JPH04211018A - 生物学的活性を有するポリペプチドを持続的に放出する組成物 - Google Patents
生物学的活性を有するポリペプチドを持続的に放出する組成物Info
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- JPH04211018A JPH04211018A JP3041336A JP4133691A JPH04211018A JP H04211018 A JPH04211018 A JP H04211018A JP 3041336 A JP3041336 A JP 3041336A JP 4133691 A JP4133691 A JP 4133691A JP H04211018 A JPH04211018 A JP H04211018A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
［０００１］
【産業上の利用分野】本発明は生物学的活性を有するポ
リペプチドを持続的に放出させる組成物に関するもので
、さらに詳細には一般に生体内の半減期が短いものと知
られている生物学的活性を有するポリペプチドをヒトお
よび動物に非経口的に投与された時、その様なポリペプ
チドを持続的に放出させる組成物に関するものである。 ［０００２］
リペプチドを持続的に放出させる組成物に関するもので
、さらに詳細には一般に生体内の半減期が短いものと知
られている生物学的活性を有するポリペプチドをヒトお
よび動物に非経口的に投与された時、その様なポリペプ
チドを持続的に放出させる組成物に関するものである。 ［０００２］
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】生物
学的活性を有するポリペプチドの大半は生体内でその半
減期が短いため生物学的効果を十分に表す同時に所望の
期間その効果を維持させるためには有効量よりも過多量
を投与するかあるいは投与頻度を高めなければならない
ため、相対的に投与対象には大きな損傷を与えることが
ありうる。したがって、このようなポリペプチドを生体
内に投与する場合には１回の投与でその効果を長期間維
持させる必要があるため、この様な要求に沿って生物学
的活性を有する物質を持続的に放出する組成物を開発し
、投与頻度を最少化することにより、投与対象への損傷
を減らすとともに頻繁な投与に伴われる煩わしさと労働
力を節減するための研究が多角的に成されてきた。 ［０００３］その例として大韓民国特許公告第８９−２
６３１号では植物性オイルや鉱物性オイル、とくに落花
生オイルと胡麻オイルを使用してビヒクルおよび補湿剤
を添加してなる濃化油（ｇｅｌｌｅｄ ｏｉｌ）ビヒ
クル（ｖｅｈ ｉｃ ｌｅ）を形成した後、遷移金属錯
体、とくに亜鉛を結合させた成長ホルモンを上記濃化油
ビヒクルと混合することにより、有効成分の放出持続性
を延長しようとした。しかし、この方法による組成物は
持続効果が２週間程度に過ぎず成長ホルモンをそのまま
に使用することができず複雑な工程を経て金属や遷移金
属を結合させて使用しなければならない。例えば、成長
ホルモンと亜鉛イオンの錯体を形成するためには制限条
件下で成長ホルモンに塩化亜鉛を添加して懸濁液を作り
殺菌脱イオン水で沈殿物の凝集を防止した上、遠心分離
する一連の過程を数回繰り返し、凍結乾燥させなければ
ならないが、かかる工程は大変難しくさらに多大な時間
を要する。 ［０００４］また、ヨーロッパ特許第２４６，５４０号
はパルミチン酸、ステアリン酸およびラウリル酸などの
脂肪酸をインシュリンと混合して錠剤の形で鼠の体内に
移植する方法を開示しており、大韓民国特許公報第９０
６８８６号にはソマトトロピンの放出を抑制するため剤
形体を部分的に覆うバリアーコーティング（Ｂａｒｒｉ
ｅｒｃｏａｔｉｎｇ）を施した形で牛や豚の体内に移植
する方法が記述されているが、この場合持続効果は多少
延長され得るがこの方法などは動物に投与するとき手術
的な方法や特殊器具を使用しなければならず、動物が感
じる異物感も液体状よりは大きいという短所があった。 ヨーロッパ特許第１９３．９１７号には動物成長ホルモ
ンを水溶性または水に分散される炭水化物重合体、例え
ばデキストラン、デキストリン、澱粉、グリコーゲン、
セルロース、およびチト酸などと混合して牛と羊に投与
して実験したが、持続期間が７Ｈ程度に短く、デキスト
ランのような炭水化物重合体は場合によって抗原として
作用して感受性の反応を見せることもありうるので医薬
組成物としては好ましくない。ヨーロッパ特許第３１４
，４２１号でもやはりオイルを主成分として補助剤およ
び炭水化物重合体であるデキストランを使用する組成物
に対して記述しているが、根本的には上記ヨーロッパ特
許第１９３、９１７号と類似しており、同じ問題点が見
られる。 また、大韓民国公開特許第８７−１８２５号でもやはり
亜鉛を使用して成長ホルモンに付着させ落花生オイルを
利用してオイルビヒクルを製造した後、このオイルビヒ
クル８ｍｇと上記成長ホルモン４０ｍｇを豚に投与した
が、９日間程度の短い持続効果した表さなかった。 ［０００５］上述した通り、公知の組成物を利用して生
物学的活性を有するソマトトロピンを生体内に投与した
場合には初期の放出があまりに過多であるかあるいは生
体内における損失が多大であるためその持続的が短いだ
けでなく、組成成分による副作用が伴うこともあり、投
与しようとするソマトトロピンを事前に予め金属または
遷移金属と結合させなければならない等の問題点があっ
た。 ［０００６］よって、本発明者らは生物学的活性を有す
るポリペプチドを生体内への投与に最も好適でかつ持続
効果が優秀な組成物を鋭意研究してきた結果、生物学的
活性を有するポリペプチドを酢酸トコフェロール、トコ
フェロールおよびおよびその誘導体のうちから選択され
た１種または２種以上のトコフェロール類および遅延補
助剤と組合せると、生体内への投与のときに初期放出を
最適にし、持続効果を極大化できるだけでなく、生体内
の副作用がまったくなく、かえって生物学的活性を有す
るポリペプチドとともに上昇効果を発揮できることはも
ちろん、組成物に適用される生物学的活性を有するポリ
ペプチドに金属または遷移金属を結合させなくても結合
させたものと同等あるいはそれ以上の優秀な持続効果を
表わすため、さらに安定したことが判明し、本発明を完
成した。すなわち、本発明は生物学的活性を有するポリ
ペプチドを非経口的に投与した時そのような有効成分を
持続的に放出させながら非常に安定した組成物を提供す
ることにその目的がある。 ［０００７］
学的活性を有するポリペプチドの大半は生体内でその半
減期が短いため生物学的効果を十分に表す同時に所望の
期間その効果を維持させるためには有効量よりも過多量
を投与するかあるいは投与頻度を高めなければならない
ため、相対的に投与対象には大きな損傷を与えることが
ありうる。したがって、このようなポリペプチドを生体
内に投与する場合には１回の投与でその効果を長期間維
持させる必要があるため、この様な要求に沿って生物学
的活性を有する物質を持続的に放出する組成物を開発し
、投与頻度を最少化することにより、投与対象への損傷
を減らすとともに頻繁な投与に伴われる煩わしさと労働
力を節減するための研究が多角的に成されてきた。 ［０００３］その例として大韓民国特許公告第８９−２
６３１号では植物性オイルや鉱物性オイル、とくに落花
生オイルと胡麻オイルを使用してビヒクルおよび補湿剤
を添加してなる濃化油（ｇｅｌｌｅｄ ｏｉｌ）ビヒ
クル（ｖｅｈ ｉｃ ｌｅ）を形成した後、遷移金属錯
体、とくに亜鉛を結合させた成長ホルモンを上記濃化油
ビヒクルと混合することにより、有効成分の放出持続性
を延長しようとした。しかし、この方法による組成物は
持続効果が２週間程度に過ぎず成長ホルモンをそのまま
に使用することができず複雑な工程を経て金属や遷移金
属を結合させて使用しなければならない。例えば、成長
ホルモンと亜鉛イオンの錯体を形成するためには制限条
件下で成長ホルモンに塩化亜鉛を添加して懸濁液を作り
殺菌脱イオン水で沈殿物の凝集を防止した上、遠心分離
する一連の過程を数回繰り返し、凍結乾燥させなければ
ならないが、かかる工程は大変難しくさらに多大な時間
を要する。 ［０００４］また、ヨーロッパ特許第２４６，５４０号
はパルミチン酸、ステアリン酸およびラウリル酸などの
脂肪酸をインシュリンと混合して錠剤の形で鼠の体内に
移植する方法を開示しており、大韓民国特許公報第９０
６８８６号にはソマトトロピンの放出を抑制するため剤
形体を部分的に覆うバリアーコーティング（Ｂａｒｒｉ
ｅｒｃｏａｔｉｎｇ）を施した形で牛や豚の体内に移植
する方法が記述されているが、この場合持続効果は多少
延長され得るがこの方法などは動物に投与するとき手術
的な方法や特殊器具を使用しなければならず、動物が感
じる異物感も液体状よりは大きいという短所があった。 ヨーロッパ特許第１９３．９１７号には動物成長ホルモ
ンを水溶性または水に分散される炭水化物重合体、例え
ばデキストラン、デキストリン、澱粉、グリコーゲン、
セルロース、およびチト酸などと混合して牛と羊に投与
して実験したが、持続期間が７Ｈ程度に短く、デキスト
ランのような炭水化物重合体は場合によって抗原として
