JPH04316595A - プラジマイシンｌ及びｆｌ並びにそれらの誘導体 - Google Patents
プラジマイシンｌ及びｆｌ並びにそれらの誘導体Info
- Publication number
- JPH04316595A JPH04316595A JP3249915A JP24991591A JPH04316595A JP H04316595 A JPH04316595 A JP H04316595A JP 3249915 A JP3249915 A JP 3249915A JP 24991591 A JP24991591 A JP 24991591A JP H04316595 A JPH04316595 A JP H04316595A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- strain
- antibiotic
- pradimycin
- subsp
- neohibisca
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
- C07H15/244—Anthraquinone radicals, e.g. sennosides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/10—Antimycotics
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Oncology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【０００１】
【発明の背景】本発明は新規抗真菌性化合物、その製造
法、その治療使用、及びそれを含む薬学的組成物に関す
る。本発明はまた抗生物質産生微生物に関する。より詳
しくは、本発明の新規化合物はプラジマイシン（ｐｒａ
ｄｉｍｉｃｉｎ） 抗生物質の群に属する。以前にはＢ
Ｕ−３６０８抗生物質と称されたプラジマイシンは病原
性酵母及び真菌に対して活性な広域抗生物質の群である
。アクチノマズラ・ヒビスカ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒ
ａ ｈｉｂｉｓｃａ） の発酵により得られた多くのプ
ラジマイシン化合物が報告され、それらの構造は式（Ｉ
）
法、その治療使用、及びそれを含む薬学的組成物に関す
る。本発明はまた抗生物質産生微生物に関する。より詳
しくは、本発明の新規化合物はプラジマイシン（ｐｒａ
ｄｉｍｉｃｉｎ） 抗生物質の群に属する。以前にはＢ
Ｕ−３６０８抗生物質と称されたプラジマイシンは病原
性酵母及び真菌に対して活性な広域抗生物質の群である
。アクチノマズラ・ヒビスカ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒ
ａ ｈｉｂｉｓｃａ） の発酵により得られた多くのプ
ラジマイシン化合物が報告され、それらの構造は式（Ｉ
）
【０００２】
【化２】
【０００３】として示される。米国特許第４，８７０，
１６５ 号はプラジマイシンＡ、Ｂ及びＣを開示してい
る。プラジマイシンＣは欧州特許出願第３１５，１４７
号（１９８９年５月１０日公表）中に開示されたベナノ
マイシンＢに等しい。欧州特許出願第３４５，７３５号
（１９８９年１２月１３日公表）はプラジマイシンＤ、
Ｅ及びそれらのそれぞれのデスキシロシル誘導体を開示
している。
１６５ 号はプラジマイシンＡ、Ｂ及びＣを開示してい
る。プラジマイシンＣは欧州特許出願第３１５，１４７
号（１９８９年５月１０日公表）中に開示されたベナノ
マイシンＢに等しい。欧州特許出願第３４５，７３５号
（１９８９年１２月１３日公表）はプラジマイシンＤ、
Ｅ及びそれらのそれぞれのデスキシロシル誘導体を開示
している。
【０００４】欧州特許出願第３５１，７９９号（１９９
０年１月２４日公表）はプラジマイシンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ
及びＥのＮ−アルキル化誘導体を開示している。欧州特
許出願第３６８，３４９号（１９９０年５月１６日公表
）はプラジマイシンＦＡ−１、ＦＡ−２、それらそれぞ
れのデスキシロシル誘導体及びそれらのＮ−アルキル化
誘導体を開示している。
０年１月２４日公表）はプラジマイシンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ
及びＥのＮ−アルキル化誘導体を開示している。欧州特
許出願第３６８，３４９号（１９９０年５月１６日公表
）はプラジマイシンＦＡ−１、ＦＡ−２、それらそれぞ
れのデスキシロシル誘導体及びそれらのＮ−アルキル化
誘導体を開示している。
【０００５】これまで報告されたプラジノマイシンはモ
ノサッカリド部分（式Ｉ中、ＲＣ が水素であるアミノ
糖）又はそれに結合したアミノ糖及びβ−Ｄ−キシロー
スからなるジサッカリド部分を有することが認められよ
う。意外にも今回、アクチノマズラ・ベルコソスポラ（
Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ ｖｅｒｒｕｃｏｓｏｓｐｏ
ｒａ）の新亜種が、、Ｄ−キシロース基がＤ−グルコー
スにより置換されたプラジマイシン抗生物質を生成でき
ることが見いだされた。従ってこの発見が本出願の基礎
を形成する。
ノサッカリド部分（式Ｉ中、ＲＣ が水素であるアミノ
糖）又はそれに結合したアミノ糖及びβ−Ｄ−キシロー
スからなるジサッカリド部分を有することが認められよ
う。意外にも今回、アクチノマズラ・ベルコソスポラ（
Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ ｖｅｒｒｕｃｏｓｏｓｐｏ
ｒａ）の新亜種が、、Ｄ−キシロース基がＤ−グルコー
スにより置換されたプラジマイシン抗生物質を生成でき
ることが見いだされた。従ってこの発見が本出願の基礎
を形成する。
【０００６】
【発明の概要】本発明は式（ＩＩ）
【０００７】
【化３】
【０００８】（式中、Ｒ１ はメチル又はヒドロキシメ
チルであり、生ずるアミノ酸がＤ−配置を有し；Ｒ２
は水素又はＣ１ 〜Ｃ５ アルキルである）の新規化合
物又はその薬学的に許容できる塩を提供する。本発明の
他の観点はアクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒ
ビスカ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ ｖｅｒｒｕｃｏｓ
ｏｓｐｏｒａ ｓｕｂｓｐ． ｎｅｏｈｉｂｉｓｃａ）
の生物学的に純粋な菌株を提供する。
チルであり、生ずるアミノ酸がＤ−配置を有し；Ｒ２
は水素又はＣ１ 〜Ｃ５ アルキルである）の新規化合
物又はその薬学的に許容できる塩を提供する。本発明の
他の観点はアクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒ
ビスカ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ ｖｅｒｒｕｃｏｓ
ｏｓｐｏｒａ ｓｕｂｓｐ． ｎｅｏｈｉｂｉｓｃａ）
の生物学的に純粋な菌株を提供する。
【０００９】本発明のなお他の観点は式（ＩＩＩ）
【０
０１０】
０１０】
【化４】
【００１１】（式中、Ｒ３ は水素であり、Ｒ４ は水
素又はメチルであり、Ｒ５ はβ−Ｄ−キシロシルであ
るか；又はＲ３ はメチルであり、生ずるアラニル残基
がＤ−配置を有し、Ｒ４ は水素又はメチルであり、Ｒ
５ は水素、β−Ｄ−キシロシル又はβ−Ｄ−グルコシ
ルである）を有する化合物を製造する方法を提供し、そ
の方法はアクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビ
スカの抗生物質産生株を、資化性炭素及び窒素源を含む
培地中で深部通気条件下に培養することを含む。
素又はメチルであり、Ｒ５ はβ−Ｄ−キシロシルであ
るか；又はＲ３ はメチルであり、生ずるアラニル残基
がＤ−配置を有し、Ｒ４ は水素又はメチルであり、Ｒ
５ は水素、β−Ｄ−キシロシル又はβ−Ｄ−グルコシ
ルである）を有する化合物を製造する方法を提供し、そ
の方法はアクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビ
スカの抗生物質産生株を、資化性炭素及び窒素源を含む
培地中で深部通気条件下に培養することを含む。
【００１２】本発明のなお他の観点は式（ＩＶ）
【００
１３】
１３】
【化５】
【００１４】（式中、Ｒ６ は水素又はメチルであり、
Ｒ７ はβ−Ｄ−キシロシルであるか；又はＲ６ はメ
チルであり、Ｒ７ はβ−Ｄ−グルコシルである）を有
する化合物を製造する方法を提供し、その方法はアクチ
ノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカの抗生物質
産生株を、炭素、窒素及びＤ−セリンの資化性源を含む
培地中で深部通気条件下に培養することを含む。
Ｒ７ はβ−Ｄ−キシロシルであるか；又はＲ６ はメ
チルであり、Ｒ７ はβ−Ｄ−グルコシルである）を有
する化合物を製造する方法を提供し、その方法はアクチ
ノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカの抗生物質
産生株を、炭素、窒素及びＤ−セリンの資化性源を含む
培地中で深部通気条件下に培養することを含む。
【００１５】本発明のなお他の観点は式（Ｉ）の化合物
の抗真菌有効量を、感染に悩む宿主に投与することを含
む真菌感染の治療法を提供する。本発明の他の観点は式
（Ｉ）の化合物及び薬学的に許容できる担体を含む薬学
的組成物を提供する。
の抗真菌有効量を、感染に悩む宿主に投与することを含
む真菌感染の治療法を提供する。本発明の他の観点は式
（Ｉ）の化合物及び薬学的に許容できる担体を含む薬学
的組成物を提供する。
【００１６】
本発明の１観点は式（ＩＩ） の抗生物質及びその薬学
的に許容できる塩を提供する。式（ＩＩ） の化合物は
サブセットに分けることができ；そのようなサブセット
の１つはここにプラジマイシンＬおよびプラジマイシン
ＦＬと称される２つのプラジマイシン抗生物質を与え、
それらはアクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビ
スカの発酵により製造される。プラジマイシンＬ及びプ
ラジマイシンＦＬの構造はそれぞれ式（Ｖａ）及び（Ｖ
ｂ）
的に許容できる塩を提供する。式（ＩＩ） の化合物は
サブセットに分けることができ；そのようなサブセット
の１つはここにプラジマイシンＬおよびプラジマイシン
ＦＬと称される２つのプラジマイシン抗生物質を与え、
それらはアクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビ
スカの発酵により製造される。プラジマイシンＬ及びプ
ラジマイシンＦＬの構造はそれぞれ式（Ｖａ）及び（Ｖ
ｂ）
【００１７】
【化６】
【００１８】として示される。理解できるように、プラ
ジマイシンＬはＤ−アラニン基を有し、一方プラジマイ
シンＦＬはＤ−セリン基を有する。式（ＩＩ）の化合物
の他のサブセットは、それぞれの親化合物から既知化学
的方法例えば還元的アルキル化により製造できるプラジ
マイシンＬ及びプラジマイシンＦＬのＮ−アルキル化誘
導体である。
ジマイシンＬはＤ−アラニン基を有し、一方プラジマイ
シンＦＬはＤ−セリン基を有する。式（ＩＩ）の化合物
の他のサブセットは、それぞれの親化合物から既知化学
的方法例えば還元的アルキル化により製造できるプラジ
マイシンＬ及びプラジマイシンＦＬのＮ−アルキル化誘
導体である。
【００１９】特記しなければ、用いた「アルキル」とい
う語は直鎖及び枝分れ炭素鎖を包含する。「薬学的に許
容できる塩」には無機酸例えば塩酸、硫酸、リン酸、硝
酸などで、又は有機酸例えば酢酸、クエン酸、フマル酸
、乳酸、酒石酸などで形成される酸付加塩、無機塩基例
えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウ
ム、炭酸カルシウム、水酸化マグネシウムなどで、又は
有機塩基例えばジエチルアミン、エチレンジアミン、ト
リエチルアミン、エタノールアミンなどで形成される塩
基塩、及び双性イオンを与える内部塩が包含さる。略号
「ＣＢＺ」はベンジルオキシカルボニル基を示すために
使用される。 １． プラジマイシンＬ及びプラジマイシンＦＬの製
造プラジマイシンＬはアクチノマズラ・ベルコソスポラ
亜種ネオヒビスカの抗生物質産生株またはその変種ある
いはその変異株を資化性炭素及び窒素の源を含む培地中
で培養することにより製造される。プラジマイシンＦＬ
は、培地がさらにＤ−セリンの同化性源を含むときに同
様に製造される。
う語は直鎖及び枝分れ炭素鎖を包含する。「薬学的に許
容できる塩」には無機酸例えば塩酸、硫酸、リン酸、硝
酸などで、又は有機酸例えば酢酸、クエン酸、フマル酸
、乳酸、酒石酸などで形成される酸付加塩、無機塩基例
えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウ
ム、炭酸カルシウム、水酸化マグネシウムなどで、又は
有機塩基例えばジエチルアミン、エチレンジアミン、ト
リエチルアミン、エタノールアミンなどで形成される塩
基塩、及び双性イオンを与える内部塩が包含さる。略号
「ＣＢＺ」はベンジルオキシカルボニル基を示すために
使用される。 １． プラジマイシンＬ及びプラジマイシンＦＬの製
造プラジマイシンＬはアクチノマズラ・ベルコソスポラ
亜種ネオヒビスカの抗生物質産生株またはその変種ある
いはその変異株を資化性炭素及び窒素の源を含む培地中
で培養することにより製造される。プラジマイシンＦＬ
は、培地がさらにＤ−セリンの同化性源を含むときに同
様に製造される。
【００２０】プラジマイシンＬはアクチノマズラ・ベル
コソスポラ亜種ネオヒビスカＲ１０３−３株及びそれか
ら誘導されたＡ１００１９株と称される変異株により製
造される。Ｒ１０３−３株はまたＤ−セリンの資化性源
を含む培地中でプラジマイシンＦＬを生ずる。Ｒ１０３
−３株及びＡ１００１９株の特徴的性質が次に記載され
る。 Ａ． 産生微生物 （ｉ） Ｒ１０３−３株はプエルト・ビジョ・コスタ（
Ｐｕｅｒｔｏ Ｖｉｅｊｏ Ｃｏｓｔａ） 、ペルーで
、採取された土壌試料から分離された。Ｒ１０３−３株
の生物学的に純粋な菌株はアメリカン・タイプ・カルチ
ャー・コレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃ
ｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ， １２３０１
Ｐａｒｋｌａｗｎ Ｄｒｉｖｅ， Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ
， Ｍａｒｙｌａｎｄ） に受託番号ＡＴＣＣ５３９３
０として寄託された。この菌株は特許手続上の微生物の
寄託の国際的承認に関するブダペスト条約下の寄託とし
て受託された。
コソスポラ亜種ネオヒビスカＲ１０３−３株及びそれか
ら誘導されたＡ１００１９株と称される変異株により製
造される。Ｒ１０３−３株はまたＤ−セリンの資化性源
を含む培地中でプラジマイシンＦＬを生ずる。Ｒ１０３
−３株及びＡ１００１９株の特徴的性質が次に記載され
る。 Ａ． 産生微生物 （ｉ） Ｒ１０３−３株はプエルト・ビジョ・コスタ（
Ｐｕｅｒｔｏ Ｖｉｅｊｏ Ｃｏｓｔａ） 、ペルーで
、採取された土壌試料から分離された。Ｒ１０３−３株
の生物学的に純粋な菌株はアメリカン・タイプ・カルチ
ャー・コレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃ
ｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ， １２３０１
Ｐａｒｋｌａｗｎ Ｄｒｉｖｅ， Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ
， Ｍａｒｙｌａｎｄ） に受託番号ＡＴＣＣ５３９３
０として寄託された。この菌株は特許手続上の微生物の
寄託の国際的承認に関するブダペスト条約下の寄託とし
て受託された。
【００２１】Ｒ１０３−３株の形態学、培養、生理学及
び化学分類学的特徴はアクチノマズラ・ベルコソスポラ
のそれに類似するが、しかしＲ１０３−３株はアクチノ
マズラ・ベルコソスポラとは赤色拡散性色素の形成及び
他の生理学的特徴に差異が認められる。従ってＲ１０３
−３株はアクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビ
スカ新亜種（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ ｖｅｒｒｕｃ
ｏｓｏｓｐｏｒａ ｓｕｂｓｐ． ｎｅｏｈｉｂｉｓｃ
ａ ｓｕｂｓｐ． ｎｏｖ．）と称された。 （ａ） 形態学 Ｒ１０３−３株は短又は原基的気菌糸及び十分枝分れし
た非断裂化基底菌糸を形成する。ループ又はら旋状短胞
子鎖（５〜１２胞子毎鎖）が気菌糸上に形成される。胞
子は卵形（０．８×１．２〜１．５μｍ）、非運動性で
あり、いぼ状表面を有する。 （ｂ） 培養及び生理学的特徴 培養及び生理学的特徴はシーリングほか（Ｓｈｉｒｌｉ
ｎｇ ａｎｄ Ｇｏｔｔｌｉｏｂ（Ｉｎｔ． Ｊ． Ｓ
ｙｓｔ． Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．， １９６６，１６：
３１３〜３４０）及びゴードン（Ｇｏｒｄｏｎ） ほか
（Ｊ． Ｇｅｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ．，１９７８，
１０９：６９〜７８）の方法により調べた。
び化学分類学的特徴はアクチノマズラ・ベルコソスポラ
のそれに類似するが、しかしＲ１０３−３株はアクチノ
マズラ・ベルコソスポラとは赤色拡散性色素の形成及び
他の生理学的特徴に差異が認められる。従ってＲ１０３
−３株はアクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビ
スカ新亜種（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ ｖｅｒｒｕｃ
ｏｓｏｓｐｏｒａ ｓｕｂｓｐ． ｎｅｏｈｉｂｉｓｃ
ａ ｓｕｂｓｐ． ｎｏｖ．）と称された。 （ａ） 形態学 Ｒ１０３−３株は短又は原基的気菌糸及び十分枝分れし
た非断裂化基底菌糸を形成する。ループ又はら旋状短胞
子鎖（５〜１２胞子毎鎖）が気菌糸上に形成される。胞
子は卵形（０．８×１．２〜１．５μｍ）、非運動性で
あり、いぼ状表面を有する。 （ｂ） 培養及び生理学的特徴 培養及び生理学的特徴はシーリングほか（Ｓｈｉｒｌｉ
ｎｇ ａｎｄ Ｇｏｔｔｌｉｏｂ（Ｉｎｔ． Ｊ． Ｓ
ｙｓｔ． Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．， １９６６，１６：
３１３〜３４０）及びゴードン（Ｇｏｒｄｏｎ） ほか
（Ｊ． Ｇｅｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ．，１９７８，
１０９：６９〜７８）の方法により調べた。
【００２２】Ｒ１０３−３株はＩＳＰ培地Ｎｏ． ３、
４、５及び７中で気菌糸及び胞子鎖を形成し、ツァペッ
クの寒天及び天然有機培地例えばＩＳＰ培地Ｎｏ． ２
中で帯赤色拡散性色素（プラジマイシン）を多量に生ず
る。培養及び生理学的特徴はそれぞれ表１及び２中に示
される。 表１．
Ｒ１０３−３株の培養特徴 培 地
増 殖 気中菌糸 基中
菌糸 拡散性色素スクロース−ナイトレート
寒天 並 なし
非常に濃い 非常に濃い（ツァヘ゜ック−ト
