JPH04356417A - 静脈注射用脂肪乳剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、投与後速やかに代謝さ
れ、肺、肝、脾等の網内系において塞栓を起こす可能性
の少ない、小粒径で、かつ安定性に優れた静脈注射用脂
肪乳剤に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】脂肪乳剤は、エネルギー源または必須脂
肪酸源として患者への栄養補給のために非経口的に使用
されるもので、油脂を乳化剤により乳化させ、微粒子の
形態で供せられる。１９６０年、Ｗｒｅｔｌｉｎｄの開
発したイントラリピッド〔市販静注用脂肪乳剤（大塚製
薬（株）販売の商品名）〕以来、脂肪乳剤は、大豆油ま
たはサフラワー油を原料とし、大豆レシチンまたは卵黄
レシチンで乳化したものが主流を占め、ここ２０年間大
きな変化がなかった。現在は、ＭＣＴ　脂肪乳剤及び化
学的に合成されたｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄ　ｌｉｐｉｄを
用いた脂肪乳剤が検討されつつある。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】上記従来の脂肪乳剤は
、その脂肪粒子の粒径が０．２　〜１．２　μｍと不揃
いであり、ときには５μｍを超える大きなものもあった
。このため、かかる脂肪乳剤を静脈注射すると、肺、脾
臓、肝クッパー細胞（Ｋｕｐｆｆｅｒ　ｃｅｌｌ）等の
網内系組織に微小塞栓を起こすことがあった。さらに、
肝不全の場合には、肝内での代謝が緩徐なため、また肝
硬変の場合は脂肪粒子が通過する肝内皮細胞小孔の減少
、狭小化のため外因性の脂肪乳剤粒子の取り込みが妨げ
られるため、内因性の脂肪以外は使用することができな
かった。また、従来の脂肪乳剤は代謝速度が比較的緩徐
であるため、肝組織内中性脂肪濃度が上昇しやすく、肝
疾患の患者への投与が制限されるという問題があった。 さらに、従来の脂肪乳剤は高温時や長期保存時の安定性
に劣り、凝集やクリーミングを生じてしまうという問題
があった。このため、代謝が速く、脂肪粒子が小粒径で
、かつ安定性に優れた静脈注射用脂肪乳剤の開発が望ま
れていた。

【０００４】

【課題を解決するための手段】かかる実情において、本
発明者らは上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果
、特定の多価アルコールの水酸基をホスファチジル基で
置換した化合物（以下、ホスファチジル化多価アルコー
ルという。）を主乳化剤として使用すると、上記要件を
満たす優れた脂肪乳剤が得られることを見出し、本発明
を完成した。

【０００５】すなわち本発明は、ホスファチジルグリセ
ロール、ホスファチジルポリグリセロール、ホスファチ
ジルエチレングリコール、ジホスファチジルエチレング
リコール、ホスファチジルポリエチレングリコール及び
ジホスファチジルポリエチレングリコールからなる群よ
り選ばれる少なくとも一種を主乳化剤として含有するこ
とを特徴とする静脈注射用脂肪乳剤を提供するものであ
る。

【０００６】本発明に使用されるホスファチジルグリセ
ロール及びホスファチジルポリグリセロールは下記一般
式（１）、ホスファチジルエチレングリコール及びホス
ファチジルポリエチレングリコールは下記一般式（２）
、ジホスファチジルエチレングリコール及びジホスファ
チジルポリエチレングリコールは下記一般式（３）で示
される構造を有するものである。

【０００７】

【化１】

【０００８】本発明で用いられるホスファチジルグリセ
ロールは、自然界に広く分布し、特に植物体や細菌中に
多く存在しており、これらから抽出操作により単離、調
製することもできるが、公知の方法〔生化学実験講座３
　　脂質の化学　２９４−２９５頁（東京化学同人）１
９７４年等〕に従い、例えば大豆、卵黄等に含まれるレ
シチンを原料として、グリセロールの存在下にホスホリ
パーゼＤを作用させることによって容易に調製すること
もできる。また、これらの転移後のリン脂質は必要に応
じて溶剤分画、高速液体クロマトグラフィー等により精
製することができる。本発明で用いられるホスファチジ
ルポリグリセロール、ホスファチジルエチレングリコー
ル、ホスファチジルポリエチレングリコール、ジホスフ
ァチジルエチレングリコール及びジホスファチジルポリ
エチレングリコールもまた、公知の方法に従い、例えば
大豆、卵黄等に含まれるレシチンを原料として、ポリグ
リセリン、エチレングリコールもしくはポリエチレング
リコールの存在下にホスホリパーゼＤＭを作用させるこ
とによって容易に調製することができる。ここで用いら
れるポリグリセリンとしては縮合度２〜１０のものが挙
げられ、ポリエチレングリコールとしては、ジエチレン
グリコール、トリエチレングリコール等及び平均分子量
２００　から６０００までの各種ポリエチレングリコー
ルが含まれる。これらの乳化剤は単独で、または二種以
上を組み合わせて使用することができ、その使用量は特
に限定されないが脂肪乳剤に対して０．１　〜５重量％
程度が好ましい。

