JPH04324341A - 粒子計数方法 - Google Patents
粒子計数方法Info
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- JPH04324341A JPH04324341A JP3122554A JP12255491A JPH04324341A JP H04324341 A JPH04324341 A JP H04324341A JP 3122554 A JP3122554 A JP 3122554A JP 12255491 A JP12255491 A JP 12255491A JP H04324341 A JPH04324341 A JP H04324341A
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- G06M—COUNTING MECHANISMS; COUNTING OF OBJECTS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N15/1031—Investigating individual particles by measuring electrical or magnetic effects
- G01N15/12—Investigating individual particles by measuring electrical or magnetic effects by observing changes in resistance or impedance across apertures when traversed by individual particles, e.g. by using the Coulter principle
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/38—Diluting, dispersing or mixing samples
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、血球等の粒子を微細孔
に流して粒子を検出し計数する粒子計数方法及び装置、
詳しくは、粒子が多い場合にも、検出領域において同時
通過が起こらないようにした粒子計数方法及び装置に関
するものである。
に流して粒子を検出し計数する粒子計数方法及び装置、
詳しくは、粒子が多い場合にも、検出領域において同時
通過が起こらないようにした粒子計数方法及び装置に関
するものである。
【０００２】
【従来の技術】血球等の粒子を微細孔（アパーチャ）に
流し、粒子がその微細孔を通過する際に生じる電気的変
化（例えば電気抵抗値）を検出し、粒子計数などの分析
をする装置が良く知られている。血球を測定対象とする
場合には、微細孔の内径は５０〜１００μｍ、長さは６
０〜１００μｍ程度である。この微細孔部分が粒子検出
における有感域となる。なお、粒子径は数μｍである。 電気抵抗式の粒子計数装置においては有感域が広いため
、粒子数が多い検体では同時通過が発生し、そのための
数補正をする必要が出てくる。粒子数の増加にともない
同時通過数は急激に増加する。この場合、数の補正は可
能である。しかし、同時通過時の粒子信号の大きさまで
補正することはできず、その結果として、粒度分布にお
ける粒子の分布幅等の値に対して誤差を含むことになる
。電気抵抗式においては、粒子信号の大きさと実際の粒
子の大きさとは良好な比例関係にある。しかし、同時通
過時には複数の粒子信号が重なり信号は大きくなってし
まい、粒子の大きさに対応した大きさの粒子信号が得ら
れない。
流し、粒子がその微細孔を通過する際に生じる電気的変
