシルカルボジイミドとＮ−エチル−Ｎ′−（
γ−ジメチルアミノプロピルカルポジイミド）　；　（
２）シアナミド類（例えばＮ、　Ｎ’−ジベンジルシア
ナミド）　；　（３）ケテンイミン類；（４）イソキサ
ゾリウム塩（例えばＮ−エチル−５−フェニル−イソキ
サゾリウム−３′−スルホネート’）　；　（５）環中
に１−４個の窒素を含有する芳香族性で単環の窒素含有
複素環式アミド類、例えばイミダゾリド類、ピラゾリド
類及び１．２．４−トリアゾリド類（有用な特定的な複
素環式アミド類はＮ、　Ｎ’−カルボニルジイミダゾー
ルとＮ、　Ｎ’−カルボニル−ジー１．２．４−トリア
ゾールを包含する）　；　（６）アルコキシル化アセチ
レン（例えばエトキシアセチレン’）　；　（７）アミ
ノ酸のカルボキシル部分と混合無水物を形成する試薬（
例えばエチルクロロフォルメートとイソブチルクロロフ
ォルメート）又はカップリングしようとするアミノ酸の
対称無水物（例えば（Ｂｏｃ−Ａｌａ）２０）；及び（
８）一つの環窒素上に１個のヒドロキシ基をもった窒素
含有複素環式化合物類（例えばＮ−ヒドロキシフタルイ
ミド、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド及び１−ヒドロキシ
ベンゾトリアゾール）である。その他の活性化試薬と、
ペプチドのカップリングにおけるそれらの使用は、ケイ
パー（Ｋａｐｏｏｒ）、Ｊ、　Ｐｈａｒｍ、　Ｓｃｉ、
５９巻１−２７頁（１９７０年）に記述されている。出
願人らは、Ａｒｇ、　Ａｓｎ及びＧｌｎを除き、すべて
のアミノ酸に対するカップリング試薬として、対称的無
水物の使用を好ましいと考える。 ［００１７］各々の保護アミノ酸又はアミノ酸配列は、
４倍過剰量で固体相反応器に導入され、ジメチルホルム
アミド：塩化メチレン（１：１）又はジメチルホルムア
ミドのみ、又は好ましくは塩化メチレンのみの媒体中で
カップリングが行なわれる。不完全なカップリングが起
こる場合は、α−アミノ保護基の除去前に、固体相反応
器中で次のアミノ酸のカップリングに先立って、カップ
リング手順を繰り返す。各合成段階でのカップリング反
応の成功は、イー・カイザー（Ｅ、　Ｋａｉｓｅｒ）ら
、Ａｎａｌｙｔ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、３４巻５９５頁（
１９７０年）に記述されたとおりに、ニンヒドリン反応
によって監視される。 ［００１８］所望のアミノ酸配列が得られた後、ペプチ
ドは樹脂から除去される。これは樹脂結合ポリペプチド
をフッ化水素酸溶液中の硫化ジメチル、ｐ−クレゾール
、及びチオクレゾールの溶液で処理するなど加水分解に
よって行なうことができる。 ［００１９］固体相ペプチド合成の技術に知られている
ように、アミノ酸類の多くは連鎖生成中に保護を必要と
するような官能基をもっている。適当な保護基の選定と
使用は当業者の能力の範囲内にあり、保護しようとする
アミノ酸と、ペプチド上の他の保護アミノ酸残基の存在
に依存しよう。このような側鎖保護基の選択は、α−ア
ミノ部分の保護基の開裂中にそれが除去されてはならな
いという点で決定的重要性をもっている。例えば、リジ
ンに適した側鎖保護基はベンジロキシカルボニル及び置
換ベンジロキシカルボニル［この置換基はハロゲン（例
えばクロロ、ブロモ、フルオロ）及びニトロ（例えば２
−クロロベンジロキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジロ
キシカルボニル、３，４−ジクロロベンジロキシカルボ
ニル）から選ばれる］、トシル、ｔ−アミロキシカルボ
ニル、ｔ−ブチロキシカルボニル、及びジイソプロピル
メトキシカルボニルである。スレオニンとセリンのアル
コール性ヒドロキシル基はアセチル、ベンゾイル、第三
ブチル、トリチル、ベンジル、２，６−ジクロロベンジ
ル又はベンジロキシカルボニル基で保護できる。アスパ
ラギン酸とグルタミン酸のカルボキシル基はベンジル又
はシクロヘキシル基で保護される。好ましい保護基はベ
ンジルである。 ［００２０１これらの基はこの技術で周知の手順によっ
