JPH04501516A - 移植組織 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、強度、開存性、感染抵抗、非免疫原生、非血栓発生性に加えて、動脈 瘤形成に対する抵抗についても、多くの他の合成グラフト物質と比較して優れた 性質を示す新規な組織グラフト・コンポジションに関する。本発明は、特に、小 腸の粘膜軍組織および基底粘膜部を含む組織グラフト・コンポジションに関し、 さらにこのようなコンポジションの調製および使用に関するものである。

発明の背景 組織グラフト材料は、今日、かなりの臨床意義および経済的意義を得ている。

１９８６年には、グラフトのためのみに（冠動脈バイパスグラフトは除く）１億 ３０００万ドルが支払われたと見積られている。血管グラフト術に対する成功率 は、他のほとんどの外科療法についての成功率と比較して非常に低い。例えば、 ５年積算開存性が５０％は、小口径グラフトの場合、非常に良い成績と考えられ ている。このような低い成功率は、大部分は、現在、臨床に利用されている移植 材料についての１つ以上の物理的、機能的欠陥に因るものである。

組織グラフトとして適当な材料の同定は特に難しいが、それは、このような材料 は、種々の全く異なる特性を有しなければならないからである。例えば、グラフ ト材料は、連続的な応力の下で機械的な安定性のみならず、毛細血管発生（Ｃａ ｐｉｌｌａｒｉｚａｔｉｏｎ）に対する十分な多孔性を有するとともに、ホスト 組織と同様な伸展性（ｃｏｍｐｌ　１ａｎｃｅ）を、さらに、（非血栓発生性で あるように）高い陰性ゼタ電位（ｈｉｇｈ　ｎｅｇａｔｉｖｅ　Ｚｅｔａ　ｐ。

ｔｅｎｔｉａｌｓ）を有しなければならない。組織グラフト材料は、その上、非 アレルギー性で、非発癌性物質であるとともに、好ましくは、製造費が安くて済 まされるべきである。

上述の所要の特性の全てを有する組織グラフト材料は、例えあるとしても、非常 に僅かでしか無い。血管グラフトの分野における研究と開発についての文献報告 からは、現在知られているグラフト材料に共通な欠陥を克服すべく着実な努力が 絶えずなされていることが読み取れる。

合成材料および０原性（自家移植）材料の両方とも、グラフトとして用いられて きた。合成品の中で、延伸ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）が、グラフ ト材料、特に、細い血管バイパス術として、一般に用いられている。しがしなが ら、延伸ＰＴＦＥは、新生内膜の過形成およびグラフトの後期血栓症にががり易 い（例えば、大腿腰高動脈のバイパスの場合、６年間の開存率が約５０％）。

ＰＴＦＥグラフトは、静脈循環系に用いられた場合、成功率の非常に低いことが 報告されている。

他の合成材料（ダクロン（登録商標））は、しばしば大口径血管（例えば、腎下 大動脈血管）移植術に用いられる。しカルながら、編成ダクロンハ比較的高い多 孔性を有するとともに、移植に先だって、広範囲の出血を避けるために、プリク ロット処理を施さなければならない。プリクロット（ｐｒｅｃｌｏｔｔｉｎｇ） 処理は、必ずしも実用的ではないか、或は成功するとは限らない。組成ダクロン （これは編成ダクロンに比べて多孔性が低い）は、従順性は正常な大動脈で見出 だされるそれの２０％のみしか示さない。なお、ダクロン製グラフトは、血流が 比較的ゆっくりである小口径の動脈や静脈内では、十分に機能しない。

移植組織材料としての合成品の利用に関する更に重要な問題の一つは、合成材料 の感染抵抗が低いということである。合成血管の移植後の感染率は、死亡率６６ ％と関連している。合成材料は、これ等の狭い材料間に微生物を庇護する傾向が あり、従って、感染した時には、抗生物質療法に対して極めて抵抗が大きい。