化（例えば電気抵抗値）を検出し、粒子計数などの分析
をする装置が良く知られている。血球を測定対象とする
場合には、微細孔の内径は５０〜１００μｍ、長さは６
０〜１００μｍ程度である。この微細孔部分が粒子検出
における有感域となる。なお、粒子径は数μｍである。 電気抵抗式の粒子計数装置においては有感域が広いため
、粒子数が多い検体では同時通過が発生し、そのための
数補正をする必要が出てくる。粒子数の増加にともない
同時通過数は急激に増加する。この場合、数の補正は可
能である。しかし、同時通過時の粒子信号の大きさまで
補正することはできず、その結果として、粒度分布にお
ける粒子の分布幅等の値に対して誤差を含むことになる
。電気抵抗式においては、粒子信号の大きさと実際の粒
子の大きさとは良好な比例関係にある。しかし、同時通
過時には複数の粒子信号が重なり信号は大きくなってし
まい、粒子の大きさに対応した大きさの粒子信号が得ら
れない。
【０００３】図３は、赤血球の粒度分布図であり、縦軸
は相対度数を示している。実線は同時通過のないときの
分布曲線を示し、破線は同時通過のあるときの分布曲線
を示している。同時通過があると、上記のように大きな
粒子信号成分が増え、得られる粒度分布曲線（破線）も
歪んだものとなる。また、試料液をシース液で囲んで微
細孔に流し（シースフロー、ｓｈｅａｔｈｆｌｏｗ）、
粒子からの光信号を検出するタイプの光学式粒子計数装
置も知られている。これはフローサイトメータと呼ばれ
ている。光学式のものは、電気式に比べて有感域は非常
に狭いため、同時通過は起こりにくく補正は不要である
。なお、シースフローとは、粒子を微細孔の中央部に精
度良く一列に整列させて通過させるために、粒子の懸濁
液の周囲を層流の液（シース液）で被覆した流れを言う
。一方、電気式と光学式とを組み合わせた装置も知られ
ている。微細孔部分に粒子の流れと直交する方向から光
を照射し、粒子個々に散乱光や蛍光の信号も同時に検出
することができる。この場合にも、上記同時通過による
粒子信号の大きさに関する問題が発生する。これを解決
する方法として、 （ａ）前もって試料液を、同時通過の起こらない程度の
倍率に希釈しておく。 （ｂ）シースフローにおいて、試料液の流量を少なくす
ることにより試料液を細く絞り微細孔に流す。
は相対度数を示している。実線は同時通過のないときの
分布曲線を示し、破線は同時通過のあるときの分布曲線
を示している。同時通過があると、上記のように大きな
粒子信号成分が増え、得られる粒度分布曲線（破線）も
歪んだものとなる。また、試料液をシース液で囲んで微
細孔に流し（シースフロー、ｓｈｅａｔｈｆｌｏｗ）、
粒子からの光信号を検出するタイプの光学式粒子計数装
置も知られている。これはフローサイトメータと呼ばれ
ている。光学式のものは、電気式に比べて有感域は非常
に狭いため、同時通過は起こりにくく補正は不要である
。なお、シースフローとは、粒子を微細孔の中央部に精
度良く一列に整列させて通過させるために、粒子の懸濁
液の周囲を層流の液（シース液）で被覆した流れを言う
。一方、電気式と光学式とを組み合わせた装置も知られ
ている。微細孔部分に粒子の流れと直交する方向から光
を照射し、粒子個々に散乱光や蛍光の信号も同時に検出
することができる。この場合にも、上記同時通過による
粒子信号の大きさに関する問題が発生する。これを解決
する方法として、 （ａ）前もって試料液を、同時通過の起こらない程度の
倍率に希釈しておく。 （ｂ）シースフローにおいて、試料液の流量を少なくす
ることにより試料液を細く絞り微細孔に流す。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】上記の（ａ）の方法は
、希釈処理に手間がかかり、時間もかかる。また、検体
