JPH0436675B2 - - Google Patents

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JPH0436675B2
JPH0436675B2 JP58239677A JP23967783A JPH0436675B2 JP H0436675 B2 JPH0436675 B2 JP H0436675B2 JP 58239677 A JP58239677 A JP 58239677A JP 23967783 A JP23967783 A JP 23967783A JP H0436675 B2 JPH0436675 B2 JP H0436675B2
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acid
genus
light
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light beam
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JP58239677A
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Yoshihisa Suzuki
Mitsuo Igami
Yoshio Yokomizo
Isamu Harasawa
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Nippon Carbide Industries Co Inc
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Nippon Carbide Industries Co Inc
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  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】
本発明は有機酸生産性微生物の培養方法に関
し、さらに詳しくは、有機酸生産性微生物を特定
の波長領域の光線の照射下に培養することによつ
て該有機酸の生産性を向上させる有機酸生産性微
生物の培養方法に関する。 本発明者は各種有用植物の成育、有用植物に対
する病害糸状菌類の繁殖の防除、藻類植物の培養
等において、光質条件が如何に影響するかを研究
している過程において、全く偶然的に、有機酸生
産性微生物を少くとも280nmおよびそれ以上の
光線を実質的に含有する特定の光線の積極的照射
下に培養すると、有機酸の生産性が大いに向上す
ることを見い出し本発明を完成するに至つた。 かくして、本発明に従えば、有機酸生産性微生
物を光線を照射しつつ、培養し、有機酸を生産す
る方法において、 前記微生物が、有機酸を産する能力を有する
細菌類、放線菌類及び菌類から選ばれた微生物
であり、 前記光線の照射開始時期が前記培養系内の前
記微生物の対数増殖期以降であり、かつ、 前記光線が少なくとも280nm及びそれ以上
の波長域の光線を実質的に含有する光線であ
る、 ことを特徴とする有機酸生産性微生物の培養方
法、が提供される。 本発明において「有機酸」とは乳酸、クエン
酸、α−ケトグルタール酸、コハク酸、フマール
酸、l−リンゴ酸、イタコン酸、酢酸、プロピオ
ン酸、酪酸、グルコール酸、イソ吉草酸、イソク
エン酸、D−アラボン酸、D−キシロン酸、D−
グルコン酸、酒石酸、2−ケトグルコン酸、5−
ケトグルコン酸、2,5−ジケトグルコン酸、D
−アラボアスコルビン酸、コージ酸、D−マンノ
ン酸、D−ガラクトン酸、2−ケトグロン酸、ク
ミン酸、トルイル酸、2,3−ジヒドロキシトル
イル酸、桂皮酸、テトラデカン−1,14−ジカル
ボン酸、アロイソクエン酸、及びこうじ酸等が包
含され、中でも、乳酸、クエン酸、α−ケトグル
タール酸、コハク酸、l−リンゴ酸、フマール
酸、イタコン酸、2,5−ジケトグルコン酸、酒
石酸、ピルビン酸、2−ケトグロン酸、酢酸、D
−グルコン酸、2−ケトグルコン酸、5−ケトグ
ルコン酸、及びこうじ酸が好ましく、特に乳酸、
クエン酸、α−ケトグルタール酸、コハク酸、l
−リンゴ酸、フマール酸、イタコン酸、2,5−
ジケトグルコン酸、酒石酸、ピルビン酸、2−ケ
トグロン酸及び5−ケトグルコン酸が好適であ
る。 本明細書において「有機酸生産性微生物」と
は、有機酸を微生物菌体外に代謝生産物として生
産する能力を有する微生物をいい、かかる微生物
には、菌類、放線菌類、細菌類及び酵母類が包含
される。 本発明の方法は、本発明者らの経験及び後述す
る実施例の結果から明らかなように、一般的に言
つて、どのような種類の微生物に対しても適用す
ることができ、それによつて大なり小なり有機酸
の生産性の向上効果を期待することができるが、
中でも菌類、細菌類、放線菌類及び酵母類の微生
物に対してその効果が著しく特に菌類及び細菌類
に適し、最も細菌類に好適である。 本発明の方法を適用することができる代表的な
微生物を例示すれば次のとおりである。なお下記
の微生物の例示においては、微生物の名称を和名
で属(Genus)及び種(Species)を示し、その
次に原名を( )内に示す。 1 細菌類 (1) ブレビバクテリウム(Brevibacterium)
属 (1) ブレビバクテリウム・アンモニアゲネス
(Br.ammoniagenes) (2) ブレビバクテリウム・フラブム(Br.
flavum) (3) ブレビバクテリウム・アルカノリテイカ
ム(Br.alkanolyticum) (4) ブレビバクテリウム・ブタニカム(Br.
butanicum) (5) ブレビバクテリウム・ケトグルタミカム
(Br.ketoglutamicum) (6) ブレビバクテリウム・ケトソレダクタム
(Br.ketosoreductum) (7) ブレビバクテリウム・テスタセウム
(Br.testaceum) (2) コリネバクテリウム(Corynebacterium)
属 (1) コリネバクテリウム・グルタミカム
(Coryne.glutamicum) (2) コリネバクテリウム・パラルデヒデイウ
ム(Coryne.paraldehydium) (3) コリネバクテリウム・ラサイ(Coryne.
rathayi) (4) コリネバクテリウム・ハイドロカーボク
ラスタス(Coryne.hydrocarboclastus) (5) コリネバクテリウム・フアシアンス
(Coryne.fascifns) (6) コリネバクテリウム・アルカノリテイク
ム(Coryne.alkanolyticum) (7) コリネバクテリウム・アルカナム
(Coryne.alkanum) (8) コリネバクテリウム・フラベスセンス
(Coryne.flavescens) (3) アルスロバクター(Arthrobacter)属 (1) アルスロバクター・シトレウス(A.
citreus) (2) アルスロバクター・グロビフオルミス
(A.globiformis) (3) アルスロバクター・シンプレツクス
(A.simplex) (4) アルスロバクター・オキシダンス(A.
oxydans) (5) アルスロバクター・パラフイネウス
(A.paraffineus) (4) バチルス(Bacillus)属 (1) バチルス・サブチリス(B.subtilis) (2) バチルス・メガテリウム(B.
