JPH0436675B2 - - Google Patents
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- JPH0436675B2 JPH0436675B2 JP58239677A JP23967783A JPH0436675B2 JP H0436675 B2 JPH0436675 B2 JP H0436675B2 JP 58239677 A JP58239677 A JP 58239677A JP 23967783 A JP23967783 A JP 23967783A JP H0436675 B2 JPH0436675 B2 JP H0436675B2
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
本発明は有機酸生産性微生物の培養方法に関
し、さらに詳しくは、有機酸生産性微生物を特定
の波長領域の光線の照射下に培養することによつ
て該有機酸の生産性を向上させる有機酸生産性微
生物の培養方法に関する。
本発明者は各種有用植物の成育、有用植物に対
する病害糸状菌類の繁殖の防除、藻類植物の培養
等において、光質条件が如何に影響するかを研究
している過程において、全く偶然的に、有機酸生
産性微生物を少くとも280nｍおよびそれ以上の
光線を実質的に含有する特定の光線の積極的照射
下に培養すると、有機酸の生産性が大いに向上す
ることを見い出し本発明を完成するに至つた。
かくして、本発明に従えば、有機酸生産性微生
物を光線を照射しつつ、培養し、有機酸を生産す
る方法において、
前記微生物が、有機酸を産する能力を有する
細菌類、放線菌類及び菌類から選ばれた微生物
であり、
前記光線の照射開始時期が前記培養系内の前
記微生物の対数増殖期以降であり、かつ、
前記光線が少なくとも280nｍ及びそれ以上
の波長域の光線を実質的に含有する光線であ
る、
ことを特徴とする有機酸生産性微生物の培養方
法、が提供される。
本発明において「有機酸」とは乳酸、クエン
酸、α−ケトグルタール酸、コハク酸、フマール
酸、ｌ−リンゴ酸、イタコン酸、酢酸、プロピオ
ン酸、酪酸、グルコール酸、イソ吉草酸、イソク
エン酸、Ｄ−アラボン酸、Ｄ−キシロン酸、Ｄ−
グルコン酸、酒石酸、２−ケトグルコン酸、５−
ケトグルコン酸、２，５−ジケトグルコン酸、Ｄ
−アラボアスコルビン酸、コージ酸、Ｄ−マンノ
ン酸、Ｄ−ガラクトン酸、２−ケトグロン酸、ク
ミン酸、トルイル酸、２，３−ジヒドロキシトル
イル酸、桂皮酸、テトラデカン−１，14−ジカル
ボン酸、アロイソクエン酸、及びこうじ酸等が包
含され、中でも、乳酸、クエン酸、α−ケトグル
タール酸、コハク酸、ｌ−リンゴ酸、フマール
酸、イタコン酸、２，５−ジケトグルコン酸、酒
石酸、ピルビン酸、２−ケトグロン酸、酢酸、Ｄ
−グルコン酸、２−ケトグルコン酸、５−ケトグ
ルコン酸、及びこうじ酸が好ましく、特に乳酸、
クエン酸、α−ケトグルタール酸、コハク酸、ｌ
−リンゴ酸、フマール酸、イタコン酸、２，５−
ジケトグルコン酸、酒石酸、ピルビン酸、２−ケ
トグロン酸及び５−ケトグルコン酸が好適であ
る。
本明細書において「有機酸生産性微生物」と
は、有機酸を微生物菌体外に代謝生産物として生
産する能力を有する微生物をいい、かかる微生物
には、菌類、放線菌類、細菌類及び酵母類が包含
される。
本発明の方法は、本発明者らの経験及び後述す
る実施例の結果から明らかなように、一般的に言
つて、どのような種類の微生物に対しても適用す
ることができ、それによつて大なり小なり有機酸
の生産性の向上効果を期待することができるが、
中でも菌類、細菌類、放線菌類及び酵母類の微生
物に対してその効果が著しく特に菌類及び細菌類
に適し、最も細菌類に好適である。
本発明の方法を適用することができる代表的な
微生物を例示すれば次のとおりである。なお下記
の微生物の例示においては、微生物の名称を和名
で属（Genus）及び種（Species）を示し、その
次に原名を（ ）内に示す。
１ 細菌類
(1) ブレビバクテリウム（Brevibacterium）
属
(1) ブレビバクテリウム・アンモニアゲネス
（Br.ammoniagenes）
(2) ブレビバクテリウム・フラブム（Br.
flavum）
(3) ブレビバクテリウム・アルカノリテイカ
ム（Br.alkanolyticum）
(4) ブレビバクテリウム・ブタニカム（Br.
butanicum）
(5) ブレビバクテリウム・ケトグルタミカム
（Br.ketoglutamicum）
(6) ブレビバクテリウム・ケトソレダクタム
（Br.ketosoreductum）
(7) ブレビバクテリウム・テスタセウム
（Br.testaceum）
(2) コリネバクテリウム（Corynebacterium）
属
(1) コリネバクテリウム・グルタミカム
（Coryne.glutamicum）
(2) コリネバクテリウム・パラルデヒデイウ
ム（Coryne.paraldehydium）
(3) コリネバクテリウム・ラサイ（Coryne.
rathayi）
(4) コリネバクテリウム・ハイドロカーボク
ラスタス（Coryne.hydrocarboclastus）
(5) コリネバクテリウム・フアシアンス
（Coryne.fascifns）
(6) コリネバクテリウム・アルカノリテイク
ム（Coryne.alkanolyticum）
(7) コリネバクテリウム・アルカナム
（Coryne.alkanum）
(8) コリネバクテリウム・フラベスセンス
（Coryne.flavescens）
(3) アルスロバクター（Arthrobacter）属
(1) アルスロバクター・シトレウス（A.
citreus）
(2) アルスロバクター・グロビフオルミス
（A.globiformis）
(3) アルスロバクター・シンプレツクス
（A.simplex）
(4) アルスロバクター・オキシダンス（A.
oxydans）
(5) アルスロバクター・パラフイネウス
（A.paraffineus）
(4) バチルス（Bacillus）属
(1) バチルス・サブチリス（B.subtilis）
(2) バチルス・メガテリウム（B.
megaterium）
(3) バチルス・リケニホルミス（B.
licheniformis）
(4) バチルス・セレウス（B.cereus）
(5) エシエリキア（Escherichia）属
(1) エシエリキア・コリ（E.coli）
(6) アクロモバクター（Achromobacter）属
(1) アクロモバクター・ヌクレオアシデベス
（Achro.nucleoacidives）
(2) アクロモバクター・タータロゲネス
（Achro.tartarogenes）
(3) アクロモバクター・ペスチフアー
（Achro.pestifer）
(7) アエロバクター（Aerobacter）属
(1) アエロバクター・アエロゲネス（Aero.
aerogenes）
(8) アグロバクテリウム（Agrobacterium）
属
(1) アグロバクテリウム・テユメフアシエン
ス（Agro.tumefaciens）
(2) アグロバクテリウム・アウレウム
（Agro.aureum）
(3) アグロバクテリウム・ビスコスム
（Agro.viscosum）
(9) アルカリゲネス（Alcaligenes）属
(1) アルカリゲネス・フアエカリス
（Alcali.faecalis）
(2) アルカリゲネス・エポキシリテイカム
（Alcali.epoxyliticum）
(3) アルカリゲネス・レボタータリカス
（Alcali.levotartaricus）
(10) アセトバクター（Acetobacter）属
(1) アセトバクター・アセテイ（Aceto.
aceti）
(2) アセトバクター・オルレアネンス
（Aceto.orleanense）
(3) アセトバクター・スクーツエンバチー
（Aceto.sch′u′tzenbachii）
(4) アセトバクター・サブオキシダンス
（Aceto.suboxydans）
(5) アセトバクター・グルコニクム
（Aceto.gluconicum）
(6) アセトバクター・メラノゲナム
（Aceto.melanogenum）
(7) アセトバクター・フラガム（Aceto.
fragum）
(8) アセトバクター・アウランテイウム
（Aceto.aurantium）
(9) アセトバクター・セリナス（Aceto.
cerinus）
(10) アセトバクター・クルタス（Aceto.
curtus）
(11) アセトバクター・キシリナム（Aceto.
xylinum）
(12) アセトバクター・ムシパルム（Aceto.
muciparum）
(13) アセトバクター・アエロゲネス
（Aceto.aerogenes）
(14) アセトバクター・アルビダス（Aceto.
albidus）
(15) アセトバクター・インダストリウム
（Aceto.industrius）
(11) ミクロコツカス（Micrococcus）属
(1) ミクロコツカス・ルテウス（M.luteus）
(2) ミクロコツカス・ソドネンシス（M.
sodonensis）
(3) ミクロコツカス・ルベンス（M.rubens）
(4) ミクロコツカス・ロゼウス（M.roseus）
(12) ミクロバクテリウム（Microbacterium）
属
(1) ミクロバクテリウム・フラブム
（Micro.flavum）
(13) シユードモナス（Pseudomonas）属
(1) シユードモナス・フルオレツセンス
（Ps.fluorescens）
(2) シユードモナス・オバリス（Ps.ovalis）
(3) シユードモナス・デスモリテイカ（Ps.
desmolytica）
(4) シユードモナス・アエルギノーサ（Ps.
aeruginosa）
(5) シユードモナス・シユードマレイ（Ps.
pseudomaleii）
(6) シユードモナス・セサミ（Ps.sesami）
(7) シユードモナス・フラギー（Ps.fragii）
(8) シユードモナス・ミルデンベルギー
（Ps.mildenbergii）
(9) シユードモナス・グラベオレンス（Ps.
garveolens）
(10) シユードモナス・プテイダ（Ps.putida）
(11) シユードモナス・コロナフアシエンス
（Ps.cronafaciens）
(12) シユードモナス・ストリアフアシエン
ス（Ps.striafaciens）
(13) シユードモナス・クロロラフイス
（Ps.chlororaphis）
(14) プロテウス（Proteus）属
(1) プロテウス・ブルガリス（Pro.
vulgaris）
(15) サルシナ（Sarcina）属
(1) サルシナ・ルテア（Sar.lutea）
(16) グルコノバクター（Gluconobacter）属
(1) グルコノバクター・ロゼウス（G.
roseus）
(2) グルコノバクター・リクエフアシエンス
（G.liquefaciens）
(3) グルコノバクター・セリナス（G.
cerinus）
(4) グルコノバクター・サブオキシダンス
（G.suboxydans）
(5) グルコノバクター・ルビギノーサス
（G.rubiginosus）
(6) グルコノバクター・インダストリウム
（G.industrius）
(7) グルコノバクター・ノンオキシグルコニ
カス（G.nonoxygluconicus）
(8) グルコノバクター・スクレロイデウス
（G.scleroideus）
(17) パラコロバクトラム
（Paracolobactrum）属
(1) パラコロバクトラム・アエロゲノイデス
（Para.aerogenoides）
(18) ラクトバシルス（Lactobacillus）属
(1) ラクトバシルス・デルブルキー
（Lactoba.delbru¨ckii）
(2) ラクトバシルス・ブレビス（Lactoba.