によって粒子数は異なっており、希釈倍率をどのぐらい
にすればいいのかを知ることができない。また、（ｂ）
の方法は、計数時間が長くかかる。本発明は、上記の諸
点に鑑みなされたもので電気式の粒子検出器を備えた粒
子計数装置において、粒子が多い場合でも、同時通過が
起こらない粒子計数方法及び装置を提供することを目的
とする。
、希釈処理に手間がかかり、時間もかかる。また、検体
によって粒子数は異なっており、希釈倍率をどのぐらい
にすればいいのかを知ることができない。また、（ｂ）
の方法は、計数時間が長くかかる。本発明は、上記の諸
点に鑑みなされたもので電気式の粒子検出器を備えた粒
子計数装置において、粒子が多い場合でも、同時通過が
起こらない粒子計数方法及び装置を提供することを目的
とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】上記の目的を達成するた
めに、本発明の粒子計数方法は、粒子を懸濁させた試料
液をシース液で囲むように検出器の微細孔に流し、液と
粒子の電気インピーダンスの差異に基づく変化、又は微
細孔部分に粒子の流れを横切るように照射された光の光
学的変化により、粒子を個々に検出する粒子計数方法に
おいて、本計数の前に、試料液を微細孔に一定流量で流
して、粒子数を計数する前計数過程と、前計数の計数値
が所定値以上の場合に、試料液の希釈倍率を決定する希
釈倍率決定過程と、上記希釈倍率に基づき試料液及び希
釈液を、試料液流量Ｑ１と希釈液流量Ｑ２との和が一定
となるように流して、試料液を希釈するとともに、この
希釈試料液を微細孔に流して計数する本計数過程と、を
包含することを特徴としている。また、本発明の粒子計
数装置は、粒子を懸濁させた試料液をシース液で囲むよ
うに検出器の微細孔に流し、液と粒子の電気インピーダ
ンスの差異に基づく変化、又は微細孔部分に粒子の流れ
を横切るように照射された光の光学的変化により、粒子
を個々に検出する粒子計数装置において、試料液を吐出
するための試料液吐出手段Ｃ１と並列に、希釈液を吐出
するための希釈液吐出手段Ｃ２を設けたことを特徴とし
ている。本発明においては、電気的な検出手段として、
上記のように、電気的インピーダンスだけでなく、微細
孔部分に粒子の流れを横切るように光を照射し、光学的
変化も検出するように装置を構成することも可能である
。光学的変化の検出とは粒子から発せられた散乱光や蛍
光を検出するということである。
めに、本発明の粒子計数方法は、粒子を懸濁させた試料
液をシース液で囲むように検出器の微細孔に流し、液と
粒子の電気インピーダンスの差異に基づく変化、又は微
細孔部分に粒子の流れを横切るように照射された光の光
学的変化により、粒子を個々に検出する粒子計数方法に
おいて、本計数の前に、試料液を微細孔に一定流量で流
して、粒子数を計数する前計数過程と、前計数の計数値
が所定値以上の場合に、試料液の希釈倍率を決定する希
釈倍率決定過程と、上記希釈倍率に基づき試料液及び希
釈液を、試料液流量Ｑ１と希釈液流量Ｑ２との和が一定
となるように流して、試料液を希釈するとともに、この
希釈試料液を微細孔に流して計数する本計数過程と、を
包含することを特徴としている。また、本発明の粒子計
数装置は、粒子を懸濁させた試料液をシース液で囲むよ
うに検出器の微細孔に流し、液と粒子の電気インピーダ
ンスの差異に基づく変化、又は微細孔部分に粒子の流れ
を横切るように照射された光の光学的変化により、粒子
を個々に検出する粒子計数装置において、試料液を吐出
するための試料液吐出手段Ｃ１と並列に、希釈液を吐出
するための希釈液吐出手段Ｃ２を設けたことを特徴とし
ている。本発明においては、電気的な検出手段として、
上記のように、電気的インピーダンスだけでなく、微細
孔部分に粒子の流れを横切るように光を照射し、光学的
