JPH0429348B2 - - Google Patents

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JPH0429348B2
JPH0429348B2 JP59004923A JP492384A JPH0429348B2 JP H0429348 B2 JPH0429348 B2 JP H0429348B2 JP 59004923 A JP59004923 A JP 59004923A JP 492384 A JP492384 A JP 492384A JP H0429348 B2 JPH0429348 B2 JP H0429348B2
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Description

【発明の詳細な説明】
本発明は有用な乳酸桿菌を用いた生体内脱臭剤
に関するものである。 ラクトバシラス・クリアランス
（Lactobacillus（以下L.と略記する）clearans；
微工研菌寄第6587、6588、6589、6590号）は多量
経口投与時、例えば該菌の添加によるヨーグルト
を摂取すると、極めて温和に糞便中の悪臭物質の
減少が投与期間中見られるが、摂取を中止すれば
早い時期に該菌は退消して生体内脱臭作用がなく
なる。 ラクトバシラス・デオドランス（L.
deodorans；微工研菌寄第2742、2779、2780、
2781、2782号）はクリアランスの約10倍ないしそ
れ以上の脱臭力を示し、試験管中では微量のある
菌量の投入で初めて生糞便の完全脱臭に到る。し
かるに実際に人畜に投与すると、個体によつては
試験管中に見られる程の効果が必ずしも現はれな
い事例を経験することがある。そこで何らかの工
夫によつて、試験管中において認められる程度の
効果を発揮せしめんものと、種々の角度から検討
を加えた来た。本発明は殊に、他の腸内細菌ない
し消化菌を併用することに依り、ラクトバシラ
ス・クリアランスおよびラクトバシラス・デオド
ランスの効果を著しく高められる場合の有る事を
知り発明を完成したものである。 従来、種々の生菌製剤として乳酸桿菌を使用す
るに際し、乳酸桿菌の単一菌のみの使用に止まら
ず、ストレプトコクス・フエカリス
（Streptococus faecalis）との併用、ビフイドバ
クテリウム（Bifidobacterium）との併用、高い
消化力を示す枯草菌（Bacillus）との併用、さら
にこれらの３種を乳酸桿菌と併用する場合が知ら
れている。このように各種の菌を併用すると一つ
には家畜に使用した場合、飼料効率が良くなると
の解釈があり、また別にヒトおよび動物の腸内の
悪性感染に対して予防率が高くなるとの解釈があ
る。 ところで本発明者等は、脱臭ないし減臭効果が
○イより早く現はれるかまたはより遅れて現はれる
か、○ロその程度はより深くなるかまたはより浅い
か、○ハ長続きするか否か、即ち投与中止後の脱臭
効果が減弱しさらに消滅するに至るのが早いか遅
いか、○ニ排便感はどうか、すなわち快便か否か、
また生体えの残存感の大小などを検討して本発明
を完成したが、このような観点から行はれた研究
はこれまでに存在しない。 本発明の整腸剤はラクトバシラス（以下L.と略
記する）・デオドランス、L.クリアランス、L.サ
ルフリカ（sulfurica）およびL.ニトローザス
（nitrosus）を含有しているが、これらの乳酸桿
菌は何れも本発明者等の発見によるものであつ
て、L.デオドランスは特許第1157655号に、また
L.クリアランスは特願昭57−119890号に開示され
ており、L.サルフリカおよびL.ニトローザスは本
発明の完成途上において本発明者等により新たに
見出されたものであり、本発明においては微工研
菌寄第7383号および第7384号のL.サルフリカおよ
び微工研菌寄第7385号および第7386号のL.ニトロ
ーザスを使用した。 本発明の整腸剤はL.デオドランス、L.クリアラ
ンスおよび（L.サルフリカ＋L.ニトローザス）か
らなる群から選んだ菌株と、抗生物質形成フエカ
リス連鎖球菌（ストレプトコクス・フエカリス；
Streptococus（以下S.と略記する）faecalis）とか
らなる整腸剤に関するものである。 本発明で使用する抗生物質を形成するフエカリ
ス連鎖球菌は本発明者等によつて分離されたもの
で、微工研菌寄第2082号および第7382号を実施例