作用して感受性の反応を見せることもありうるので医薬
組成物としては好ましくない。ヨーロッパ特許第３１４
，４２１号でもやはりオイルを主成分として補助剤およ
び炭水化物重合体であるデキストランを使用する組成物
に対して記述しているが、根本的には上記ヨーロッパ特
許第１９３、９１７号と類似しており、同じ問題点が見
られる。 また、大韓民国公開特許第８７−１８２５号でもやはり
亜鉛を使用して成長ホルモンに付着させ落花生オイルを
利用してオイルビヒクルを製造した後、このオイルビヒ
クル８ｍｇと上記成長ホルモン４０ｍｇを豚に投与した
が、９日間程度の短い持続効果した表さなかった。 ［０００５］上述した通り、公知の組成物を利用して生
物学的活性を有するソマトトロピンを生体内に投与した
場合には初期の放出があまりに過多であるかあるいは生
体内における損失が多大であるためその持続的が短いだ
けでなく、組成成分による副作用が伴うこともあり、投
与しようとするソマトトロピンを事前に予め金属または
遷移金属と結合させなければならない等の問題点があっ
た。 ［０００６］よって、本発明者らは生物学的活性を有す
るポリペプチドを生体内への投与に最も好適でかつ持続
効果が優秀な組成物を鋭意研究してきた結果、生物学的
活性を有するポリペプチドを酢酸トコフェロール、トコ
フェロールおよびおよびその誘導体のうちから選択され
た１種または２種以上のトコフェロール類および遅延補
助剤と組合せると、生体内への投与のときに初期放出を
最適にし、持続効果を極大化できるだけでなく、生体内
の副作用がまったくなく、かえって生物学的活性を有す
るポリペプチドとともに上昇効果を発揮できることはも
ちろん、組成物に適用される生物学的活性を有するポリ
ペプチドに金属または遷移金属を結合させなくても結合
させたものと同等あるいはそれ以上の優秀な持続効果を
表わすため、さらに安定したことが判明し、本発明を完
成した。すなわち、本発明は生物学的活性を有するポリ
ペプチドを非経口的に投与した時そのような有効成分を
持続的に放出させながら非常に安定した組成物を提供す
ることにその目的がある。 ［０００７］
【課題を解決するための手段】以下本発明の詳細な説明
する。本発明は、生物学的活性を有するポリペプチドを
酢酸トコフェロール、トコフェロールおよびその誘導体
のうちから選択された１種あるいは２種以上のトコフェ
ロール類および遅延補助材と組合せて成る組成物を提供
するものである。
する。本発明は、生物学的活性を有するポリペプチドを
酢酸トコフェロール、トコフェロールおよびその誘導体
のうちから選択された１種あるいは２種以上のトコフェ
ロール類および遅延補助材と組合せて成る組成物を提供
するものである。
【０００８】かかる本発明において生物学的活性を有す
るポリペプチドではこの分野で公知である生物学的活性
を有するすべてのポリペプチドが使用され得、例えばソ
マトトロピンを含む各種の成長ホルモンやその他のホル
モン、インシュリン、インターフェロン、インターロイ
キンＩＩ、腫瘍壊死因子、コロニー刺激因子またはその
誘導体などがある。 ［０００９］その中でもソマトトロピンはその半減期が
非常に短いものと知られており、本発明の適用に特に好
ましい。その様なソマトトロピンの例として生形成長ホ
ルモン、豚成長ホルモン、山羊または綿羊成長ホルモン
、鮭成長ホルモンまたは魚介類の成長ホルモン等のよう
な各種の動物成長ホルモンやヒト成長ホルモンが挙げら
れる。上記ソマトトロピンは各種の動物、特に動物の脳
下垂体から抽出して得るかあるいは、遺伝工学的方法に
よりＤＮＡ−組換微生物から発現させて得られたもので
あっても良い。本発明においてポリペプチドは錯イオン
金属を結合させた形態や結合させない形態のうちいずれ
を使用しても良い。しかし、本発明では錯イオン金属や
その他の一般的にこの分野で水溶性流体に対するポリペ
プチドの溶解度を低めるため使用される物質などと化学
的に結合させて使用しなくても充分な程皮の持続性を表
わすので従来のように化学的に結合された状態で使用す
る必要がない。 ［００１０１一方、本発明による組成物に使用される酢
酸トコフェロール、トコフェロールおよびその誘導体は
ポリペプチドの放出を遅延することはもちろん、それ自
体が薬理活性を有しているので、非常に好ましい。例え
ば、鼠、二十日鼠、ギニアビッグ、豚、または家禽では
正常な生産過程を助、幼い綿羊、子牛または犬で筋肉発
達の異常を防止し、ひよこには脳軟化症、筋肉活動不規
則、筋痙縮、運動失調および強直性痛撃を予防すること
ができる。さらに、ミンク、豚または猫では脂肪組織炎
（ｓ ｔｅａｔ ｉｔ ｉｓ）の予防に役立つ。 ［００１１］本発明の組成物ではポリペプチドの放出を
さらに遅延するため、トコフェロール類とともに遅延補
助剤が使用される。その遅延補助剤は多く公知であり、
その中でもコリン誘導体、アルミニウムモノステアレー
ト、カルシウムステアレート、蜜蝋、カルナウバワック
スまたはパラフィンなどを使用する時、満足すべき効果
が得られる。これらの遅延補助剤は上述したものから１
種あるいは２種以上を選択して使用することができる。 本発明において特に好ましい遅延誘導体はコリン誘導体
であり、これらのコリン誘導体を使用すると生体内で有
効成分が消尽した後にも遅延補助剤が残留するので発生
する問題点を克服できるだけでなく、粘性の異常上昇を
避けられる利点がある。この様なコリン誘導体の例では
ホスファチジルコリン、リンホスホリピド、プラスマロ
ゲンまたはスピンゴマイエリン等が挙げられる。上記ホ
スファチジルコリンは大豆、牛の肝、牛の心臓または卵
黄から抽出されたものでありうる。 ［００１２］本発明による組成物において生物学的活性
を有するポリペプチドの含量は相当に広い範囲であり、
その下限は生体内で要求されるポリペプチドの最小要求
量であり、上限は組成物内で酢酸トコフェロール等がポ
リペプチドの全部を事実上官められる量であればかまわ
ないが、明白な目的がない限りポリペプチドを過多量に
使用する必要はない。なお、遅延補助剤とトコフェロー
ル類の合計を１００重量％とじた時、−殻内に遅延補助
剤を２ないし１０重量％、好ましくは２ないし７重量％
、さらに好ましくは２ないし５重量％含めて、その残り
はトコフェロール類を含めるのが良い。 ［００１３］以上にて説明した通りの本発明の組成物は
、先ずトコフェロール類と遅延補助剤を混合した後にこ
こに生物学的活性を有するポリペプチドを組合わせるか
あるいは生物学的活性を有するポリペプチドを補助遅延
剤に分散した後これをトコフェロール類に組合わせて製
造できる。この際、トコフェロール類と遅延補助剤は湯
煎処理し、湯煎加熱温度は１３０ないし１６０℃、好ま
しくは１４０ないし１５０℃とし、湯煎の時間は１０な
いし４０分、好ましくは２０ないし３０分にした方が良
い。 ［００１４］従来知られた組成物の場合、それ自体だけ
では持続効果が充分でなかったため投与された時のポリ
ペプチドの体内溶解皮を低めないと所望の目的を達成で
きず透析などの煩わしい工程を経て金属または遷移金属
などを結合させなければならないばかりでなく、過多な
初期放出の損失を補うためにポリペプチドを過多量投与
するしかなかったが、本発明による組成物は放出持続性
が優秀であることはもちろん、従来とは違って生物学的
活性を有するポリペプチドを金属軟または錯化合物の形
態でない化学的に非結合である状態で使用しても驚くべ
き持続効果を表わし、金属または遷移金属などの利用に
よる生体内の副作用の恐れがない。かえって本発明によ
る組成物の場合、トコフェロール類が生体に有用な薬理
作用を行い、異物質に対する生体拒否反応を予防するか
あるいは暖化する作用をも兼ねるようになる。何よりも
本発明の組成物は有効物質の初期放出が温和なので生体
内利用率が従来と比べて遥かに向上し、製造工程および
投与方法が非常に簡便であるという利点がある。 ［００１５］以下、本発明を次の実施例にもとづいてよ
り具体的に説明する。 実施例１ ５００ｍｌの容儀のビーカーに生形ソマトトロピン液（
濃度１８ｍｇ／ｍｌ、 （株）ラッキーの組換生形ソマ
トトロピン）３００ｍｌとタイプＩＶ Ｓの大豆から
抽出したＬα−ホスファチジルコリン（Ｌ−α−レシチ
ン）３ｇをホモミキサーで１０分間均等に混合した後、
４℃を維持するマイクロフルイダイザーに投入してこれ
を５分間作動した。この液を収集して凍結乾燥用の瓶に
投入しドライアイスとアセトンを利用して一７０℃で急
速凍結した後、１２時間以上凍結乾燥した。１６１．８
ｍｇの凍結乾燥した生形ソマトトロピン混合物（生形ソ
マトトロピン１００ｍｇ）をボールに入れ均等に擦った
後、酢酸トコフェロール１ｍｌにＬ−α−ホスファチジ
ルコリンと混合された生形ソマトトロピンを添加し、ホ
モミキサーで５分間分散させた。この様にして得られた
生形ソマトトロピン組成物を投与した時、体重の増加効
果について次のように実験した。実験に使用した動物で
は８０ないし１００ｇ程度の雌ＳＤラットを使用し、脳
下垂体除去手術（Ｈｙｐｏｐｈｙｓｅｃｔｏｍｙ）の一
方法である咽頭の周りを手術する方法（Ｐａｒａｐｈａ
ｒｙｎｇｅａｌ ｍｅｔｈｏｄ）を利用して脳下垂体
を除去した上、手術後２週間から１週間の間毎日同じ時
間に体重を測定し体重の変化がないフットを選別し、こ
れらを実験に使用した。体重の変化がないラット３匹に