感染した合成血管の外移植の回避は、はとんど不可能である。

ごく最近には、合成の皮膚および血管の調製は、生きたヒト細胞を利用するのに 匹敵すると、研究者達によりて報告されている。（米国特許第４，６０４．３４ ６；４，５４６，５００．４，５３９，７１６；４，４８５．０９７；および４ ．４８５．０９６号を参照） ０原性の材料の中で、伏在静脈、ヒトのへそ静脈、反転小腸、撓骨動脈が、すべ て用いられるようになっているが、これら各材料は、また重大な欠点も有してい る。伏在静脈は、そのサイズから一定の移植術に適さない場合とか、病気にょる 損傷めために利用できない場合もある。さらに、伏在静脈には、静脈瘤様腫脹が あれば受け容れられず、また“動脈化”に続いて、加速したアテローム発生を被 るかもしれない。へその静脈および反転小腸の両方とも、早期の血栓症や後期動 脈瘤形成に悩まされる。なお、撓骨動脈の利用は限定されるが、それは取り出す ことが困難なことと、並びにその移植後に劣化するがもしれないがらである。

それ故、本発明の目的は、臨床に現在使用されている多くの組織グラフト材料と 関連する欠点の多くを克服した組織グラフト材料を提供することである。

本発明の他の目的は、小腸のセクションがら新規な組織グラフト材料を調製する ための方法を提供することである。

さらに、本発明の他の目的は、新規な多目的組織グラフト材料を自家移植、同種 移植、異種移植に適用するための方法を提供することである。

さらに、本発明の他の目的は、新規な組織グラフト・コンポジションを血管取り 替えのために用いる方法を提供することである。

図面の簡単な説明 第１図は、小腸のセクションの横断面図である。

本発明は、主として、温血を椎動物の小腸セグメントの粘膜上組織を含む組織グ ラフト・コンポジションに関する。この粘膜上組織は、小腸セグメントの前層お よび少なくとも粘膜内腔部から離層されたもので、この組織グラフト會コンポジ ションは、血管の自家グラフトおよび同種グラフトとして適用する場合に、非常 に優れた機能的な特性を有することが認められているが、他方、本発明の組織グ ラフト・コンポジションは血管や他の組織の両グラフトへの適用における異種移 植としても広い使用が見いだされるだろうということが予期される。本出願人は 本発明の組織グラフト・コンポジションが、それを組織グラフトとしての適用に 特に適応した幾つかの物理的特性および生物特性を示すことを発見した。

本発明の好ましい実施態様において、組織グラフト材料は、小腸、特に空腸、す なわち−二指腸と回腸との間にて延びる小腸部分のセグメントから薄片とじて取 り出した粘膜上組織および基底粘膜組織を含む。小腸は、本発明に従い離層法（ ｄｅｌａｍｉｎａｔｉｏｎ）によりグラフト材料を取り出す以前は、幾つかの別 々の組織層で構成されている。第１図は、小腸の横断面図で、小腸壁を構成する 個々の組織層を外から内へＡからＧでそれぞれ開示した。最も外側の組織層Ａは 、腸間膜組織で、これは特に、理解し易いように、明白に区別された層として描 いである。普通、これ等組織は、別々の層として存在することはなく、むしろ不 連続組織セグメントとして現れる。ＢとＣは、それぞれ莱膜層および前層を開示 する。Ｄは粘膜上組織層を開示するが、これは不規則な、膠原性結合組織で、た びたび肥満細胞を庇護している。これらの肥満細胞に由来するヘパリンは、その 移植材料が血栓を早期に発生しないことと、少なくとも部分的に関与すると考え られている。

層Ｅ、ＦおよびＧは、一括して、いわゆる粘膜として示す。層Ｅは、粘膜篩板と して知られる平滑筋細胞層である。層Ｆの緻密層は、無細胞の膠原繊維およびエ ラスチン線維から成る。層Ｇは、上皮板粘膜（ｌａｍｉｎａ　ｅｐｉｔｈｅｔｉ ａｌｉｓ　ｍｕｃｏｓａ）および固有層から成っており、これ等は共に、かつ絨 毛突起、すなわち一連の指状粘膜派生物、に鹸列されている。

