JPH04330280A - 安定化コンドロイチナーゼａｂｃ、その保存方法及び治療剤 - Google Patents
安定化コンドロイチナーゼａｂｃ、その保存方法及び治療剤Info
- Publication number
- JPH04330280A JPH04330280A JP3125385A JP12538591A JPH04330280A JP H04330280 A JPH04330280 A JP H04330280A JP 3125385 A JP3125385 A JP 3125385A JP 12538591 A JP12538591 A JP 12538591A JP H04330280 A JPH04330280 A JP H04330280A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- chondroitinase abc
- chondroitinase
- stabilized
- dried
- serum albumin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 102000037716 Chondroitin-sulfate-ABC endolyases Human genes 0.000 title claims abstract description 36
- 108090000819 Chondroitin-sulfate-ABC endolyases Proteins 0.000 title claims abstract description 36
- 238000004321 preservation Methods 0.000 title description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 49
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 claims abstract description 14
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 claims abstract description 14
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 claims abstract description 14
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 claims abstract description 14
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 claims abstract description 14
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 claims abstract description 13
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims abstract description 13
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims abstract description 13
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims abstract description 13
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 claims abstract description 13
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims abstract description 13
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 claims abstract description 12
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims abstract description 11
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 claims abstract description 11
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 235000013681 dietary sucrose Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 208000003618 Intervertebral Disc Displacement Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract 2
- 102000011413 Chondroitinases and Chondroitin Lyases Human genes 0.000 claims description 9
- 108010023736 Chondroitinases and Chondroitin Lyases Proteins 0.000 claims description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 9
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 8
- 206010050296 Intervertebral disc protrusion Diseases 0.000 claims description 6
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 6
- 125000003071 maltose group Chemical group 0.000 claims description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 abstract description 17
