JPH04502146A - 医薬品として用いられるフェニルピロール化合物、その製造法及び用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 医薬品として用いられるフェニルピロール化合物、その製造法及び用途 本発明は、新規なフェニルピロール化合物、その製造法及びその有効成分として の、特に抗有糸分裂活性をもつ医薬としての、用途に関する。

本発明の目的は、第一に、チューブリン（ｔｕｂｕｌｉｎ　）に対するそれらの 反応性によって、そしてそれらの抗有糸分裂の特性の証明によって明らかにされ る、癌細胞と闘うのに有用な新しい化合物を提供することにある。

チューブリンは、二種のしっかりと結合した（ｃｌｏｓｅｌｙａｓｓｏｃｉａｆ ｅ＋１）サブユニットαとβからなる分子量１１０．０００〜１２０．０００ダ ルトンのオーダーの細胞蛋白である。これは、ヘリコイド（ｈｅｌｉｃｏｉｄ） の形態に集合すると、一般に微小管として知られている複雑な高分子構造の構築 を可能にする基本成分（ｂａｓｉｃ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ　）を構成するもので ある。

微小管は、実際上すべての真核細胞中に存在し、多くの細胞質の構造、すなわち 有糸分裂紡錘体、中心小体、鞭毛（ｆｌａｇｅｌｌａｅ　）　、染色糸、神経細 管などの形成に用いられる。この様に微小管は、まだすべて列挙されていないが 、細胞の生命（分裂、運動性、輸送、成長など）において、重要な役割を持って いる。チューブリンが集合することは、現在間らかにされていない制御を受ける 可逆的な動的機構である。

（豚の脳から）その蛋白質を抽出後、下記の変化する種々の物理化学的パラメー ターの効果の下で、インビトロ（ｉｎ−ｖＮｒｏ）でのチューブリンの集合や分 解の動きをモニターすることが可能である： ＝３７℃の温度にあげると起こり、ＧＴＰ、ポリカチオン、グリセロールなどの 存在によって促進される微小管の形態への重合、 一低温（４°Ｃ）によって引き起こされ、Ｃａ２＋イオンや過剰なＧＴＰ等によ って促進される脱重合。

多数の天然の物質が、特異性のあるチューブリンの受容体部位（＋ｅｃｅｐｊｏ ｒ　５ｉｔｅｓ）に結合できる。それらは、チューブリンの重合を阻害したり（ コルヒチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ポドフィロトキシン等）、又は 脱重合を阻害しくタキソール（ｌａｘｏｌ）　、ラジニラム（ｒｈａｘｉｎｉｌ ａｍ））　、らせん化を引き起こし得る（ビンブラスチン）。

本発明は、チューブリンと相互に作用でき、その結果有糸分裂の紡錘体の毒素と しての活性を示すようなビアリール（ｂｉａｒ７１）性の物質の研究に向けられ てきた。この結果、フェニルピロール骨格を含む化合物が合成された。

本発明の化合物は、一般式Ｉに相当する。

−Ｒ、Ｒ及びＲ３は、互いに独立して、（１）−Ｈ （２）　Ｃｌ−６アルキル基、 で表される。

−２′−又は３′−位に位置するＲ′は、で表され、更に、Ａ１及びＡ２は互い に独立して、（ａ）−Ｈ （ｂ）　Ｃｌ−４アルキル基 （Ｃ）−ピロール環の５−位のＣ原子上に環化しているＣｌ−６アルキレン又は Ｃ１−６アルケニレン基 （式中Ｂは、 −　フェニル（ＣＩ−４アルコキシ）基−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル アミノ（ＣＩ−４アルキル）基 −ピロール環の５−位のＣ原子上に 環化しているＣ１−６アルキレン又 はＣ１−６アルケニレン基を示す。） で表される。

Ｒ４は、 （１）−５−又は６−員のへテロシクロアルキル−（ＣＩ−４アルキル）基、 （式中、Ｙは、 （ａ）　Ｃｌ−４アルコキシ基 （ｂ）−Ｎ、Ｎ−−（５−乃至６−員のシクロアルキル）−（ウレイド）基 （ｃ）−Ｒ−一位での環化可能なアミノ基を示す。） で表される。