上記にて製造された生形ソマトトロピン組成物を匹当り
０゜１ｍｌの量で腹側皮下に投与した。一方、体重の変
化がないラット３匹に酢酸トコフェロールのみを投与し
てこれを対照群にした。毎日同じ時間に体重を測定して
付与前３日間の体重と比較して増俸率（体重増加率）を
次の表１と［図１］に表した。 ［００１６］実施例２ 実施例１と同様の方法で製造するが、マイクロフルイダ
イザーだけを通過させなかったＬ−α−ホスファチジル
コリンと混合した生形ソマトトロピンを実施例１と同一
方法により調製した脳下垂体除去鼠３匹を使用して実験
し、その結果を次の表１と［図１］に表した。 表１ 脳下垂体除去鼠における生形ソマトトロピンによ
る体重増加率 （単位％） 投与日数 実施例１ 実施例２ 対照群１
８．１ ７．５ −０．２２ １８
．４ １３．５ −０．８３ ２１．４
１９．８ −１．２４ ２８．２ ２４．
２ −１．０５ ３０．３ ２８．６
０．０６ ３１．５ ２９．５
−１．６７ ３３．４ ３２．６
−０．４８ ３５．８ ３４．９ −
０．５９ ３８．０ ３５．１ −１
．２１０ ３８．０ ３７．３ −１
．５１１ ４１．９ ４０．３ −１
．２１２ ４３．６ ３９．１ −０
．５１３ ４４．３ ４０．８ −１
．３１４ ４７．２ ４０．７ −１
．２１５ ４７．２ ４０．５ −０
．３［００１７］実施例３ 豚ソマトトロピン液２００ｍ１（濃度２４■／ｍｌ）と
Ｌα−ホスファチジルコリン１．５８ｇを入れて実施例
１と同一方法にて製造し、酢酸トコフェロール１ｍｌに
Ｌα−ホスファチジルコリンを混合した豚ソマトトロピ
ンを入れて実施例１と同一方法にて実験し、その結果を
次の表２と［図２］に表した。 ［００１８］実施例４ 実施例３と同様な方法で製造されたＬ−α−ホスファチ
ジルコリンと混合した豚ソマトトロピンと酢酸トコフェ
ロール０． ５ｍｌ、胡麻オイル０． ５ｍｌを入れて
実施例１と同一方法により実験し、その結果を次の表２
と［図２］に表した。 ［００１９］実施例５ 実施例４と同様な方法によるが、但し胡麻オイルの代り
に同量の落花生オイルを使用して実施例１と同一方法に
より実施し、その結果を次の表２と［図２］に表した。 表２ 脳下垂体除去風における豚ソマトトロピンによる
体重増加率 （単位 ％） 投与日数 実施例３ 実施例４ 実施例５ 対
照群１ ６、 ６ ４． ６ ８． １
−０． ２２ １３．６ １２．５ １３．
４−０．８３ １９．７ １５．０ １２．４
−１．２４ ２２．６ １４．３ １３．９−
１．０５ ２５．５ １４．９ １５．４
０．０６ ２９．０ １５．７ １６．４−１
．６７ ３１．８ １６．１ １８．９−０．
４８ ３３．５ １６．３ １８．７−０．５
９ ３６．３ １７．５ ２１．１−１．２１
０ ３５．２ １７．０ ２３．０−１．５１
１ ３７．６ １９゜２ ２５．２−１．２１
２ ４１．１ １９．９ ２６．４−０．５１
３ ４３．７ ２１．２ ２７．５−１．３１
４ ４３．５ １８．５ ２８．２ １．２
１５ ４７．７ ２０．４ ３０．２ ０．
３１６ ４８．３ ２０．２ ３１．４ ０
．０１７ ５０．３ ２０．５ ３２．６−１
．２１８ ５０．９ ２２．６ ３２．４−０
．１１９ ５１．８ ２２．６ ３３．０−０
．４２０ ５３．０ ２２．７ ３４．０
０．０［００２０］実施例６ 酢酸トコフェロール１ｍｌにＬ−α−ホスファチジルコ
リン３３ｍｇを入れてホモミキサーで分散した後、ここ
に凍結乾燥させた１００■の豚ソマトトロピンを入れて
実施例１と同一方法にて実験し、その結果を次の表３と
［図３］に表した。 ［００２１１実施例７ 実施例３と同様な方法によるが、但し酢酸トコフェロー
ルの量を２ｍｌにして同じ濃度の豚ソマトトロピンを脳
下垂体に注射して実施例１と同じ方法にて実験し、その
結果を次の表３と［図３］に表した。 ［００２２］実施例８ 実施例３と同様な方法によるが、但し酢酸トコフェロー
ルの代りに同量の落花生オイルを使用して実施例１と同
じ方法にて実験し、その結果を次の表３と［図３］に表
した。 表３ 脳下垂体除去鼠における豚ソマトトロピンによる
体重増加率 （単位 ％） 投与日数 実施例６ 実施例７ 実施例８ 対
照群１ ６、 ６ ８． Ｏ４，７−０，
２２１４，１１４，８１０，１−０，８ ３１９，７２０，０１０，０−１，２ ４２３，４２２，１１０，４−１，０ ５２３，３２３，３１１，１０，０ ６２３，４２４，９１１，９−１，６ ７２３，１２６，２１２，９−０，４ ８２６，３２４，３６，９−０，５ ９２６，６２８，３１０，８−１，２ １０２５，９３１，５９，９−１，５ １１２６，７３２，３９，６−１，２ １２２７，２３３，５１１，８−０，５１３２８，７３
５，２１２，５−１，３１４３０，５３７，１１３，７
−１，２１５３０，４３５，６１２，１−０，３［００
２３］実施例９ 生形ソマトトロピン液４００ｍ１（濃度２３■／ｍｌ）
とＬα−ホスファチジルコリン３．１０２ｇを入れて実
施例１と同じ方法で製造し、酢酸トコフェロール１ｍｌ
にＬα−ホスファチジルと混合された１３．３ｍｇの生
形ソマトトロピン混合物（生形ソマトトロピン１０■）
を入れ、実施例１と同じ方法で実験し、その結果を次の
表４と［図４］に表した。 ［００２４］実施例１０ 実施例９と同様な方法によりＬ−α−ホスファチジルコ
リンと混合された６６．５■の生形ソマトトロピン混合
物（生形ソマトトロピン５０■）を使用して実施例１と
同じ方法で実験し、その結果を次の表４と［図４］に表
した。 ［００２５］実施例１１ Ｌ−α−ホスファチジルコリンと混合しない凍結乾燥さ
れた１００■の生形ソマトトロピンを酢酸トコフェロー
ル１ｍｌと混合し、実施例１と同じ方法で実験し、その
結果を表４と［図４］に表した。 ［００２６］実施例１２ 酢酸トコフェロール１ｍｌと２０ｍｇのアルミニウムモ
ノステアレートを入れて１５０℃に加熱して５分間攪拌
加熱した上、常温にて十分に冷やし、ここにＬ−α−ホ
スファチジルコリンと混合しない１００■の凍結乾燥生
形ソマトトロピンを入れ、実施例１と同じ方法で実験し
、その結果を次の表４と［図４］に表した。 ［００２７］実施例１３ 実施例１２と同様に生形ソマトトロピンに錯イオン金属
である亜鉛が結合した生形ソマトトロピンを入れ、実施
例１と同じ方法にて実験し、その結果を次の表４と［図
４］に表した。 表４ 脳下垂体除去鼠における生形ソマトトロピンによ
る体重増加率 （単位 ％） 投与日数 実施例 実施例 実施例 実施例 実
施例 対照群９ １０ １１ １２
１３１ ８．７ ８．８ ７．３ ７．
９ ５．５−０．２２ １２．２ １３．９ ８
．８ １５．５ ９．９ −０．８３ １３．９
１６．１ ９．６ ２２．４ １２．４ −１．２４
１５．２ ２０．９ ８．９ ２４．０ １５．
５ −１．０５ １６．３ ２４．２ １０．５ ２
８．０ １７．２ ０．０６ １７．２ ２７．８
１０．８ ３０．０ １９．０ −１．６７ １６
．９ ２５．５ １２．６ ３１．７ ２２．５ −０
．４８ １８．１ ２９．０ １４．１ ３１．３
２２．８ −０．５９ １８．９ ３０．６ １４．
１ ３２．２ ２３．８ −１．２１０ １７、
１ ３０．２ １４．８ ３４． １ ２５．９ −
１．５１１ １９．２ ３３．５ １７．２ ３
６． １ ２９．３ −１．２１２ １９．６ ３
４．４ １６．４ ３６．７ ２８．２ −０． ５１
３ ２０．２ ３５．２ １８．２ ４３．６
２９．４ −１．３１４ ２０．４ ３２．９
１９．２ ４６．５ ３１．３ −１．２１５ ２
１．９ ３６． １ １８． １ ４５．４ ２９．
１ −０．３［００２８］実施例１４ 酢酸トコフェロール１ｍｌに２０ｍｇのポリエチレング
リコール−７５ラノリン（ＰＥＧ−７５Ｌａｎｏｌｉｎ
または５ｏｌａｎ Ｅ）をホモミキサーで分散した後
、亜鉛が結合した１００ｍｇの生形ソマトトロピンを入
れ、実施例１と同じ方法にて実験し、その結果を次の表
５と［図５］に表した。 ［００２９］実施例１５ 実施例１４と同様であるが、但しポリエチレングリコー
ル−７５ラノリンの代りに３３ｍｇのアラセル１６５（
グリセリルモノステアレートとＰＥＧ−１００ステアレ
ートが結合した物質）を使用して実施例１と同様な方法
にて実験し、その結果を次の表５と［図５］に表した。 ［００３０１実施例１６ 実施例１２と同様であるが、但し凍結乾燥した生形ソマ
トトロピンの代りにスプレー乾燥した生形ソマトトロピ
ンを使用して実施例１と同様な方法にて実験し、その結
果を次の表５と［図５］に表した。 ［００３１］実施例１７ 実施例１２と同様であるが、但しアルミニウムモノステ
アレートを１０■に減らし、その代り１０ｍｇのコレス
テロールを入れ、実施例１と同じ方法にて実験し、その
結果を次の表５と［図５］に表した。 表５ 脳下垂体除去鼠における生形ソマトトロピンによ
る体重増加率 （単位 ％） 投与日数 実施例１４ 実施例１５ 実施例１６ 実施
例１７ 対照群１ ６、 ９ ４． １
８． ５ ６． ７ −０． ２２ １０．９
１０．３ １１．７ ９．９−０゜８３ １
３．７ １３．３ １６．１ １０．２−１．２
４ １６．７ １６．６ １６．１ １１．０
−１．０５ １７．２ １８．１ １６．３
１２．５ ０．０６ １９．２ １９．６ １