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 abstract description 16
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 abstract description 16
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 abstract description 10
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 14
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 12
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 9
- 229960001855 mannitol Drugs 0.000 description 9
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 8
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 8
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 8
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 6
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 6
- 229960001375 lactose Drugs 0.000 description 6
- 229960002160 maltose Drugs 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- 229940119744 dextran 40 Drugs 0.000 description 4
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 206010019909 Hernia Diseases 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 108090001069 Chymopapain Proteins 0.000 description 2
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- ISWQCIVKKSOKNN-UHFFFAOYSA-L Tiron Chemical compound [Na+].[Na+].OC1=CC(S([O-])(=O)=O)=CC(S([O-])(=O)=O)=C1O ISWQCIVKKSOKNN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 2
- 229960002976 chymopapain Drugs 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- AVJBPWGFOQAPRH-FWMKGIEWSA-L dermatan sulfate Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H](OS([O-])(=O)=O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C([O-])=O)O1 AVJBPWGFOQAPRH-FWMKGIEWSA-L 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical group CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(trifluoromethoxy)pyridine Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(Br)C=N1 SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000723867 Arabidopsis thaliana DNA-directed RNA polymerase subunit 10-like protein Proteins 0.000 description 1
- 208000008035 Back Pain Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 101000723784 Brassica napus DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit RPABC5 Proteins 0.000 description 1
- 240000006432 Carica papaya Species 0.000 description 1
- 241000251730 Chondrichthyes Species 0.000 description 1
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 description 1
- 101710106625 Chondroitinase-AC Proteins 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- 229920000045 Dermatan sulfate Polymers 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 208000008930 Low Back Pain Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 1
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 244000007853 Sarothamnus scoparius Species 0.000 description 1
- KXKPYJOVDUMHGS-OSRGNVMNSA-N chondroitin sulfate Chemical group CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(O)=O)O1 KXKPYJOVDUMHGS-OSRGNVMNSA-N 0.000 description 1