brevis）
(3) ラクトバシルス・レイクマンニイ
（Lactoba.leichmannii）
(19) アシネトバクター（Acinetobacter）属
(1) アシネトバクター・タータロゲネス
（Acineto.tartarogenes）
(20) リゾビウム（Rhizobium）属
(1) リゾビウム・バリダム（Phizo.
validum）
(21) セラチア（Serratia）属
(1) セラチア・マーシエツシエンス（Se.
marcescens）
(22) マイコバクテリウム（Mycobacterium）
属
(1) マイコバクテリウム・ロドクラス
（Myco.rhodocluous）
(23) エンテロバクター（Enterobacter）属
(1) エンテロバクター・クロアカエ
（Entero.cloacae）
(24) スタフイロコツカス（Staphylococcus）
属
(1) スタフイロコツカス・アウレウス
（Staphylo.aureus）
(25) アセトモナス（Acetomonas）属
(1) アセトモナス・アルボセサメア
（Acetomo.albosesamea）
(26) シトロバクター（Citrobacter）属
(1) シトロバクター・フレウンデイー
（Citro.freundii）
(2) シトロバクター・デイバーサス（Citro.
diversus）
(27) ロウコノストツク（Leuconostoc）属
(1) ロウコノストツク・メセンテロイデス
（Leuco.mesenteroides）
(28) ペデイオコツカス（Pediococcus）属
(1) ペデイオコツカス・リンドネリ（Pedio.
lindneri）
(29) プロピオニバクテリウム
（Propionibacterium）属
(1) プロピオニバクテリウム・シヤーマニー
（Propio.shermanii）
(2) プロピオニバクテリウム・ゼニクム
（Propio.thenicum）
(30) ストレプトコツカス（Streptococcus）
属
(1) ストレプトコツカス・ラクテイス
（Strepto.lactis）
(31) クルイベラ（Kluyvera）属
(1) クルイベラ・シトロフイラ（Kluy.
citrophila）
(32) セルロモナス（Cellulomonas）属
(1) セルロモナス・ガルバ（Cell.galba）
等が挙げられ、就中、アセトバクター属、グル
コノバクター属、アルスロバクター属、シユード
モナス属、プレビバクテリウム属、コリネバクテ
リウム属、セルロモナス属、セラチア属、ストレ
プトコツカス属、ペデイオコツカス属、ロウコノ
ストツク属、ラクトバチルス属、プロピオニバク
テリウム属、アクロモバクター属、アシネトバク
ター属、クルイベラ属、エシエリキア属、及びア
ルカリゲネス属が好ましく、さらにアセトバクタ
ー属、グルコノバクター属、アルスロバクター
属、シユードモナス属、ブレビバクテリウム属、
コリネバクテリウム属、セルロモナス属、セラチ
ア属、ストレプトコツカス属、ペデイオコツカス
属、ロウコノストツク属、ラクトバチルス属、プ
ロピオニバクテリウム属、アシネトバクター属、
及びアクロモバクター属が好ましく、特にアセト
バクター属、グルコノバクター属、アルスロバク
ター属、シユードモナス属、ブレビバクテリウム
属、コリネバクテリウム属、ラクトバチルス属及
びアシネトバクター属が好適である。
２ 酵母菌類
(1) キヤンデイダ（Candida）属
(1) キヤンデイダ・グイラーモンデイ（C.
guilliermondii）
(2) キヤンデイダ・リポリテイカ（C.
lypolytica）
(3) キヤンデイダ・アルビカンス（C.
albicans）
(4) キヤンデイダ・クルソイデス（C.
krusoides）
(5) キヤンデイダ・メリニイ（C.melinii）
(6) キヤンデイダ・モノーサ（C.monosa）
(7) キヤンデイダ・マイコデルマ（C.
mycoderma）
(8) キヤンデイダ・パラプシロシス（C.
parapsilosis）
(9) キヤンデイダ・ペリクローサ（C.
pelliculosa）
(10) キヤンデイダ・カテヌラーテ（C.
catenulate）
(11) キヤンデイダ・ワルバータ（C.
curvata）
(12) キヤンデイダ・フラレリー（C.
flareri）
(13) キヤンデイダ・ジヤポニカ（C.
japonica）
(14) キヤンデイダ・クルセイ（C.krusei）
(15) キヤンデイダ・トロピカリス（C.
tropicalis）
(16) キヤンデイダ・メリビオーサ（C.
melibiosa）
(17) キヤンデイダ・ブルンプテイー（C.
brumptii）
(18) キヤンデイダ・パルチエリマ（C.
pulcherrima）
(19) キヤンデイダ・ロブスタ（C.robusta）
(20) キヤンデイダ・オレオフイラ（C.
oleophila）
(21) キヤンデイダ・ヒタチニカ（C.
hitachinica）
(22) キヤンデイダ・フイブラエ（C.fibrae）
(23) キヤンデイダ・サブトロピカリス（C.
subtropicalis）
(24) キヤンデイダ・ルゴーサ（C.rugosa）
(25) キヤンデイダ・ペトロフイルム（C.
petrophilum）
(26) キヤンデイダ・ゼイラノイデス（C.
zeylanoides）
(27) キヤンデイダ・インターメデイア（C.
intermedia）
(28) キヤンデイダ・クロアカエ（C.
cloacae）
(29) キヤンデイダ・ソラニー（C.solanii）
(30) キヤンデイダ・ルシタニアエ（C.
lusitaniae）
(31) キヤンデイダ・クラウセニー（C.
claussenii）
(32) キヤンデイダ・シユードトロピカリス
（C.pseudotropicalis）
(33) キヤンデイダ・ハイドロカーボフマリ
カ（C.hydrocarbofumarica）
(34) キヤンデイダ・ステアトリテイカ（C.
steatolytica）
(35) キヤンデイダ・マルトーサ（C.
maltosa）
(36) キヤンデイダ・ウテイリス（C.utilis）
(2) デバリオマイセス（Debaryomyces）属
(1) デバリオマイセス・クロエケリ
（Debaryo.kloeckeri）
(2) デバリオマイセス・ハンセニイ
（Debaryo.hansenii）
(3) デバリオマイセス・サブグロボサス
（Debaryo.subglobosus）
(3) ハンセヌラ（Hansenula）属
(1) ハンセヌラ・サブペリクローサ（Han.
subpellculosa）
(2) ハンセヌラ・サターナス（Han.
saturnus）
(3) ハンセヌラ・スアベオレンス（Han.
suaveolens）
(4) ハンセヌラ・シルビコーラ（Han.
silvicola）
(5) ハンセヌラ・ミソ（Han.miso）
(6) ハンセヌラ・アノマラ（Han.anomala）
(4) クロエケラ（Kloeckera）属
(1) クロエケラ・アピクラータ（Kloe.
apiculata）
(2) クロエケラ・マグナ（Kloe.magna）
(5) トルロプシス（Torulopsis）属
(1) トルロプシス・フアマータ（Tor.
famata）
(2) トルロプシス・キヤンデイダ（Tor.
candida）
(3) トルロプシス・エルノビー（Tor.
ernobii）
(4) トルロプシス・ペトロフイルム（Tor.
petrophilum）
(6) ピキア（Pichia）属
(1) ピキア・ポリモルフア（Pi.
polymorpha）
(2) ピキア・ハプロフイラ（Pi.haplophila）
(3) ピキア・フアリノラ（Pi.farinora）
(4) ピキア・メンブラナエフアシエンス
（Pi.membarnaefaciens）
(5) ピキア・フアリノラ（Pi.farinora）
(6) ピキア・クエルシバス（Pi.quercibus）
(7) サツカロマイセス（Saccharomyces）属
(1) サツカロマイセス・アシデイフアシエン
ス（Sac.acidifaciens）
(2) サツカロマイセス・ウイリアナス（Sac.
willianus）
(3) サツカロマイセス・カールスベルゲンシ
ス（Sac.carlsbergensis）
(4) サツカロマイセス・セレビーシアエ
（Sac.cerevisiae）
(5) サツカロマイセス・ウバルム（Sac.
uvarum）
(8) トリコスポロン（Trichosporon）属
(1) トリコスポロン・ベヘレンデイー
（Trichosp.behrendii）
(2) トリコスポロン・カピタータム
（Trichosp.capitatum）
(3) トリコスポロン・キシリナス
（Trichosp.xylinus）
(9) トリコデルマ（Trichoderma）属
(1) トリコデルマ・ビリド（Trichode.
viride）
(10) ブレタノマイセス（Brettanomyces）属
(1) ブレタノマイセス・クラウセニー
（Bret.clausenii）
(11) エンドマイコプシス（Endomycopsis）
属
(1) エンドマイコプシス・スコリテイ
（Endomyco.scolyti）
等が有り、キヤンデイダ属、ピキア属、トリコ
デルマ属が好ましく、キヤンデイダ属がさらに好
ましい。
３ 菌類
(1) アスペルギルス（Aspergillus）属
(1) アスペルギルス・ニガー（Asp.niger）
(2) アスペルギルス・テルレウス（Asp.
terreus）
(3) アスペルギルス・フラバス（Asp.
flavus）
(4) アスペルギルス・フオネセカエウス
（Asp.fonesecaeus）
(5) アスペルギルス・ウエンテイー（Asp.
wentii）
(6) アスペルギルス・アワモリ（Asp.
awamori）
(7) アスペルギルス・サイトイ（Asp.
saitoi）
(8) アスペルギルス・エレガンス（Asp.
eregans）
(9) アスペルギルス・フマリカス（Asp.
fumaricus）
(10) アスペルギルス・パラシテイカス
（Asp.paraciticus）
(11) アスペルギルス・オリザエ（Asp.
oryzae）
(12) アスペルギルス・イタコニカス（Asp.
itaconicus）
(2) ペニシリウム（Penicillium）属
(1) ペニシリウム・ジヤンシネルム（Pen.
janthinellum）
(2) ペニシリウム・エチヌロナルジオベンス
（Pen.echinulonalgiovense）
(3) ペニシリウム・ルテウス（Pen.luteus）
(4) ペニシリウム・プルプロゲナム（Pen.
purpurogenum）
(5) ペニシリウム・ノタータム（Pen.
notatum）
(6) ペニシリウム・コリロフイルム（Pen.
corylophilum）
(7) ペニシリウム・クリソゲナム（Pen.
chrysogenum）
(8) ペニシリウム・シトリナム（Pen.
citrinum）
(3) リゾプス（Rhizopus）属
(1) リゾプス・オリザエ（Rhizo.oryzae）
(2) リゾプス・リグリカンス（Rhizo.
nigricans）
(3) リゾプス・シネンシス（Rhizo.
chinensis）
(4) リゾプス・アルリザス（Rhizo.
arrhizus）
(5) リゾプス・デレマー（Rhizo.delemar）
(4) アブシデイア（Absidia）属
(1) アブシデイア・レグニエリ（Absi.
regnieri）
(5) アクレモニウム（Acremonium）属
(1) アクレモニウム・ポトロニー（Acremo.
potronii）
(6) エウペニシリウム（Eupenicillium）属
(1) エウペニシリウム・アビダナム
（Eupen.abidjanum）
(2) エウペニシリウム・ルドウイギー
（Eupen.ludwigii）
(3) エウペニシリウム・パルバム（Eupen.