゛ックス 寒天）
赤色（１４） 帯紫赤色
（２５７）トリフ゜トン−
酵母エキスフ゛ロス 貧
なし 濃赤色（１３） 並赤色（１
５）（ＩＳＰ Ｎｏ．１） 濁
らず酵母エキス−麦芽 良好
なし 非常に濃い 非常に暗いエキ
ス寒天（ＩＳＰ．Ｎｏ．２）
赤色（１４） 赤
色（１７）オートミール寒天 並
並； 並；
帯灰ピンク色（ＩＳＰ Ｎｏ．３）
淡ピンク色 ピンク
色 （８） 〜淡帯灰
（
７） （５） 赤色
（１８）無機塩−デンプン寒天 並
貧；白色 並 淡帯灰（
ＩＳＰ Ｎｏ．４）
ピンク色（５）
赤色（１８）ク゛リセロール−アスハ゜ラキ゛ン
寒天 貧 貧；白色 無
色 なし（ＩＳＰ Ｎｏ．５） ペプトン 良好
ほとんど 帯灰ピンク 非常に暗い−酵
母エキス− 鉄寒天（ＩＳＰ Ｎｏ．６）
なし； 白色 色（８） 〜 赤
色（１４）
濃
赤色（１３）チロシン寒天 並
貧；白色 並
淡帯黄（ＩＳＰ Ｎｏ．７）
赤
色（１５） ピンク色（２８）ク゛リコース
アスハ゜ラキ゛ン 貧
なし 無色
淡ピンク色寒天
（４）栄養寒天
並 貧；白色
暗ピンク色 暗赤色（１６）
（６） ベンネット寒天
良好 なし 帯黒赤
色 帯黒赤色（２１）
（２１）────────────
────────────────────────２
８℃で３週間のインキュベーション後に観察色名：ＩＳ
ＣＣ−ＮＢＳ 色名 チャート
表２． Ｒ１０３−
３株の生理学的特徴 分 解：
酸生成＊ ：
アデニン
− アドニトール
− カゼイン
＋ Ｄ−アラビノース
− 馬尿酸
＋ Ｌ−アラビノース
＋ ヒポキサチン
− セロビオース
＋ チロシン
＋ ズルシトール
− キサンチン
− エリトリトー
ル −
Ｄ−フルクトース ＋
脱炭酸：
Ｄ−ガラクトース −
Ｄ−グルコース
＋ 安息香酸塩
− グリセロール
− クエン酸塩
− イノシトール
− 粘液酸塩
− ラクトース
− コハク酸塩
＋ Ｄ−マンニトール
＋ 酒石酸塩
− Ｄ−マンノー
ス −
Ｄ−メレジトース −
生成：
メリビオース −
メチル−α−
−
グ
ルコシド アミラーゼ
− ラフィノース
− エスクリナーゼ
＋ Ｌ−ラムノース
＋ ゲラチナーゼ
＋ Ｄ−リボース
＋ 硝酸レダクターゼ
＋ サリシン
＋ チロシナーゼ
− 溶性デンプン
＋ ウレアーゼ
− Ｄ−ソルビトール
−
Ｌ−
ソルボース − 増
殖：
スクロース ＋
トレハロース
− リゾチーム、０．００１％
− Ｄ−キシロース
＋ ＮａＣｌ，１〜７％
＋ ８
％ −
ｐＨ，５．８〜１１．０ ＋
２５〜３９℃ ＋
２２℃及び４２℃
− ──────────────────
──────────── ＊ 基本培
地： ＣｕＳＯ４・７Ｈ２Ｏを除いたプリダム−ゴット
リーブ 培地
（ＩＳＰ Ｎｏ．９） （ｃ） 化学分類学 Ｒ１０３−３株の全細胞水解物はメソ−ジアミノピメリ
ン酸、グルコース及びマズロースを含む。従って該株は
細胞壁ＩＩＩ 型及び糖Ｂ型に属する。リン脂質は含窒
素リン脂質なくホスファチジルグリセロール及びホスフ
ァチジルイノシトールを含み、従ってＰ−Ｉ型に属する
。 （ｄ） 分類学的位置 Ｒ１０３−３株の形態学及び化学分類学に基いて、該株
はアクチノマズラ属に属する。アクチノマズラのこれま
でに記載された既知種の中で、Ｒ１０３−３株はアクチ
ノマズラ・ベルコソスポラに生理学的に最も類似し、し
かし後者とは赤色拡散性色素の生成、ＮａＣｌに対する
耐性並びにグリセロール、ラクトース及びトレハロース
からの酸生成のないことに差異が認められる。従ってＲ
１０３−３株はアクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネ
オヒビスカ新亜種と帰属された。
４、５及び７中で気菌糸及び胞子鎖を形成し、ツァペッ
クの寒天及び天然有機培地例えばＩＳＰ培地Ｎｏ． ２
中で帯赤色拡散性色素（プラジマイシン）を多量に生ず
る。培養及び生理学的特徴はそれぞれ表１及び２中に示
される。 表１．
Ｒ１０３−３株の培養特徴 培 地
増 殖 気中菌糸 基中
菌糸 拡散性色素スクロース−ナイトレート
寒天 並 なし
非常に濃い 非常に濃い（ツァヘ゜ック−ト
゛ックス 寒天）
赤色（１４） 帯紫赤色
（２５７）トリフ゜トン−
酵母エキスフ゛ロス 貧
なし 濃赤色（１３） 並赤色（１
５）（ＩＳＰ Ｎｏ．１） 濁
らず酵母エキス−麦芽 良好
なし 非常に濃い 非常に暗いエキ
ス寒天（ＩＳＰ．Ｎｏ．２）
赤色（１４） 赤
色（１７）オートミール寒天 並
並； 並；
帯灰ピンク色（ＩＳＰ Ｎｏ．３）
淡ピンク色 ピンク
色 （８） 〜淡帯灰
（
７） （５） 赤色
（１８）無機塩−デンプン寒天 並
貧；白色 並 淡帯灰（
ＩＳＰ Ｎｏ．４）
ピンク色（５）
赤色（１８）ク゛リセロール−アスハ゜ラキ゛ン
寒天 貧 貧；白色 無
色 なし（ＩＳＰ Ｎｏ．５） ペプトン 良好
ほとんど 帯灰ピンク 非常に暗い−酵
母エキス− 鉄寒天（ＩＳＰ Ｎｏ．６）
なし； 白色 色（８） 〜 赤
色（１４）
濃
赤色（１３）チロシン寒天 並
貧；白色 並
淡帯黄（ＩＳＰ Ｎｏ．７）
赤
色（１５） ピンク色（２８）ク゛リコース
アスハ゜ラキ゛ン 貧
なし 無色
淡ピンク色寒天
（４）栄養寒天
並 貧；白色
暗ピンク色 暗赤色（１６）
（６） ベンネット寒天
良好 なし 帯黒赤
色 帯黒赤色（２１）
（２１）────────────
────────────────────────２
８℃で３週間のインキュベーション後に観察色名：ＩＳ
ＣＣ−ＮＢＳ 色名 チャート
表２． Ｒ１０３−
３株の生理学的特徴 分 解：
酸生成＊ ：
アデニン
− アドニトール
− カゼイン
＋ Ｄ−アラビノース
− 馬尿酸
＋ Ｌ−アラビノース
＋ ヒポキサチン
− セロビオース
＋ チロシン
＋ ズルシトール
− キサンチン
− エリトリトー
ル −
Ｄ−フルクトース ＋
脱炭酸：
Ｄ−ガラクトース −
Ｄ−グルコース
＋ 安息香酸塩
− グリセロール
− クエン酸塩
− イノシトール
− 粘液酸塩
− ラクトース
− コハク酸塩
＋ Ｄ−マンニトール
＋ 酒石酸塩
− Ｄ−マンノー
ス −
Ｄ−メレジトース −
生成：
メリビオース −
メチル−α−
−
グ
ルコシド アミラーゼ
− ラフィノース
− エスクリナーゼ
＋ Ｌ−ラムノース
＋ ゲラチナーゼ
＋ Ｄ−リボース
＋ 硝酸レダクターゼ
＋ サリシン
＋ チロシナーゼ
− 溶性デンプン
＋ ウレアーゼ
− Ｄ−ソルビトール
−
Ｌ−
ソルボース − 増
殖：
スクロース ＋
トレハロース
− リゾチーム、０．００１％
− Ｄ−キシロース
＋ ＮａＣｌ，１〜７％
＋ ８
％ −
ｐＨ，５．８〜１１．０ ＋
２５〜３９℃ ＋
２２℃及び４２℃
− ──────────────────
──────────── ＊ 基本培
地： ＣｕＳＯ４・７Ｈ２Ｏを除いたプリダム−ゴット
リーブ 培地
（ＩＳＰ Ｎｏ．９） （ｃ） 化学分類学 Ｒ１０３−３株の全細胞水解物はメソ−ジアミノピメリ
ン酸、グルコース及びマズロースを含む。従って該株は
細胞壁ＩＩＩ 型及び糖Ｂ型に属する。リン脂質は含窒
素リン脂質なくホスファチジルグリセロール及びホスフ
ァチジルイノシトールを含み、従ってＰ−Ｉ型に属する
。 （ｄ） 分類学的位置 Ｒ１０３−３株の形態学及び化学分類学に基いて、該株
はアクチノマズラ属に属する。アクチノマズラのこれま
でに記載された既知種の中で、Ｒ１０３−３株はアクチ
ノマズラ・ベルコソスポラに生理学的に最も類似し、し
かし後者とは赤色拡散性色素の生成、ＮａＣｌに対する
耐性並びにグリセロール、ラクトース及びトレハロース
からの酸生成のないことに差異が認められる。従ってＲ
１０３−３株はアクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネ
オヒビスカ新亜種と帰属された。
【００２３】Ｒ１０３−３株はまたプラジマイシンの既
知産生株アクチノマズラ・ヒビスカ（Ａｃｔｉｎｏｍａ
ｄｕｒａ ｈｉｂｉｓｃａ） とは異なる。表３にアク
チノマズラ・ヒビスカＰ１５７〜２株（ＡＴＣＣ Ｎｏ
．５３５５７）とＲ１０３−３株との示差特徴が示され
る。 表３．アクチノマズラ・ベルコソスポラ亜
種ネオヒビスカ Ｒ１０３−３
株とアクチノマズラ・ヒビスカ
Ｐ１５７−２株との示差特徴
Ｐ
１０３−３株 Ｐ１５７−２株 形態学： 胞子鎖
短、ホック
長、直線 胞子表面
いぼ状
平 滑 培養及び生理学的
特徴： チロシン寒天： 帯褐色色素
形成されず
形 成 グルコース−アスパラギン寒天：
増殖
貧
多 量 帯赤色色素
ほとんど
なし 多 量 利用： Ｌ−アラビノース
＋
− Ｄ−マンニトール
＋
− Ｌ−ラムノース
＋
− Ｄ−キシロー
ス
＋ −（ｉｉ） Ａ
１００１９株はＲ１０３−３株からＮ−メチル−Ｎ′−
ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン（ＮＴＧ）を用いる変
異により誘導される。Ａ１００１９の生物学的に純粋な
菌株はアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション
に受託番号ＡＴＣＣ５５０９１として寄託された。この
菌株は特許手続上の微生物の寄託の国際的承認に関する
ブダペスト条約下の寄託として受託された。Ｒ１０３−
３株の変異及び変異株の選別の操作が次に記載される。
知産生株アクチノマズラ・ヒビスカ（Ａｃｔｉｎｏｍａ
ｄｕｒａ ｈｉｂｉｓｃａ） とは異なる。表３にアク
チノマズラ・ヒビスカＰ１５７〜２株（ＡＴＣＣ Ｎｏ
．５３５５７）とＲ１０３−３株との示差特徴が示され
る。 表３．アクチノマズラ・ベルコソスポラ亜
種ネオヒビスカ Ｒ１０３−３
株とアクチノマズラ・ヒビスカ
Ｐ１５７−２株との示差特徴
Ｐ
１０３−３株 Ｐ１５７−２株 形態学： 胞子鎖
短、ホック
長、直線 胞子表面
いぼ状
平 滑 培養及び生理学的
特徴： チロシン寒天： 帯褐色色素
形成されず
形 成 グルコース−アスパラギン寒天：
増殖
貧
多 量 帯赤色色素
ほとんど
なし 多 量 利用： Ｌ−アラビノース
＋
− Ｄ−マンニトール
＋
− Ｌ−ラムノース
＋
− Ｄ−キシロー
ス
＋ −（ｉｉ） Ａ
１００１９株はＲ１０３−３株からＮ−メチル−Ｎ′−
ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン（ＮＴＧ）を用いる変
異により誘導される。Ａ１００１９の生物学的に純粋な
菌株はアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション
に受託番号ＡＴＣＣ５５０９１として寄託された。この
菌株は特許手続上の微生物の寄託の国際的承認に関する
ブダペスト条約下の寄託として受託された。Ｒ１０３−
３株の変異及び変異株の選別の操作が次に記載される。
【００２４】Ｒ１０３−３株を、溶性デンプン０．５％
、グルコース０．５％、魚肉エキス０．１％、酵母エキ
ス０．１％、ＮＺ−ｃａｓｅ０．２％、ＮａＣｌ ０
．２％、ＣａＣＯ３ ０．１ ％及び寒天１．６％から
なる改良ベンネット寒天； ｐＨ７．０、上で２８℃で
１４日間増殖させた。株の胞子を食塩水中に懸濁させ、
氷浴中の２０秒間の音波処理により分散させ、２５℃で
１０分間３５００ｒｐｍ における遠心分離により回収
し、１０ ｍＭトリス−ＨＣｌ 、 ｐＨ９．０、中に
再懸濁した。胞子懸濁液（３ｍｌ ）をＮＴＧ溶液〔水
−ジメチルスルホキシド９：１（ｖ／ｖ）の混合物中５
０００μｇ／ｍｌ 〕３ｍｌ と混合した。混合物を２
８℃で１時間緩やかに振とうした。ＮＴＧ処理した胞子
を遠心分離により回収し、食塩水中に再懸濁し、新寒天
平板上に広げ、２８℃で７日間インキュベートした。各
コロニーを摘み、新寒天平板に接種し、２８℃で７日間
インキュベートし、母培養平板として用いた。各菌体培
地を、Ｌ−グルタミン酸ナトリウム０．１％、Ｌ−メチ
オニン０．０５％、Ｌ−アルギニン０．０５％、溶性デ
ンプン１．０％、グルコース１．０％、（ＮＨ４）２Ｓ
Ｏ４ ０．０１％、Ｋ２ＨＰＯ４０．６％、ＭｇＳＯ４
・７Ｈ２Ｏ ０．０５％、ＮａＣｌ ０．０５％、
ＣａＣＯ３ ０．３％、塩溶液（水１リットル中、Ｆｅ
ＳＯ４ ・７Ｈ２Ｏ ０．１ｇ、ＺｎＳＯ４ ・７Ｈ２
Ｏ ０．１ｇ、ＭｎＣｌ２ ・４Ｈ２Ｏ ０．１ｇ）１
％ｖ／ｖ、 ｐＨ７．０からなる栄養培地（培地Ａ）１
０ｍｌ に移した。菌体培地を、２００ｒｐｍ で運転
する振とう機上で２８℃で１４日間インキュベートした
。各発酵ブロス中に生じたプラジマイシンＬは、酢酸メ
チル−ｎ−プロパノール−２８％アンモニア（３：７：
４）の溶媒系を用いるシリカゲルＴＬＣ〔メルク（Ｍｅ
ｒｃｋ Ｃｏ．）製キーゼルゲル（Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ
）６０Ｆ２５４ 〕並びに０．１５％（ｗ／ｖ）リン酸
カリウム緩衝液（ ｐＨ３．５）及びアセトニトリル（
３：１）の溶媒系を用い、２５４ｎｍで検出するＨＰＬ
Ｃ〔ウォターズ（Ｗａｔｅｒｓ） Ｍ６００、ＹＭＣ−
Ａ３０１−３〕により分析した。ＨＰＬＣに対する試料
は次のように調製した：発酵ブロスを５分間１０，００
０ｒｐｍ で遠心分離し、上澄み希ＨＣｌ で ｐＨ２
．０に調整し、再び遠心分離した。上澄みを希ＮａＯＨ
で ｐＨ５．０に調整し、遠心分離した。得られた沈降
物を水中に ｐＨ３．５で溶解し、アセトニリル−０．
１５％リン酸カリウム緩衝液（ ｐＨ３．５）（１：１
）で希釈することによりＳｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）〔
ミリポア−ウォーターズ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ−Ｗａｔ
ｅｒｓ） 〕に通した。濾液をＤＭＳＯと混合し（１：
１）、再びミリポア・フィルターＨＶＡ（０．４５μｍ
）に通して濾過した。その結果、変異株Ａ１００１９が
、プラジマイシンＡ及びＣに比べてより多くのプラジマ
イシンＬを生ずる能力に基づいてプラジマイシンＬの大
規模発酵のための産生微生物として選択された。
、グルコース０．５％、魚肉エキス０．１％、酵母エキ
ス０．１％、ＮＺ−ｃａｓｅ０．２％、ＮａＣｌ ０
．２％、ＣａＣＯ３ ０．１ ％及び寒天１．６％から
なる改良ベンネット寒天； ｐＨ７．０、上で２８℃で
１４日間増殖させた。株の胞子を食塩水中に懸濁させ、
氷浴中の２０秒間の音波処理により分散させ、２５℃で
１０分間３５００ｒｐｍ における遠心分離により回収
し、１０ ｍＭトリス−ＨＣｌ 、 ｐＨ９．０、中に
再懸濁した。胞子懸濁液（３ｍｌ ）をＮＴＧ溶液〔水
−ジメチルスルホキシド９：１（ｖ／ｖ）の混合物中５
０００μｇ／ｍｌ 〕３ｍｌ と混合した。混合物を２
８℃で１時間緩やかに振とうした。ＮＴＧ処理した胞子
を遠心分離により回収し、食塩水中に再懸濁し、新寒天
平板上に広げ、２８℃で７日間インキュベートした。各
コロニーを摘み、新寒天平板に接種し、２８℃で７日間
インキュベートし、母培養平板として用いた。各菌体培
地を、Ｌ−グルタミン酸ナトリウム０．１％、Ｌ−メチ
オニン０．０５％、Ｌ−アルギニン０．０５％、溶性デ
ンプン１．０％、グルコース１．０％、（ＮＨ４）２Ｓ
Ｏ４ ０．０１％、Ｋ２ＨＰＯ４０．６％、ＭｇＳＯ４
・７Ｈ２Ｏ ０．０５％、ＮａＣｌ ０．０５％、
ＣａＣＯ３ ０．３％、塩溶液（水１リットル中、Ｆｅ
ＳＯ４ ・７Ｈ２Ｏ ０．１ｇ、ＺｎＳＯ４ ・７Ｈ２
Ｏ ０．１ｇ、ＭｎＣｌ２ ・４Ｈ２Ｏ ０．１ｇ）１
％ｖ／ｖ、 ｐＨ７．０からなる栄養培地（培地Ａ）１
０ｍｌ に移した。菌体培地を、２００ｒｐｍ で運転
する振とう機上で２８℃で１４日間インキュベートした
。各発酵ブロス中に生じたプラジマイシンＬは、酢酸メ
チル−ｎ−プロパノール−２８％アンモニア（３：７：
４）の溶媒系を用いるシリカゲルＴＬＣ〔メルク（Ｍｅ
ｒｃｋ Ｃｏ．）製キーゼルゲル（Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ
）６０Ｆ２５４ 〕並びに０．１５％（ｗ／ｖ）リン酸
カリウム緩衝液（ ｐＨ３．５）及びアセトニトリル（
３：１）の溶媒系を用い、２５４ｎｍで検出するＨＰＬ
Ｃ〔ウォターズ（Ｗａｔｅｒｓ） Ｍ６００、ＹＭＣ−
Ａ３０１−３〕により分析した。ＨＰＬＣに対する試料
は次のように調製した：発酵ブロスを５分間１０，００
０ｒｐｍ で遠心分離し、上澄み希ＨＣｌ で ｐＨ２
．０に調整し、再び遠心分離した。上澄みを希ＮａＯＨ
で ｐＨ５．０に調整し、遠心分離した。得られた沈降
物を水中に ｐＨ３．５で溶解し、アセトニリル−０．
１５％リン酸カリウム緩衝液（ ｐＨ３．５）（１：１
）で希釈することによりＳｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）〔
ミリポア−ウォーターズ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ−Ｗａｔ
ｅｒｓ） 〕に通した。濾液をＤＭＳＯと混合し（１：
１）、再びミリポア・フィルターＨＶＡ（０．４５μｍ
）に通して濾過した。その結果、変異株Ａ１００１９が
、プラジマイシンＡ及びＣに比べてより多くのプラジマ
イシンＬを生ずる能力に基づいてプラジマイシンＬの大
規模発酵のための産生微生物として選択された。
【００２５】
全生成＊ プラジマイシンの比＊＊（％
） 株 培地 （μ
ｇ／ｍｌ） Ａ Ｂ Ｃ Ｄ
Ｅ ＬＲ−１０３−３（親）
Ａ ２９０ ５８
６ ２２ ２ １ １
１Ａ−１００１９（変異株） Ａ
３１０ ５７ １ ８
３ １ ３０＊ プラジマイシン
成分の測定。発酵ブロスを１０，０００ｒｐｍ で１０
分間遠心分離した。上澄みを０．０１Ｎ−ＮａＯＨ−Ｍ
ｅＯＨ（１：１）で希釈し、その光学濃度を５００ｎｍ
で測定した。抗生物質濃度はＢＵ−３６０８Ａ遊離塩基
の量として示した。１１日の発酵ブロスのデータ。 ＊＊ＨＰＬＣ（ウォーターズＭ６００、ＹＭＣ−Ａ３０
１−３システム）により、溶媒として０．１５％リン酸
カリウム−緩衝アセトニトリルの３：１混合物（ ｐＨ
３．５）を用い、２５４ｎｍにおけるＵＶ検定で測定。
全生成＊ プラジマイシンの比＊＊（％
） 株 培地 （μ
ｇ／ｍｌ） Ａ Ｂ Ｃ Ｄ
Ｅ ＬＲ−１０３−３（親）
Ａ ２９０ ５８
６ ２２ ２ １ １
１Ａ−１００１９（変異株） Ａ
３１０ ５７ １ ８
３ １ ３０＊ プラジマイシン
成分の測定。発酵ブロスを１０，０００ｒｐｍ で１０
分間遠心分離した。上澄みを０．０１Ｎ−ＮａＯＨ−Ｍ
ｅＯＨ（１：１）で希釈し、その光学濃度を５００ｎｍ
で測定した。抗生物質濃度はＢＵ−３６０８Ａ遊離塩基
の量として示した。１１日の発酵ブロスのデータ。 ＊＊ＨＰＬＣ（ウォーターズＭ６００、ＹＭＣ−Ａ３０
１−３システム）により、溶媒として０．１５％リン酸
カリウム−緩衝アセトニトリルの３：１混合物（ ｐＨ
３．５）を用い、２５４ｎｍにおけるＵＶ検定で測定。
【００２６】Ｒ１０３−３株とＡ１００１９株との間の
示差特性は表４中に示される。２菌株間には糖利用性に
明らかな差異がない。 表４ Ｒ１０３−３株とその変
異株Ｎｏ． Ａ１００１９
との示差特徴
培養特
徴 Ｒ１０３−３株
Ｎｏ． Ａ１００１９ スクロース−ナイ
ト Ｇ 並
貧 レート
寒天 ＡＭ なし
なし
Ｒ 非常に濃い帯紫
並ピンク色（５）
赤色（１４）
ＤＰ 非常に濃い赤色 濃帯紫赤色（２５
６）
（２５７） チロシン寒天
Ｇ 並
貧 （ＩＳＰ Ｎｏ．７
） ＡＭ 貧；白色
非常にわずか
Ｒ 並赤
色（１５） 並ピンク色（５）
ＤＰ 淡帯黄ピンク色（２８） 並ピンク色（
５） パパビザス（Ｐａｐａｖｉｚａｓ）
Ｇ 良好 良好
Ｖ−８寒天 ＡＭ
わずか；白色 なし
Ｒ
非常に濃い赤色（１４） 暗赤色（１６）
ＤＰ
非常に濃い赤色（１４） 非常に暗い赤色（１７
）────────────────────────