- 229940059329 chondroitin sulfate Drugs 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 229940051593 dermatan sulfate Drugs 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- -1 for example Proteins 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 108020001775 protein parts Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、安定化コンドロイチナ
ーゼＡＢＣ、その保存方法及び椎間板ヘルニア治療剤に
関する。
ーゼＡＢＣ、その保存方法及び椎間板ヘルニア治療剤に
関する。
【０００２】
【従来技術】コンドロイチナーゼＡＢＣ［ＥＣ４．２．
２．４］は、哺乳動物軟骨由来のコンドロイチン硫酸Ａ
、鮫軟骨由来のコンドロイチン硫酸Ｃ及び哺乳動物皮膚
由来のコンドロイチン硫酸Ｂ（デルマタン硫酸）の分解
を協力に触媒し、ヒアルロン酸の分解に対しては弱く触
媒する酵素である。
２．４］は、哺乳動物軟骨由来のコンドロイチン硫酸Ａ
、鮫軟骨由来のコンドロイチン硫酸Ｃ及び哺乳動物皮膚
由来のコンドロイチン硫酸Ｂ（デルマタン硫酸）の分解
を協力に触媒し、ヒアルロン酸の分解に対しては弱く触
媒する酵素である。
【０００３】本酵素は、動物組織中からムコ多糖類を除
去したり、組織中のムコ多糖を同定するための研究用試
薬として、プロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ・
ｖｕｌｇａｒｉｓ）菌の産生する酵素商品が市販されて
いる。
去したり、組織中のムコ多糖を同定するための研究用試
薬として、プロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ・
ｖｕｌｇａｒｉｓ）菌の産生する酵素商品が市販されて
いる。
【０００４】一方、ヒトの腰痛の病因として区分される
椎間板ヘルニア症の治療に、植物パパイヤ由来の蛋白分
解酵素キモパパインや、バクテリア由来の膠質分解酵素
コラゲナーゼ等を、該ヘルニア症患者の椎間板腔に注入
し、ヘルニアを溶解する椎間板溶解療法（ＩＤ療法）が
開発され、欧米に於ては、キモパパインが医薬品（商品
名キモダイアクチン）として販売されている。
椎間板ヘルニア症の治療に、植物パパイヤ由来の蛋白分
解酵素キモパパインや、バクテリア由来の膠質分解酵素
コラゲナーゼ等を、該ヘルニア症患者の椎間板腔に注入
し、ヘルニアを溶解する椎間板溶解療法（ＩＤ療法）が
開発され、欧米に於ては、キモパパインが医薬品（商品
名キモダイアクチン）として販売されている。
【０００５】然るに、上記蛋白分解酵素を用いるＩＤ療
法は、脊椎・椎間板のヘルニア部分のみならず、周辺の
構造組織の蛋白部分をも分解し、神経麻脾や、アレルギ
ー発現等、副作用を生じやすい欠点を有する。
法は、脊椎・椎間板のヘルニア部分のみならず、周辺の
構造組織の蛋白部分をも分解し、神経麻脾や、アレルギ
ー発現等、副作用を生じやすい欠点を有する。
【０００６】Ｒ．Ｂｒｏｗｎは、ヘルニアに特異的に作
用する酵素の検索の結果、ヘルニアの主たる構成因子で
あるプロテオグリカンの分解に着目し、コンドロイチナ
ーゼＡＢＣ、及びコンドロイチナーゼＡＣを用いるＩＤ
療法を提案した（米国特許第４，６９６，８１６号）。
用する酵素の検索の結果、ヘルニアの主たる構成因子で
あるプロテオグリカンの分解に着目し、コンドロイチナ
ーゼＡＢＣ、及びコンドロイチナーゼＡＣを用いるＩＤ
療法を提案した（米国特許第４，６９６，８１６号）。
【０００７】然し、このような脊椎・椎間板に注入し、
その患部に作用せしめる薬剤は、極めて純化された酵素
を変性の無い状態で使用することにより、副作用の発現
が低減出来る。上記米国特許第４，６９６，８１６号記
載の発明によれば、ＩＤ療法に用いる酵素（コンドロイ
チナーゼＡＢＣ）は保存剤無しで、無菌状態で、凍結乾
燥した高純度（１００Ｕ／ｍｇ以上）のコンドロイチナ
ーゼを−２０℃の低温に保存し、使用直前に無菌水に溶
解して使用することも特定している。
その患部に作用せしめる薬剤は、極めて純化された酵素
を変性の無い状態で使用することにより、副作用の発現
が低減出来る。上記米国特許第４，６９６，８１６号記
載の発明によれば、ＩＤ療法に用いる酵素（コンドロイ
チナーゼＡＢＣ）は保存剤無しで、無菌状態で、凍結乾
燥した高純度（１００Ｕ／ｍｇ以上）のコンドロイチナ
ーゼを−２０℃の低温に保存し、使用直前に無菌水に溶
解して使用することも特定している。
【０００８】
【解決しようとする問題点】しかし、このように比活性
の高い、高純度のコンドロイチナーゼＡＢＣは安定性が
非常に低く、凍結乾燥時または通常の条件において保存
する時、その酵素活性が著しく低下する。このように安
定性が低い酵素は、試薬として、殊に医薬品として市場
に流通させることは困難である。従来コンドロイチナー
ゼＡＢＣは、−２０℃以下での凍結保存という条件でそ
の活性の低下を防止していた。しかし、−２０℃以下で
凍結保存することは、それ自体試薬または医薬品として
の用途を制限していることになる。
の高い、高純度のコンドロイチナーゼＡＢＣは安定性が
非常に低く、凍結乾燥時または通常の条件において保存
する時、その酵素活性が著しく低下する。このように安
定性が低い酵素は、試薬として、殊に医薬品として市場
に流通させることは困難である。従来コンドロイチナー
ゼＡＢＣは、−２０℃以下での凍結保存という条件でそ
の活性の低下を防止していた。しかし、−２０℃以下で
凍結保存することは、それ自体試薬または医薬品として
の用途を制限していることになる。
【０００９】
【問題点を解決するための手段】そこで本発明者は、コ
ンドロイチナーゼＡＢＣの凍結乾燥時の活性低下を防ぎ
また保存安定性を改良することについて研究を重ねたと
ころ、コンドロイチナーゼＡＢＣに或る種の成分を添加
して凍結乾燥すると、凍結乾燥時の活性低下が防止でき
、かくして得られた乾燥コンドロイチナーゼＡＢＣは、
常温程度の温度で保存しても活性の低下は少なく、その
上、そのまゝ局所注入用の椎間板ヘルニア治療剤として