６．９ １１．８−１．６７ ２１．６ ２０．
３ １８．７ １２．５−０．４８ ２３．４
１９．１ ２０．０ １２．５−０．５９ ２
２．６ ２０．４ １９．６ １２．３−１．２
１０ ２２．８ ２０．５ ２１．２ １３．
２−１．５１１ ２３．９ ２０．６ ２１．０
１２．４−１．２１２ ２３．１ ２１．６
２０．６ １５．１−０．５１３ ２３．９
２１．５ １９．９ １１．９−１゜３１４ ２
４．６ ２１．６ ２２．０ １４．１−１．２
１５ ２４．０ １９．８ ２１．９ １１．
３−０．３［００３２］実施例１８ 実施例１２と同様に、凍結乾燥した生形ソマトトロピン
と亜鉛結合した生形ソマトトロピンを入れ、実施例１と
同一方法にて実験し、その結果を次の表６と［図６］に
表した。 ［００３３］実施例１９ 実施例１２と同様であるが、生形ソマトトロピンの代り
に亜鉛が結合した豚ソマトトロピンを使用し、実施例１
と同一方法にて実験し、その結果の次の表６と［図６］
に表した。 表６ 脳下垂体除去鼠における生形ソマトトロピンおよ
び豚ソマトトロピンによる体重増加率 （単位 ％） 投与日数 実施例１８ 実施例１９ 対照群１
８．０ ５．９ −０．２２ １３
．６ １０．４ −０．８３ １７．９
１２．３ −１．２４ １４．８ １４．
４ −１．０５ １３．５ １４．７
０．０６ １７．３ １４．１
−１．６７ ２１．０ １４．６
−０．４８ ２２．８ １７．３ −
０．５９ １６．７ １６．９ −１
．２１０ ２４．６ １４．３ −１
．５１１ ２６．４ １７．６ −１
．２１２ ２８．２ １７．１ −０
．５１３ ２７．９ １８．４ −１
．３１４ ３０．５ １５．３ −１
．２１５ ３０．５ １７．５ −０
．３［００３４］実施例２０ ５０ｍ１容量のビーカーに酢酸トコフェロール３０ｍ１
およびアルミニウムモノステアレー）６００ｍｌを投入
し、別途に温度調節が可能なホットプレートの上で５０
０ｍ１容量のビーカーに酢酸トコフェロール１５０ｍ１
を投入したものを１５０℃の温度に加熱した後、ここに
上記反応混合物を添加した上、マグネチックバーを使用
して混合しながら湯煎加熱した。２０分程度加熱してア
ルミニウムモノステアレートは充分に溶解するが酢酸ト
コフェロールはこげないようにし、次いでビーカーを取
り出して真空状態で冷却しゼリーを形成したのち、生形
ソマトトロピン（（株）ラッキーの組換生形ソマトトロ
ピン）３ｇを添加して約４０℃程度に温度を下げた後、
マグネチックバーを使用して２時間混合した。それから
、１５ゲージニードル付きの２０ｍ１ １回用の注射器
に充分に混合した上記組成物１０ｍ１（生形ソマトトロ
ピ２１頭当りＩｇ）を入れ詰めた。実験に使用した乳牛
は２回目の授乳期第２期の３か月の期間にあるホルスタ
イン乳牛であり、乳牛数は２匹で対照群には何にも注射
しなかった２匹の乳牛を使用した。充填した組成物を乳
牛の肩胛骨の上方皮下に注射した後、注射後毎日の産乳
量を測定し、１日産乳量を累積まとめて次の表７に示し
、時間の推移に従う産乳量の増加率のグラフを［図７］
に示した。単位は１日当り眩で表示した。 表７１日産乳量の累積平均（ｋｇ／Ｂ）日 付 投与
量 対照群 投与群／対照群の増加率（％）−
５〜０ ２４．５ ２７．９ −〜
７ ２７．６ ２７．５ １４．３〜１
４ ２７．８ ２７．７ １３．９〜２
１ ２７．３ ２７．８ １１．７〜３
０ ２６．６ ２７．８ ８．７［０
０３５］ 投与群／対照群の増加率（％）＝［投与鮮度乳量の増加
率（％）／対照群産乳量の増加率（％）］Ｘ１００［０
０３６］血液内に存在するソマトトロピンを検出するた
め毎日一定時間に尻尾の静脈から真空チューブ注射器を
使用して血液を採取し、遠心分離した後、血漿を取った
上、放射線免疫分析法（Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓ
ａｙ）で分析した結果を次の表８に示した。時間の推移
に従う血漿ＢＳＴ濃度の変化を［図８］に示した。 ［００３７］ 表８ 生形ソマトトロピンの平均血漿濃度（ｎｇ／ｍｌ
）グループ 日付 投与群 対照群 −２９，２１６，９ ０１８７，７４８，２ １７５，１２２，７ ３６１，３１３，３ ５５８，４４１，３ ７６０，０３１，３ ９６９，３２８，６ １１５４，９２１，１ １３３３，４１１，３ １５２４，９１６，０ １７２４，４１３，３ １９４３，５２８，９ ２１ ５５．７ ２９．３２
３ ５４．２ ２２．２３０
４１．８ ２３．７［００
３８］本発明による組成物を投与した成長ホルモンが牛
乳内に遊離する量を検出するため搾乳のとき牛乳を１０
ｍ１程度採取し放射線免疫分析法により分析した結果を
次の表９に示し、時間の推移に従う牛乳内ＢＳＴの濃度
を［図９］に示した。 表９ 生形ソマトトロピンの平均牛乳内濃度（ｎｇ／ｍ
ｌ）グループ 日付 投与群 対照群 ５ ０．３３１０ ０．３２０４ １２ ０．３１８４ ０．３５３７ ２０ ０．３５５７ ０．２６７７ ２８ ０．３２３７ ０．３８１２ ３５ ０．３０９８ ０．３０４３ ［００３９］実施例２１ 上記実施例２０と同様に製造した組成物を乳牛当り５ｍ
１（生形ソマトトロピン：頭当り５００ｍｇ）ずつ上記
実施例２０と同じく投与した。実験に使用した乳牛数は
投与群５匹、対照群４匹であり、実施例２０と同じ分析
法により測定し、その結果を次の表１０、表１１および
表１２にそれぞれ示し、時間の推移に従う産乳量の増加
率、血漿ＢＳＴ濃度および牛乳内ＢＳＴ濃度を［図１０
］、［図１１］および［図１２］にそれぞれ表わした。 表１０１日産乳量の累積平均（ｋｇ／日）グループ 日 付 投与量 対照群 投与群／対照
群の増加率（％）−５〜０ ２５．７ ２５．７
−〜７ ２７．５ ２４．４
１２．２〜１４ ２７．９ ２５．０
１１．４〜２１ ２７．１ ２４．９
８．５〜２８ ２６．６ ２４．５
８．９［００４０］ 投与群／対照群の増加率（％）＝［投与鮮度乳量の増加
率（％）／対照群産乳量の増加率（％）］ｘ１００［０
０４１］ 表１１ 生形ソマトトロピンの平均血漿濃度（ｎｇ／ｍ
ｌ）グループ 日付 投与群 対照群 −１１５，０１０，１ １７９，５１７，０ ５３８，４１２，３ ８４０、３９，２ １２２４，９１４，２ １５１８，７１３，３ １９１４，５８，４ ２２２０，４１１，２ ２７１７，９１５，５ ２９２１，２１４，２ 表１２ 生形ソマトトロピンの平均牛乳内濃度（ｎｇ／ｍｌ）グ
ループ 日付 投与群 対照群 ６ ０．３２９６ ０．３０４３ １６ ０．３４５０ ０．３９３１ ２１ ０．３７００ ０．４１３８ ２８ ０．３８１９ ０．３４８３ ［００４２］実施例２２ 授乳中期にあるホルスタイン乳牛３匹を利用して実験し
た。実施例１と同様な方法によって製造したＬ−αホフ
ファチジルコリンを混合した生形ソマトトロピン組成物
７． ５ｍｌを投与し、対照群としては３匹の乳牛に酢
酸トコフェロールを同量注射した。注射前２週間の間６
匹の乳牛の産乳景を毎日測定し、注射後と比較するのに
指標とした。充填した組成物を乳牛の肩胛骨の上方皮下
に注射した後、注射後毎日産乳量を測定し、１日産乳量
をまとめて表１３に示し、時間の推移による産乳景の増
加率のグラフを［図１３］に表した。単位ｋｇ／日と表
示した。また、注射前と注射後の３Ｂ、 ７Ｂ、 １
４Ｂ、 ２１［Ｅｌ、２８日口の乳牛の微静脈から採血
して放射線免疫分析法（Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓ
ａｙ）で血清肉牛形ソマトトロピンの濃度を測定し、次
の表１４に示し、表１４に対する時間の推移によるグラ
フを［図１４］に示した。 表１３ 投与前と投与後の１日産乳量 （ｋｇ／日） 日付投与群 対照群 −１４１６，６１４，９ −１３１５，８１４，９ −１２１４，９１１，６ −１１１６，６１５，３ −１０１５，８１３，５ −９１５，１１２，８ −８１４，１１２，１ −７１４，９１３，１ −６１５，１１４，１ −５１４，８１３，７ −４１４，６１３，５ −３１４，７１３，５ −２１５，１１３，６ −１１３，０１３，２ ０１５，８１２，９ １１８，３１３，４ ２１８，４１４，１ ３１７，５１４，３ ４１９，０１３，４ ５２０，２１４，４ ６１９，７１４，５ ７１８，１１３，５ ８１９，８１４，１ ９１７，５１４，２ １０１９，２１５，４ １１１９，０１６，０ １２２０，０１７，０ １３１８，８１５，５ １４１７，８１５，６ １５１７，２１５，５ １６１８，３１６゜８ １７ １７．９ １６．９ １８ １６．８ １４．４ １９ １７．５ １６．４２０ １
６．５ １４．８２１ １５．６
１５．１２２ １６．０ １５．５２３
１６．９ １５．３２４ １６．７
１５．７２５ １７．３ １６．
０２６ １６．５ １５．８２７
１５．１ １５．１２８ １７．３
１６．６表１４ 投与前と投与後の血漿肉牛形ソマト
トロピンの濃度 （ｎｇ／ｍｌ） 日付 投与群 対照群 ０ １５．１７５１５．０９５ ３ ３５．６９９１５．１９５ ７２１゜６７８１５．５０１ １４ １５．１２３１４．５１６ ２１ １３．８５１１４．４６０ ２８ １４．４８３１２．３９３ ［００４３］実施例２３ 体重６０ｋｇ程度の去勢雄豚１５匹を実験に使用した。 これらのうち５匹の豚にはＬ−α−ホフファチジルコリ