本発明の移植材料を調製するための腸組織セグメントの処理法について以下に詳 述するが、これに従って行った組織学検査から、上皮板粘膜および固有層とが、 前層および莱膜層の場合と同様に、取り出せることが明らかになっている。かく して、本発明の好ましい組織材料は、粘膜下紐織りを、粘膜の基底部、特に、粘 膜篩板Ｅおよび緻密層Ｆとともに含むものである。上述した各層は、以下におい ては一括して小腸粘膜軍組織（Ｓ　Ｉ　Ｓ）と呼ぶことにする。

本発明によるＳＩＳ自家グラフトは、例えば、中枢線の開腹手術切開に続いて、 自家の近位空腸セグメントを最初に切除することによって調製され得る。次いで 、切除された空腸セグメントが、生理食塩水で浸した手術用ガーゼで包まれる。

腸腸吻合の完了と同時に、切り取った腸セグメントは、以下に記述する本発明の 方法に従って調製され、組織グラフト材料として使用される。同種グラフトの場 合も、同じ種の器官／組織提供者より取り出した腸組織から同様に調製される。

異種移植は、例えば、署殺場の作業で犠牲にした動物がら取り回収したネコ、ブ タあるいはヴシの小腸組織から調製される。しかし、今日に至って、異なる種が ら取り出した小腸組織には、形態上に微小の差のあることが見出だされた。実際 、本発明によるヒトのグラフト組織の組織学的外観は、イヌのそれと、はとんど 同じであることが見出だされている。唯一の認識可能な形態上の相違は、ヒトの 組織における緻密層の密度がわずかに低いことであった。

本発明による組織グラフト材料は、外層（紫膜および前層、すなわち第１図のＢ 層および０層を含む）および内層（粘膜、すなわち第１図のＥ層から６層の少な くとも内腔部、すなわち６層を含む）とを取り除くために、腸組織を擦りむくこ とによって調製される。軽く擦りむくと言う条件下において、粘膜は、緻密層Ｆ と固有層Ｇとの間で薄い層に層離されている。特に、例えば、Ａｄｓｏｎ−Ｂｒ ｏｗｎ鉗子およびＭｅｔｚｅｎｂａｕｍ挾みを用いて、腸セグメントから若干腸 間膜組織を除去した後に、紫膜および前層（外組織層）が、縦方向のワイピング 運動（ｗｉｐｉｎｇ　ｍｏｔｉｏｎ）を利用した擦りむきによって、手術用メス と湿らせたガーゼを用いて、腸セグメントから離層される。この腸セグメントを 裏返した後、粘膜の内腔部が、同一のワイピング運動を用いて下部組織から離層 される。粘膜上組織に穿孔が生じないように注意が必要である。グラフト表面上 に残っている離層された層からの幾らかの組織“タッグ″が除去される。任意に 、腸セグメントを、まず、裏返し、次いで内腔層から剥ぎ取り、さらに紫膜およ び前層を除去するために、そのオリジナル方向に再挿入される。このグラフト材 料は、白みかかった半透明な、厚さが約０．　１層ｍの組織のチューブで、典型 的には、粘膜篩板および緻密層の付着した粘膜上組織からなっている。血管グラ フトを調製するためには、この調製されたグラフトは、そのオリジナル方向に裏 返され、かくして緻密層がグラフトの内腔表面として役立つ。

調製されたグラフト材料は、典型的には、食塩水で濯ぎ、そして１０％硫酸ネオ マイシン溶液内に約２０分間処理し、かくして、グラフト材料として使用される ようになる。このグラフトは、組織グラフト移植に普通に用いられている通常の 手術法により適用される。非血管組織グラフトに適用する場合には、チューブ状 グラフト材料を縦方向に切断し、そしてロールアウトして組織の“ｐｉｔｃｈ” を形成することが可能である。実際上、上述した全組織の離層方法が、腸セグメ ントを縦方向に切断し、そして前グラフト・パッチを形成するようにそれを“Ｕ ｎｒａｌｌｉｎｇ”することによって調製された腸組織の°パッチ”で行われ得 る。調製されたグラフト組織バッチが、例えば、皮膚グラフト材料として、また は他の体組織欠陥の修理のために利用され得ることで、本発明によるグラフト・ コンポジションの物理的および機能的特性を有する組織グラフト・バッチを外科 的に適用するのに役立つ。