使用しうることを見出し本発明に到達した。
ンドロイチナーゼＡＢＣの凍結乾燥時の活性低下を防ぎ
また保存安定性を改良することについて研究を重ねたと
ころ、コンドロイチナーゼＡＢＣに或る種の成分を添加
して凍結乾燥すると、凍結乾燥時の活性低下が防止でき
、かくして得られた乾燥コンドロイチナーゼＡＢＣは、
常温程度の温度で保存しても活性の低下は少なく、その
上、そのまゝ局所注入用の椎間板ヘルニア治療剤として
使用しうることを見出し本発明に到達した。
【００１０】かくして本発明によれば、デキストラン類
、サッカロース、ラクトース、マルトース、マンニトー
ル、キシリトール、ソルビトールおよび血清アルブミン
よりなる群から選ばれた少なくとも１種の添加成分を含
有する乾燥した安定化コンドロイチナーゼＡＢＣが提供
される。
、サッカロース、ラクトース、マルトース、マンニトー
ル、キシリトール、ソルビトールおよび血清アルブミン
よりなる群から選ばれた少なくとも１種の添加成分を含
有する乾燥した安定化コンドロイチナーゼＡＢＣが提供
される。
【００１１】また、本発明によればデキストラン類、サ
ッカロース、ラクトース、マルトース、マンニトール、
キシリトール、ソルビトールおよび血清アルブミンより
なる群から選ばれた少なくとも１種の添加成分と、コン
ドロイチナーゼＡＢＣとの混合物を含む水性媒体溶液を
凍結乾燥し、得られた乾燥物を、該添加成分がデキスト
ラン類または血清アルブミンの場合には約４０℃以下の
温度で、該添加成分がサッカロース、マンニトール、キ
シリトールまたはソルビトールの場合には約２０℃以下
の温度で、該添加成分がマルトースまたはラクトースの
場合には約１０℃以下の温度で保存・貯蔵することを特
徴とする乾燥した安定化コンドロイチナーゼＡＢＣの保
存方法が提供される。
ッカロース、ラクトース、マルトース、マンニトール、
キシリトール、ソルビトールおよび血清アルブミンより
なる群から選ばれた少なくとも１種の添加成分と、コン
ドロイチナーゼＡＢＣとの混合物を含む水性媒体溶液を
凍結乾燥し、得られた乾燥物を、該添加成分がデキスト
ラン類または血清アルブミンの場合には約４０℃以下の
温度で、該添加成分がサッカロース、マンニトール、キ
シリトールまたはソルビトールの場合には約２０℃以下
の温度で、該添加成分がマルトースまたはラクトースの
場合には約１０℃以下の温度で保存・貯蔵することを特
徴とする乾燥した安定化コンドロイチナーゼＡＢＣの保
存方法が提供される。
【００１２】さらに本発明によれば、デキストラン類、
サッカロース、ラクトース、マルトース、マンニトール
、キシリトール、ソルビトールおよび血清アルブミンよ
りなる群から選ばれた少なくとも１種の添加成分を含有
する乾燥した安定化コンドロイチナーゼＡＢＣを有効成
分とする椎間板ヘルニア治療剤が提供される。
サッカロース、ラクトース、マルトース、マンニトール
、キシリトール、ソルビトールおよび血清アルブミンよ
りなる群から選ばれた少なくとも１種の添加成分を含有
する乾燥した安定化コンドロイチナーゼＡＢＣを有効成
分とする椎間板ヘルニア治療剤が提供される。
【００１３】以下本発明についてさらに詳細に説明する
。
。
【００１４】本発明において、コンドロイチナーゼＡＢ
Ｃに配合される添加成分は、デキストラン類、サッカロ
ース、ラクトース、マルトース、マンニトール、キシリ
トール、ソルビトール、血清アルブミン或いはこれらの
２種以上の混合物である。デキストラン類としては分子
量が約４０，０００〜約７０，０００のものが好ましく
、具体例としてはデキストラン４０が挙げられる。また
血清アルブミンとしては、例えば人血清アルブミン、牛
血清アルブミンが好ましいが、医薬用の目的のためには
人血清アルブミンが望ましい。これらのうち、デキスト
ラン類、キシリトール、ソルビトール、マンニトール及
び血清アルブミンよりなる群から選ばれた少なくとも１
種が凍結乾燥時の活性低下及び凍結乾燥時の活性低下を
共に抑制する効果が優れているので好ましい。
Ｃに配合される添加成分は、デキストラン類、サッカロ
ース、ラクトース、マルトース、マンニトール、キシリ
トール、ソルビトール、血清アルブミン或いはこれらの
２種以上の混合物である。デキストラン類としては分子
量が約４０，０００〜約７０，０００のものが好ましく
、具体例としてはデキストラン４０が挙げられる。また
血清アルブミンとしては、例えば人血清アルブミン、牛
血清アルブミンが好ましいが、医薬用の目的のためには
人血清アルブミンが望ましい。これらのうち、デキスト
ラン類、キシリトール、ソルビトール、マンニトール及
び血清アルブミンよりなる群から選ばれた少なくとも１
種が凍結乾燥時の活性低下及び凍結乾燥時の活性低下を
共に抑制する効果が優れているので好ましい。
【００１５】前記した添加成分は、コンドロイチナーゼ
ＡＢＣに対して重量で０．２倍以上で効果が認められる
が、好ましくは０．５〜１００倍の割合で配合される。
ＡＢＣに対して重量で０．２倍以上で効果が認められる
が、好ましくは０．５〜１００倍の割合で配合される。
【００１６】本発明において、添加成分をコンドロイチ
ナーゼＡＢＣに配合するには、その凍結乾燥時であるの
が最も好ましい。かくすることにより凍結乾燥時におけ
るコンドロイチナーゼＡＢＣの活性低下を大巾に防止で
きる。その際コンドロイチナーゼＡＢＣに所定量の添加
成分を加えて水性媒体中で混合し、通常の方法に従って
凍結乾燥することにより、乾燥した安定化コンドロイチ
ナーゼＡＢＣが得られる。
ナーゼＡＢＣに配合するには、その凍結乾燥時であるの
が最も好ましい。かくすることにより凍結乾燥時におけ
るコンドロイチナーゼＡＢＣの活性低下を大巾に防止で
きる。その際コンドロイチナーゼＡＢＣに所定量の添加
成分を加えて水性媒体中で混合し、通常の方法に従って
凍結乾燥することにより、乾燥した安定化コンドロイチ
ナーゼＡＢＣが得られる。
【００１７】かくして得られた乾燥コンドロイチナーゼ
ＡＢＣは、常温程度の温度で保存しても、その活性低下
は少ない。保存すべき温度の上限は、保存期間や使用目
的に応じて変えられるが、添加成分の種類に概して依存
している。添加成分がデキストラン類または血清アルブ
ミンの場合には約４０℃以下の温度、サッカロース、マ
ンニトール、キシリトールまたはソルビトールの場合に
は約２０℃以下の温度、またマルトースまたはラクトー
スの場合には約１０℃以下の温度で保存し貯蔵するのが
適当である。一般的に保存温度は低い方が活性低下は少
ない。
ＡＢＣは、常温程度の温度で保存しても、その活性低下