変化も検出するように装置を構成することも可能である
。光学的変化の検出とは粒子から発せられた散乱光や蛍
光を検出するということである。
【０００６】
【作用】測定は前測定と本測定とに分けて考える。まず
、前測定において、試料液吐出手段Ｃ１が一定流量で試
料液を微細孔１２に供給し、粒子の計数を行い、本試料
液の中の粒子の概数が求められる。その概数をもとに同
時通過が発生する程度が判断され、さらに、どの程度試
料液を希釈すれば同時通過をなくせるかが求められる。 本発明においては、希釈液吐出手段Ｃ２も設けられてお
り、前測定の結果に基づき、本計数において、試料液吐
出手段Ｃ１と希釈液吐出手段Ｃ２の流量が、各所定値に
なるように各吐出手段が動作される。粒子数が多い場合
でも、希釈された試料液が本計数にて測定されるので、
同時通過は起こらない。なお、試料液と希釈液の流量の
総量は一定であるので、シース液とこの希釈された試料
液との流量バランスも一定であり、微細孔１２部分にお
いて、試料液流の径も一定である。
、前測定において、試料液吐出手段Ｃ１が一定流量で試
料液を微細孔１２に供給し、粒子の計数を行い、本試料
液の中の粒子の概数が求められる。その概数をもとに同
時通過が発生する程度が判断され、さらに、どの程度試
料液を希釈すれば同時通過をなくせるかが求められる。 本発明においては、希釈液吐出手段Ｃ２も設けられてお
り、前測定の結果に基づき、本計数において、試料液吐
出手段Ｃ１と希釈液吐出手段Ｃ２の流量が、各所定値に
なるように各吐出手段が動作される。粒子数が多い場合
でも、希釈された試料液が本計数にて測定されるので、
同時通過は起こらない。なお、試料液と希釈液の流量の
総量は一定であるので、シース液とこの希釈された試料
液との流量バランスも一定であり、微細孔１２部分にお
いて、試料液流の径も一定である。
【０００７】
【実施例】以下、図面を参照して本発明の好適な実施例
を詳細に説明する。ただし、この実施例に記載されてい
る構成機器の形状、その相対配置などは、とくに特定的
な記載がない限りは、本発明の範囲をそれらのみに限定
する趣旨のものではなく、単なる説明例にすぎない。図
１は本発明の粒子計数装置の一実施例を示す流体回路図
である。破線で囲んだ箇所が、本発明において追加され
た部分である。１０は粒子検出器である。微細孔１２を
挟んだ液の上流側（図においては下側）に試料液が一端
から吐出されるノズル１４が設けられ、下流側（図にお
いては上側）に測定済の試料液等を回収する回収管１６
が設けられている。ノズル１４の他端には試料液を所定
流量で供給する試料液吐出手段（ここでは一例として、
ステッピングモータＭ１駆動によるシリンジタイプのも
の）Ｃ１が接続されている。弁Ｖ３、Ｖ４が開き、ポン
プＰ１が吸引モードになることにより、試料液チャンバ
Ｓ１の試料液（所定倍率に希釈処理された血液試料）は
一定量吸引され、ノズル近傍のチャージングライン２２
に充満される。
を詳細に説明する。ただし、この実施例に記載されてい
る構成機器の形状、その相対配置などは、とくに特定的
な記載がない限りは、本発明の範囲をそれらのみに限定
する趣旨のものではなく、単なる説明例にすぎない。図
１は本発明の粒子計数装置の一実施例を示す流体回路図
である。破線で囲んだ箇所が、本発明において追加され
た部分である。１０は粒子検出器である。微細孔１２を
挟んだ液の上流側（図においては下側）に試料液が一端
から吐出されるノズル１４が設けられ、下流側（図にお
いては上側）に測定済の試料液等を回収する回収管１６
が設けられている。ノズル１４の他端には試料液を所定
流量で供給する試料液吐出手段（ここでは一例として、
ステッピングモータＭ１駆動によるシリンジタイプのも
の）Ｃ１が接続されている。弁Ｖ３、Ｖ４が開き、ポン
