JPH04279596A - 新規オリゴ糖およびその製造法 - Google Patents
新規オリゴ糖およびその製造法Info
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- JPH04279596A JPH04279596A JP6381791A JP6381791A JPH04279596A JP H04279596 A JPH04279596 A JP H04279596A JP 6381791 A JP6381791 A JP 6381791A JP 6381791 A JP6381791 A JP 6381791A JP H04279596 A JPH04279596 A JP H04279596A
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- maltooligosaccharide
- galactosidase
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- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は新規オリゴ糖およびその
製造法に関し、詳しくはマルトオリゴ糖の非還元末端の
グルコシル残基にβ−１，４結合でガラクトシル基が結
合した新規オリゴ糖およびその製造法に関する。
製造法に関し、詳しくはマルトオリゴ糖の非還元末端の
グルコシル残基にβ−１，４結合でガラクトシル基が結
合した新規オリゴ糖およびその製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術と発明が解決しようとする課題】マルトオ
リゴ糖、特にマルトテトラオース，マルトペンタオース
，マルトヘキサオースおよびマルトヘプタオースは、血
中のα−アミラーゼ活性測定用基質として利用されてい
る。しかし、この基質は試薬中に含まれているα−グル
コシダーゼにより、非常に微弱ではあるが分解されるた
め、基質とα−グルコシダーゼを混合させた基質液は長
期間安定に保つことはできない。そのため、α−アミラ
ーゼ活性を測定するたびごとに基質液を調製する必要が
ある。最近、α−グルコシダーゼによる分解を抑える目
的でマルトペンタオースの非還元末端のグルコシル残基
を化学的に修飾した基質が一部使用されている。また、
糖質の細胞認識特性に着目してドラッグ・デリバリー・
システム（ＤＤＳ）に糖質を利用しようとする試みがな
されている。
リゴ糖、特にマルトテトラオース，マルトペンタオース
，マルトヘキサオースおよびマルトヘプタオースは、血
中のα−アミラーゼ活性測定用基質として利用されてい
る。しかし、この基質は試薬中に含まれているα−グル
コシダーゼにより、非常に微弱ではあるが分解されるた
め、基質とα−グルコシダーゼを混合させた基質液は長
期間安定に保つことはできない。そのため、α−アミラ
ーゼ活性を測定するたびごとに基質液を調製する必要が
ある。最近、α−グルコシダーゼによる分解を抑える目
的でマルトペンタオースの非還元末端のグルコシル残基
を化学的に修飾した基質が一部使用されている。また、
糖質の細胞認識特性に着目してドラッグ・デリバリー・
システム（ＤＤＳ）に糖質を利用しようとする試みがな
されている。
【０００３】このような状況下、本発明はα−グルコシ
ダーゼにより全く分解されない血中α−アミラーゼ活性
測定用基質を酵素の糖転移作用を利用して合成すること
並びに生体内組織、特に肝臓に強い親和性を示すことが
知られているガラクトシル基を含む新規なオリゴ糖を酵
素の糖転移作用を利用して合成することを目的としてい
る。
ダーゼにより全く分解されない血中α−アミラーゼ活性
測定用基質を酵素の糖転移作用を利用して合成すること
並びに生体内組織、特に肝臓に強い親和性を示すことが
知られているガラクトシル基を含む新規なオリゴ糖を酵
素の糖転移作用を利用して合成することを目的としてい
る。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、β−ガラクトシダ
ーゼをマルトオリゴ糖〔マルトース（以下、Ｇ２ と略
記することがある。） ，マルトトリオース（以下、Ｇ
３ と略記することがある。） ，マルトテトラオース