megaterium) (3) バチルス・リケニホルミス(B.
licheniformis) (4) バチルス・セレウス(B.cereus) (5) エシエリキア(Escherichia)属 (1) エシエリキア・コリ(E.coli) (6) アクロモバクター(Achromobacter)属 (1) アクロモバクター・ヌクレオアシデベス
(Achro.nucleoacidives) (2) アクロモバクター・タータロゲネス
(Achro.tartarogenes) (3) アクロモバクター・ペスチフアー
(Achro.pestifer) (7) アエロバクター(Aerobacter)属 (1) アエロバクター・アエロゲネス(Aero.
aerogenes) (8) アグロバクテリウム(Agrobacterium)
属 (1) アグロバクテリウム・テユメフアシエン
ス(Agro.tumefaciens) (2) アグロバクテリウム・アウレウム
(Agro.aureum) (3) アグロバクテリウム・ビスコスム
(Agro.viscosum) (9) アルカリゲネス(Alcaligenes)属 (1) アルカリゲネス・フアエカリス
(Alcali.faecalis) (2) アルカリゲネス・エポキシリテイカム
(Alcali.epoxyliticum) (3) アルカリゲネス・レボタータリカス
(Alcali.levotartaricus) (10) アセトバクター(Acetobacter)属 (1) アセトバクター・アセテイ(Aceto.
aceti) (2) アセトバクター・オルレアネンス
(Aceto.orleanense) (3) アセトバクター・スクーツエンバチー
(Aceto.sch′u′tzenbachii) (4) アセトバクター・サブオキシダンス
(Aceto.suboxydans) (5) アセトバクター・グルコニクム
(Aceto.gluconicum) (6) アセトバクター・メラノゲナム
(Aceto.melanogenum) (7) アセトバクター・フラガム(Aceto.
fragum) (8) アセトバクター・アウランテイウム
(Aceto.aurantium) (9) アセトバクター・セリナス(Aceto.
cerinus) (10) アセトバクター・クルタス(Aceto.
curtus) (11) アセトバクター・キシリナム(Aceto.
xylinum) (12) アセトバクター・ムシパルム(Aceto.
muciparum) (13) アセトバクター・アエロゲネス
(Aceto.aerogenes) (14) アセトバクター・アルビダス(Aceto.
albidus) (15) アセトバクター・インダストリウム
(Aceto.industrius) (11) ミクロコツカス(Micrococcus)属 (1) ミクロコツカス・ルテウス(M.luteus) (2) ミクロコツカス・ソドネンシス(M.
sodonensis) (3) ミクロコツカス・ルベンス(M.rubens) (4) ミクロコツカス・ロゼウス(M.roseus) (12) ミクロバクテリウム(Microbacterium)
属 (1) ミクロバクテリウム・フラブム
(Micro.flavum) (13) シユードモナス(Pseudomonas)属 (1) シユードモナス・フルオレツセンス
(Ps.fluorescens) (2) シユードモナス・オバリス(Ps.ovalis) (3) シユードモナス・デスモリテイカ(Ps.
desmolytica) (4) シユードモナス・アエルギノーサ(Ps.
aeruginosa) (5) シユードモナス・シユードマレイ(Ps.
pseudomaleii) (6) シユードモナス・セサミ(Ps.sesami) (7) シユードモナス・フラギー(Ps.fragii) (8) シユードモナス・ミルデンベルギー
(Ps.mildenbergii) (9) シユードモナス・グラベオレンス(Ps.
garveolens) (10) シユードモナス・プテイダ(Ps.putida) (11) シユードモナス・コロナフアシエンス
(Ps.cronafaciens) (12) シユードモナス・ストリアフアシエン
ス(Ps.striafaciens) (13) シユードモナス・クロロラフイス
(Ps.chlororaphis) (14) プロテウス(Proteus)属 (1) プロテウス・ブルガリス(Pro.
vulgaris) (15) サルシナ(Sarcina)属 (1) サルシナ・ルテア(Sar.lutea) (16) グルコノバクター(Gluconobacter)属 (1) グルコノバクター・ロゼウス(G.
roseus) (2) グルコノバクター・リクエフアシエンス
(G.liquefaciens) (3) グルコノバクター・セリナス(G.
cerinus) (4) グルコノバクター・サブオキシダンス
(G.suboxydans) (5) グルコノバクター・ルビギノーサス
(G.rubiginosus) (6) グルコノバクター・インダストリウム
(G.industrius) (7) グルコノバクター・ノンオキシグルコニ
カス(G.nonoxygluconicus) (8) グルコノバクター・スクレロイデウス
(G.scleroideus) (17) パラコロバクトラム
(Paracolobactrum)属 (1) パラコロバクトラム・アエロゲノイデス
(Para.aerogenoides) (18) ラクトバシルス(Lactobacillus)属 (1) ラクトバシルス・デルブルキー
(Lactoba.delbru¨ckii) (2) ラクトバシルス・ブレビス(Lactoba.
brevis) (3) ラクトバシルス・レイクマンニイ
(Lactoba.leichmannii) (19) アシネトバクター(Acinetobacter)属 (1) アシネトバクター・タータロゲネス
(Acineto.tartarogenes) (20) リゾビウム(Rhizobium)属 (1) リゾビウム・バリダム(Phizo.
validum) (21) セラチア(Serratia)属 (1) セラチア・マーシエツシエンス(Se.
marcescens) (22) マイコバクテリウム(Mycobacterium)
属 (1) マイコバクテリウム・ロドクラス
(Myco.rhodocluous) (23) エンテロバクター(Enterobacter)属 (1) エンテロバクター・クロアカエ
(Entero.cloacae) (24) スタフイロコツカス(Staphylococcus)
属 (1) スタフイロコツカス・アウレウス
(Staphylo.aureus) (25) アセトモナス(Acetomonas)属 (1) アセトモナス・アルボセサメア
(Acetomo.albosesamea) (26) シトロバクター(Citrobacter)属 (1) シトロバクター・フレウンデイー
(Citro.freundii) (2) シトロバクター・デイバーサス(Citro.