parvum）
(4) エウペニシリウム・レテイクリスポルム
（Eupen.reticulisporum）
(5) エウペニシリウム・シエアリー
（Eupen.shearii）
(6) エウペニシリウム・オクロサルモネウム
（Eupen.ochrosalmoneum）
(7) タラロマイセス（Talaromycec）属
(1) タラロマイセス・ステイピタータス
（Talaro.stipitatus）
(2) タラロマイセス・ストリアタス
（Talaro.striatus）
(8) アニキシイエラ（Anixiella）属
(1) アニキシイエラ・レテイクラータ
（Anix.reticulata）
(9) アラキニオタス（Arachniotus）属
(1) アラキニオタス・フラボテウス
（Arach.flavoteus）
(10) セルコスポーラ（Cercospora）属
(1) セルコスポーラ・ブチコーラ（Cerco.
beticorla）
(2) セルコスポーラ・メロゲナエ（Cerco.
melogenae）
(11) フザリウム（Fusarium）属
(1) フザリウム・ソニ（Fusa.lini）
(12) プルラリア（Pullularia）属
(1) プルラリア・プルランス（Pull.
pullulans）
(13) シトロマイセス（Citromycec）属
(1) シトロマイセス・プフエフエリアヌス
（Citro.pfefferianus）
(14) スキゾフイルム（Schizophyllum）属
(1) スキゾフイルム・コムーネ（Schizo.
commune）
(15) シルシネラ（Circinella）属
(1) シルシネラ・ムスカエ（Cir.muscae）
(16) クンニングアメラ（Cunninghaemella）
属
(1) クンニングアメラ・エレガンス
（Cunning.elegans）
(17) ムコール（Mucor）属
(1) ムコール・ピリフオルミス（Mu.
piriformis）
(18) アウレオバシデイウム
（Aureobasidium）属
(1) アウレオバシデイウム・プルランス
（Aureo.pullulans）
(19) パエシロマイセス（Paecilomyces）属
(1) パエシロマイセス・バリオテイ（Pae.
varioti）
等が有り、アスペルギルス属、ペニシリウム属、
リゾブス属、シトロマイセス属、スキゾフイルム
属、ムコール属、シルシネラ属及びクンニングア
メラ属が好ましく、さらにアスペルギルス属、ペ
ニシリウム属、リゾプス属、及びシトロマイセス
属が好ましく、特にアスペルギルス属及びペニシ
リウム属が好適である。
４ 放線菌類
(1) ストレプトミセス（Streptomyces）属
(1) ストレプトミセス・ベルス（St.bellus）
(2) ストレプトミセス・グリセウス（St.
griseus）
(3) ストレプトミセス・アンボフアシエンス
（St.ambofaciens）
(2) ノカルデイア（Nocardia）属
(1) ノカルデイア・グロベルラ（N.
globerula）
(2) ノカルデイア・パラフイナエ（N.
paraffinae）
(3) ノカルデイア・タータリカンス（N.
tartaricans）
があり、ノカルデイア属が好ましい。
従来、有機酸の発酵による工業的生産は、通
常、終始暗黒のタンク内で行われており、光線の
照射を実質的に回避した条件下に行なわれてい
る。本発明は、かかる従来の有機酸の発酵的生産
法とは対照的に、上記特定の光線を含まない光線
を積極的に照射しながら微生物の培養を行なうも
のであり、この点、本発明の方法は従来の発酵法
とは本質的に相違するものである。
上記特定光線の照射は有機酸生産工程でいう、
前培養および、本培養いづれの場合も適用される
が、本培養に行うことによりその効果が大とな
る。
照射しうる光線は、少なくとも280nｍおよび
それ以上の波長域の光線を実質的に含有する限
り、特に制限はなく、280〜800nｍの波長域光を
実質的に含有する光線であれば、人工光線のみな
らず、自然光線も使用することができる。
しかして、人工光線及び／又は自然光線を用い
る場合には、必要に応じ光フイルターを用い、少
なくとも280nｍおよびそれ以上の波長域光を実
質的に含有する光線の照射光量が100000μw／cm2
以下、好ましくは10000μw／cm2以下、更に好まし
くは1000μw／cm2に抑制された人工光線の照射下
に培養することが好ましい。
本発明の方法に従い、微生物の培養系に照射さ
れる前記光線の強度は、厳密に制限されるもので
はなく、培養すべき微生物の種類やその他の培養
条件等により異なり、個々の場合における最適の
照射条件は当業者であれば小規模の実験を行なう
ことにより容易に決定しうるが、一般には、
400nｍ〜800nｍの範囲の波長の可視光線領域光
の光量が100000μw／cm2以下、好ましくは10000〜
1μw／cm2、さらに好ましくは1000〜50μw／cm2の
範囲内に調節された光線を照射するのが有利であ
る。また、280nｍ〜400nｍの波長の紫外線領域
の光線はあまり強くない方が好ましく、通常該波
長範囲の紫外線の強度は一般に80000μw／cm2以
下、好ましくは10000μw／cm2以下、さらに好まし
くは1000〜20μw／cm2とするのが望ましい。
また、本発明の方法に従い、微生物の培養系に
対して前記特定の光線を積極的に照射する具体的
方法としては、例えば、実質的に外光線から密閉
された系内（タンク内）において、少なくとも
280nｍおよびそれ以上の波長域の光線を実質的
に含有する光線、好ましくは、280〜800nｍの波
長域光を実質的に含有する人工光線（この場合、
人工光線源それ自体がかかる光質特性の光を発す
るものであつてもよく、或いは人工光線源を適当
なフイルターで覆うことにより照射される光が上
記のような光質特性をもつようにしてもよい）を
照射する方法；太陽又は自然光線の照射下に、少
なくとも280nｍおよびそれ以上の波長域の光線
を実質的に含有する光線、好ましくは280〜800n
ｍの波長域光を実質的に含有する光を透過する、
透明な無色乃至有色の有機質又は無機質の被覆材
（例えば、紫外線吸収剤を配合した合成樹脂フイ
ルム）により被覆した条件下に培養を行なう方
法；並びに上記両方法の組合わせ等が考えられ
る。
本発明の方法に従がい上記特定波長域光を実質
的に含有する光線の有機酸生産性微生物に対する
照射開始時期は、該微生物培養系内に於いて、該
微生物の対数増殖期が好ましい。該微生物は、培
養系内に植菌されると、直ちに急激なる増殖は行
なわず、誘導期を経過した後に、急速に増殖を行
う対数増殖期となる。対数増殖期以降の、該微生
物は、系内の栄養源の枯渇に伴ない定常期を経
て、減数、死滅する。本発明によれば、上記特定
波長域光を実質的に含有する光線の照射開始は、
対数増殖期、好ましくは、対数増殖期の前期さら
に好ましくは、中期である。また、上記特定の波
長域光を実質的に含有する光線を照射する期間と
しては、前期の照射開始時点より発酵が終了する
時点まで、あるいは発酵がある過程に達する時点
まで等あげられるが、好ましくは発酵が終了する
時点までである。
なお、照射形式としては、続けて照射を行う連
続照射法、照射と暗黒とを交互にくり返す間欠照
射法、およびこれらの組み合せ法等があり、適宜
選択することが出来る。
本発明でいう［Xnｍおそびそれ以上の波長域
の光線を実質的に含有する」とは照射する全光線
量のうち、Xnｍ未満の波長域の紫外線が完全に
存在しないことのみならず、該紫外線が本発明の
培養に悪影響を及ぼさない程度の範囲で少量含有
していても支障はないことを意味する。
また、本発明でいう「Ｙ〜Znｍの波長域光を
実質的に含有する」とは、照射する全光線量のう
ち、Ｙ〜Znｍの波長域光が100％の場合のみなら
ず、60％以上、好ましくは、80％以上更に好まし
くは90％以上である。
本発明の方法に従う有機酸生産性微生物の培養
は、上記特定の光線の照射下に行なうという条件
を除けば、従来から行なわれている条件と全く同
様の条件下に行なうことができる。例えば、有機
酸生産性微生物を適当な栄養培地中で液体培養又
は固体培養することにより行うことができる。そ
の際の培地の栄養源、窒素源及び無機塩類等は、
使用する微生物や培養手段に応じて適宜変更選択
されるが、微生物の培養に敵常用いられるものが
広く使用される。炭素源としては、同化可能な炭
素化合物であればよく、例えばブドウ糖、シヨ
糖、乳糖、麦芽糖、澱粉、デキストリン、糖密、
グリセリン、炭化水素、エチルアルコール、メチ
ルアルコール、酢酸などが使用される。また、窒
素源としては、使用可能な窒素化合物であればよ
く、例えばコーン・スチーブ・リカー、大豆粉、
綿実油、小麦グルテン、ペプトン、肉エキス、酵
母エキス、酵母、カゼイン加水分解物、大豆タン
パク加水分解物、アンモニウム塩、硝酸塩、など
が使用される。その他無機塩としては例えば、リ
ン酸塩、マグネシウム、カルシウム、カリウム、
ナトリウム、亜鉛、鉄、マンガンなどの塩類が、
さらに必要に応じてアミノ酸類、ビタミン類、有
機酸類、核酸関連物質、発酵原料となる前駆体な
どが使用される。
培養温度および培養時間は、使用する微生物に
よつても多少異なるものであつて、その微生物が
充分発育し得る範囲内で適宜変更することができ
るが一般に、例えば細菌の場合は約25〜37℃程
度、糸状菌、酵母菌、担子菌の場合は約20〜26℃
程度、放線菌類の場合は約26〜32℃程度で培養す
ることがよい。
更に具体的な培養条件は、個々の微生物によつ
て異なるが、例えば、山口辰良、山口和夫著、最
新応用微生物学入門、（昭和52年７月１日、１版
９刷発行）技報堂出版(株)第310〜322頁、鮫島広
年、奈良高編著者、微生物とその応用−全６巻、
微生物と発酵生産（昭和54年４月25日、初版１
刷発行）共立出版(株)第186〜192頁、木下祝郎著、
新版発酵工業（昭和52年７月20日、発行）大日本
図書(株)第159〜182頁、及び日本化学学会編、実験
化学講座25生物化学（昭和33年９月25日発行）
丸善(株)第141〜171等に、開示された培養条件を用
いて行うことができる。
更に詳しくは、クエン酸の生産では、例えば特
許公告第50−16879号、同50−16436号、同51−
45673号、同51−21073号、同51−6751号、同51−
34474号、同51−44195号、同53−7514号、同53−
8797号、同53−19676号等の明細書、及びＬ−リ
ンゴ酸は、例えば特許公報第53−24515号同53−
31955号及び同53−43590号等開示された培養条件
を用いて行うことができる。
本発明において、上記光質条件下で培養を行う
際に使用する資材としては、上記の光線透過特性
を有するものであれば、その材質等は特に制限さ
れるものではなく、どのようなタイプの被覆材で
も使用することができる。そしてかかる資材は通
常無機質又は有機質のフイルム、板、その他の成
形体から成ることができる。しかして、例えば無
機質フイルム又は板としては、典型的には染料又
は顔料（例：エメラルドグリーン）を配合したガ
ラス板、一般的な紫外線吸収剤を含有する合成樹
脂膜を塗布又は積層したガラス板およびガラスフ
イルター等が挙げられ、また、有機質フイルム又
は板としては、特に紫外線吸収剤を塗布又は含有
せしめた合成樹脂フイルム又は板が好適である。
この成形に使用しうる樹脂としては、後述する
熱可塑性樹脂の他、例えば、メラミン樹脂、フエ
ノール樹脂、エポキシ樹脂、シリコーン樹脂、尿
素樹脂、アルキツド樹脂、アリルフタレート樹脂
等の熱硬化性樹脂もまた用いることができる。
本発明に使用し得る透明フイルム又は板は、例
えば通常のフイルム形成性熱可塑性樹脂に適当な
紫外線吸収剤を配合し、フイルム又は板に成形す
ることにより製造することができる。
使用し得るフイルム成形性熱可塑性合成樹脂と
しては、例えばポリ塩化ビニル、ポリ塩化ビニリ
デン、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリスチ
レン、ポリエステル、ポリアミド、ポリカーボネ
ート、ポリメチルメタクリレート、ポリアクリレ
ート、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール、
含フツ素樹脂、セルロース系樹脂、ABS樹脂等、
又はこれら重合体を主体（好ましくは50重量％以
上）とする共重合体もしくはブレンド物が包含さ
れ、特に耐光性、強度、光線透過性の理由からポ
リ塩化ビニル、ポリエチレン、ポリプロピレン、
ポリエステル、含フツソ系樹脂、セルロース系樹
脂及びポリカーボネートが好適である。
本発明に使用し得る人工光源として、上記した
特定波長域の光線を放射する光源であれば、いづ
れものでも使用できる。そして、かかる光源とし
ては例えば、螢光灯、水銀灯、陽光ランプ、一般
電球、投光用電球、特殊電球（東芝ランプカタロ
グより、東芝電材株式会社）等がある。更に具体
的には、螢光灯〔（ ）内は、商品名を示す。〕と
して、日照灯（FL40SW−Ｅ／Ｍ、東芝）、プラ
ントルクス（FL40B／NL、東芝）、フイツシユ
ルクス（FL40SBRF／NL、東芝）、青色
（FL40B／NL、東芝）、青白色（FL40BW／NL、
東芝）、白色（FL40SD／NL、東芝）、昼光色
（FL40SD／NL、東芝）、デラツクス（FL40SW
−DL−Ｘ／NL、東芝）、温白色（FL40SW／
NL、FL40SW−Ａ／NL、東芝）、葉たばこ用
6100〓、（FL40SRD−SDL6100〓、東芝）、写真
撮影用（FL40SD−SDL−CP／NL、東芝）、ブ
ラツクライト螢光ランプ（FL40SBL−Ｂ松下）、
健康線用螢光灯（FL20S−Ｅ松下）、螢光ケミカ
ルランプ（FL20S−BL松下）、陽光ランプ
（D125、D250など、東芝）、高演色性螢光灯
（FL20SW−EDL50K、東芝）及び捕虫用螢光灯
（FL20SBA−37K、東芝）等がある。
以上述べた本発明の方法に従えば、醗酵法によ
る有機酸の生産において、特定の光質条件下に微
生物を培養することにより、有機酸の生産が大い
に促進され、医薬、食品等の分野に資する所極め
て甚大である。
次に実施例を挙げて、本発明をさらに説明す
る。
実施例１、比較例及び17
マルト・エキストラクト・ブロス（Difco社
製）溶液100mlを500ml三角フラスコに分注し、加
圧減菌後、あらかじめマルツ・エキストラクト・
アガー（Difco社製）スラントに植継いでおいた
Ｌ−リンゴ酸生産性微生物キヤンデイダ・プルン
プテイー（Candida brumptii IFO0731）を１白
金耳植菌し、培養温度30℃、振とう回転数200