───────────２８℃における３週間のインキ
ュベーション後に観察Ｇ：増殖；ＡＭ：気中菌糸；Ｒ：
リバースカラー；ＤＰ：拡散性色素。 Ｂ．抗生物質生成 Ｒ１０３−３株は普通の培地中で培養すると新規抗生物
質のプラジマイシンＬ並びに既知プラジマイシンＡ、Ｂ
、Ｃ、Ｄ及びＥを生ずる。該微生物はアクチノミセス類
に対して既知の栄養源すなわち炭素及び窒素の資化性源
を含み、随意に無機塩及び他の既知増殖因子を加えた栄
養培地中で増殖される。好ましくは深部通気条件が多量
の抗生物質の製造に使用されるけれども、しかし表面培
養及びボトルもまた限定量の製造に使用できる。他のア
クチノミセス類の培養に使用される一般的操作は本発明
に適用できる。
示差特性は表４中に示される。２菌株間には糖利用性に
明らかな差異がない。 表４ Ｒ１０３−３株とその変
異株Ｎｏ． Ａ１００１９
との示差特徴
培養特
徴 Ｒ１０３−３株
Ｎｏ． Ａ１００１９ スクロース−ナイ
ト Ｇ 並
貧 レート
寒天 ＡＭ なし
なし
Ｒ 非常に濃い帯紫
並ピンク色（５）
赤色（１４）
ＤＰ 非常に濃い赤色 濃帯紫赤色（２５
６）
（２５７） チロシン寒天
Ｇ 並
貧 （ＩＳＰ Ｎｏ．７
） ＡＭ 貧；白色
非常にわずか
Ｒ 並赤
色（１５） 並ピンク色（５）
ＤＰ 淡帯黄ピンク色（２８） 並ピンク色（
５） パパビザス（Ｐａｐａｖｉｚａｓ）
Ｇ 良好 良好
Ｖ−８寒天 ＡＭ
わずか；白色 なし
Ｒ
非常に濃い赤色（１４） 暗赤色（１６）
ＤＰ
非常に濃い赤色（１４） 非常に暗い赤色（１７
）────────────────────────
───────────２８℃における３週間のインキ
ュベーション後に観察Ｇ：増殖；ＡＭ：気中菌糸；Ｒ：
リバースカラー；ＤＰ：拡散性色素。 Ｂ．抗生物質生成 Ｒ１０３−３株は普通の培地中で培養すると新規抗生物
質のプラジマイシンＬ並びに既知プラジマイシンＡ、Ｂ
、Ｃ、Ｄ及びＥを生ずる。該微生物はアクチノミセス類
に対して既知の栄養源すなわち炭素及び窒素の資化性源
を含み、随意に無機塩及び他の既知増殖因子を加えた栄
養培地中で増殖される。好ましくは深部通気条件が多量
の抗生物質の製造に使用されるけれども、しかし表面培
養及びボトルもまた限定量の製造に使用できる。他のア
クチノミセス類の培養に使用される一般的操作は本発明
に適用できる。
【００２７】栄養培地は適当な資化性炭素源例えばリボ
ース、グルコース、スクロース及びセロビオースを含む
べきである。窒素源として塩化アンモニウム、硫酸アン
モニウム、尿素、硝酸アンモニウム、硝酸ナトリウムな
どを単独で、又は有機窒素源例えばペプトン、肉エキス
、酵母エキス、コーンスティープリカー、大豆粉、綿実
粕などと組合わせて使用できる。必要であれば、ナトリ
ウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、リン酸塩
、硫酸塩、塩化物、臭化物、炭酸塩、亜鉛、マグネシウ
ム、マンガン、コバルト、鉄などの源を与えるために栄
養無機塩もまた加えることができる。
ース、グルコース、スクロース及びセロビオースを含む
べきである。窒素源として塩化アンモニウム、硫酸アン
モニウム、尿素、硝酸アンモニウム、硝酸ナトリウムな
どを単独で、又は有機窒素源例えばペプトン、肉エキス
、酵母エキス、コーンスティープリカー、大豆粉、綿実
粕などと組合わせて使用できる。必要であれば、ナトリ
ウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、リン酸塩
、硫酸塩、塩化物、臭化物、炭酸塩、亜鉛、マグネシウ
ム、マンガン、コバルト、鉄などの源を与えるために栄
養無機塩もまた加えることができる。
【００２８】Ｒ１０３−３株を、Ｄ−セリンの源を補足
した栄養培地中で培養すると、新規抗生物質プラジマイ
シンＦＬ、並びに既知プラジマイシンＦＡ−１及びＦＡ
−２が生成される。さらに、プラジマイシンＡ、Ｃ及び
Ｌもまた共生成される。意外にも、Ｒ１０３−３株がこ
れらの条件のもとでプラジマイシンＦＡ−１及びＦＡ−
２の有効な産生株であることが見いだされた。プラジマ
イシンＦＬ並びにＦＡ−１及びＦＡ−２の製造のために
Ｄ−セリン又はＤＬ−セリンを使用できる。
した栄養培地中で培養すると、新規抗生物質プラジマイ
シンＦＬ、並びに既知プラジマイシンＦＡ−１及びＦＡ
−２が生成される。さらに、プラジマイシンＡ、Ｃ及び
Ｌもまた共生成される。意外にも、Ｒ１０３−３株がこ
れらの条件のもとでプラジマイシンＦＡ−１及びＦＡ−
２の有効な産生株であることが見いだされた。プラジマ
イシンＦＬ並びにＦＡ−１及びＦＡ−２の製造のために
Ｄ−セリン又はＤＬ−セリンを使用できる。
【００２９】プラジマイシン成分を含む抗生物質複合物
の製造は産生微生物の良好な増殖に適する温度例えば２
５〜４０℃で行なうことができ、最も便宜には約２７〜
３２℃の温度で行なわれる。通常、最適の抗生物質の生
成はフラスコ発酵により５〜１２日のインキュベーショ
ン期間の振とう後に得られる。発酵をタンク発酵槽中で
行なうならば、斜面培養又は凍結乾燥菌株からの栄養ブ
ロス中の増殖接種菌の使用が望ましい。この方法で活性
接種菌を得た後、それを無菌的にタンク発酵槽中の発酵
培地に移す。タンク発酵槽中の抗生物質生成は通常３〜
１５日のインキュベーション後に最大に達する。タンク
発酵槽中のかくはんはかきまぜにより与えられ、通気は
かくはん混合物中への空気又は酸素の噴入により達成で
きる。抗生物質生成はＨＰＬＣ次いで分光法により、又
は普通の生物学的検定によりモニターできる。
の製造は産生微生物の良好な増殖に適する温度例えば２
５〜４０℃で行なうことができ、最も便宜には約２７〜
３２℃の温度で行なわれる。通常、最適の抗生物質の生
成はフラスコ発酵により５〜１２日のインキュベーショ
ン期間の振とう後に得られる。発酵をタンク発酵槽中で
行なうならば、斜面培養又は凍結乾燥菌株からの栄養ブ
ロス中の増殖接種菌の使用が望ましい。この方法で活性
接種菌を得た後、それを無菌的にタンク発酵槽中の発酵
培地に移す。タンク発酵槽中の抗生物質生成は通常３〜
１５日のインキュベーション後に最大に達する。タンク
発酵槽中のかくはんはかきまぜにより与えられ、通気は
かくはん混合物中への空気又は酸素の噴入により達成で
きる。抗生物質生成はＨＰＬＣ次いで分光法により、又
は普通の生物学的検定によりモニターできる。
【００３０】生じたプラジマイシンＬ及びプラジマイシ
ンＦＬは回収に適する方法により発酵ブロスから回収で
き、これらの方法の例には抽出、沈殿、クロマトグラフ
ィー及び他の技術的に認められた普通の技術が包含され
る。プラジマイシンＬ及びＦＬに対する好ましい分離及
び精製系列はそれぞれ実施例２及び５中に示される。プ
ラジマイシンＬ及びＦＬの製造に対し、本発明は上記特
定微生物に限定されず、抗生物質産生能力を保持するそ
の変種及び変異株の使用を包含することを理解すべきで
ある。そのような変種及び変異株は親株から種々の方法
例えばＸ線照射、ＵＶ照射及び化学的変異原例えばＮ−
メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジンにより
製造できる。そのような変異株の１つはＲ１０３−３株
から前記のようにＮＴＧによる変異により得られたＡ１
００１９株（ＡＴＣＣＮｏ． ５５０９１）である。Ａ
１００１９は、Ｒ１０３−３株に対するものと実質的に
同じ条件で培養してプラジマイシンＬを含むプラジマイ
シン抗生物質複合物を生成できる。
ンＦＬは回収に適する方法により発酵ブロスから回収で
き、これらの方法の例には抽出、沈殿、クロマトグラフ
ィー及び他の技術的に認められた普通の技術が包含され
る。プラジマイシンＬ及びＦＬに対する好ましい分離及
び精製系列はそれぞれ実施例２及び５中に示される。プ
ラジマイシンＬ及びＦＬの製造に対し、本発明は上記特
定微生物に限定されず、抗生物質産生能力を保持するそ
の変種及び変異株の使用を包含することを理解すべきで
ある。そのような変種及び変異株は親株から種々の方法
例えばＸ線照射、ＵＶ照射及び化学的変異原例えばＮ−
メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジンにより
製造できる。そのような変異株の１つはＲ１０３−３株
から前記のようにＮＴＧによる変異により得られたＡ１
００１９株（ＡＴＣＣＮｏ． ５５０９１）である。Ａ
１００１９は、Ｒ１０３−３株に対するものと実質的に
同じ条件で培養してプラジマイシンＬを含むプラジマイ
シン抗生物質複合物を生成できる。
【００３１】従って本発明の他の観点はアクチノマズラ
・ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカの抗生物質産生株を
、資化性炭素及び窒素源を含む培地中で深部通気条件下
に培養し、前記プラジマイシンを含む抗生物質複合物を
培地から回収し、所望のプラジマイシン化合物を前記抗
生物質複合物から分離することを含むプラジマイシンＡ
、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ及びＬを製造する方法を提供する。 好ましくは抗生物質産生株はＲ１０３−３株、ＡＴＣＣ
Ｎｏ． ５３９３０、及びＡ１００９１株、ＡＴＣＣＮ
ｏ． ５５０９１、である。好ましくはこの方法がプラ
ジマイシンＬの製造に使用される。
・ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカの抗生物質産生株を
、資化性炭素及び窒素源を含む培地中で深部通気条件下
に培養し、前記プラジマイシンを含む抗生物質複合物を
培地から回収し、所望のプラジマイシン化合物を前記抗
生物質複合物から分離することを含むプラジマイシンＡ
、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ及びＬを製造する方法を提供する。 好ましくは抗生物質産生株はＲ１０３−３株、ＡＴＣＣ
Ｎｏ． ５３９３０、及びＡ１００９１株、ＡＴＣＣＮ
ｏ． ５５０９１、である。好ましくはこの方法がプラ
ジマイシンＬの製造に使用される。
【００３２】本発明の他の観点はアクチノマズラ・ベル
コソスポラ亜種ネオヒビスカの抗生物質産生株を、資化
性炭素及び窒素源並びにＤ−セリンの源を含む培地中で
深部通気条件下に培養し、前記プラジマイシンを含む抗
生物質複合物を培地から回収し、所望プラジマイシン化
合物を前記抗生物質複合物から分離することを含むプラ
ジマイシンＦＡ−１、ＦＡ−２及びＦＬを製造する方法
を提供する。好ましくは抗生物質産生株はＲ１０３−３
株、ＡＴＣＣＮｏ． ５３９３０である。Ｄ−セリンの
源を含む培地中で培養するとＲ１０３−３株は、アクチ
ノマズラ・ヒビスカの種々の株である以前に知られた産
生株、例えばＡＴＣＣＮｏ． ５３８１５及びＡＴＣＣ
Ｎｏ． ５３８１６よりも一層効率よくプラジマイシン
ＦＡ−１／ＦＡ−２を生じ、従ってこの方法はプラジマ
イシンＦＡ−１／ＦＡ−２の製造のための改良法を提供
する。本発明の他の好ましい態様はプラジマイシンＦＬ
の製法を提供する。 ２．Ｎ−アルキル誘導体の製造 プラジマイシンＬ及びプラジマイシンＦＬの第二糖基は
、初めに抗生物質出発物質をアルデヒド又はケトンと反
応させてイミンを形成し、次いで形成されたイミンを還
元することを含む還元的アルキル化により第三級アミノ
基に転化できる。縮合及び還元は同一反応容器中で１段
階又は２つの別の段階で行なうことができる。カルボニ
ル反応物は１〜５個の炭素原子、好ましくは１〜３個の
炭素原子をもつアルデヒド又はケトン例えばホルムアル
デヒド、アセトアルデヒド、プロピオンアルデヒド及び
アセトンであることができる。イミンの還元は還元剤例
えば金属水素化物、例えば水素化ホウ素ナトリウム、水
素化シアノホウ素ナトリウム、及び水素化アルミニウム
リチウム、の使用により行なうことができる。反応は極
性有機溶媒又はその混合物例えば水、アセトニトリル、
低級アルカノール及びジメチルスルホキシド中で行なわ
れる。反応温度は特に制限されず、約２０〜約１００℃
であることができ；一般に、反応は便宜に室温で行なう
ことができる。我々の経験では室温で行なわれた還元的
アルキル化は通常１〜４日内で完了する。第三級アミノ
糖をもつプレジマイシンは一般に親化合物より高い水溶
性を示す。
コソスポラ亜種ネオヒビスカの抗生物質産生株を、資化
性炭素及び窒素源並びにＤ−セリンの源を含む培地中で
深部通気条件下に培養し、前記プラジマイシンを含む抗
生物質複合物を培地から回収し、所望プラジマイシン化
合物を前記抗生物質複合物から分離することを含むプラ
ジマイシンＦＡ−１、ＦＡ−２及びＦＬを製造する方法
を提供する。好ましくは抗生物質産生株はＲ１０３−３
株、ＡＴＣＣＮｏ． ５３９３０である。Ｄ−セリンの
源を含む培地中で培養するとＲ１０３−３株は、アクチ
ノマズラ・ヒビスカの種々の株である以前に知られた産
生株、例えばＡＴＣＣＮｏ． ５３８１５及びＡＴＣＣ
Ｎｏ． ５３８１６よりも一層効率よくプラジマイシン
ＦＡ−１／ＦＡ−２を生じ、従ってこの方法はプラジマ
イシンＦＡ−１／ＦＡ−２の製造のための改良法を提供
する。本発明の他の好ましい態様はプラジマイシンＦＬ
の製法を提供する。 ２．Ｎ−アルキル誘導体の製造 プラジマイシンＬ及びプラジマイシンＦＬの第二糖基は
、初めに抗生物質出発物質をアルデヒド又はケトンと反
応させてイミンを形成し、次いで形成されたイミンを還
元することを含む還元的アルキル化により第三級アミノ
基に転化できる。縮合及び還元は同一反応容器中で１段
階又は２つの別の段階で行なうことができる。カルボニ
ル反応物は１〜５個の炭素原子、好ましくは１〜３個の
炭素原子をもつアルデヒド又はケトン例えばホルムアル
デヒド、アセトアルデヒド、プロピオンアルデヒド及び
アセトンであることができる。イミンの還元は還元剤例
えば金属水素化物、例えば水素化ホウ素ナトリウム、水
素化シアノホウ素ナトリウム、及び水素化アルミニウム
リチウム、の使用により行なうことができる。反応は極
性有機溶媒又はその混合物例えば水、アセトニトリル、
低級アルカノール及びジメチルスルホキシド中で行なわ
れる。反応温度は特に制限されず、約２０〜約１００℃
であることができ；一般に、反応は便宜に室温で行なう
ことができる。我々の経験では室温で行なわれた還元的
アルキル化は通常１〜４日内で完了する。第三級アミノ
糖をもつプレジマイシンは一般に親化合物より高い水溶
性を示す。
【００３３】生物学的活性
本発明の代表的化合物を、サブローデキストロース寒天
又は１／１５Ｍリン酸塩緩衝液を含む酵母モルホロジー
寒天中の系列寒天希釈法により種々の真菌に対し試験管
内で試験した。例えば約１０６ 〜１０７ 細胞／ｍｌ
を含む真菌懸濁液約０．００３ｍｌ を、試験抗生物
質を含む寒天平板の表面にのせた。試験化合物の最小阻
止濃度（ＭＩＣ）値は培養を２８℃で４０〜６０時間イ
ンキュベートした後記録した。結果は表４ａ、４ｂ及び
４ｃ中に示されている。
又は１／１５Ｍリン酸塩緩衝液を含む酵母モルホロジー
寒天中の系列寒天希釈法により種々の真菌に対し試験管
内で試験した。例えば約１０６ 〜１０７ 細胞／ｍｌ
を含む真菌懸濁液約０．００３ｍｌ を、試験抗生物
質を含む寒天平板の表面にのせた。試験化合物の最小阻
止濃度（ＭＩＣ）値は培養を２８℃で４０〜６０時間イ
ンキュベートした後記録した。結果は表４ａ、４ｂ及び
４ｃ中に示されている。
【００３４】
表４ａ プラジマイシンＬ及びＮ−
メチルプラジマイシンＬ
の試験管内抗真菌活性
ＭＩＣ（μｇ／ｍｌ ）
Ｎ−メチル
試験微生物
フ゜ラシ゛マイシＬ フ゜ラシ゛マイシＬ
フ゜ラシ゛マイシＡ カンジダ−アルビ
カンス ６．３
１２．５ ６．３ （Ｃａｎ
ｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）ＩＡＭ４８８８
Ｃ．アルビカンス
１２．５ １２．５ １
００．０ （Ｃ． ａｌｂｉｃａｎｓ）Ａ９５
４０ クリプトコックス・
０．８ ６．３
１．６ ネオフォルマンス （Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒ
ｍａｎｓ）Ｄ４９ Ｃ．ネオフォルマンス
０．８
６．３ １．６ （Ｃ． ｎ
ｅｏｆｏｒｍａｎｓ）ＩＡＭ４５１４ アスペ
ルギルス・フミガーツス ３．１
６．３ １．６ （Ａ
ｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）ＩＡＭ２
５３０ Ａ．フミガーツス
３．１ ６．
３ ３．１ （Ａ． ｆｕｍｉ
ｇａｔｕｓ）ＩＡＭ２０３４ Ａ．フラーブス
１００
．０ ＞１００．０ ＞１００．０
（Ａ． ｆｌａｖｕｓ）ＦＡ２１４３６
フザリウム・モニリフォルメ ６
．３ １２．５ ６．３
（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ）Ａ
２２８４ トリコフィトン・
６．３ ２５．０
１．６ メンタグロフィテ
ス （Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｍｅｎｔａｇ
ｒｏｐｈｙｔｅｓ）Ｄ１５５ Ｔ．メンタグロ
フィテス １２．５
２５．０ ６．３ （
Ｔ． ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）＃４３２９
ブラストミセス・デルマチジス
３．１ ６．３ ６．３
（Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ ｄｅｒｍａｔｉｔｉ
ｄｉｓ）Ｄ４０ スポロトリックス・シエンキイ
０．８ １．６
１．６ （Ｓｐｏｒｏｔｈｒｉｘ ｓ
ｃｈｅｎｃｋｉｉ）ＩＦＯ８１５８ ペトリエ
リジウム・ボイジイ ２５．０
２５．０ ６．３ （Ｐ
ｅｔｒｉｅｌｌｉｄｉｕｍ ｂｏｙｄｉｉ）ＩＦＯ８０
７８ ムコール・スピノスス
＞１００．０ ＞１００．０
＞１００．０ （Ｍｕｃｏｒ ｓｐｉｎｏｓｕ
ｓ）ＩＦＯ５３１７ ────────────
─────────────────── 培地
：サブローデキストロース寒天接種菌：１０６ Ｃ
ＦＵ／ｍｌ 表４ｂ プラジマイシンＦ
Ｌ及びプラジマイシンＬの
試験管内抗真菌活性
ＭＩＣ（μｇ／ｍｌ）１
試験微生物２
フ゜ラシ゛マイシンＦＬ フ゜ラシ゛マイシンＬ
フ゜ラシ゛マイシンＡ サッカロミセス・セ
レビシエ ３．１ ６．
３ ６．３ （Ｓａｃｃｈａｒｏ
ｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）
ＡＴＣＣ９７６３ カンジダ・アルビカンス
６．３ ２５．０ １２．
５ （Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）Ａ
９５４０ カンジダ・アルビカンス
６．３ ６．３
６．３ （Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａ
ｎｓ） ＡＴＣＣ３２３５４（Ｂ３１１）
カンジダ・アルビカンス
６．３ １００．０ １２．
５ （Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）８
３−２−１４ （ジュンテンドー） カンジダ・アルビカンス
３．１ ３．１ ６．
３ （Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）Ａ
ＴＣＣ３８２４７ （ポリエン−Ｒ） カンジダ・トロピカリス
６．３ ＞１００．０ １２．
５ （Ｃａｎｄｉｄａ ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ
）８５−８ （キタサト） カンジダ・トロピカリス
６．３ １００．０ ＞１００．