diversus) (27) ロウコノストツク(Leuconostoc)属 (1) ロウコノストツク・メセンテロイデス
(Leuco.mesenteroides) (28) ペデイオコツカス(Pediococcus)属 (1) ペデイオコツカス・リンドネリ(Pedio.
lindneri) (29) プロピオニバクテリウム
(Propionibacterium)属 (1) プロピオニバクテリウム・シヤーマニー
(Propio.shermanii) (2) プロピオニバクテリウム・ゼニクム
(Propio.thenicum) (30) ストレプトコツカス(Streptococcus)
属 (1) ストレプトコツカス・ラクテイス
(Strepto.lactis) (31) クルイベラ(Kluyvera)属 (1) クルイベラ・シトロフイラ(Kluy.
citrophila) (32) セルロモナス(Cellulomonas)属 (1) セルロモナス・ガルバ(Cell.galba) 等が挙げられ、就中、アセトバクター属、グル
コノバクター属、アルスロバクター属、シユード
モナス属、プレビバクテリウム属、コリネバクテ
リウム属、セルロモナス属、セラチア属、ストレ
プトコツカス属、ペデイオコツカス属、ロウコノ
ストツク属、ラクトバチルス属、プロピオニバク
テリウム属、アクロモバクター属、アシネトバク
ター属、クルイベラ属、エシエリキア属、及びア
ルカリゲネス属が好ましく、さらにアセトバクタ
ー属、グルコノバクター属、アルスロバクター
属、シユードモナス属、ブレビバクテリウム属、
コリネバクテリウム属、セルロモナス属、セラチ
ア属、ストレプトコツカス属、ペデイオコツカス
属、ロウコノストツク属、ラクトバチルス属、プ
ロピオニバクテリウム属、アシネトバクター属、
及びアクロモバクター属が好ましく、特にアセト
バクター属、グルコノバクター属、アルスロバク
ター属、シユードモナス属、ブレビバクテリウム
属、コリネバクテリウム属、ラクトバチルス属及
びアシネトバクター属が好適である。 2 酵母菌類 (1) キヤンデイダ(Candida)属 (1) キヤンデイダ・グイラーモンデイ(C.
guilliermondii) (2) キヤンデイダ・リポリテイカ(C.
lypolytica) (3) キヤンデイダ・アルビカンス(C.
albicans) (4) キヤンデイダ・クルソイデス(C.
krusoides) (5) キヤンデイダ・メリニイ(C.melinii) (6) キヤンデイダ・モノーサ(C.monosa) (7) キヤンデイダ・マイコデルマ(C.
mycoderma) (8) キヤンデイダ・パラプシロシス(C.
parapsilosis) (9) キヤンデイダ・ペリクローサ(C.
pelliculosa) (10) キヤンデイダ・カテヌラーテ(C.
catenulate) (11) キヤンデイダ・ワルバータ(C.
curvata) (12) キヤンデイダ・フラレリー(C.
flareri) (13) キヤンデイダ・ジヤポニカ(C.
japonica) (14) キヤンデイダ・クルセイ(C.krusei) (15) キヤンデイダ・トロピカリス(C.
tropicalis) (16) キヤンデイダ・メリビオーサ(C.
melibiosa) (17) キヤンデイダ・ブルンプテイー(C.
brumptii) (18) キヤンデイダ・パルチエリマ(C.
pulcherrima) (19) キヤンデイダ・ロブスタ(C.robusta) (20) キヤンデイダ・オレオフイラ(C.
oleophila) (21) キヤンデイダ・ヒタチニカ(C.
hitachinica) (22) キヤンデイダ・フイブラエ(C.fibrae) (23) キヤンデイダ・サブトロピカリス(C.
subtropicalis) (24) キヤンデイダ・ルゴーサ(C.rugosa) (25) キヤンデイダ・ペトロフイルム(C.
petrophilum) (26) キヤンデイダ・ゼイラノイデス(C.
zeylanoides) (27) キヤンデイダ・インターメデイア(C.
intermedia) (28) キヤンデイダ・クロアカエ(C.
cloacae) (29) キヤンデイダ・ソラニー(C.solanii) (30) キヤンデイダ・ルシタニアエ(C.
lusitaniae) (31) キヤンデイダ・クラウセニー(C.
claussenii) (32) キヤンデイダ・シユードトロピカリス
(C.pseudotropicalis) (33) キヤンデイダ・ハイドロカーボフマリ
カ(C.hydrocarbofumarica) (34) キヤンデイダ・ステアトリテイカ(C.
steatolytica) (35) キヤンデイダ・マルトーサ(C.
maltosa) (36) キヤンデイダ・ウテイリス(C.utilis) (2) デバリオマイセス(Debaryomyces)属 (1) デバリオマイセス・クロエケリ
(Debaryo.kloeckeri) (2) デバリオマイセス・ハンセニイ
(Debaryo.hansenii) (3) デバリオマイセス・サブグロボサス
(Debaryo.subglobosus) (3) ハンセヌラ(Hansenula)属 (1) ハンセヌラ・サブペリクローサ(Han.
subpellculosa) (2) ハンセヌラ・サターナス(Han.
saturnus) (3) ハンセヌラ・スアベオレンス(Han.
suaveolens) (4) ハンセヌラ・シルビコーラ(Han.
silvicola) (5) ハンセヌラ・ミソ(Han.miso) (6) ハンセヌラ・アノマラ(Han.anomala) (4) クロエケラ(Kloeckera)属 (1) クロエケラ・アピクラータ(Kloe.
apiculata) (2) クロエケラ・マグナ(Kloe.magna) (5) トルロプシス(Torulopsis)属 (1) トルロプシス・フアマータ(Tor.
famata) (2) トルロプシス・キヤンデイダ(Tor.
candida) (3) トルロプシス・エルノビー(Tor.
ernobii) (4) トルロプシス・ペトロフイルム(Tor.
petrophilum) (6) ピキア(Pichia)属 (1) ピキア・ポリモルフア(Pi.
polymorpha) (2) ピキア・ハプロフイラ(Pi.haplophila) (3) ピキア・フアリノラ(Pi.farinora) (4) ピキア・メンブラナエフアシエンス
(Pi.membarnaefaciens) (5) ピキア・フアリノラ(Pi.farinora) (6) ピキア・クエルシバス(Pi.quercibus) (7) サツカロマイセス(Saccharomyces)属 (1) サツカロマイセス・アシデイフアシエン
ス(Sac.acidifaciens) (2) サツカロマイセス・ウイリアナス(Sac.