（以下、Ｇ４ と略記することがある。） ，マルトペ
ンタオース（以下、Ｇ５ と略記することがある。）
，マルトヘキサオース（以下、Ｇ６ と略記することが
ある。） またはマルトヘプタオース（以下、Ｇ７ と
略記することがある。） 〕の存在下ラクトースに作用
させると、ラクトースが分解すると同時に、そのガラク
トシル基をマルトオリゴ糖の非還元末端側のグルコシル
基Ｃ４位水酸基に転移させ、ガラクトシル−マルトオリ
ゴ糖（例えばガラクトシル−マルトース）を生成するこ
とを見出し、本発明を完成するに至ったのである。
を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、β−ガラクトシダ
ーゼをマルトオリゴ糖〔マルトース（以下、Ｇ２ と略
記することがある。） ，マルトトリオース（以下、Ｇ
３ と略記することがある。） ，マルトテトラオース
（以下、Ｇ４ と略記することがある。） ，マルトペ
ンタオース（以下、Ｇ５ と略記することがある。）
，マルトヘキサオース（以下、Ｇ６ と略記することが
ある。） またはマルトヘプタオース（以下、Ｇ７ と
略記することがある。） 〕の存在下ラクトースに作用
させると、ラクトースが分解すると同時に、そのガラク
トシル基をマルトオリゴ糖の非還元末端側のグルコシル
基Ｃ４位水酸基に転移させ、ガラクトシル−マルトオリ
ゴ糖（例えばガラクトシル−マルトース）を生成するこ
とを見出し、本発明を完成するに至ったのである。
【０００５】すなわち、本発明は下記の構造式で表され
る新規オリゴ糖
る新規オリゴ糖
【０００６】
【化２】
【０００７】（式中、Ｇａｌ はガラクトシル基、Ｇｌ
ｃ はグルコシル基を示し、ｎは０〜５の整数である。 ）並びにマルトオリゴ糖とラクトースの混合溶液にβ−
ガラクトシダーゼを作用させることを特徴とする上記オ
リゴ糖の製造法を提供するものである。
ｃ はグルコシル基を示し、ｎは０〜５の整数である。 ）並びにマルトオリゴ糖とラクトースの混合溶液にβ−
ガラクトシダーゼを作用させることを特徴とする上記オ
リゴ糖の製造法を提供するものである。
【０００８】上記したように、本発明のオリゴ糖はＧ２
，Ｇ３ ，Ｇ４ ，Ｇ５ ，Ｇ６ またはＧ７ の非
還元末端側のグルコシル基にβ−１，４結合でガラクト
シル基が結合した構造の新規なオリゴ糖である。具体的
には、図１の（１）〜（６）に示した構造式で表される
ものである。
，Ｇ３ ，Ｇ４ ，Ｇ５ ，Ｇ６ またはＧ７ の非
還元末端側のグルコシル基にβ−１，４結合でガラクト
シル基が結合した構造の新規なオリゴ糖である。具体的
には、図１の（１）〜（６）に示した構造式で表される
ものである。
【０００９】本発明の新規オリゴ糖は、マルトオリゴ糖
とラクトースの混合溶液にβ−ガラクトシダーゼを作用
させることにより合成される。マルトオリゴ糖としては
市販の精製品のほか、澱粉を部分加水分解または酵素分
解して得た反応液より種々のクロマトグラフィー等によ
り単離，精製したものなどが任意に使用できる。
とラクトースの混合溶液にβ−ガラクトシダーゼを作用
させることにより合成される。マルトオリゴ糖としては
市販の精製品のほか、澱粉を部分加水分解または酵素分
解して得た反応液より種々のクロマトグラフィー等によ
り単離，精製したものなどが任意に使用できる。
【００１０】また、β−ガラクトシダーゼとしてはマル
トオリゴ糖とラクトースの混合溶液に作用させたとき、
ラクトースを分解してそのガラクトシル基をマルトオリ
ゴ糖の非還元末端側のグルコシル基にβ−１，４結合で
転移させ、β−ガラクトシル−マルトオリゴ糖を合成し
得る酵素であればよく、微生物起源のもの、特にバチル
ス・サーキュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｉｒｃｕｌ
ａｎｓ）起源の酵素（例えば商品名、Ｂｉｏｌａｃｔａ
、大和化成（株）製）が好適である。
トオリゴ糖とラクトースの混合溶液に作用させたとき、
ラクトースを分解してそのガラクトシル基をマルトオリ
ゴ糖の非還元末端側のグルコシル基にβ−１，４結合で
転移させ、β−ガラクトシル−マルトオリゴ糖を合成し
得る酵素であればよく、微生物起源のもの、特にバチル
ス・サーキュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｉｒｃｕｌ
ａｎｓ）起源の酵素（例えば商品名、Ｂｉｏｌａｃｔａ
、大和化成（株）製）が好適である。
【００１１】マルトオリゴ糖と糖供与体であるラクトー
スの混合溶液は、通常水溶液または水懸濁液として用い
られ、マルトオリゴ糖濃度は１〜４０％（ｗ／ｗ） 、
好ましくは２０〜４０％（ｗ／ｗ） が、ラクトース濃
度は１〜５０％（ｗ／ｗ） 、好ましくは２０〜５０％
（ｗ／ｗ） が適当である。なお、マルトオリゴ糖に対
するラクトースの比率は０．１〜１０倍、好ましくは１
〜５倍の範囲とすべきである。
スの混合溶液は、通常水溶液または水懸濁液として用い
られ、マルトオリゴ糖濃度は１〜４０％（ｗ／ｗ） 、
好ましくは２０〜４０％（ｗ／ｗ） が、ラクトース濃
度は１〜５０％（ｗ／ｗ） 、好ましくは２０〜５０％
（ｗ／ｗ） が適当である。なお、マルトオリゴ糖に対
するラクトースの比率は０．１〜１０倍、好ましくは１
〜５倍の範囲とすべきである。
【００１２】マルトオリゴ糖とラクトースの混合溶液に
β−ガラクトシダーゼを作用させるときの反応条件につ
いては、ｐＨ４〜８、好ましくは５〜７、温度３０〜６
０℃、好ましくは４０〜６０℃が適当である。また、反
応時間は使用する酵素の活性量と密接な関係にあり、通
常は５〜１２０時間、好ましくは５〜２４時間で反応が
終了する酵素活性量を選定すべきである。
β−ガラクトシダーゼを作用させるときの反応条件につ
いては、ｐＨ４〜８、好ましくは５〜７、温度３０〜６
０℃、好ましくは４０〜６０℃が適当である。また、反
応時間は使用する酵素の活性量と密接な関係にあり、通
常は５〜１２０時間、好ましくは５〜２４時間で反応が
終了する酵素活性量を選定すべきである。
【００１３】反応液から目的とするオリゴ糖を分離、精
製するには既知の手法を適用すればよく、例えば反応液
から高速液体クロマトグラフィーにより転移反応生成物
を分取し調製できる。また、オリゴ糖の構造確認はβ−
ガラクトシダーゼおよびグルコアミラーゼ（例えばアス
ペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇ
ｅｒ）起源のもの） 処理および１３Ｃ−ＮＭＲによる
構造解析により行うことができる。
製するには既知の手法を適用すればよく、例えば反応液
から高速液体クロマトグラフィーにより転移反応生成物
を分取し調製できる。また、オリゴ糖の構造確認はβ−
ガラクトシダーゼおよびグルコアミラーゼ（例えばアス
ペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇ
ｅｒ）起源のもの） 処理および１３Ｃ−ＮＭＲによる
構造解析により行うことができる。
【００１４】
【実施例】以下において、本発明を実施例により具体的
に説明する。 実施例１ （１）転移反応 マルトペンタオース（塩水港精糖（株）製、純度９８％
）５００ｍｇとラクトース５５０ｍｇを２ｍｌの５０ｍ
Ｍ、ｐＨ６．０の酢酸緩衝液に溶解させた後、β−ガラ
クトシダーゼ（商品名、Ｂｉｏｌａｃｔａ、大和化成（
株）製）３ｍｇを加え、４０℃で５時間反応させた。
に説明する。 実施例１ （１）転移反応 マルトペンタオース（塩水港精糖（株）製、純度９８％
）５００ｍｇとラクトース５５０ｍｇを２ｍｌの５０ｍ
Ｍ、ｐＨ６．０の酢酸緩衝液に溶解させた後、β−ガラ
クトシダーゼ（商品名、Ｂｉｏｌａｃｔａ、大和化成（
株）製）３ｍｇを加え、４０℃で５時間反応させた。
【００１５】反応終了後、反応液を１００℃で１０分間
加熱した。次いで、Ａｓａｈｉｐａｋ ＮＨ２Ｐ−５
０（４．６×２５０ｍｍ） をカラムとし、６５％アセ
トニトリルを溶媒に用いた高速液体クロマトグラフィー
（ＨＰＬＣ） で分析した。反応液の高速液体クロマト
グラムを図２に示す。この反応液から分取用ＨＰＬＣに
よりマルトペンタオースへの転移生成物Ａを単離し、凍
結乾燥して凍結乾燥標品５０ｍｇを得た。
加熱した。次いで、Ａｓａｈｉｐａｋ ＮＨ２Ｐ−５
０（４．６×２５０ｍｍ） をカラムとし、６５％アセ
トニトリルを溶媒に用いた高速液体クロマトグラフィー
（ＨＰＬＣ） で分析した。反応液の高速液体クロマト
グラムを図２に示す。この反応液から分取用ＨＰＬＣに
よりマルトペンタオースへの転移生成物Ａを単離し、凍
結乾燥して凍結乾燥標品５０ｍｇを得た。