は少ない。保存すべき温度の上限は、保存期間や使用目
的に応じて変えられるが、添加成分の種類に概して依存
している。添加成分がデキストラン類または血清アルブ
ミンの場合には約４０℃以下の温度、サッカロース、マ
ンニトール、キシリトールまたはソルビトールの場合に
は約２０℃以下の温度、またマルトースまたはラクトー
スの場合には約１０℃以下の温度で保存し貯蔵するのが
適当である。一般的に保存温度は低い方が活性低下は少
ない。
【００１８】かくして本発明により得られた乾燥コンド
ロイチナーゼＡＢＣは酵素活性を高い水準に維持し、そ
の保存安定性も良好でありしかも添加成分は人体に許容
しうる化合物であるので、これを医薬用注射剤として使
用するに極めて適している。すなわち、椎間板ヘルニア
の治療のための注射剤として本発明の乾燥した安定化コ
ンドロイチナーゼＡＢＣは極めて有利に使用される。従
来のコンドロイチナーゼＡＢＣは、保存安定性が低く、
且つ−２０℃以下の極低温で保存する必要があったので
、治療剤として実用的には不適当であった。
ロイチナーゼＡＢＣは酵素活性を高い水準に維持し、そ
の保存安定性も良好でありしかも添加成分は人体に許容
しうる化合物であるので、これを医薬用注射剤として使
用するに極めて適している。すなわち、椎間板ヘルニア
の治療のための注射剤として本発明の乾燥した安定化コ
ンドロイチナーゼＡＢＣは極めて有利に使用される。従
来のコンドロイチナーゼＡＢＣは、保存安定性が低く、
且つ−２０℃以下の極低温で保存する必要があったので
、治療剤として実用的には不適当であった。
【００１９】以下実施例を揚げて本発明を詳述する。
【００２０】なお、コンドロイチナーゼＡＢＣの活性測
定の方法はザ・ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケ
ミストリーの２４３巻、１５２３頁〜１５３３頁、１９
６８年の山形らの方法に従った。
定の方法はザ・ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケ
ミストリーの２４３巻、１５２３頁〜１５３３頁、１９
６８年の山形らの方法に従った。
【００２１】また、コンドロイチナーゼＡＢＣの１単位
のコンドロイチン硫酸を基質として、３７℃で反応した
とき、１分間に１マイクロモル（μ ｍｏｌｅ）の不
飽和二糖を遊離させる酵素量である。
のコンドロイチン硫酸を基質として、３７℃で反応した
とき、１分間に１マイクロモル（μ ｍｏｌｅ）の不
飽和二糖を遊離させる酵素量である。
【００２２】
【実施例１】凍結乾燥時における各種添加剤の活性維持
効果：コンドロイチナーゼＡＢＣ１０単位に表１に示す
ような物質を酵素蛋白量（４０μｇ）の０．１、０．２
、０．５、１、１０及び１００倍量添加した溶液をバイ
アル瓶に入れ、凍結乾燥し、凍結乾燥品の活性を測定し
て凍結乾燥時における添加剤の活性維持効果を調べた。 その結果、牛血清アルブミン（ＢＳＡ）、人血清アルブ
ミン（ＨＳＡ）、キシリトール、ソルビトール、マンニ
トール、ラクトース、サッカロース、マルトース及びデ
キストラン４０は無添加のものに比べ凍結乾燥品の酵素
活性の残存率は高かった。これらの添加剤には凍結乾燥
時に活性を維持する効果が認められた。凍結乾燥時に上
記の各種物質をコンドロイチナーゼＡＢＣに添加するこ
とにより、活性を維持したまま、凍結乾燥製剤を得るこ
とができる。
効果：コンドロイチナーゼＡＢＣ１０単位に表１に示す
ような物質を酵素蛋白量（４０μｇ）の０．１、０．２
、０．５、１、１０及び１００倍量添加した溶液をバイ
アル瓶に入れ、凍結乾燥し、凍結乾燥品の活性を測定し
て凍結乾燥時における添加剤の活性維持効果を調べた。 その結果、牛血清アルブミン（ＢＳＡ）、人血清アルブ
ミン（ＨＳＡ）、キシリトール、ソルビトール、マンニ
トール、ラクトース、サッカロース、マルトース及びデ
キストラン４０は無添加のものに比べ凍結乾燥品の酵素
活性の残存率は高かった。これらの添加剤には凍結乾燥
時に活性を維持する効果が認められた。凍結乾燥時に上
記の各種物質をコンドロイチナーゼＡＢＣに添加するこ
とにより、活性を維持したまま、凍結乾燥製剤を得るこ
とができる。
【００２３】なお、凍結乾燥時の条件は、比活性１００
ユニット／ｍｇ以上のＣｈａｓｅＡＢＣを蛋白として０
．０５〜１．０ｍｇ及び該添加剤を０．０５−１００ｍ
ｇ好ましくは０．２５−１００ｍｇを水または生理食塩
液０．５−１．０ｍｌの割合に溶解した後に無菌ろ過を
行い、バイアルまたはアンプルに無菌的に分注し、凍結
乾燥を行った。
ユニット／ｍｇ以上のＣｈａｓｅＡＢＣを蛋白として０
．０５〜１．０ｍｇ及び該添加剤を０．０５−１００ｍ
ｇ好ましくは０．２５−１００ｍｇを水または生理食塩
液０．５−１．０ｍｌの割合に溶解した後に無菌ろ過を
行い、バイアルまたはアンプルに無菌的に分注し、凍結
乾燥を行った。
【００２４】
【表１】
【００２５】
【実施例２】凍結乾燥品の１５℃に保存したときの各種
添加剤の活性保存効果：コンドロイチナーゼＡＢＣ１０
単位に表２に示すような物質を酵素蛋白量（４０μｇ）
の０．１、０．２、０．５、１、１０及び１００倍量添
加した溶液をバイアル瓶に入れ、凍結乾燥したのち、１
５℃に１ケ月間保存し、保存後の活性を測定して添加剤
の活性保存効果を調べた。その結果、人血清アルブミン
（ＨＳＡ）、キシリトール、ソルビトール、ラクトース
、マルトース及びデキストラン４０を０．２倍量以上添
加したものの保存後の活性は無添加のものに比べいずれ
も高く、これら添加剤の保存時における活性保存効果が
認められた。しかし、０．１倍量では活性保存効果はわ
ずかしかなかった。
添加剤の活性保存効果：コンドロイチナーゼＡＢＣ１０
単位に表２に示すような物質を酵素蛋白量（４０μｇ）
の０．１、０．２、０．５、１、１０及び１００倍量添
加した溶液をバイアル瓶に入れ、凍結乾燥したのち、１
５℃に１ケ月間保存し、保存後の活性を測定して添加剤
の活性保存効果を調べた。その結果、人血清アルブミン
（ＨＳＡ）、キシリトール、ソルビトール、ラクトース
、マルトース及びデキストラン４０を０．２倍量以上添
加したものの保存後の活性は無添加のものに比べいずれ
も高く、これら添加剤の保存時における活性保存効果が
認められた。しかし、０．１倍量では活性保存効果はわ
ずかしかなかった。
【００２６】上記の各種物質をコンドロイチナーゼＡＢ
Ｃに添加することにより、保存時の活性の低下を少なく
することができる。表には示さなかったが、牛血清アル