で使用しているが、これらの菌は何れも今日承認
されている分類学上の知見からすればフエカリス
連鎖球菌に属する。 従来研究者の中には無菌動物を用いた実験など
から漸くフエカリス連鎖球菌は生体にとつて有害
との説をなす人もあるが、実際にはヒトの腸管内
には100兆個にも達する細菌が協調的ないし競争
的生存を展開しており、しかもそれらの多くはフ
エカリス乳酸菌などとは較べものにもならない猛
毒性物質（例えばメルカプタン）を形成してい
る。このことからフエカリス乳酸菌は腸管内では
一概に有害菌の仲間に直ちに編入されるべきもの
ではなく、ことに抗生物質生成フエカリス菌など
は、むしろラクトバシラスやビフイドバクテリウ
ム（Bifidobacterium）の活躍の支援ないし悪性
菌の活躍の抑制の方向で腸内で生存しており、そ
の僅かな有害性は他の腸内細菌の活躍と代謝の中
に埋没されてしまつているものと推定され、反面
フエカリス乳酸菌の有益性はより重要視されなけ
ればならない。因みに本発明者らの実験結果はこ
のような見解を充分に支援している。 実験番号の示す如く、１つの乳酸桿菌に対して
44通りの実験を行つた。使用した乳酸桿菌はL.デ
オドランス、L.クリアランスおよびL.（サルフリ
カ＋ニトローザス）の３つの菌種であるから計
132通りという尨大なものであり、更に時として
他の菌種についても、２株以上の菌株で実験を行
つたので、実験には真に尨大な数に達した。 実験方法：本発明の整腸菌を添加したヨーグル
トを朝夕２回連続４日間投与前から後までの観察
結果を集計した。そして無くなるか減少している
糞便臭が復元して後３〜10日以降、次の実験を行
つた。またL.クリアランスの或る種の実験におい
ては、投与中止後の復元が極めて早いので、早い
時期に次の実験に入る事が出来たが、L.デオドラ
ンスの実験例においては、糞便臭の復元のみでも
長い日数を要し、かつ腸内細菌の変化までを精密
に検査した後に次の実験に入つたために実験数と
相俟つて全実験の終了までには多くの才月を要し
た。 この実験で使用したL.デオドランスおよびL.ク
リアランス以外の菌株は次の通りである。 乳酸桿菌： 微工研菌寄番号 L.サルフリカ 7383 L. 〃 7384 L.ニトローザス 7385 L. 〃 7386 連鎖球菌： S. フエカリス（第１表の菌、以下同じ）7382 S. 〃 （菌） 2082 S. 〃 （菌）※ ATCC6569 S. 〃 （菌）※ ATCC14506 ※菌および菌は抗生物質を形成しない。 ビフイズス菌： B.ビフイダム（菌） ATCC11146 B. 〃 （菌） ATCC11863 枯草菌： バシラス・サブチリス（Ａ菌） IFO3009 バシラス・コアギユランス（Ｂ菌）FERM−Ｐ
No.2930（米国特許第4210672号） 本発明の整腸剤は前記乳酸桿菌およびフエカリ
ス連鎖球菌の外に更にビフイズス菌または／およ
び枯草菌を含有することができる。ビフイズス菌
としては例えばビフイドバクテリウム・ビフイダ
ム（Bifidobacterium（以下B.と略記する）
bifidum）が挙げられ枯草菌としてはバシラス・
サブチリス（Bacillus subtilis）が挙げられる。 本発明による整腸剤はヒトおよび動物に投与し
たときに極めて優れた整腸作用を示し、排泄され
る糞便に対する脱臭効果が優れており、また排便
感を良くする作用を有している。 なお、本発明において使用する新規な乳酸桿菌
であるL.サルフリカ（微工研菌寄No.7383、7384）
およびL.ニトローザス（微工研菌寄No.7385、
7386）のNa2S・9H2Oならびにアンモニアの資化
能力を調べたデータを以下に示す。 肉エキス10g、ペプトン10g、NaCl2g、グルコ
ース1g、CaCO31g、酵母エキス0.1gより成る培地
にNa2S・9H2Oおよびアンモニアを夫々0.5g添加
して（何れの培地もPHを中性に修正）、37℃で培
養、各24、48、72時間目の減少程度を調べた。
【表】 上表から明らかな如く、L.サルフリカは
Na2S・9H2Oのみを、L.ニトローザスはアンモニ
アのみを72時間目で、それぞれ半分程度資化する
能力を有していることが判明した。 此等の新菌の分離法は基本的にL.クリアランス
の分離法と同じであり、先づ分離用培地として、
培地１中に肉エキス5g、ペプトン5g、Na2S・
9H2O0.5g、酪酸ソーダ3g、ブドウ糖5g、