回／分、暗黒条件下で36時間前培養した。
予め、表−１から成る水溶液を調製しておき、
その水溶液20mlをハリオガラス製の500ml坂口フ
ラスコに分注し、110℃、10分間減菌後、上記前
培養菌体浮遊液２mlを植菌し、培養温度30℃、振
とう回転数200回／分、暗黒条件下で、本培養を
行つた。
The present invention relates to a method for culturing organic acid-producing microorganisms, and more specifically, to an organic acid-producing microorganism that improves the productivity of organic acids by culturing the organic acid-producing microorganisms under irradiation with light in a specific wavelength range. This article relates to a method for culturing productive microorganisms. The present inventor happened to discover the effects of light conditions on the growth of various useful plants, the prevention of the growth of pathogenic fungi on useful plants, the cultivation of algal plants, etc. It was discovered that the productivity of organic acids is greatly improved when organic acid-producing microorganisms are cultured under active irradiation with a specific light beam substantially containing light of at least 280 nm and above, and in completing the present invention. I've reached it. Thus, according to the present invention, in the method for producing organic acids by culturing organic acid-producing microorganisms while irradiating them with light, the microorganisms include bacteria, actinomycetes, and fungi that have the ability to produce organic acids. The irradiation time of the light beam is after the logarithmic growth phase of the microorganism in the culture system, and the light beam substantially contains light in a wavelength range of at least 280 nm or more. Provided is a method for culturing an organic acid-producing microorganism, characterized in that: In the present invention, "organic acids" include lactic acid, citric acid, α-ketoglutaric acid, succinic acid, fumaric acid, l-malic acid, itaconic acid, acetic acid, propionic acid, butyric acid, glycolic acid, isovaleric acid, isocitric acid, D-arabonic acid, D-xylonic acid, D-
Gluconic acid, tartaric acid, 2-ketogluconic acid, 5-
Ketogluconic acid, 2,5-diketogluconic acid, D
-araboascorbic acid, kojic acid, D-mannonic acid, D-galactonic acid, 2-ketogulonic acid, cumic acid, toluic acid, 2,3-dihydroxytoluic acid, cinnamic acid, tetradecane-1,14-dicarboxylic acid, Alloisocitric acid, kojic acid, etc. are included, among them lactic acid, citric acid, α-ketoglutaric acid, succinic acid, l-malic acid, fumaric acid, itaconic acid, 2,5-diketogluconic acid, tartaric acid, pyruvic acid, 2-ketogulonic acid, acetic acid, D
- gluconic acid, 2-ketogluconic acid, 5-ketogluconic acid, and kojic acid are preferred, especially lactic acid,
Citric acid, α-ketoglutaric acid, succinic acid, l
-malic acid, fumaric acid, itaconic acid, 2,5-
Diketogluconic acid, tartaric acid, pyruvic acid, 2-ketogulonic acid and 5-ketogluconic acid are preferred. As used herein, "organic acid-producing microorganisms" refer to microorganisms that have the ability to produce organic acids as metabolic products outside the microbial cells, and such microorganisms include fungi, actinomycetes, bacteria, and yeasts. is included. Generally speaking, the method of the present invention can be applied to any type of microorganism, as is clear from the experience of the present inventors and the results of the examples described below. Although it can be expected to improve the productivity of organic acids to a greater or lesser extent,
Among them, it is particularly effective against fungi, bacteria, actinomycetes, and yeast microorganisms, and is most suitable for bacteria. Examples of typical microorganisms to which the method of the present invention can be applied are as follows. In the examples of microorganisms below, the genus and species are shown in Japanese, followed by the original name in parentheses. 1 Bacteria (1) Brevibacterium
Genus (1) Brevibacterium ammoniagenes (2) Brevibacterium flavum (Br.
flavum) (3) Brevibacterium alkanolyticum (Br.alkanolyticum) (4) Brevibacterium butanicum (Br.
(5) Brevibacterium ketoglutamicum (6) Brevibacterium ketosoreductum (7) Brevibacterium testaceum (2) Corynebacterium
Genus (1) Coryne.glutamicum (2) Coryne.paraldehydium (3) Coryne.
rathayi) (4) Coryne.hydrocarboclastus (5) Coryne.fascifns (6) Coryne.alkanolyticum (7) Coryne Bacterium alkanum (8) Corynebacterium flavescens (3) Arthrobacter genus (1) Arthrobacter citreus (A.
citreus) (2) Arthrobacter globiformis (A.globiformis) (3) Arthrobacter simplex (A.simplex) (4) Arthrobacter oxydans (A.
oxydans) (5) Arthrobacter paraffineus (4) Bacillus genus (1) B. subtilis (2) Bacillus megaterium (B.
megaterium) (3) Bacillus licheniformis (B.
licheniformis) (4) B.cereus (5) Escherichia genus (1) Escherichia coli (6) Achromobacter genus (1) Achromobacter nucleo Achro.nucleoacidives (2) Achro.tartarogenes (3) Achro.pestifer (7) Aerobacter genus (1) Aerobacter aerogenes (Aero.
(8) Agrobacterium
Genus (1) Agro.tumefaciens (2) Agro.aureum (3) Agro.viscosum (9) Genus Alcaligenes (1) Alcali.faecalis (2) Alcali.epoxyliticum (3) Alcali.levotartaricus (10) Acetobacter genus (1) Acetobacter Aceto.
aceti) (2) Aceto.orleanense (3) Aceto.sch′u′tzenbachii (4) Aceto.suboxydans (5) Acetobacter gluconicum (6) Acetobacter melanogenum (7) Acetobacter fragum (Aceto.
fragum) (8) Acetobacter aurantium (Aceto.aurantium) (9) Acetobacter selinus (Aceto.
cerinus) (10) Acetobacter curtus (Aceto.
curtus) (11) Acetobacter xylinum (Aceto.
xylinum) (12) Acetobacter muciparum (Aceto.
muciparum) (13) Acetobacter aerogenes (Aceto. aerogenes) (14) Acetobacter albidus (Aceto.
albidus) (15) Aceto.industrius (11) Micrococcus spp. (1) Micrococcus luteus (2) Micrococcus sodonensis (M.
(3) M. rubens (4) M. roseus (12) Microbacterium
Genus (1) Microbacterium flavum (13) Genus Pseudomonas (1) Ps.fluorescens (2) Ps.ovalis (3) Pseudomonas・Desmoliteika (Ps.
desmolytica) (4) Pseudomonas aeruginosa (Ps.
aeruginosa) (5) Ps.
pseudomaleii) (6) Ps.sesami (7) Ps.fragii (8) Ps.mildenbergii (9) Ps.
garveolens) (10) Ps.putida (11) Ps.cronafaciens (12) Ps.striafaciens (13) Ps.chlororaphis (14) Genus Proteus (1) Proteus vulgaris (Pro.
vulgaris) (15) Sarcina genus (1) Sarcina lutea (16) Gluconobacter genus (1) Gluconobacter roseus (G.
roseus) (2) G. liquefaciens (3) G. liquefaciens (G.
cerinus) (4) G. suboxydans (5) G. rubiginosus (6) G. industrius (7) Gluconobacter・G.nonoxygluconicus (8) G.scleroideus (17) Genus Paracolobactrum (1) Paracolobactrum aerogenoides (18) ) Genus Lactobacillus (1) Lactoba.delbru¨ckii (2) Lactoba.