て除去できる。典型的には、保護基の除去はペプチド鎖
合成が完了してから行なわれるが、保護基はその他の任
意適当な時に除去できる。 ［００２１１一般に環化されたペプチドは支持体からペ
プチドを除去する前又は後の何れかに、適当な前駆体の
線形ペプチド誘導体から製造される。Ｘが−５−８−基
である式１の化合物は、対応する遊離スルフヒドリル含
有線形ペプチドから良くしられて結合技術、例えば線形
ペプチドを例えばシュワード等、　「同相ペプチド合成
」　（サンフランシスコのフリーマンアンドカンパニー
、１９６９年）第１章、９５頁に記載されるフェリシア
ン化カリウムで酸化すること等によって製造される。Ｘ
が−Ｓ　−ＡｌｋＳ−−０−Ａｌｋ−０−−０−Ａｌｋ
−８−１又は−８Ａｌｋ−０−基であって、Ａｌｋがエ
チレンである式１の化合物は、遊離スルフヒドリル含有
及び／又はアルコール含有線形ペプチドからエッチ、ア
イ、モスベルブ及びジェ、アール、オムンアース、Ｊ、
　Ａｍｅｒ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、　１０７．２９８
６−２９８７　（１９８５）中に記載されるのと類似の
方法で適当な非環式又は環式、飽和又は不飽和アルキル
の１．２−ブロモ誘導体との反応によって製造できる。 Ａｌｋがメチレン基であるＸが−５−Ａｌｋ−−Ｓ−基
である式１の化合物は、遊離スルフヒドリル含有線形ペ
プチドの適当な非環式又は環式飽和又は不飽和アルキル
ケトン又はアルデヒドとの、Ｊ、Ａｍｅｒ、　Ｃｈｅｍ
、　Ｓｏｃ、　７６、１９４５　（１９５４）に記載さ
れたのと類似の方法による反応によって製造される。Ｘ
が一〇−又は−Ｓ−基である式１の化合物の製造は、ケ
イ、ジョスト、Ｃｏ１１ｅｃｔ、　Ｃｚｅｃｈ、　Ｃｈ
ｅｍ、　Ｃｏｍｍｕｎ、　３６．２１８（１９７１）に
述べられた方法、及び米国特許第４．１６１．５２１に
述べられた方法によって達成できる。Ｘが−Ｃ（＝Ｏ）
Ｎ（Ｒ）又は−Ｎ（Ｒ）Ｃ（＝０）である式１の化合物
は、環状ラクタムであり、シラー等、Ｊ、　Ｍｅｄ、　
Ｃｈｅｍ、　２８：　１７６６−１７７１　（１９８５
）又はアルーオブリド等、Ｊ、　Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｍ、
　３２：　２５５５−２５６１　（１９８９）によって
記載される様に、側鎖カップリングによって得られる。 Ｘが−Ｃ（＝Ｏ）−０−１−〇Ｃ（＝Ｏ）−−Ｃ（＝Ｏ
）−８−１又は−３−Ｃ（＝Ｏ）基である式１の化合物
はデプシペプチド及びチオデプシペプチド類である。こ
れらの化合物は結合剤（例えば１エチル−３−（３−ジ
メチルアミノプロピル）カルボジイミド）との線形ペプ
チド類似体のエステル化によって製造できる。アール、
ケイ、オルセン及びエム、ケ乙ダオン、Ｐｅｐｔ　１ｄ
ｅｓ　：合成、構造−機能（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　５ｔ
ｒｕｃｔｕｒｅ−Ｆｕｎｃｔｉｏｎ）、デイ−、エッチ
、リッチ及びイー、グロス編１９８１、ロックフォード
のピアースケミカルカンパニー、４１〜４４頁を参照。 Ｘが−ＮＨＣ（＝Ｏ）−ＮＨ−である式１の化合物は、
それ以外の時は保護されているペプチド断片中の二つの
遊離アミノ基の分子内環化によって製造される。遊離ア
ミノ前駆体は非常にゆっくりと１．１当景のホスゲンで
滴定され、所望の分子内環化された尿素物体を生じる。 式１のペプチド誘導体が内皮イオン分泌を抑制する能力
はエッチ、コックス等、Ｊ、　Ｐｈｙｓｉｏｌ　３９８
：　６５−８０　（１９８８）に記載されるようにショ
ートサーキットカレントの減少によって実証され、２は
ほとんどＮＰＹ自身と同じくらい効果的であることが分
った。これはＣ７ＮＰＹ及びＣ３−ＮＹＰ等の他の類似
体と対称的である。　（前にＰ、Ｎ、Ａ、Ｓ、　ＵＳＡ
　８６：４３７７−４３８１（１９８１）に記載され、
これらは顕著に２又はＮＰＹのいずれよりも効力が小さ
い。） ［００２２１本発明のペプチド誘導体は内皮イオン分泌