CaCO33gを含有せしめたもの、および上記
Na2S・9H2Oの代りにアンモニア0.5g添加したも
のを作り、PHを中性に修正し、これに人畜の糞便
を塗布し、37℃で嫌気性培養を行う。以後のスク
リーニングはL.クリアランスに関わる特願昭57−
119890号に記載したと同様に行ない、最後に上記
した検定培地（減少程度を調べる培地）を使い、
Na2S・9H2Oのみしか減少しない菌株をL.サルフ
リカとし、アンモニアのみしか減少しない菌株を
L.ニトローザスとした。 また、本発明で使用した微工研菌寄第2082、
7382、7383、7384、7385および7386号の形態、培
地に於ける生育状態、生理学的諸性質は次の各表
に示す通りである。
【表】 (注) 上記の形態は、肉汁培地に培養した時の結
果であるが、肉汁寒天に培養した場合も同
形態を示した。(37℃培養)
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】 更に実験の内容について、実験番号１、２、
３、４、５、６、７、８および29番について説明
する。 １番の例では乳酸桿菌と、菌すなわち
FERM Ｐ−7382とを、スキムミルク100g、砂糖
100g、クエン酸0.25g、Na2HPO4・12H2O3.12g、
寒天2g、ビタミンC0.2g、水1000mlに投入、24時
間、37℃で培養したものを製品とし、朝夕、嚥下
せしめた。この時使用の菌の特徴は分類上は連
鎖球菌に入るが、胆汁酸と熱に対する抵抗力は強
く、増殖力は極めて旺盛で、かつ一般の腸球菌が
形成するのと同質の抗生物質を多量に形成する。 実験番号２で用いた菌も分類学上連鎖球菌に
属し、胆汁酸に対して抵抗性を示し、かつ上記
菌同様複数の抗生物質を多量に形成する。 実験番号３で用いている菌および４で用いて
いる菌は共に分類学上連鎖球菌で胆汁酸に対し
て抵抗性を示すが、抗生物質の形成はない。 実験番号５および６で用いている菌と菌
は、何れもビフイズス菌に属し抗生物質の形成は
ない。 実験番号７および８で用いているＡ菌とＢ菌は
共に蛋白や澱粉の消化力が強いことで著名な枯草
菌属（Bacillus）であり、抗生物質は形成しな
い。 実験番号29は４者併用の場合である。 ここで特に記載すべきことは、菌の発育速度が
余りに違い過ぎる場合である。すなわち菌なら
びに菌は、使用乳酸桿菌と比較して発育速度が
非常に遅い。そのためこれらの菌を添加した場合
には乳酸桿菌の急速な増殖と酸の形成によつてPH
が速やかに4.0以下に下つてしまいビフイズス菌
の増殖が悪い侭に終つてしまう。つまり作用菌量
が少い侭に止ることになる。そのため本実験では
ビフイズス菌を約８時間、乳酸桿菌に先行して添
加することに依つて、つまり添加して時間差を設
ける事により最終製品中における乳酸桿菌：ビフ
イズス菌の量比が３：１以内に収まるようにし
た。 脱臭効果の表示：第１表の脱臭効果の表示の速
度の欄の◎は急速に脱臭効果が現はれる時の表
示、深度の欄の◎は、深い脱臭力を示し、期間の
欄の◎は長期に亘つて脱臭効果が継続される事を
示し、気分の欄の◎は排便感の良いことを示した
ものである。 総合判定：第１表において◎は効果が著しい場
合、〇は明らかに差の感じられる場合、△は乳酸
桿菌単独の場合に比して効果が存したとは認め難
い場合を意味する。 また◎にはテストした全部でなくても半数以上
が顕著と認められるものも含んでおり、〇も同様
に半数以上が効果を認めた場合を含んでいる。△
は半数以下しか効果の認められない場合である。
【表】
【表】 実験結果の検討：実験成績を検討した結果、ラ
クトバシラスと菌の併用は、事項を脱臭効果の
みに限れば、効果は極めて大きい。菌との併用
も効果はあるが、菌の場合よりも少い、また
菌および(d)菌は分類学上菌および菌と同じ属
に属し、かつ増殖速度なども決して菌などには
劣らないが、抗生物質非形成の点で異り、菌お
よび菌よりも脱臭効果が劣るので、L.デオドラ
ンス、L.クリアランスさらにL.（サルフリカ＋ニ
トローザス）との併用には、抗生物質を形成する
フエカリス菌を使用する事が大切である。ちなみ
にフエカリス連鎖球菌の形成する抗生物質に対し
て、ラクトバシラスは非感受性である。 ラクトバシラス＋菌と、ラクトバシラス＋
菌＋第３の菌とを比較すると、前者の方が良い成
績が得られる事が判る。この傾向は此処に示した
第３の菌がビフイズス菌単独または枯草菌属単独