【０００９】本発明の脂肪乳剤の乳化剤としては、基本
的には前記のホスファチジル化多価アルコールのみが用
いられるが４０重量％未満の範囲内で他の乳化剤が配合
されていてもよい。例えばホスファチジル化多価アルコ
ールをレシチンを原料として製造した場合、生成するホ
スファチジル化多価アルコール中には原料であるレシチ
ンが残存する場合があるが、その残存量は４０重量％未
満、特に２０重量％未満であることが望ましい。上記の
乳化剤以外の乳化剤が４０重量％以上含まれている場合
には、脂肪乳剤の粒径、代謝速度等の面で充分満足でき
る効果が得られない。なお、本発明においてホスファチ
ジル化多価アルコールの濃度は、基準油脂試験分析法（
日本油化学協会編）に記載に従い定量して決定したもの
である。

【００１０】また、本発明で使用される脂質としては、
常温で液状のものであればよく、特に限定されるもので
はないが、中でも大豆油、ゴマ油、菜種油、綿実油、紅
花油、オリーブ油、ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄ　ｌｉｐｉｄ
等が好ましい。脂質の使用量は特に限定されないが、脂
肪乳剤に対して５〜２５重量％程度が好ましい。

【００１１】本発明の静脈注射用脂肪乳剤は、例えば以
下のようにして製造される。すなわち、まず前記ホスフ
ァチジル化多価アルコール〔（１）、（２）または（３
）を乳化剤として用いて、液晶中油滴分散相を経由する
液晶分散法により粗乳化を行い、次いで常法により精乳
化することにより行われる。粗乳化を実施するには、ま
ず、前記ホスファチジル化多価アルコール（１）、（２
）または（３）を、それぞれ約２倍量のグリセリン及び
水と混合し、界面活性剤相を形成させる。 これに界面活性剤相と等量ないし２倍量の大豆油等の脂
質を少量ずつ攪拌しながら加えることによりラメラ型液
晶相が形成される。この液晶相に対し３倍量ないし１０
倍量の水を少量ずつかき混ぜながら加え、ウルトラホモ
ミキサーで１０００ｒｐｍ　以上、好ましくは５０００
ｒｐｍ　以上で１０分間以上粗乳化することにより水中
油型エマルションが得られる。精乳化は、高圧ホモジナ
イザーや超音波ホモジナイザーを用いて乳化することに
より、小粒径の水中油型エマルションとすることができ
る。精乳化の条件については特に制限はないが、超音波
乳化の場合、１００Ｗ以上、できれば２００Ｗ以上で１
０分間以上乳化することが好ましい。これらの精乳化手
段のうち、大量生産の場合には高圧ホモジナイザーによ
るのが好ましい。得られたエマルションは、アルカリ水
溶液でｐＨを７〜８に調整した後、孔径１〜５μｍのメ
ンブランフィルターで数回続けて濾過し、最終的に孔径
０．４　〜０．５μｍのメンブランフィルターで一度濾
過することにより、０．３　μｍ以下でしかも比較的均
一な粒径をもった脂肪乳剤とすることができる。これを
窒素雰囲気下で分注後、オートクレーブを用いて滅菌す
ることにより、滅菌前後で粒径が大きく変化することな
く、生体に対して静脈注射が可能な脂肪乳剤が得られる
。

