JPH04360839A - 細菌性魚病の予防及び治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【産業上の利用分野】本発明は、細菌が原因となる魚病
の予防及び治療剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】現在、海産魚においては、ブリ，カンパ
チ，マダイ，クロダイ，ヒラメ等、また淡水魚において
は、ニジマス，アマゴ，ヤマメ，アユ，コイ，ウナギ，
フナ，テラピア等の養殖が広く行われており、年々その
生産量も増加の傾向にある。それに伴い魚病による被害
も増加し、業界にとって大きな問題となっている。魚病
には細菌及びウィルスによるものが多く、特に細菌性魚
病が大きな問題となっている。代表的な細菌性魚病には
連鎖球菌症，類結節症，ビブリオ病，セッソウ病，パラ
コロ病，エドワルドジェラ症等がある。

【０００３】従来、これら細菌性魚病の予防または治療
にはペニシリン系，テトラサイクリン系，マクロライド
系等の抗生物質や合成抗菌剤が使用されてきた。投与方
法としてこれら薬剤を飼料と共に投与するか、薬浴させ
るかの方法が取られてきた。しかし、近年薬剤に対する
耐性菌の出現や、また、魚への薬剤の残留性及び安全性
等が特に問題となり養殖魚に対して抗生物質等の投与を
行うことは望ましくないという気運が高まりつつある。 従って、抗生物質等に代わる安全で有効な細菌性魚病の
予防及び治療剤の開発が強く望まれている。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】即ち本発明の目的は魚
病、具体的には養殖魚の細菌性魚病に対し、安全でかつ
有効な予防及び治療剤を提供することにある。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課
題を解決すべく鋭意研究した結果、本発明を完成させた
。ユーカリ抽出物が抗細菌作用を有することはすでに公
知（江川ら、防菌防黴学会誌、Ｖｏｌ．７，Ｎｏ．６，
Ｐ２５５〜２６１，１９７９年；江川ら、同誌、Ｖｏｌ
．８，Ｎｏ．２，Ｐ７〜１１，１９８９年；Ｎａｋａｙ
ａｍａら、Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ
．５４（１），Ｐ２３１〜２３２，１９９０年；山越ら
、日本農芸化学学会誌、ＶＯＬ．６４，Ｎｏ．３，１９
９０年）であるが、これらは一般細菌等についての抗菌
性の報告であり、本発明のユーカリ抽出物が魚病の原因
細菌に対して抗菌性を示すことは本発明者らにより初め
て見い出されたものである。

【０００６】本発明における細菌性魚病とは、類結節病
（原因菌；Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａｐｉｓｃｉｃｉｄａ
）、ビブリオ病（原因菌；Ｖｉｂｒｉｏ属細菌）、アエ
ロモナス症（原因菌；Ａｅｒｏｍｏｎａｓ　　ｈｙｄｒ
ｏｐｈｉｌａ）、及びセッソウ病（原因菌；Ａｅｒｏｍ
ｏｎａｓ　　ｓａｌｍｏｎｉｃｉｄａ）、エドワルドジ
ェラ症（原因菌；Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ　　ｔａｒ
ｄａ）を指す。本発明に用いるユーカリとは、フトモモ
科のユーカリ属植物の生、もしくは乾燥した葉，枝及び
樹皮を指す。

【０００７】現在、ユーカリの利用分野としては、ユー
カリの精油成分が蚊の忌避作用や植物に対する発芽・発
根・光合成阻害作用等を示すことが知られていることか
ら、防虫剤を初めとする農薬に利用することが考えられ
ている（西村ら、「未来の生物資源ユーカリ−そのバイ
オテクノロジーとバイオサイエンス」内田老鶴圃、１９
８９年）。さらに、食品への利用としては酸化防止剤と
して「ユーカリ葉抽出物」及び、香料として「ユーカリ
」が食品添加物に認定されていることから食品の分野へ
の実用化が期待されている（「化学的合成品以外の食品
添加物リスト」厚生省生活衛生局食品化学課、１９８９
年）。

【０００８】またユーカリ抽出物とは、ユーカリの生も
しくは乾燥した葉，枝及び樹皮を水，有機溶剤または水
と有機溶剤との混合物を用いて各種温度にて抽出したも
の、更に、有効成分を各種有機溶剤により分画したもの
、またはクロマトグラフィー等により精製したものを指
す。