ンと混合した豚ソマトトロピンを匹当り１． ２ｍｌの
量で２週間に１回ずつ３回投与しく投与群１）、他の５
匹の豚にはＬ−α−ホフファチジルコリンと混合した豚
ソマトトロピンを匹当り１． ８ｍｌを３週間に１回ず
つ２回付与しく投与群２）、残りの５匹の豚には何も投
与せずに対照群として使用した。豚の体重を投与前に測
定し、投与後毎週同じ時間に１回ずつ測定し、飼料効率
と背脂肪の厚さをも併せて測定した。豚の体重を１日平
均重さ増加量（ＡＤＧ、単位：ｋｇ／日）で表示し、こ
れと共に飼料効率（ＦＥ＝接種飼料量／重さ増加量、Ｆ
Ｅが低いほど良い飼料効率である）と背脂肪の厚さを次
の表１５に表した。 表１５ 豚ソマトトロピンの投与による１日平均増体量
および飼料効率の変化 対照群 投与群１ 投与群２ １週 ＡＤＧ １．００ ０．９７ １．０３Ｆ
Ｅ ３．０５ ３．２６ ２．７５２週
ＡＤＧ Ｏ，９６０，７７０，８７ＦＥ
３．３６ ４．４８ ４．１６３週 ＡＤＧ
１．０７ ０．９８ １．００ＦＥ ３．
１４ ２．９５ ３．４５４週 ＡＤＧ Ｏ，
９０１，０５１，０９ＦＥ ４．３５ ３．
５７ ３．１３５週 ＡＤＧ Ｏ，８４０，８１
１，０４ＦＥ ５．０５ ４．３７ ３．
６５６週 ＡＤＧ １．０９ １．１４ １．
０８ＦＥ ４．９１ ４．０４ ４．３０
１−６週 ＡＤＧ Ｏ，９８０，９６１，０２ＦＥ
３．６５ ３．５０ ３．４６ＦＥ増加
率 −４，１％ ５．２％１−６週背脂肪 厚さの減少％ ６％ ９％
［００４４］実施例２４ 実施例１９と同様に製造した豚ソマトトロピン組成物を
５匹の豚には匹当り０． ９ｍｌの量で３週間に１回ず
つ注射しく投与群１）、他の５匹の豚には匹当り１．８
ｍｌの量で３週間に１回ずつ注射しく投与群２）、また
他の５匹の豚には匹当り６ｍｌの量で毎日注射した（毎
日投与群）。 残りの５匹の豚には何も投与せずに対照群として使用し
た。体重は２週間に１回ずつ測定し、飼料効率と背脂肪
の厚さをも併せて測定した。豚の体重を１日平均重さ増
加量（ＡＤＧ、単位：ｋｇ／Ｂ）で表示し、これと共に
飼料効率（ＦＥ＝摂取摂取量料量７重加量、ＦＥが低い
ほど良い飼料効率である）と背脂肪の厚さを次の表１６
に表した。 表１６ 豚ソマトトロピン投与による１日平均増体量お
よび飼料効率の変化 対照群 毎日投与群 投与群１ 投与群２第１−２週
ＡＤＧ １．０１ ０．８５ １．０６ １．０
２ＦＥ ２．９２ ２．６０ ２．７９ ２
．７０第３−４週ＡＤＧ Ｏ，９１１，０４１，０
９１，０４ＦＥ ３．８７ ２．６８ ２．
９３ ３．０９第５−６週ＡＤＧ Ｏ，８８０，９
８０，６４１，０１ＦＥ ３．６７ ３．１
４ ５．０６ ３．６５１−６週ＡＤＧ ０．９３
０．９５ ０．９３ １．０２ＦＥ ３．４
５ ２．７９ ３．３７ ３．１６ＦＥ増加％
−１９，１％ ２．３％ ８．４％１−６週背脂肪 厚さの減少％ ３９％ ２４％
１１％
るポリペプチドではこの分野で公知である生物学的活性
を有するすべてのポリペプチドが使用され得、例えばソ
マトトロピンを含む各種の成長ホルモンやその他のホル
モン、インシュリン、インターフェロン、インターロイ
キンＩＩ、腫瘍壊死因子、コロニー刺激因子またはその
誘導体などがある。 ［０００９］その中でもソマトトロピンはその半減期が
非常に短いものと知られており、本発明の適用に特に好
ましい。その様なソマトトロピンの例として生形成長ホ
ルモン、豚成長ホルモン、山羊または綿羊成長ホルモン
、鮭成長ホルモンまたは魚介類の成長ホルモン等のよう
な各種の動物成長ホルモンやヒト成長ホルモンが挙げら
れる。上記ソマトトロピンは各種の動物、特に動物の脳
下垂体から抽出して得るかあるいは、遺伝工学的方法に
よりＤＮＡ−組換微生物から発現させて得られたもので
あっても良い。本発明においてポリペプチドは錯イオン
金属を結合させた形態や結合させない形態のうちいずれ
を使用しても良い。しかし、本発明では錯イオン金属や
その他の一般的にこの分野で水溶性流体に対するポリペ
プチドの溶解度を低めるため使用される物質などと化学
的に結合させて使用しなくても充分な程皮の持続性を表
わすので従来のように化学的に結合された状態で使用す
る必要がない。 ［００１０１一方、本発明による組成物に使用される酢
酸トコフェロール、トコフェロールおよびその誘導体は
ポリペプチドの放出を遅延することはもちろん、それ自
体が薬理活性を有しているので、非常に好ましい。例え
ば、鼠、二十日鼠、ギニアビッグ、豚、または家禽では
正常な生産過程を助、幼い綿羊、子牛または犬で筋肉発
達の異常を防止し、ひよこには脳軟化症、筋肉活動不規
則、筋痙縮、運動失調および強直性痛撃を予防すること
ができる。さらに、ミンク、豚または猫では脂肪組織炎
（ｓ ｔｅａｔ ｉｔ ｉｓ）の予防に役立つ。 ［００１１］本発明の組成物ではポリペプチドの放出を
さらに遅延するため、トコフェロール類とともに遅延補
助剤が使用される。その遅延補助剤は多く公知であり、
その中でもコリン誘導体、アルミニウムモノステアレー
ト、カルシウムステアレート、蜜蝋、カルナウバワック
スまたはパラフィンなどを使用する時、満足すべき効果
が得られる。これらの遅延補助剤は上述したものから１
種あるいは２種以上を選択して使用することができる。 本発明において特に好ましい遅延誘導体はコリン誘導体
であり、これらのコリン誘導体を使用すると生体内で有
効成分が消尽した後にも遅延補助剤が残留するので発生
する問題点を克服できるだけでなく、粘性の異常上昇を
避けられる利点がある。この様なコリン誘導体の例では
ホスファチジルコリン、リンホスホリピド、プラスマロ
ゲンまたはスピンゴマイエリン等が挙げられる。上記ホ
スファチジルコリンは大豆、牛の肝、牛の心臓または卵
黄から抽出されたものでありうる。 ［００１２］本発明による組成物において生物学的活性
を有するポリペプチドの含量は相当に広い範囲であり、
その下限は生体内で要求されるポリペプチドの最小要求
量であり、上限は組成物内で酢酸トコフェロール等がポ
リペプチドの全部を事実上官められる量であればかまわ
ないが、明白な目的がない限りポリペプチドを過多量に
使用する必要はない。なお、遅延補助剤とトコフェロー
ル類の合計を１００重量％とじた時、−殻内に遅延補助
剤を２ないし１０重量％、好ましくは２ないし７重量％
、さらに好ましくは２ないし５重量％含めて、その残り
はトコフェロール類を含めるのが良い。 ［００１３］以上にて説明した通りの本発明の組成物は
、先ずトコフェロール類と遅延補助剤を混合した後にこ
こに生物学的活性を有するポリペプチドを組合わせるか
あるいは生物学的活性を有するポリペプチドを補助遅延
剤に分散した後これをトコフェロール類に組合わせて製
造できる。この際、トコフェロール類と遅延補助剤は湯
煎処理し、湯煎加熱温度は１３０ないし１６０℃、好ま
しくは１４０ないし１５０℃とし、湯煎の時間は１０な
いし４０分、好ましくは２０ないし３０分にした方が良
い。 ［００１４］従来知られた組成物の場合、それ自体だけ
では持続効果が充分でなかったため投与された時のポリ
ペプチドの体内溶解皮を低めないと所望の目的を達成で
きず透析などの煩わしい工程を経て金属または遷移金属
などを結合させなければならないばかりでなく、過多な
初期放出の損失を補うためにポリペプチドを過多量投与
するしかなかったが、本発明による組成物は放出持続性
が優秀であることはもちろん、従来とは違って生物学的
活性を有するポリペプチドを金属軟または錯化合物の形
態でない化学的に非結合である状態で使用しても驚くべ
き持続効果を表わし、金属または遷移金属などの利用に
よる生体内の副作用の恐れがない。かえって本発明によ
る組成物の場合、トコフェロール類が生体に有用な薬理
作用を行い、異物質に対する生体拒否反応を予防するか
あるいは暖化する作用をも兼ねるようになる。何よりも
本発明の組成物は有効物質の初期放出が温和なので生体
内利用率が従来と比べて遥かに向上し、製造工程および
投与方法が非常に簡便であるという利点がある。 ［００１５］以下、本発明を次の実施例にもとづいてよ
り具体的に説明する。 実施例１ ５００ｍｌの容儀のビーカーに生形ソマトトロピン液（
濃度１８ｍｇ／ｍｌ、 （株）ラッキーの組換生形ソマ
トトロピン）３００ｍｌとタイプＩＶ Ｓの大豆から
抽出したＬα−ホスファチジルコリン（Ｌ−α−レシチ
ン）３ｇをホモミキサーで１０分間均等に混合した後、
４℃を維持するマイクロフルイダイザーに投入してこれ
を５分間作動した。この液を収集して凍結乾燥用の瓶に
投入しドライアイスとアセトンを利用して一７０℃で急
速凍結した後、１２時間以上凍結乾燥した。１６１．８
ｍｇの凍結乾燥した生形ソマトトロピン混合物（生形ソ
マトトロピン１００ｍｇ）をボールに入れ均等に擦った
後、酢酸トコフェロール１ｍｌにＬ−α−ホスファチジ
ルコリンと混合された生形ソマトトロピンを添加し、ホ
モミキサーで５分間分散させた。この様にして得られた
生形ソマトトロピン組成物を投与した時、体重の増加効
果について次のように実験した。実験に使用した動物で
は８０ないし１００ｇ程度の雌ＳＤラットを使用し、脳
下垂体除去手術（Ｈｙｐｏｐｈｙｓｅｃｔｏｍｙ）の一
方法である咽頭の周りを手術する方法（Ｐａｒａｐｈａ
ｒｙｎｇｅａｌ ｍｅｔｈｏｄ）を利用して脳下垂体