欠陥グラフトとしての使用のために、このグラフトの口径は、被移植側の口径と ほぼ同じであるべである。これは、被移植側の血管とほぼ同じ口径を有するシリ ンダを限定するように組織グラフトを操作し、そしてこの組織グラフトを縦方向 に縫合または固定し、かくして上述の血管グラフトを形成することによって遂行 される。このようにして、例えば、血管グラフトは、被移植側の血管と等しい外 径を有する無菌ガラス棒を洗濯し、そしてこのガラス棒をグラフトの内腔内に導 入することによって調製され得る。次いで、余分の組織を集め、そして所要の内 腔口径が、除去グラフトを長手方向に縫合しく例えば、二つの連続縫合線または 単純な中断縫合線を用いて）、或は、技術的に認められる（ａｒｔ−ｒｅｃ。

ｇｎｉｚｅｄ）組織固定法を用いることによって、得られる。

本発明の目的によってＳＩＳコンポジションは、組織グラフト材料として強く要 望されている機械的特性、すなわち低い孔隙率（ｐｏｒｏｓｉｔｙ　１ｎｄｅＸ ）％高い伸展性および高い破裂圧点等を有している。孔隙率について言うと、当 業者が抱くであろう見解によれば、組織グラフト材料は、手術に起因する出血を 防止できるだけの十分に低い孔隙率であること、しがちグラフト材料を通じて新 しく発生したｖａｓａ　ｖａｓｏｒｕｍ　（脈管の脈管）の伸展が可能で、かつ 新内膜および内腔表面に栄養補給を可能とするだけの十分に高い孔隙率でなけれ ばならないことである。グラフト材料の孔隙率は、典型的には、１２０ｍｉＨｇ 柱の圧力にてＣ■２当り、毎分通過する水のｍｌ数にて表現される。ＳＩＳグラ フト材料の孔隙率は１０であって、現在この分野で知られている他のグラフト材 料と比較して非常に小さい。（例えば、織成りａｃｒｏｎ　（登録商標）の孔隙 率は５０である）。この低い孔隙率にもかかわらず、ＳＩＳはなお、ＳＩＳグラ フト内に毛細血管が新生されるのに十分に透過性である。ＳＩＳフンポジション を血管グラフトとでて適用した場合には、グラフト壁内において、術後４日にし て早くも内腔表面にまで延びる血液の充填した毛細血管の形成が可能である。

グラフトの伸展性に関しては、この分野で、伸展性と開存性との間に直接関係の 存在することが報告されている。グラフト材料は、理想的には、少なくとも、そ れが取って代わる組織と同様な伸展性を有すべきである。ＳＩＳグラフト材料の 縦方向における伸展性は、簡単な引張りテストによって測定される。初期のゲー ジ長さを、５．　Ｏｃ■間隔で付した２個のインク・マークによって形成した。

伸長および印加された力は、試験片に３２ｃ■／−Ｃ■／濁１０の引っ張り率で 負荷した場合と同様に測定し、次の結果を得た：ＳＩＳグラフトの伸展率：Ｃ− 長さ当り０．　０４５ｃｓ＋／Ｎ正常イヌの大動脈の伸展率：Ｃ■長さ当り０． ０１７ｃ置／Ｎかくして、ＳＩＳグラフト材料は、実際上、正常な大動脈と較べ て大きい伸展率を示す。これは、血管グラフトの分野において、従来法と比較し 有意な進歩である。現在入手し得る合成グラフトの全ては、自然動脈と比較して 、伸展率については１／３ないし１／１０で、これに比例して、血栓症になり易 い。この伸展性の不釣合いを補償する従来法は、隣接する０然動脈より大きい口 径のグラフト材料を使用することである。しかしながら、この方法は、通過の問 題を引き起こした。グラフト・セグメントを流れる血液の速度は、口径の大きい ほど遅くなる。