０ （Ｃａｎｄｉｄａ ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ
）ＩＡＭ１０２４１ クリプトコックス・ネオ
フォルマンス ３．１ １．６
１．６ （Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎ
ｅｏｆｏｒｍａｎｓ）Ｄ４９ クリプトコック
ス・ネオフォルマンス １．６ ０．８
１．６ （Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃ
ｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）ＩＡＭ４５１４
アスペルギルス・フミガーツス ３．１
３．１ １．６
（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）ＩＡ
Ｍ２０３４ トリコフィトン・メンタグロフィ
テス ３．１ ３．１ ３．
１ （Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｍｅｎｔａ
ｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）＃４３２９ ─────
─────────────────────────
───１． ２８℃で４０時間のインキュベーション
後に測定（トリコフィトン・メンタグロフィテス：６０
時間、２８℃） ２． 接種菌大きさ１０６ 細胞／ｍｌ （トリコフ
ィトン・メンタグロフィテス：１０７ 細胞／ｍｌ ）
、１／１５Ｍリン酸塩緩衝液を含む酵母モルホロジー寒
天中。
メチルプラジマイシンＬ
の試験管内抗真菌活性
ＭＩＣ（μｇ／ｍｌ ）
Ｎ−メチル
試験微生物
フ゜ラシ゛マイシＬ フ゜ラシ゛マイシＬ
フ゜ラシ゛マイシＡ カンジダ−アルビ
カンス ６．３
１２．５ ６．３ （Ｃａｎ
ｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）ＩＡＭ４８８８
Ｃ．アルビカンス
１２．５ １２．５ １
００．０ （Ｃ． ａｌｂｉｃａｎｓ）Ａ９５
４０ クリプトコックス・
０．８ ６．３
１．６ ネオフォルマンス （Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒ
ｍａｎｓ）Ｄ４９ Ｃ．ネオフォルマンス
０．８
６．３ １．６ （Ｃ． ｎ
ｅｏｆｏｒｍａｎｓ）ＩＡＭ４５１４ アスペ
ルギルス・フミガーツス ３．１
６．３ １．６ （Ａ
ｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）ＩＡＭ２
５３０ Ａ．フミガーツス
３．１ ６．
３ ３．１ （Ａ． ｆｕｍｉ
ｇａｔｕｓ）ＩＡＭ２０３４ Ａ．フラーブス
１００
．０ ＞１００．０ ＞１００．０
（Ａ． ｆｌａｖｕｓ）ＦＡ２１４３６
フザリウム・モニリフォルメ ６
．３ １２．５ ６．３
（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ）Ａ
２２８４ トリコフィトン・
６．３ ２５．０
１．６ メンタグロフィテ
ス （Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｍｅｎｔａｇ
ｒｏｐｈｙｔｅｓ）Ｄ１５５ Ｔ．メンタグロ
フィテス １２．５
２５．０ ６．３ （
Ｔ． ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）＃４３２９
ブラストミセス・デルマチジス
３．１ ６．３ ６．３
（Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ ｄｅｒｍａｔｉｔｉ
ｄｉｓ）Ｄ４０ スポロトリックス・シエンキイ
０．８ １．６
１．６ （Ｓｐｏｒｏｔｈｒｉｘ ｓ
ｃｈｅｎｃｋｉｉ）ＩＦＯ８１５８ ペトリエ
リジウム・ボイジイ ２５．０
２５．０ ６．３ （Ｐ
ｅｔｒｉｅｌｌｉｄｉｕｍ ｂｏｙｄｉｉ）ＩＦＯ８０
７８ ムコール・スピノスス
＞１００．０ ＞１００．０
＞１００．０ （Ｍｕｃｏｒ ｓｐｉｎｏｓｕ
ｓ）ＩＦＯ５３１７ ────────────
─────────────────── 培地
：サブローデキストロース寒天接種菌：１０６ Ｃ
ＦＵ／ｍｌ 表４ｂ プラジマイシンＦ
Ｌ及びプラジマイシンＬの
試験管内抗真菌活性
ＭＩＣ（μｇ／ｍｌ）１
試験微生物２
フ゜ラシ゛マイシンＦＬ フ゜ラシ゛マイシンＬ
フ゜ラシ゛マイシンＡ サッカロミセス・セ
レビシエ ３．１ ６．
３ ６．３ （Ｓａｃｃｈａｒｏ
ｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）
ＡＴＣＣ９７６３ カンジダ・アルビカンス
６．３ ２５．０ １２．
５ （Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）Ａ
９５４０ カンジダ・アルビカンス
６．３ ６．３
６．３ （Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａ
ｎｓ） ＡＴＣＣ３２３５４（Ｂ３１１）
カンジダ・アルビカンス
６．３ １００．０ １２．
５ （Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）８
３−２−１４ （ジュンテンドー） カンジダ・アルビカンス
３．１ ３．１ ６．
３ （Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）Ａ
ＴＣＣ３８２４７ （ポリエン−Ｒ） カンジダ・トロピカリス
６．３ ＞１００．０ １２．
５ （Ｃａｎｄｉｄａ ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ
）８５−８ （キタサト） カンジダ・トロピカリス
６．３ １００．０ ＞１００．
０ （Ｃａｎｄｉｄａ ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ
）ＩＡＭ１０２４１ クリプトコックス・ネオ
フォルマンス ３．１ １．６
１．６ （Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎ
ｅｏｆｏｒｍａｎｓ）Ｄ４９ クリプトコック
ス・ネオフォルマンス １．６ ０．８
１．６ （Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃ
ｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）ＩＡＭ４５１４
アスペルギルス・フミガーツス ３．１
３．１ １．６
（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）ＩＡ
Ｍ２０３４ トリコフィトン・メンタグロフィ
テス ３．１ ３．１ ３．
１ （Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｍｅｎｔａ
ｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）＃４３２９ ─────
─────────────────────────
───１． ２８℃で４０時間のインキュベーション
後に測定（トリコフィトン・メンタグロフィテス：６０
時間、２８℃） ２． 接種菌大きさ１０６ 細胞／ｍｌ （トリコフ
ィトン・メンタグロフィテス：１０７ 細胞／ｍｌ ）
、１／１５Ｍリン酸塩緩衝液を含む酵母モルホロジー寒
天中。
【００３５】
表４ｃ Ｎ−メチ
ルプラジマイシンＦＬの
試験管内抗真菌活性
ＭＩＣ（μｇ／ｍｌ）１ 試
験管微生物２
Ｎ−メチルプラジマイシンＦＬ サッカロミセス
・セレビシエ
３．１ （Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ
ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）ＡＴＣＣ９７６３
カンジダ・アルビカンス
６．３ （Ｃａｎ
ｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）Ａ９５４０ カン
ジダ・アルビカンス
６．３ （Ｃａｎｄｉｄ
ａ ａｌｂｉｃａｎｓ）ＡＴＣＣ３２３５４（Ｂ３１１
） カンジダ・アルビカンス
６．３
（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）８３−２−１４
（ジュンテンドー） カンジダ・トロピカリス
１２．５ （Ｃ
ａｎｄｉｄａ ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ）８５−８
（キタサト） カンジダ・トロピカリス
１２．５ （Ｃ
ａｎｄｉｄａ ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ）ＩＡＭ１０２４
１ クリプトコックス・ネオフォルマンス
６．３ （Ｃｒｙｐ
ｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）Ｄ４９
クリプトコックス・ネオフォルマンス
６．３ （Ｃｒｙｐｔｏｃ
ｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）ＩＡＭ４５１４
アスペルギルス・フミガーツス
６．３ （Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）ＩＡＭ２０３
４ トリコフィトン・メンタグロフィテス
６．３ （Ｔｒｉｃ
ｈｏｐｈｙｔｏｎ ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）＃
４３２９ ────────────────
────────────────１． ２８℃で４
０時間のインキュベーション後に測定（トリコフィトン
・メンタグロフィテス：６０時間、２８℃） ２． 接種菌大きさ１０６ 細胞／ｍｌ （トリコフ
ィトン・メンタグロフィテス（１０７ 細胞／ｍｌ ）
、１／１５Ｍリン酸塩緩衝液を含む酵母モルホロジー寒
天中。
ルプラジマイシンＦＬの
試験管内抗真菌活性
ＭＩＣ（μｇ／ｍｌ）１ 試
験管微生物２
Ｎ−メチルプラジマイシンＦＬ サッカロミセス
・セレビシエ
３．１ （Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ
ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）ＡＴＣＣ９７６３
カンジダ・アルビカンス
６．３ （Ｃａｎ
ｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）Ａ９５４０ カン
ジダ・アルビカンス
６．３ （Ｃａｎｄｉｄ
ａ ａｌｂｉｃａｎｓ）ＡＴＣＣ３２３５４（Ｂ３１１
） カンジダ・アルビカンス
６．３
（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）８３−２−１４
（ジュンテンドー） カンジダ・トロピカリス
１２．５ （Ｃ
ａｎｄｉｄａ ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ）８５−８
（キタサト） カンジダ・トロピカリス
１２．５ （Ｃ
ａｎｄｉｄａ ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ）ＩＡＭ１０２４
１ クリプトコックス・ネオフォルマンス
６．３ （Ｃｒｙｐ
ｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）Ｄ４９
クリプトコックス・ネオフォルマンス
６．３ （Ｃｒｙｐｔｏｃ
ｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）ＩＡＭ４５１４
アスペルギルス・フミガーツス
６．３ （Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）ＩＡＭ２０３
４ トリコフィトン・メンタグロフィテス
６．３ （Ｔｒｉｃ
ｈｏｐｈｙｔｏｎ ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）＃
４３２９ ────────────────
────────────────１． ２８℃で４
０時間のインキュベーション後に測定（トリコフィトン
・メンタグロフィテス：６０時間、２８℃） ２． 接種菌大きさ１０６ 細胞／ｍｌ （トリコフ
ィトン・メンタグロフィテス（１０７ 細胞／ｍｌ ）
、１／１５Ｍリン酸塩緩衝液を含む酵母モルホロジー寒
天中。
【００３６】表４ａ〜４ｃ中のデータから知ることがで
きるように、本発明の抗生物質は種々の酵母及び真菌に
対して活性である。従って本発明の抗生物質は酵母又は
真菌感染で悩むヒトを含む動物宿主の治療に有用な薬物
である。動物及びヒトにおける真菌感染の治療に対して
本発明の抗生物質を抗真菌有効量で投与の許容される経
路により与えることができ、これらの経路には静脈内、
筋肉内、経口、鼻腔内及び体表感染に対する局所投与が
含まれ、しかしそれらに限定されない。好ましくは該抗
生物質は全身的に投与される。非経口投与のための配合
物には無菌の水性又は非水性溶液、懸濁液又は乳濁液が
包含される。それらはまた無菌の水、生理食塩水、又は
若干の他の無菌注射用媒質中に使用直前に溶解できる無
菌固体組成物の形態に製造できる。経口配合物は錠剤、
ゼラチンカプセル剤、粉末、口中錠、シロップ剤などの
形態であることができる。局所投与のために化合物はロ
ーション剤、外用薬、ゲル、クリーム、軟膏剤、チンキ
剤などの中へ混合することができる。単位剤形は薬学的
配合当業者に一般に知られた方法を用いて製造すること
ができる。
きるように、本発明の抗生物質は種々の酵母及び真菌に
対して活性である。従って本発明の抗生物質は酵母又は
真菌感染で悩むヒトを含む動物宿主の治療に有用な薬物
である。動物及びヒトにおける真菌感染の治療に対して
本発明の抗生物質を抗真菌有効量で投与の許容される経
路により与えることができ、これらの経路には静脈内、
筋肉内、経口、鼻腔内及び体表感染に対する局所投与が
含まれ、しかしそれらに限定されない。好ましくは該抗
生物質は全身的に投与される。非経口投与のための配合
物には無菌の水性又は非水性溶液、懸濁液又は乳濁液が
包含される。それらはまた無菌の水、生理食塩水、又は
若干の他の無菌注射用媒質中に使用直前に溶解できる無
菌固体組成物の形態に製造できる。経口配合物は錠剤、
ゼラチンカプセル剤、粉末、口中錠、シロップ剤などの
形態であることができる。局所投与のために化合物はロ
ーション剤、外用薬、ゲル、クリーム、軟膏剤、チンキ
剤などの中へ混合することができる。単位剤形は薬学的
配合当業者に一般に知られた方法を用いて製造すること
ができる。
【００３７】本発明の抗生物質に感受性の真菌に感染し
た宿主を治療するとき、投与の実際の好ましい経路及び
使用される投薬量は、真菌感染に治療に熟練した担当臨
床医の裁量であり、選ばれる個々の抗生物質、原因微生
物、その抗生物質に対する感受性、感染の重さ及び部位
、並びに患者の特徴例えば年令、体重、排泄の速さ、並
用薬物、及び一般的身体状態により変動することが理解
されよう。
た宿主を治療するとき、投与の実際の好ましい経路及び
使用される投薬量は、真菌感染に治療に熟練した担当臨
床医の裁量であり、選ばれる個々の抗生物質、原因微生
物、その抗生物質に対する感受性、感染の重さ及び部位
、並びに患者の特徴例えば年令、体重、排泄の速さ、並
用薬物、及び一般的身体状態により変動することが理解
されよう。
【００３８】以下の実施例は本発明の範囲を制限するこ
とのない例示である。 実施例１ アクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカＲ１
０３−３株の発酵によるプラジマイシンＬの製造Ａ
寒天斜面 アクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカＲ１
０３−３株（ＡＴＣＣＮｏ． ５３９３０）を改良ベン
ネット培地の寒天斜面上で２８℃で１４日間増殖させた
。培地の組成は溶性デンプン（日澱化学製）０．５％、
グルコース０．５％、魚肉エキス（ミクニカガクサンギ
ョウ製）０．１％、酵母エキス（オリエンタル酵母製）
０．１、ＮＺ−ｃａｓｅ〔シェフィールド（Ｓｈｅｆｆ
ｉｅｌｄ） 製〕０．２％、ＮａＣｌ ０．２％、Ｃａ
ＣＯ３ ０．１％及び寒天１．６％である。
とのない例示である。 実施例１ アクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカＲ１
０３−３株の発酵によるプラジマイシンＬの製造Ａ
寒天斜面 アクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカＲ１
０３−３株（ＡＴＣＣＮｏ． ５３９３０）を改良ベン
ネット培地の寒天斜面上で２８℃で１４日間増殖させた
。培地の組成は溶性デンプン（日澱化学製）０．５％、
グルコース０．５％、魚肉エキス（ミクニカガクサンギ
ョウ製）０．１％、酵母エキス（オリエンタル酵母製）
０．１、ＮＺ−ｃａｓｅ〔シェフィールド（Ｓｈｅｆｆ
ｉｅｌｄ） 製〕０．２％、ＮａＣｌ ０．２％、Ｃａ
ＣＯ３ ０．１％及び寒天１．６％である。
【００３９】Ｂ 種培養
斜面培養からの微生物増殖の一部を、溶性デンプン（日
澱化学製）１％、グリセロール１％、酵母エキス（オリ
エンタル酵母製）１％、ペプトン（ダイゴエイヨウ製）
０．５％、ＮａＣｌ ０．３％及びＣａＣＯ３ ０．２
％からなる栄養培地１００ｍｌ を入れた５００ｍｌ
三角フラスコに接種した。培地の ｐＨはオートクレー
ブ処理前に７．０に調整した。種培養は回転振とう機上
で２００ｒｐｍ で２８℃で７日間インキュベートした
。
澱化学製）１％、グリセロール１％、酵母エキス（オリ
エンタル酵母製）１％、ペプトン（ダイゴエイヨウ製）
０．５％、ＮａＣｌ ０．３％及びＣａＣＯ３ ０．２
％からなる栄養培地１００ｍｌ を入れた５００ｍｌ
三角フラスコに接種した。培地の ｐＨはオートクレー
ブ処理前に７．０に調整した。種培養は回転振とう機上
で２００ｒｐｍ で２８℃で７日間インキュベートした
。
【００４０】Ｃ フラスコ発酵
種菌培地５ｍｌ 部を、溶性デンプン（日澱化学製）１
％、グルコース１％、Ｌ−グルタミン酸ナトリウム０．
１％、Ｌ−メチオニン０．０５％、Ｌ−アルギニン０．
０５％、（ＮＨ４）２ＳＯ４ ０．１ ％、 ＭｇＳＯ
４・７Ｈ２Ｏ ０．０５％、ＮａＣｌ ０．０ ５％
、ＣａＣＯ３ ０．３％、Ｋ２ＨＰＯ４ ０．６％及び
塩溶液（水１リットル中に ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ０．
１ｇ、ＺｎＳＯ４ ・７Ｈ２Ｏ ０．１ｇ及び Ｍｎ
Ｃｌ２・４Ｈ２Ｏ ０．１ｇ）１％（ｖ／ｖ）からな
る生産培地（ＦＲ−１７）１００ｍｌ を入れた５００
ｍｌ 三角フラスコに移した。培地の ｐＨはオートク
レーブ処理の前に７．０に調整した。発酵は回転振とう
機（２００ｒｐｍ ）上で２８℃で１４日間行なった。 発酵ブロス中の抗生物質生成は分光光学的に測定した。 全プラジマイシンの生成は第１１日に最大２９０μｇ／
ｍｌ に達した。生じた種々の成分の割合は次のとおり
である： 全生成＊
プラジマイシンの割合＊＊（％）
（μｇ／ｍｌ ） Ａ Ｂ
Ｃ Ｄ Ｅ Ｆ
２９０ ５８
６ ２２ ２ １ １
１ ＊プラジマイシン成分の測定。 発酵ブロス１０，０００ｒｐｍ で１０分間遠心分離し
た。上澄みを０．０１Ｎ−ＮａＯＨ−ＭｅＯＨ（１：１