を除去した上、手術後２週間から１週間の間毎日同じ時
間に体重を測定し体重の変化がないフットを選別し、こ
れらを実験に使用した。体重の変化がないラット３匹に
上記にて製造された生形ソマトトロピン組成物を匹当り
０゜１ｍｌの量で腹側皮下に投与した。一方、体重の変
化がないラット３匹に酢酸トコフェロールのみを投与し
てこれを対照群にした。毎日同じ時間に体重を測定して
付与前３日間の体重と比較して増俸率（体重増加率）を
次の表１と［図１］に表した。 ［００１６］実施例２ 実施例１と同様の方法で製造するが、マイクロフルイダ
イザーだけを通過させなかったＬ−α−ホスファチジル
コリンと混合した生形ソマトトロピンを実施例１と同一
方法により調製した脳下垂体除去鼠３匹を使用して実験
し、その結果を次の表１と［図１］に表した。 表１ 脳下垂体除去鼠における生形ソマトトロピンによ
る体重増加率 （単位％） 投与日数 実施例１ 実施例２ 対照群１
８．１ ７．５ −０．２２ １８
．４ １３．５ −０．８３ ２１．４
１９．８ −１．２４ ２８．２ ２４．
２ −１．０５ ３０．３ ２８．６
０．０６ ３１．５ ２９．５
−１．６７ ３３．４ ３２．６
−０．４８ ３５．８ ３４．９ −
０．５９ ３８．０ ３５．１ −１
．２１０ ３８．０ ３７．３ −１
．５１１ ４１．９ ４０．３ −１
．２１２ ４３．６ ３９．１ −０
．５１３ ４４．３ ４０．８ −１
．３１４ ４７．２ ４０．７ −１
．２１５ ４７．２ ４０．５ −０
．３［００１７］実施例３ 豚ソマトトロピン液２００ｍ１（濃度２４■／ｍｌ）と
Ｌα−ホスファチジルコリン１．５８ｇを入れて実施例
１と同一方法にて製造し、酢酸トコフェロール１ｍｌに
Ｌα−ホスファチジルコリンを混合した豚ソマトトロピ
ンを入れて実施例１と同一方法にて実験し、その結果を
次の表２と［図２］に表した。 ［００１８］実施例４ 実施例３と同様な方法で製造されたＬ−α−ホスファチ
ジルコリンと混合した豚ソマトトロピンと酢酸トコフェ
ロール０． ５ｍｌ、胡麻オイル０． ５ｍｌを入れて
実施例１と同一方法により実験し、その結果を次の表２
と［図２］に表した。 ［００１９］実施例５ 実施例４と同様な方法によるが、但し胡麻オイルの代り
に同量の落花生オイルを使用して実施例１と同一方法に
より実施し、その結果を次の表２と［図２］に表した。 表２ 脳下垂体除去風における豚ソマトトロピンによる
体重増加率 （単位 ％） 投与日数 実施例３ 実施例４ 実施例５ 対
照群１ ６、 ６ ４． ６ ８． １
−０． ２２ １３．６ １２．５ １３．
４−０．８３ １９．７ １５．０ １２．４
−１．２４ ２２．６ １４．３ １３．９−
１．０５ ２５．５ １４．９ １５．４
０．０６ ２９．０ １５．７ １６．４−１
．６７ ３１．８ １６．１ １８．９−０．
４８ ３３．５ １６．３ １８．７−０．５
９ ３６．３ １７．５ ２１．１−１．２１
０ ３５．２ １７．０ ２３．０−１．５１
１ ３７．６ １９゜２ ２５．２−１．２１
２ ４１．１ １９．９ ２６．４−０．５１
３ ４３．７ ２１．２ ２７．５−１．３１
４ ４３．５ １８．５ ２８．２ １．２
１５ ４７．７ ２０．４ ３０．２ ０．
３１６ ４８．３ ２０．２ ３１．４ ０
．０１７ ５０．３ ２０．５ ３２．６−１
．２１８ ５０．９ ２２．６ ３２．４−０
．１１９ ５１．８ ２２．６ ３３．０−０
．４２０ ５３．０ ２２．７ ３４．０
０．０［００２０］実施例６ 酢酸トコフェロール１ｍｌにＬ−α−ホスファチジルコ
リン３３ｍｇを入れてホモミキサーで分散した後、ここ
に凍結乾燥させた１００■の豚ソマトトロピンを入れて
実施例１と同一方法にて実験し、その結果を次の表３と
［図３］に表した。 ［００２１１実施例７ 実施例３と同様な方法によるが、但し酢酸トコフェロー
ルの量を２ｍｌにして同じ濃度の豚ソマトトロピンを脳
下垂体に注射して実施例１と同じ方法にて実験し、その
結果を次の表３と［図３］に表した。 ［００２２］実施例８ 実施例３と同様な方法によるが、但し酢酸トコフェロー
ルの代りに同量の落花生オイルを使用して実施例１と同
じ方法にて実験し、その結果を次の表３と［図３］に表
した。 表３ 脳下垂体除去鼠における豚ソマトトロピンによる
体重増加率 （単位 ％） 投与日数 実施例６ 実施例７ 実施例８ 対
照群１ ６、 ６ ８． Ｏ４，７−０，
２２１４，１１４，８１０，１−０，８ ３１９，７２０，０１０，０−１，２ ４２３，４２２，１１０，４−１，０ ５２３，３２３，３１１，１０，０ ６２３，４２４，９１１，９−１，６ ７２３，１２６，２１２，９−０，４ ８２６，３２４，３６，９−０，５ ９２６，６２８，３１０，８−１，２ １０２５，９３１，５９，９−１，５ １１２６，７３２，３９，６−１，２ １２２７，２３３，５１１，８−０，５１３２８，７３
５，２１２，５−１，３１４３０，５３７，１１３，７
−１，２１５３０，４３５，６１２，１−０，３［００
２３］実施例９ 生形ソマトトロピン液４００ｍ１（濃度２３■／ｍｌ）
とＬα−ホスファチジルコリン３．１０２ｇを入れて実
施例１と同じ方法で製造し、酢酸トコフェロール１ｍｌ
にＬα−ホスファチジルと混合された１３．３ｍｇの生
形ソマトトロピン混合物（生形ソマトトロピン１０■）
を入れ、実施例１と同じ方法で実験し、その結果を次の
表４と［図４］に表した。 ［００２４］実施例１０ 実施例９と同様な方法によりＬ−α−ホスファチジルコ
リンと混合された６６．５■の生形ソマトトロピン混合
物（生形ソマトトロピン５０■）を使用して実施例１と
同じ方法で実験し、その結果を次の表４と［図４］に表
した。 ［００２５］実施例１１ Ｌ−α−ホスファチジルコリンと混合しない凍結乾燥さ
れた１００■の生形ソマトトロピンを酢酸トコフェロー
ル１ｍｌと混合し、実施例１と同じ方法で実験し、その
結果を表４と［図４］に表した。 ［００２６］実施例１２ 酢酸トコフェロール１ｍｌと２０ｍｇのアルミニウムモ
ノステアレートを入れて１５０℃に加熱して５分間攪拌
加熱した上、常温にて十分に冷やし、ここにＬ−α−ホ
スファチジルコリンと混合しない１００■の凍結乾燥生
形ソマトトロピンを入れ、実施例１と同じ方法で実験し
、その結果を次の表４と［図４］に表した。 ［００２７］実施例１３ 実施例１２と同様に生形ソマトトロピンに錯イオン金属
である亜鉛が結合した生形ソマトトロピンを入れ、実施
例１と同じ方法にて実験し、その結果を次の表４と［図
４］に表した。 表４ 脳下垂体除去鼠における生形ソマトトロピンによ
る体重増加率 （単位 ％） 投与日数 実施例 実施例 実施例 実施例 実
施例 対照群９ １０ １１ １２
１３１ ８．７ ８．８ ７．３ ７．
９ ５．５−０．２２ １２．２ １３．９ ８
．８ １５．５ ９．９ −０．８３ １３．９
１６．１ ９．６ ２２．４ １２．４ −１．２４
１５．２ ２０．９ ８．９ ２４．０ １５．
５ −１．０５ １６．３ ２４．２ １０．５ ２
８．０ １７．２ ０．０６ １７．２ ２７．８
１０．８ ３０．０ １９．０ −１．６７ １６
．９ ２５．５ １２．６ ３１．７ ２２．５ −０
．４８ １８．１ ２９．０ １４．１ ３１．３
２２．８ −０．５９ １８．９ ３０．６ １４．
１ ３２．２ ２３．８ −１．２１０ １７、
１ ３０．２ １４．８ ３４． １ ２５．９ −
１．５１１ １９．２ ３３．５ １７．２ ３
６． １ ２９．３ −１．２１２ １９．６ ３
４．４ １６．４ ３６．７ ２８．２ −０． ５１
３ ２０．２ ３５．２ １８．２ ４３．６
２９．４ −１．３１４ ２０．４ ３２．９
１９．２ ４６．５ ３１．３ −１．２１５ ２
１．９ ３６． １ １８． １ ４５．４ ２９．
１ −０．３［００２８］実施例１４ 酢酸トコフェロール１ｍｌに２０ｍｇのポリエチレング
リコール−７５ラノリン（ＰＥＧ−７５Ｌａｎｏｌｉｎ
または５ｏｌａｎ Ｅ）をホモミキサーで分散した後
、亜鉛が結合した１００ｍｇの生形ソマトトロピンを入
れ、実施例１と同じ方法にて実験し、その結果を次の表
５と［図５］に表した。 ［００２９］実施例１５ 実施例１４と同様であるが、但しポリエチレングリコー
ル−７５ラノリンの代りに３３ｍｇのアラセル１６５（
グリセリルモノステアレートとＰＥＧ−１００ステアレ
ートが結合した物質）を使用して実施例１と同様な方法
にて実験し、その結果を次の表５と［図５］に表した。 ［００３０１実施例１６ 実施例１２と同様であるが、但し凍結乾燥した生形ソマ
トトロピンの代りにスプレー乾燥した生形ソマトトロピ
ンを使用して実施例１と同様な方法にて実験し、その結
果を次の表５と［図５］に表した。 ［００３１］実施例１７ 実施例１２と同様であるが、但しアルミニウムモノステ
アレートを１０■に減らし、その代り１０ｍｇのコレス
テロールを入れ、実施例１と同じ方法にて実験し、その
結果を次の表５と［図５］に表した。 表５ 脳下垂体除去鼠における生形ソマトトロピンによ
る体重増加率 （単位 ％） 投与日数 実施例１４ 実施例１５ 実施例１６ 実施
例１７ 対照群１ ６、 ９ ４． １
８． ５ ６． ７ −０． ２２ １０．９
１０．３ １１．７ ９．９−０゜８３ １