それ故、グラフト壁における剪断応力は小さくなる。このような条件下では、血 小板とフィブリンとの付着およびそれに続く血栓症とが一層発生し易い。対照的 に、ＳＩＳ材料はこのような高い伸展性を示すので、口径の等しいＳＩＳグラフ トは、このような問題を引き起こすこと無しに用いられ得る。

本発明のＳＩＳグラフト材料は、生理学的に遭遇するであろうものより十分に越 えた破裂圧を有することが見出された。破裂圧テストは、チューブ状ＳＩＳグラ フト・セグメントを２個の２５１１０径のシリンダに付着させ、次いでグラフト を窒素ガスで一定の流速で圧力をかけることによって行われた。二つの流速が用 いられたが、低い方の流速では、圧力は、最初、増大し、次いで低下し、それが らは、ガスがグラフト壁を通っての流出と流入とが平衡しながら恒常に経過する 。

高い方の流速では、圧力が直ちに約４００ｍｍＨｇの破裂条件にまで上昇するが 、これは、グラフト材料が正常な生理学的血管グラフトを利用した場合に遭遇す る連続脈圧に容易に抵抗し得ることを示す。

小腸の異なる三つの構造部分が、イヌの腎下火動脈のグラフトとして役立つがど うかを試験するため一連の実験を行った。第１実験では、グラフト材料として、 空腸の全層非反転セグメントで、無傷の腸間膜神経血管サプライまたは自由単離 セグメントのいずれかの付属したものが利用された。腸粘膜は、血液−グラフト ・インターフェースであった。この実験に用いた４匹のイヌはすべてグラフトセ グメントの血栓症と縫合線からの出血のために、術後１８時間内にて死んだ。

第２実験は、グラフトとして空腸の単離した反転セグメントで、血液−グラフト ・インターフェースとして役立つ紫膜の付属したものを利用し、２匹のイヌを用 いた。第１のイヌのグラフトは、術後４時間以内に血栓ができ、第２のイヌは、 近位吻合部位における急性出血のため術後４日日に死んだ。

第３実験は、グラフト材料として腸壁の一部のみの使用を試験した。０原性の上 空腸の自由セグメントを各イヌから取り出し、次いで粘膜の大部分は、メスの柄 でもって内腔表面を荒く掻き落すことによって除去した。次いで、同じ方法で、 紫膜および部層を除去した。腸セグメントの、荒っぽく見えるこの処理後に残る 組織は、粘膜下組織および基底粘膜の１００μ厚さセクションであった。次いで 、このグラフトを１５匹のイヌの腎下火動脈に移植し、著しい成功を見た。この 実験の結果は、以下に要約される。

１５匹の内の１３匹は、犠牲の時まで、グラフトが開存性を維持した。術後の４ 日から１年までの時期を変えて、１１匹を犠牲にし、検査したが、グラフトに感 染、動脈瘤の形成や血栓症の徴候は無かった。２匹は、金属性靭帯クリップの位 置違えおよびまずい吻合術を含む技術的原因から移植に失敗した。２匹は、この 本明細書の記述の時期まで生存しており、さらに長期間にわたり、グラフトの開 存性を監視している。

グラフトの開存性は、術後４日ないし７日内に、およびその後、６ないし８週毎 に陽性造船ラジオグラフィによって確認された。なお、グラフトの開存性は、臨 床的には、大腿動脈に強い脈があること、および後肢に浮腫が無いことを観察す ることによって確認した。

グラフトの開存性を維持した１１匹のイヌは、術後種々の時期（４，７，１０お よび１４日目星びに９．１１，１３．１７，２６．４４および５２週目）に犠牲 にした。犠牲直前には、これ等イヌについて、さらに血管造影図を撮り、グラフ トの開存性を確認し、並びに比較ラジオグラフを行い、グラフトの拡張、狭窄お よび動脈瘤形成を評価した。１１匹のイヌ全ては、内腔に異常な変化の起こった 証拠は何も無く、完全な開存性を示した。