(3) Lactoba. leichmannii (19) Acinetobacter genus (1) Acinetobacter tartarogenes (20) Rhizobium genus (1) Rhizobium baridum (Phizo.
validum) (21) Genus Serratia (1) Serratia marcietsiens (Se.
marcescens) (22) Mycobacterium
Genus (1) Myco.rhodocluous (23) Genus Enterobacter (1) Entero.cloacae (24) Staphylococcus
Genus (1) Staphylo.aureus (25) Genus Acetomonas (1) Acetomo.albosesamea (26) Genus Citrobacter (1) Citrobacter freundii (Citro.freundii) (2) Citrobacter deversus (Citro.
diversus) (27) Genus Leuconostoc (1) Leuco.mesenteroides (28) Genus Pediococcus (1) Pedio.
lindneri) (29) Genus Propionibacterium (1) Propio.shermanii (2) Propio.thenicum (30) Streptococcus
Genus (1) Streptococcus lactis (31) Genus Kluyvera (1) Kluyvera.
citrophila) (32) Cellulomonas genus (1) Cellulomonas galba (Cell.galba), among others, Acetobacter genus, Gluconobacter genus, Arthrobacter genus, Pseudomonas genus, Plevibacterium genus , Corynebacterium, Cellulomonas, Serratia, Streptococcus, Pedeiococcus, Lauconostoccus, Lactobacillus, Propionibacterium, Achromobacter, Acinetobacter, Kluybella, Esierichia, and Alcaligenes is preferable, and further includes Acetobacter genus, Gluconobacter genus, Arthrobacter genus, Pseudomonas genus, Brevibacterium genus,
Corynebacterium, Cellulomonas, Serratia, Streptococcus, Pedeiococcus, Lauconostoccus, Lactobacillus, Propionibacterium, Acinetobacter,
and Achromobacter are preferred, and particularly Acetobacter, Gluconobacter, Arthrobacter, Pseudomonas, Brevibacterium, Corynebacterium, Lactobacillus and Acinetobacter are preferred. 2 Yeast fungi (1) Candida genus (1) Candida Guillermondei (C.
guilliermondii) (2) Quyandida lipolyteica (C.
(3) Candeida albicans (C.
albicans) (4) Quyandida crusoides (C.
krusoides) (5) C. melinii (6) C. monosa (7) C.
mycoderma) (8) Candida parapsilosis (C.
parapsilosis) (9) Candida periklosa (C.
pelliculosa) (10) Quillandida catenulate (C.
catenulate) (11) Quyandida Warbata (C.
curvata) (12) Quyandida Fraleri (C.
flareri) (13) Candeida japonica (C.
japonica) (14) C. krusei (15) C. krusei (15) C.
tropicalis) (16) Candeida melibiosa (C.
melibiosa) (17) Quillandida brumpteii (C.
brumptii) (18) Quillandida partierima (C.
pulcherrima) (19) C. robusta (20) C. oleofila (C.
oleophila) (21) Candeida hitatinica (C.
(22) C. fibrae (23) C. hitachinica (22) C. fibrae (23) C.
(24) C. rugosa (25) C. subtropicalis) (24) C. rugosa (25) C.
petrophilum) (26) Candida zeylanoides (C.
zeylanoides) (27) Quiandida intermedia (C.
intermedia) (28) Candeida cloacae (C.
cloacae) (29) C. solanii (30) C.
lusitaniae) (31) Quiandeida Clausenyi (C.
claussenii) (32) C. pseudotropicalis (33) C. hydrocarbofumarica (34) C.
steatolytica) (35) Quillandeida Maltosa (C.
maltosa) (36) C.utilis (2) Genus Debaryomyces (1) Debaryomyces kloeckeri (2) Debaryo.hansenii (3) Debaryomyces subglobosus ( Debaryo.subglobosus) (3) Genus Hansenula (1) Hansenula subglobosus (Han.
(2) Hansenula saturnus (Han.
saturnus) (3) Hansenula suaveolens (Han.
suaveolens) (4) Hansenula sylvicola (Han.
silvicola) (5) Han.miso (6) Han.anomala (4) Kloeckera spp. (1) Kloeckera apiculata (Kloeckera).
apiculata) (2) Kloe.magna (5) Genus Torulopsis (1) Torulopsis (Tor.
famata) (2) Torulopsis kyandida (Tor.
candida) (3) Torulopsis ernobii (Tor.
ernobii) (4) Torulopsis petrophyllum (Tor.
(6) Genus Pichia (1) Pichia polymorpha (Pi.
(2) Pi. haplophila (3) Pi. farinora (4) Pi. membarnaefaciens (5) Pi. farinora (6) Pi.quercibus (7) Saccharomyces genus (1) Sac.acidifaciens (2) Sac.
willianus) (3) Sac.carlsbergensis (4) Sac.cerevisiae (5) Sac.
(8) Trichosporon genus (1) Trichosp.behrendii (2) Trichosp.capitatum (3) Trichosp.xylinus (9) Trichoderma Genus (1) Trichoderma virid (Trichode.
viride) (10) Genus Brettanomyces (1) Bret.clausenii (11) Endomycopsis
Genus (1) Endomycopsis scolyti (Endomyco.scolyti), etc., and the genus Candeida, Pichia, and Trichoderma are preferred, and the genus Candeida is more preferred. 3 Fungi (1) Genus Aspergillus (1) Aspergillus niger (2) Aspergillus terreus (Asp.
(3) Aspergillus flavus (Asp.
flavus) (4) Aspergillus fonesecaeus (5) Aspergillus wendii (Asp.
(6) Aspergillus awamori (Asp.
awamori) (7) Aspergillus cytoi (Asp.
saitoi) (8) Aspergillus elegans (Asp.
eregans) (9) Aspergillus fumaricus (Asp.
fumaricus) (10) Aspergillus paraciticus (Asp.paraciticus) (11) Aspergillus oryzae (Asp.
oryzae) (12) Aspergillus itaconicus (Asp.
itaconicus) (2) Genus Penicillium (1) Penicillium jiangshinerum (Pen.
janthinellum) (2) Pen.echinulonalgiovense (3) Pen.luteus (4) Penicillium purpurogenum (Pen.
(5) Penicillium notatum (Pen.
(6) Penicillium corylophyllum (Pen.
(7) Penicillium chrysogenum (Pen.
chrysogenum) (8) Penicillium citrinum (Pen.
citrinum) (3) Rhizopus genus (1) Rhizopus oryzae (2) Rhizopus ligricans (Rhizo.
(3) Rhizopus sinensis (Rhizo.
chinensis) (4) Rhizopus alurizas (Rhizo.
arrhizus) (5) Rhizopus delemar (4) Absidia spp. (1) Absidia regnieri (Absi.
(5) Genus Acremonium (1) Acremonium potoronii (Acremo.
potronii) (6) Eupenicillium genus (1) Eupenicillium abidjanum (2) Eupenicillium ludwigii (3) Eupenicillium parvum (Eupen.
(4) Eupenicillium reticulisporum (5) Eupenicillium shearii (6) Eupenicillium ochrosalmoneum (7) Talaromycec Genus (1) Talaro.stipitatus (2) Talaro.striatus (8) Genus Anixiella (1) Anix.reticulata (9) Arachniotus ) Genus (1) Arach.flavoteus (10) Genus Cercospora (1) Cercospora buticola (Cerco.
beticorla) (2) Cercospora melogenae (Cerco.
melogenae) (11) Fusarium genus (1) Fusarium soni (Fusa.lini) (12) Pullularia genus (1) Pullularia pullulans (Pull.
(13) Citromycec genus (1) Citro.pfefferianus (14) Schizophyllum genus (1) Schizophyllum comune (Schizo.
commune) (15) Circinella genus (1) Circinella muscae (16) Cunninghaemella
Genus (1) Cunning.elegans (17) Genus Mucor (1) Mucor pyriformis (Mu.
piriformis) (18) Genus Aureobasidium (1) Aureo. pullulans (19) Genus Paecilomyces (1) Paecilomyces variotei (Pae.
varioti), Aspergillus spp., Penicillium spp.
The genera Rhizobus, Citromyces, Schizophyllum, Mucor, Circinella, and Cunninghamella are preferred, and Aspergillus, Penicillium, Rhizopus, and Citromyces are particularly preferred, and Aspergillus and Penicillium are particularly preferred. 4 Actinobacteria (1) Streptomyces genus (1) St.bellus (2) Streptomyces griseus (St.
griseus) (3) St. ambofaciens (2) Genus Nocardia (1) Nocardia globulella (N.
globerula) (2) Nocardia parahuinae (N.
paraffinae) (3) Nocardia tartaricans (N.
tartaricans), with Nocardia being preferred. Conventionally, the industrial production of organic acids by fermentation has generally been carried out in a dark tank from beginning to end, under conditions that substantially avoid exposure to light. In contrast to such conventional fermentative production methods for organic acids, the present invention involves culturing microorganisms while actively irradiating them with light that does not include the above-mentioned specific light. The method is essentially different from traditional fermentation methods. Irradiation with the above specific light beam is referred to in the organic acid production process.
This method can be applied to both pre-culture and main culture, but the effect will be greater if it is applied during main culture. The light that can be irradiated is not particularly limited as long as it substantially contains light in the wavelength range of at least 280 nm and above, and only artificial light can be used as long as it substantially contains light in the wavelength range of 280 to 800 nm. Instead, natural light can also be used. Therefore, when using artificial light and/or natural light, use an optical filter as necessary to ensure that the irradiation amount of light that substantially contains light in the wavelength range of at least 280 nm and above is 100,000 μw/cm 2
Hereinafter, it is preferable to culture under artificial light irradiation, preferably at 10,000 μw/cm 2 or less, more preferably at 1,000 μw/cm 2 . According to the method of the present invention, the intensity of the light rays irradiated onto the microorganism culture system is not strictly limited, and varies depending on the type of microorganism to be cultured and other culture conditions, and is determined to be optimal in each case. Irradiation conditions can be easily determined by those skilled in the art by conducting small-scale experiments, but in general,
The amount of light in the visible light range with a wavelength in the range of 400 nm to 800 nm is 100,000 μw/cm 2 or less, preferably 10,000 to
It is advantageous to irradiate with a light beam adjusted to 1 μw/cm 2 , more preferably in the range from 1000 to 50 μw/cm 2 . In addition, it is preferable that the ultraviolet rays in the wavelength range of 280 nm to 400 nm are not very strong, and the intensity of ultraviolet rays in this wavelength range is generally 80000 μw/cm 2 or less, preferably 10000 μw/cm 2 or less, and more preferably 1000 to 20 μw. / cm2 is desirable. Further, according to the method of the present invention, a specific method of actively irradiating the microorganism culture system with the specific light beam includes, for example, in a system (inside a tank) that is substantially sealed from external light; at least
Light rays substantially containing light rays in the wavelength range of 280 nm and above, preferably artificial light rays substantially containing light rays in the wavelength range 280 to 800 nm (in this case,
The artificial light source itself may emit light with such light quality characteristics, or the artificial light source may be covered with a suitable filter so that the emitted light has the above light quality characteristics. A method of irradiating light rays substantially containing light rays in the wavelength range of at least 280 nm and above, preferably 280 to 800 nm, under irradiation from the sun or natural light.