３．７ １３．３ １６．１ １０．２−１．２
４ １６．７ １６．６ １６．１ １１．０
−１．０５ １７．２ １８．１ １６．３
１２．５ ０．０６ １９．２ １９．６ １
６．９ １１．８−１．６７ ２１．６ ２０．
３ １８．７ １２．５−０．４８ ２３．４
１９．１ ２０．０ １２．５−０．５９ ２
２．６ ２０．４ １９．６ １２．３−１．２
１０ ２２．８ ２０．５ ２１．２ １３．
２−１．５１１ ２３．９ ２０．６ ２１．０
１２．４−１．２１２ ２３．１ ２１．６
２０．６ １５．１−０．５１３ ２３．９
２１．５ １９．９ １１．９−１゜３１４ ２
４．６ ２１．６ ２２．０ １４．１−１．２
１５ ２４．０ １９．８ ２１．９ １１．
３−０．３［００３２］実施例１８ 実施例１２と同様に、凍結乾燥した生形ソマトトロピン
と亜鉛結合した生形ソマトトロピンを入れ、実施例１と
同一方法にて実験し、その結果を次の表６と［図６］に
表した。 ［００３３］実施例１９ 実施例１２と同様であるが、生形ソマトトロピンの代り
に亜鉛が結合した豚ソマトトロピンを使用し、実施例１
と同一方法にて実験し、その結果の次の表６と［図６］
に表した。 表６ 脳下垂体除去鼠における生形ソマトトロピンおよ
び豚ソマトトロピンによる体重増加率 （単位 ％） 投与日数 実施例１８ 実施例１９ 対照群１
８．０ ５．９ −０．２２ １３
．６ １０．４ −０．８３ １７．９
１２．３ −１．２４ １４．８ １４．
４ −１．０５ １３．５ １４．７
０．０６ １７．３ １４．１
−１．６７ ２１．０ １４．６
−０．４８ ２２．８ １７．３ −
０．５９ １６．７ １６．９ −１
．２１０ ２４．６ １４．３ −１
．５１１ ２６．４ １７．６ −１
．２１２ ２８．２ １７．１ −０
．５１３ ２７．９ １８．４ −１
．３１４ ３０．５ １５．３ −１
．２１５ ３０．５ １７．５ −０
．３［００３４］実施例２０ ５０ｍ１容量のビーカーに酢酸トコフェロール３０ｍ１
およびアルミニウムモノステアレー）６００ｍｌを投入
し、別途に温度調節が可能なホットプレートの上で５０
０ｍ１容量のビーカーに酢酸トコフェロール１５０ｍ１
を投入したものを１５０℃の温度に加熱した後、ここに
上記反応混合物を添加した上、マグネチックバーを使用
して混合しながら湯煎加熱した。２０分程度加熱してア
ルミニウムモノステアレートは充分に溶解するが酢酸ト
コフェロールはこげないようにし、次いでビーカーを取
り出して真空状態で冷却しゼリーを形成したのち、生形
ソマトトロピン（（株）ラッキーの組換生形ソマトトロ
ピン）３ｇを添加して約４０℃程度に温度を下げた後、
マグネチックバーを使用して２時間混合した。それから
、１５ゲージニードル付きの２０ｍ１ １回用の注射器
に充分に混合した上記組成物１０ｍ１（生形ソマトトロ
ピ２１頭当りＩｇ）を入れ詰めた。実験に使用した乳牛
は２回目の授乳期第２期の３か月の期間にあるホルスタ
イン乳牛であり、乳牛数は２匹で対照群には何にも注射
しなかった２匹の乳牛を使用した。充填した組成物を乳
牛の肩胛骨の上方皮下に注射した後、注射後毎日の産乳
量を測定し、１日産乳量を累積まとめて次の表７に示し
、時間の推移に従う産乳量の増加率のグラフを［図７］
に示した。単位は１日当り眩で表示した。 表７１日産乳量の累積平均（ｋｇ／Ｂ）日 付 投与
量 対照群 投与群／対照群の増加率（％）−
５〜０ ２４．５ ２７．９ −〜
７ ２７．６ ２７．５ １４．３〜１
４ ２７．８ ２７．７ １３．９〜２
１ ２７．３ ２７．８ １１．７〜３
０ ２６．６ ２７．８ ８．７［０
０３５］ 投与群／対照群の増加率（％）＝［投与鮮度乳量の増加
率（％）／対照群産乳量の増加率（％）］Ｘ１００［０
０３６］血液内に存在するソマトトロピンを検出するた
め毎日一定時間に尻尾の静脈から真空チューブ注射器を
使用して血液を採取し、遠心分離した後、血漿を取った
上、放射線免疫分析法（Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓ
ａｙ）で分析した結果を次の表８に示した。時間の推移
に従う血漿ＢＳＴ濃度の変化を［図８］に示した。 ［００３７］ 表８ 生形ソマトトロピンの平均血漿濃度（ｎｇ／ｍｌ
）グループ 日付 投与群 対照群 −２９，２１６，９ ０１８７，７４８，２ １７５，１２２，７ ３６１，３１３，３ ５５８，４４１，３ ７６０，０３１，３ ９６９，３２８，６ １１５４，９２１，１ １３３３，４１１，３ １５２４，９１６，０ １７２４，４１３，３ １９４３，５２８，９ ２１ ５５．７ ２９．３２
３ ５４．２ ２２．２３０
４１．８ ２３．７［００
３８］本発明による組成物を投与した成長ホルモンが牛
乳内に遊離する量を検出するため搾乳のとき牛乳を１０
ｍ１程度採取し放射線免疫分析法により分析した結果を
次の表９に示し、時間の推移に従う牛乳内ＢＳＴの濃度
を［図９］に示した。 表９ 生形ソマトトロピンの平均牛乳内濃度（ｎｇ／ｍ
ｌ）グループ 日付 投与群 対照群 ５ ０．３３１０ ０．３２０４ １２ ０．３１８４ ０．３５３７ ２０ ０．３５５７ ０．２６７７ ２８ ０．３２３７ ０．３８１２ ３５ ０．３０９８ ０．３０４３ ［００３９］実施例２１ 上記実施例２０と同様に製造した組成物を乳牛当り５ｍ
１（生形ソマトトロピン：頭当り５００ｍｇ）ずつ上記
実施例２０と同じく投与した。実験に使用した乳牛数は
投与群５匹、対照群４匹であり、実施例２０と同じ分析
法により測定し、その結果を次の表１０、表１１および
表１２にそれぞれ示し、時間の推移に従う産乳量の増加
率、血漿ＢＳＴ濃度および牛乳内ＢＳＴ濃度を［図１０
］、［図１１］および［図１２］にそれぞれ表わした。 表１０１日産乳量の累積平均（ｋｇ／日）グループ 日 付 投与量 対照群 投与群／対照
群の増加率（％）−５〜０ ２５．７ ２５．７
−〜７ ２７．５ ２４．４
１２．２〜１４ ２７．９ ２５．０
１１．４〜２１ ２７．１ ２４．９
８．５〜２８ ２６．６ ２４．５
８．９［００４０］ 投与群／対照群の増加率（％）＝［投与鮮度乳量の増加
率（％）／対照群産乳量の増加率（％）］ｘ１００［０
０４１］ 表１１ 生形ソマトトロピンの平均血漿濃度（ｎｇ／ｍ
ｌ）グループ 日付 投与群 対照群 −１１５，０１０，１ １７９，５１７，０ ５３８，４１２，３ ８４０、３９，２ １２２４，９１４，２ １５１８，７１３，３ １９１４，５８，４ ２２２０，４１１，２ ２７１７，９１５，５ ２９２１，２１４，２ 表１２ 生形ソマトトロピンの平均牛乳内濃度（ｎｇ／ｍｌ）グ
ループ 日付 投与群 対照群 ６ ０．３２９６ ０．３０４３ １６ ０．３４５０ ０．３９３１ ２１ ０．３７００ ０．４１３８ ２８ ０．３８１９ ０．３４８３ ［００４２］実施例２２ 授乳中期にあるホルスタイン乳牛３匹を利用して実験し
た。実施例１と同様な方法によって製造したＬ−αホフ
ファチジルコリンを混合した生形ソマトトロピン組成物
７． ５ｍｌを投与し、対照群としては３匹の乳牛に酢
酸トコフェロールを同量注射した。注射前２週間の間６
匹の乳牛の産乳景を毎日測定し、注射後と比較するのに
指標とした。充填した組成物を乳牛の肩胛骨の上方皮下
に注射した後、注射後毎日産乳量を測定し、１日産乳量
をまとめて表１３に示し、時間の推移による産乳景の増
加率のグラフを［図１３］に表した。単位ｋｇ／日と表
示した。また、注射前と注射後の３Ｂ、 ７Ｂ、 １
４Ｂ、 ２１［Ｅｌ、２８日口の乳牛の微静脈から採血
して放射線免疫分析法（Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓ
ａｙ）で血清肉牛形ソマトトロピンの濃度を測定し、次
の表１４に示し、表１４に対する時間の推移によるグラ
フを［図１４］に示した。 表１３ 投与前と投与後の１日産乳量 （ｋｇ／日） 日付投与群 対照群 −１４１６，６１４，９ −１３１５，８１４，９ −１２１４，９１１，６ −１１１６，６１５，３ −１０１５，８１３，５ −９１５，１１２，８ −８１４，１１２，１ −７１４，９１３，１ −６１５，１１４，１ −５１４，８１３，７ −４１４，６１３，５ −３１４，７１３，５ −２１５，１１３，６ −１１３，０１３，２ ０１５，８１２，９ １１８，３１３，４ ２１８，４１４，１ ３１７，５１４，３ ４１９，０１３，４ ５２０，２１４，４ ６１９，７１４，５ ７１８，１１３，５ ８１９，８１４，１ ９１７，５１４，２ １０１９，２１５，４ １１１９，０１６，０ １２２０，０１７，０ １３１８，８１５，５ １４１７，８１５，６ １５１７，２１５，５ １６１８，３１６゜８ １７ １７．９ １６．９ １８ １６．８ １４．４ １９ １７．５ １６．４２０ １
６．５ １４．８２１ １５．６
１５．１２２ １６．０ １５．５２３
１６．９ １５．３２４ １６．７
１５．７２５ １７．３ １６．
０２６ １６．５ １５．８２７
１５．１ １５．１２８ １７．３
１６．６表１４ 投与前と投与後の血漿肉牛形ソマト
トロピンの濃度 （ｎｇ／ｍｌ） 日付 投与群 対照群 ０ １５．１７５１５．０９５ ３ ３５．６９９１５．１９５ ７２１゜６７８１５．５０１ １４ １５．１２３１４．５１６ ２１ １３．８５１１４．４６０ ２８ １４．４８３１２．３９３ ［００４３］実施例２３ 体重６０ｋｇ程度の去勢雄豚１５匹を実験に使用した。 これらのうち５匹の豚にはＬ−α−ホフファチジルコリ