【００１６】（２）構造解析
上記転移生成物Ａの４％溶液１５μｌにβ−ガラクトシ
ダーゼを加え、４０℃で３０分間反応させた。次いで、
反応液をＨＰＬＣにより分析したところ、転移生成物Ａ
はガラクトースとマルトペンタオースに完全に分解され
、そのモル比は１：１であった（図３ａ，図３ｂ）。ま
た、結晶グルコアミラーゼ（アスペルギルス・ニガー起
源のもの）およびα−グルコシダーゼ（酵母起源のもの
）により全く分解されないことが分かった。転移生成物
Ａおよびマルトペンタオースの１３Ｃ−ＮＭＲを測定し
た結果、転移生成物Ａの非還元末端側のグルコシル基の
４位の炭素のケミカルシフトはマルトペンタオースのも
のと比較すると、９ｐｐｍ低磁場側にシフトし、３位お
よび５位の炭素のケミカルシフトは１．４〜１．９ｐｐ
ｍ高磁場シフトが観察され、ガラクトシル基はマルトペ
ンタオース分子の非還元末端側のグルコシル基の４位に
結合していることを確認した（図４ａ，図４ｂ）。
ダーゼを加え、４０℃で３０分間反応させた。次いで、
反応液をＨＰＬＣにより分析したところ、転移生成物Ａ
はガラクトースとマルトペンタオースに完全に分解され
、そのモル比は１：１であった（図３ａ，図３ｂ）。ま
た、結晶グルコアミラーゼ（アスペルギルス・ニガー起
源のもの）およびα−グルコシダーゼ（酵母起源のもの
）により全く分解されないことが分かった。転移生成物
Ａおよびマルトペンタオースの１３Ｃ−ＮＭＲを測定し
た結果、転移生成物Ａの非還元末端側のグルコシル基の
４位の炭素のケミカルシフトはマルトペンタオースのも
のと比較すると、９ｐｐｍ低磁場側にシフトし、３位お
よび５位の炭素のケミカルシフトは１．４〜１．９ｐｐ
ｍ高磁場シフトが観察され、ガラクトシル基はマルトペ
ンタオース分子の非還元末端側のグルコシル基の４位に
結合していることを確認した（図４ａ，図４ｂ）。
【００１７】以上の結果から、転移生成物Ａはマルトペ
ンタオース分子の非還元末端側のグルコシル基にβ−１
，４結合でガラクトシル基が結合した構造であることが
確認された（図１の４参照）。
ンタオース分子の非還元末端側のグルコシル基にβ−１
，４結合でガラクトシル基が結合した構造であることが
確認された（図１の４参照）。
【００１８】実施例２
（１）転移反応
マルトヘキサオース（日本食品化工（株）製、純度９８
％）２００ｍｇとラクトース４００ｍｇを１ｍｌの５０
ｍＭ、ｐＨ６．０の酢酸緩衝液に溶解させた後、β−ガ
ラクトシダーゼ（商品名、Ｂｉｏｌａｃｔａ、大和化成
（株）製）１ｍｇを加え、４０℃で１時間反応させた。 このときの反応液のＨＰＬＣを図５に示す。この反応液
から分取用ＨＰＬＣによりマルトヘキサオースへの転移
生成物Ｂを単離し、凍結乾燥して凍結乾燥標品３０ｍｇ
を得た。
％）２００ｍｇとラクトース４００ｍｇを１ｍｌの５０
ｍＭ、ｐＨ６．０の酢酸緩衝液に溶解させた後、β−ガ
ラクトシダーゼ（商品名、Ｂｉｏｌａｃｔａ、大和化成
（株）製）１ｍｇを加え、４０℃で１時間反応させた。 このときの反応液のＨＰＬＣを図５に示す。この反応液
から分取用ＨＰＬＣによりマルトヘキサオースへの転移
生成物Ｂを単離し、凍結乾燥して凍結乾燥標品３０ｍｇ
を得た。
【００１９】（２）構造解析
上記転移生成物Ｂの４％溶液１５μｌにβ−ガラクトシ
ダーゼを加え、４０℃で３０分間反応させた。次いで、
反応液をＨＰＬＣにより分析したところ、転移生成物Ｂ
はガラクトースとマルトヘキサオースに完全に分解され
、そのモル比は１：１であった。また、結晶グルコアミ
ラーゼ（アスペルギルス・ニガー起源のもの）およびα
−グルコシダーゼ（酵母起源のもの）により全く分解さ
れないことが分かった。転移生成物Ｂおよびマルトヘキ
サオースの１３Ｃ−ＮＭＲを測定した結果、実施例１と
同様に、転移生成物Ｂの非還元末端側のグルコシル基の
４位の炭素のケミカルシフトはマルトヘキサオースのも
のと比較すると、約９ｐｐｍ低磁場側にシフトし、３位
および５位の炭素のケミカルシフトは１．４〜２．０ｐ
ｐｍ高磁場シフトが観察され、ガラクトシル基はマルト
ヘキサオース分子の非還元末端側のグルコシル基の４位
に結合していることを確認した。
ダーゼを加え、４０℃で３０分間反応させた。次いで、
反応液をＨＰＬＣにより分析したところ、転移生成物Ｂ
はガラクトースとマルトヘキサオースに完全に分解され
