JPH04342567A - Ｎ−置換−１−デオキシノジリマイシンの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、Ｎ−置換−１−デオキ
シノジリマイシン及びその製造のための中間体の製造方
法に関する。

【０００２】

【従来の技術】１−アミノソルビトールを微生物学的に
酸化して６−アミノソルボースを得、これをその後触媒
で水素化して１−デオキシノジリマイシンを得る、１−
デオキシノジリマイシンの製造方法は、米国特許第４，
２４６，３４５号に開示されている。しかしながら、こ
の方法の収率、特に微生物学的反応における低容量の収
率は分解の問題、及び短い反応時間に関連し、加えて、
１−デオキシノジリマイシンのＮ−置換誘導体の製造方
法は開示されていない。

【０００３】１−デオキシノジリマイシンがアミノソル
ビトールをその後のマイクロバイアル（ｍｉｃｒｏｂｉ
ａｌ）酸化で安定な保護により保護されて作ることがで
きるのが知られている。この保護基はその後触媒的水素
化により除去しうる。このような方法は、米国特許第４
，２６６，０２５号に開示されている。この　’０２５
特許では、保護されたアミノ糖を、微生物学的に酸化し
、保護６−アミノソルボースを得、これをその後単離す
る。この保護基をその後触媒的水素化により除去し、そ
して、環を再閉鎖して、１−デオキシノジリマイシンの
Ｎ−置換基を形成する。しかしながら、この　’０２５
方法は、水素化工程において大量の触媒を必要とする。 更に、６−アミノ−ソルボースはそうはたやすく単離す
ることはできない。

【０００４】米国特許第４，４０５，７１４は、グルコ
ースを１−アミノソルビトールに変換し、つづいて１−
アミノソルビトールを、その後の微生物学的酸化プロセ
スにおいて安定な保護基により保護する１−デオキシノ
ジリマイシンのＮ−置換誘導体を製造する方法を開示し
ている。保護基をその後の酸性条件下で除去する。化合
物をマイクロバイアル的に酸化して、保護化６−アミノ
ソルボースを得る。６−アミノソルボース上の保護基を
その後酸性条件下除去する。かくして得られた６−アミ
ノソルボース塩は、触媒により水素化して１−デオキシ
ノジリマイシンのＮ−置換誘導体を得る。この　’７１
４方法は、　’０２５方法のように１−デオキシノジリ
マイシンのＮ−置換誘導体を得るために保護基の使用を
必要とする。

【０００５】１−デオキシノジリマイシンのＮ−置換誘
導体が、保護基の使用を必要としない方法により製造し
うることが見出された。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明は、式：

【化９】 のグルカミン又はその塩をマイクローブ（ｍｉｃｒｏｂ
ｅ）又はその抽出物で酸化し、そして式：

【化１０】 の化合物又はその塩を製造もすることを含む方法である
（式中、各場合のＲは、フェニル、Ｃ１　〜Ｃ１０アル
キル、フェニル又はカルボキシで置換されたＣ１　〜Ｃ
１０アルキル、又はヒドロキシで置換されたＣ２　〜Ｃ
１０アルキルである）。

【０００７】本発明の一例では、上記の反応により製造
された６−（置換アミノ）−６−デオキシ−α−Ｌ−ソ
ルボフラノースは還元されて、式ＩＩＩ　（次に示す）
のＮ−置換−１−デオキシノジリマイシン又はその塩と
なる。

【化１１】

【０００８】（式中、Ｒは、上記したものに同じである
）。本発明のもうひとつの例では、Ｄ−グルコースがワ
ンポットプロセス（ｏｎｅｐｏｔ　　ｐｒｏｃｅｓｓ）
で、Ｎ−置換−１−デオキシノジリマイシンに変換され
る。

【化１２】

【０００９】本発明のもうひとつの例は、Ｎ−置換グル
カミン又はその塩を製造する方法である。もうひとつの
例において、化合物６−ブチルアミノ−６−デオキシ−
α−Ｌ−ソルボフラノース及びその塩を開示している。 式ＩＩの構造の正確な型はソルボースが存在する環境に
よって決まる（ｄｉｃｔａｔｅ）（Ｈ．Ｐａｕｌｓｅｎ
等、Ｃｈｅｍ．Ｂｅｒ．１００：８０２（１９６７）参
照）。ソルボフラノース又はソルボース命名の使用は、
この化合物が、その等価な型の別の型で存在しえないと
いうことを意味するものではない。

【００１０】Ｎ−置換グリカミンの微生物的酸化により
製造された６−（置換アミノ）−６−デオキシ−α−Ｌ
−ソルボフラノースは、Ｎ−置換−１−デオキシノジリ
マイシン化合物（これは、抗ビールス剤、抗利尿剤、抗
ダイアベーテス剤、動物飼料添加剤及び抗過血糖剤）を
製造する中間体として有用である。

【００１１】ここで使用するように、上記式Ｉのグリカ
ミンは、Ｎ−置換グリカミン（１−（置換アミノ）−１
−デオキシ−Ｄ−グルシトールとして知られている）を
意味する。上記式ＩＩの化合物は、以後、６−置換アミ
ノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースと呼ぶ。 上記式ＩＩＩ　の化合物をＮ−置換−１−デオキシノジ
リマイシン（１，５−（置換イミノ）−１，５−ジデオ
キシ−Ｄ−グルシトール及び１−置換−３，４，５−ト
リヒドロキシ−２−ピペリジニルメタノールとして知ら
れている）と呼ぶ。

【００１２】直鎖又は分枝アルキルが本発明の方法を実
施するのに適切である。Ｃ１　−Ｃ５　アルキル基が好
ましい。適当なアルキル基の例は、メチル、エチル、ｎ
−プロピル、１−メチルエチル、ｎ−ブチル、１−メチ
ルプロピル、１，１−ジメチルエチル、ｎ−ペンチル、
３−メチルブチル、１−メチルブチル、２−メチルブチ
ル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−
ノニル、及びｎ−デシルである。適当なヒドロキシ置換
アルキル基は、２−ヒドロキシエチル、３−ヒドロキシ
プロピル、４−ヒドロキシブチル、５−ヒドロキシペン
チル、６−ヒドロキシヘキシル、７−ヒドロキシヘプチ
ル、８−ヒドロキシオクチル、９−ヒドロキシノニル、
及び１０−ヒドロキシデシルである。適当なカルボキシ
置換アルキル基は、カルボキシメチル、２−カルボキシ
エチル、３−カルボキシプロピル、４−カルボキシブチ
ル、５−カルボキシペンチル、６−カルボキシヘキシル
、７−カルボキシヘプチル、８−カルボキシオクチル、
９−カルボキシノニル、及び１０−カルボキシデシルで
ある。適当なフェニル置換アルキル基は、フェニルメチ
ル（ベンジル）、２−フェニルエチル、３−フェニルプ
ロピル、４−フェニルブチル、５−フェニルペンチル、
６−フェニルヘキシル、７−フェニルヘプチル、８−フ
ェニルオクチル、９−フェニルノニル、及び１０−フェ
ニルデシルである。フェニル単独でも許容しうる基であ
る。

【００１３】本発明の方法により製造される６−置換ア
ミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースの例は
、６−メチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフ
ラノース、６−エチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−
ソルボフラノース、６−ｎ−プロピルアミノ−６−デオ
キシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−（１−メチルエ
チル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノー
ス、６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソ
ルボフラノース、６−（１−メチルプロピル）アミノ−
６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−（１，
１−ジメチルエチル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−
ソルボフラノース、６−ｎ−ペンチルアミノ−６−デオ
キシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−（３−メチルブ
チル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノー
ス、６−（１−メチルブチル）アミノ−６−デオキシ−
α−Ｌ−ソルボフラノース、６−（２−メチルブチル）
アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６
−ｎ−ヘキシルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボ
フラノース、６−ｎ−ヘプチルアミノ−６−デオキシ−
α−Ｌ−ソルボフラノース、６−ｎ−オクチルアミノ−
６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−ｎ−ノ
ニルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース
、６−ｎ−デシルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソル
ボフラノース、６−（２−ヒドロキシエチル）アミノ−
６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−（３−
ヒドロキシプロピル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−
ソルボフラノース、６−（４−ヒドロキシブチル）アミ
ノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−（
５−ヒドロキシペンチル）アミノ−６−デオキシ−α−
Ｌ−ソルボフラノース、６−（６−ヒドロキシヘキシル
）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、
６−（７−ヒドロキシヘプチル）アミノ−６−デオキシ
−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−（８−ヒドロキシオ
クチル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノ
ース

【００１４】６−（９−ヒドロキシノニル）アミノ−６
−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−（１０−
ヒドロキシデシル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソ
ルボフラノース、６−（カルボキシメチル）アミノ−６
−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−（２−カ
ルボキシエチル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソル
ボフラノース、６−（３−カルボキシプロピル）アミノ
−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−（４
−カルボキシブチル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−
ソルボフラノース、６−（５−カルボキシペンチル）ア
ミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−
（６−カルボキシヘキシル）アミノ−６−デオキシ−α
−Ｌ−ソルボフラノース、６−（７−カルボキシヘプチ
ル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース
、６−（８−カルボキシオクチル）アミノ−６−デオキ
シ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−（９−カルボキシ
ノニル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノ
ース、６−（１０−カルボキシデシル）アミノ−６−デ
オキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−フェニルアミ
ノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−（
フェニルメチル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソル
ボフラノース、６−（２−フェニルエチル）アミノ−６
−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−（３−フ
ェニルプロピル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソル
ボフラノース、６−（４−フェニルブチル）アミノ−６
−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−（５−フ
ェニルペンチル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソル
ボフラノース、６−（６−フェニルヘキシル）アミノ−
６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−（７−
フェニルヘプチル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソ
ルボフラノース、６−（８−フェニルオクチル）アミノ
−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース、６−（９
−フェニルノニル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソ
ルボフラノース、及び６−（１０−フェニルデシル）ア
ミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースである
。

【００１５】式ＩのＮ−置換グルカミンは公知の手段、
例えば、Ｄ−グルコースのアミノ化により得られる。ア
ミンによる糖の還元的（ｒｅｄｕｃｔｉｖｅ）アルキル
化は、Ｎ−置換−１−アミノ−１−デオキシ糖の製造方
法として文献に報告されている。（Ｆ．Ｋａｇａｎ等．
Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，７９，３５４１（
１９５７）、Ａ．Ｍｏｈａｍｍａｄ等，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈ
ｅｍ．Ｓｏｃ．，６６，９６９（１９４７）、Ｐ．Ｎ．
Ｒｙｌａｎｄｅｒ，Ｈｙｄｒｏｇｅｎａｔｉｏｎ　　Ｍ
ｅｔｈｏｄ（Ａｃａｄｅｍｉｃ　　Ｐｒｅｓｓ，（１９
８５）ＰＰ．８２−９３）及びＧ．Ｍｉｔｔｓ等、Ｊ．
Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，６６：４８３（１９４４）
参照）。一般的に、これらの製造方法は、糖とアミンと
を、比率を変えて、水性メタノール又はエタノールのよ
うな適当な溶媒中で反応することを含む。触媒量の塩酸
を場合によって添加する。得られた混合物を４０−１３
００ｐｓｉｇの水素圧下、２３−１００℃で、７−３０
時間水素化する。得られた１−（置換アミノ）−１−デ
オキシ・Ｄ−グルシトール（Ｎ−置換グルカミン）をそ
の後単離する。

【００１６】Ｎ−置換グルカミン塩の好ましい製造方法
において、パールシェーカーボトル（Ｐａｒｒ　　ｓｈ
ａｋｅｒ　　ｂｏｔｔｌｅ）等に、溶媒及びアミンを入
れる。適当な溶媒には水、アルコール（メタノール及び
エタノールのような）又は水性アルコールを含む。好ま
しい溶媒は、エタノールである。適当なアミノは、式Ｉ
、ＩＩ及びＩＩＩ　として述べられたＮ−置換グルカミ
ンを製造するためのアミンを含む。好ましいアミンには
、エチルアミン、ｎ−ブチルアミン、ｎ−オクチルアミ
ン、２−ヒドロキシエチルアミン、フェニルメチルアミ
ン、フェニルアミン及び４−カルボキシブチルアミンを
含む。Ｄ−グルコース対アミンの比率は、約１：１、こ
れにより、生成物が単離することなしに又は過度の試薬
を除去することなしに使用しうるようになる。混合物を
撹拌し、冷却し、同時に約８．０から１２．０の範囲の
ｐＨが得られるまで酸をゆっくりと添加する。適当な酸
には、塩酸、硫酸、硝酸、酢酸、アスコルビン酸、コハ
ク酸、クエン酸、マレイン酸、オキザル酸及びリン酸が
あり、好ましくは塩酸である。