transmitting light substantially containing light in the wavelength range of m;
Possible methods include culturing under conditions of coating with a transparent colorless to colored organic or inorganic coating material (for example, a synthetic resin film containing an ultraviolet absorber); and a combination of both of the above methods. According to the method of the present invention, irradiation of the organic acid-producing microorganism with the light beam substantially containing light in the specific wavelength range is preferably started during the logarithmic growth phase of the microorganism in the microorganism culture system. When the microorganism is inoculated into a culture system, it does not rapidly proliferate immediately, but after passing through a lag phase, it enters a logarithmic growth phase in which it proliferates rapidly. After the logarithmic growth phase, the microorganisms go through a stationary phase as nutrient sources in the system are depleted, and then decrease in number and die. According to the present invention, the start of irradiation with the light beam substantially containing light in the specific wavelength range is as follows:
It is in the logarithmic growth phase, preferably in the early phase of the logarithmic growth phase, and more preferably in the middle phase. In addition, the period of irradiation with the light beam substantially containing light in the above-mentioned specific wavelength range includes, for example, from the start of irradiation in the first period until the end of fermentation, or until the time when fermentation reaches a certain stage, etc., but it is preferable. is up to the point where fermentation ends. Note that the irradiation format includes a continuous irradiation method in which irradiation is performed continuously, an intermittent irradiation method in which irradiation and darkness are alternately repeated, and a combination method thereof, which can be selected as appropriate. In the present invention, "substantially containing light in the wavelength range of Xnm and above" means not only that ultraviolet rays in the wavelength range of less than Xnm are completely absent from the total amount of light irradiated, but also that This means that there is no problem even if ultraviolet rays are contained in a small amount within a range that does not adversely affect the culture of the present invention. Furthermore, in the present invention, "substantially containing light in the wavelength range of Y to Znm" means not only a case where the light in the wavelength range of Y to Znm accounts for 100% of the total light dose to be irradiated, but also 60% of the total light dose. The ratio is preferably 80% or more, more preferably 90% or more. The cultivation of organic acid-producing microorganisms according to the method of the present invention can be carried out under exactly the same conditions as those conventionally used, except for the condition that it is carried out under irradiation with the above-mentioned specific light rays. For example, this can be carried out by culturing organic acid-producing microorganisms in a suitable nutrient medium in liquid or solid state. Nutrient sources, nitrogen sources, inorganic salts, etc. of the medium at that time are as follows:
The selection may be changed as appropriate depending on the microorganisms and culture means used, but those commonly used for culturing microorganisms are widely used. The carbon source may be any assimilable carbon compound, such as glucose, sucrose, lactose, maltose, starch, dextrin, molasses,
Glycerin, hydrocarbons, ethyl alcohol, methyl alcohol, acetic acid, etc. are used. In addition, the nitrogen source may be any nitrogen compound that can be used, such as corn stew liquor, soybean flour,
Cottonseed oil, wheat gluten, peptone, meat extract, yeast extract, yeast, casein hydrolyzate, soy protein hydrolyzate, ammonium salts, nitrates, etc. are used. Examples of other inorganic salts include phosphate, magnesium, calcium, potassium,
Salts such as sodium, zinc, iron, and manganese are
Furthermore, amino acids, vitamins, organic acids, nucleic acid-related substances, precursors for fermentation raw materials, etc. are used as necessary. The culture temperature and culture time vary somewhat depending on the microorganism used, and can be changed as appropriate within a range that allows the microorganism to grow sufficiently, but in general, for example, in the case of bacteria, it is approximately 25 to 37°C. approximately 20-26℃ for filamentous fungi, yeast fungi, and basidiomycetes
In the case of actinomycetes, it is best to culture them at about 26-32°C. More specific culture conditions vary depending on the individual microorganism, but for example, Tatsuyoshi Yamaguchi and Kazuo Yamaguchi, Introduction to Latest Applied Microbiology, (July 1, 1975, 1st edition, 9th printing) Gihodo Publishing. Co., Ltd. pp. 310-322, edited by Hirotoshi Samejima and Taka Nara, microorganisms and their applications - 6 volumes,
Microorganisms and fermentation production (April 25, 1978, first edition 1)
Published by Kyoritsu Shuppan Co., Ltd., pp. 186-192, written by Yoshio Kinoshita,
New edition of Fermentation Industry (published on July 20, 1970), Dainippon Tosho Co., Ltd., pp. 159-182, and edited by the Chemical Society of Japan, Experimental Chemistry Course 25 Biochemistry (published on September 25, 1952)
This can be carried out using the culture conditions disclosed in Maruzen Co., Ltd. No. 141-171. More specifically, in the production of citric acid, for example, Patent Publications Nos. 50-16879, 50-16436, and 51-
No. 45673, No. 51-21073, No. 51-6751, No. 51-
No. 34474, No. 51-44195, No. 53-7514, No. 53-
8797, Patent Publication No. 53-19676, and L-malic acid, for example, Patent Publication No. 53-24515, Patent Publication No. 53-19676.
It can be carried out using the culture conditions disclosed in No. 31955 and No. 53-43590. In the present invention, the material used for culturing under the above light quality conditions is not particularly limited as long as it has the above light transmission characteristics, and any type of material may be used. It can also be used as a dressing. Such materials can usually consist of inorganic or organic films, plates, or other molded bodies. For example, inorganic films or plates typically include glass plates mixed with dyes or pigments (e.g. emerald green), glass plates coated with or laminated with synthetic resin films containing general ultraviolet absorbers, and Examples include glass filters, and as the organic film or plate, a synthetic resin film or plate coated with or containing an ultraviolet absorber is particularly suitable. In addition to the thermoplastic resins described below, thermosetting resins such as melamine resins, phenolic resins, epoxy resins, silicone resins, urea resins, alkyd resins, and allyl phthalate resins can also be used as resins that can be used for this molding. be able to. The transparent film or plate that can be used in the present invention can be produced, for example, by blending a suitable ultraviolet absorber with a normal film-forming thermoplastic resin and molding the mixture into a film or plate. Examples of usable film-forming thermoplastic synthetic resins include polyvinyl chloride, polyvinylidene chloride, polyethylene, polypropylene, polystyrene, polyester, polyamide, polycarbonate, polymethyl methacrylate, polyacrylate, polyvinyl acetate, polyvinyl alcohol,
Fluorine-containing resin, cellulose resin, ABS resin, etc.
Also included are copolymers or blends containing these polymers as the main component (preferably 50% by weight or more), and in particular polyvinyl chloride, polyethylene, polypropylene, polyvinyl chloride, polyethylene, polypropylene,
Polyester, fluorine-containing resin, cellulose resin, and polycarbonate are suitable. As the artificial light source that can be used in the present invention, any light source that emits light in the above-mentioned specific wavelength range can be used. Such light sources include, for example, fluorescent lamps, mercury lamps, sunlight lamps, general light bulbs, flood light bulbs, and special light bulbs (from the Toshiba Lamp Catalog, Toshiba Electric Materials Co., Ltd.). More specifically, fluorescent lamps [( ) indicate the product name. ] as daylight (FL40SW-E/M, Toshiba), Plantorx (FL40B/NL, Toshiba), Fuitsyulux (FL40SBRF/NL, Toshiba), blue (FL40B/NL, Toshiba), blue-white (FL40BW/NL,
Toshiba), white (FL40SD/NL, Toshiba), daylight (FL40SD/NL, Toshiba), deluxe (FL40SW
-DL-X/NL, Toshiba), warm white (FL40SW/
NL, FL40SW-A/NL, Toshiba), for leaf tobacco
6100〓, (FL40SRD-SDL6100〓, Toshiba), for photography (FL40SD-SDL-CP/NL, Toshiba), blacklight fluorescent lamp (FL40SBL-B Matsushita),
Health line fluorescent lamp (FL20S-E Matsushita), fluorescent chemical lamp (FL20S-BL Matsushita), sunlight lamp (D125, D250, etc., Toshiba), high color rendering fluorescent lamp (FL20SW-EDL50K, Toshiba), and insect trap There are commercial fluorescent lamps (FL20SBA-37K, Toshiba), etc. According to the method of the present invention described above, in the production of organic acids by fermentation, by culturing microorganisms under specific light quality conditions, the production of organic acids is greatly promoted, which is useful in the fields of medicine, food, etc. The contributions made are extremely significant. Next, the present invention will be further explained with reference to Examples. Example 1, Comparative Example and 17 Dispense 100ml of malt extract broth (manufactured by Difco) into a 500ml Erlenmeyer flask, sterilize it under pressure, and add malt extract broth in advance.
One platinum loop of L-malic acid-producing microorganism Candida brumptii (IFO0731) was inoculated onto an agar (manufactured by Difco) slant, and the culture temperature was 30°C and the shaking speed was 200.
The cells were preincubated for 36 hours in the dark at 3 times/min. Prepare an aqueous solution consisting of Table 1 in advance,
Dispense 20ml of the aqueous solution into a 500ml Sakaguchi flask made of Hario glass, sterilize it at 110°C for 10 minutes, inoculate it with 2ml of the above pre-cultured bacterial cell suspension, culture at 30°C, and shake at 200 rotations. The main culture was carried out under dark conditions for 1 minute.
【表】
＊ 培養液１当たりの組
成量
本培養開始より24時間目に、菌体の増殖が対数
増殖期の中期に達していることを生菌数により確
認したので、表−２、図−１及び図−２に示した
280〜360nｍ及び300〜800nｍ波長域光を発光す
る螢光灯を設置してある振とう培養機（培養温度
30℃、振とう回転数200回／分）に、培養フラス
コ10本を移し、培養を継続した。なお、残つた10
本の培養フラスコについてはそのまま暗黒培養を
続けた。培養時間は培養開始より120時間とし、
光照射区では連続照射培養を行つた。さらに、本
培養開始当初から実施例１と同様な光線照射条件
の下で培養を行つた（比較例17）それらの結果を
表−３に示した。培養結果（生成量）は各区の培
養フラスコ（10本）で得られた値の平均値であ
る。[Table] * Groups per culture solution
24 hours after the start of the main culture, it was confirmed by the number of viable bacteria that the bacterial growth had reached the middle of the logarithmic growth phase, as shown in Table 2, Figure 1 and Figure 2.
A shaking culture machine equipped with a fluorescent lamp that emits light in the 280-360nm and 300-800nm wavelength range (culture temperature
The 10 culture flasks were transferred to a temperature of 30° C. and a shaking speed of 200 times/min, and the culture was continued. In addition, there were 10 remaining
The original culture flask continued to be cultured in the dark. The culture time was 120 hours from the start of culture.
Continuous irradiation culture was performed in the light irradiation area. Furthermore, the culture was carried out under the same light irradiation conditions as in Example 1 from the beginning of the main culture (Comparative Example 17), and the results are shown in Table 3. The culture results (production amount) are the average values obtained from the culture flasks (10 flasks) in each section.