、そのモル比は１：１であった。また、結晶グルコアミ
ラーゼ（アスペルギルス・ニガー起源のもの）およびα
−グルコシダーゼ（酵母起源のもの）により全く分解さ
れないことが分かった。転移生成物Ｂおよびマルトヘキ
サオースの１３Ｃ−ＮＭＲを測定した結果、実施例１と
同様に、転移生成物Ｂの非還元末端側のグルコシル基の
４位の炭素のケミカルシフトはマルトヘキサオースのも
のと比較すると、約９ｐｐｍ低磁場側にシフトし、３位
および５位の炭素のケミカルシフトは１．４〜２．０ｐ
ｐｍ高磁場シフトが観察され、ガラクトシル基はマルト
ヘキサオース分子の非還元末端側のグルコシル基の４位
に結合していることを確認した。
【００２０】以上の結果から、転移生成物Ｂはマルトヘ
キサオース分子の非還元末端側のグルコシル基にβ−１
，４結合でガラクトシル基が結合した構造であることが
確認された（図１の５参照）。
キサオース分子の非還元末端側のグルコシル基にβ−１
，４結合でガラクトシル基が結合した構造であることが
確認された（図１の５参照）。
【００２１】実施例３
（１）転移反応
マルトース（１００ｍｇ），マルトトリオース（１５０
ｍｇ），マルトテトラオース（２００ｍｇ）またはマル
トヘプタオース（３４０ｍｇ）〔いずれも日本食品化工
（株）製〕とラクトース１４０ｍｇをそれぞれ１ｍｌの
５０ｍＭ，ｐＨ６．０の酢酸緩衝液に溶解させた後、β
−ガラクトシダーゼ（商品名、Ｂｉｏｌａｃｔａ、大和
化成（株）製）２ｍｇを加え、４０℃で１時間反応させ
た。次いで、反応液を１００℃で１０分間加熱した。そ
れぞれの反応液のＨＰＬＣを図６，図７，図８および図
９に示す。
ｍｇ），マルトテトラオース（２００ｍｇ）またはマル
トヘプタオース（３４０ｍｇ）〔いずれも日本食品化工
（株）製〕とラクトース１４０ｍｇをそれぞれ１ｍｌの
５０ｍＭ，ｐＨ６．０の酢酸緩衝液に溶解させた後、β
−ガラクトシダーゼ（商品名、Ｂｉｏｌａｃｔａ、大和
化成（株）製）２ｍｇを加え、４０℃で１時間反応させ
た。次いで、反応液を１００℃で１０分間加熱した。そ
れぞれの反応液のＨＰＬＣを図６，図７，図８および図
９に示す。
【００２２】これらの反応液から分取用ＨＰＬＣにより
、それぞれマルトース，マルトトリオース，マルトテト
ラオースまたはマルトヘプタオースへの転移生成物Ｃ，
Ｄ，ＥおよびＦを単離精製し、凍結乾燥して凍結乾燥標
品を得た。
、それぞれマルトース，マルトトリオース，マルトテト
ラオースまたはマルトヘプタオースへの転移生成物Ｃ，
Ｄ，ＥおよびＦを単離精製し、凍結乾燥して凍結乾燥標
品を得た。
【００２３】（２）構造解析
上記転移生成物Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆの４％溶液１５μｌにβ
−ガラクトシダーゼを加え、４０℃で３０分間反応させ
た。次いで、反応液をＨＰＬＣにより分析したところ、
転移生成物Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆはそれぞれガラクトースとマ
ルトース，マルトトリオース，マルトテトラオース，マ
ルトヘプタオースに完全に分解され、そのモル比はいず
れも１：１であった。また、結晶グルコアミラーゼ（ア
スペルギルス・ニガー起源のもの）およびα−グルコシ
ダーゼ（酵母起源のもの）によりいずれも全く分解され
ないことが分かった。転移生成物Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆの１３
Ｃ−ＮＭＲを測定した結果、実施例１と同様に、各転移
生成物の非還元末端側のグルコシル基の４位の炭素のケ
ミカルシフトは各マルトオリゴ糖のものと比較すると、
約９ｐｐｍ低磁場側にシフトし、３位および５位の炭素
のケミカルシフトは１．４〜２．０ｐｐｍ高磁場シフト
が観察され、ガラクトシル基はそれぞれマルトース，マ
ルトトリオース，マルトテトラオースおよびマルトヘプ
タオース分子の非還元末端側のグルコシル基の４位に結
合していることを確認した。
−ガラクトシダーゼを加え、４０℃で３０分間反応させ
た。次いで、反応液をＨＰＬＣにより分析したところ、
転移生成物Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆはそれぞれガラクトースとマ
ルトース，マルトトリオース，マルトテトラオース，マ
ルトヘプタオースに完全に分解され、そのモル比はいず
れも１：１であった。また、結晶グルコアミラーゼ（ア
スペルギルス・ニガー起源のもの）およびα−グルコシ
ダーゼ（酵母起源のもの）によりいずれも全く分解され
ないことが分かった。転移生成物Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆの１３
Ｃ−ＮＭＲを測定した結果、実施例１と同様に、各転移
生成物の非還元末端側のグルコシル基の４位の炭素のケ
ミカルシフトは各マルトオリゴ糖のものと比較すると、
約９ｐｐｍ低磁場側にシフトし、３位および５位の炭素
のケミカルシフトは１．４〜２．０ｐｐｍ高磁場シフト
が観察され、ガラクトシル基はそれぞれマルトース，マ
ルトトリオース，マルトテトラオースおよびマルトヘプ
タオース分子の非還元末端側のグルコシル基の４位に結
合していることを確認した。
【００２４】以上の結果から、転移生成物Ｃ，Ｄ，Ｅ，
Ｆはいずれも基質分子の非還元末端側のグルコシル基に
β−１，４結合でガラクトシル基が結合した構造である
ことが確認された（図１の１，２，３および６参照）。
Ｆはいずれも基質分子の非還元末端側のグルコシル基に
β−１，４結合でガラクトシル基が結合した構造である
ことが確認された（図１の１，２，３および６参照）。
【００２５】
【発明の効果】本発明の新規マルトオリゴ糖は、酵素の
糖転移作用を利用して効率よく製造される。しかも、こ
のマルトオリゴ糖はα−グルコシダーゼによる分解が著
しく抑制されるため、血中のα−アミラーゼ活性測定用
基質として極めて有用である。
糖転移作用を利用して効率よく製造される。しかも、こ
のマルトオリゴ糖はα−グルコシダーゼによる分解が著
しく抑制されるため、血中のα−アミラーゼ活性測定用
基質として極めて有用である。
【００２６】
【図１】 本発明のマルトオリゴ糖の構造を示すもの
である。
である。
【図２】 マルトペンタオースとラクトースにβ−ガ
ラクトシダーゼを作用させたときの反応液のＨＰＬＣを
示す。
ラクトシダーゼを作用させたときの反応液のＨＰＬＣを
示す。
【図３】 転移生成物ＡのＨＰＬＣ（図３ａ）と該転
移生成物Ａにβ−ガラクトシダーゼを作用させてガラク
トースとマルトペンタオースに分解したときのＨＰＬＣ
（図３ｂ）を示す。
移生成物Ａにβ−ガラクトシダーゼを作用させてガラク
トースとマルトペンタオースに分解したときのＨＰＬＣ
（図３ｂ）を示す。
【図４】 マルトペンタオースの１３Ｃ−ＮＭＲのチ
ャート（図４ａ）と転移生成物Ａの１３Ｃ−ＮＭＲのチ
ャート（図４ｂ）を示す。図中のａ，ｂ，ｃ，ｄ，ｅお
よびｆは、それぞれ非還元末端グルコースの４位炭素，
グルコースの２位および５位炭素，非還元末端グルコー
スの５位炭素，非還元末端グルコースの３位炭素，グル
コースの３位炭素およびグルコースの４位炭素を示す。
ャート（図４ａ）と転移生成物Ａの１３Ｃ−ＮＭＲのチ
ャート（図４ｂ）を示す。図中のａ，ｂ，ｃ，ｄ，ｅお
よびｆは、それぞれ非還元末端グルコースの４位炭素，
グルコースの２位および５位炭素，非還元末端グルコー
スの５位炭素，非還元末端グルコースの３位炭素，グル
コースの３位炭素およびグルコースの４位炭素を示す。
【図５】 マルトヘキサオースとラクトースにβ−ガ
ラクトシダーゼを作用させたときの反応液のＨＰＬＣを
示す。
ラクトシダーゼを作用させたときの反応液のＨＰＬＣを
示す。
【図６】 マルトースとラクトースにβ−ガラクトシ
ダーゼを作用させたときの反応液のＨＰＬＣを示す。
ダーゼを作用させたときの反応液のＨＰＬＣを示す。
【図７】 マルトトリオースとラクトースにβ−ガラ
クトシダーゼを作用させたときの反応液のＨＰＬＣを示
す。
クトシダーゼを作用させたときの反応液のＨＰＬＣを示
す。
【図８】 マルトテトラオースとラクトースにβ−ガ
ラクトシダーゼを作用させたときの反応液のＨＰＬＣを
示す。
ラクトシダーゼを作用させたときの反応液のＨＰＬＣを
示す。
【図９】 マルトヘプタオースとラクトースにβ−ガ
ラクトシダーゼを作用させたときの反応液のＨＰＬＣを
示す。
ラクトシダーゼを作用させたときの反応液のＨＰＬＣを
示す。
Claims (3)
- 【請求項１】 下記の構造式で表される新規オリゴ糖