であつても、または両者の併用であつても同様に
みられた。 また、此処でL.クリアランス＋菌での成績◎
と、L.デオドランス＋菌での成績◎の糞便脱臭
の程度は、勿論異つている。前者の場合、L.クリ
アランスのみによる減臭の程度が投与前の臭気の
約1/2で、嚥下中止で直ちに復元するのに対し、
菌との併用では1/4となり、かつ投与中止後も
３日前後は菌を飲んだ影響が明瞭に現はれてい
る。これに対して、L.デオドランスのみでも１時
期殆んど糞便の脱臭は完成しているが菌を併用
することにより完全脱臭の現はれる時期は早くな
り、かつ投与中止後も長く脱臭が続いている場合
（10日以上）が験体の半分を超えた。 また糞便臭の復元に関連して、投与を受けた人
の腸内細菌がどのようになつているかを調べた
が、○イL.クリアランスの場合には、殆んど投与前
と変りが無い所まで復元するのに菌添加の場合
さえ５日前後であつた。○ロしかし、L.デオドラン
スの場合は、腸内細菌糞が、かなり変動を受ける
個人差の存する事が明らかとなつた。復元には平
均15日程度が必要で、中には復元には到らず途中
で止るような個体も存した。 なお本発明において使用する新規なL.サルフリ
カ（FERM Ｐ−7983、Ｐ−7384）は、L.クリア
ランスがNa2S・9H2Oとアンモニアの両方をペプ
トン10g、肉エキス10g、NaCl2g、グルコース
1g、酵母エキス0.1g、CaCO31g、水1000mlからな
る培地中で減少せしめるのに対して、アンモニア
は減少させることなくNa2S・9H2Oのみを同一培
地中でL.クリアランスと同様に減少せしめる作用
を有する。またL.ニトローザス（FERM Ｐ−
7385、Ｐ−7386）はこれと反対にNa2S・9H2Oは
減少させないでアンモニアのみを同一培地中でL.
クリアランスと同様に減少せしめる作用を示す。
そしてこれらの何れの菌種もNa2S・9H2Oまたは
アンモニアの添加によつてL.デオドランスの場合
のように発育促進を示すことはない。実験によれ
ば、これらの新規な２菌種の混合使用、すなわち
（L.スルフリカ＋L.ニトローザス）はL.クリアラ
ンス単一菌使用の場合と同様な作用を示す。 第１表に示した様にヒトに投与した場合、本発
明による各菌種の２者、３者、４者の併用の中に
は、上述の判断基準では明瞭な差の出難い実験区
が多かつたので、鶏と豚の発育の如何も調べた。 この実験における飼料えの添加量は次の通りで
ある： 鶏の場合：通常の鶏用配合飼料１Kg当り添加せし
める菌としては何れもその増量剤添加乾燥菌
体0.2g量を添加した。 豚の場合：通常の鶏用配合飼料１Kg当り添加せし
める菌としては何れもその増量剤添加乾燥菌
体0.4g量を添加した。 調査は主として投与前後における体量と肉づき
を比較して行つた。 その結果、ヒトの場合に明確な差の認め難かつ
たビフイズス菌（菌および菌）との併用区な
らびに枯草菌（Ａ菌およびＢ菌）との併用区で、
またビフイズス菌または枯草菌の３者さらにこれ
ら４者の併用において何れの乳酸桿菌を使用した
場合も、L.デオドランス、L.クリアランスないし
（L.サルフリカ＋L.ニトローザス）の単独添加の
場合よりも約１割飼料効率が良くなつた。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １ ラクトバシラス・デオドランス、ラクトバシ
    ラス・クリアランスおよび（ラクトバシラス・サ
    ルフリカ＋ラクトバシラス・ニトローザス）から
    なる群から選んだ菌株と、抗生物質形成フエカリ
    ス連鎖球菌とからなる生体内脱臭剤。 ２ ラクトバシラス・デオドランス、ラクトバシ
    ラス・クリアランスおよび（ラクトバシラス・サ
    ルフリカ＋ラクトバシラス・ニトローザス）から
    なる群から選んだ菌株と、抗生物質形成フエカリ
    ス連鎖球菌と、ビフイズス菌または枯草菌とから
    なる生体内脱臭剤。 ３ ラクトバシラス・デオドランス、ラクトバシ
    ラス・クリアランスおよび（ラクトバシラス・サ
    ルフリカ＋ラクトバシラス・ニトローザス）から
    なる群から選んだ菌株と、抗生物質形成フエカリ
    ス連鎖球菌と、ビフイズス菌と、枯草菌とからな
    る生体内脱臭剤。
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