プＰ１が吸引モードになることにより、試料液チャンバ
Ｓ１の試料液（所定倍率に希釈処理された血液試料）は
一定量吸引され、ノズル近傍のチャージングライン２２
に充満される。
【０００８】図２は本発明における計数時のシーケンス
図である。まず、前計数が短時間（例えば、１秒間程度
）なされる。弁Ｖ３、Ｖ４は閉じ、弁Ｖ１、Ｖ２、Ｖ９
が開き、試料液吐出手段Ｃ１が一定流量で試料液を押し
出すことにより、チャージングライン２２の試料液はノ
ズル１４から微細孔１２に向かって吐出される。一方、
シース液チャンバＳ２に陽圧（大気圧より高い圧力）が
かかることにより、シース液も供給口１８から検出器１
０内に吐出され、シースフローが形成され、試料液中の
粒子は微細孔１２の中央を整列して流れる。微細孔１２
を通過した粒子は、供給口２０から吐出されるバックシ
ース液に包まれて回収管１６に回収され、廃液チャンバ
Ｓ４に排出される。前計数時に、この検体中の粒子数が
概算される。粒子数が多いと同時通過が発生する。そこ
で、粒子数が多い場合には、試料液を少し希釈して計数
すれば良い。粒子数と同時通過率の関係は既知である。 このため、前計数により、試料液の希釈処理が必要かど
うか、必要ならばどの程度希釈すればよいかがわかる。
図である。まず、前計数が短時間（例えば、１秒間程度
）なされる。弁Ｖ３、Ｖ４は閉じ、弁Ｖ１、Ｖ２、Ｖ９
が開き、試料液吐出手段Ｃ１が一定流量で試料液を押し
出すことにより、チャージングライン２２の試料液はノ
ズル１４から微細孔１２に向かって吐出される。一方、
シース液チャンバＳ２に陽圧（大気圧より高い圧力）が
かかることにより、シース液も供給口１８から検出器１
０内に吐出され、シースフローが形成され、試料液中の
粒子は微細孔１２の中央を整列して流れる。微細孔１２
を通過した粒子は、供給口２０から吐出されるバックシ
ース液に包まれて回収管１６に回収され、廃液チャンバ
Ｓ４に排出される。前計数時に、この検体中の粒子数が
概算される。粒子数が多いと同時通過が発生する。そこ
で、粒子数が多い場合には、試料液を少し希釈して計数
すれば良い。粒子数と同時通過率の関係は既知である。 このため、前計数により、試料液の希釈処理が必要かど
うか、必要ならばどの程度希釈すればよいかがわかる。
【０００９】次に本計数がなされる。本装置においては
、試料液の吐出手段Ｃ１だけでなく、ノズル１４の他端
に希釈液を所定流量で供給する希釈液吐出手段（例えば
、試料液吐出手段Ｃ１と同タイプのもの）Ｃ２が接続さ
れている。接続箇所はチャージングライン２２の、ノズ
ル１４に近い方の端２３である。この希釈液吐出手段Ｃ
２と希釈液チャンバＳ３とは弁Ｖ５を介して接続されて
いる。試料液吐出手段Ｃ１、希釈液吐出手段Ｃ２の吐出
流量をそれぞれＱ１、Ｑ２とすると、粒子濃度はＱ１／
（Ｑ１＋Ｑ２）倍となり、両者はチャージングライン端
２３からノズル１４の先端までの流路において混合され
、ノズル１４先端から吐出される。流量Ｑ１、Ｑ２の比
率を変えることにより、ノズル１４から吐出される液の
総流量（Ｑ１＋Ｑ２）は不変で、希釈倍率だけ変えるこ
とができる。なお、希釈液吐出手段Ｃ２を設けず、試料
液吐出手段Ｃ１の吐出流量だけを変えることによっても
、同時通過を低減することは可能ではあるが、そのよう
にすると、シース液と試料液のバランスが変わり、微細
孔１２部分の試料液流の太さが変わってしまう。試料液
流の太さが変わると、粒子の同時通過の仕方も変わる。 このため、例えば試料液吐出流量を１／２にして計数し
、その計数値を２倍しても、正しい粒子数を求めること
はできない。そこで、本発明では、試料液を希釈し試料
としての流量は変わらないように工夫したのである。
、試料液の吐出手段Ｃ１だけでなく、ノズル１４の他端