【表】【table】
【表】
実施例２、３、比較例２、３
表−４に示した成分組成を有する培地を前培地
及び本培地に用いて、コハク酸生産性微生物キヤ
ンデイダ・ブルンプテイー（Candida brumptii
IFO0731）及びキヤンデイダ・リポリテイカ
（Candida lipolytica IFO1195）をそれぞれ実施
例１、比較例１と同一の方法で培養した。但し、
前培養は48時間とし、本培養は168時間とした。
その培養結果を表−５に示した。[Table] Examples 2 and 3, Comparative Examples 2 and 3 Using the medium having the component composition shown in Table 4 as the pre-medium and main medium, the succinic acid-producing microorganism Candida brumptii
IFO0731) and Candida lipolytica IFO1195 were cultured in the same manner as in Example 1 and Comparative Example 1, respectively. however,
Preculture was for 48 hours, and main culture was for 168 hours.
The culture results are shown in Table-5.
【表】【table】
【表】
実施例４、比較例４
YMブロス（Difco0711）溶液を前培地とし、
表−６に示した本培地を用いて、フマール酸生産
性微生物キヤンデイダ・ハイドロカーボフマリカ
（Candida hydrocarbofumarica ATCC28532）
を実施例１、比較例１と同一の方法で培養した。
但し、前培養は48時間とし、本培養は168時間と
した。その培養結果を表−７に示した[Table] Example 4, Comparative Example 4 YM broth (Difco0711) solution was used as pre-medium,
Using this medium shown in Table 6, the fumaric acid producing microorganism Candida hydrocarbofumarica (Candida hydrocarbofumarica ATCC28532)
was cultured in the same manner as in Example 1 and Comparative Example 1.
However, the preculture was for 48 hours, and the main culture was for 168 hours. The culture results are shown in Table 7.
【表】【table】
【表】
実施例５、比較例５
表−８及び表−９に示した組成を有する前培地
及び本培地を用いて、イタコン酸生産性微生物ア
スペルギウス・テレウス（Aspergillus terreus
ATCC10020）を実施例１、比較例１と同一の方
法で培養した。但し、本培地の量は100ml／500ml
坂口フラスコとし、そこに５mlの前培養菌体浮遊
液を植菌した。また、培養温度は本培養のみ36
℃、培養時間は前培養48時間、本培養168時間と
し、光照射区では培養72時間目から光照射培養を
開始した。[Table] Example 5, Comparative Example 5 Using the pre-medium and main medium having the compositions shown in Tables 8 and 9, itaconic acid-producing microorganism Aspergillus terreus
ATCC10020) was cultured in the same manner as in Example 1 and Comparative Example 1. However, the amount of this medium is 100ml/500ml.
A Sakaguchi flask was used, and 5 ml of the precultured cell suspension was inoculated there. In addition, the culture temperature is only for main culture36
℃, and the culture time was 48 hours for preculture and 168 hours for main culture, and in the light irradiation group, light irradiation culture was started from 72 hours after culture.
【表】【table】
【表】 その培養結果を表−10に示した。【table】 The culture results are shown in Table-10.
【表】
実施例６、比較例６
グルコース1.0％、コーン・ステイーブ・リカ
ー0.5％、NaCl0.1％、及びCaCO30.25％から成る
培地を試験管に１mlとり、121℃下で10分間滅菌
した。予めYGCメデイウム（ATCC菌株カタロ
グ）スラントに植継いでおいた２，５−ジケトグ
ルコン酸生産性微生物アセトバクター・フラグム
（Acetobacter fragum ATCC21409）を、この
液体培地に１白金耳接種し、30℃の暗黒条件下で
72時間静置培養した。次に、この静置培養液２ml
を滅菌済の同じ組成の培養液100mlの入つた坂口
フラスコに添加し、30℃の暗黒条件下、振とう回
転数200回／分で18時間振とう培養した。
こうして得られた前培養菌体浮遊液を表−11に
示した組成を有する本培地50mlの入つた坂口フラ
スコ（ハリオガラス製）に、各々５mlずつ植菌
し、30℃の暗黒条件下、振とう回転数200回／分
で実施例１、比較例１と同様に本培養を行つた。
但し、本培養は60時間とし、光照射区では培養７
時間目から光照射培養を開始した。その培養結果
を表−12に示した。[Table] Example 6, Comparative Example 6 1 ml of a medium consisting of 1.0% glucose, 0.5% corn stave liquor, 0.1% NaCl, and 0.25% CaCO 3 was placed in a test tube and sterilized at 121°C for 10 minutes. . One platinum loop of 2,5-diketogluconic acid-producing microorganism Acetobacter fragum (Acetobacter fragum ATCC21409), which had been previously inoculated onto a YGC medium (ATCC strain catalog) slant, was inoculated into this liquid medium and incubated in the dark at 30°C. below
Static culture was performed for 72 hours. Next, 2ml of this static culture solution
was added to a Sakaguchi flask containing 100 ml of a sterilized culture solution with the same composition, and cultured with shaking at 200 rotations/min under dark conditions at 30°C for 18 hours. 5 ml of the precultured cell suspension thus obtained was inoculated into each Sakaguchi flask (manufactured by Halio Glass) containing 50 ml of the main medium having the composition shown in Table 11, and shaken in the dark at 30°C. Main culture was carried out in the same manner as in Example 1 and Comparative Example 1 at a rotating speed of 200 times/min.
However, the main culture is for 60 hours, and in the light irradiation area, the culture is for 7 hours.
Light irradiation culture was started from the hour. The culture results are shown in Table-12.
【表】【table】
【表】
※ グルコースに基づく収率
実施例７、比較例７
グルコース0.5％及びコーン・ステイーブ・リ
カー1.0％から成る水溶液（PH7.0）100mlの入つ
た500ml坂口フラスコを滅菌、冷却後、Ｌ（＋）−
酒石酸生産性（シス・エポキシコハク酸より生
成）微生物アシネトバクター・タータロゲネス
（Acinetobacter tartarogenes ATCC31105）を
１白金耳接種し、30℃の暗黒条件下、振とう回転
数200回／分で24時間振とう培養した。こうして
得られた前培養菌体浮遊液５mlを、コーン・ステ
イーブ・リカー0.2％、NH4NO30.1％、
K2HPO40.2％、MgSO4・7H2O0.05％、及び
FeSO4・7H2O0.001％から成る本培地50ml（PH
7.0）を含む500ml三角フラスコ（滅菌済）に植菌
し、同時にシス・エポキシコハク酸カルシウムを
浮遊酸として30％の濃度になるように添加し、30
℃の暗黒条件下、振とう回転数200回／分で実施
例１、比較例１と同様に本培養を行つた。但し、
本培養は48時間とし、光照射区では培養７時間目
から光照射培養を開始した。その結果を表−13に
示した。[Table] *Yield based on glucose Example 7, Comparative Example 7 After sterilizing and cooling a 500 ml Sakaguchi flask containing 100 ml of an aqueous solution (PH7.0) consisting of 0.5% glucose and 1.0% corn stave liquor, +)-
One platinum loop of tartaric acid-producing (produced from cis-epoxysuccinic acid) microorganism Acinetobacter tartarogenes (ATCC31105) was inoculated and cultured under dark conditions at 30°C with shaking at a shaking speed of 200 times/min for 24 hours. . 5 ml of the precultured bacterial cell suspension obtained in this way was mixed with 0.2% corn stave liquor, 0.1% NH 4 NO 3 ,
K 2 HPO 4 0.2%, MgSO 4 7H 2 O 0.05%, and
50 ml of this medium consisting of FeSO 4 7H 2 O 0.001% (PH
7.0) was inoculated into a 500ml Erlenmeyer flask (sterilized), and at the same time, calcium cis-epoxysuccinate was added as a floating acid to a concentration of 30%.
Main culture was carried out in the same manner as in Example 1 and Comparative Example 1 under dark conditions at .degree. C. and shaking at a rotational speed of 200 times/min. however,
The main culture was carried out for 48 hours, and in the light irradiation group, light irradiation culture was started from the 7th hour of culture. The results are shown in Table-13.
【表】
％としたモル収率
実施例８、９、比較例８、９
表−14及び表−15に示した前培地及び本培地を
用いて、２−ケト−Ｌ−グロン酸生産性（２，５
−ジケト−Ｄ−グルコン酸あるいはその塩類より
生成）微生物ブレビバクテリウム・ケトソレダク
タム（Brevibacterium ketosoreductum
ATCC21914）及びシユードモナス・タロロラフ
イス（Pseudomonas chlororaphis ATCC9446）
を実施例１、比較例１と同一の方法で、それぞれ
別々に培養した。但し、前培養は24時間、本培養
は72時間とし、光照射区では培養７時間目から光
照射培養を開始した。その培養結果を表−16に示
した。[Table] Molar yield as %Examples 8, 9, Comparative Examples 8, 9 Using the pre-culture medium and main medium shown in Table-14 and Table-15, 2-keto-L-gulonic acid productivity ( 2,5
Brevibacterium ketosoreductum (produced from -diketo-D-gluconic acid or its salts)
ATCC21914) and Pseudomonas chlororaphis ATCC9446
were cultured separately in the same manner as in Example 1 and Comparative Example 1. However, the preculture was for 24 hours and the main culture was for 72 hours, and in the light irradiation group, light irradiation culture was started from the 7th hour of culture. The culture results are shown in Table-16.
【表】【table】
【表】【table】
【表】
実施例10〜12、比較例10〜12
前記表−14及び表−17に示した前培地及び本培
地を用いて、ピルビン酸生産性微生物ブレビバク
テリウム・ブタニカム（Brevibacterium
butanicum ATCC21196）、アルスロバクター、
パラフイネウス（Arthrobacter paraffjneus
ATCC19064）、及びコリネバクテリウム・アルカ
ナム（Corynebacterium alkanum
ATCC21194）を実施例１、比較例１と同一の方
法で、それぞれ別々に培養を行つた。但し、前培
養は24時間、本培養は96時間とし、光照射区では
培養７時間目から光照射培養を開始した。その培
養結果を表−18に示した。[Table] Examples 10 to 12, Comparative Examples 10 to 12 Using the preculture medium and main medium shown in Tables 14 and 17 above, the pyruvate-producing microorganism Brevibacterium butanicum was grown.
butanicum ATCC21196), Arthrobacter,
Arthrobacter paraffjneus
ATCC19064), and Corynebacterium alkanum
ATCC21194) was cultured separately in the same manner as in Example 1 and Comparative Example 1. However, the preculture was for 24 hours and the main culture was for 96 hours, and in the light irradiation group, light irradiation culture was started from the 7th hour of culture. The culture results are shown in Table-18.