【００１２】

【実施例】以下、実施例を挙げてさらに詳細に説明する
が、本発明はこれらに限定されるものではない。

【００１３】実施例１ 乳化剤として大豆レシチン由来のホスファチジルグリセ
ロール（グリセロールの存在下に大豆レシチンにホスホ
リパーゼＤを作用させることにより調製したもの：「基
準油脂試験分析法（日本油化学協会編）〔５．３．３　
リン脂質組成〕記載の方法による純度８５モル％）１．
２ｇを用い、９８．５％グリセリン２．５ｇ及び蒸留水
２．５ｇと共に混合した。 そこへ大豆油１０ｇを少量ずつかき混ぜながら加え、続
いて蒸留水８３．３ｇを少量ずつかき混ぜながら加えた
のち、ウルトラホモミキサー（特殊器化工業社製）にて
９０００ｒｐｍ　で３０分間粗乳化した。さらにこれを
、超音波ホモジナイザー（ブランソン社製）を用い冷却
しながら、２４０Ｗにて３０分間超音波乳化した。０．
１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液にてｐＨを７．４　に調整
したのち、孔径３μｍ、１．２μｍ、０．４５μｍのメ
ンブランフィルターで続けて濾過した。これを窒素雰囲
気下で分注後、オートクレーブを用いて１２１　℃、２
０分間滅菌することにより、小粒径でかつ保存安定性に
優れた脂肪乳剤を得た。

【００１４】実施例２ 実施例１においてホスファチジルグリセロール１．２ｇ
の代わりに大豆レシチン由来のホスファチジルポリエチ
レングリコール４００　（ポリエチレングリコール４０
０の存在下に大豆レシチンにホスホリパーゼＤを作用さ
せることにより調製したもの：実施例１と同じ分析法に
よる純度８３モル％）１．２ｇを用い、実施例１と同様
の方法により、小粒径でかつ保存安定性に優れた脂肪乳
剤を得た。

【００１５】比較例１ 実施例１においてホスファチジルグリセロール１．２ｇ
の代わりに精製卵黄レシチン１．２ｇを用い、実施例１
と同様の方法により、対応する脂肪乳剤を得た。

【００１６】試験例１（高温安定性試験）実施例１、２
及び比較例１において、製造工程の最終段階のオートク
レーブ滅菌処理（１２１　℃，２０分間）の前後におけ
る各脂肪乳剤のｐＨ及び平均粒径の変化を表１に示す。 なお、ｐＨはデジタルｐＨメーター２２５　型（岩城ガ
ラス社製）により、平均粒径はコールターカウンター（
コールターエレクトロニクス社製，コールターモデルＮ
４）により測定した。

【００１７】

【表１】

【００１８】試験例２（長期保存安定性試験）実施例１
、２及び比較例１で得られた脂肪乳剤並びに市販静注用
脂肪乳剤（イントラリピッド、大塚製薬（株）製）につ
いて、４℃及び３７℃で長期保存したときのｐＨ及び平
均粒径の変化を試験した。測定は、製造直後並びに保存
後１０日、３０日及び６０日に行った。なお、実施例１
及び比較例１で得られた脂肪乳剤については、平均粒径
、最大粒径、粒径分布、ゼータ電位及び粘度についても
測定したのでその結果を表２に示す。長期保存安定性試
験の結果は表３に示す。なお、最大粒径、粒径分布は脂
肪乳剤粒子固定法（Ｍｉｋｉ，　Ｋ．，　Ｔａｎｉｍｕ
ｒａ，　Ｈ．；　Ｊ．　Ｃｌｉｎ．　Ｅｌｅｃｔｒｏｎ
　Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ，１２：８５５　〜８５６（１
９７９）　）による走査電顕観察及びこれのコンピュー
ター画像処理により算出した。

【００１９】

【表２】

【００２０】

【表３】

【００２１】表２により、本発明脂肪乳剤の平均粒径は
１９０　±２．５ｎｍ　であり、レシチンを乳化剤とし
て用いた脂肪乳剤の２７２　±１０ｎｍに比べ有意に小
さかった（ｐ＜０．０１）。また、粒径分布については
、０．５　μｍ以下の粒子は本発明脂肪乳剤で９４．１
±２．５％、比較例１の乳剤で９１．０±１．５　％で
あり、問題となる１μｍ以上の粒子の割合も少なかった
。さらに、本発明脂肪乳剤のゼータ電位は低値を示し、
粘度はやや高値を示した。

【００２２】また、表３より本発明脂肪乳剤は長期間保
存後も粒径の変化が少ないものであった。また、３７℃
で３０日以上保存するとレシチンを乳化剤として用いた
脂肪乳剤は大半の粒子が癒合して１０μｍ程度の巨大粒
子となり、破壊されて表面が粗造となったものも存在し
たが、本発明脂肪乳剤は癒合したと考えられる巨大粒子
及び破壊像も認められなかった。