【０００９】抽出及び分画に用いる有機溶剤は、メタノ
ール，エタノール，プロパノール，イソプロパノール，
ブタノール，アセトン，酢酸エチル，クロロホルム，石
油エーテル，ヘキサン，ベンゼン等があげられる。

【００１０】本発明の細菌性魚病の予防及び治療剤は、
ユーカリ抽出物をそのまま、または適当な溶媒に溶解ま
たは分散させたもの、あるいは適当な固体担体と混合す
るか、または吸着させたもので油剤，乳剤，粉剤，ゲル
状剤，カプセル剤等の任意の剤形で使用することができ
る。また、薬理上許容される乳化剤，分散剤，展着剤，
浸透剤，ゲル化剤等を添加使用できる。

【００１１】溶媒としては、例えば水，アルコール類，
油脂類（例えば魚油，植物性油等）などが適当であり、
これらの少なくとも１種または２種以上の混合物が使用
できる。

【００１２】固体担体としては、魚粉，鶏卵粉末，貝殻
粉末，卵殻粉末，大豆粉，小麦粉，澱粉，酸化カルシウ
ム，酸化ケイ素，酸化マグネシウム，酸化アルミナ，海
藻粉末，セルロース，カルボキシメチルセルロース，繊
維，プラスチック，木材等も用いられ、これらの少なく
とも１種または２種以上の混合物が使用できる。

【００１３】また乳化剤としては、グリセリン脂肪酸エ
ステル，ショ糖脂肪酸エステル，ソルビタン脂肪酸エス
テル，プロピレングリコール脂肪酸エステル，及び大豆
リン脂質等の食品用乳化剤が使用できる。

【００１４】ゲル化剤としては、寒天，アルギン酸，ゼ
ラチン，ポリビニールアルコール，ジベンジリデンソル
ビトール，Ｎ−アシルアミノ酸アミン塩等が使用できる
。また、本発明の予防及び治療剤に、他の予防及び治療
剤，摂餌誘引物質及び促進物質，香料，色素，更に魚飼
料に通常用いられているビタミン類，ミネラル類及び抗
酸化剤等を適宜配合することも可能である。

【００１５】本発明の予防及び治療剤は、飼料に直接混
入するか、薬浴用として飼育水に溶解するか、あるいは
生け簀に直接投入することができる。通常有効成分であ
るユーカリ抽出物の使用量は、予防剤として飼料等に混
入する場合、飼料重量当たり０．０１〜２０％、薬浴用
及び生け簀に直接投入する場合、飼育水中に１００ｐｐ
ｍ以上の濃度で存在させることが望ましい。また治療剤
として用いる場合の使用量は予防剤として用いる場合よ
り多くすることが望ましい。以下、本発明の実施例及び
試験例によりその詳細を説明するが、これにより本発明
を限定するものではない。

【００１６】

【作用】本発明に用いるユーカリ抽出物中の抗菌活性は
、ユーカリのメタノール抽出物のヘキサン可溶画分及び
水可溶画分に抗菌活性が認められることから、抗菌成分
はテルペン化合物を主成分とする精油成分，ポリフェノ
ール化合物，あるいは芳香族カルボン酸類が考えられる
。しかしながら、これら化合物が魚病細菌にどの様に作
用して抗菌性を発現しているかは不明である。

【００１７】

【実施例】

実施例１ ユーカリの生葉１，０２０ｇにメタノール約４リットル
を加え、時々攪拌しながら室温で放置し、１０日間抽出
した。これを３度繰り返した。抽出液をろ紙によりろ過
した後、濃縮乾固し、ユーカリ抽出物２６６．６２ｇを
得た。ユーカリ抽出物１００ｇを乳化剤２ｇ（サンソフ
トＱ−１８Ｂ　　０．３％　　サンソフト６２１　　Ｂ
　　０．２％　　太陽化学（株）製），キサンタンガム
０．５ｇ及び水９００ｇの混合溶液と共に乳化し、Ｏ／
Ｗ系の乳剤１，０００ｇを得た。