【００１７】パールシェーカーボトルに、Ｄ−グルコー
ス、引き続き炭素上パラジウム（Ｐａ／ｃ）触媒（５０
％水湿）を添加した。約１から５０重量％グルコースを
ロード（ｌｏａｄ）するパラジウム触媒を使用する。好
ましくは、１０％から３０％である。貴金属からの触媒
を使用できる。例えば、プラチナ、パラジウム、ロジウ
ム、及びレニウム、好ましくはパラジウムである。混合
物を水素で約１から１００ａｔｍ、好ましくは３−６ａ
ｔｍ、約２５℃から１００℃、好ましくは、約４０℃か
ら８０℃の温度で反応が完了するまで（水素とり込みに
より示す）振とう及び水素化を行う。水素をベント（ｖ
ｅｎｔ）し、パラジウム／炭素を濾過（好ましくは、粉
末セルロース層を通して）することによって除去する。 触媒を溶媒、例えばアルコール、好ましくはエタノール
、引きつづき水で洗滌する。洗滌物を濾過液と一緒にし
てＮ−置換グルカミン及びその対応する塩の混合物を含
む溶液を得る。混合物を撹拌及び冷却し、同時に塩酸を
添加して最終ｐＨを約１から７、好ましくは約４から６
にする。エタノールを減圧下蒸留により除去する。残渣
を水で希釈し、精製せず微生物酸化の次の工程での使用
に用意する。従って、本方法は、過剰の試薬の単離又は
除去をすることなしにＤ−グルコースからＮ−置換グル
カミン塩を製造するものである。単離及び過剰の試薬の
除去工程の省略により、微生物酸化におけるＮ−置換グ
ルカミンを直接使用でき、この酸化は、６−置換アミノ
−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースをもたらし
、これは、ひき続いて直接水素化によりＮ−置換−１−
デオキシノジリマイシンを得る（即ち、ワンポット　　
プロセス）。

【００１８】Ｎ−置換グルカミン塩の別の利点は、残留
アミンに関連するにおいが除去できることである。普通
、アミンは、非常に悪臭を放ち、操作時にはレスピレー
ターの使用を必要とする。他方、グルカミン塩は、かな
り臭いが無く、これはレスピレーターのような特別の予
防策なしに操作可能である。

【００１９】Ｎ−ｎ−ブチルアミンの供給者（例えば、
Ｆｉｓｈｅｒ　　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｆａｉｒ　　
Ｌａｗｎ，ＮＪ）からのマニュアル　　セイフティデー
タ　　シートに示されているように、Ｎ−ｎ−ブチルア
ミンには毒性があり、同、皮膚及び粘膜をひどく刺激す
る。５−１０ｐｐｍもの少量のＮ−ブチルアミンへさら
されると、鼻及びのどを刺激する。１０−２５ｐｐｍの
濃度へさらすと、数分以上は耐えられない。従って、Ｎ
−置換グルカミン化合物の塩型は、におい及び刺激性を
有さないという利点がある。

【００２０】まず、Ｎ−置換グルカミンのマイクロバイ
アル酸化については、酸化微生物をＮ−置換グルカミン
又はその塩を含む反応混合物に添加する。又は、Ｎ−置
換グルカミン又はその塩を、酸化工程を実行するであろ
う酸化微生物の境地に添加する。好ましくは、Ｎ−置換
グルカミンの塩を添加する。Ｎ−置換グルカミンの適当
な塩は、クロリド、スルフェート、ナイトレート、アセ
タート、アスコルベート、ヌクシネート、シトレート、
アレアート、オキサラート、又はホスフェートを含む。 好ましくは、塩酸塩が使用される。塩の使用が好ましい
けれども、塩は、そこでＮ−置換グルカミン及び適当な
酸を添加してｐＨを下げてＮ−置換グルカミン塩を作る
ことができる。微生物を含む反応混合物のイノキュベー
ション（ｉｎｏｃｕｂａｔｉｏｎ）の間、反応を逆相又
はイオン交換高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）
でモニターして、Ｎ−置換グルカミンからの各、６−（
置換アミノ）−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノー
スへの変換を観察する。薄層クロマトグラフィー（ＴＬ
Ｃ）及びガスクロマトグラフィー（ＧＣ）も又この変換
をモニターするのに使用しうる。

【００２１】酸化を実行するのに適当な酸化微生物（又
は、酸化を実行する活性な抽出物が得られる微生物）は
、プロカリオテア（Ｐｒｏｃａｒｙｏｔａｅ）（細菌）
、又は、オイカリオテア（Ｑｕｃａｒｙｏｔａｅ）、例
えば菌（ｆｕｎｇｉ）であってよく、これらは、ディバ
ースタキソノミック群（ｄｉｖｅｒｓｅ　　ｔａｘｏｎ
ｏｍｉｃ）に属する。適当な微生物は、相対的に多数の
微生物をソルビトール又はＮ−置換グルカミンを含む適
当な栄養培地に生育させ、ソルビオース又は６−（置換
アミノ）−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースを
それぞれ調べることにより見出すことができる。本発明
による酸化反応を触媒する微生物の能力は、高速液体ク
ロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を含む、種々の手段によ
り測定することができる。本発明の方法に使用する微生
物は、アメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴ
ＣＣ）、Ｒｏｃｋｖｉｌｌ，Ｍａｒｙｌａｎｄ；ジアグ
リカルチュラルリサーチカルチャーコレクション（ＮＲ
ＲＬ）、Ｐｅｏｒｉａ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ；ドイチェ　
　ザミルングホンミクロオルガニズメン（ＤＳＭ）、独
、及び醗酵研究所（ＦＲＩ）日本を含む種々の源から入
手しうる。

【００２２】適当な酸化微生物の例は、シュードモナデ
ール目（Ｏｒｄｅｒ　　Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｄａｌｅ
）からのバクテリア、シュードモナダッシー科（ｆａｍ
ｉｌｙＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｄａｃｅａｅ）からのバク
テリア、コリネホーム科（ｆａｍｉｌｙ　　Ｃｏｒｙｎ
ｅｆｏｒｍ）からのバクテリア、メチエニコビア属（ｇ
ｅｎｕｓ　　Ｍｅｔｓｃｈｖｉｋｏｗｉａ）からの菌で
ある。 ジュードモナダール目の中で、好ましいものは、シュー
ドモナダッシー科のものである。シュードモナダッシー
科のうちでは、グルコノバクター属（ｇｅｎｕｓ　　Ｇ
ｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ）（以前Ａｃｅｔｏｂａｃｔ
ｅｒと呼ばれていた）が好ましい。コリネホルム群（ｇ
ｒｏｕｐ　　Ｃｏｒｙｎｅｆｏｒｍ）からのバクテリア
、特にコリネバクテリウム属（ｇｅｎｕａ　　Ｃｏｒｙ
ｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）（Ｃｕｒｔｏｂａｃｔｅｒｉ
ｕｍとしても知られている）からのバクテリアが適当で
ある。 最後に、酸化は菌ととも（例えば、酵菌といっしょに）
実行するこができる。特に、スペルモフトラッシー科（
ｆａｍｉｌｙ　　Ｓｐｅｒｍｏｐｈｔｈｒａｃｅａｅ）
、例えばメチニコビア属である。

【００２３】適当なコリネバクテリアの例は、コリネバ
クテリウム　　アセトアシドフィラム（ａｃｅｔｏａｃ
ｉｄｏｐｈｉｌｕｍ）、コリネバクテリウム　　アセト
グルタミカム（ａｃｅｔｏｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ）、コ
リネバクテリウム　　アクネス（ａｃｎｅｓ）、コリネ
バクテリウム　　アルカノリチカム（ａｌｋａｎｏｌｙ
ｔｉｃｕｍ）、コリネバクテリウム　　アルカナム（ａ
ｌｋａｎｕｍ）、コリネバクテリウム　　ベタエ（ｂｅ
ｔａｅ）、コネリバクテリウム　　ボビス（ｂｏｖｉｓ
）、コリネバクテリウム　　カルナエ（ｃａｌｌｕｎａ
ｅ）、コリネバクテリウム　　シスチチジス（ｃｙｓｔ
ｉｔｉｄｉｓ）、コリネバクテリウム　　ジオキシダン
ス（ｄｉｏｘｙｄａｎｓ）、コリネバクテリウム　　エ
クイ（ｅｑｕｉ）、コリネバクテリウム　　フラベスセ
ンス（ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ）、コリネバクテリウム　
　グルタミカム（ｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ）、コリネバク
テリウム　　ヘルクリス（ｈｅｒｃｕｌｉｓ）、コリネ
バクテリウム　　ホアジ（ｈｏａｇｉｉ）、コリネバク
テリウム　　ヒドロカルボオキシダンス（ｈｙｄｒｏｃ
ａｒｂｏｏｘｙｄａｎｓ）、コリネバクテリウム　　イ
リシス（ｉｌｉｃｉｓ）、コリネバクテリウムリリウム
（ｌｉｌｉｕｍ）、コリネバクテリウム　　リクエファ
シエンス（ｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、コリネバクテ
リウム　　マトラコチ（ｍａｔｒｕｃｈｏｔｉｉ）、コ
リネバクテリウム　　メラセコラ（ｍｅｌａｓｓｅｃｏ
ｌａ）、コリネバクテリウム　　ミセトイデス（ｍｙｃ
ｅｔｏｉｄｅｓ）、コリネバクテリウム　　ネフリジイ
（ｎｅｐｈｒｉｄｉｉ）、コリネバクテリウム　　ニト
リロフィラス（ｎｉｔｒｉｌｏｐｈｉｌｕｓ）、コリネ
バクテリウム　　オオルティ（ｏｏｒｔｉｉ）、コリネ
バクテリウム　　ペトロラフィーラル（ｐｅｔｒｏｐｈ
ｉｌｕｍ）、コリネバクテリウム　　ピロサム（ｐｉｌ
ｏｓｕｍ）、コリネバクテリウム　　ピオゲネス（ｐｙ
ｏｇｅｎｅｓ）、コリネバクテリウム　　ラタイイ、（
ｒａｔｈａｙｉ）、コリネバクテリウム　　レナン（ｒ
ｅｎａｌｅ）、コリネバクテリウム　　シンプレックス
（ｓｉｍｐｌｅｘ）、コリネバクテリウム　　ストリア
タム（ｓｔｒｉａｔｕｍ）、コリネバクテリウム　　ト
リチシ（ｔｒｉｔｉｃｉ）、コリネバクテリウムウラト
キシダンス（ｕｒａｔｏｘｉｄａｎｓ）、コリネバクテ
リウム　　ビタルメン（ｖｉｔａｒｕｍｅｎ）及びコリ
ネバクテリウム　　キセロシス（ｘｅｒｏｓｉｓ）があ
る。

【００２４】本発明の方法に用いる適当なグルコノバク
テリウムは、グルコノバクター　　オキシダンス（ｇｌ
ｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ　　ｏｘｙ　　ｄａｎｓ）サブ
ｓｐ．インダストリウス（ｉｎｄｕｓｔｒｉｕｓ）、グ
ルコノバクター　　オキシダンス　　サブｓｐ．メラノ
ゲネス（ｍｅｌａｎｏｇｅｎｅｓ）、グルコノバクター
　　オキシダンスサブｓｐ．スフアエリカス（ｓｐｈａ
ｅｒｉｃｕｓ）、及びグルコノバクターオキシダンスサ
ブｓｐ．サブオキシダンス（ｓｕｂｏｘｙｄａｎｓ）を
含む。本発明の方法に使用するのに好ましいメチニコビ
ア（以前キャンジダと呼ばれていた）は、メチニコビア
プルチリミア（ｐｕｌｃｈｅｒｒｉｍｉａ）を含む。

【００２５】特定の微生物を培養する一般的な生育条件
は寄託所及び業界で知られているテキスト、例えば、Ｂ
ｅｒｇｅｙ’ｓ　　Ｍａｎｕａｌ　　ｏｆ　　Ｓｙｓｔ
ｅｍａｔｉｃ　　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．
１，Ｗｉｌｌｉａｍｓ　　ａｎｄ　　Ｗｉｌｌｋｉｎｓ
，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ／Ｌｏｎｄｏｎ（１９８４），Ｎ
．Ｒ．Ｋｒｉｅｇ，ｅｄ．から得られる。