これ等グラフトセグメントの病理学上からの総合評価からは、偶然に配列された 赤色や白色の領域を持つぴかぴかする内腔表面が確認され、そして血栓の形成が 広まっている証拠は無かった。グラフト壁と一緒になった、周囲の堅い結合組織 の蓄積があった。術後６力月前に検査した全てのイヌでは、グラフトの表面に内 皮細胞が成長している証拠は認められなかった。これ等グラフトの表面は、偏平 な、適度の密度および組織化された膠原層で覆われていた。

２６．４４および５２週目の標本について、組織病理学的検査にて、偏平化した “内皮様”細胞が密に組織化されたフィブリンの薄層（約５００μ）を部分的に 覆っているのが認められた。全体組織は血液充填毛細血管で浸潤されており、そ して初めのグラフト材料の外側境界は周囲の結合組織と区別できなかった。内腔 表面の走査電子顕微鏡検査では、偏平化した細胞で、内皮細胞とは異なり、伸展 した“偽足°を有する細胞の層を認めた。これ等グラフトセグメントの透過電子 顕微鏡の検査でも、内腔表面の内皮細胞による覆いの存在が示唆された。さらに 、免疫蛍光染色によって検出されるファクタＶＩ　Ｉ　Ｉ　：関係抗原からこれ 等グラフトの内腔表面細胞についての内皮Ｏｒｉｇｉｎが示唆される。グラフト 材料については、内皮細胞の存在を、それに由来する弛緩ファクタの存在をテス トすることによって検査した。グラフトの標本の表面にアセチルコリンを塗布し て、流出液を回収し、この流出液に内皮由来の弛緩ファクタの含有されることが 、ラット大動脈標本の平滑筋弛緩観察法によって認められた。

ＳＩＳグラフトに対して頭方向および末端方向における血圧、さらにその内部に おける血圧を犠牲にした１０匹の各イヌについて測定した。各イヌの３位置にて 測定した血圧は、全て、ＳＩＳグラフト材料の使用に起因する血流力学的副作用 の発生していないことを反映した値を示した。

全てのイヌにおいて、術前、術後１日目、その後数カ月にわたって時々、次の項 目：ヘマトクリット、プロトロンビン時間、活性化部分トロンボプラスチン時間 、血小板数、全血球算定および簡略血清化学プロフィール（Ａｂｂｒｅｖｉａｔ ｅｄ　ｓｅｒｕｍ　ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｐｒｏｆｉｌｅ）について血液検査を 行った。全ての犠牲時期において、上記の項目についての検査結果は、全てのイ ヌについて正常であることが認められた。上記のイヌは、術期間中、ヘパリンを 僅少（６００単位ＩＶ）投与されたが、術後の期間中は投与されなかった。凝固 テストでは、なんの変化も認められなかったが、血小板数は、イヌの凝固系が、 ヒトと比較して、比較的亢進性であることから見て、特に増えつつあった。

実施例　２．小口径動脈グラフトとしての小腸粘膜上組織この実施例には、１８ 匹のイヌを用い、大腿動脈および頚動脈の両方に、従って、合計３６個のグラフ トを用いた。３６個の内の３３個のグラフトが開存性を維持した。これ等のイヌ について、実施例１の場合に行ったように、同一の検査項目に関して測定を行い 、異常の無いことを確認した。なお、開存性および血管の口径を測定するのに、 ２次元超音波イメージングを用いた。

術後４日目に犠牲にしたイヌから取り出したグラフト組織について病理検査を行 い、内腔表面に血栓は認めれなかったが、軽度に狭窄した近位吻合を認めた。

組織学的検査によって、グラフト壁内にて血液が充填した毛細血管、すなわち感 染に対する自然の潜在的な生体防衛の早期存在が明らかになった。これ等イヌの ５匹は、継続評価のために、本明細書記述の時においてなお生存している。この 実施例における最長生存イヌは、現在のことろ、術後７力月である。

実施例　３．静脈グラフトとしての小腸粘膜上組織この実施例では、ＳＩＳグラ フトが、２匹のイヌの後大静脈内に、そして５匹の前大静脈（ヒトの上大静脈に 類似）内に置かれた。後大静脈グラフトは、１１日および１４日のみ、それぞれ 開存性のままであったが、病理検査により、グラフトの失敗が認められたが、こ れは下吻合部位が狭窄（隣接の自然の大静脈および近位う′ラフトの口径が１． ６ｍｓに対して、８ＩＩ■の口径）した技術的失敗に帰せられるものであった。