）で希釈し、その光学濃度を５００ｎｍで測定した。抗
生物質濃度はプラジマイシンＡ遊離塩基の量として示し
た。１１日の発酵ブロスのデータ。＊＊ ０．１５％
リン酸カリウム−緩衝アセトニトリルの３：１混合物（
ｐＨ３．５）を溶媒として用い、２５４ｎｍにおける
ＵＶ検出でＨＰＬＣ〔ウオーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）
Ｍ６００、ＹＭＣ−Ａ３０１−３システム）により測定
。
％、グルコース１％、Ｌ−グルタミン酸ナトリウム０．
１％、Ｌ−メチオニン０．０５％、Ｌ−アルギニン０．
０５％、（ＮＨ４）２ＳＯ４ ０．１ ％、 ＭｇＳＯ
４・７Ｈ２Ｏ ０．０５％、ＮａＣｌ ０．０ ５％
、ＣａＣＯ３ ０．３％、Ｋ２ＨＰＯ４ ０．６％及び
塩溶液（水１リットル中に ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ０．
１ｇ、ＺｎＳＯ４ ・７Ｈ２Ｏ ０．１ｇ及び Ｍｎ
Ｃｌ２・４Ｈ２Ｏ ０．１ｇ）１％（ｖ／ｖ）からな
る生産培地（ＦＲ−１７）１００ｍｌ を入れた５００
ｍｌ 三角フラスコに移した。培地の ｐＨはオートク
レーブ処理の前に７．０に調整した。発酵は回転振とう
機（２００ｒｐｍ ）上で２８℃で１４日間行なった。 発酵ブロス中の抗生物質生成は分光光学的に測定した。 全プラジマイシンの生成は第１１日に最大２９０μｇ／
ｍｌ に達した。生じた種々の成分の割合は次のとおり
である： 全生成＊
プラジマイシンの割合＊＊（％）
（μｇ／ｍｌ ） Ａ Ｂ
Ｃ Ｄ Ｅ Ｆ
２９０ ５８
６ ２２ ２ １ １
１ ＊プラジマイシン成分の測定。 発酵ブロス１０，０００ｒｐｍ で１０分間遠心分離し
た。上澄みを０．０１Ｎ−ＮａＯＨ−ＭｅＯＨ（１：１
）で希釈し、その光学濃度を５００ｎｍで測定した。抗
生物質濃度はプラジマイシンＡ遊離塩基の量として示し
た。１１日の発酵ブロスのデータ。＊＊ ０．１５％
リン酸カリウム−緩衝アセトニトリルの３：１混合物（
ｐＨ３．５）を溶媒として用い、２５４ｎｍにおける
ＵＶ検出でＨＰＬＣ〔ウオーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）
Ｍ６００、ＹＭＣ−Ａ３０１−３システム）により測定
。
【００４１】実施例２
プラジマイシンＬの分離及び精製
発酵ブロス（１０．０リットル）を遠心分離して菌糸塊
を除去した。上澄みを６Ｎ−ＨＣｌ を用いて ｐＨ４
．１になし、５℃で２時間保持した。暗赤色沈殿を濾過
により捕集し、次いで６Ｎ−ＮａＯＨで ｐＨ９．１に
調整した水９００ｍｌ 中に溶解した。溶液を濾過して
不溶性不純物を除去し、濾液を ｐＨ２．０に調整し、
次いでダイヤイオン （Ｄｉａｉｏｎ） ＨＰ−２０（
８００ｍｌ ）のカラム上にのせた。 カラムを水（３．０リットル）で洗浄し、６０％アセト
ン水溶液（ ｐＨ２．５）で溶離した。アセトンを真空
で除去し、赤色残留物を酢酸エチル（４００ｍｌ ）で
洗浄し、次いで乾燥し、プラジマイシンの複合物をそれ
らの塩酸塩として得た（４．５ｇ）。複合固体（４．５
ｇ）を ＣＨ３ＣＮ−０．１５％ ＫＨ２ＰＯ４ 、
ｐＨ３．５（２２：７８）の混合物４５０ｍｌ 中に溶
解し、同じ溶媒混合物と平衡させたＯＤＳ−Ａ６０（１
０リットル、ヤマムラ化学研製）上の逆相カラムクロマ
トグラフィーにかけた。溶離を上記溶媒混合物で行ない
、溶出液を分画した。画分をＨＰＬＣにより分析した〔
カラム：ＹＭＣＡ−３０１−３、４．６ｍｍ内径×１０
０ｍｍ、３μ、ＯＤＳ、ヤマムラ化学研製、移動相：
ＣＨ３ＣＮ−０．１５％ Ｋ２ＰＯ４、 ｐＨ３．５（
２５：７５）、流量：０．８ｍｌ ／分、検出：２５４
ｎｍにおけるＵＶ吸収、保持時間：プラジマイシンＬ１
０．７６分〕。プラジマイシンＬを含む画分をプールし
、減圧で濃縮してアセトニトリルを除去した。濃縮物を
ダイヤイオンＨＰ−２０クロマトグラフィーにより脱塩
して半純プラジマイシンＬ塩酸塩（５６３ｍｇ）を得た
。粉末（５０ｍｇ）を２４％アセトニトリル／リン酸塩
緩衝液（ ｐＨ３．５）中に溶解し、ＯＤＳカラム〔Ｒ
Ｐ−１８，２．２リットル、メルク （Ｍｅｒｃｋ Ｌ
ｔｄ）製〕上でクロマトグラフィーにかけ、同じ溶媒で
溶離した。所望化合物を含む画分を合わせて減圧で濃縮
してアセトニトリルを除去した。濃縮物をダイヤイオン
ＨＰ−２０カラム（０．２リットル）に通した。カラム
を水（０．６リットル）で洗浄し、６０％アセトン水溶
液（ ｐＨ３．０）で溶離した。溶出液を乾燥し、純プ
ラジマイシンＬ塩酸塩２４ｍｇを橙色粉末として得た（
ＨＰＬＣによる純度９９％）。塩酸塩を遊離形態に転化
し、不純物としての無機塩を除去するため、塩（１２ｍ
ｇ）の水溶液（３ｍｌ）を０．１Ｎ−ＮａＯＨで ｐＨ
５．６ に調整し、純双性イオン形態のプラジマイシン
Ｌ（５．０ｍｌ ）で析出させた。 プラジマイシンＬの物理化学的性質 形態：暗赤色無定型粉末 溶解性：ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド
及び酸性又はアルカリ性の水に溶性；エタノール、メタ
ノール及び水中に難溶。
を除去した。上澄みを６Ｎ−ＨＣｌ を用いて ｐＨ４
．１になし、５℃で２時間保持した。暗赤色沈殿を濾過
により捕集し、次いで６Ｎ−ＮａＯＨで ｐＨ９．１に
調整した水９００ｍｌ 中に溶解した。溶液を濾過して
不溶性不純物を除去し、濾液を ｐＨ２．０に調整し、
次いでダイヤイオン （Ｄｉａｉｏｎ） ＨＰ−２０（
８００ｍｌ ）のカラム上にのせた。 カラムを水（３．０リットル）で洗浄し、６０％アセト
ン水溶液（ ｐＨ２．５）で溶離した。アセトンを真空
で除去し、赤色残留物を酢酸エチル（４００ｍｌ ）で
洗浄し、次いで乾燥し、プラジマイシンの複合物をそれ
らの塩酸塩として得た（４．５ｇ）。複合固体（４．５
ｇ）を ＣＨ３ＣＮ−０．１５％ ＫＨ２ＰＯ４ 、
ｐＨ３．５（２２：７８）の混合物４５０ｍｌ 中に溶
解し、同じ溶媒混合物と平衡させたＯＤＳ−Ａ６０（１
０リットル、ヤマムラ化学研製）上の逆相カラムクロマ
トグラフィーにかけた。溶離を上記溶媒混合物で行ない
、溶出液を分画した。画分をＨＰＬＣにより分析した〔
カラム：ＹＭＣＡ−３０１−３、４．６ｍｍ内径×１０
０ｍｍ、３μ、ＯＤＳ、ヤマムラ化学研製、移動相：
ＣＨ３ＣＮ−０．１５％ Ｋ２ＰＯ４、 ｐＨ３．５（
２５：７５）、流量：０．８ｍｌ ／分、検出：２５４
ｎｍにおけるＵＶ吸収、保持時間：プラジマイシンＬ１
０．７６分〕。プラジマイシンＬを含む画分をプールし
、減圧で濃縮してアセトニトリルを除去した。濃縮物を
ダイヤイオンＨＰ−２０クロマトグラフィーにより脱塩
して半純プラジマイシンＬ塩酸塩（５６３ｍｇ）を得た
。粉末（５０ｍｇ）を２４％アセトニトリル／リン酸塩
緩衝液（ ｐＨ３．５）中に溶解し、ＯＤＳカラム〔Ｒ
Ｐ−１８，２．２リットル、メルク （Ｍｅｒｃｋ Ｌ
ｔｄ）製〕上でクロマトグラフィーにかけ、同じ溶媒で
溶離した。所望化合物を含む画分を合わせて減圧で濃縮
してアセトニトリルを除去した。濃縮物をダイヤイオン
ＨＰ−２０カラム（０．２リットル）に通した。カラム
を水（０．６リットル）で洗浄し、６０％アセトン水溶
液（ ｐＨ３．０）で溶離した。溶出液を乾燥し、純プ
ラジマイシンＬ塩酸塩２４ｍｇを橙色粉末として得た（
ＨＰＬＣによる純度９９％）。塩酸塩を遊離形態に転化
し、不純物としての無機塩を除去するため、塩（１２ｍ
ｇ）の水溶液（３ｍｌ）を０．１Ｎ−ＮａＯＨで ｐＨ
５．６ に調整し、純双性イオン形態のプラジマイシン
Ｌ（５．０ｍｌ ）で析出させた。 プラジマイシンＬの物理化学的性質 形態：暗赤色無定型粉末 溶解性：ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド
及び酸性又はアルカリ性の水に溶性；エタノール、メタ
ノール及び水中に難溶。
【００４２】ＭＰ： ＞２００℃（分解）。
【００４３】
【外１】
【００４４】ＳＩＭＳ： ｍ／ｚ ８７１ （Ｍ
＋Ｈ）＋ ． ＵＶ λｍａｘ ｎｍ（ε） ｉｎ ０．０１Ｎ ＨＣｌ−ＭｅＯＨ （１：１）：２
３４ （３３，４００）， ２９８ （２８，９００）
， ４６０（１２，０００）ｉｎ ０．０１Ｎ Ｎａ
ＯＨ−ＭｅＯＨ （１：１）： ２４１ （３２，７０
０）， ３１９ （１４，５００），４９８ （１３，
９００）ＩＲ （ＫＢｒ） ｃｍ−１： ３３８０
， ２９００， １６２０−１６００， １３８５，
１２９５， １２６０，１１６０， １０６０．１Ｈ
ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）
δ： １．３１ （３Ｈ， ｄ， Ｊ＝６．８）， １
．３７ （３Ｈ，ｄ， Ｊ＝７．３）， ２．３５ （
３Ｈ， ｓ）， ２．７５ （３Ｈ， ｓ），３．１０
（１Ｈ， ｔ， Ｊ＝９．０）， ３．１７ （１Ｈ
， ｔ−ｌｉｋｅ， Ｊ＝９．０）， ３．２１−３．
２６ （２Ｈ， ｍ）， ３．４９ （１Ｈ， ｄｄ，
Ｊ＝６．４， １１．５）， ３．５３−３．５８（
２Ｈ， ｍ）， ３．７６ （１Ｈ， ｄｄ， Ｊ＝１
．７， １１．５）， ３．９３ （１Ｈ， ｑｕｉ，
Ｊ＝６．８）， ３．９７ （３Ｈ， ｓ）， ３．
９９ （１Ｈ， ｍ）， ４．４６ （１Ｈ， ｑｕｉ
， Ｊ＝７．３）， ４．５０ （１Ｈ， ｄ， Ｊ＝
７．７）， ４．６１ （１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．８），
４．６５ （１Ｈ， ｄ， Ｊ＝９．８）， ４．７９
（１Ｈ， ｄ， Ｊ＝７．７）， ５．７９ ＊ （
１Ｈ， ｂｒ−ｓ）， ５．８５＊ （１Ｈ， ｂｒ−
ｓ）， ６．９１ （１Ｈ， ｄ， Ｊ＝２．６），
７．１３ （１Ｈ， ｂｒ−ｓ）， ７．３１ （１Ｈ
， ｄ， Ｊ＝２．６）， ８．０２ （１Ｈ， ｓ）
， ８．２０ ＊ （１Ｈ， ｂｒ−ｓ）， ８．３０
＊ （１Ｈ， ｂｒ−ｓ），８．３８＊ （１Ｈ， ｄ
， Ｊ＝６．８）， １２．８３ ＊（１Ｈ， ｓ）．
＊ Ｄ２Ｏ 添加で消滅 実施例３ Ａ１００１９株（ＡＴＣＣＮｏ． ５５０９１）の発酵
によるプラジマイシンＬの製造 変異株Ａ１００１９を実施例１．Ｂ中に示した組成と同
じ組成を有する種培地１００ｍｌ を入れた５００ｍｌ
三角フラスコ中で回転振とう機上２００ｒｐｍ で３
２℃で７日間増殖させた。種菌体培地５ｍｌ を、実施
例１．Ｃに示したと同じ組成を有する生産培地１００ｍ
ｌ を入れた５００ｍｌ 三角フラスコ中へ接種した。 発酵を回転振とう機上２００ｒｐｍ で２８℃で８日間
行なった。全プラジマイシンの生成は３４５μｇ／ｍｌ
であった。抗生物質成分の割合はプラジマイシンＬ３
４．１％、プラジマイシンＣ７．５％、及びプラジマイ
シンＡ４２．４％であった。
＋Ｈ）＋ ． ＵＶ λｍａｘ ｎｍ（ε） ｉｎ ０．０１Ｎ ＨＣｌ−ＭｅＯＨ （１：１）：２
３４ （３３，４００）， ２９８ （２８，９００）
， ４６０（１２，０００）ｉｎ ０．０１Ｎ Ｎａ
ＯＨ−ＭｅＯＨ （１：１）： ２４１ （３２，７０
０）， ３１９ （１４，５００），４９８ （１３，
９００）ＩＲ （ＫＢｒ） ｃｍ−１： ３３８０
， ２９００， １６２０−１６００， １３８５，
１２９５， １２６０，１１６０， １０６０．１Ｈ
ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）
δ： １．３１ （３Ｈ， ｄ， Ｊ＝６．８）， １
．３７ （３Ｈ，ｄ， Ｊ＝７．３）， ２．３５ （
３Ｈ， ｓ）， ２．７５ （３Ｈ， ｓ），３．１０
（１Ｈ， ｔ， Ｊ＝９．０）， ３．１７ （１Ｈ
， ｔ−ｌｉｋｅ， Ｊ＝９．０）， ３．２１−３．
２６ （２Ｈ， ｍ）， ３．４９ （１Ｈ， ｄｄ，
Ｊ＝６．４， １１．５）， ３．５３−３．５８（
２Ｈ， ｍ）， ３．７６ （１Ｈ， ｄｄ， Ｊ＝１
．７， １１．５）， ３．９３ （１Ｈ， ｑｕｉ，
Ｊ＝６．８）， ３．９７ （３Ｈ， ｓ）， ３．
９９ （１Ｈ， ｍ）， ４．４６ （１Ｈ， ｑｕｉ
， Ｊ＝７．３）， ４．５０ （１Ｈ， ｄ， Ｊ＝
７．７）， ４．６１ （１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．８），
４．６５ （１Ｈ， ｄ， Ｊ＝９．８）， ４．７９
（１Ｈ， ｄ， Ｊ＝７．７）， ５．７９ ＊ （
１Ｈ， ｂｒ−ｓ）， ５．８５＊ （１Ｈ， ｂｒ−
ｓ）， ６．９１ （１Ｈ， ｄ， Ｊ＝２．６），
７．１３ （１Ｈ， ｂｒ−ｓ）， ７．３１ （１Ｈ
， ｄ， Ｊ＝２．６）， ８．０２ （１Ｈ， ｓ）
， ８．２０ ＊ （１Ｈ， ｂｒ−ｓ）， ８．３０
＊ （１Ｈ， ｂｒ−ｓ），８．３８＊ （１Ｈ， ｄ
， Ｊ＝６．８）， １２．８３ ＊（１Ｈ， ｓ）．
＊ Ｄ２Ｏ 添加で消滅 実施例３ Ａ１００１９株（ＡＴＣＣＮｏ． ５５０９１）の発酵
によるプラジマイシンＬの製造 変異株Ａ１００１９を実施例１．Ｂ中に示した組成と同
じ組成を有する種培地１００ｍｌ を入れた５００ｍｌ
三角フラスコ中で回転振とう機上２００ｒｐｍ で３
２℃で７日間増殖させた。種菌体培地５ｍｌ を、実施
例１．Ｃに示したと同じ組成を有する生産培地１００ｍ
ｌ を入れた５００ｍｌ 三角フラスコ中へ接種した。 発酵を回転振とう機上２００ｒｐｍ で２８℃で８日間
行なった。全プラジマイシンの生成は３４５μｇ／ｍｌ
であった。抗生物質成分の割合はプラジマイシンＬ３
４．１％、プラジマイシンＣ７．５％、及びプラジマイ
シンＡ４２．４％であった。
【００４５】実施例４
アクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカＲ１
０３−３株の発酵によるプラジマイシンＦＬの製造実施
例１．Ｂで製造された種菌体培地５ｍｌ 部を、溶性デ
ンプン（日澱化学製）１％、グルコース１％、Ｌ−グル
タミン酸ナトリウム０．１％、Ｌ−メチオニン０．０５
％、Ｌ−アルギニン０．０５％、（ＮＨ４）２ＳＯ４
０．１ ％、 ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ０．０５％、Ｎａ
Ｃｌ ０．０ ５％、ＣａＣＯ３ ０．３％、Ｋ２ＨＰ
Ｏ４ ０．６％、塩溶液（水１リットル中に ＦｅＳＯ
４・７Ｈ２Ｏ ０．１ｇ及び ＭｎＣｌ２・４Ｈ２Ｏ
０．１ｇ）１％（ｖ／ｖ）及びＤＬ−セリン０．５
％（又はＤ−セリン０．２５％）からなる生産培地１０
０ｍｌ を入れた５００ｍｌ 三角フラスコに移した。 培地の ｐＨはオートクレーブ処理の前に７．０に調整
した。発酵は回転振とう機（２００ｒｐｍ ）上で２８
℃で１０日間行なった。発酵ブロス中の抗生物質生成は
分光光学的に測定した。全プラジマイシンの生成は第１
０日に最大３３０μｇ／ｍｌ に達した。プラジマイシ
ンＡ，Ｃ，ＦＡ−１、ＦＡ−２及びＬもまた同時に生成
した。プラジマイシンＦＬの含量はＨＰＬＣ分析により
全生成の約４．８％であると評価された。
０３−３株の発酵によるプラジマイシンＦＬの製造実施
例１．Ｂで製造された種菌体培地５ｍｌ 部を、溶性デ
ンプン（日澱化学製）１％、グルコース１％、Ｌ−グル
タミン酸ナトリウム０．１％、Ｌ−メチオニン０．０５
％、Ｌ−アルギニン０．０５％、（ＮＨ４）２ＳＯ４
０．１ ％、 ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ０．０５％、Ｎａ
Ｃｌ ０．０ ５％、ＣａＣＯ３ ０．３％、Ｋ２ＨＰ
Ｏ４ ０．６％、塩溶液（水１リットル中に ＦｅＳＯ
４・７Ｈ２Ｏ ０．１ｇ及び ＭｎＣｌ２・４Ｈ２Ｏ
０．１ｇ）１％（ｖ／ｖ）及びＤＬ−セリン０．５
％（又はＤ−セリン０．２５％）からなる生産培地１０
０ｍｌ を入れた５００ｍｌ 三角フラスコに移した。 培地の ｐＨはオートクレーブ処理の前に７．０に調整
した。発酵は回転振とう機（２００ｒｐｍ ）上で２８
℃で１０日間行なった。発酵ブロス中の抗生物質生成は
分光光学的に測定した。全プラジマイシンの生成は第１
０日に最大３３０μｇ／ｍｌ に達した。プラジマイシ
ンＡ，Ｃ，ＦＡ−１、ＦＡ−２及びＬもまた同時に生成
した。プラジマイシンＦＬの含量はＨＰＬＣ分析により
全生成の約４．８％であると評価された。
【００４６】実施例５
プラジマイシンＦＬの分離及び精製
採取したブロス（２０リットル、２００個のフラスコ）
を遠心分離し、菌糸ケークを除去した。上澄み（２０リ
ットル）をｎ−ブタノール−メタノール（１５：５）の
混合物２０リットルで ｐＨ２．４において抽出した。 溶媒抽出物を、１Ｎ−ＮａＯＨで ｐＨ９．０に調整し
たアルカリ水溶液３リットルの移した。溶液を ｐＨ３
．５に調整し、ダイヤイオンＨＰ−２００（２．３リッ
トル）のカラム上にのせた。カラムを水（１０リットル
）で洗浄し、６０％アセトン水溶液（ ｐＨ２．５）で
溶離した。所望生成物を含む画分をプールし、減圧で濃
縮し、次いで乾燥して暗赤色固体を得、それは塩酸塩と
してプラジマイシンの複合物であった（７．２ｇ）。複
合物（６．８ｇ）を水３４０ｍｌ 中に溶解し、溶液を
濾過して不溶性不純物を除去した。濾液を酢酸エチル１
５０ｍｌ で洗浄し（３回）、乾燥して部分精製複合物
を得た。残留物を ＣＨ３ＣＨ−０．１５％ ＫＨ２Ｐ
Ｏ４ 、 ｐＨ３．５（２２：７８）の溶液５００ｍｌ
中に溶解し、同じ混合溶液でと平衡させたＯＤＳ−Ａ
６０（１０リットル、ヤマムラ化学研製）のカラム上で
逆相クロマトグラフィーにかけた。溶離は上記混合溶液
で行ない、溶出液を０．５リットル画分で捕集した。画
分をＨＰＬＣにより分析した〔カラム：ＹＭＣゲルＡ−
３０１−３、４．６ｍｍ内径×１００ｍｍ、３μｍ、Ｏ
ＤＳ、ヤマムラ化学研製、移動相： ＣＨ３ＣＨ−０．
１５％ ＫＨ２ＰＯ４ 、 ｐＨ３．５（２５：７５）
、流量：０．８ｍｌ ／分、検出：２５４ｎｍにおける
ＵＶ吸収、保持時間：プラジマイシンＦＬ５．４１分〕
。プラジマイシンＦＬを含む画分をプールし（２．８リ
ットル）、減圧で濃縮してアセトニトリルを除去した。 濃縮物をダイヤイオンＨＰ−２０クロマトグラフィー（
５０ｍｌ ）により脱塩して半純プラジマイシンＦＬ塩
酸塩（４０ｍｇ）を得た。粉末（２４ｍｇ）アセトニト
リル／０．１５％リン酸塩緩衝液、 ｐＨ３．５（２２
：７８、２．５ｍｌ ）中に溶解し、ＯＤＳカラム（Ｏ
ＤＳ−Ａ６０、４０ｍｌ ）でクロマトグラフを行ない
、同じ溶媒で溶離した。所望化合物を含む画分を合わせ
（１００ｍｌ ）、減圧で濃縮してアセトニトリルを除
去した。濃縮物をダイヤイオンＨＰ−２０カラム（２０
ｍｌ ）に通した。カラムを水（１００ｍｌ ）で洗浄
し、６０％アセトン水溶液（ ｐＨ３．０）で溶離した
。溶出液を乾燥し、純プラジマイシンＦＬ塩酸塩１９．
５ｍｇを橙色粉末として得た（ＨＰＬＣによる純度：９
９％）。
を遠心分離し、菌糸ケークを除去した。上澄み（２０リ
ットル）をｎ−ブタノール−メタノール（１５：５）の
混合物２０リットルで ｐＨ２．４において抽出した。 溶媒抽出物を、１Ｎ−ＮａＯＨで ｐＨ９．０に調整し
たアルカリ水溶液３リットルの移した。溶液を ｐＨ３
．５に調整し、ダイヤイオンＨＰ−２００（２．３リッ
トル）のカラム上にのせた。カラムを水（１０リットル
）で洗浄し、６０％アセトン水溶液（ ｐＨ２．５）で
溶離した。所望生成物を含む画分をプールし、減圧で濃
縮し、次いで乾燥して暗赤色固体を得、それは塩酸塩と
してプラジマイシンの複合物であった（７．２ｇ）。複
合物（６．８ｇ）を水３４０ｍｌ 中に溶解し、溶液を
濾過して不溶性不純物を除去した。濾液を酢酸エチル１
５０ｍｌ で洗浄し（３回）、乾燥して部分精製複合物
を得た。残留物を ＣＨ３ＣＨ−０．１５％ ＫＨ２Ｐ
Ｏ４ 、 ｐＨ３．５（２２：７８）の溶液５００ｍｌ
中に溶解し、同じ混合溶液でと平衡させたＯＤＳ−Ａ
６０（１０リットル、ヤマムラ化学研製）のカラム上で