【００２６】酸化微生物の生育用栄養培地は、資化しう
る炭素及び窒素；及びミネラル塩を含むものとする。資
化しうる適当な炭素及び窒素源には、ディバースオリジ
ン（ｄｉｖｅｒｓｅ　　ｏｒｉｇｉｎ）の生物学的生育
物によって構成されるようなもの、例えば、ソイビーン
フラワー、コットンシードフラワー、レンチルフラワー
、ピーフラワー、可溶及び不溶野菜蛋白、コーンスティ
ープリカー、酵母エキス、ペプトン及び肉エキスを含む
。 別の窒素源は、アンモニア塩及び硝酸塩、例えば、塩化
アンモニウム、硫化アンモニウム、硝酸ナトリウム及び
硝酸カリウムである。一般的に栄養培地は、次のイオン
を含み、これによって限定されない：Ｍｇ＋＋、Ｎａ＋
　、Ｋ＋　、Ｃａ＋＋、ＮＨ４　＋　、Ｃｌ−　、ＳＯ
４−−、ＰＯ４　−−−　、及びＮＯ３　−及び希原素
例えばＣｕ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｍｏ、Ｚｎ、Ｃｏ及びＮｉの
イオン：好ましいイオンはミネラル塩である。

【００２７】もし、これらの塩及び希原素が栄養培地の
コンプレックス　　コンスチチューエント又は使用する
水の中に十分な量存在しない場合は、栄養培地を補給す
ることが適当である。

【００２８】本発明の方法に使用する微生物は、醗酵ブ
ロス、ホールウオシュトセル（ｗｈｏｌｅ　　ｗａｓｈ
ｅｄ　　ｃｅｌｌ）、濃縮細胞サスペンジョン、酵素エ
キス、及び不動化細胞の形で存在しうる。好ましくは、
濃縮細胞サスペンジョン、酵素エキス、及びホールウオ
ッシュトセルが、本発明の方法に使用される（Ｓ．Ａ．
Ｗｈｉｔｅ　　ａｎｄ　　Ｂ．Ｗ．Ｃｌａｕｓ（１９８
２），Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　　１５０：９３
４−９４３）

【００２９】濃縮洗滌細胞サスペンジョンは、次のよう
に製造しうる。微生物を適当な栄養溶液中で培養し、ハ
ーベストし（例えば、遠心分離により）、そしてより小
さい容量中にサスペンドする（塩中又はバッファー溶液
中、例えば、生理塩化ナトリウム溶液又はリン酸カリウ
ム、酢酸ナトリウム、ナトリウムアレエート、硫酸マグ
ネシウム、又は単に流水、蒸留水又は栄養溶液中に）。 Ｎ−置換グルカミン又はその塩をその後この型の細胞サ
スペンジョンに添加し、本発明の酸化反応を記述した条
件下実行する。

【００３０】生育微生物培養又はフラクショネートした
細胞エキス中のＮ−置換グルカミンの酸化条件は、濃縮
細胞サスペンジョンにより本発明の方法を実行するのに
有利である。特に、温度範囲は約０℃から約４５℃であ
り、ｐＨ範囲は約２から約１０である。本発明の方法で
特別に必要な栄養素はない。より大切なことは、洗滌し
又は不動化した細胞を単にＮ−置換グルカミン又はその
塩に、栄養培地なしで、単に添加することができる。

【００３１】バクテリアから作った酵素エキス又は酵素
エキスフラクションにより本発明の方法を実行すること
も可能である。このエキスは、粗エキス、例えば、微生
物細胞の従来の消化により得られるものであってよい。 細胞を破壊（ｂｒｅａｋ　　ｕｐ）する方法は、機械的
ディスラプション、物理的ディスラプション、化学的デ
ィスラプション及び酵素ディスラプションを含み、これ
に限定されない。細胞をフレークアップするこのような
手段には、超音波処理、フレンチプレッシャー細胞・パ
ッセージスルー、クオーツ砂によるグラインディング、
オートリシス、加熱、浸透ショック、アルカリ処理、デ
ィタージエント、又は凍結と解凍の反覆を含む。

【００３２】もし、本発明の方法が、部分的に精製され
た酵素エキス製剤により実行されるならば、超遠心分離
、沈殿反応、イオン交換クロマトグラフィー又は吸着ク
ロマトグラフィー、ゲル濾過又は電気泳動方のような蛋
白化学の方法は、このような製剤を得るのに使用するこ
とができる。フラクショネートされた細胞エキスにより
本発明による反応を実行するために、アッセイシステム
に、ＮＡＤ＋　又はＮＡＰ＋　のような生理学的又は合
成電子受容体、メチレンブルー、ジクロロフェノリンド
フェノール、テトラゾリウム塩等を添加する必要がある
かもしれない。これらの反応物を使用する時、これらは
等モル量（使用するＮ−置換グルカミンのそれに対応す
る濃度）か又は触媒量（Ｎ−置換グルカミンの選択濃度
よりはるかに（低い濃度）で使用する。触媒量を用いる
時、もし本発明の方法がほぼ定量的に実行されるならば
、わずか触媒量で存在する反応体を連続的に再発生させ
るシステムも又この反応混合物中に加えなければならな
い。このシステムは、例えば、本発明の反応途上で還元
される電子受容体の再酸化（酸素又は他の酸化剤の存在
下）を行なう酵素であっても良い。

【００３３】もし、栄養培地が生育培地中のインタクト
微生物と共に使用されるならば、栄養培地は固体、半固
体又は液体であって良い。メディアを使用するときには
水性−液体栄養培地を好ましくは使用する。適当なメデ
ィア及び適当な生育条件は、Ｎ−置換グルカミン又はそ
の塩が添加される公知のメディア及び条件を含む。

【００３４】本発明の方法で酸化されるＮ−置換グルカ
ミン及びその塩は、それ自体か又は１以上の酸化可能化
合物との混合物として、ベースの栄養培地に添加しうる
。使用できる追加の酸化可能化合物には、ポリオール、
例えばソルビトール又はグリセロールを含む。

【００３５】もし１以上の酸化可能化合物を栄養溶液に
添加する場合は、酸化されるＮ−置換グルカミン又はそ
の塩は、イノキュレーションに先立つか又は、その後の
所望の時期（初期の対数増殖期と遅いステーショナリー
期のあいだ）に添加しうる。その場合、酸化生物を酸化
化合物でプレ培養する。栄養メディアのイノキュレーシ
ョンをスラント試験管培養又はフラスコ培養を含む種々
の方法により行なう。

【００３６】反応溶液のコンタミネーションを避ける必
要がある。コンタミネーションを避けるため、栄養メデ
ィア、反応容器及びエアレーション用空気の殺菌を行な
わなければならない。反応容器の殺菌には、例えば、蒸
気殺菌又は乾燥殺菌を使用することができる。空気及び
栄養メディアは同様に蒸気又は濾過により殺菌しうる。 基質（Ｎ−置換グルカミン）を含む反応溶液の加熱殺菌
も又可能である。

【００３７】本発明の方法は、振とうフラスコ又は通気
攪拌タンクを用いて好気条件下実行することができる。 好ましくは、本方法は、タンクで好気的サブマージョン
手法により行なう。例えば、従来の醗酵槽である。本方
法を連続的に又はバッチで又はバッチモードでフィード
して実行することが可能である。好ましくはバッチモー
ドである。

【００３８】微生物を適切に酸素及びＮ−置換グルカミ
ンと接触するように保証することは利点がある。これに
は種々の方法、例えば、振とう、攪拌及びエアレーショ
ンがある。もし、方法の実行の間望ましくない量の泡が
生じたときは、化学的泡制御剤、例えば、液体脂肪、及
び油、水中油滴エマルジョン、ハラフィン、高級アルコ
ール（オクタデカノール等）、シリコーン・オイル、ポ
リオキシエチレン化合物及びポリオキシプロピレン化合
物を添加しうる。泡は、機械的装置によっても抑制又は
排除しうる。

【００３９】培地中の６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフ
ラノースの経時形成は、薄層クロマトグラフィー、ＨＰ
ＬＣによるか又は、サッカロースインヒビションテスト
での阻害活性の増加により、フォローすることができる
。好ましくは、６−（置換アミノ）−６−デオキシ−α
−Ｌ−ソルボースはＨＰＬＣにより測定しうる。

【００４０】本発明の方法により得られた６−（置換ア
ミノ）−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースは以
下の反応溶液から単離する。即ち、細胞マス（ｍａｓｓ
）を濾過し、遠心分離し上澄リカーを酸イオン交換剤を
含むカラムを通過させ、アルコール又は水でリンスする
。塩基により溶出を行ない、溶出液を濃縮する。アセト
ンその他を添加した後、６−（置換アミノ）−６−デオ
キシ−α−Ｌ−ソルボースが結晶化する。もし６−（置
換アミノ）−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボースからＮ
−置換−１−デオキシノジリマイシンへのさらにプロセ
スを行なうならば、単離は必要ではない。６−（置換ア
ミノ）−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースから
Ｎ−置換−１−デオキシノジリマイシンを製造するため
には、細胞マスを除去した後、クリアな溶液を好ましく
は触媒の存在下、還元する。

【００４１】本発明のこの面（単離が必要でない）は特
に有利である、というのは、マイクロバイアル酸化反応
溶液の細胞マスの除去から得られた上澄リカーから直接
プロセスが進行するからである。同様に、これは特に有
利である。というのは、これまでのプロセスと異なり、
アミノ保護基を除去する必要がないためである。本発明
方法は、保護基中間体を作り単離する必要をなくしかつ
、保護基を除去して所望の化合物を得る必要がない。 このような工程除去はより大きな変換及び全体収率のよ
り効率の良い方法をもたらす。６−（置換アミノ）−６
−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースは又より高い溶
解性を示し、従って、高い濃度が得られ、これは高い生
産性及びより高い率をもたらす。更に、６−（置換アミ
ノ）−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノーセは分解
及び得られた副産物を防げる大きな安定性を有している
。

【００４２】いくつかの公知の手段が還元に利用できる
（例えば、Ｐ．Ｎ．Ｒｙｌｃｍｄｅｒ，Ｈｙｄｒｏｇｅ
ｎａｔｉｏｎ　　Ｍｅｔｈｏｄ（Ａｃａｄｅｍｉｃ　　
Ｐｒｅｓｓ，（１９８５）ｐｐ８２−９３及びＯｒｇａ
ｍｉｃ　　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３版、Ｅｄｓ　　Ｊａ
ｍａｓ　　Ｂ．Ｈｅｎｄｒｉｃｋｓｏｎ，Ｄｏｎａｌｄ
　　Ｊ．Ｃｒａｍ，Ｇｅｏｒｇｅ　　Ｓ．Ｈａｍｍｏｎ
ｄ（ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，Ｃｈｏｐｔｅｒ　　１８
，１９７０）参照）。これらの手段には、金属ヒドリド
還元、触媒的水素化、溶解金属還元及び電気化学的還元
を含む。一般的に、６−（置換アミノ）−６−デオキシ
−α−Ｌ−ソルボフラノースをＮ−置換−１−デオキシ
ノジリマイシンに還元するために、６−（置換アミノ）
−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースをフラスコ
に入れ、つづいて脱色炭素を添加する。この攪拌混合物
を濾過して炭素を除去する。濾液を水素化装置；例えば
、水素化触媒を含んでいるパール実験反応器（Ｐａｒｒ
　　ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＲｅａｃｔｏｒ）に入れる。 ＶＩＩＩ　　Ｂ金属を用いた約１−５０重量％のソルボ
フラノースをロードする触媒を用いる。好ましくは約１
０−３０％を用いる。このような触媒には、パラジウム
、プラチナ、ニッケル及びロジウムを含み、これらに限
定されない。触媒の支持体には、アルミナ、硫酸バリウ
ム、炭酸カルシウム、炭素、シリカ及びケイソウ土（Ｋ
ｉｓｅｌｇｕｈｒ）を含み、これらに限定されない。普
通、支持体は１−２０％金属ローディング、好ましくは
４−１０％ローディングを含む。パラジウム触媒が好ま
しい。しかしながら、６−フェニルメチルアミノ−６−
デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースの好ましい触媒は
プラチナ又はラニーニッケル（Ｒａｎｅｙ　　ｎｉｃｋ
ｅｌ）であ。混合物を約５時間水素化する。約１から１
００ａｔｍの水素圧を用いることができる；好ましくは
、約１−５ａｔｍの範囲を使用する。触媒をその後除去
し、酸イオン交換樹脂を濾液に添加して、Ｎ−置換−１
−デオキシノジリマイシンを吸着する。Ｎ−置換−１−
デオキシノジリマイシンを樹脂から解放して単離する。