【００２３】試験例３（過酷遠心条件での安定性試験）
実施例１及び比較例１で得られた脂肪乳剤を３７℃、１
５７２×ｇで６時間遠心したときの粒子の状態を観察し
た。その結果、比較例１の脂肪乳剤は脂肪粒子が強い凝
集傾向を示したのに対し、本発明脂肪乳剤は凝集傾向が
弱く、粒子破壊もほとんど認められなかった。

【００２４】試験例４（体内動態）乳化剤として３Ｈ標
識体を用い、実施例１及び比較例１と同様にして得られ
た脂肪乳剤をラットにｂｏｌｕｓ　静脈により投与し、
脂肪乳剤の体内動態、代謝速度について検討した。脂肪
乳剤投与後の血清中性脂肪濃度の変化を図１に示す。そ
の結果、血清中性脂肪は投与５分後に、比較例１の脂肪
乳剤で３９１　±５３ｍｇ／ｄｌと急上昇したのに対し
、本発明脂肪乳剤では１４６　±１２ｍｇ／ｄｌとわず
かに上昇しただけであった（ｐ＜０．０１）。肝組織内
中性脂肪濃度変化を図２に示す。その結果、肝組織内中
性脂肪は、本発明脂肪乳剤では投与５分後から１２０　
分後にかけて中性脂肪の上昇が少なく、肝組織への中性
脂肪の蓄積が少ないことが判明した。また、投与した３
Ｈ標識乳化剤の主要組織への分布率は、表４に示すよう
に本発明脂肪乳剤では比較例１の脂肪乳剤に比べ投与５
分後よりすでに肝に高い分布率を示した。

【００２５】

【表４】

【００２６】また、肝組織での脂肪粒子の代謝過程を電
子顕微鏡で観察すると、本発明脂肪乳剤では脂肪粒子は
肝細胞に活発に取り込まれ、投与６０分後になると、大
半の脂肪粒子は代謝され、比較例１の脂肪乳剤に比べ肝
での代謝速度が速やかであった。つまり、本発明脂肪乳
剤は投与後肝に速やかに取り込まれるため血中よりの消
失も速く、しかも肝組織でよく代謝される。

【００２７】

【発明の効果】以上のように、本発明の静脈注射用脂肪
乳剤は小粒径で、高温下や長期保存においても脂肪粒子
の粒径の変化が小さく、また過酸化物の産生の指標とな
るｐＨの低下の程度も、従来の卵黄レシチンを乳化剤と
する脂肪乳剤と同等またはそれ以下と、非常に安定なも
のである。また、本発明の静脈注射用脂肪乳剤は、（１
）粒子径が微細であるため網内系などの塞栓を起こしに
くい、（２）血中及び肝内での代謝が速いため、肝に蓄
積せず肝機能障害患者にも投与でき、（３）従来のレシ
チンを主乳化剤として用いた脂肪乳剤に比べてリン脂質
自体の蓄積性がなく、（４）特にホスファチジルグリセ
ロールを用いた場合には分解産物がグリセリンであり、
これ自体もエネルギー源として利用される等の利点を有
する。

【図面の簡単な説明】

【図１】脂肪乳剤静脈内投与後の血清中性脂肪濃度変化
を示す。

【図２】脂肪乳剤静脈内投与後の肝組織中性脂肪濃度変
化を示す。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】　　ホスファチジルグリセロール、ホスフ
   ァチジルポリグリセロール、ホスファチジルエチレング
   リコール、ジホスファチジルエチレングリコール、ホス
   ファチジルポリエチレングリコール及びジホスファチジ
   ルポリエチレングリコールからなる群より選ばれる少な
   くとも一種を主乳化剤として含有することを特徴とする
   静脈注射用脂肪乳剤。
2. 【請求項２】　　乳化剤の６０重量％以上が、ホスファ
   チジルグリセロール、ホスファチジルポリグリセロール
   、ホスファチジルエチレングリコール、ジホスファチジ
   ルエチレングリコール、ホスファチジルポリエチレング
   リコール及びジホスファチジルポリエチレングリコール
   からなる群より選ばれる少なくとも一種である請求項１
   記載の静脈注射用脂肪乳剤。