逆相クロマトグラフィーにかけた。溶離は上記混合溶液
で行ない、溶出液を０．５リットル画分で捕集した。画
分をＨＰＬＣにより分析した〔カラム：ＹＭＣゲルＡ−
３０１−３、４．６ｍｍ内径×１００ｍｍ、３μｍ、Ｏ
ＤＳ、ヤマムラ化学研製、移動相： ＣＨ３ＣＨ−０．
１５％ ＫＨ２ＰＯ４ 、 ｐＨ３．５（２５：７５）
、流量：０．８ｍｌ ／分、検出：２５４ｎｍにおける
ＵＶ吸収、保持時間：プラジマイシンＦＬ５．４１分〕
。プラジマイシンＦＬを含む画分をプールし（２．８リ
ットル）、減圧で濃縮してアセトニトリルを除去した。 濃縮物をダイヤイオンＨＰ−２０クロマトグラフィー（
５０ｍｌ ）により脱塩して半純プラジマイシンＦＬ塩
酸塩（４０ｍｇ）を得た。粉末（２４ｍｇ）アセトニト
リル／０．１５％リン酸塩緩衝液、 ｐＨ３．５（２２
：７８、２．５ｍｌ ）中に溶解し、ＯＤＳカラム（Ｏ
ＤＳ−Ａ６０、４０ｍｌ ）でクロマトグラフを行ない
、同じ溶媒で溶離した。所望化合物を含む画分を合わせ
（１００ｍｌ ）、減圧で濃縮してアセトニトリルを除
去した。濃縮物をダイヤイオンＨＰ−２０カラム（２０
ｍｌ ）に通した。カラムを水（１００ｍｌ ）で洗浄
し、６０％アセトン水溶液（ ｐＨ３．０）で溶離した
。溶出液を乾燥し、純プラジマイシンＦＬ塩酸塩１９．
５ｍｇを橙色粉末として得た（ＨＰＬＣによる純度：９
９％）。
【００４７】プラジマイシンＦＬの物理化学的性質形態
： 橙色無定形粉末 ＭＰ： ＞２００℃（分解） ＦＡＢ−ＭＳ（負）ｍ／ｚ： ８８６（Ｍ）ＵＶ
λｍａｘ ｎｍ（ε） ｉｎ ０．０１Ｎ ＨＣｌ−ＭｅＯＨ （１：１）：２
３４ （３１，９００）， ２９９ （２７，８００）
， ４５９（１０，６００）ｉｎ ０．０１Ｎ Ｎａ
ＯＨ−ＭｅＯＨ （１：１）： ２４２ （３４，５０
０）， ３１９ （１５，２００），４９７ （１３，
６００）ＩＲ （ＫＢｒ） ｃｍ−１： ３４００
， ２９４０， １７２０， １６３０−１６１０，
１３９０， １３３５， １２９５，１２６０， １１
６０， １０８０−１０６０．１Ｈ ＮＭＲ （４００
ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ： １．２９
（３Ｈ， ｄ， Ｊ＝６．８）， ２．３４ （３Ｈ，
ｓ）， ２．７１ （３Ｈ， ｓ）， ３．０５ （１
Ｈ， ｔ， Ｊ＝９．０）， ３．１６ （１Ｈ， ｔ
， Ｊ＝７．７）， ３．１８−３．２３ （２Ｈ，
ｍ）， ３．４１−３．５３ （３Ｈ， ｍ）， ３．
７１−３．８０ （３Ｈ， ｍ）， ３．９２ （１Ｈ
， ｑｕｉ， Ｊ＝７．７）， ３．９３−３．９７
（１Ｈ， ｍ）， ３．９５ （３Ｈ， ｓ）， ４．
４４−４．４９ （１Ｈ， ｍ）， ４．４７ （１Ｈ
， ｄ， Ｊ＝６．８），４．５５−４．６３ （２Ｈ
， ｍ）， ４．８０ （１Ｈ， ｄ， Ｊ＝８．１）
， ５．９０＊ （２Ｈ， ｂｒ−ｓ）， ６．９０
（１Ｈ，ｓ）， ７．０４ （１Ｈ， ｓ）， ７．２
５ （１Ｈ， ｄ， Ｊ＝２．１）， ７．９２ （１
Ｈ， ｓ）， ８．２０ ＊ （１Ｈ， ｂｒ−ｓ），
８．３４＊ （１Ｈ， ｂｒ−ｓ）， ８．４２＊
（１Ｈ， ｄ−ｌｉｋｅ）， １２．９５ ＊ （１Ｈ
， ｓ）．＊ Ｄ２Ｏ 添加で消滅 実施例６ アクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカの発
酵によるプラジマイシンＦＡ−及びＦＡ−２の製造Ａ
寒天斜面 アクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカＲ１
０３−３株（ＡＴＣＣＮｏ． ５３９３０）を、溶性デ
ンプン０．５％、魚肉エキス０．１％、酵母エキス０．
１％、ＮＺ−ｃａｓｅ〔シェフィールド（Ｓｈｅｆｆｉ
ｅｌｄ） ０．２％、ＮａＣｌ ０．２％、ＣａＣＯ３
０．１％及び寒天１．６％を含む変性ベンネット培地
の寒天斜面上で増殖させ、２８℃で１０日間インキュベ
ートした。 Ｂ 種培養 斜面培養からの微生物増殖の小部を、溶性デンプン１％
、グルコース１％、酵母エキス０．５％、ペプトン０．
５％、ＮａＣｌ ０．３％及びＣａＣＯ３ ０．２％か
らなる種培地１００ｍｌ を入れた５００ｍｌ 三角フ
ラスコに接種した。培地の ｐＨをオートクレーブ処理
の前に７．０に調整し、菌株を回転振とう機上で３２℃
で６日間インキュベートした。 Ｃ フラスコ発酵 得られた種菌体培地５ｍｌ 部を、グルコース３％、プ
ロテインＳ（大豆粉、味の素製）３％、ＣａＣＯ３ ０
．３％及びＤＬ−セリン０．５％からなる発酵培地１０
０ｍｌ を入れた他の５００ｍｌ 三角フラスコに移し
た。発酵を回転振とう機上で２８℃で１１日間行なった
。発酵ブロス中の全抗生物質活量をブロス希釈法により
カンジダ・アルビカンスＡ９５４０を検定菌として用い
サブローデキストロースブロス中で測定した。０．０１
Ｎ ＮａＯＨ−ＭｅＯＨ（１：１）溶液中の５００ｎ
ｍにおけるＵＶ検定もまた上記生物検定に並行して用い
た。プラジマイシンＡ塩酸塩
： 橙色無定形粉末 ＭＰ： ＞２００℃（分解） ＦＡＢ−ＭＳ（負）ｍ／ｚ： ８８６（Ｍ）ＵＶ
λｍａｘ ｎｍ（ε） ｉｎ ０．０１Ｎ ＨＣｌ−ＭｅＯＨ （１：１）：２
３４ （３１，９００）， ２９９ （２７，８００）
， ４５９（１０，６００）ｉｎ ０．０１Ｎ Ｎａ
ＯＨ−ＭｅＯＨ （１：１）： ２４２ （３４，５０
０）， ３１９ （１５，２００），４９７ （１３，
６００）ＩＲ （ＫＢｒ） ｃｍ−１： ３４００
， ２９４０， １７２０， １６３０−１６１０，
１３９０， １３３５， １２９５，１２６０， １１
６０， １０８０−１０６０．１Ｈ ＮＭＲ （４００
ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ： １．２９
（３Ｈ， ｄ， Ｊ＝６．８）， ２．３４ （３Ｈ，
ｓ）， ２．７１ （３Ｈ， ｓ）， ３．０５ （１
Ｈ， ｔ， Ｊ＝９．０）， ３．１６ （１Ｈ， ｔ
， Ｊ＝７．７）， ３．１８−３．２３ （２Ｈ，
ｍ）， ３．４１−３．５３ （３Ｈ， ｍ）， ３．
７１−３．８０ （３Ｈ， ｍ）， ３．９２ （１Ｈ
， ｑｕｉ， Ｊ＝７．７）， ３．９３−３．９７
（１Ｈ， ｍ）， ３．９５ （３Ｈ， ｓ）， ４．
４４−４．４９ （１Ｈ， ｍ）， ４．４７ （１Ｈ
， ｄ， Ｊ＝６．８），４．５５−４．６３ （２Ｈ
， ｍ）， ４．８０ （１Ｈ， ｄ， Ｊ＝８．１）
， ５．９０＊ （２Ｈ， ｂｒ−ｓ）， ６．９０
（１Ｈ，ｓ）， ７．０４ （１Ｈ， ｓ）， ７．２
５ （１Ｈ， ｄ， Ｊ＝２．１）， ７．９２ （１
Ｈ， ｓ）， ８．２０ ＊ （１Ｈ， ｂｒ−ｓ），
８．３４＊ （１Ｈ， ｂｒ−ｓ）， ８．４２＊
（１Ｈ， ｄ−ｌｉｋｅ）， １２．９５ ＊ （１Ｈ
， ｓ）．＊ Ｄ２Ｏ 添加で消滅 実施例６ アクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカの発
酵によるプラジマイシンＦＡ−及びＦＡ−２の製造Ａ
寒天斜面 アクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカＲ１
０３−３株（ＡＴＣＣＮｏ． ５３９３０）を、溶性デ
ンプン０．５％、魚肉エキス０．１％、酵母エキス０．
１％、ＮＺ−ｃａｓｅ〔シェフィールド（Ｓｈｅｆｆｉ
ｅｌｄ） ０．２％、ＮａＣｌ ０．２％、ＣａＣＯ３
０．１％及び寒天１．６％を含む変性ベンネット培地
の寒天斜面上で増殖させ、２８℃で１０日間インキュベ
ートした。 Ｂ 種培養 斜面培養からの微生物増殖の小部を、溶性デンプン１％
、グルコース１％、酵母エキス０．５％、ペプトン０．
５％、ＮａＣｌ ０．３％及びＣａＣＯ３ ０．２％か
らなる種培地１００ｍｌ を入れた５００ｍｌ 三角フ
ラスコに接種した。培地の ｐＨをオートクレーブ処理
の前に７．０に調整し、菌株を回転振とう機上で３２℃
で６日間インキュベートした。 Ｃ フラスコ発酵 得られた種菌体培地５ｍｌ 部を、グルコース３％、プ
ロテインＳ（大豆粉、味の素製）３％、ＣａＣＯ３ ０
．３％及びＤＬ−セリン０．５％からなる発酵培地１０
０ｍｌ を入れた他の５００ｍｌ 三角フラスコに移し
た。発酵を回転振とう機上で２８℃で１１日間行なった
。発酵ブロス中の全抗生物質活量をブロス希釈法により
カンジダ・アルビカンスＡ９５４０を検定菌として用い
サブローデキストロースブロス中で測定した。０．０１
Ｎ ＮａＯＨ−ＭｅＯＨ（１：１）溶液中の５００ｎ
ｍにおけるＵＶ検定もまた上記生物検定に並行して用い
た。プラジマイシンＡ塩酸塩
【００４８】
【外２】
【００４９】検定に対する標準試料として用いた。各成
分の測定はミクロソルブ・ショート（Ｍｉｃｒｏｓｏｒ
ｂ Ｓｈｏｒｔ） １Ｃ１８カラム〔レイニン・インス
トルメント（Ｒａｉｎｉｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｃ
ｏ．） 製〕を用い、アセトニトリル−０．１５％ Ｋ
Ｈ２ＰＯ４ （Ｈ３ＰＯ４ で ｐＨ３．５に調整）（
７：１７）で溶離するＨＰＬＣにより行なった。各プラ
ジマイシン成分の比はプラジマイシンＦＡ−１：ＦＡ−
２：Ａ：Ｃ（６２：１：３６：１）であった。時間経過
並びにプラジマイシンＦＡ−１及びＦＡ−２の生成比の
例は次のように示される：
第７日 第９日
第１１日 全力価（μｇ／ｍｌ ）
１，４７０ １，８７０
１，６００ ＦＡ−１＋ＦＡ−２
６３ ６２
６３ Ｄ タンク培養 十分に増殖した種菌体培地２０リットルを、タンク発酵
槽中の生産培地１００リットルに移した。生産培地の組
成はフラスコ発酵の培地組成と同じである。タンク発酵
を２５０ｒｐｍ におけるかくはん下に、１２０リット
ル／分の通気で３２℃で１０日間運転した。全抗生物質
力価は第９日に最大５２０μｇ／ｍｌ に達した。
分の測定はミクロソルブ・ショート（Ｍｉｃｒｏｓｏｒ
ｂ Ｓｈｏｒｔ） １Ｃ１８カラム〔レイニン・インス
トルメント（Ｒａｉｎｉｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｃ
ｏ．） 製〕を用い、アセトニトリル−０．１５％ Ｋ
Ｈ２ＰＯ４ （Ｈ３ＰＯ４ で ｐＨ３．５に調整）（
７：１７）で溶離するＨＰＬＣにより行なった。各プラ
ジマイシン成分の比はプラジマイシンＦＡ−１：ＦＡ−
２：Ａ：Ｃ（６２：１：３６：１）であった。時間経過
並びにプラジマイシンＦＡ−１及びＦＡ−２の生成比の
例は次のように示される：
第７日 第９日
第１１日 全力価（μｇ／ｍｌ ）
１，４７０ １，８７０
１，６００ ＦＡ−１＋ＦＡ−２
６３ ６２
６３ Ｄ タンク培養 十分に増殖した種菌体培地２０リットルを、タンク発酵
槽中の生産培地１００リットルに移した。生産培地の組
成はフラスコ発酵の培地組成と同じである。タンク発酵
を２５０ｒｐｍ におけるかくはん下に、１２０リット
ル／分の通気で３２℃で１０日間運転した。全抗生物質
力価は第９日に最大５２０μｇ／ｍｌ に達した。
【００５０】実施例７
プラジマイシンＦＡ−１及びＦＡ−２の分離実施例６の
発酵ブロスを回収し、遠心分離して菌糸塊を除去した。 上澄みを６Ｎ−ＨＣｌ で ｐＨ２．０ に調整し、遠
心分離して沈殿を不純物として除去した。上澄みを６Ｎ
−ＮａＯＨで ｐＨ５．５に調整し、生じた沈殿を濾過
により捕集した。沈殿を ｐＨ１０．０の水に溶解し、
次いで溶液を６Ｎ−ＨＣｌ で ｐＨ２．０ に調整し
、次いでダイヤイオンＨＰ−２０カラム（４．１リット
ル）上にのせた。カラムを水で洗浄し、０．００１Ｎ
ＨＣｌ −アセトン（４０：６０）で溶離した。プラ
ジマイシンを含む画分を捕集し（９．５リットル）、減
圧で４０℃で濃縮し、濃縮物（４００ｍｌ ）を凍結乾
燥し、約８０％の純度を有するプラジマイシン複合物（
２９ｇ）の帯赤色粉末を得た。 ＨＰＬＣにより分析した各成分の割合はプラジマイシン
ＦＡ−１ ６２．２％、プラジマイシンＦＡ−２
０．７％、プラジマイシンＡ３６．４％及びプラジマイ
シンＣ０．７％であった。この複合物をＯＤＳ６０Ａカ
ラム（ヤマムラ化学研製）及び溶離剤としてアセトニト
リル−０．１５％ ＫＨ２ＰＯ４（１Ｎ−Ｈ３ＰＯ４
で ｐＨ３．５に調整）（２２：７８、ｖ／ｖ）を用い
て逆相シリカゲルクロマトグラフィーにより個々の成分
に分離した。各活性画分を濃縮し、ダイヤイオンＨＰ−
２０で脱塩し、凍結乾燥した。
発酵ブロスを回収し、遠心分離して菌糸塊を除去した。 上澄みを６Ｎ−ＨＣｌ で ｐＨ２．０ に調整し、遠
心分離して沈殿を不純物として除去した。上澄みを６Ｎ
−ＮａＯＨで ｐＨ５．５に調整し、生じた沈殿を濾過
により捕集した。沈殿を ｐＨ１０．０の水に溶解し、
次いで溶液を６Ｎ−ＨＣｌ で ｐＨ２．０ に調整し
、次いでダイヤイオンＨＰ−２０カラム（４．１リット
ル）上にのせた。カラムを水で洗浄し、０．００１Ｎ
ＨＣｌ −アセトン（４０：６０）で溶離した。プラ
ジマイシンを含む画分を捕集し（９．５リットル）、減
圧で４０℃で濃縮し、濃縮物（４００ｍｌ ）を凍結乾
燥し、約８０％の純度を有するプラジマイシン複合物（
２９ｇ）の帯赤色粉末を得た。 ＨＰＬＣにより分析した各成分の割合はプラジマイシン
ＦＡ−１ ６２．２％、プラジマイシンＦＡ−２
０．７％、プラジマイシンＡ３６．４％及びプラジマイ
シンＣ０．７％であった。この複合物をＯＤＳ６０Ａカ
ラム（ヤマムラ化学研製）及び溶離剤としてアセトニト
リル−０．１５％ ＫＨ２ＰＯ４（１Ｎ−Ｈ３ＰＯ４
で ｐＨ３．５に調整）（２２：７８、ｖ／ｖ）を用い
て逆相シリカゲルクロマトグラフィーにより個々の成分
に分離した。各活性画分を濃縮し、ダイヤイオンＨＰ−
２０で脱塩し、凍結乾燥した。
【００５１】実施例８
Ｎ−メチルプラジマイシンＬ（ＩＩ，Ｒ１ ＝ＣＨ３
，Ｒ２ ＝ＣＨ３ ）の製造プラジマイシンＬ（１８ｍ
ｇ）を水１．８ｍｌ 中に溶解し、溶液を０．１Ｎ水酸
化ナトリウムの添加で ｐＨ７．８に調整し、アセトニ
トリル１．８ｍｌ で希釈した。次いでホルムアルデヒ
ド水溶液（＞３５％、０．１２ｍｌ）及び水素化シアノ
ホウ素ナトリウム（１８ｍｇ）を室温で溶液に加えた。 溶液を室温で４８時間放置し、反応の進行をＨＰＬＣに
よりモニターした。有機溶媒を真空で蒸発させ、水溶液
を水３０ｍｌ で希釈した。溶液をダイヤイオンＨＰ−
２０（５ｍｌ ）のカラム上にのせた。カラムを水３０
ｍｌで洗浄し、６０％アセトン水溶液（ ｐＨ３．０）
１０ｍｌ で溶離した。暗赤色溶出液を濃縮してＮ，Ｎ
−ジメチルプラジマイシンＬ塩酸塩の無定形固体（１８
ｍｇ）を得た。
，Ｒ２ ＝ＣＨ３ ）の製造プラジマイシンＬ（１８ｍ
ｇ）を水１．８ｍｌ 中に溶解し、溶液を０．１Ｎ水酸
化ナトリウムの添加で ｐＨ７．８に調整し、アセトニ
トリル１．８ｍｌ で希釈した。次いでホルムアルデヒ
ド水溶液（＞３５％、０．１２ｍｌ）及び水素化シアノ
ホウ素ナトリウム（１８ｍｇ）を室温で溶液に加えた。 溶液を室温で４８時間放置し、反応の進行をＨＰＬＣに
よりモニターした。有機溶媒を真空で蒸発させ、水溶液
を水３０ｍｌ で希釈した。溶液をダイヤイオンＨＰ−
２０（５ｍｌ ）のカラム上にのせた。カラムを水３０
ｍｌで洗浄し、６０％アセトン水溶液（ ｐＨ３．０）
１０ｍｌ で溶離した。暗赤色溶出液を濃縮してＮ，Ｎ
−ジメチルプラジマイシンＬ塩酸塩の無定形固体（１８
ｍｇ）を得た。
【００５２】ＭＰ： ＞１８０℃（分解）ＩＲ （Ｋ
Ｂｒ） ｃｍ−１： ３４００， １７３０， １
６２０， １４５０， １３８０， １３３５， １
２９５， １２５５，１１６０， １１３０， １０７
０．ＵＶ λｍａｘ （ｉｎ ０．０１Ｎ ＮａＯＨ
−５０％ ＭｅＯＨ）ｎｍ （ε）： ２１１ （３
０，６００），３１９ （１１，６００）， ５０１
（１１，１００）．（１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ
， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ： ３．０２ （６Ｈ，
ｂｒ−ｓ， Ｎ（ＣＨ３）２） ． ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：８８５（Ｍ＋Ｈ）＋ ．
Ｂｒ） ｃｍ−１： ３４００， １７３０， １
６２０， １４５０， １３８０， １３３５， １
２９５， １２５５，１１６０， １１３０， １０７
０．ＵＶ λｍａｘ （ｉｎ ０．０１Ｎ ＮａＯＨ
−５０％ ＭｅＯＨ）ｎｍ （ε）： ２１１ （３
０，６００），３１９ （１１，６００）， ５０１
（１１，１００）．（１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ
， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ： ３．０２ （６Ｈ，
ｂｒ−ｓ， Ｎ（ＣＨ３）２） ． ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：８８５（Ｍ＋Ｈ）＋ ．
【０
０５３】実施例９ Ｎ−メチルプラジマイシンＦＬ（ＩＩ，Ｒ１ ＝ＣＨ２
ＯＨ，Ｒ２ ＝ＣＨ３ ）の製造 プラジマイシンＦＬ塩酸塩（３７ｍｇ）を水４ｍｌ 中
に溶解し、溶液を０．１Ｎ水酸化ナトリウムの添加によ
り ｐＨ８．０に調整し、アセトニトリル４ｍｌ で希
釈した。次いでホルムアルデヒド水溶液（＞３５％、０
．３ｍｌ ）及び水素化シアノホウ素ナトリウム（４５
ｍｇ）を室温で溶液に加えた。反応混合物を室温で６６
時間放置し、反応の進行をＨＰＬＣによりモニターした
。反応混合物を真空で蒸発させた。残留物を水１０ｍｌ
に溶解し、使用前に ＣＨ３ＣＮ−０．１５％ ＫＨ
２ＰＯ４ 、 ｐＨ３．５（２５：７５）の混合物と平
衡させたＯＤＳカラム（ＲＰ−１８、２．２リットル、
メルク製）上の逆相クロマトグラフィーにかけた。溶離
を同じ溶媒混合物で行なった。所望化合物を含む画分を
合わせ（２．７リットル）、減圧で濃縮してＣＨ３ＣＮ
を除去した。濃縮物（２．２リットル）をダイヤイオン
ＨＰ−２０（５ｍｌ）に通した。カラムを水（３００ｍ
ｌ ）で洗浄し、６０％アセトン水溶液（ ｐＨ３．０
）で溶離した。溶出液（５０ｍｌ ）を濃縮し、乾燥し
て均一なＮ，Ｎ−ジメチルプラジマイシンＦＬ塩酸塩１
７ｍｇを得た。この化合物の純度はＨＰＬＣにより９９
％に評価された。
０５３】実施例９ Ｎ−メチルプラジマイシンＦＬ（ＩＩ，Ｒ１ ＝ＣＨ２
ＯＨ，Ｒ２ ＝ＣＨ３ ）の製造 プラジマイシンＦＬ塩酸塩（３７ｍｇ）を水４ｍｌ 中
に溶解し、溶液を０．１Ｎ水酸化ナトリウムの添加によ
り ｐＨ８．０に調整し、アセトニトリル４ｍｌ で希
釈した。次いでホルムアルデヒド水溶液（＞３５％、０
．３ｍｌ ）及び水素化シアノホウ素ナトリウム（４５
ｍｇ）を室温で溶液に加えた。反応混合物を室温で６６
時間放置し、反応の進行をＨＰＬＣによりモニターした
。反応混合物を真空で蒸発させた。残留物を水１０ｍｌ
に溶解し、使用前に ＣＨ３ＣＮ−０．１５％ ＫＨ
２ＰＯ４ 、 ｐＨ３．５（２５：７５）の混合物と平
衡させたＯＤＳカラム（ＲＰ−１８、２．２リットル、
メルク製）上の逆相クロマトグラフィーにかけた。溶離
を同じ溶媒混合物で行なった。所望化合物を含む画分を
合わせ（２．７リットル）、減圧で濃縮してＣＨ３ＣＮ
を除去した。濃縮物（２．２リットル）をダイヤイオン
ＨＰ−２０（５ｍｌ）に通した。カラムを水（３００ｍ
ｌ ）で洗浄し、６０％アセトン水溶液（ ｐＨ３．０
）で溶離した。溶出液（５０ｍｌ ）を濃縮し、乾燥し
て均一なＮ，Ｎ−ジメチルプラジマイシンＦＬ塩酸塩１
７ｍｇを得た。この化合物の純度はＨＰＬＣにより９９
％に評価された。
【００５４】ＭＰ： ＞１８０℃（分解）ＩＲ （Ｋ
Ｂｒ） ｃｍ−１： ３４００， ２９５０， １
７３０， １６３０−１６１０， １４５０， １３９