ブミンとマンニトールにも同じような活性保存効果がみ
られた。
Ｃに添加することにより、保存時の活性の低下を少なく
することができる。表には示さなかったが、牛血清アル
ブミンとマンニトールにも同じような活性保存効果がみ
られた。
【００２７】
【表２】
【００２８】
【表３】
【００２９】
【実施例３】凍結乾燥品を異なる温度に保存したときの
各種添加剤の活性保存効果：コンドロイチナーゼＡＢＣ
１０単位に表３に示すような物質を酵素蛋白量（４０μ
ｇ）の１００倍量添加した溶液をバイアル瓶に入れ、凍
結乾燥したのち、−２０℃、４℃、１５℃に２ケ月間及
び４０℃に１ケ月間保存し、保存後の活性を測定して添
加剤の活性保存効果を調べた。その結果、牛血清アルブ
ミン（ＢＳＡ）、人血清アルブミン（ＨＳＡ）、デキス
トラン４０はいずれの保存温度条件でも活性保存効果が
認められた。一方、他の糖及び糖アルコールは１５℃以
下の保存条件では活性保存効果が認められたが、４０℃
での保存ではその効果が殆どないか、または小さかった
。
各種添加剤の活性保存効果：コンドロイチナーゼＡＢＣ
１０単位に表３に示すような物質を酵素蛋白量（４０μ
ｇ）の１００倍量添加した溶液をバイアル瓶に入れ、凍
結乾燥したのち、−２０℃、４℃、１５℃に２ケ月間及
び４０℃に１ケ月間保存し、保存後の活性を測定して添
加剤の活性保存効果を調べた。その結果、牛血清アルブ
ミン（ＢＳＡ）、人血清アルブミン（ＨＳＡ）、デキス
トラン４０はいずれの保存温度条件でも活性保存効果が
認められた。一方、他の糖及び糖アルコールは１５℃以
下の保存条件では活性保存効果が認められたが、４０℃
での保存ではその効果が殆どないか、または小さかった
。
【００３０】
【表４】
【００３１】
【表５】
Claims (8)
- 【請求項１】 デキストラン類、サッカロース、ラク
トース、マルトース、マンニトール、キシリトール、ソ
ルビトールおよび血清アルブミンよりなる群から選ばれ
た少なくとも１種の添加成分を含有する乾燥した安定化
コンドロイチナーゼＡＢＣ。 - 【請求項２】 該添加成分がコンドロイチナーゼＡＢ
Ｃに対して重量で０．２〜１００倍含有される請求項１
記載の安定化コンドロイチナーゼＡＢＣ。 - 【請求項３】 該コンドロイチナーゼＡＢＣの比活性
が、少なくとも１００単位／ｍｇである請求項１または
２記載の安定化コンドロイチナーゼＡＢＣ。 - 【請求項４】 デキストラン類、サッカロース、ラク
トース、マルトース、マンニトール、キシリトール、ソ
ルビトールおよび血清アルブミンよりなる群から選ばれ
た少なくとも１種の添加成分と、コンドロイチナーゼＡ
ＢＣとの混合物を含む水性媒体溶液を凍結乾燥し、得ら
れた乾燥物を、該添加成分がデキストラン類または血清
アルブミンの場合には約４０℃以下の温度で、該添加成
分がサッカロース、マンニトール、キシリトールまたは
ソルビトールの場合には約２０℃以下の温度で、該添加
成分がマルトースまたはラクトースの場合には約１０℃
以下の温度で保存・貯蔵することを特徴とする乾燥した
安定化コンドロイチナーゼＡＢＣの保存方法。 - 【請求項５】 該添加成分がコンドロイチナーゼＡＢ
Ｃに対して重量で１〜１００倍含有される請求項４記載
の乾燥した安定化コンドロイチナーゼＡＢＣの保存方法
。 - 【請求項６】 デキストラン類、サッカロース、ラク
トース、マルトース、マンニトール、キシリトール、ソ
ルビトールおよび血清アルブミンよりなる群から選ばれ
た少なくとも１種の添加成分を含有する乾燥した安定化
コンドロイチナーゼＡＢＣを有効成分とする椎間板ヘル
ニア治療剤。 - 【請求項７】 該添加成分が、コンドロイチナーゼＡ
ＢＣに対して重量で０．２〜１００倍含有される請求項
６記載の治療剤。 - 【請求項８】 該コンドロイチナーゼＡＢＣの比活性
が少なくとも１００単位／ｍｇである請求項６または７
記載の治療剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03125385A JP3140797B2 (ja) | 1991-04-26 | 1991-04-26 | 安定化コンドロイチナーゼａｂｃ、その保存方法及び治療剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03125385A JP3140797B2 (ja) | 1991-04-26 | 1991-04-26 | 安定化コンドロイチナーゼａｂｃ、その保存方法及び治療剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04330280A true JPH04330280A (ja) | 1992-11-18 |
| JP3140797B2 JP3140797B2 (ja) | 2001-03-05 |
Family
ID=14908830
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP03125385A Expired - Lifetime JP3140797B2 (ja) | 1991-04-26 | 1991-04-26 | 安定化コンドロイチナーゼａｂｃ、その保存方法及び治療剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3140797B2 (ja) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5496718A (en) * | 1992-06-26 | 1996-03-05 | Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha (Seikagaku Corporation) | Chondroitinase ABC isolated from proteus vulgaris ATCC 6896 |
| EP0747469A1 (en) | 1995-06-08 | 1996-12-11 | The Procter & Gamble Company | Cleaning compositions comprising chondroitinase |
| JPH1084954A (ja) * | 1996-07-25 | 1998-04-07 | Rikagaku Kenkyusho | 酵素を熱活性化する方法 |
| US6007810A (en) * | 1997-05-02 | 1999-12-28 | Seikagaku Corporation | Chondroitinase compositions |