willianus) (3) サツカロマイセス・カールスベルゲンシ
ス(Sac.carlsbergensis) (4) サツカロマイセス・セレビーシアエ
(Sac.cerevisiae) (5) サツカロマイセス・ウバルム(Sac.
uvarum) (8) トリコスポロン(Trichosporon)属 (1) トリコスポロン・ベヘレンデイー
(Trichosp.behrendii) (2) トリコスポロン・カピタータム
(Trichosp.capitatum) (3) トリコスポロン・キシリナス
(Trichosp.xylinus) (9) トリコデルマ(Trichoderma)属 (1) トリコデルマ・ビリド(Trichode.
viride) (10) ブレタノマイセス(Brettanomyces)属 (1) ブレタノマイセス・クラウセニー
(Bret.clausenii) (11) エンドマイコプシス(Endomycopsis)
属 (1) エンドマイコプシス・スコリテイ
(Endomyco.scolyti) 等が有り、キヤンデイダ属、ピキア属、トリコ
デルマ属が好ましく、キヤンデイダ属がさらに好
ましい。 3 菌類 (1) アスペルギルス(Aspergillus)属 (1) アスペルギルス・ニガー(Asp.niger) (2) アスペルギルス・テルレウス(Asp.
terreus) (3) アスペルギルス・フラバス(Asp.
flavus) (4) アスペルギルス・フオネセカエウス
(Asp.fonesecaeus) (5) アスペルギルス・ウエンテイー(Asp.
wentii) (6) アスペルギルス・アワモリ(Asp.
awamori) (7) アスペルギルス・サイトイ(Asp.
saitoi) (8) アスペルギルス・エレガンス(Asp.
eregans) (9) アスペルギルス・フマリカス(Asp.
fumaricus) (10) アスペルギルス・パラシテイカス
(Asp.paraciticus) (11) アスペルギルス・オリザエ(Asp.
oryzae) (12) アスペルギルス・イタコニカス(Asp.
itaconicus) (2) ペニシリウム(Penicillium)属 (1) ペニシリウム・ジヤンシネルム(Pen.
janthinellum) (2) ペニシリウム・エチヌロナルジオベンス
(Pen.echinulonalgiovense) (3) ペニシリウム・ルテウス(Pen.luteus) (4) ペニシリウム・プルプロゲナム(Pen.
purpurogenum) (5) ペニシリウム・ノタータム(Pen.
notatum) (6) ペニシリウム・コリロフイルム(Pen.
corylophilum) (7) ペニシリウム・クリソゲナム(Pen.
chrysogenum) (8) ペニシリウム・シトリナム(Pen.
citrinum) (3) リゾプス(Rhizopus)属 (1) リゾプス・オリザエ(Rhizo.oryzae) (2) リゾプス・リグリカンス(Rhizo.
nigricans) (3) リゾプス・シネンシス(Rhizo.
chinensis) (4) リゾプス・アルリザス(Rhizo.
arrhizus) (5) リゾプス・デレマー(Rhizo.delemar) (4) アブシデイア(Absidia)属 (1) アブシデイア・レグニエリ(Absi.
regnieri) (5) アクレモニウム(Acremonium)属 (1) アクレモニウム・ポトロニー(Acremo.
potronii) (6) エウペニシリウム(Eupenicillium)属 (1) エウペニシリウム・アビダナム
(Eupen.abidjanum) (2) エウペニシリウム・ルドウイギー
(Eupen.ludwigii) (3) エウペニシリウム・パルバム(Eupen.
parvum) (4) エウペニシリウム・レテイクリスポルム
(Eupen.reticulisporum) (5) エウペニシリウム・シエアリー
(Eupen.shearii) (6) エウペニシリウム・オクロサルモネウム
(Eupen.ochrosalmoneum) (7) タラロマイセス(Talaromycec)属 (1) タラロマイセス・ステイピタータス
(Talaro.stipitatus) (2) タラロマイセス・ストリアタス
(Talaro.striatus) (8) アニキシイエラ(Anixiella)属 (1) アニキシイエラ・レテイクラータ
(Anix.reticulata) (9) アラキニオタス(Arachniotus)属 (1) アラキニオタス・フラボテウス
(Arach.flavoteus) (10) セルコスポーラ(Cercospora)属 (1) セルコスポーラ・ブチコーラ(Cerco.
beticorla) (2) セルコスポーラ・メロゲナエ(Cerco.
melogenae) (11) フザリウム(Fusarium)属 (1) フザリウム・ソニ(Fusa.lini) (12) プルラリア(Pullularia)属 (1) プルラリア・プルランス(Pull.
pullulans) (13) シトロマイセス(Citromycec)属 (1) シトロマイセス・プフエフエリアヌス
(Citro.pfefferianus) (14) スキゾフイルム(Schizophyllum)属 (1) スキゾフイルム・コムーネ(Schizo.
commune) (15) シルシネラ(Circinella)属 (1) シルシネラ・ムスカエ(Cir.muscae) (16) クンニングアメラ(Cunninghaemella)
属 (1) クンニングアメラ・エレガンス
(Cunning.elegans) (17) ムコール(Mucor)属 (1) ムコール・ピリフオルミス(Mu.
piriformis) (18) アウレオバシデイウム
(Aureobasidium)属 (1) アウレオバシデイウム・プルランス
(Aureo.pullulans) (19) パエシロマイセス(Paecilomyces)属 (1) パエシロマイセス・バリオテイ(Pae.
varioti) 等が有り、アスペルギルス属、ペニシリウム属、
リゾブス属、シトロマイセス属、スキゾフイルム
属、ムコール属、シルシネラ属及びクンニングア
メラ属が好ましく、さらにアスペルギルス属、ペ
ニシリウム属、リゾプス属、及びシトロマイセス
属が好ましく、特にアスペルギルス属及びペニシ
リウム属が好適である。 4 放線菌類 (1) ストレプトミセス(Streptomyces)属 (1) ストレプトミセス・ベルス(St.bellus) (2) ストレプトミセス・グリセウス(St.