【００１８】実施例２ 実施例１で得たユーカリ抽出物を用いて生け簀投入用の
徐放性ゲル化剤を調製した。ポリビニルアルコール１８
０ｇ（ポバールＵＶ　　ユニチカ（株）製）に３０％塩
化カルシウム液７２０ｇを加え、１２０℃，３０分間加
熱溶解し、ポリビニルアルコールハイドロゲル９００ｇ
を調製した。次に実施例１で得たユーカリ抽出物５０ｇ
及び乳化剤１ｇ（サンソフトＱ−１８２Ｓ　　太陽化学
（株））を含む水の懸濁液１００ｇをポリビニルアルコ
ールハイドロゲルに分散し混入後、円柱の型に流し込み
、５℃で一夜固化し、生けす投入用の徐放性ゲル状剤９
９０ｇを得た。

【００１９】実施例３ ユーカリの生葉１，０００ｇを砕断し、水１５リットル
を加え、時々攪拌しながら加熱し沸騰後３０分間煮沸し
た。冷却後、ろ紙によりろ過を行い、ろ液を凍結乾燥し
ユーカリ抽出物２３０ｇを得た。ユーカリ抽出物１００
ｇを水１００ｇに溶解したものを乳化剤（サンソフトＱ
−８１８Ｈ　　太陽化学（株）製）５ｇを含むイカ油８
００ｇ中に乳化し、Ｗ／Ｏ系の油剤１，０００ｇを得た
。

【００２０】試験例１ 各種魚病の原因細菌のユーカリ抽出物に対する感受性を
調べた。採取したユーカリの生葉，枝，樹皮を各々１０
０ｇをミキサーにかけ、細かくした後、メタノールにて
抽出を行った。抽出後、ろ紙によりろ過を行い、液部の
み濃縮乾固し、それぞれ、メタノール抽出物として、生
葉２６．１４ｇ，枝０．６１ｇ及び樹皮０．５２ｇを得
た。これら抽出物の０．１％液を調製し、試験液とした
。試験液を直径８ｍｍのペーパーディスクに５０μｌず
つしみ込ませ、乾燥後、各種魚病細菌を植菌した１．５
％ＮａＣｌ加ブレインハート・インフュージョン寒天培
地上に置き、２５℃，２４時間培養した後、阻止円の直
径を測定した。試験した菌は、ビブリオ病のアユより分
離したＶｉｂｒｉｏ　　ａｎｇｕｉｌｌａｌｕｍ、ビブ
リオ病のヒラメより分離したＶｉｂｒｉｏ　　ｓｐ．、
エドワルドジェラ症のヒラメより分離したＥｄｗａｒｄ
ｓｉｅｌｌａ　　ｔａｒｄａ、アエロモナスのフナより
分離したＡｅｒｏｍｏｎａｓ　　ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ
、セッソウ病のニジマスより分離したＡｅｒｏｍｏｎａ
ｓ　　ｓａｌｍｏｎｉｓｉｄａ、及び類結節症のブリよ
り分離したＰａｓｔｅｕｒｅｌｌａ　　ｐｉｓｃｉｃｉ
ｄａである。それらの試験結果を表１に示す。

【００２１】

【表１】

【００２２】試験例２ ユーカリの生葉１００ｇを砕断し、ユーカリ葉に対し５
倍量の水を加えてミキサーで粗砕する。ろ紙によりろ過
した後、ろ液を凍結乾燥し、水抽出物１０．１ｇを得た
（水抽出物）。更に別途砕断したユーカリの生葉１００
ｇに水を加え、時々攪拌しながら３０分間煮沸した。冷
却後、ろ紙によりろ過を行い、ろ液を凍結乾燥し、熱水
抽出物２３．１ｇを得た（熱水抽出物）。更に別途砕断
したユーカリの生葉１，０２０ｇにメタノール４リット
ルを加え、室温にて１０日間抽出した。抽出後、ろ紙に
よりろ過を行い、ろ液を濃縮乾固し、メタノール抽出物
２６６．６２ｇを得た（メタノー抽出物）。得られたメ
タノール抽出物１５０．１１ｇに水１リットルを加え、
分散溶解後、ヘキサン１リットルを加え、激しく攪拌後
一夜静置した。ヘキサン層を分離し、ヘキサンを留去後
乾燥し、ヘキサン可溶画分２７．８５ｇを得た（ヘキサ
ン可溶画分）。次に上述のヘキサン層を分離後の水層を
濃縮乾固し水可溶画分７３．５３ｇを得た。これらユー
カリ抽出物を試料とし、試験例１と同様の試験菌と条件
で抗菌性試験を行った。その結果を表２に示す。