【表】【table】
【表】
実施例13、比較例13
ｎ−パラフイン（C12〜C15の混合物）10％、
NH4NO30.1％、MgSO40.02％、KH2PO40.03％、
Na2HPO4・12H2O0.03％、CaCO34％及び水道水
より成る培地（PH5.0）に、クエン酸生産性微生
物ペニシリウム・シエルメシナム（Penicillium
chermesinum ATCC20325）の胞子懸濁液を接
種し、28℃の暗黒条件下で振とう培養した。培養
時間は14日間とし、光照射区では培養４日目より
光照射培養を開始した。その培養結果を表−19に
示した。[Table] Example 13, Comparative Example 13 n-paraffin (mixture of C 12 to C 15 ) 10%,
NH4NO3 0.1 %, MgSO4 0.02%, KH2PO4 0.03 %,
A citric acid - producing microorganism , Penicillium
chermesinum ATCC20325) was inoculated and cultured with shaking at 28°C in the dark. The culture time was 14 days, and in the light irradiation group, light irradiation culture was started on the fourth day of culture. The culture results are shown in Table-19.
【表】
実施例14、比較例14
前記表−14及び表−20に示した前培地及び本培
地を用いて、α−ケトグルタール酸生産性微生物
ブレビバクテリウム・ケトグルタミカム
（Brevibacterium ketoglutamicum
ATCC15587）を実施例１、比較例１と同一の方
法で培養した。
但し、前培養は24時間、本培養は96時間とし、
光照射区では培養７時間目より光照射培養を開始
した。又、本培養中の培地PHはアンモニア水のフ
イード法によりPH6.0〜8.0の範囲に調節した。[Table] Example 14, Comparative Example 14 Using the preculture medium and main medium shown in Tables 14 and 20 above, α-ketoglutaric acid-producing microorganism Brevibacterium ketoglutamicum was grown.
ATCC15587) was cultured in the same manner as in Example 1 and Comparative Example 1. However, the pre-culture was for 24 hours and the main culture was for 96 hours.
In the light irradiation section, light irradiation culture was started after 7 hours of culture. In addition, the pH of the medium during the main culture was adjusted to a range of PH6.0 to 8.0 by feeding with aqueous ammonia.
【表】 その培養結果を表−21に示した。【table】 The culture results are shown in Table-21.
【表】
実施例15、比較例15
乳酸生産性微生物ラクトバチルス・デルブルキ
（Lactobacillus delbiu¨ckii IFO3202）を少量の
CaCO3を添加したグルコース1.5％、酵母エキス
0.8％、寒天1.5％からなる培地（PH6.8）に37℃で
２日間穿刺培養し、その１白金耳を表−22の液体
培地100mlに接種し、37℃で18時間前培養した。
無菌的に遠心分離（4000rpm、15分）により集
菌し、滅菌生理食塩水で洗浄したのち、100mlの
滅菌食塩水に浮遊した。予め、表−23から成る水
溶液を調製しておき、その水溶液100mlをパイレ
ツクスガラス製の500ml三角フラスコに分注し、
滅菌・冷却後、上記前培養菌体浮遊液５mlを植菌
し、別殺菌しておいてCaCO35ｇを添加し、７日
間静置培養した。但し、光照射区では、本培養開
始より18時間目に、表−２、図−１、及び図−２
に示した280〜360nm及び300〜800nmの波長域光
を放射する螢光灯下に移し、培養を継続した。な
お培養中は時々フラスコを振とうした。その培養
結果を表−24に示した。[Table] Example 15, Comparative Example 15 A small amount of lactic acid-producing microorganism Lactobacillus delbiu¨ckii (Lactobacillus delbiu¨ckii IFO3202)
Glucose 1.5%, Yeast Extract with CaCO3
0.8% agar and 1.5% agar (PH 6.8) for 2 days at 37°C, a loopful of the culture was inoculated into 100ml of the liquid medium shown in Table 22, and precultured at 37°C for 18 hours. Bacteria were collected by aseptic centrifugation (4000 rpm, 15 minutes), washed with sterile physiological saline, and then suspended in 100 ml of sterile saline. Prepare the aqueous solution shown in Table 23 in advance, dispense 100 ml of the aqueous solution into a 500 ml Erlenmeyer flask made of Pyrex glass,
After sterilization and cooling, 5 ml of the above pre-cultured cell suspension was inoculated, separately sterilized, 5 g of CaCO 3 was added, and the mixture was left to stand for 7 days. However, in the light irradiation area, 18 hours after the start of main culture, Table 2, Figure 1, and Figure 2
The culture was continued under a fluorescent lamp emitting light in the wavelength ranges of 280 to 360 nm and 300 to 800 nm. The flask was occasionally shaken during the culture. The culture results are shown in Table-24.
【表】【table】
【表】【table】
【表】
実施例16、比較例16
ソルビトール５％、酵母エキス１％、寒天２％
からなる斜面寒天培地に培養した５−ケトグルコ
ン酸生産性微生物グルコノバクター・オキシダン
ス・亜種サブオキシダンス（アセトバクター・サ
ブオキシダンス）〔Gluconobacter oxydans
subsp.suboxydans（Acetobacter suboxydans）
ATCC23773〕をソルビトール５％、酵母エキス
１％の水溶液５mlに一白金耳植菌し、27℃で48時
間前培養した。
これを更に表−25からなる水溶液50mlに無菌的
に加えて、30℃で48時間振とう培養した。
予め、表−26から成る水溶液を調製しておき、
その水溶液50mlをハリオガラス製の500ml坂口フ
ラスコに分注し、滅菌後、上記前培養菌体浮遊液
１mlを植菌し、実施例１、比較例１と同様の方法
で光照射による培養を行なつた。但し、本培養期
間は40時間であり、光照射開始は菌体の増殖が対
数増殖期の中期に達した時期、すなわち本培養開
始後14時間目に行なつた。
その培養結果を表−27に示した。[Table] Example 16, Comparative Example 16 Sorbitol 5%, yeast extract 1%, agar 2%
5-ketogluconic acid-producing microorganism Gluconobacter oxydans subspecies (Acetobacter suboxydans) cultured on a slanted agar medium consisting of
subsp.suboxydans (Acetobacter suboxydans)
ATCC23773] was inoculated into 5 ml of an aqueous solution of 5% sorbitol and 1% yeast extract, and precultured at 27°C for 48 hours. This was further added aseptically to 50 ml of the aqueous solution shown in Table 25, and cultured with shaking at 30°C for 48 hours. Prepare an aqueous solution consisting of Table 26 in advance,
50 ml of the aqueous solution was dispensed into a 500 ml Sakaguchi flask made of Halio glass, and after sterilization, 1 ml of the above pre-cultured cell suspension was inoculated and cultured by light irradiation in the same manner as in Example 1 and Comparative Example 1. Summer. However, the main culture period was 40 hours, and the light irradiation was started when the growth of bacterial cells reached the middle of the logarithmic growth phase, that is, 14 hours after the start of the main culture. The culture results are shown in Table 27.
【表】【table】
【表】【table】
第１図及び第２図は実施例及び比較例で使用し
た照射光の波長別比エネルギー曲線である。
FIGS. 1 and 2 are specific energy curves by wavelength of irradiation light used in Examples and Comparative Examples.
Claims (1)
養し、有機酸を生産する方法において、 前記微生物が、有機酸を産する能力を有する
細菌類、放線菌類及び菌類から選ばれた微生物
であり、 前記光線の照射開始時期が前記培養系内の前
記微生物の対数増殖期以降であり、かつ、 前記光線が少なくとも280nｍおよびそれ以
上の波長域の光線を実質的に含有する光線であ
る、 ことを特徴とする有機酸生産性微生物の培養方
法。 ２ 該培養を少なくとも280〜800nｍの波長域光
を実質的に含有する光線の照射下に行なう特許請
求の範囲第１項記載の方法。 ３ 該光線の照射強度が100000〜1μW／cm2の範
囲である特許請求の範囲第１〜２項いずれか記載
の方法。 ４ 該光線が、人工光線及び／又は自然光線であ
る特許請求の範囲第１〜３項いずれか記載の方
法。 ５ 該有機酸が、乳酸、クエン酸、α−ケトグル
タール酸、コハク酸、ｌ−リンゴ酸、フマール
酸、イタコン酸、２，５−ジケトグルコン酸、酒
石酸、ピルビン酸、２−ケトグロン酸、及び５−
ケトグルコン酸である特許請求の範囲第１〜４項
いずれか記載の方法。 ６ 該微生物が、アセトバクター
（Acetobacter）属、グルコノバクター
（Gluconobacter）属、アルスロバクター
（Arthrobacter）属、シユードモナス
（Pseudomonas）属、ラクトバチルス
（Lactobacillus）属、ブレビバクテリウム
（Brevibacteriun）属、コリネバクテリウム
（Corynebacterinm）属、アシネトバクター
（Acinetobacter）属、キヤンデイダ（Candida）
属、アスペルギルス（Aspergillus）属、及びペ
ニシリウム（Penicillum）属である特許請求の範
囲第１項記載の方法。[Scope of Claims] 1. A method for producing organic acids by culturing organic acid-producing microorganisms while irradiating them with light, wherein the microorganisms are selected from bacteria, actinomycetes, and fungi that have the ability to produce organic acids. the selected microorganism, the irradiation start time of the light beam is after the logarithmic growth phase of the microorganism in the culture system, and the light beam substantially contains light in a wavelength range of at least 280 nm or more. A method for culturing organic acid-producing microorganisms using light rays. 2. The method according to claim 1, wherein the culturing is carried out under irradiation with light that substantially contains light in the wavelength range of at least 280 to 800 nm. 3. The method according to any one of claims 1 to 2, wherein the irradiation intensity of the light beam is in the range of 100000 to 1 μW/cm 2 . 4. The method according to any one of claims 1 to 3, wherein the light beam is an artificial light beam and/or a natural light beam. 5 The organic acid is lactic acid, citric acid, α-ketoglutaric acid, succinic acid, l-malic acid, fumaric acid, itaconic acid, 2,5-diketogluconic acid, tartaric acid, pyruvic acid, 2-ketogulonic acid, and 5-
The method according to any one of claims 1 to 4, wherein the ketogluconic acid is ketogluconic acid. 6 The microorganism is of the genus Acetobacter, genus Gluconobacter, genus Arthrobacter, genus Pseudomonas, genus Lactobacillus, genus Brevibacteriun, genus Corynebacterium, Bacterium (Corynebacterinm), Acinetobacter (Acinetobacter), Candida
2. The method according to claim 1, wherein the genus Aspergillus and the genus Penicillum.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP23967783A JPS60133881A (en) | 1983-12-21 | 1983-12-21 | Method for cultivating microorganism capable of producing organic acid and cultivation material used therefor |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP23967783A JPS60133881A (en) | 1983-12-21 | 1983-12-21 | Method for cultivating microorganism capable of producing organic acid and cultivation material used therefor |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60133881A JPS60133881A (en) | 1985-07-17 |
| JPH0436675B2 true JPH0436675B2 (en) | 1992-06-16 |
Family
ID=17048267
Family Applications (1)
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Family Cites Families (1)
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| JPS5639789A (en) * | 1979-09-05 | 1981-04-15 | Yamamoto Takashi | Activating method of bacteria used for treating and deodorizing organic waste |
-
1983
- 1983-12-21 JP JP23967783A patent/JPS60133881A/en active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
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| JPS60133881A (en) | 1985-07-17 |
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