０， １３４０，１３００， １２６０， １０７０．
ＵＶ λｍａｘ （ｉｎ ０．０１Ｎ ＮａＯＨ−５
０％ ＭｅＯＨ）ｎｍ （ε）： ２４３ （３２，
８００），３２０ （１４，５００）， ４９８ （１
３，３００）．１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ
ＭＳＯ−ｄ６） δ：３．０１ （６Ｈ， Ｓ， Ｎ（
ＣＨ３）２） ． ＦＡＢ（＋）−ＭＳ（ｍ／ｚ）：９０１（Ｍ＋１）．
Ｂｒ） ｃｍ−１： ３４００， ２９５０， １
７３０， １６３０−１６１０， １４５０， １３９
０， １３４０，１３００， １２６０， １０７０．
ＵＶ λｍａｘ （ｉｎ ０．０１Ｎ ＮａＯＨ−５
０％ ＭｅＯＨ）ｎｍ （ε）： ２４３ （３２，
８００），３２０ （１４，５００）， ４９８ （１
３，３００）．１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ
ＭＳＯ−ｄ６） δ：３．０１ （６Ｈ， Ｓ， Ｎ（
ＣＨ３）２） ． ＦＡＢ（＋）−ＭＳ（ｍ／ｚ）：９０１（Ｍ＋１）．
【
００５５】実施例１０ Ｎ−エチルプラジマイシンＬ（ＩＩ，Ｒ１ ＝ＣＨ３
，Ｒ２ ＝ＣＨ２ ＣＨ３ ）の製造 実施例８の一般操作に従い、アセトアルデヒドをホルム
アルデヒドの代わりに用いると表題化合物が得られる。
００５５】実施例１０ Ｎ−エチルプラジマイシンＬ（ＩＩ，Ｒ１ ＝ＣＨ３
，Ｒ２ ＝ＣＨ２ ＣＨ３ ）の製造 実施例８の一般操作に従い、アセトアルデヒドをホルム
アルデヒドの代わりに用いると表題化合物が得られる。
【００５６】実施例１１
Ｎ−プロピルプラジマイシンＬ〔ＩＩ，Ｒ１ ＝ＣＨ３
，Ｒ２ ＝（ＣＨ２）２ ＣＨ３ 〕の製造実施例８
の一般操作に従い、プロピオンアルデヒドをホルムアル
デヒドの代わりに用いると表題化合物が得られる。
，Ｒ２ ＝（ＣＨ２）２ ＣＨ３ 〕の製造実施例８
の一般操作に従い、プロピオンアルデヒドをホルムアル
デヒドの代わりに用いると表題化合物が得られる。
【００５７】実施例１２
Ｎ−イソプロピルプラジマイシンＬ〔ＩＩ，Ｒ１ ＝Ｃ
Ｈ３，Ｒ２ ＝ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ３）２ 〕の製造実施
例８の一般操作に従い、アセトンをホルムアルデヒドの
代わりに用いると表題化合物が得られる。
Ｈ３，Ｒ２ ＝ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ３）２ 〕の製造実施
例８の一般操作に従い、アセトンをホルムアルデヒドの
代わりに用いると表題化合物が得られる。
【００５８】実施例１３
Ｎ−エチルプラジマイシンＦＬ（ＩＩ，Ｒ１ ＝ＣＨ２
ＯＨ，Ｒ２ ＝ＣＨ２ ＣＨ３）の製造 実施例９の一般操作に従い、アセトアルデヒドをホルム
アルデヒドの代わりに用いると表題化合物が得られる。
ＯＨ，Ｒ２ ＝ＣＨ２ ＣＨ３）の製造 実施例９の一般操作に従い、アセトアルデヒドをホルム
アルデヒドの代わりに用いると表題化合物が得られる。
【００５９】実施例１４
Ｎ−プロピルプラジマイシンＦＬ〔ＩＩ，Ｒ１ ＝ＣＨ
２ ＯＨ，Ｒ２ ＝（ＣＨ２）２ ＣＨ３ 〕の製造実
施例９の一般操作に従い、プロピオンアルデヒドをホル
ムアルデヒドの代わりに用いると表題化合物が得られる
。
２ ＯＨ，Ｒ２ ＝（ＣＨ２）２ ＣＨ３ 〕の製造実
施例９の一般操作に従い、プロピオンアルデヒドをホル
ムアルデヒドの代わりに用いると表題化合物が得られる
。
【００６０】実施例１５
化学合成によるプラジマイシンＬの製造Ａ プラジマ
イシンＢの製造 プラジマイシンＡナトリウム塩（６ｇ、７ミリモル）、
酢酸（２４０ｍｌ ）及び２Ｎ−ＨＣｌ （２４０ｍｌ
）の混合物を８０℃で７時間かくはんした。次いで溶
媒を蒸発させ、残留油状物質を水中に溶解した。溶液を
μボンダパク （Ｂｏｎｄａｐａｃｋ）Ｃ１８カラム（
４００ｍｌ ）上に吸収させ、カラムを水で洗浄し、２
５％アセトニトリル水溶液（１Ｎ−ＨＣｌ で ｐＨ３
．５に調製）で溶離した。所望生成物を含む画分を捕集
し、蒸発させるとプラジマイシンＢが得られた（３．２
５ｇ、６２％収率、ＨＰＬＣによる純度８５％）。この
生成物をさらに精製することなく次のベンジルオキシカ
ルボニル化に用いた。
イシンＢの製造 プラジマイシンＡナトリウム塩（６ｇ、７ミリモル）、
酢酸（２４０ｍｌ ）及び２Ｎ−ＨＣｌ （２４０ｍｌ
）の混合物を８０℃で７時間かくはんした。次いで溶
媒を蒸発させ、残留油状物質を水中に溶解した。溶液を
μボンダパク （Ｂｏｎｄａｐａｃｋ）Ｃ１８カラム（
４００ｍｌ ）上に吸収させ、カラムを水で洗浄し、２
５％アセトニトリル水溶液（１Ｎ−ＨＣｌ で ｐＨ３
．５に調製）で溶離した。所望生成物を含む画分を捕集
し、蒸発させるとプラジマイシンＢが得られた（３．２
５ｇ、６２％収率、ＨＰＬＣによる純度８５％）。この
生成物をさらに精製することなく次のベンジルオキシカ
ルボニル化に用いた。
【００６１】ＭＰ： １４０℃
ＩＲ υｍａｘ （ＫＢｒ） ｃｍ−１： ３４０
０， １７２０， １６００．
０， １７２０， １６００．
【００６２】
【外３】
【００６３】１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：
１．２７ （３Ｈ， ｄ， Ｊ＝６．４ Ｈｚ， ５
’−Ｍｅ）， １．３３ （３Ｈ， ｄ， Ｊ＝７．３
Ｈｚ， １７−Ｍｅ）， ２．３１ （３Ｈ， ｓ，
３−Ｍｅ）， ２．６９ （３Ｈ， ｓ， ４’−Ｎ
Ｍｅ）， ３．８８（１Ｈ， ｑ，５’−Ｈ）， ４．
４０ （１Ｈ， ｄｑ， Ｊ１７，ＮＨ ＝ ７．３
Ｈｚ， １７−Ｈ）， ｃａ， ４．５−４．６ （２
Ｈ，ｍ， ５− 及び６−Ｈ）， ４．７０ （１Ｈ，
ｍ， １’−Ｈ）， ６．９６ （１Ｈ， ｄ， Ｊ
１０，１２ ＝ ２．６ Ｈｚ， １０−Ｈ）， ７．
１８ （１Ｈ，ｓ， ４−Ｈ）， ７．３１ （１Ｈ，
ｄ， １２−Ｈ）， ８．０８ （１Ｈ， ｂｒｓ，
７−Ｈ）．Ｂ ４′−Ｎ−ベンジルオキシカルボニ
ルプラジマイシンＢの製造 プラジマイシンＢ（３．１３ｇ、４．２ミリモル）及び
Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド（２０
．８ｍｌ 、８４ミリモル）の乾燥塩化メチレン（１５
０ｍｌ ）中の混合物を溶液が得られるまで室温で約０
．５時間かくはんした。塩化ベンジルオキシカルボニル
（３．０ｍｌ 、２１ミリモル）を上記溶液に加え、か
くはんを２．５時間続けた。溶媒を蒸発させ、油状残留
物を氷水冷却下に順次メタノール（２１０ｍｌ ）及び
１Ｎ−ＨＣｌ （４２ｍｌ ）を加えた。混合物を室温
で０．５時間かくはんし、次いで溶媒を蒸発させた。残
留物を水中で摩砕し、濾過し、水及びエーテルで順次洗
浄し、固体（３．３２ｇ、収率９４％）を得、それは表
題化合物（６５％）及びそのメチルエステル（１９％）
であった。この試料をさらに精製することなく次の反応
に用いた。この試料の一部（１２０ｍｇ）をＣ１８カラ
ムにより溶離剤として５０％アセトニトリル水溶液（１
Ｎ−ＨＣｌ で ｐＨ３．５に調整）を用いて精製する
と表題化合物（４７ｍｇ、ＨＰＬＣにより９０％純度）
が得られた。
１．２７ （３Ｈ， ｄ， Ｊ＝６．４ Ｈｚ， ５
’−Ｍｅ）， １．３３ （３Ｈ， ｄ， Ｊ＝７．３
Ｈｚ， １７−Ｍｅ）， ２．３１ （３Ｈ， ｓ，
３−Ｍｅ）， ２．６９ （３Ｈ， ｓ， ４’−Ｎ
Ｍｅ）， ３．８８（１Ｈ， ｑ，５’−Ｈ）， ４．
４０ （１Ｈ， ｄｑ， Ｊ１７，ＮＨ ＝ ７．３
Ｈｚ， １７−Ｈ）， ｃａ， ４．５−４．６ （２
Ｈ，ｍ， ５− 及び６−Ｈ）， ４．７０ （１Ｈ，
ｍ， １’−Ｈ）， ６．９６ （１Ｈ， ｄ， Ｊ
１０，１２ ＝ ２．６ Ｈｚ， １０−Ｈ）， ７．
１８ （１Ｈ，ｓ， ４−Ｈ）， ７．３１ （１Ｈ，
ｄ， １２−Ｈ）， ８．０８ （１Ｈ， ｂｒｓ，
７−Ｈ）．Ｂ ４′−Ｎ−ベンジルオキシカルボニ
ルプラジマイシンＢの製造 プラジマイシンＢ（３．１３ｇ、４．２ミリモル）及び
Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド（２０
．８ｍｌ 、８４ミリモル）の乾燥塩化メチレン（１５
０ｍｌ ）中の混合物を溶液が得られるまで室温で約０
．５時間かくはんした。塩化ベンジルオキシカルボニル
（３．０ｍｌ 、２１ミリモル）を上記溶液に加え、か
くはんを２．５時間続けた。溶媒を蒸発させ、油状残留
物を氷水冷却下に順次メタノール（２１０ｍｌ ）及び
１Ｎ−ＨＣｌ （４２ｍｌ ）を加えた。混合物を室温
で０．５時間かくはんし、次いで溶媒を蒸発させた。残
留物を水中で摩砕し、濾過し、水及びエーテルで順次洗
浄し、固体（３．３２ｇ、収率９４％）を得、それは表
題化合物（６５％）及びそのメチルエステル（１９％）
であった。この試料をさらに精製することなく次の反応
に用いた。この試料の一部（１２０ｍｇ）をＣ１８カラ
ムにより溶離剤として５０％アセトニトリル水溶液（１
Ｎ−ＨＣｌ で ｐＨ３．５に調整）を用いて精製する
と表題化合物（４７ｍｇ、ＨＰＬＣにより９０％純度）
が得られた。
【００６４】ＭＰ： ２１５℃（分解）ＩＲ υｍ
ａｘ （ＫＢｒ） ｃｍ−１： ３３７０， １７２
０， １６６０， １６００．
ａｘ （ＫＢｒ） ｃｍ−１： ３３７０， １７２
０， １６６０， １６００．
【００６５】
【外４】
【００６６】１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ６−Ｄ２０
）δ： １．０２ ＆ １．０４ （３Ｈ， 各 ｄ
， Ｊ＝６．４ Ｈｚ， ５’−Ｍｅ），１．３２ （
３Ｈ， ｄ， Ｊ＝７．３ Ｈｚ， １７−Ｍｅ），
２．２９ ＆ ２．３０ （３Ｈ， 各ｓ， ３−Ｍｅ
）， ３．０８ ＆ ３．１３３Ｈ， 各 ｓ， ４’
−ＮＭｅ）， ３．９６ （３Ｈ， ｓ， １１−ＯＭ
ｅ）， ４．３９ （１Ｈ， ｑ， １７−Ｈ）， ４
．４６ （１Ｈ， ｂｒｄ， Ｊ５，６ ＝ １０．３
Ｈｚ， ５−Ｈ）， ４．５４ （１Ｈ， ｂｒｄ，
６−Ｈ）， ４．６０ （１Ｈ， ｄ， Ｊ１’，２
’ ＝ ７．３Ｈｚ， １’−Ｈ）， ５．０６ ＆
５．１０ （２Ｈ，各 ＡＢｑ， Ｊ ＝ １２．８
Ｈｚ， −ＣＨＰｈ）， ６．９５ （１Ｈ， ｄ，
Ｊ１０，１２ ＝ ２．１ Ｈｚ， １０−Ｈ）， ７
．０９ （１Ｈ， ｂｒｓ， ４−Ｈ），７．３０ （
１Ｈ， ｄ， １２−Ｈ）， ｃａ． ７．４（５Ｈ，
ｍ，Ｐｈ）， ８．０８ （１Ｈ， ｂｒｓ， ７−
Ｈ）． ＦＡＢ（＋）−ＭＳ（ｍ／ｚ）：８４３（Ｍ＋Ｈ）．Ｃ
４′−ベンジルオキシカルボニルプラジマイシンＢ
メチルエステルの製造塩化チオニル（１．４ｍｌ ）及
び４′−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルプラジマイシン
Ｂをメタノール（１００ｍｌ ）と乾燥１，２−ジクロ
ロエタン（３０ｍｌ）との冷混合物に加え、その混合物
を室温で３時間かくはんした。溶媒を除去し、残留物を
シリカゲル〔ワコゲル （Ｗａｋｏｇｅｌ）Ｃ−２００
、４５０ｇ、 ＣＨＣｌ３中〕カラムによりＣＨＣｌ３
−ＣＨ３ＯＨ （１５：１，ｖ／ｖ）を溶離剤として
精製して表題化合物（２．８０ｇ、８６％収率）を濃赤
色粉末として得た、ＨＰＬＣにより９５％純度。
）δ： １．０２ ＆ １．０４ （３Ｈ， 各 ｄ
， Ｊ＝６．４ Ｈｚ， ５’−Ｍｅ），１．３２ （
３Ｈ， ｄ， Ｊ＝７．３ Ｈｚ， １７−Ｍｅ），
２．２９ ＆ ２．３０ （３Ｈ， 各ｓ， ３−Ｍｅ
）， ３．０８ ＆ ３．１３３Ｈ， 各 ｓ， ４’
−ＮＭｅ）， ３．９６ （３Ｈ， ｓ， １１−ＯＭ
ｅ）， ４．３９ （１Ｈ， ｑ， １７−Ｈ）， ４
．４６ （１Ｈ， ｂｒｄ， Ｊ５，６ ＝ １０．３
Ｈｚ， ５−Ｈ）， ４．５４ （１Ｈ， ｂｒｄ，
６−Ｈ）， ４．６０ （１Ｈ， ｄ， Ｊ１’，２
’ ＝ ７．３Ｈｚ， １’−Ｈ）， ５．０６ ＆
５．１０ （２Ｈ，各 ＡＢｑ， Ｊ ＝ １２．８
Ｈｚ， −ＣＨＰｈ）， ６．９５ （１Ｈ， ｄ，
Ｊ１０，１２ ＝ ２．１ Ｈｚ， １０−Ｈ）， ７
．０９ （１Ｈ， ｂｒｓ， ４−Ｈ），７．３０ （
１Ｈ， ｄ， １２−Ｈ）， ｃａ． ７．４（５Ｈ，
ｍ，Ｐｈ）， ８．０８ （１Ｈ， ｂｒｓ， ７−
Ｈ）． ＦＡＢ（＋）−ＭＳ（ｍ／ｚ）：８４３（Ｍ＋Ｈ）．Ｃ
４′−ベンジルオキシカルボニルプラジマイシンＢ
メチルエステルの製造塩化チオニル（１．４ｍｌ ）及
び４′−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルプラジマイシン
Ｂをメタノール（１００ｍｌ ）と乾燥１，２−ジクロ
ロエタン（３０ｍｌ）との冷混合物に加え、その混合物
を室温で３時間かくはんした。溶媒を除去し、残留物を
シリカゲル〔ワコゲル （Ｗａｋｏｇｅｌ）Ｃ−２００
、４５０ｇ、 ＣＨＣｌ３中〕カラムによりＣＨＣｌ３
−ＣＨ３ＯＨ （１５：１，ｖ／ｖ）を溶離剤として
精製して表題化合物（２．８０ｇ、８６％収率）を濃赤
色粉末として得た、ＨＰＬＣにより９５％純度。
【００６７】ＭＰ： ２００°−２０５℃（分解）。
ＩＲ υｍａｘ （ＫＢｒ） ｃｍ−１： ３４０
０， １７３０， １６７０， １６２０， １４４０
．
０， １７３０， １６７０， １６２０， １４４０
．
【００６８】
【外５】
【００６９】１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ６−Ｄ２０
）δ： １．０３ ＆ １．０４ （３Ｈ， 各ｄ，
Ｊ＝６．９ Ｈｚ，５’−Ｍｅ），１．３２ （３Ｈ
， ｄ， Ｊ＝７．３ Ｈｚ， １７−Ｍｅ）， ２．
２６ ＆ ２．２７ （３Ｈ，各ｓ， ３−Ｍｅ），
３．０８ ＆ ３．１３（３Ｈ，各 ｓ， ４’−ＮＭ
ｅ）， ３．６６ （３Ｈ， ｓ， ＣＯＯＭｅ），
３．７３ （１Ｈ， ｍ， ５’−Ｈ）， ３．９３
（３Ｈ， ｓ，１１−ＯＭｅ）， ４．４４ （１Ｈ，
ｑ， １７−Ｈ）， ４．５０ （１Ｈ， ｄ， Ｊ
５．６ ＝ １０．９ Ｈｚ，５−Ｈ）， ４．６１
（１Ｈ， ｄ， Ｊ１’，２’ ＝ ７．６ Ｈｚ，
１’−Ｈ）， ［５．００ ＆ ５．１２ （１Ｈ，
ＡＢｑ， Ｊ ＝ １２．９ Ｈｚ） 及び５．１０
（１Ｈ， ｓ）， −ＣＨＰｈ］， ６．８８ （１Ｈ
， ｂｒｓ， １０−Ｈ）， ７．０４ （１Ｈ， ｓ
， ４−Ｈ）， ７．２５ （１Ｈ，ｂｒｓ， １２−
Ｈ）， ｃａ． ７．４ （５Ｈ， ｍ， Ｐｈ），
７．９８ （１Ｈ， ｓ， ７−Ｈ）．ＦＡＢ（＋）−
ＭＳ（ｍ／ｚ）：８５７（Ｍ＋Ｈ），８７９（Ｍ＋Ｎａ
）． Ｄ プラジマイシンＬの製造 ４′−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルプラジマイシンＢ
メチルエステル（１．０３ｇ、１．２ミリモル）、シア
ン化第二水銀（２．４３ｇ、９．２ミリモル）、臭化第
二水銀（１．０８ｇ、３ミリモル）及びモレキュラーシ
ーブ３Ａ（１２ｇ）の乾燥１，２−ジクロロエタン（２
４０ｍｌ ）中のかくはん懸濁液にテトラ−Ｏ−アセチ
ル−α−Ｄ−グルコピラノシルブロミド（１．４８ｇ、
３ミリモル）を加え、混合物をかくはん下に９０℃（浴
温）で加熱した。１５、２１及び８４時間後に、シアン
化第二水銀（２．４３ｇ）、臭化第二水銀（１．０８ｇ
）及びテトラ−Ｏ−アセチルグルコシルブロミド（２、
１．４８ｇ）のセットを加え、混合物を合計１０３時間
加熱した。不溶物を濾過し、クロロホルムで洗浄し、濾
液を合わせて１０％ ＮａＨＣＯ３ 水溶液、水及びブ
ラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空で蒸発
させた。残留油状物質（５．９７ｇ）をシリカゲル（ワ
コゲルＣ−２００，１００ｇ、トルエン中）カラム上で
溶離剤としてトルエン、トルエン−酢酸エチル（２：１
）及びクロロホルム−メタノール（１０：１）を用いて
クロマトグラフを行なった。クロロホルム−メタノール
溶出液を合わせて蒸発させた。残留物（２．７０ｇ）を
シリカゲル（ワコゲルＣ−２００，１００ｇ、ＣＨＣｌ
３ 中）のカラムによりクロロホルム−メタノール（１
００：１、５０：１、２５：１及び１０：１）で溶離し
て分離し、結合生成物の２画分、画分Ａ （ｔｌｃ，
ＣＨＣｌ３： ＭｅＯＨ＝２５：１でＦｆ ０．３５；
濃赤色粉末、２８３ｍｇ）及び画分Ｂ （Ｆｆ ０．５
２、橙色粉末、２．０３ｇ）を得た。
）δ： １．０３ ＆ １．０４ （３Ｈ， 各ｄ，
Ｊ＝６．９ Ｈｚ，５’−Ｍｅ），１．３２ （３Ｈ
， ｄ， Ｊ＝７．３ Ｈｚ， １７−Ｍｅ）， ２．
２６ ＆ ２．２７ （３Ｈ，各ｓ， ３−Ｍｅ），
３．０８ ＆ ３．１３（３Ｈ，各 ｓ， ４’−ＮＭ
ｅ）， ３．６６ （３Ｈ， ｓ， ＣＯＯＭｅ），
３．７３ （１Ｈ， ｍ， ５’−Ｈ）， ３．９３
（３Ｈ， ｓ，１１−ＯＭｅ）， ４．４４ （１Ｈ，
ｑ， １７−Ｈ）， ４．５０ （１Ｈ， ｄ， Ｊ
５．６ ＝ １０．９ Ｈｚ，５−Ｈ）， ４．６１
（１Ｈ， ｄ， Ｊ１’，２’ ＝ ７．６ Ｈｚ，
１’−Ｈ）， ［５．００ ＆ ５．１２ （１Ｈ，
ＡＢｑ， Ｊ ＝ １２．９ Ｈｚ） 及び５．１０
（１Ｈ， ｓ）， −ＣＨＰｈ］， ６．８８ （１Ｈ
， ｂｒｓ， １０−Ｈ）， ７．０４ （１Ｈ， ｓ
， ４−Ｈ）， ７．２５ （１Ｈ，ｂｒｓ， １２−
Ｈ）， ｃａ． ７．４ （５Ｈ， ｍ， Ｐｈ），
７．９８ （１Ｈ， ｓ， ７−Ｈ）．ＦＡＢ（＋）−
ＭＳ（ｍ／ｚ）：８５７（Ｍ＋Ｈ），８７９（Ｍ＋Ｎａ
）． Ｄ プラジマイシンＬの製造 ４′−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルプラジマイシンＢ
メチルエステル（１．０３ｇ、１．２ミリモル）、シア
ン化第二水銀（２．４３ｇ、９．２ミリモル）、臭化第
二水銀（１．０８ｇ、３ミリモル）及びモレキュラーシ
ーブ３Ａ（１２ｇ）の乾燥１，２−ジクロロエタン（２
４０ｍｌ ）中のかくはん懸濁液にテトラ−Ｏ−アセチ
ル−α−Ｄ−グルコピラノシルブロミド（１．４８ｇ、
３ミリモル）を加え、混合物をかくはん下に９０℃（浴
温）で加熱した。１５、２１及び８４時間後に、シアン
化第二水銀（２．４３ｇ）、臭化第二水銀（１．０８ｇ
）及びテトラ−Ｏ−アセチルグルコシルブロミド（２、
１．４８ｇ）のセットを加え、混合物を合計１０３時間
加熱した。不溶物を濾過し、クロロホルムで洗浄し、濾
液を合わせて１０％ ＮａＨＣＯ３ 水溶液、水及びブ
ラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空で蒸発
させた。残留油状物質（５．９７ｇ）をシリカゲル（ワ
コゲルＣ−２００，１００ｇ、トルエン中）カラム上で
溶離剤としてトルエン、トルエン−酢酸エチル（２：１
）及びクロロホルム−メタノール（１０：１）を用いて
クロマトグラフを行なった。クロロホルム−メタノール
溶出液を合わせて蒸発させた。残留物（２．７０ｇ）を
シリカゲル（ワコゲルＣ−２００，１００ｇ、ＣＨＣｌ
３ 中）のカラムによりクロロホルム−メタノール（１
００：１、５０：１、２５：１及び１０：１）で溶離し
て分離し、結合生成物の２画分、画分Ａ （ｔｌｃ，
ＣＨＣｌ３： ＭｅＯＨ＝２５：１でＦｆ ０．３５；
濃赤色粉末、２８３ｍｇ）及び画分Ｂ （Ｆｆ ０．５
２、橙色粉末、２．０３ｇ）を得た。
【００７０】画分Ａ （２７０ｍｇ）のメタノール（２
７ｍｌ ）中の溶液に１Ｎ−ＮａＯＨ（６ｍｌ）を加え
、混合物を室温で１時間かくはんした。混合物を１Ｎ−
ＨＣｌ で ｐＨ６．５ に調整し、水（１００ｍｌ
）で希釈し、蒸発させて有機溶媒を除去した。水溶液を
ダイヤイオンＨＰ−２０（５０ｍｌ ）のカラム上にの
せ、カラムを水で洗浄し、４０％アセトニトリル水溶液