【００４３】本発明のマイクロバイアル酸化方法で製造
する６−（置換アミノ）−６−デオキシ−α−Ｌ−ソル
ボフラノースを水素化して製造することのできるＮ−置
換−１−デオキシノジリマイシンの例は、Ｎ−置換−１
−デオキシノジリマイシン、Ｎ−エチル−１−デオキシ
ノジリマイシン、Ｎ−ｎ−プロピル−１−デオキシノジ
リマイシン、Ｎ−１−メチルエチル−１−デオキシノジ
リマイシン、Ｎ−ｎ−ブチル−１−デオキシノジリマイ
シン、Ｎ−１−メチルプロピル−１−デオキシノジリマ
イシン、Ｎ−１，１−ジメチルエチル−１−デオキシノ
ジリマイシン、Ｎ−ｎ−ペンチル−１−デオキシノジリ
マイシン、

【００４４】Ｎ−３−メチルブチル−１−デオキシノジ
リマイシン、Ｎ−１−メチルブチル−１−デオキシノジ
リマイシン、Ｎ−２−メチルブチル−１−デオキシノジ
リマイシン、Ｎ−ｎ−ヘキシル−１−デオキシノジリマ
イシン、Ｎ−ｎ−ヘプチル−１−デオキシノジリマイシ
ン、Ｎ−ｎ−オクチル−１−デオキシノジリマイシン、
Ｎ−ｎ−ノニル−１−デオキシノジリマイシン、Ｎ−ｎ
−デシル−１−デオキシノジリマイシン、Ｎ−（２−ヒ
ドロキシエチル）−１−デオキシノジリマイシン、Ｎ−
（３−ヒドロキシプロピル）−１−デオキシノジリマイ
シン、Ｎ−（４−ヒドロキシブチル）−１−デオキシノ
ジリマイシン、Ｎ−（５−ヒドロキシペンチル）−１−
デオキシノジリマイシン、Ｎ−（６−ヒドロキシヘキシ
ル）−１−デオキシノジリマイシン、Ｎ−（７−ヒドロ
キシヘプチル）−１−デオキシノジリマイシン、Ｎ−（
８−ヒドロキシオクチル）−１−デオキシノジリマイシ
ン、Ｎ−（９−ヒドロキシノニル）−１−デオキシノジ
リマイシン、Ｎ−（１０−ヒドロキシデシル）−１−デ
オキシノジリマイシン、Ｎ−（カルボキシメチル）−１
−デオキシノジリマイシン、Ｎ−（２−カルボキシエチ
ル）−１−デオキシノジリマイシン、Ｎ−（３−カルボ
キシプロピル）−１−デオキシノジリマイシン、Ｎ−（
４−カルボキシブチル）−１−デオキシノジリマイシン
、Ｎ−（５−カルボキシペンチル）−１−デオキシノジ
リマイシン、Ｎ−（６−カルボキシヘキシル）−１−デ
オキシノジリマイシン、Ｎ−（７−カルボキシヘプチル
）−１−デオキシノジリマイシン、Ｎ−（８−カルボキ
シオクチル）−１−デオキシノジリマイシン、Ｎ−（９
−カルボキシノニル）−１−デオキシノジリマイシン、
Ｎ−（１０−カルボキシデシル）−１−デオキシノジリ
マイシン、Ｎ−フェニル−１−デオキシノジリマイシン
、Ｎ−（フェニルメチル）−１−デオキシノジリマイシ
ン、Ｎ−（２−フェニルエチル）−１−デオキシノジリ
マイシン、Ｎ−（３−フェニルプロピル）−１−デオキ
シノジリマイシン、

【００４５】Ｎ−（４−フェニルブチル）−１−デオキ
シノジリマイシン、Ｎ−（５−フェニルペンチル）−１
−デオキシノジリマイシン、Ｎ−（６−フェニルヘキシ
ル）−１−デオキシノジリマイシン、Ｎ−（７−フェニ
ルヘプチル）−１−デオキシノジリマイシン、Ｎ−（８
−フェニルオクチル）−１−デオキシノジリマイシン、
Ｎ−（９−フェニルノニル）−１−デオキシノジリマイ
シン、Ｎ−（１０−フェニルデシル）−１−デオキシノ
ジリマイシンである

【００４６】以下の実施例は、ここに述べた本発明の特
定の例を説明するものである。当業者ならば明らかなよ
うに、種々の変更及び修正が可能であり、これらは述べ
た本発明の範囲内に含まれる。

【００４７】

【実施例】酸化微生物の細胞ペーストの調整グルコノバ
クターオキシダンス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ　　
ｏｘｄａｎｓ）細胞ペーストを一連の１０リッター醗酵
槽にイノキュレートして調整した。これには、６０ｇ／
ｌ　　Ｄ−ソルビトール、２４ｇ／ｌ酵母エキス、４８
ｇ／ｌリン酸二塩基カリウム、及び０．３ｍｌ／ｌ消泡
剤（Ｕｃｏｎ　　ＬＢ６２５）、微生物Ｇ．オキシダン
ス（ＤＳＭ２００３）を有する８リットルのメディアを
含む。醗酵槽を攪し、エアレートし、同時に温度（３０
℃）及びｐＨ（５．５から６．５）に細胞生育期間中コ
ントロールした。光学デンシティ測定により対数増殖期
が終了したのを示した時、約２７時間後に醗酵を終了さ
せた。ブロスをその後、冷却し、遠心分離し、細胞を水
（又は０．０２Ｍ　　ＭｇＳＯ４　）中に再懸濁し、遠
心分離して洗滌、細胞ペーストを製造した。これらの細
胞ペーストをアリコートに分離し、１０℃以下で、反応
溶液に添加するため解凍するまで貯蔵した。

【００４８】反応溶液は、以下に示すようにオートクレ
ーブにより殺菌することもできる。２０ｍＭ　　ＭｇＳ
Ｏ４　を含む５％の（重量／容量）Ｎ−ブチルグルカミ
ン溶液、ｐＨ５．０を、シリコン栓を有する５００ｍｌ
の振とうフラスコ中でオートクレーブした。オートクレ
ーブの条件は１２１℃、３０Ｐ．Ｓ．Ｉ、３０分間であ
った。ｐＨをその後チェックし、室温で５．０であった
。溶液の色又はクラリティーには外観変化はなく、カラ
メル化又は沈殿が生じたという徴候はなかった。ＨＰＬ
Ｃアッセイによる分析は、オートクレーブの前後の反応
溶液が同じであることを示していた。グルコノバクター
オキシダンス細胞を振とうフラスコに添加し、ＨＰＬＣ
結果は、４８時間後、少なくとも９０％の変換を示した
。コントロールも又、（オートクレーブせず）４８時間
後、少なくとも９０％変換を示した。従ってオートクレ
ーブは、反応溶液の殺菌方法として使用しうる。

【００４９】実施例１ ２，３−Ｌ　　パールシェーカーボトルに１Ｌの３Ａエ
タノール及び８３ｇ（１．１モル）のｎ−ブチルアミン
を入れた。混合物を攪拌し、冷却し、同時に１６ｍｌの
１２Ｎ塩酸をゆっくり加えた。この添加後のｐＨは１０
であった。この２，３−Ｌ　　パールボトルに２００ｇ
（１．１モル）のＤ−グルコース、つづいて６０ｇの４
％パラジウム／炭素（５０％水ウェット）を添加した。 混合物を急速に攪拌し、反応が完結する（水素取り込み
により示す）まで、水素圧４ａｔｍの一定圧力で、６０
±５℃で水素化した。水素をベントし４％パラジウム／
炭素を粉末セルロース層を通して濾過して除去した。触
媒を１００ｍｌの３Ａエタノール、つづいて５０ｍｌの
水で洗滌した洗滌液と濾液とを一緒にして、Ｎ−ブチル
グルカミン及び対応する塩酸塩を含む溶液を得た。混合
物を攪拌し、冷却し、同時に８０ｍｌの１２Ｎ塩酸をゆ
っくり添加した。この添加後のｐＨは２．５であった。 エタノールを蒸留により減圧下除去した。残渣は約２７
０ｇのＮ−ｎ−ブチルグルカミン塩酸を含む。残渣を水
で５００ｍｌに稀釈して精製せず次の工程に使用するＮ
−ｎ−ブチルグルカミン塩酸のバルク溶液を得た。

【００５０】実施例２ １−Ｌ−バイオリアクター中の４６０ｍｌの水に、ＨＰ
ＬＣによる濃度５００ｍｇ／リットルを有する１０９ｍ
ｌのＮ−ｎ−ブチルグルカミン塩酸のバルク溶液（実施
例１で製造）を添加して反応溶液を製造した。この溶液
を希水酸化ナトリウムを添加することによりｐＨ５に調
節し、約１５℃に冷却した。トータルで３０ｇ（湿重量
）の洗滌したＧ．オキシダンス細胞ペーストを添加し、
反応混合物を攪拌（５００ｒｐｍ）し、エアレートし（
０．５ｖｖｍ）、同時に温度１５℃、ｐＨ５にコントロ
ールした。 ２３時間後、ＨＰＬＣアッセイは基質の９９％以上が８
０％収率の６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α−
Ｌ−ソルボフラノース塩酸に変換したことを示した。

【００５１】実施例３ フラスコに、６−（ｎ−ブチルアミノ）−６−デオキシ
−α−Ｌ−ソルボフラノース塩酸を含む前反応のバルク
溶液（実施例２）４９０ｍｌを入れた。フラスコに５ｇ
の活性化脱色炭素剤を入れた。混合物を１０分間、２５
±５℃で攪拌した。炭素をケイソウ土の層を通して濾過
により除去した。炭素を約２５ｍｌの水で洗滌し、洗滌
物を濾液と一緒にした。

【００５２】８．４ｇのパラジウム／炭素（５０％水−
ウェット）及び炭素処理からの濾液をフラスコに入れた
。混合物を急速に攪拌し、６０ｐｓｉｇの水素の一定圧
で、２５±５℃で水素の取り込みで指示されるように反
応が完結するまで水素化を行なった。水素をベントし、
反応容器を窒素雰囲気とした。パラジウム／炭素を粉末
セルロースの層を通して濾過により除去した。触媒を５
０ｍｌの水で洗滌し、洗滌物を濾液と一緒にして、ＨＰ
ＬＣ分析により決定されたようにＮ−ｎ−ブチル−１−
デオキシノジリマイシン塩酸を含む溶液を得た。

【００５３】２００ｍｌのスルホン酸カチオン交換樹脂
（水−ウェット）及びＮ−ｎ−ブチル−１−デオキシノ
ジリマイシンを含む前工程からの濾液をフラスコに入れ
た。混合物をゆっくり１５分間２５±５℃で攪拌し、樹
脂を濾過により除去した。樹脂を約１００ｍｌの水で洗
滌し、洗滌物を濾液と一緒にした。フラスコに、もうひ
とつの１００ｍｌのスルホン酸カチオン−交換樹脂（水
−ウェット）及び濾液を入れた。混合物をゆっくり１５
分間２５±５℃で攪拌し、樹脂を濾過により除去した。 樹脂を約５０ｍｌの水で洗滌し、洗滌物を濾液と一緒に
した。 フラスコに、もうひとつの１００ｍｌのスルホン酸カチ
オン交換樹脂（水−ウェット）及び上記からの濾液を入
れた。混合物をゆっくり１５分間２５±５℃で攪拌し、
樹脂を濾過により除去した。樹脂を約５０ｍｌの水で洗
滌し、洗滌物を濾液と一緒にした。