なお、両グラフトの内腔表面は、気密にバックされたフィブリンおよび未熟な膠 原性結合組織からなる非血栓性″ｐｓｅｕｄｏｅｎｔｈｅｌｉｕｍ”で覆われて いた。

前大静脈グラフトは、３匹の各イヌが、それぞれ術後７．１４および２１日に犠 牲にされるまで、開存性を維持した。この実験に用いたイヌの内の２匹は、本明 細書の記述の時に生存しており、術後７週目にてグラフトは開存していた。３匹 の全部のイヌにおいて、近位縫合線によって、早期血栓症が実証された。グラフ トのフラップが逆転され、そして血流の撹乱を惹起しつつあったが、しかし残り のグラフトは、非血栓性であった。さらに、総合病理組織検査により、上記グラ フトがぴかぴかした平滑な赤色表面で内張り、すなわち覆われており、その外観 は、実施例１および２における早期のグラフトと同じであった。

実施例　４．動脈同種グラフトとしての小腸粘膜上組織ＳＩＳを、イヌ大動脈の 大口径同種グラフトとして用いられた。この同種グラフトは、上述したものと同 様に調製され、大動脈同種グラフトの研究のために用いた。本明細書を記述した 時点においては、術後８週間に過ぎなかったが、グラフトには、血栓、感染また は動脈瘤形成の徴候は（血管造影図によって実証されるように）何も認められな かった。

実施例　５．動脈異種グラフトとしての小腸粘膜上組織ＳＩＳが、イヌの異種グ ラフトとＬ２て用いた。ネコから取り出した、ＳＩＳグラフトを上述した方法に て調製し、イヌに適用した。本明細書を記述した時点においては、実験動物は、 術後２週間であったが有害徴候は何も認められていない。

補正書の写しく翻訳文）提出書（特許法第１８４条の７第１項）平成３年１月１ １日

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. １．温血哺乳動物の小腸セグメントの粘膜下組織からなる組織グラフト・コンポ ジションにおいて、上記粘膜下組織が上記小腸セクションの筋層および少なくと も粘膜の内腔部とから離層されたことを特徴とする組織グラフト・コンポジショ ン。
2. ２．上記小腸セクションが空腸から切り取られることを特徴とする請求の範囲第 １項に記載の組織グラフト・コンポジション。
3. ３．上記粘膜下組織が、粘勝の粘膜筋板および緻密層とに付着したことを特徴と する請求の範囲第１項に記載の組織グラフト・コンポジション。
4. ４．上記小腸セクションが空腸から切り取られることを特徴とする請求の範囲第 ３項に記載の組織グラフト・コンポジション。
5. ５．小腸セグメントを擦りむくことによって漿膜、筋層および少なくとも粘膜の 内腔部を除去することからなる、小腸のセグメントから組織グラフト・コンポジ ションを調製する方法。
6. ６．上記小腸セグメントが空腸から切り取られることを特徴とする請求の範囲第 ５項に記載の方法。
7. ７．上記セグメントの粘膜下組織、隣接の粘膜筋板および緻密層の両層とから主 としてなるグラフト材料を得るように、全ての組織層を除去するために、上記セ グメントを擦りむくことを特徴とする請求の範囲第５項に記載の方法。
8. ８．腸セグメントを縦方向に切断して１枚のグラフト材料を形成する工程を更に 有することを特徴とする組織グラフト・コンポジションを調製するための請求の 範囲第５項に記載の方法。
9. ９．被移植側の血管とほぼ同じ口径を有する円筒を画成するために上記組織グラ フト・コンポジションを処理する工程と、上記組織グラフトを縦方向に縫合して 上記血管グラフトを形成する工程とを更に有することを特徴とする被移植側の血 管のための血管グラフトを調製するための請求の範囲第５項に記載の方法。
10. １０．上記小腸セグメントが空腸から切り取られることを特徴とする請求の範囲 第５項に記載の方法。