griseus) (3) ストレプトミセス・アンボフアシエンス
(St.ambofaciens) (2) ノカルデイア(Nocardia)属 (1) ノカルデイア・グロベルラ(N.
globerula) (2) ノカルデイア・パラフイナエ(N.
paraffinae) (3) ノカルデイア・タータリカンス(N.
tartaricans) があり、ノカルデイア属が好ましい。 従来、有機酸の発酵による工業的生産は、通
常、終始暗黒のタンク内で行われており、光線の
照射を実質的に回避した条件下に行なわれてい
る。本発明は、かかる従来の有機酸の発酵的生産
法とは対照的に、上記特定の光線を含まない光線
を積極的に照射しながら微生物の培養を行なうも
のであり、この点、本発明の方法は従来の発酵法
とは本質的に相違するものである。 上記特定光線の照射は有機酸生産工程でいう、
前培養および、本培養いづれの場合も適用される
が、本培養に行うことによりその効果が大とな
る。 照射しうる光線は、少なくとも280nmおよび
それ以上の波長域の光線を実質的に含有する限
り、特に制限はなく、280〜800nmの波長域光を
実質的に含有する光線であれば、人工光線のみな
らず、自然光線も使用することができる。 しかして、人工光線及び/又は自然光線を用い
る場合には、必要に応じ光フイルターを用い、少
なくとも280nmおよびそれ以上の波長域光を実
質的に含有する光線の照射光量が100000μw/cm2
以下、好ましくは10000μw/cm2以下、更に好まし
くは1000μw/cm2に抑制された人工光線の照射下
に培養することが好ましい。 本発明の方法に従い、微生物の培養系に照射さ
れる前記光線の強度は、厳密に制限されるもので
はなく、培養すべき微生物の種類やその他の培養
条件等により異なり、個々の場合における最適の
照射条件は当業者であれば小規模の実験を行なう
ことにより容易に決定しうるが、一般には、
400nm〜800nmの範囲の波長の可視光線領域光
の光量が100000μw/cm2以下、好ましくは10000〜
1μw/cm2、さらに好ましくは1000〜50μw/cm2
範囲内に調節された光線を照射するのが有利であ
る。また、280nm〜400nmの波長の紫外線領域
の光線はあまり強くない方が好ましく、通常該波
長範囲の紫外線の強度は一般に80000μw/cm2
下、好ましくは10000μw/cm2以下、さらに好まし
くは1000〜20μw/cm2とするのが望ましい。 また、本発明の方法に従い、微生物の培養系に
対して前記特定の光線を積極的に照射する具体的
方法としては、例えば、実質的に外光線から密閉
された系内(タンク内)において、少なくとも
280nmおよびそれ以上の波長域の光線を実質的
に含有する光線、好ましくは、280〜800nmの波
長域光を実質的に含有する人工光線(この場合、
人工光線源それ自体がかかる光質特性の光を発す
るものであつてもよく、或いは人工光線源を適当
なフイルターで覆うことにより照射される光が上
記のような光質特性をもつようにしてもよい)を
照射する方法;太陽又は自然光線の照射下に、少
なくとも280nmおよびそれ以上の波長域の光線
を実質的に含有する光線、好ましくは280〜800n
mの波長域光を実質的に含有する光を透過する、
透明な無色乃至有色の有機質又は無機質の被覆材
(例えば、紫外線吸収剤を配合した合成樹脂フイ
ルム)により被覆した条件下に培養を行なう方
法;並びに上記両方法の組合わせ等が考えられ
る。 本発明の方法に従がい上記特定波長域光を実質
的に含有する光線の有機酸生産性微生物に対する
照射開始時期は、該微生物培養系内に於いて、該
微生物の対数増殖期が好ましい。該微生物は、培
養系内に植菌されると、直ちに急激なる増殖は行
なわず、誘導期を経過した後に、急速に増殖を行
う対数増殖期となる。対数増殖期以降の、該微生
物は、系内の栄養源の枯渇に伴ない定常期を経
て、減数、死滅する。本発明によれば、上記特定
波長域光を実質的に含有する光線の照射開始は、
対数増殖期、好ましくは、対数増殖期の前期さら
に好ましくは、中期である。また、上記特定の波
長域光を実質的に含有する光線を照射する期間と
しては、前期の照射開始時点より発酵が終了する
時点まで、あるいは発酵がある過程に達する時点
まで等あげられるが、好ましくは発酵が終了する
時点までである。 なお、照射形式としては、続けて照射を行う連
続照射法、照射と暗黒とを交互にくり返す間欠照
射法、およびこれらの組み合せ法等があり、適宜
選択することが出来る。 本発明でいう[Xnmおそびそれ以上の波長域
の光線を実質的に含有する」とは照射する全光線
量のうち、Xnm未満の波長域の紫外線が完全に
存在しないことのみならず、該紫外線が本発明の
培養に悪影響を及ぼさない程度の範囲で少量含有
していても支障はないことを意味する。 また、本発明でいう「Y〜Znmの波長域光を
実質的に含有する」とは、照射する全光線量のう
ち、Y〜Znmの波長域光が100%の場合のみなら
ず、60%以上、好ましくは、80%以上更に好まし
くは90%以上である。 本発明の方法に従う有機酸生産性微生物の培養
は、上記特定の光線の照射下に行なうという条件
を除けば、従来から行なわれている条件と全く同
様の条件下に行なうことができる。例えば、有機
酸生産性微生物を適当な栄養培地中で液体培養又
は固体培養することにより行うことができる。そ
の際の培地の栄養源、窒素源及び無機塩類等は、
使用する微生物や培養手段に応じて適宜変更選択
されるが、微生物の培養に敵常用いられるものが
広く使用される。炭素源としては、同化可能な炭
素化合物であればよく、例えばブドウ糖、シヨ
糖、乳糖、麦芽糖、澱粉、デキストリン、糖密、
グリセリン、炭化水素、エチルアルコール、メチ
ルアルコール、酢酸などが使用される。また、窒
素源としては、使用可能な窒素化合物であればよ
く、例えばコーン・スチーブ・リカー、大豆粉、
綿実油、小麦グルテン、ペプトン、肉エキス、酵
母エキス、酵母、カゼイン加水分解物、大豆タン
パク加水分解物、アンモニウム塩、硝酸塩、など