。 【化１】 （式中、Ｇａｌ はガラクトシル基、Ｇｌｃ はグルコ
シル基を示し、ｎは０〜５の整数である。） - 【請求項２】 マルトオリゴ糖とラクトースの混合溶
液にβ−ガラクトシダーゼを作用させることを特徴とす
る請求項１記載の新規オリゴ糖の製造法。 - 【請求項３】 マルトオリゴ糖がマルトース，マルト
トリオース，マルトテトラオース，マルトペンタオース
，マルトヘキサオースおよびマルトヘプタオースの中か
ら選ばれた少なくとも１種のものである請求項２記載の
方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3063817A JP3064031B2 (ja) | 1991-03-06 | 1991-03-06 | 新規オリゴ糖およびその製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3063817A JP3064031B2 (ja) | 1991-03-06 | 1991-03-06 | 新規オリゴ糖およびその製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04279596A true JPH04279596A (ja) | 1992-10-05 |
| JP3064031B2 JP3064031B2 (ja) | 2000-07-12 |
Family
ID=13240303
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3063817A Expired - Lifetime JP3064031B2 (ja) | 1991-03-06 | 1991-03-06 | 新規オリゴ糖およびその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3064031B2 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998049201A1 (en) * | 1997-04-29 | 1998-11-05 | Hercules Incorporated | Galactosylated hydroxyalkyl polysaccharides and their derivatives |
| JP2001103911A (ja) * | 1999-10-06 | 2001-04-17 | Yokohama Kokusai Bio Kenkyusho:Kk | 反芻動物用飼料 |
| US7498318B1 (en) * | 1999-11-11 | 2009-03-03 | N.V. Nutricia | Food for diabetics |
-
1991
- 1991-03-06 JP JP3063817A patent/JP3064031B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998049201A1 (en) * | 1997-04-29 | 1998-11-05 | Hercules Incorporated | Galactosylated hydroxyalkyl polysaccharides and their derivatives |
| US6433161B1 (en) | 1997-04-29 | 2002-08-13 | Hercules Incorporated | Galactosylated hydroxyalkyl polysaccharides |
| JP2001103911A (ja) * | 1999-10-06 | 2001-04-17 | Yokohama Kokusai Bio Kenkyusho:Kk | 反芻動物用飼料 |
| US7498318B1 (en) * | 1999-11-11 | 2009-03-03 | N.V. Nutricia | Food for diabetics |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3064031B2 (ja) | 2000-07-12 |
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