| WO2003004633A1 (fr) * | 2001-07-02 | 2003-01-16 | Asahi Kasei Kabushiki Kaisha | Procede de stabilisation de la phosphatase alcaline |
| EP1189600B1 (en) * | 1999-06-30 | 2003-09-10 | Applied Research Systems ARS Holding N.V. | Grf-containing lyophilized pharmaceutical compositions |
| WO2013039244A1 (ja) * | 2011-09-15 | 2013-03-21 | 生化学工業株式会社 | 骨格筋再生促進剤 |
| JP2016523267A (ja) * | 2013-07-01 | 2016-08-08 | 上海賀普薬業股▲分▼有限公司Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｈｅｐ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ．， Ｌｔｄ． | ヘプラペプチドの製剤 |
| CN111727050A (zh) * | 2018-02-28 | 2020-09-29 | 生化学工业株式会社 | 药物组合物、包装体及其制造方法 |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP7110360B2 (ja) | 2017-10-09 | 2022-08-01 | テルモ ビーシーティー バイオテクノロジーズ，エルエルシー | 凍結乾燥方法 |
| EP3760220B1 (en) * | 2018-02-28 | 2025-02-19 | Seikagaku Corporation | A package comprising lyophilized chondroitinase abc and method for manufacturing the same |
| CN113597532B (zh) | 2019-03-14 | 2023-02-17 | 泰尔茂比司特生物技术有限公司 | 冻干容器填充固定装置、系统及使用方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4696816A (en) | 1985-11-07 | 1987-09-29 | Brown Mark D | Method for treating intervertebral disc displacement with enzymes |
-
1991
- 1991-04-26 JP JP03125385A patent/JP3140797B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5496718A (en) * | 1992-06-26 | 1996-03-05 | Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha (Seikagaku Corporation) | Chondroitinase ABC isolated from proteus vulgaris ATCC 6896 |
| EP0747469A1 (en) | 1995-06-08 | 1996-12-11 | The Procter & Gamble Company | Cleaning compositions comprising chondroitinase |
| JPH1084954A (ja) * | 1996-07-25 | 1998-04-07 | Rikagaku Kenkyusho | 酵素を熱活性化する方法 |
| US6007810A (en) * | 1997-05-02 | 1999-12-28 | Seikagaku Corporation | Chondroitinase compositions |
| EP0875253A3 (en) * | 1997-05-02 | 2000-11-22 | Seikagaku Corporation | Chondroitinase compositions |
| EP1189600B1 (en) * | 1999-06-30 | 2003-09-10 | Applied Research Systems ARS Holding N.V. | Grf-containing lyophilized pharmaceutical compositions |
| US8431534B2 (en) | 1999-06-30 | 2013-04-30 | Merck Serono Sa | GRF-containing lyophilized pharmaceutical compositions |
| WO2003004633A1 (fr) * | 2001-07-02 | 2003-01-16 | Asahi Kasei Kabushiki Kaisha | Procede de stabilisation de la phosphatase alcaline |
| WO2013039244A1 (ja) * | 2011-09-15 | 2013-03-21 | 生化学工業株式会社 | 骨格筋再生促進剤 |
| JPWO2013039244A1 (ja) * | 2011-09-15 | 2015-03-26 | 生化学工業株式会社 | 骨格筋再生促進剤 |
| US9144601B2 (en) | 2011-09-15 | 2015-09-29 | Seikagaku Corporation | Skeletal muscle regeneration promoter |
| JP2016523267A (ja) * | 2013-07-01 | 2016-08-08 | 上海賀普薬業股▲分▼有限公司Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｈｅｐ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ．， Ｌｔｄ． | ヘプラペプチドの製剤 |