【００５４】スルホン酸カチオン交換樹脂部を一緒にし
、フィルターに入れ、２００ｍｌのメタノールで洗滌し
た。フラスコに、Ｎ−ｎ−ブチル−１−デオキシノジリ
マイシン、５００ｍｌのメタノール及び６５ｍｌの１４
．８Ｎ水酸化アンモニウムを含む上記メタノール−洗滌
スルホン酸カチオン交換樹脂を入れた。混合物をゆっく
り１５分間攪拌し、樹脂を濾過により除去した。樹脂を
１００ｍｌのメタノールで洗滌し、洗滌物を濾液と一緒
にした。スルホン酸カチオン−交換樹脂をフィルターか
ら除去し、フラスコに入れた。フラスコに５００ｍｌの
メタノール及び６５ｍｌの１４．８Ｎ水酸化アンモニウ
ムを入れた。混合物をゆっくり１５分間攪拌し、樹脂を
濾液により除去した。樹脂を１００ｍｌのメタノールで
洗滌し、洗滌物を濾液と一緒にした。スルホン酸陽イオ
ン交換樹脂をフィルターから除去し、再びフラスコに入
れた。フラスコに１００ｍｌのメタノール及び６５ｍｌ
の１４．８Ｎ水酸化アンモニウムを入れた。混合物をゆ
っくり１５分間攪拌し、樹脂を濾過により除去した。樹
脂を１００ｍｌのメタノール及び洗滌物を濾液と一緒に
した。

【００５５】濾液を一緒にし、溶媒を減圧下蒸留により
除去した。残留水を減圧下、約２００ｍｌのイソプロピ
ルアルコールでアゼオトロピック蒸留により除去した。 残渣を２４０ｍｌのアセトン及び１５ｍｌのメタノール
の溶液にサスペンドし、混合物を１５分間還流した。混
合物を２５±２℃に冷却した。粗生成物を濾過により集
め、２５ｍｌの冷たい１０：１、アセトン：メタノール
溶液で洗滌した。粗生成物を１５０ｍｌのメタノール及
び１５．３ｇの活性化脱色炭素剤により攪拌し、４０±
５℃で１時間加熱した。活性化脱色炭素剤を濾過により
除去し、１００ｍｌのメタノールで洗滌した。このメタ
ノール洗滌物を濾液と一緒にして、濃縮して減圧下蒸留
によりネア乾燥（ｎｅａｒｄｒｙｎｅｓｓ）とした。フ
ラスコに２１ｍｌのメタノールを入れ、加熱して還流し
た。還流を維持する間、１６０ｍｌのエチルアセタート
を添加した。得られた混合物を５±２℃で１４−１８時
間冷却した。生成物を濾過により集め、２０ｍｌの冷た
い８：１、エチルアセタート：メタノール溶液で洗滌し
た。生成物を真空オーブン中で２０時間３５±５℃で乾
燥して２３．７ｇ（４５％、グルコースに基づく理論値
の）のＮ−ｎ−ブチル−１−デオキシノジリマイシンを
得た。ＨＰＬＣによるこの物質の精製及びデリビタイズ
ドＧＣは９９．８％であった。構造はＮＭＲ及びＩＲで
確認した。この生成物は、２重ポリエチレンバッグ中で
アルゴン雰囲気下で周囲温度で貯蔵した。

【００５６】実施例４ 微生物グルコノバクターオキシダンス（Ｇｌｕｃｏｎｏ
ｂａｃｔｅｒ　　ｏｘｙｄａｍｓ）（ＤＳＭ　　２００
３、Ｆｅｄｅｒａｌ　　Ｒｅｐｕｂｌｉｃ　　ｏｆ　　
Ｇｅｒｍａｎｙ）をこの１０リットルの醗酵槽で生育さ
せる。この中には、６２４ｇＤ−ソルビトール、２００
ｇ酵母エキス、５０ｇリン酸カリウム二塩基性、５０ｇ
グルタミン及び２．５ｍｌ消泡剤（Ｕｃｏｎ　　ＬＢ６
２５、ポリアルキレングリコール、Ｕｎｉｏｎ　　Ｃａ
ｒｂｉｄｅ　　Ｃｏ．Ｄａｎｂｕｒｙ、ＣＴ）を含む８
リットルのメディアを含んでいる。これらの醗酵槽を攪
拌しエアレートし、同時に細胞の生育相中温度（約３０
℃）及びｐＨ（約５．５から６．３）にコントロールし
た。醗酵は約２７時間後終了する（光学濃度計が細胞の
対数期が終結するのを示す時）。この２つの醗酵ブロス
をハーベストし、プールし、細胞を遠心分離により回収
した。上澄液をデカンティングした後、細胞を水に再サ
スペンドし、遠心分離して、マイクロバイアル酸化反応
用洗滌細胞を作った。この洗滌細胞を約４℃で数日貯蔵
する。細胞をそれから、細胞の一部をゲルライトゲラン
ガム（Ｇｅｌｒｉｔｅ　　ｇｅｌｌａｎ　　ｇｕｍ）（
０．６ｇ，５０ｍｌ水当り）に約５５℃で添加して不動
化する（ゲルライトゲランガムはウロニック、ラムノー
ス及びグルコースを含むパリサッカライトで、Ｋｅｌｃ
ｏ　　Ｃｏ．，サンジェゴ、カルホルニアから入手でき
る）。このサスペンジョンを０．２ＭＭｇＳＯ４　を室
温溶液に滴下して、不動化した細胞を含むビーズを作る
。不動化した細胞を含むビーズは、濾過により回収し、
約４０℃で貯蔵する。不動化細胞を含むビーズの一部を
ｐＨ６．１（オキザリックアシッドにより）に調整した
０．５ｇＮ−ｎ−ブチルグルカミンを含む５０ｍｌの水
性溶液に添加する。この反応溶液を３０℃シェーカーで
インキュベーションするための２５０ｍｌ振とうフラス
コに移す。反応溶液を３０℃で約４日間インキュベート
し、その後、所望の反応生成物６−ｎ−ブチルアミノ−
６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースとして、薄層
クロマトグラフィ（ＴＬＣ）アッセイにより新しいスポ
ットが検知される。

【００５７】実施例５ 反応溶液を、３．０ｇのＮ−ｎ−ブチル−グルカミンを
１２０ｍｌの水に溶解し、この溶液を濃塩酸でｐＨ約５
．７に調節し、０．３６ｇの無水硫酸マグネシウムを添
加し、最終溶液をｐＨ５．０（濃塩酸で）に調節し、そ
の後水で稀釈して最終容量を１５０ｍｌ、最終濃度２０
ｇ／ｌとして製造した。０．２ミクロンフィルターによ
り濾過した後、５０ｍｌの溶液を５００ｍｌ振とうフラ
スコに、実施例４で述べたとおり製造したＧ．オキシダ
ンスの２ｇ湿細胞ペーストとともに添加した。混合物を
振とうフラスコ中で、室温で（約２３℃）、７２時間（
時々サンプリングしながら）インキュベートした。反応
をインオペアリング逆相高速クロマトグラフィー（ＨＰ
ＬＣ）アッセイでモニターし、Ｎ−ｎ−ブチルグルカミ
ンの６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソ
ルボフラノースの変換を２４、４８及び７２時間後、そ
れぞれ４７％、７７％及び７９％示した。

【００５８】実施例６ 反応溶液を、１０ｇのＮ−ｎ−ブチルグルカミンを水こ
れをｐＨ５に調整し（濃塩酸により）、そして０．０２
Ｍ　　ＭｇＳＯ４　に溶解して製造した。溶液を水で２
００ｍｌに稀釈し、濾過して、ｐＨ５．１、５０ｇ／ｌ
のＮ−ｎ−ブチルグルカミンを含む最終溶液を得た。こ
の溶液及びＧ．オキシダンスセルペーストを２５０ｍｌ
撹拌反応器に移し、これを水浴中で２０℃に維持した。 溶液を３日間インキュベートし、同時に溶液を約２０℃
で撹拌及び維持する、反応液の（６４時間後）イオンペ
アリング逆相ＨＰＬＣはＮ−ｎ−ブチルグルカミンの６
−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフ
ラノースへの変換９０％を示す。

【００５９】実施例７ ５０ｇ／ｌ、ｐＨ５．０のＮ−ｎ−ブチルグルカミンの
５０ｍｌサンプル４つ、２０ｍＭ硫酸マグネシウムを室
温でシェイクフラスコ中でＧ．オキシダンスで処理した
。３日後、実質的にすべてのＮ−ｎ−ブチルグルカミン
が６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソル
ボフラノースに変換した（ＨＰＬＣアッセイ）。

【００６０】６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α
−Ｌ−ソルボフラノースは次のように精製する。遠心分
離して細胞を除去後、クリアでアンバーな上澄液をチャ
コール（１６７ｍｌ中２ｇ）で処理して脱色した。この
濾液に３ｇのＡｍｂｅｒｌｉｔｅ（Ｒｏｈｍ　　ａｎｄ
　　Ｈａｏｓ）２００樹脂（事前に濃塩酸及び水で処理
され酸型に変換されている）を添加し、無機カチオンを
除くため４５分間平衡させた。Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ樹脂
を除去後、約２から４．４に下げられているｐＨをＲｈ
ｏｒｍａｃｉａ　　Ｑ　　Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（事前に
、２．５Ｎ　　ＮａＯＨでリピーテッドサスペンジョン
によりヒドロキシド型に変換されている）のアリコード
でｐＨが４．７になるまで調整する。２３ｇのウェット
Ｑ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅの全量を添加してスルフェート
及びクロリドアニオンを除去する。このややオフ白色（
ｏｆｆ−ｗｈｉｔｅ）濾液を、−５０℃に一晩凍結した
５０ｍｌセーラム容器にアリコードし、その後−２０℃
のシェルク温度で３日間、０℃で２４時間そして２０℃
で２時間乾燥した。 この乾燥バイアルをシリコーン栓でキャップし、−２０
℃で貯蔵した。乾燥固体をＮＭＲ及びＩＲでキャラクタ
ライズして構造を確認した。純度をモイスチュア分析、
ＨＰＬＣ及びイオンクロマトグラフィーで確認した。

【００６１】実施例８ 微生物、コリネバクテリウムベテア（Ｃｏｒｙｎｅｂａ
ｃｔｅｒｉｕｍ　　ｂｅｔｅａ）（ＡＴＣＣ　　１３４
３７）別名、クルトバクテリウムフラカムファシエンス
（Ｃｕｒｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　　ｆｌａｃｃｕｍｆ
ａｃｉｅｎｓ）（ＤＳＭ２０１４１）を、１０ｇ／ｌト
リプトン、５ｇ／ｌ酵母エキス、及び５ｇ／ｌソルビト
ールを含む３００ｍｌオートクレブした栄養溶液を、ス
トックバイアルからの０．５ｍｌのカルチャーでイノキ
ュレートして生育させる。この溶液を０．３ｍｌの消泡
剤（例えばＵＣＯＮ　　ＬＢ６２５）入りの殺菌２．８
リットルシェークフラスコに移した。フラスコをシェー
カーに乗せ、これを２００ｒｐｍで、温度を２５℃に保
ちながら振とうした。２４時間インキュベーション後、
細胞（光学濃度に基づき後の対数期にある）をアセプチ
カリーに遠心分離によりハーベストした。細胞を１ｇの
Ｎ−ｎ−ブチルグルカミンが溶解した５０ｍｌのオート
クレーブした栄養溶液（上記）を含む２５０ｍｌバッフ
ルなし振とうフラスコに移した。Ｎ−ｎ−ブチルグルカ
ミンを含むこの溶液はｐＨ約８である。振とうフラスコ
を２５℃で２００ｒｐｍで振とうするシェーカー上で４
８時間インキュベートした。ＨＰＬＣアッセイは約３％
のＮ−ｎ−ブチルグルカミンが６−ｎ−ブチルアミノ−
６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースに変換するの
を示す。

【００６２】実施例９ Ｎ−ｎ−ブチルグルカミンを水中に溶解し、ｐＨを塩酸
で５．０に調節し、硫酸マグネシウムを２０ｍＭ添加し
て、Ｎ−ｎ−ブチルグルカミンの最終濃度５ｇ／ｌを得
た。 この溶液５０ｍｌ（オートクレーブした５００ｍｌ振と
うフラスコ中）に、２ｇ（湿細胞重量）の洗滌Ｇ．オキ
シダンス細胞を添加し、サスペンジョンを１２０ｒｐｍ
で室温でローテーションした。２４時間後、３７％の初
期投入Ｎ−ｎ−ブチルグルカミンが６−ｎ−ブチルアミ
ノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースに変換し
た。

【００６３】実施例１０ Ｎ−ｎ−ブチルグルカミンを水に溶解して最終濃度２０
ｇ／ｌ、その後ｐＨ調整して５．０（塩酸で）とし、硫
酸マグネシウムを添加して２０ｍＭにする。この溶液の
５０ｍｌ（オートクレーブした５００ｍｌ振とうフラス
コ中）に、２ｇ（湿重）の洗滌Ｇ．オキシダンス細胞を
添加し、サスペンジョンを３０℃に置き、２００ｒｐｍ
でローテートした。２４時間後、４７％の初期投入Ｎ−
ｎ−ブチルグルカミンを６−ｎ−ブチルアミノ−６−デ
オキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース（ＨＰＬＣアッセイ
により）に変換する。４８時間後、８１％が６−ｎ−ブ
チルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース
に変換した。