【００２３】

【表２】

【００２４】試験例３ 実施例３で得たユーカリ葉の熱水抽出物について各種魚
病細菌に対する最小生育阻止濃度（μｇ／ｍｌ）を寒天
希釈法により求めた。試験菌とその培養方法は、試験例
１と同様の試験菌と条件で行った。その結果を表３に示
す。

【００２５】

【表３】

【００２６】試験例４ 実施例３で得た油剤を用いてブリの稚魚（モジャコ）の
類結節症に対する感染予防効果を調べた。０．５％ビタ
ミン剤とイカ油４．５％を含む冷凍イカナゴを基本試料
として用いた。試験試料はイカ油４．５％を加えない基
本試料に対し実施例３で得た油剤を５％添加したものを
調製して用いた。体重約２０〜３０ｇのモジャコ１００
尾を５０尾ずつ２群に分け、１群は実施例３で得た油剤
を含む試験試料で飼育し、他群は基本試料で飼育した。 飼育は２００リットル容ポリエチレン水槽に１２０リッ
トルの海水を入れ、循環ろ過とエアレーションをしなが
ら、水温２４〜２７℃で行った。飼育３０日後、それぞ
れの群に対し類結節症の原因細菌であるＰａｓｔｅｕｒ
ｅｌｌａ　　ｐｓｃｉｃｉｄａ菌を人為感染させ、感染
による両群の斃死率を１４日間観察した。感染方法は１
．５％ＮａＣｌ加ブレインハート・インフュージョン寒
天培地で２５℃，２４時間培養したＰａｓｔｅｕｒｅｌ
ｌａ　　ｐｓｃｉｃｉｄａ菌液を海水にて１×１０５個
／ｍｌとなる様に希釈し、その希釈菌液２０リットル中
にエアレーション下、２４℃で、各群のモジャコを５分
間浸漬した。人為感染後、１４日間の両群の斃死率は基
本試料群で８３％、本発明の油剤を含む試験試料群で２
５％であった。

【００２７】試験例５ 実施例１で得た乳剤を用いてヒラメのエドワルドジェラ
症に対する感染予防効果を調べた。０．５％のビタミン
剤を含む冷凍イカナゴを基本試料として用いた。試験試
料は基本試料に対し本発明品を５％添加したものを調製
し用いた。体重約１２０〜１５０ｇのヒラメ５０尾を２
５尾ずつ２群に分け、１群は実施例１で得乳剤を含む試
験試料で飼育し、他群は基本試料で飼育した。飼育は２
００リットル容ポリエチレン水槽に１２０リットルの海
水を入れ、循環ろ過とエアレーションをしながら、水温
２４℃で行った。飼育２０日後、それぞれの群に対しエ
ドワルドジェラ症の原因細菌であるＥｄｗａｒｄｓｉｅ
ｌｌａｔａｒｄａ菌を人為感染させ、感染による両群の
斃死率を２０日間観察した。感染方法は１．５％ＮａＣ
ｌ加ブレインハート・インフュージョン寒天培地で２５
℃，４８時間培養したＥｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ　　ｔ
ａｒｄａ菌液から遠心分離により菌体を集め、生理食塩
水で２回洗浄後、生理食塩水で１．０×１０３個／ｍｌ
となる様に菌液を調整した。次にそれぞれの群のヒラメ
に菌液１ｍｌを腹腔内注射し、人為感染を行った。人為
感染後２０日間の両群の斃死率は基本試料群で７２％、
実施例１で得た乳剤を含む試験試料群で１６％であった
。

【００２８】

【発明の効果】本発明に使用したユーカリ抽出物は各種
の魚病細菌に対して抗菌活性を示す。しかもユーカリは
成長も早く、資源的に豊富であるため供給され易い。ま
た有効成分が天然物由来であり、食品添加物として利用
されていることからも、その安全性は高いと考えられる
。従って、抗生物質等の抗菌剤の安全性，残留性が懸念
されている状況において本発明品を細菌性魚病の予防及
び治療剤として利用することは産業的に極めて有効であ
ると考えられる。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】ユーカリ抽出物を有効成分とする細菌性魚
   病の予防及び治療剤 【０００１】