| JP2019070016A (ja) * | 2013-07-01 | 2019-05-09 | 上海賀普薬業股▲分▼有限公司Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｈｅｐ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ．， Ｌｔｄ． | ヘプラペプチドの製剤 |
| US10603352B2 (en) | 2013-07-01 | 2020-03-31 | Shanghai Hep Pharmaceutical Co., Ltd. | Formulations of hepalatide |
| CN111727050A (zh) * | 2018-02-28 | 2020-09-29 | 生化学工业株式会社 | 药物组合物、包装体及其制造方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3140797B2 (ja) | 2001-03-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4696816A (en) | Method for treating intervertebral disc displacement with enzymes | |
| CA2246033C (en) | Therapeutic agent for herniated intervertebral disc | |
| JP6440691B2 (ja) | ボツリヌス神経毒を含む医薬組成物およびその使用 | |
| US4478829A (en) | Pharmaceutical preparation containing purified fibronectin | |
| US20090028906A1 (en) | Process for providing a temperature-stable muscle relaxant on the basis of the neurotoxic component of botulinum toxin in a solid form | |
| JPH04330280A (ja) | 安定化コンドロイチナーゼａｂｃ、その保存方法及び治療剤 | |
| MX2007004534A (es) | Composiciones que contienen lipasa, proteasa y amilasa para tratar la insuficiencia pancreatica. | |
| KR20080108996A (ko) | 셀룰라이트 치료용 아교질분해효소 | |
| MX2014004792A (es) | Metodo de tratamiento o reduccion de efp. | |
| US20080025963A1 (en) | Compositions and methods for the treatment of CNS injuries | |
| EP3525769A1 (de) | Schmelztablette enthaltend burlulipase und daraus hergestellte pharmazeutische zusammensetzung | |
| CA1187791A (en) | Insoluble crosslinked cytotoxic oxidase-peroxidase system | |
| EP0124018B1 (en) | Pharmaceutical preparation containing purified fibronectin | |
| JP4172842B2 (ja) | コンドロイチナーゼ組成物 | |
| JPH06135851A (ja) | コンドロイチナーゼ組成物およびそれを含有する注射用製剤 | |
| JP7321142B2 (ja) | 医薬組成物、包装体及びその製造方法 | |
| JP4728459B2 (ja) | 椎間板ヘルニア治療剤 | |
| JPH0767642A (ja) | 酵素組成物 | |
| JPH03503644A (ja) | ヘパリン含有製剤 | |
| JP4833430B2 (ja) | 窒素酸化物産生抑制剤 | |
| RU2788173C2 (ru) | Фармацевтическая композиция, упаковка и способ ее получения | |
| JPH0458451B2 (ja) | ||
| WO2004110479A1 (de) | Hyaluronatlyase enthaltendes mittel zur behandlung des akuten myokardinfarktes bzw. symptomen darauf sowie zur behandlung von postinfarktioneller myokarditis und myokardischämie | |
| BR112020016631B1 (pt) | Método para produção de uma embalagem | |
| DE10211457A1 (de) | Verwendung von Hyaluronatlyase zur Behandlung von Myokardinfarkten |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20081215 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091215 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091215 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20101215 Year of fee payment: 10 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20111215 Year of fee payment: 11 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term | ||
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20111215 Year of fee payment: 11 |