を抑制する能力のおかげで、撹乱されたイオン分泌と関
連した下痢、特にカルシノイド症候群及びＶ　Ｉ　Ｐｏ
ｍａと関連した下痢、及び例えば細菌毒素、胆汁酸、及
び吸収されない食物の脂肪、及びカルシトニン等のある
種のホルモンによって一般に生じる分泌性の下痢を防止
するのに有用である。 ［００２３］内皮イオン分泌を抑制するのに要求される
、即ち抗下痢剤として作用するのに要求される本発明の
ペプチド誘導体の投与量は、患者、処置される症状のひ
どさ、及び選ばれるペプチド誘導体に依存して、−日あ
たり患者体重Ｋｇあたり、１．０ｍｃｇ／ｋｇ〜１００
ｍｃｇ／ｋｇである。 特定の患者に対する特定の投与量は容易に決定出来る。 好ましくは１〜４回の毎日の投与量が典型的には投与量
あたり１００ｍｃｇ〜５００ｍｃｇの活性化合物として
投与される。 ［００２４］本明細書で使用される用語の「患者」は、
ヒトを含めた霊長類、羊、馬、牛、豚、犬、猫、ラット
及びハツカネズミのような哺乳類を意味するものとして
扱われる。 ［００２５］ペプチド誘導体類の幾つかは経口投与後、
消化管を通過して生き残ることもあるが、出願人らは非
経口投与、例えば皮下、静脈内、筋肉内又は腹膜内；デ
ポ−注射による投与；移植製剤；又は鼻、咽喉、気管な
どの粘膜へ、噴霧液又は乾燥粉末型の本発明のペプチド
誘導体を含有するアエロゾル缶での適用が好ましいと考
える。 ［００２６］非経ロ投与には、化合物類は薬学担体を伴
った生理学的に受入れられる希釈剤中の化合物の溶液又
は懸濁液の注射可能な適景として投与でき、担体は、表
面活性剤その他の薬学的に受は入れられる助剤を伴って
、又は伴っていない水や油類のような無菌液体でありう
る。 これらの製剤に使用できる油類の例は、石油、動植物、
又は合成起源のもの、例えば落花生油、大豆油、及び鉱
油である。概して、水、食塩水、デキストロース水溶液
、及び関連する糖溶液、エタノールやグリコール類、例
えばプロピレングリコールやポリエチレングリコールが
、特に注射液用に好ましい液体担体である。 ［００２７］化合物類は、デポ−注射剤又は移植製剤の
形で投与でき、これらは活性分の持続的放出を可能とす
るような方法で処方できる。活性成分はペレットや小円
筒形に圧縮されて、皮下又は筋肉内にデポ−注射剤又は
移植剤として移植できる。移植剤は生物分解可能な重合
体類や合成シリコーン類、例えばダウコーニング・コー
ポレーションで製造されるシリコンゴムのシラスチック
のような不活性材料を使用できる。 ［００２８］　　（実施例〕 本発明は、以下の非限定的な実施例によって例示されて
いる。 ［００２９］実施例１

【化５】 ペプチド２を０．５ミリモルスケ ルで、 アブライドバイ オシステムズ、モデル４３０−Ａペプチドシンセサイザ
ーを用いてｐ−メチルベンズヒドリルアミン樹脂（０，
４０ミリモル／ｇ、ケンタラキー州ルイズビルのペプチ
ドインターナショナル）に対する同相法によって合成し
た。全ての残基は製造業者によって供給されたプロトコ
ルを用いて、Ｎα−ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）
−保護アミノ酸の対称無水物としてダブルカップルした
が、但し、アルギニン、アスパラギン、グルタミンはジ
シクロへキシルカルボジイミド及び１−ヒドロキシベン
ゾトリアゾールを用いてダブルカップルした。側鎖保護
は次の通りである。Ａｒｇ（Ｔｏｓ）、Ｃｙｓ　（ｐＭ
ｅＢｚ　ｌ）、Ｇｌｕ（Ｂｚｌ）、Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）、
Ｓｅｒ　（Ｂｚｌ）、Ｔｙｒ　（２−Ｂｒ２）、ここで
Ｔｏｓはトシル、Ｃｈｘはシクロヘキシル、ｐＭｅＢＺ
ｌはｐ−メチルベンジル、Ｂｚｌはベンジル、２−Ｂｒ
Ｚは２−ブロモベンジロキシカルボニルである。ペプチ
ドは樹脂支持体から開裂され、５％容量／容量アニソー
ルを含有している液体ＨＦの中で一５℃で４０分間脱保
護された。真空でＨＦを除去した後にペプチドを樹脂か
ら３０％容量／容量酢酸及び水で抽出した。抽出物を１
リツトルに希釈し、ｐＨを水酸化アンモニウムで８と９