で溶離し、４′−Ｎ−ＣＢＺ−プラジマイシンＬを含む
粗画分（２２４ｍｇ）を得、それをさらに逆相カラム（
ウオーターズ、μボンダパクＣ１８、５５〜１０５μ、
４００ｍｌ ）により精製し、４５％アセトニトリル水
溶液（１Ｎ−ＨＣｌ で ｐＨ３．５に調整）で溶離し
て半純４′−Ｎ−ＣＢＺ−プラジマイシンＬ（５７ｍｇ
）を得た、ＨＰＬＣによる純度７５％〔保持時間９．４
分；Ａ／Ｂ＝４０／６０〕。得られた４′−Ｎ−ＣＢＺ
−プラジマイシンＬの混合物（５０ｍｇ）及び１０％Ｐ
ｄ−Ｃ（２０ｍｇ）のメタノール（２０ｍｌ ）及び水
（４ｍｌ ）中の混合物を２時間水素化した。触媒を除
去し、濾液を蒸発させ、残留物を逆相カラム（ウオータ
ーズ、μボンダパクＣ１８、８０ｍｌ ）で、２０〜２
５％アセトニトリル水溶液（１Ｎ−ＨＣｌで ｐＨ３．
５に調整）を溶離剤として精製し、プラジマイシンＬ（
１２ｍｇ、収率１．１％、ＨＰＬＣによる純度８５％）
を濃赤色粉末として得た。
７ｍｌ ）中の溶液に１Ｎ−ＮａＯＨ（６ｍｌ）を加え
、混合物を室温で１時間かくはんした。混合物を１Ｎ−
ＨＣｌ で ｐＨ６．５ に調整し、水（１００ｍｌ
）で希釈し、蒸発させて有機溶媒を除去した。水溶液を
ダイヤイオンＨＰ−２０（５０ｍｌ ）のカラム上にの
せ、カラムを水で洗浄し、４０％アセトニトリル水溶液
で溶離し、４′−Ｎ−ＣＢＺ−プラジマイシンＬを含む
粗画分（２２４ｍｇ）を得、それをさらに逆相カラム（
ウオーターズ、μボンダパクＣ１８、５５〜１０５μ、
４００ｍｌ ）により精製し、４５％アセトニトリル水
溶液（１Ｎ−ＨＣｌ で ｐＨ３．５に調整）で溶離し
て半純４′−Ｎ−ＣＢＺ−プラジマイシンＬ（５７ｍｇ
）を得た、ＨＰＬＣによる純度７５％〔保持時間９．４
分；Ａ／Ｂ＝４０／６０〕。得られた４′−Ｎ−ＣＢＺ
−プラジマイシンＬの混合物（５０ｍｇ）及び１０％Ｐ
ｄ−Ｃ（２０ｍｇ）のメタノール（２０ｍｌ ）及び水
（４ｍｌ ）中の混合物を２時間水素化した。触媒を除
去し、濾液を蒸発させ、残留物を逆相カラム（ウオータ
ーズ、μボンダパクＣ１８、８０ｍｌ ）で、２０〜２
５％アセトニトリル水溶液（１Ｎ−ＨＣｌで ｐＨ３．
５に調整）を溶離剤として精製し、プラジマイシンＬ（
１２ｍｇ、収率１．１％、ＨＰＬＣによる純度８５％）
を濃赤色粉末として得た。
【００７１】ＭＰ： １５５℃（分解）。
ＩＲ υｍａｘ （ＫＢｒ） ｃｍ−１ １
７２０，１６００， １５１０．
７２０，１６００， １５１０．
【００７２】
【外６】
【００７３】１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ６） δ
： １．２８ （３Ｈ， ｄ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ
， ５’−ＣＨ３）， １．３３ （３ｄ， Ｊ＝
７．７ Ｈｚ， １７−ＣＨ３）， ２．３１ （３Ｈ
， ｓ， ３−ＣＨ３）， ２．７２ （３Ｈ， ｂｒ
ｓ， ４’−ＮＣＨ３）， ３．９６（３Ｈ， ｓ，
１１−ＯＣＨ３）， ４．４０ （Ｈ， 五重線、
Ｊ ＝ ７．３ Ｈｚ， １７−Ｈ），４．４８ （１
Ｈ， ｄ， Ｊ＝ ７．３ Ｈｚ， １”−Ｈ）， ４
．６１ （２Ｈ， ｂｒｓ， ５−Ｈ 及び６−Ｈ），
４．８０ （１Ｈ， ｂｒｄ， １’−Ｈ）， ６．
９６（１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ２．６ Ｈｚ， １０−
Ｈ）， ７．１１ （１Ｈ， ｓ， ＯＨ）， ７．１
４ （１Ｈ，ｓ， ４−Ｈ）， ７．３１ （１Ｈ，
ｄ， Ｊ ＝ ２．６ Ｈｚ， １２−Ｈ）， ７．３
６ （１Ｈ， ｓ， ＯＨ）， ８．０５ （１Ｈ，
ｓ， ７−Ｈ）．ＦＡＢ（＋）−ＭＳ（ｍ／ｚ）：８７
３（Ｍ＋３Ｈ）．実施例１６ Ｎ−イソプロピルプラジマイシンＦＬ〔ＩＩ，Ｒ１ ＝
ＣＨ２ ＯＨ，Ｒ２ ＝ＣＨ（ＣＨ３ ）２〕の製造実
施例９の一般操作に従い、アセトンをホルムアルデヒド
の代わりに用いると表題化合物が得られる。
： １．２８ （３Ｈ， ｄ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ
， ５’−ＣＨ３）， １．３３ （３ｄ， Ｊ＝
７．７ Ｈｚ， １７−ＣＨ３）， ２．３１ （３Ｈ
， ｓ， ３−ＣＨ３）， ２．７２ （３Ｈ， ｂｒ
ｓ， ４’−ＮＣＨ３）， ３．９６（３Ｈ， ｓ，
１１−ＯＣＨ３）， ４．４０ （Ｈ， 五重線、
Ｊ ＝ ７．３ Ｈｚ， １７−Ｈ），４．４８ （１
Ｈ， ｄ， Ｊ＝ ７．３ Ｈｚ， １”−Ｈ）， ４
．６１ （２Ｈ， ｂｒｓ， ５−Ｈ 及び６−Ｈ），
４．８０ （１Ｈ， ｂｒｄ， １’−Ｈ）， ６．
９６（１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ２．６ Ｈｚ， １０−
Ｈ）， ７．１１ （１Ｈ， ｓ， ＯＨ）， ７．１
４ （１Ｈ，ｓ， ４−Ｈ）， ７．３１ （１Ｈ，
ｄ， Ｊ ＝ ２．６ Ｈｚ， １２−Ｈ）， ７．３
６ （１Ｈ， ｓ， ＯＨ）， ８．０５ （１Ｈ，
ｓ， ７−Ｈ）．ＦＡＢ（＋）−ＭＳ（ｍ／ｚ）：８７
３（Ｍ＋３Ｈ）．実施例１６ Ｎ−イソプロピルプラジマイシンＦＬ〔ＩＩ，Ｒ１ ＝
ＣＨ２ ＯＨ，Ｒ２ ＝ＣＨ（ＣＨ３ ）２〕の製造実
施例９の一般操作に従い、アセトンをホルムアルデヒド
の代わりに用いると表題化合物が得られる。
Claims (24)
- 【請求項１】 式 【化１】 （式中、Ｒ１ はメチル又はヒドロキシメチルであり、
生じたアミノ酸残基はＤ−配置を有し、Ｒ２ は水素又
はＣ１ 〜Ｃ５ アルキルである）を有する化合物又は
その薬学的に許容できる塩。 - 【請求項２】 Ｒ２ が水素である、請求項１に記載
の化合物。 - 【請求項３】 Ｒ２ がＣ１ 〜Ｃ５ アルキルであ
る、請求項１に記載の化合物。 - 【請求項４】 Ｒ２ がメチルである、請求項１に記
載の化合物。 - 【請求項５】 Ｒ１ がメチルである、請求項１に記
載の化合物。 - 【請求項６】 Ｒ１ がヒドロキシメチルである、請
求項１に記載の化合物。 - 【請求項７】 Ｒ２ が水素である、請求項５に記載
の化合物。 - 【請求項８】 Ｒ２ がメチルである、請求項５に記
載の化合物。 - 【請求項９】 Ｒ２ が水素である、請求項６に記載
の化合物。 - 【請求項１０】 Ｒ２ がメチルである、請求項６に
記載の化合物。 - 【請求項１１】 プラジマイシンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
及びＬを含む抗生物質複合物を製造する方法であって、
前記抗生物質複合物を生成できるアクチノマズラ・ベル
コソスポラ亜種ネオヒビスカ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒ
ａ ｖｅｒｒｕｃｏｓｏｓｐｏｒａ ｓｕｂｓｐ． ｎ
ｅｏｈｉｂｉｓｃａ）の株を炭素及び窒素の資化性源を
含む培地中、で深部通気条件下に培養する段階及び前記
抗生物質複合物を培地から回収する段階を含む方法。 - 【請求項１２】 抗生物質産生株がアクチノマズラ・
ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄ
ｕｒａ ｖｅｒｒｕｃｏｓｏｓｐｏｒａ ｓｕｂｓｐ．
ｎｅｏｈｉｂｉｓｃａ）Ｒ１０３−３株、ＡＴＣＣ
Ｎｏ． ５３９３０、及びＡ１００１９株、ＡＴＣＣ
Ｎｏ． ５５０９１、から選ばれる、請求項１１に記載
の方法。 - 【請求項１３】 プラジマイシンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
及びＬからなる群から選ばれる抗生物質を製造する方法
であって、前記抗生物質を含む抗生物質複合物を生成で
きるアクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカ
（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａｖｅｒｒｕｃｏｓｏｓｐｏ
ｒａ ｓｕｂｓｐ． ｎｅｏｈｉｂｉｓｃａ）の株を、
炭素及び窒素の資化性源を含む培地中で深部通気条件下
に培養する段階、前記抗生物質複合物を培地から回収す
る段階及び所望抗生物質を前記複合物から分離する段階
を含む方法。 - 【請求項１４】 抗生物質産生株がアクチノマズラ・
ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄ
ｕｒａ ｖｅｒｒｕｃｏｓｏｓｐｏｒａ ｓｕｂｓｐ．
ｎｅｏｈｉｂｉｓｃａ）Ｒ１０３−３株、ＡＴＣＣＮ
ｏ． ５３９３０、及びＡ１００１９株、ＡＴＣＣＮｏ
． ５５０９１、から選ばれる、請求項１３に記載の方
法。 - 【請求項１５】 プラジマイシンＦＡ−１、ＦＡ−２
及びＦＬを含む抗生物質複合物を製造する方法であって
、前記抗生物質複合物を生成できるアクチノマズラ・ベ
ルコソスポラ亜種ネオヒビスカ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕ
ｒａ ｖｅｒｒｕｃｏｓｏｓｐｏｒａ ｓｕｂｓｐ．ｎ
ｅｏｈｉｂｉｓｃａ）の株を、Ｄ−セリン、炭素及び窒
素の資化性源を含む培地中で深部通気条件下に培養する
段階、及び前記抗生物質複合物を培地から回収する段階
を含む方法。 - 【請求項１６】 抗生物質産生株がアクチノマズラ・
ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄ
ｕｒａ ｖｅｒｒｕｃｏｓｏｓｐｏｒａ ｓｕｂｓｐ．
ｎｅｏｈｉｂｉｓｃａ）Ｒ−１０３−３株、ＡＴＣＣ
Ｎｏ． ５３９３０である、請求項１５に記載の方法。 - 【請求項１７】 プラジマイシンＦＡ−１、ＦＡ−２
及びＦＬからなる群から選ばれる抗生物質を製造する方
法であって、前記抗生物質を含む抗生物質複合物を生成
できるアクチノマズラ・ベルコソスポラ亜種ネオヒビス
カ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ ｖｅｒｒｕｃｏｓｏｓ
ｐｏｒａ ｓｕｂｓｐ． ｎｅｏｈｉｂｉｓｃａ）の株
を、Ｄ−セリン、炭素及び窒素の資化性源を含む培地中
で深部通気条件下に培養する段階、前記抗生物質複合物
を培地から回収する段階、及び所望抗生物質を前記複合
物から分離する段階を含む方法。 - 【請求項１８】 抗生物質産生株がアクチノマズラ・
ベルコソスポラ亜種ネオヒビスカ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄ
ｕｒａ ｖｅｒｒｕｃｏｓｏｓｐｏｒａ ｓｕｂｓｐ．
ｎｅｏｈｉｂｉｓｃａ）Ｒ−１０３−３株、ＡＴＣＣ
Ｎｏ． ５３９３０、である、請求項１７に記載の方法
。 - 【請求項１９】 抗生物質がプラジマイシンＦＡ−１
である、請求項１８に記載の方法。 - 【請求項２０】 抗生物質がプラジマイシンＦＬであ
る、請求項１８に記載の方法。 - 【請求項２１】 アクチノマズラ・ベルコソスポラ亜
種ネオヒビスカ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ ｖｅｒｒ
ｕｃｏｓｏｓｐｏｒａ ｓｕｂｓｐ． ｎｅｏｈｉｂｉ
ｓｃａ）Ｒ１０３−３株、ＡＴＣＣＮｏ． ５３９３０
、の生物学的に純粋な菌株。 - 【請求項２２】 アクチノマズラ・ベルコソスポラ亜
種ネオヒビスカ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ ｖｅｒｒ
ｕｃｏｓｏｓｐｏｒａ ｓｕｂｓｐ． ｎｅｏｈｉｂｉ
ｓｃａ）Ａ１００１９株、ＡＴＣＣＮｏ． ５５０９１
、の生物学的に純粋な菌株。 - 【請求項２３】 請求項１に記載の化合物の抗真菌有
効量を動物に投与することを含む、動物中の真菌感染を
治療する方法。 - 【請求項２４】 請求項１に記載の化合物及び薬学的
に許容できる賦形剤を含む薬学的組成物。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/589,728 US5843908A (en) | 1990-09-28 | 1990-09-28 | Pradimicins l and fl, and derivatives thereof |
| US589728 | 1996-01-22 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04316595A true JPH04316595A (ja) | 1992-11-06 |
Family
ID=24359252
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3249915A Pending JPH04316595A (ja) | 1990-09-28 | 1991-09-27 | プラジマイシンｌ及びｆｌ並びにそれらの誘導体 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5843908A (ja) |
| EP (1) | EP0479505A1 (ja) |
| JP (1) | JPH04316595A (ja) |
| CA (1) | CA2048295A1 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5696096A (en) * | 1990-09-28 | 1997-12-09 | Bristol-Myers Squibb Company | Pradimicin derivatives |
| CA2068484A1 (en) * | 1991-05-29 | 1992-11-30 | Osamu Tenmyo | Pradimicin s antibiotics |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4130709A (en) * | 1977-12-08 | 1978-12-19 | Eli Lilly And Company | Pleuromutilin glycoside derivatives |
| US4870165A (en) * | 1987-02-02 | 1989-09-26 | Bristol-Myers Company | Antifungal antibiotics |
| US4960755A (en) * | 1988-07-19 | 1990-10-02 | Bristol-Myers Company | BU-3608 derivatives |
| US4973673A (en) * | 1988-11-10 | 1990-11-27 | Bristol-Myers Company | Serine analogs of BU-3608 antibiotics |
-
1990
- 1990-09-28 US US07/589,728 patent/US5843908A/en not_active Expired - Lifetime
-
1991
- 1991-08-01 CA CA002048295A patent/CA2048295A1/en not_active Abandoned
- 1991-09-27 JP JP3249915A patent/JPH04316595A/ja active Pending
- 1991-09-27 EP EP91308869A patent/EP0479505A1/en not_active Ceased
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0479505A1 (en) | 1992-04-08 |
| CA2048295A1 (en) | 1992-03-29 |
| US5843908A (en) | 1998-12-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0271581A1 (en) | Novel compounds dc-88a and dc-89a1 and process for their preparation | |
| AU628418B2 (en) | Serine analogs of BU-3608 antibodies | |
| US5055453A (en) | Benanomicins a and antibiotic compositions | |
| CA1242159A (en) | Bbm-2478 antibiotic complex | |
| JPH04261140A (ja) | 新規α−グルコシダーゼ阻害物質、プラジマイシンＱ | |
| CA1338085C (en) | Antibiotics bu-3608d and bu-3608e from actinomadura | |
| JPH0521909B2 (ja) | ||
| JPH04316595A (ja) | プラジマイシンｌ及びｆｌ並びにそれらの誘導体 | |
| US5109122A (en) | Antibiotics, dexylosylbenanomicin B | |
| US5114857A (en) | Actinomadura hibisca microorganism useful for preparing serine analogs of BU-3608 antibiotics | |
| CA1306213C (en) | Phenanthridine derivatives, process for the preparation thereof, and compositions containing them | |
| US5194371A (en) | Production of pradimicin antibiotics | |
| US5061624A (en) | Serine analogs of BU-3608 antibiotics | |
| US5096817A (en) | Process for producing antibiotics BU-3608 D and BU-3608 E | |
| US5183808A (en) | Method for treating fungal infections with serine analogs of BU-3608 antibiotics | |
| JP2592468B2 (ja) | 新規抗生物質ベナノマイシンａおよびｂならびにその製造法 | |
| JP4759756B2 (ja) | 抗生物質カプラザマイシンｄ、ｇ、ｄ１、ｇ１とその製造法 | |
| EP0581652A1 (en) | Pradimicins T1 and T2 and 11-0-dexylosylpradimicin T1, new members of the pradimicin family of antibiotics | |
| JPH05262786A (ja) | プラジミシン抗生物質 | |
| JP2007131552A (ja) | 新規抗生物質ｓｆ２８５６物質、その製造法および医薬組成物 | |
| IL107367A (en) | Aglycone of d-serine intermediate for the synthesis of bu-3608 antibiotics | |
| JP2007097548A (ja) | 新規抗生物質ｓｆ２８４７物質、その製造法及び医薬組成物 | |
| NZ231319A (en) | Serine analogs of bu-3608 antibiotics, production by culture and the pure culture of the microorganism actinomadura hibisca |