ンと混合した豚ソマトトロピンを匹当り１． ２ｍｌの
量で２週間に１回ずつ３回投与しく投与群１）、他の５
匹の豚にはＬ−α−ホフファチジルコリンと混合した豚
ソマトトロピンを匹当り１． ８ｍｌを３週間に１回ず
つ２回付与しく投与群２）、残りの５匹の豚には何も投
与せずに対照群として使用した。豚の体重を投与前に測
定し、投与後毎週同じ時間に１回ずつ測定し、飼料効率
と背脂肪の厚さをも併せて測定した。豚の体重を１日平
均重さ増加量（ＡＤＧ、単位：ｋｇ／日）で表示し、こ
れと共に飼料効率（ＦＥ＝接種飼料量／重さ増加量、Ｆ
Ｅが低いほど良い飼料効率である）と背脂肪の厚さを次
の表１５に表した。 表１５ 豚ソマトトロピンの投与による１日平均増体量
および飼料効率の変化 対照群 投与群１ 投与群２ １週 ＡＤＧ １．００ ０．９７ １．０３Ｆ
Ｅ ３．０５ ３．２６ ２．７５２週
ＡＤＧ Ｏ，９６０，７７０，８７ＦＥ
３．３６ ４．４８ ４．１６３週 ＡＤＧ
１．０７ ０．９８ １．００ＦＥ ３．
１４ ２．９５ ３．４５４週 ＡＤＧ Ｏ，
９０１，０５１，０９ＦＥ ４．３５ ３．
５７ ３．１３５週 ＡＤＧ Ｏ，８４０，８１
１，０４ＦＥ ５．０５ ４．３７ ３．
６５６週 ＡＤＧ １．０９ １．１４ １．
０８ＦＥ ４．９１ ４．０４ ４．３０
１−６週 ＡＤＧ Ｏ，９８０，９６１，０２ＦＥ
３．６５ ３．５０ ３．４６ＦＥ増加
率 −４，１％ ５．２％１−６週背脂肪 厚さの減少％ ６％ ９％
［００４４］実施例２４ 実施例１９と同様に製造した豚ソマトトロピン組成物を
５匹の豚には匹当り０． ９ｍｌの量で３週間に１回ず
つ注射しく投与群１）、他の５匹の豚には匹当り１．８
ｍｌの量で３週間に１回ずつ注射しく投与群２）、また
他の５匹の豚には匹当り６ｍｌの量で毎日注射した（毎
日投与群）。 残りの５匹の豚には何も投与せずに対照群として使用し
た。体重は２週間に１回ずつ測定し、飼料効率と背脂肪
の厚さをも併せて測定した。豚の体重を１日平均重さ増
加量（ＡＤＧ、単位：ｋｇ／Ｂ）で表示し、これと共に
飼料効率（ＦＥ＝摂取摂取量料量７重加量、ＦＥが低い
ほど良い飼料効率である）と背脂肪の厚さを次の表１６
に表した。 表１６ 豚ソマトトロピン投与による１日平均増体量お
よび飼料効率の変化 対照群 毎日投与群 投与群１ 投与群２第１−２週
ＡＤＧ １．０１ ０．８５ １．０６ １．０
２ＦＥ ２．９２ ２．６０ ２．７９ ２
．７０第３−４週ＡＤＧ Ｏ，９１１，０４１，０
９１，０４ＦＥ ３．８７ ２．６８ ２．
９３ ３．０９第５−６週ＡＤＧ Ｏ，８８０，９
８０，６４１，０１ＦＥ ３．６７ ３．１
４ ５．０６ ３．６５１−６週ＡＤＧ ０．９３
０．９５ ０．９３ １．０２ＦＥ ３．４
５ ２．７９ ３．３７ ３．１６ＦＥ増加％
−１９，１％ ２．３％ ８．４％１−６週背脂肪 厚さの減少％ ３９％ ２４％
１１％
【図１】 本発明による生形ソマトトロピン組成物を投
与した時、体重増加の効果を表したグラフ、
与した時、体重増加の効果を表したグラフ、
【図２】
本発明による豚ソマトトロピン組成物を投与した時、体
重増加の効果を表したグラフ、
本発明による豚ソマトトロピン組成物を投与した時、体
重増加の効果を表したグラフ、
【図３】 本発明による
豚ソマトトロピン組成物を投与した時、体重増加の効果
を表したグラフ、
豚ソマトトロピン組成物を投与した時、体重増加の効果
を表したグラフ、
【図４】 本発明による生形ソマトト
ロピン組成物を投与した時、体重増加の効果を表したグ
ラフ、
ロピン組成物を投与した時、体重増加の効果を表したグ
ラフ、
【図５】 本発明による生形ソマトトロピン組成
物を投与した時、体重増加の効果を表したグラフ、
物を投与した時、体重増加の効果を表したグラフ、
【図
６】 本発明による生形ソマトトロピン組成物と豚ソマ
トトロピン組成物を投与した時、体重増加の効果を表し
たグラフ、
６】 本発明による生形ソマトトロピン組成物と豚ソマ
トトロピン組成物を投与した時、体重増加の効果を表し
たグラフ、
【図７】 本発明による生形ソマトトロピン組成物を投
与した時、産乳量に及ぶ効果を表したグラフ、
与した時、産乳量に及ぶ効果を表したグラフ、
【図８】
本発明による生形ソマトトロピン組成物を投与した時
、血漿内のソマトトロピン濃度を表したグラフ、
本発明による生形ソマトトロピン組成物を投与した時
、血漿内のソマトトロピン濃度を表したグラフ、
【図９】 本発明による生形ソマトトロピン組成物を投
与した時、牛乳内のソマトトロピン濃度を表したグラフ
、
与した時、牛乳内のソマトトロピン濃度を表したグラフ
、
【図１０】 本発明による生形ソマトトロピン組成物
を投与した時、産乳量に及ぶ効果を表したグラフ、
を投与した時、産乳量に及ぶ効果を表したグラフ、
【図
１１】 本発明による生形ソマトトロピン組成物を投
与した時、血漿内のソマトトロピン濃度を表したグラフ
、
１１】 本発明による生形ソマトトロピン組成物を投
与した時、血漿内のソマトトロピン濃度を表したグラフ
、
【図１２】 本発明による生形ソマトトロピン組成物を
投与した時、牛乳内のソマトトロピン濃度を表したグラ
フ、
投与した時、牛乳内のソマトトロピン濃度を表したグラ
フ、
【図１３】 本発明によるソマトトロピン組成物を投
与した時、産乳量に及ぶ効果を表したグラフ、
与した時、産乳量に及ぶ効果を表したグラフ、
【図１４
】 本発明によるソマトトロピン組成物を投与した時
、血漿内のソマトトロピン濃度の変化を表したグラフで
ある。
】 本発明によるソマトトロピン組成物を投与した時
、血漿内のソマトトロピン濃度の変化を表したグラフで
ある。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１３】
【図１４】
【図１１】
【図１２】
Claims (17)
- 【請求項１】 生物学的活性を有するポリペプチドを酢
酸トコフェロール、トコフェロールおよびその誘導体の
うちから選択された１種または２種以上のトコフェロー
ル類および遅延補助剤と組合せて成る組成物。 - 【請求項２】 上記ポリペプチドが、ソマトトロピン、
インシュリン、インターフェロン、インターロイキン■
■、腫瘍壊死因子、コロニー刺激因子またはその誘導体
である、請求項１記載の組成物。 - 【請求項３】 上記ポリペプチドが、ソマトトロピンで
ある、請求項１または２記載の組成物。 - 【請求項４】 上記ソマトトロピンが、ヒト成長ホルモ
ンである、請求項３記載の組成物。 - 【請求項５】 上記ソマトトロピンが、動物成長ホルモ
ンである、請求項３記載の組成物。 - 【請求項６】 上記動物成長ホルモンが、生形成長ホル
モン、豚成長ホルモン、山羊または綿羊成長ホルモン、
鮭成長ホルモンまたは魚介類の成長ホルモンである、請
求項５記載の組成物。 - 【請求項７】 上記動物成長ホルモンが、生形ソマトト
ロピンまたは豚ソマトトロピンである、請求項６記載の
組成物。 - 【請求項８】 上記ソマトトロピンが、動物の脳下垂体
から抽出されたものである、請求項１−７のいずれか１
項記載の組成物。 - 【請求項９】 上記ソマトトロピンが、ＤＮＡ−組換微
生物により発現されたものである、請求項１−７のいず
れか１項記載の組成物。 - 【請求項１０】 上記ポリペプチドが、錯イオン金属
を結合しないものである、請求項１−９のいずれか１項
記載の組成物。 - 【請求項１１】 上記ポリペプチドが、錯イオン金属
を結合させたものである、請求項１−９のいずれか１項
記載の組成物。 - 【請求項１２】 上記遅延補助剤が、コリン誘導体、
アルミニウムモノステアレート、カルシウムステアレー
ト、蜜蝋、カルナウバワックスおよびパラフィンのうち
から１種または２種以上を選択して使用するものである
、請求項１−１１のいずれか１項記載の組成物。 - 【請求項１３】 上記遅延補助剤が、１種または２種
以上のコリン誘導体を使用するものである、請求項１−
１１のいずれか１項記載の組成物。 - 【請求項１４】 上記コリン誘導体が、ホスファチジ
ルコリン、リソホスホリピド、プラスマロゲンまたはス
ピンゴマイエリンである、請求項１３項記載の組成物。 - 【請求項１５】 上記ホスファチジルコリンが、大豆
、牛の肝、牛の心臓または卵黄から抽出されたものであ
る、請求項１４項記載の組成物。 - 【請求項１６】 上記遅延補助剤と上記トコフェロー
ルの合計を１００重量％とじた時、上記遅延補助剤を２
ないし１０重量％含有し、上記トコフェロール類を９０
ないし９０重量％含有するものである、請求項１−１５
のいずれか１項記載の組成物。 - 【請求項１７】 上記遅延補助剤と上記トコフェロー
ルの合計を１００重量％とじた時、上記遅延補助剤を２
ないし５重量％含有し、上記トコフェロール類を９５な
いし９８重電電含有するものである、請求項１６記載の
組成物。
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-
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