に希釈液を所定流量で供給する希釈液吐出手段（例えば
、試料液吐出手段Ｃ１と同タイプのもの）Ｃ２が接続さ
れている。接続箇所はチャージングライン２２の、ノズ
ル１４に近い方の端２３である。この希釈液吐出手段Ｃ
２と希釈液チャンバＳ３とは弁Ｖ５を介して接続されて
いる。試料液吐出手段Ｃ１、希釈液吐出手段Ｃ２の吐出
流量をそれぞれＱ１、Ｑ２とすると、粒子濃度はＱ１／
（Ｑ１＋Ｑ２）倍となり、両者はチャージングライン端
２３からノズル１４の先端までの流路において混合され
、ノズル１４先端から吐出される。流量Ｑ１、Ｑ２の比
率を変えることにより、ノズル１４から吐出される液の
総流量（Ｑ１＋Ｑ２）は不変で、希釈倍率だけ変えるこ
とができる。なお、希釈液吐出手段Ｃ２を設けず、試料
液吐出手段Ｃ１の吐出流量だけを変えることによっても
、同時通過を低減することは可能ではあるが、そのよう
にすると、シース液と試料液のバランスが変わり、微細
孔１２部分の試料液流の太さが変わってしまう。試料液
流の太さが変わると、粒子の同時通過の仕方も変わる。 このため、例えば試料液吐出流量を１／２にして計数し
、その計数値を２倍しても、正しい粒子数を求めること
はできない。そこで、本発明では、試料液を希釈し試料
としての流量は変わらないように工夫したのである。
【００１０】試料測定が終わると、弁Ｖ１０が開き、試
料液チャンバＳ１に残った試料液は排出される。そして
、弁Ｖ４が開き、弁Ｖ６が開に切り換わり、ポンプＰ２
が吐出モードとなることにより、試料吸引ライン２４及
び試料液チャンバＳ１が洗浄される。洗浄液としては希
釈液を使うことができる。チャージングライン２２は弁
Ｖ４、Ｖ３が開き、ポンプＰ１が吸引モードになること
により洗浄される。なお、ポンプＰ１が吸引した液は弁
Ｖ３を閉じ、弁Ｖ１１を開け、ポンプＰ１を吐出モード
にすることにより廃液チャンバＳ４に排出される。弁Ｖ
１、Ｖ７、Ｖ２、Ｖ８を開け、シース液チャンバＳ２に
陽圧をかければ、検出器１０内部が洗浄できる。なお、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は流路を電気的に絶縁するための絶縁
チャンバである。以上のように、本発明においては、粒
子数の多い検体（試料液）は希釈され、粒子数の少ない
検体は希釈されず、いずれも、同時通過の起こらない範
囲で計数される。なお、単に一様に希釈するならば、粒
子数の多い検体では問題ないが、粒子数の少ない検体で
は、粒子検出数が少なくなってしまい、計数精度の低下
を招く。
料液チャンバＳ１に残った試料液は排出される。そして
、弁Ｖ４が開き、弁Ｖ６が開に切り換わり、ポンプＰ２
が吐出モードとなることにより、試料吸引ライン２４及
び試料液チャンバＳ１が洗浄される。洗浄液としては希
釈液を使うことができる。チャージングライン２２は弁
Ｖ４、Ｖ３が開き、ポンプＰ１が吸引モードになること
により洗浄される。なお、ポンプＰ１が吸引した液は弁
Ｖ３を閉じ、弁Ｖ１１を開け、ポンプＰ１を吐出モード
にすることにより廃液チャンバＳ４に排出される。弁Ｖ
１、Ｖ７、Ｖ２、Ｖ８を開け、シース液チャンバＳ２に
陽圧をかければ、検出器１０内部が洗浄できる。なお、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は流路を電気的に絶縁するための絶縁
チャンバである。以上のように、本発明においては、粒
子数の多い検体（試料液）は希釈され、粒子数の少ない
検体は希釈されず、いずれも、同時通過の起こらない範
囲で計数される。なお、単に一様に希釈するならば、粒
子数の多い検体では問題ないが、粒子数の少ない検体で
は、粒子検出数が少なくなってしまい、計数精度の低下
を招く。
【００１１】
【発明の効果】本発明は上記のように構成されているの