【００６４】実施例１１ ２０ｇのＮ−ｎ−ブチルグルカミンを１５６ｍｌ水にサ
スペンドし、６ｍｌ濃ＨＣｌを添加した。その後、０．
４８ｇ無水硫酸マグネシウムを添加し、ｐＨを５．０に
調整した（水酸化ナトリウムで）。２００ｍｌに容量を
調整し、溶液を０．２μフィルターで濾過し、２５０ｍ
ｌスピナーフラスコに置いた。溶液を空気で１ｖｖｍエ
アレートし、５℃に冷却し、８．７ｇ（湿重量）の洗滌
Ｇ．オキシダンス細胞を添加した。５日後、６７％の初
期投入Ｎ−ｎ−ブチルグルカミンが６−ｎ−ブチルアミ
ノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースに変換し
た（ＨＰＬＣアッセイによる）。

【００６５】実施例１２ ５０ｍｌの５０ｇ／ｌ　　Ｎ−ｎ−ブチルグルカミン濃
度のｐＨを３．５に調整し（塩酸で）、５００ｍｌ振と
うフラスコに置き、洗滌Ｇ．オキシダンス細胞の５ｇの
４０％サスペンジョンを添加した。これを室温でシェー
カー上に置く。２４時間後、４６％のアミノ糖がＨＰＬ
Ｃアッセイにより、６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキ
シ−α−Ｌ−ソルボフラノースに変換する。

【００６６】実施例１３ ３０５ｇの水に２２ｇのＮ−ｎ−ブチルグルカミンをサ
スペンドし、ｐＨを７．０に調整した（塩酸で）。容量
を４１５ｍｌに調整した後、５０ｍｌをアリコートし、
２．９ｍｌの新たに解凍し、洗滌したＧ．オキシダンス
細胞を添加した。２０時間後、８１％の初期Ｎ−ｎ−ブ
チルグルカミンが、ＨＰＬＣアッセイにより検出されて
６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボ
フラノースに変換した。

【００６７】実施例１４ ４２ｍｌの水にサスペンドした２．５ＧのＮ−ｎ−ブチ
ルグルカミンをｐＨ５に硝酸でタイトレートし、容量を
５０ｍｌに調整した。これを０．２μフィルターで濾過
し、振とうフラスコに置いた。洗滌したＧ．オキシダン
ス細胞を添加した。４時間後、４４％の初期投入Ｎ−ｎ
−ブチルグルカミンが６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオ
キシ−α−Ｌ−ソルボフラノースに、変換し、そして２
４時間後、生成物への変換は９０％を越える（ＨＰＬＣ
アッセイによる）。

【００６８】実施例１５ Ｎ−ｎ−ブチルグルカミンを実施例１４に従って製造し
たが、硝酸の代りに硫酸を用いる。４時間後、ＨＰＬＣ
アッセイは、７％の初期投入Ｎ−ｎ−ブチルグルカミン
の６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソル
ボフラノースへ変換し、２４時間後、変換は３２％に増
加した。

【００６９】実施例１６ Ｎ−ブチルグルカミンを実施例１４に従って製造する。 ただし、硝酸の代わりに酢酸を用いる。４時間後、２０
％の初期投入Ｎ−ｎ−ブチルグルカミンを６−ｎ−ブチ
ルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースに
変換し、２４時間後、３５％の初期投入を６−ｎ−ブチ
ルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースと
して検出した。

【００７０】実施例１７ Ｎ−ｎ−ブチルグルカミンを実施例１４に従って製造し
た。ただし、硝酸の代りにリン酸を用いる。４時間後、
ＨＰＬＣは、２１％の初期投入のＮ−ｎ−ブチルグルカ
ミンの６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−
ソルボフラノースへの変換を、そして２４時間後４４％
の変換を検出した。

【００７１】実施例１８ １０ｇのＮ−ｎ−ブチルグルカミンを１６０ｍｌの水及
び８ｍｌ　　０．５Ｍ硫酸マグネシウム中にサスペンド
し、その後、塩酸でｐＨ５．０にタイトレートし、稀釈
して２００ｍｌにした。この溶液のうち、５０ｍｌを３
０分間１２１℃でオートクレーブし、室温に冷却し、振
とうフラスコに置いた。Ｇ．オキシダンス細胞の添加の
２４時間後、５７％の初期投入Ｎ−ｎ−ブチルグルカミ
ンを６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソ
ルボフラノースに変換した。

【００７２】実施例１９ グルコノバクターオキシダンス（ＤＳＭ２００３）を、
振とうフラスコ中で、標準条件下、５％ソルビトール２
％酵母エキス、３ｇ／ｌスクシニックアシッド、ｐＨ６
．３、３０℃で生育させる（Ｓ．Ａ．Ｗｈｉｔｅ及びＧ
．Ｗ．Ｃｌａｕｓ（１９８２），Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏ
ｌｏｇｙ　　１５０：９３４−９４３及びＮｏｅｌ　　
Ｒ．Ｋｒｉｅｇｅｄ．，Ｂｅｒｇ　　ｅｙ’ｓ　　Ｍａ
ｎｕａｌ　　ｏｆＳｙｓｔｅｍａｔｉｃ　　Ｂａｃｔｅ
ｒｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１，Ｗｉｌｌｉａｍｓ　　＆
　　Ｗｉｌｋｉｎｓ、ボルチモア／ロンドンｐ．２７５
；Ｃ．１９８４）。細胞を遠心分離により単離し、２０
ｍＭの硫酸マグネシウム（２℃で）で洗滌した。５０ｍ
ｌのＮ−ｎ−ブチルグルカミン（ｐＨ５．０、塩酸によ
り）に２ｇのパックしたウェット細胞を添加し、このサ
スペンジョンを１２０ｒｐｍで室温で、２４時間振とう
した。２４時間後、ＨＰＬＣ分析は、３８％の初期投与
のＮ−ｎ−ブチルグルカミンを６−ｎ−ブチルアミノ−
６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースに変換した。

【００７３】実施例２０ グルコノバクターオキシダンス（ＡＴＣＣ６２１）を生
育し、Ｎ−ｎ−ブチルグルカミンを実施例６に実質的に
従って変転する。ただし、５１％の初期Ｎ−ｎ−ブチル
グルカミンを６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α
−Ｌ−ソルボフラノースに変転する。

【００７４】実施例２１ 反応溶液を９１ｇＮ−ｎ−ブチルグルカミンを５８０ｍ
ｌの水に１−Ｌバイオリアクター中で添加することによ
り製造した。サスペンジョンを約ｐＨ５に調整し（濃Ｈ
Ｃｌで）、約１５℃に冷却した。２４ｇ（湿重量）の洗
滌Ｇ．オキシダンス細胞ペーストを添加し、反応混合物
を振とう（５００ｒｐｍ）し、アエレートし（０．５ｖ
ｖｍ）、同時に温度１５℃、ｐＨ５にコントロールした
。２３時間後、ＨＰＬＣアッセイは９９％以上の基質が
８３％収率の６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α
−Ｌ−ソルボフラノースに変換した。

【００７５】実施例２２ 反応溶液を７５０ｇＮ−ｎ−ブチルグルカミンを７．２
Ｌの水に１０−Ｌバイオリアクター中で添加して製造す
る。サスペンジョンをｐＨに調整し（濃ＨＣｌで）、冷
却して約１５℃とした。３００ｇ（湿重量）の洗滌Ｇ．
オキシダンス細胞ペーストを添加し、反応混合物を（３
５０−５００ｒｐｍに）振とうし、エアレートし（０．
４ｖｖｍ）、同時に温度１５℃及びｐＨ５に調整する。 １４時間後、ＨＰＬＣアッセイは９７％以上の基質が８
５％収率の６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α−
Ｌ−ソルボフラノースに変換したことを示す。

【００７６】実施例２３ 反応溶液を４６ｇＮ−ｎ−ブチルグルカミンを６２０ｍ
ｌの水に１−Ｌバイオリアクター中で添加して製造した
。 サスペンジョンをｐＨ５に調整し（濃塩酸で）、冷却し
て１５℃とする。３０ｇ（湿重量）の洗滌Ｇ．オキシダ
ンス細胞ペーストを添加し、反応混合物を振とうし（３
５０ｒｐｍ）、エアレートし（０．２ｖｖｍ）、同時に
温度１５℃、ｐＨ５にコントロールする。７７時間後、
ＨＰＬＣアッセイは、９７％以上の基質が７５％収率の
６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボ
フラノースに変換したことを示す。

【００７７】実施例２４ 反応溶液を８１ｇＮ−ｎ−ブチルグルカミン塩酸を６４
０ｍｌの水に１−Ｌ−バイオリアクター中で添加して製
造する。溶液（このｐＨは５）を冷却し、約１５℃にす
る。 ７０ｇ（湿重量）の洗滌Ｇ．ｏｘｙｄａｎｓ細胞ペース
トを添加し、反応混合物を振とうし（４００ｒｐｍ）、
エアレートし（０．５ｖｖｍ）、同時に湿度１５℃及び
ｐＨ５にコントロールする。２０時間後、ＨＰＬＣアッ
セイは９９％以上のＮ−ｎ−ブチルグルカミンが８０％
収率の６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−
ソルボフラノースに変換したことを示す。

【００７８】実施例２５ 反応溶液を１７０ｍｌのＮ−ｎ−ブチルグルカミン塩酸
；濃度４５０ｇ／ｌ（ＨＰＬＣ）バルク溶液を２１０ｍ
ｌの水に、１−Ｌバイオリアクター中で添加して製造す
る。 溶液を稀水酸化ナトリウムを添加してｐＨ５に調整し、
冷却して約１５℃とする。２０ｇ（湿重量）の洗滌Ｇ．
オキシダンス細胞ペートを添加し、反応混合物を振とう
し（１０００ｒｐｍ）、エアレート（１ｖｖｍ）し、同
時に温度１５℃、ｐＨ５にコントロールする。２７時間
後、ＨＰＬＣアッセイは９７％以上の基質が８０％収率
のＮ−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソル
ボフラノースに変換したことを示す。

【００７９】実施例２６ １．０ｇのＮ−エチルグルカミンを５０ｍｌの水にサス
ペンドし、濃ＨＣｌでタイトレートしてｐＨ５とする（
同時にアミノ糖を溶解させる）。この溶液を５００ｍｌ
振とうフラスコに置く。この溶液に２．０ｇ（湿重量）
の洗滌Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ　　ｏｘｙｄａｎｓ
細胞を添加し、この溶液を１００−１２０ｒｐｍで振と
うする。 ２４時間後、ＨＰＬＣアッセイは７０％の初期投与Ｎ−
エチルグルカミンが６−エチルアミノ−６−デオキシ−
α−Ｌ−ソルボフラノースに変換し、約４８時間後、少
くとも９０％が変換したことを示す。７２時間後、上澄
後を細胞から分離し、殺菌濾過する。上澄液のアリコー
トを濃ＮＨ４　ＯＨでｐＨ９に調整し、氷浴中でチルし
、１００ｍｇＮａＢＨ４　を添加する。氷浴中に一晩静
止後、サンプルをアセチル化し；ガスクロマトグラフィ
ー（ＧＣ）−質量スペクトロスコピーでアッセイする。 ＧＣ−マススペクトロスコピーは６−エチルアミノ−６
−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースから６０％収率
のＮ−エチル−１−デオキシノジリマイシンを示す（ア
セチル化された生成物の化合イオン化マススペクトロス
コピーは、ＧＣピークが還元環化生成物に対応する親ピ
ークマス３６０（Ｍ＋Ｈ）を有し、これは、テトラアセ
チル化Ｎ−エチル−１−デオキシノジリマイシンに対応
する）。