が使用される。その他無機塩としては例えば、リ
ン酸塩、マグネシウム、カルシウム、カリウム、
ナトリウム、亜鉛、鉄、マンガンなどの塩類が、
さらに必要に応じてアミノ酸類、ビタミン類、有
機酸類、核酸関連物質、発酵原料となる前駆体な
どが使用される。 培養温度および培養時間は、使用する微生物に
よつても多少異なるものであつて、その微生物が
充分発育し得る範囲内で適宜変更することができ
るが一般に、例えば細菌の場合は約25〜37℃程
度、糸状菌、酵母菌、担子菌の場合は約20〜26℃
程度、放線菌類の場合は約26〜32℃程度で培養す
ることがよい。 更に具体的な培養条件は、個々の微生物によつ
て異なるが、例えば、山口辰良、山口和夫著、最
新応用微生物学入門、(昭和52年7月1日、1版
9刷発行)技報堂出版(株)第310〜322頁、鮫島広
年、奈良高編著者、微生物とその応用−全6巻、
微生物と発酵生産(昭和54年4月25日、初版1
刷発行)共立出版(株)第186〜192頁、木下祝郎著、
新版発酵工業(昭和52年7月20日、発行)大日本
図書(株)第159〜182頁、及び日本化学学会編、実験
化学講座25生物化学(昭和33年9月25日発行)
丸善(株)第141〜171等に、開示された培養条件を用
いて行うことができる。 更に詳しくは、クエン酸の生産では、例えば特
許公告第50−16879号、同50−16436号、同51−
45673号、同51−21073号、同51−6751号、同51−
34474号、同51−44195号、同53−7514号、同53−
8797号、同53−19676号等の明細書、及びL−リ
ンゴ酸は、例えば特許公報第53−24515号同53−
31955号及び同53−43590号等開示された培養条件
を用いて行うことができる。 本発明において、上記光質条件下で培養を行う
際に使用する資材としては、上記の光線透過特性
を有するものであれば、その材質等は特に制限さ
れるものではなく、どのようなタイプの被覆材で
も使用することができる。そしてかかる資材は通
常無機質又は有機質のフイルム、板、その他の成
形体から成ることができる。しかして、例えば無
機質フイルム又は板としては、典型的には染料又
は顔料(例:エメラルドグリーン)を配合したガ
ラス板、一般的な紫外線吸収剤を含有する合成樹
脂膜を塗布又は積層したガラス板およびガラスフ
イルター等が挙げられ、また、有機質フイルム又
は板としては、特に紫外線吸収剤を塗布又は含有
せしめた合成樹脂フイルム又は板が好適である。 この成形に使用しうる樹脂としては、後述する
熱可塑性樹脂の他、例えば、メラミン樹脂、フエ
ノール樹脂、エポキシ樹脂、シリコーン樹脂、尿
素樹脂、アルキツド樹脂、アリルフタレート樹脂
等の熱硬化性樹脂もまた用いることができる。 本発明に使用し得る透明フイルム又は板は、例
えば通常のフイルム形成性熱可塑性樹脂に適当な
紫外線吸収剤を配合し、フイルム又は板に成形す
ることにより製造することができる。 使用し得るフイルム成形性熱可塑性合成樹脂と
しては、例えばポリ塩化ビニル、ポリ塩化ビニリ
デン、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリスチ
レン、ポリエステル、ポリアミド、ポリカーボネ
ート、ポリメチルメタクリレート、ポリアクリレ
ート、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール、
含フツ素樹脂、セルロース系樹脂、ABS樹脂等、
又はこれら重合体を主体(好ましくは50重量%以
上)とする共重合体もしくはブレンド物が包含さ
れ、特に耐光性、強度、光線透過性の理由からポ
リ塩化ビニル、ポリエチレン、ポリプロピレン、
ポリエステル、含フツソ系樹脂、セルロース系樹
脂及びポリカーボネートが好適である。 本発明に使用し得る人工光源として、上記した
特定波長域の光線を放射する光源であれば、いづ
れものでも使用できる。そして、かかる光源とし
ては例えば、螢光灯、水銀灯、陽光ランプ、一般
電球、投光用電球、特殊電球(東芝ランプカタロ
グより、東芝電材株式会社)等がある。更に具体
的には、螢光灯〔( )内は、商品名を示す。〕と
して、日照灯(FL40SW−E/M、東芝)、プラ
ントルクス(FL40B/NL、東芝)、フイツシユ
ルクス(FL40SBRF/NL、東芝)、青色
(FL40B/NL、東芝)、青白色(FL40BW/NL、
東芝)、白色(FL40SD/NL、東芝)、昼光色
(FL40SD/NL、東芝)、デラツクス(FL40SW
−DL−X/NL、東芝)、温白色(FL40SW/
NL、FL40SW−A/NL、東芝)、葉たばこ用
6100〓、(FL40SRD−SDL6100〓、東芝)、写真
撮影用(FL40SD−SDL−CP/NL、東芝)、ブ
ラツクライト螢光ランプ(FL40SBL−B松下)、
健康線用螢光灯(FL20S−E松下)、螢光ケミカ
ルランプ(FL20S−BL松下)、陽光ランプ
(D125、D250など、東芝)、高演色性螢光灯
(FL20SW−EDL50K、東芝)及び捕虫用螢光灯
(FL20SBA−37K、東芝)等がある。 以上述べた本発明の方法に従えば、醗酵法によ
る有機酸の生産において、特定の光質条件下に微
生物を培養することにより、有機酸の生産が大い
に促進され、医薬、食品等の分野に資する所極め
て甚大である。 次に実施例を挙げて、本発明をさらに説明す
る。 実施例1、比較例及び17 マルト・エキストラクト・ブロス(Difco社
製)溶液100mlを500ml三角フラスコに分注し、加
圧減菌後、あらかじめマルツ・エキストラクト・
アガー(Difco社製)スラントに植継いでおいた
L−リンゴ酸生産性微生物キヤンデイダ・プルン
プテイー(Candida brumptii IFO0731)を1白
金耳植菌し、培養温度30℃、振とう回転数200
回/分、暗黒条件下で36時間前培養した。 予め、表−1から成る水溶液を調製しておき、
その水溶液20mlをハリオガラス製の500ml坂口フ
ラスコに分注し、110℃、10分間減菌後、上記前
培養菌体浮遊液2mlを植菌し、培養温度30℃、振