の間に調節し、そして０．０ＩＮフエリシアン化カリウ
ムを黄色の色が続くまで加えた（＝２５ｍｌ）。３０分
攪拌後、ｐＨを氷酢酸でく５に下げ、溶液を２５ｍ１の
沈降させたＡＧ　３−Ｘ４Ａ樹脂（Ｒｉｏ−Ｒａｄ）と
共に２時間攪拌した。溶液を樹脂から瀘過し、凍結乾燥
した。残ったペプチド物質を分離用ＨＰＬＣによってダ
イナマックス０１８カラム（４１，４Ｘ　２５０ｍｍ、
ライニンインストラメンツ）上で０．１％トリフルオロ
酢酸中のアセトニトリルを溶離剤として用いて精製した
。ペプチドの純度及び同定は分析用ＨＰＬＣ（ブイダッ
ク（Ｖｙｄａｃ）　２１８ＴＰ５４Ｃ＋ｓカラム、４．
６　ｘ　２５０ｍｍ、２．０ｍｌ／分、ｔｏ　＝１．９
分、２５分間にわたる０．１％トトリルオロ酢酸中１５
〜４０％又は２５〜５０％（容量／容量）アセトニトリ
ルの線形勾配）、アミノ酸分析（８％（容量／容量）フ
ェノールを含有してる６Ｍ　ＨＣｌ、１０６℃；２０及
び４０時間）、及び高速原子衝突マススペクトロメトリ
ー（Ｍ−３ｃａｎ）で評価した。更に環状の類似体は、
エルマン（Ｅｌｌｍａｎ）試薬で試験したときにネガチ
ブであることが示され、ジスルフィドの存在を確認した
。 アミノ酸分析　　Ａｓｘ　１．００（１）；　Ｔｈｒ　
１．０１（１）；　Ｓｅｒ　１．００（１）；　Ｇｌｘ
　１．０３（１）；　ｌ１ｅ１．８６（２）；　Ｌｅｕ
　０．９９（１）；　Ｔｙｒ　２．０２（２）；　Ｈｉ
ｓ　Ｏ，９７（１）；　Ｌｙｓ　１．１０（１）；　Ａ
ｒｇ　２．９７（３）。 ＦＡＢ−ＭＳ　：　（Ｍ＋Ｈ）　＝２１９４．２　（還
元）　（計算値、　２１９３．２）ε２８０　＝２８２
１

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 【請求項１】　式 【１】 〔式中Ｘ１はＬｅｕ、　Ｉｌｅ、　Ｍｅｔ、　Ｎｌｅ、
   又はＶａｌであり、Ｘ２はＬｅｕ、　Ｉｌｅ、　Ｍｅｔ
   、　Ｎｌｅ、　Ｖａｌであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ
   ４はそれぞれ独立に水素及び（Ｃ＋〜Ｃ４）アルキルか
   ら選択され、Ｔｎは（０２〜Ｃ１ｏ）アシル、（Ｃ１〜
   Ｃ４）アルキルであり、ＴｃはＯＲ’又はＮＨＫ”であ
   り、ここでＲ′は水素又は（Ｃ＋〜Ｃ４）アルキルであ
   り、θは構造式−ＮＨ（ＣＨ２）ｎｃＯ２−の基であり
   、ここでｎは１〜１１の整数であり、Ｘは結合であるか
   、又は式 ％式％（６） （） （ （） Ｃ（＝Ｏ）−１及び−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｈ）
   −であり、ここでＲ５とＲ６はそれぞれ独立に水素及び
   （Ｃ＋〜Ｃ４）アルキルからなる群から選ばれ、ｍは１
   〜３の値の整数である〕のペプチド誘導体、又は製薬上
   受入れられるその塩。 【請求項２】Ｘｌがイソロイシンである請求項１に記載
   のペプチド誘導体。 【請求項３】Ｘ２がイソロイシンである請求項１に記載
   のペプチド誘導体。 【請求項４】　ＸｌとＸ２がそれぞれイソロイシンであ
   る請求項１に記載のペプチド誘導体。 【請求項５】　θがＡｏｃである請求項１に記載のペプ
   チド誘導体。 【請求項６】ＸｌとＸ２がそれぞれイソロイシンである
   請求項５に記載のペプチド誘導体。 【請求項７１　　ＴＣが−ＮＨ２である請求項１に記載
   のペプチド誘導体。 【請求項８】　式 【２】 である請求項１に記載のペプチド誘導体。 【請求項９】　請求項１〜８の何れか−に記載のペプチ
   ド誘導体を含有する下痢の処置剤。 【請求項１０】　　請求項１〜８の何れか−に記載のペ
   プチド誘導体を含有する分泌性の下痢の処置剤。 【請求項１１】　　請求項１〜８の何れか−に記載のペ
   プチド誘導体の有効量を含有するカルシノイド症候群と
   関連する下痢の処置剤。 【請求項１２】　　請求項１〜８の何れか−に記載のペ
   プチド誘導体の有効量を含有するＶ　Ｉ　Ｐｏｍａと関
   連する下痢の処置剤。