【００８０】実施例２７ 実施例２６に実質的に従って、Ｎ−（２−ヒドロキシエ
チル）グルカミンをマイクロバイアリーに酸化する。た
だしＮ−エチルグルカミンの代りにＮ−（２−ヒドロキ
シエチル）グルカミンを使用し、Ｎ−エチル−１−デオ
キシノジリマイシンの代りにＮ−（２−ヒドロキシエチ
ル）−１−デオキシノジリマイシンが得られる。２４時
間後のＨＰＬＣ分析は、７９％の初期投与のＮ−（２−
ヒドロキシエチル）グルカミンが６−（２−ヒドロキシ
エチル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノ
ースに変換したことを示す。４８時間後、少くとも９０
％の初期投入が変換した。７２時間後、上澄液を細胞か
ら分離し、殺菌濾過する。アリコート（１０ｍｌ）のｐ
Ｈを濃ＮＨ４　ＯＨによりｐＨ９．０に調整し、氷浴中
でチリし、１００ｍｇＮａＢＨ４　を添加する。氷浴中
に一晩静置後、サンプルをアセチル化し、ガスクロマト
グラフィーマススペクトロスコピー（ＧＣ−ＭＳ）によ
りアッセイした。ＧＣ−ＭＳは６−（２−ヒドロキシエ
チル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノー
スからの９５％収率のＮ−（２−ヒドロキシエチル）−
１−デオキシノジリマイシンを示す（アセチル化生成物
の化学イオン化マススペクトロスコピーは、還元、環化
生成物の対応するＧＣピークがペンタ−アセチル化Ｎ−
２−ヒドロキシ−１−デオキシノジリマイシンの親ピー
クマス４１８（Ｍ＋Ｈ）を有することを示す）。

【００８１】実施例２８ 実施例２６に実質的に従ってＮ−フェニルメチルグルカ
ミンをマイクロバイアリーに酸化する。ただし、Ｎ−エ
チルグルカミンの代りにＮ−フェニルメチルグルカミン
を用い、Ｎ−エチル−１−デオキシノジリマイシンの代
りにＮ−フェニルメチル−１−デオキシノジリマイシン
を得る。４時間後、ＨＰＬＣ分析は４８％の初期投入Ｎ
−フェニルメチルグルカミンが６−（フェニルメチル）
アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースに変
換したことを示す。２４時間後、少くとも９０％の初期
投入が変換した。実施例２６に実質的に従って還元及び
アセチル化した時、ＧＣ−ＭＳ（化合的イオン化）はテ
トラ−アセチルＮ−フェニルメチル−１−デオキシノジ
リマイシンに対応する親ピーク（Ｍ＋Ｈ）４２２を与え
たＧＣは、６−（フェニルメチル）アミノ−６−デオキ
シ−α−Ｌ−ソルボフラノースからの９８％収率のＮ−
フェニルメチル−１−デオキシノジリマイシンを示す。

【００８２】実施例２９ 実施例２６に実質的に従って、Ｎ−ｎ−オクチルグルカ
ミンをマイクロバイアリーに酸化した。ただし、Ｎ−エ
チルグルカミンの代りにＮ−ｎ−オクチルグルカミンを
用い、Ｎ−エチル−１−デオキシノジリマイシンの代り
にＮ−ｎ−オクチル−１−デオキシノジリマイシンを得
る。変換を分析するのに使用する樹脂に対するＮ−ｎ−
オクチル−グルカミンの高い調和性のために、ＨＰＬＣ
アッセイを使用しない。変換をＮａＢＨ４　でのアルカ
リ性ｐＨでの還元、アセチル化、及びＧＣ−マススペク
トロスコピーによりモニターする。実施例２６に実質的
に従って還元し、アセチル化して、ＧＣ−ＭＳ（化合的
イオン化）は、テトラ−アセチルＮ−オクチル−１−デ
オキシノジリマイシンに対応する親ピーク（Ｍ＋Ｈ）４
４４を与える。ＧＣ−ＭＳは６−ｎ−オクチルアミノ−
６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースからの９４％
収率のＮ−ｎ−オクチル−１−デオキシノジリマイシン
を示す。

【００８３】実施例３０ 約１５００ｍｌの水性溶液で、約９６ｇ（０．４１モル
）の６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソ
ルボフラノースを含むものを４リトルエルレンマイヤー
フラスコに入れ、ひきつづき１３ｇの脱色炭素剤を入れ
た。混合物を約１０分間攪拌し、炭素を濾過により除去
する。濾液を２．３リットル　　Ｐａｒｒボトルに添加
し、これには約１９ｇ（５０％ウェット）の４％パナジ
ウム／炭素が入っている。混合物を約５時間、６０ｐｓ
ｉｇの水素圧で周囲温度で水素化した。濾過による触媒
を除去後、５５０ｍｌのＤｏｗｅｘ（商標）５０×８−
２００イオン交換樹脂（Ｄｏｗ　　Ｃｈｅｍｉｃａｌ，
Ｍｉｄｌａｎｄ，ＭＩ）、ポリスチレンジビニルベンゼ
ン、バックボーンを有する強酸カチオン交換樹脂を濾液
に添加する。スラリーを３０分間攪拌し、樹脂（これに
生成物が含まれている）を集めた。濾液を約２５０ｍｌ
のＤｏｗｅｘ樹脂で（上記したとおり）再処理する。２
つの樹脂フィルターケーキを合わせ、生成物を約２．５
リットルのＭｅＯＨ／ＮＨ４　ＯＨ（４：１）を用いて
解放する。抽出物を濃縮し、水をアゼオトロピック蒸留
により除去する。残渣を６１０ｍｌのメタノール／アセ
トン（１：１６）から再結晶化する。固体を約３７５ｍ
ｌメタノールに溶解し、約７．６ｇの脱色炭素剤を用い
て脱色する。濾液を濃縮し、残渣を約６２５ｍｌのメタ
ノール／エチルアセタート（１：９）から再結晶化する
。生成物をその後乾燥する。 収率：６５ｇ＝７５％（理論値の） 融点：１３２−１３５℃ デリビタイズドＧＣアッセイによる純度：９９．５％

【
００８４】実施例３１ 実施例５、６及び７で製造されたようないくつかの反応
溶液を遠心分離し、プールし、濾過してＮ−ｎ−ブチル
−１−デオキシノジリマイシンへの変換用のクラリファ
イした溶液を作る。約１００ｍｌのこのクリアであるが
色のついた溶液を、まず活性化チャコールで処理し、そ
の後パール実験室反応器（ＢａｘｔｅｒＨｅａｌｔｈｃ
ａｒｅ　　Ｃｏｒｐ．，Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　　Ｐｒ
ｏｄｕｃｔＤｉｖｉｓｉｏｎ，ＭｃＧａｗ，ＩＬ）に移
し、これにパラジウム／炭素触媒も添加する。このシス
テムを室温で５０ｐｓｉｇ水素で約２．５時間操作し、
その後触媒を濾過して除き、濾液を更なる精製のために
作る。 この濾液を強酸陽イオン性樹脂（Ｄｏｗｅｘ　　５０×
８−２００メッシュ）に接触させ生成物（Ｎ−ｎ−ブチ
ル−１−デオキシノジリマイシン）を吸着し、これをメ
タノール：水酸化アンモニウム（３：１）溶液で溶出す
る。この溶液を濃縮して蒸発させて濃い油状とし、この
後、メタノール：アセトン（１：６）の混合物を添加し
て生成物を結晶化する。この単離された物質はＮ−ｎ−
ブチル−１−デオキシノジリマイシン、９９．５％純度
（ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）アッセイによる）、
５３％単離収率のＮ−ｎ−ブチル−１−デオキシノジリ
マイシンとして同定した。