とう回転数200回/分、暗黒条件下で、本培養を
行つた。
【表】 * 培養液1当たりの組
成量
本培養開始より24時間目に、菌体の増殖が対数
増殖期の中期に達していることを生菌数により確
認したので、表−2、図−1及び図−2に示した
280〜360nm及び300〜800nm波長域光を発光す
る螢光灯を設置してある振とう培養機(培養温度
30℃、振とう回転数200回/分)に、培養フラス
コ10本を移し、培養を継続した。なお、残つた10
本の培養フラスコについてはそのまま暗黒培養を
続けた。培養時間は培養開始より120時間とし、
光照射区では連続照射培養を行つた。さらに、本
培養開始当初から実施例1と同様な光線照射条件
の下で培養を行つた(比較例17)それらの結果を
表−3に示した。培養結果(生成量)は各区の培
養フラスコ(10本)で得られた値の平均値であ
る。
【表】
【表】 実施例2、3、比較例2、3 表−4に示した成分組成を有する培地を前培地
及び本培地に用いて、コハク酸生産性微生物キヤ
ンデイダ・ブルンプテイー(Candida brumptii
IFO0731)及びキヤンデイダ・リポリテイカ
(Candida lipolytica IFO1195)をそれぞれ実施
例1、比較例1と同一の方法で培養した。但し、
前培養は48時間とし、本培養は168時間とした。
その培養結果を表−5に示した。
【表】
【表】 実施例4、比較例4 YMブロス(Difco0711)溶液を前培地とし、
表−6に示した本培地を用いて、フマール酸生産
性微生物キヤンデイダ・ハイドロカーボフマリカ
(Candida hydrocarbofumarica ATCC28532)
を実施例1、比較例1と同一の方法で培養した。
但し、前培養は48時間とし、本培養は168時間と
した。その培養結果を表−7に示した
【表】
【表】 実施例5、比較例5 表−8及び表−9に示した組成を有する前培地
及び本培地を用いて、イタコン酸生産性微生物ア
スペルギウス・テレウス(Aspergillus terreus
ATCC10020)を実施例1、比較例1と同一の方
法で培養した。但し、本培地の量は100ml/500ml
坂口フラスコとし、そこに5mlの前培養菌体浮遊
液を植菌した。また、培養温度は本培養のみ36
℃、培養時間は前培養48時間、本培養168時間と
し、光照射区では培養72時間目から光照射培養を
開始した。
【表】
【表】 その培養結果を表−10に示した。
【表】 実施例6、比較例6 グルコース1.0%、コーン・ステイーブ・リカ
ー0.5%、NaCl0.1%、及びCaCO30.25%から成る
培地を試験管に1mlとり、121℃下で10分間滅菌
した。予めYGCメデイウム(ATCC菌株カタロ
グ)スラントに植継いでおいた2,5−ジケトグ
ルコン酸生産性微生物アセトバクター・フラグム
(Acetobacter fragum ATCC21409)を、この
液体培地に1白金耳接種し、30℃の暗黒条件下で
72時間静置培養した。次に、この静置培養液2ml
を滅菌済の同じ組成の培養液100mlの入つた坂口
フラスコに添加し、30℃の暗黒条件下、振とう回
転数200回/分で18時間振とう培養した。 こうして得られた前培養菌体浮遊液を表−11に
示した組成を有する本培地50mlの入つた坂口フラ
スコ(ハリオガラス製)に、各々5mlずつ植菌
し、30℃の暗黒条件下、振とう回転数200回/分
で実施例1、比較例1と同様に本培養を行つた。
但し、本培養は60時間とし、光照射区では培養7
時間目から光照射培養を開始した。その培養結果
を表−12に示した。
【表】
【表】 ※ グルコースに基づく収率
実施例7、比較例7 グルコース0.5%及びコーン・ステイーブ・リ
カー1.0%から成る水溶液(PH7.0)100mlの入つ
た500ml坂口フラスコを滅菌、冷却後、L(+)−
酒石酸生産性(シス・エポキシコハク酸より生
成)微生物アシネトバクター・タータロゲネス
(Acinetobacter tartarogenes ATCC31105)を
1白金耳接種し、30℃の暗黒条件下、振とう回転
数200回/分で24時間振とう培養した。こうして
得られた前培養菌体浮遊液5mlを、コーン・ステ
イーブ・リカー0.2%、NH4NO30.1%、
K2HPO40.2%、MgSO4・7H2O0.05%、及び
FeSO4・7H2O0.001%から成る本培地50ml(PH
7.0)を含む500ml三角フラスコ(滅菌済)に植菌
し、同時にシス・エポキシコハク酸カルシウムを
浮遊酸として30%の濃度になるように添加し、30
℃の暗黒条件下、振とう回転数200回/分で実施
例1、比較例1と同様に本培養を行つた。但し、
本培養は48時間とし、光照射区では培養7時間目
から光照射培養を開始した。その結果を表−13に
示した。
【表】 %としたモル収率
実施例8、9、比較例8、9 表−14及び表−15に示した前培地及び本培地を
用いて、2−ケト−L−グロン酸生産性(2,5
−ジケト−D−グルコン酸あるいはその塩類より
生成)微生物ブレビバクテリウム・ケトソレダク
タム(Brevibacterium ketosoreductum
ATCC21914)及びシユードモナス・タロロラフ
イス(Pseudomonas chlororaphis ATCC9446)
を実施例1、比較例1と同一の方法で、それぞれ
別々に培養した。但し、前培養は24時間、本培養
は72時間とし、光照射区では培養7時間目から光
照射培養を開始した。その培養結果を表−16に示
した。
【表】
【表】
【表】 実施例10〜12、比較例10〜12 前記表−14及び表−17に示した前培地及び本培
地を用いて、ピルビン酸生産性微生物ブレビバク
テリウム・ブタニカム(Brevibacterium
butanicum ATCC21196)、アルスロバクター、
パラフイネウス(Arthrobacter paraffjneus
ATCC19064)、及びコリネバクテリウム・アルカ
ナム(Corynebacterium alkanum
ATCC21194)を実施例1、比較例1と同一の方
法で、それぞれ別々に培養を行つた。但し、前培