でつぎのような効果を奏する。 （１） 本発明の粒子計数方法は、前計数過程、希釈
倍率決定過程及び本計数過程からなり、本計数の前に前
計数を行って計数値が多く同時通過が発生するような検
体の場合に、希釈倍率を決定し、この希釈倍率に基づい
て試料液を希釈して本計数を行うものであるから、同時
通過は起こらず、精度良く粒子計数を行うことができる
。 また、試料液流量と希釈液流量との和は、常に一定であ
るので、シース液とこの希釈された試料液との流量バラ
ンスも一定であり、微細孔部分において、試料液流の径
も一定となり、正確な計数を行うことができる。 （２） 本発明の粒子計数装置は、希釈液吐出手段を
設けているので、粒子数が多く同時通過が発生するよう
な検体の場合には、試料液吐出時に希釈液も同時に吐出
し、両者の混合液、つまり、希釈された試料液を検出器
の微細孔に供給することができる。このため、そのよう
な場合でも同時通過は起こらず、粒子計数精度が向上す
る。
でつぎのような効果を奏する。 （１） 本発明の粒子計数方法は、前計数過程、希釈
倍率決定過程及び本計数過程からなり、本計数の前に前
計数を行って計数値が多く同時通過が発生するような検
体の場合に、希釈倍率を決定し、この希釈倍率に基づい
て試料液を希釈して本計数を行うものであるから、同時
通過は起こらず、精度良く粒子計数を行うことができる
。 また、試料液流量と希釈液流量との和は、常に一定であ
るので、シース液とこの希釈された試料液との流量バラ
ンスも一定であり、微細孔部分において、試料液流の径
も一定となり、正確な計数を行うことができる。 （２） 本発明の粒子計数装置は、希釈液吐出手段を
設けているので、粒子数が多く同時通過が発生するよう
な検体の場合には、試料液吐出時に希釈液も同時に吐出
し、両者の混合液、つまり、希釈された試料液を検出器
の微細孔に供給することができる。このため、そのよう
な場合でも同時通過は起こらず、粒子計数精度が向上す
る。
【図１】本発明の粒子計数装置の一実施例を示す流体回
路図である。
路図である。
【図２】本発明における粒子計数時のシーケンス図であ
る。
る。
【図３】赤血球の粒度分布図である。
１０ 粒子検出器
１２ 微細孔
１４ ノズル
１６ 回収管
２２ チャージングライン
Ｃ１ 試料液吐出手段
Ｃ２ 希釈液吐出手段
Ｓ１ 試料液チャンバ
Ｓ２ シース液チャンバ
Ｓ３ 希釈液チャンバ
Ｓ４ 廃液チャンバ
Claims (2)
- 【請求項１】 粒子を懸濁させた試料液をシース液で
囲むように検出器の微細孔に流し、液と粒子の電気イン
ピーダンスの差異に基づく変化、又は微細孔部分に粒子
の流れを横切るように照射された光の光学的変化により
、粒子を個々に検出する粒子計数方法において、本計数
の前に、試料液を微細孔に一定流量で流して、粒子数を
計数する前計数過程と、前計数の計数値が所定値以上の
場合に、試料液の希釈倍率を決定する希釈倍率決定過程
と、上記希釈倍率に基づき試料液及び希釈液を、試料液
流量Ｑ１と希釈液流量Ｑ２との和が一定となるように流
して、試料液を希釈するとともに、この希釈試料液を微
細孔に流して計数する本計数過程と、を包含することを
特徴とする粒子計数方法。 - 【請求項２】 粒子を懸濁させた試料液をシース液で
囲むように検出器の微細孔に流し、液と粒子の電気イン
ピーダンスの差異に基づく変化、又は微細孔部分に粒子
の流れを横切るように照射された光の光学的変化により
、粒子を個々に検出する粒子計数装置において、試料液
を吐出するための試料液吐出手段（Ｃ１）と並列に、希
釈液を吐出するための希釈液吐出手段（Ｃ２）を設けた
ことを特徴とする粒子計数装置。
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