【００８５】本発明を特別の修正に関して述べてきたけ
れども、そこでの詳細を限定と解するべきではない。と
いうのは、種々の等価物、変更、及び修正といったもの
が、本発明の精神及び範囲から離れることなく、リゾー
トしうるからであり、そしてこのような等価な例はそこ
に含まれるべきであると理解すべきである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 【請求項１】　　式： 【化１】 のグルカミン又はその塩を酸化マイクローブ又はその抽
   出物で酸化すること、及び式： 【化２】 の化合物を製造することを含む方法。（式中、Ｒは、フ
   ェニル、Ｃ１　〜Ｃ１０アルキル）、フェニル又はカル
   ボキシにより置換されたＣ１　〜Ｃ１０アルキル、又は
   ヒドロキシにより置換されたＣ２〜Ｃ１０アルキル）【
   請求項２】　　マイクローブが、シュードモナデール目
   （ｏｒｄｅｒ　　Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｄａｌｅ）　で
   ある請求項１の方法。 【請求項３】　　マイクローブが、グルコノバクターオ
   キシダンス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ　　ｏｘｙｄ
   ａｎｓ）である請求項２の方法。 【請求項４】　　マイクローブが、グルコノバクターオ
   キシダンスＳｕｂｓｐ・サブオキシダンスである請求項
   ３の方法。 【請求項５】　　マイクローブが、コリネホルム科（ｆ
   ａｍｉｌｙ　　Ｃｏｒｙｎｅｆｏｒｍ）に属するもので
   ある請求項１の方法。 【請求項６】　　マイクローブが、コリネバクテリウム
   ベテア（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ　　ｂｅｔｅ
   ａ）である請求項５の方法。 【請求項７】　　マイクローブが、セルサスペンジョン
   の形で使用される請求項１の方法。 【請求項８】　　マイクローブが、不動化細胞の形で使
   用される請求項１の方法。 【請求項９】　　Ｒが、Ｃ１　〜Ｃ１０アルキルである
   請求項１の方法。 【請求項１０】　　Ｎ−ｎ−ブチルグルカミンが酸化さ
   れ、６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソ
   ルボフラノースが製造される請求項９の方法。 【請求項１１】　　Ｎ−ｎ−オクチルグルカミンが酸化
   され、６−ｎ−オクチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ
   −ソルボフラノースが製造される請求項９の方法。 【請求項１２】　　Ｎ−エチルグルカミンが酸化され、
   ６−エチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラ
   ノースが製造される請求項９の方法。 【請求項１３】　　Ｒが、ヒドロキシルで置換されたＣ
   ２　〜Ｃ１０アルキルである請求項１の方法。 【請求項１４】　　Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）グル
   カミンが酸化され、６−（２−ヒドロキシエチル）アミ
   ノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースが製造さ
   れる請求項１３の方法。 【請求項１５】　　Ｒが、フェニルで置換されたＣ１　
   〜Ｃ１０アルキルである請求項１の方法。 【請求項１６】　　Ｎ−フェニルメチルグルカミンが酸
   化され、６−（フェニルメチル）アミノ−６−デオキシ
   −α−Ｌ−ソルボフラノースが製造される請求項１５の
   方法。 【請求項１７】　　Ｒが、カルボキシルで置換されたＣ
   １　〜Ｃ１０アルキルである請求項１の方法。 【請求項１８】　　Ｎ−（３−カルボキシプロピル）グ
   ルカミンが酸化され、６−（３−カルボキシプロピル）
   アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースが製
   造される請求項１７の方法。 【請求項１９】　　Ｎ−フェニルグルカミンが酸化され
   、６−フェニルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボ
   フラノースが製造される請求項１の方法。 【請求項２０】　　式： 【化３】 （式中、Ｒはフェニル、Ｃ１　〜Ｃ１０アルキル、フェ
   ニル又はカルボキシで置換されたＣ１　〜Ｃ１０アルキ
   ル、又はヒドロキシで置換されたＣ２　〜Ｃ１０アルキ
   ル）のグルカミン又はその塩を、マイクローブ又はその
   抽出物で酸化し、そして式： 【化４】 （式中、Ｒは前記に同じ）の化合物を製造し、そして、
   この化合物を還元して式： 【化５】 （式中、Ｒは前記に同じ）のＮ−置換−１−デオキシノ
   ジリマイシンを製造する方法。 【請求項２１】　　マイクローブが、シュードモナデー
   ル目（ｏｒｄｅｒ　　Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｄａｌｅ）
   　である請求項２０の方法。 【請求項２２】　　マイクローブが、グルコノバクター
   オキシダンスである請求項２１の方法。 【請求項２３】　　マイクローブが、グルコノバクター
   オキシダンスＳｕｂｓｐ・サブオキシダンスである請求
   項２２の方法。 【請求項２４】　　マイクローブが、コリネホルム科（
   ｆａｍｉｌｙ　　Ｃｏｒｙｎｅｆｏｒｍ）に属するもの
   である請求項２０の方法。 【請求項２５】　　マイクローブが、コリネバクテリウ
   ムベテア（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ　　ｂｅｔ
   ｅａ）である請求項２４の方法。 【請求項２６】　　Ｎ−ｎ−ブチルグルカミンが酸化さ
   れて６−ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソ
   ルボフラノースが製造し、これを還元してＮ−ｎ−ブチ
   ル−１−デオキシノジリマイシンを製造する請求項２０
   の方法。 【請求項２７】　　Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）グル
   カミンを酸化して６−（２−ヒドロキシエチル）アミノ
   −６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースを製造し、
   これを還元してＮ−（２−ヒドロキシエチル）−１−デ
   オキシノジリマイシンを製造する請求項２０の方法。 【請求項２８】　　Ｎ−ｎ−オクチルグルカミンを酸化
   して６−（ｎ−オクチルアミノ−）−６−デオキシ−α
   −Ｌ−ソルボフラノースを製造して、これを還元してＮ
   −ｎ−オクチル−１−デオキシノジリマイシンを製造す
   る請求項２０の方法。 【請求項２９】　　Ｎ−フェニルメチルグルカミンを酸
   化して６−（フェニルメチル）アミノ−６−デオキシ−
   α−Ｌ−ソルボフラノースを製造し、これを還元してＮ
   −（フェニルメチル）−１−デオキシノジリマイシンを
   製造する方法。 【請求項３０】　　Ｎ−（３−カルボキシプロピル）グ
   ルカミンを酸化して６−（３−カルボキシプロピル）ア
   ミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースを製造
   し、これを還元してＮ−（３−カルボキシプロピル）−
   １−デオキシノジリマイシンを製造する請求項２０の方
   法。 【請求項３１】　　Ｎ−フェニルグルカミンを酸化して
   ６−フェニルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフ
   ラノースを製造し、これを還元してＮ−フェニル−１−
   デオキシノジリマイシンを製造する請求項２０の方法。 【請求項３２】　　Ｎ−エチルグルカミンを酸化して６
   −エチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノ
   ースを製造し、これを還元してＮ−エチル−１−デオキ
   シノジリマイシンを製造する請求項２０の方法。 【請求項３３】　　マイクローブ又はその抽出物により
   、Ｄ−グリコースから式： 【化６】 （式中、Ｒはフェニル、Ｃ１　〜Ｃ１０アルキル、フェ
   ニル又はカルボキシで置換されたＣ１　〜Ｃ１０アルキ
   ル、又はヒドロキシで置換されたＣ２　〜Ｃ１０アルキ
   ル）のＮ−置換グルカミン又はその塩へのアミノ化、そ
   して式：【化７】 （式中、Ｒは前記に同じ）の化合物を製造し、この化合
   物を還元して式： 【化８】 （式中、Ｒは前記に同じ）のＮ−置換−１−デオキシノ
   ジリマイシンを製造することを含む方法。 【請求項３４】　　マイクローブが、シュードモナダー
   ル目（ｏｒｄｅｒ　　Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｄａｌｅ）
   である請求項３３の方法。 【請求項３５】　　マイクローブが、グルコノバクター
   オキシダンスである請求項３４の方法。 【請求項３６】　　マイクローブが、グルコノバクター
   オキシダンスＳｕｂｓｐ・サブオキシダンスである請求
   項３５の方法。 【請求項３７】　　マイクローブが、コリネホルム（Ｃ
   ｏｒｙｎｅｆｏｒｍ）である請求項３５の方法。 【請求項３８】　　マイクローブがコリネホルムベテア
   （Ｃｏｒｙｎｅｆｏｒｍ　　ｂｅｔｅａ）である請求項
   ３７の方法。 【請求項３９】　　Ｄ−グルコースがアミノ化されてＮ
   −ｎ−ブチルグルカミンを製造し、これを酸化して６−
   ｎ−ブチルアミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラ
   ノースを製造し、これを還元してＮ−ｎ−ブチル−１−
   デオキシノジリマイシンを製造する請求項３３の方法。 【請求項４０】　　Ｄ−グルコースをアミノ化してＮ−
   （２−ヒドロキシエチル）グルカミンを得、これを酸化
   して６−（２−ヒドロキシエチル）アミノ−６−デオキ
   シ−α−Ｌ−ソルボフラノースを製造し、これを還元し
   てＮ−（２−ヒドロキシエチル）−１−デオキシノジリ
   マイシンを製造する請求項３３の方法。 【請求項４１】　　Ｄ−グルコースをアミノ化してＮ−
   ｎ−オクチルグルカミンを得、これを酸化して６−（ｎ
   −オクチルアミノ）−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフ
   ラノースを製造し、これを還元してＮ−ｎ−オクチル−
   １−デオキシノジリマイシンを製造する請求項３３の方
   法。 【請求項４２】　　Ｄ−グルコースをアミノ化してＮ−
   フェニルメチルグルカミンを得、これを酸化して６−（
   フェニルメチル）アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソル
   ボフラノースを作り、これを還元してＮ−（フェニルメ
   チル）−１−デオキシノジリマイシンを作る請求項３３
   の方法。 【請求項４３】　　Ｄ−グルコースをアミノ化してＮ−
   ３−カルボキシプロピルグルカミンを得、これを酸化し
   て６−（３−カルボキシプロピル）アミノ−６−デオキ
   シ−α−Ｌ−ソルボフラノースを作り、これを還元して
   Ｎ−（３−カルボキシプロピル）−１−デオキシノジリ
   マイシンを作る請求項３３の方法。 【請求項４４】　　Ｄ−グルコースをアミノ化してＮ−
   フェニルグルカミンを得、これを酸化して６−フェニル
   アミノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースを作
   り、これを還元してＮ−フェニル−１−デオキシノジリ
   マイシンを作る請求項３３の方法。 【請求項４５】　　Ｄ−グルコースをアミノ化してＮ−
   エチルグルカミンを得、これを酸化して６−エチルアミ
   ノ−６−デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースを作り、
   これを還元してＮ−エチル−１−デオキシキノジリマイ
   シンを作る請求項３３の方法。 【請求項４６】　　（ａ）溶媒とアミンを混合し、（ｂ
   ）ｐＨを約８．０から１２：０に調整し、（ｃ）Ｄ−グ
   ルコースを約１：１の比率でアミンに添加し、（ｄ）触
   媒を添加し、（ｅ）約１から１００ａｔｍで約２５℃か
   ら１００℃で還元し、（ｆ）触媒を除去し、（ｇ）ｐＨ
   を約１から７に調整し、そして（ｈ）溶媒を除去してＮ
   −置換グルカミン塩を得るを含む方法。 【請求項４７】　　アミンが、メチルアミン、フェニル
   アミン、エチルアミン、プロピルアミン、１−メチルエ
   チルアミン、ｎ−ブチルアミン、メチルプロピルアミン
   、１、１−ジメチルエチルアミン、ｎ−ペンチルアミン
   、３−メチルブチルアミン、１−メチルブチルアミン、
   ２−メチルブチルアミン、ｎ−ヘキシルアミン、ｎ−ヘ
   ププチアミン、ｎ−オクチルアミン、ｎ−ノニルアミン
   、ｎ−デシルアミン、２−ヒドロキシエチルアミン、フ
   ェニルメチルアミン、５−フェニルペンチルアミン、６
   −フェニルヘキシルアミン、７−フェニルヘプチルアミ
   ン、８−フェニルオクチルアミン、９−フェニルノニル
   アミン及び１０−フェニルデシルアミンから成る群から
   選ばれる請求項４６の方法。 【請求項４８】　　アミンが、ｎ−ブチルアミン、エチ
   ルアミン、２−ヒドロキシエチルアミン、ｎ−オクチル
   アミン、フェニルメチルアミン、及びフェニルアミンか
   ら成る群から選ばれる請求項４７の方法。 【請求項４９】　　アミンが、ｎ−ブチルアミンである
   請求項４８の方法。 【請求項５０】　　アミンが、エチルアミンである請求
   項４８の方法。 【請求項５１】　　アミンが、２−ヒドロキシエチルア
   ミンである請求項４８の方法。 【請求項５２】　　アミンが、ｎ−オクチルアミンであ
   る請求項４８の方法。 【請求項５３】　　アミンが、フェニルメチルアミンで
   ある請求項４１の方法。 【請求項５４】　　アミンが、フェニルアミンである請
   求項４８の方法。 【請求項５５】　　触媒が、プラチナ、パラジウム、ロ
   ジウム、及びレニウムから成る群から選ばれる請求項４
   ６の方法。 【請求項５６】　　触媒が、パラジウムである請求項５
   ５の方法。 【請求項５７】　　溶媒が、メタノール、エタノール及
   び水性アルコールから成る群から選ばれる請求項４６の
   方法。 【請求項５８】　　溶媒が、メタノールである請求項５
   ７の方法。 【請求項５９】　　溶媒が、エタノールである請求項５
   ７の方法。 【請求項６０】　　ｐＨが、塩酸、硫酸、硝酸、酢酸、
   アスコルビン酸、コハク酸、クエン酸、マレイン酸、蓚
   酸及びリン酸から成る群から選ばれる酸で調整ささる請
   求項４６の方法。 【請求項６１】　　酸が、塩酸である請求項６０の方法
   。 【請求項６２】　　還元が、約１から５ａｔｍで行れる
   請求項４６の方法。 【請求項６３】　　還元が、４０℃から８０℃で行れる
   請求項４６の方法。 【請求項６４】　　工程（ｇ）のｐＨが、約４から６に
   調整される請求項４６の方法。 【請求項６５】　　（ａ）エタノールとｎ−ブチルアミ
   ンを混合し、（ｂ）ｐＨを、約９−１１に塩酸により調
   整し、（ｃ）Ｄ−グルコースを、約１：１の比でｎ−ブ
   チルアミンに添加し、（ｄ）炭素上パラジウム触媒を添
   加し、（ｅ）１から５ａｔｍで約４０℃から８０℃で還
   元し、（ｆ）触媒を除去し、（ｇ）ｐＨを約５．５に塩
   酸で調整し、（ｈ）エタノールを除去してＮ−ｎ−ブチ
   ルグルカミンを得る、工程を含む方法。 【請求項６６】　　Ｎ−置換グルカミン塩が請求項１の
   方法により酸化される請求項４６の方法。 【請求項６７】　　Ｎ−ｎ−ブチルグルカミン塩が請求
   項１の方法により酸化される請求項６５の方法。 【請求項６８】　　Ｎ−置換グルカミン塩が酸化され、
   請求項２０の方法により還元される請求項４６の方法。 【請求項６９】　　Ｎ−ｎ−ブチル−グルカミン塩が酸
   化され、請求項２０の方法により還元される請求項６５
   の方法。 【請求項７０】　　Ｎ−置換グルカミンが、請求項４６
   の方法により製造される請求項３３の方法。 【請求項７１】　　Ｎ−置換グルカミンが、請求項４６
   の方法により製造される請求項３９の方法。 【請求項７２】　　Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）グル
   カミンが、請求項４６の方法により製造される請求項４
   ０の方法。 【請求項７３】　　Ｎ−ｎ−オクチルグルカミンが、請
   求項４６の方法により製造される請求項４１の方法。 【請求項７４】　　Ｎ−フェニルメチルグルカミンが、
   請求項４６の方法により製造される請求項４２の方法。 【請求項７５】　　Ｎ−３−カルボキシプロピルグルカ
   ミンが、請求項４６の方法により製造される請求項４３
   の方法。 【請求項７６】　　化合物６−ｎ−ブチルアミノ−６−
   デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノース。 【請求項７７】　　化合物６−ｎ−ブチルアミノ−６−
   デオキシ−α−Ｌ−ソルボフラノースの塩型。 【請求項７８】　　塩が、クロリド、スルフェート、ニ
   トレート、アセテート、アスコルベート、スクシネート
   、シトレート、マレエート、オキザレート及びホスフェ
   ートから成る群から選ばれる請求項７７の化合物。 【請求項７９】　　塩型が、クロリドである請求項７８
   の化合物。 【請求項８０】　　塩型が、硫酸塩である請求項７８の
   化合物。 【請求項８１】　　塩型が、硫酸塩である請求項７８の
   化合物。 【請求項８２】　　塩型が、リン酸塩である請求項７８
   の化合物。 【請求項８３】　　塩型が、酢酸塩である請求項７８の
   化合物。 【請求項８４】　　塩型が、蓚酸塩である請求項７８の
   化合物。 【請求項８５】　　塩型が、アスコルビン酸塩である請
   求項７８の化合物。 【請求項８６】　　塩型が、こはく酸塩である請求項７
   ８の化合物。 【請求項８７】　　塩型が、クエン酸塩である請求項７
   ８の化合物。 【請求項８８】　　塩型が、マレイン酸塩である請求項
   ７８の化合物。