養は24時間、本培養は96時間とし、光照射区では
培養7時間目から光照射培養を開始した。その培
養結果を表−18に示した。
【表】
【表】 実施例13、比較例13 n−パラフイン(C12〜C15の混合物)10%、
NH4NO30.1%、MgSO40.02%、KH2PO40.03%、
Na2HPO4・12H2O0.03%、CaCO34%及び水道水
より成る培地(PH5.0)に、クエン酸生産性微生
物ペニシリウム・シエルメシナム(Penicillium
chermesinum ATCC20325)の胞子懸濁液を接
種し、28℃の暗黒条件下で振とう培養した。培養
時間は14日間とし、光照射区では培養4日目より
光照射培養を開始した。その培養結果を表−19に
示した。
【表】 実施例14、比較例14 前記表−14及び表−20に示した前培地及び本培
地を用いて、α−ケトグルタール酸生産性微生物
ブレビバクテリウム・ケトグルタミカム
(Brevibacterium ketoglutamicum
ATCC15587)を実施例1、比較例1と同一の方
法で培養した。 但し、前培養は24時間、本培養は96時間とし、
光照射区では培養7時間目より光照射培養を開始
した。又、本培養中の培地PHはアンモニア水のフ
イード法によりPH6.0〜8.0の範囲に調節した。
【表】 その培養結果を表−21に示した。
【表】 実施例15、比較例15 乳酸生産性微生物ラクトバチルス・デルブルキ
(Lactobacillus delbiu¨ckii IFO3202)を少量の
CaCO3を添加したグルコース1.5%、酵母エキス
0.8%、寒天1.5%からなる培地(PH6.8)に37℃で
2日間穿刺培養し、その1白金耳を表−22の液体
培地100mlに接種し、37℃で18時間前培養した。 無菌的に遠心分離(4000rpm、15分)により集
菌し、滅菌生理食塩水で洗浄したのち、100mlの
滅菌食塩水に浮遊した。予め、表−23から成る水
溶液を調製しておき、その水溶液100mlをパイレ
ツクスガラス製の500ml三角フラスコに分注し、
滅菌・冷却後、上記前培養菌体浮遊液5mlを植菌
し、別殺菌しておいてCaCO35gを添加し、7日
間静置培養した。但し、光照射区では、本培養開
始より18時間目に、表−2、図−1、及び図−2
に示した280〜360nm及び300〜800nmの波長域光
を放射する螢光灯下に移し、培養を継続した。な
お培養中は時々フラスコを振とうした。その培養
結果を表−24に示した。
【表】
【表】
【表】 実施例16、比較例16 ソルビトール5%、酵母エキス1%、寒天2%
からなる斜面寒天培地に培養した5−ケトグルコ
ン酸生産性微生物グルコノバクター・オキシダン
ス・亜種サブオキシダンス(アセトバクター・サ
ブオキシダンス)〔Gluconobacter oxydans
subsp.suboxydans(Acetobacter suboxydans)
ATCC23773〕をソルビトール5%、酵母エキス
1%の水溶液5mlに一白金耳植菌し、27℃で48時
間前培養した。 これを更に表−25からなる水溶液50mlに無菌的
に加えて、30℃で48時間振とう培養した。 予め、表−26から成る水溶液を調製しておき、
その水溶液50mlをハリオガラス製の500ml坂口フ
ラスコに分注し、滅菌後、上記前培養菌体浮遊液
1mlを植菌し、実施例1、比較例1と同様の方法
で光照射による培養を行なつた。但し、本培養期
間は40時間であり、光照射開始は菌体の増殖が対
数増殖期の中期に達した時期、すなわち本培養開
始後14時間目に行なつた。 その培養結果を表−27に示した。
【表】
【表】
【表】 【図面の簡単な説明】
第1図及び第2図は実施例及び比較例で使用し
た照射光の波長別比エネルギー曲線である。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1 有機酸生産性微生物を光線に照射しつつ、培
    養し、有機酸を生産する方法において、 前記微生物が、有機酸を産する能力を有する
    細菌類、放線菌類及び菌類から選ばれた微生物
    であり、 前記光線の照射開始時期が前記培養系内の前
    記微生物の対数増殖期以降であり、かつ、 前記光線が少なくとも280nmおよびそれ以
    上の波長域の光線を実質的に含有する光線であ
    る、 ことを特徴とする有機酸生産性微生物の培養方
    法。 2 該培養を少なくとも280〜800nmの波長域光
    を実質的に含有する光線の照射下に行なう特許請
    求の範囲第1項記載の方法。 3 該光線の照射強度が100000〜1μW/cm2の範
    囲である特許請求の範囲第1〜2項いずれか記載
    の方法。 4 該光線が、人工光線及び/又は自然光線であ
    る特許請求の範囲第1〜3項いずれか記載の方
    法。 5 該有機酸が、乳酸、クエン酸、α−ケトグル
    タール酸、コハク酸、l−リンゴ酸、フマール
    酸、イタコン酸、2,5−ジケトグルコン酸、酒
    石酸、ピルビン酸、2−ケトグロン酸、及び5−
    ケトグルコン酸である特許請求の範囲第1〜4項
    いずれか記載の方法。 6 該微生物が、アセトバクター
    (Acetobacter)属、グルコノバクター
    (Gluconobacter)属、アルスロバクター
    (Arthrobacter)属、シユードモナス
    (Pseudomonas)属、ラクトバチルス
    (Lactobacillus)属、ブレビバクテリウム
    (Brevibacteriun)属、コリネバクテリウム
    (Corynebacterinm)属、アシネトバクター
    (Acinetobacter)属、キヤンデイダ(Candida)
    属、アスペルギルス(Aspergillus)属、及びペ
    ニシリウム(Penicillum)属である特許請求の範
    囲第1項記載の方法。
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