本発明は又、一般式１で表される化合物の製法にも関する。この製造方法は式■ のニトロスチレン類を反応させることで事で特徴づけられる。

ＮＯ□基は、２′−又は３゛−位に位置する。コに対して　式■のアルキル　イ ソシアノアセテートＲ−０−ＣＯ−ＣＨ２−ＮＣＣｍ） ［式中、 Ｒは、エチル又はメチル基である。］。

この反応は、４０〜５０℃の温度で、ＴＨＦ／無水＋ｅｒｆ−ブタノール（２： １）の混合液中で、脂肪族又は芳香族のニトロアルケン類からビロール類を生成 させるバートンとザード（Ｂａｒｔｏｎ　ｘｎｄ　Ｘａｒｄ　）の方法に従って 行われる。

反応の開始点は、塩基の存在下、この場合はＤＢＵの存在下、ニトロスチレンへ のα−イソシアノアセテートのマイクルタイプ（Ｍｉｃｈａｅｌ　ｊ７ｐｃ）の 付加である。

用いられたニトロスチレン類は、クネベナーゲル反応に従って、対応するニトロ ベンズアルデヒド類とニトロエタンを縮合することによって事前に調製する。

従って、ニトロスチレン類から、直接又は簡単な官能基の転換を経て、本発明の フェニルビロール類が得られる。

従って化合物Ｉ′が得られる場合には、それは一つ又は複数の以下の転換法によ って、一般式Ｉで表される他の化合物に転換される。： （１）−芳香環のニトロ基とピロール環のエステル官能基（ｆｕｎｃｔｉｏｎ） の同時還元、この場合は環化、（２）−ニトロ基のアミンへの還元、 （３）−（２）によって得られたアミン官能基のアシル化、 （４）−（３）によって得られたカルバマートのアルキル化、及び必要に応じ、 引き続いて行われる水素化分解、 （５）−ビロール環のエステル官能基のけん化、（６）〜　（５）に従って得ら れた酸官能基とＮ、Ｎ−一シクロへキシルウレアの縮合、 （７）−（５）に従って得られた酸官能基のアルデヒドへの還元、 （８）−（６）に従って得られたアルデヒド官能基についてのホーナー−一エモ ンズ（Ｈｏｒｎｅｒ−Ｅｍｍｏｎｓ　）縮合、 （９）−ビロール環上での電子置換、 （１０）　−−ふたつの芳香環間での分子内環化反応。

上記転換法に従って、芳香環を連結する第３の環の創造は、上述した一つ又は複 数の転換法を用いて各々の環即ちフェニルとビロールに結合された、官能基を有 する鎖又は反応性基を用いることによって行われ、こうして分子内開環を行なう ものである。

それらの有利な抗有糸分裂作用に照らし、一般式■で表されるフェニルビロール 化合物類は、医薬として有用であることが判る。本発明は又、一般式Ｉの化合物 を活性成分として含有することを特徴とする薬剤組成物をも包含する。

本発明の他の特徴及び有利な点は、以下の記述を読むことにより、特に、単に例 示として挙げられている多数の実施例により、明らかになるであろう。

以下のフェニルビロール化合物類は、事前に方法Ｉに従って合成した対応するニ トロスチレン類から、下記のＨに記載した操作に従って、製造される。

エ　ニトロスチレン類の製造 アルデヒド（２ｍｍｏｌ）を６００ｍｇ酢酸アンモニウム／１０ｍ１氷酢酸の緩 衝液中に溶解する。ニトロエタン１．４当ｆｊｋ　（ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ）を 加え、混合物を還流する。３〜４時間後、アルデヒドは消え、より極性の小さい 生成物が生成される。反応混合液を２０ｍ１の氷冷水に注ぎ、生じた混合物を塩 化メチレンで抽出する。有機層を水で２回及び炭酸水（ｃａｒｂｏｎａ（ｅｄ　 ｗａｆｅｒ）で２回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ最後に蒸発させる。この ニトロスチレン類はシリカカラムで単離される（溶離液：　ＣＨ２Ｃ１□／ヘキ サン。

プの化合物類を製造する一般的な方法 ニトロスチレン類（２０ｍｍｏｌ）を、蒸留したテトラヒドロフラン／無水１ｅ ｒｊ−ブタノール（２：１）混合液５０ｍ１に溶解する。ＤＢＵｌ、５当量を加 え、室温でイソシアノ酢酸エチル１．２当ｔ！　（２，７ｍ１）を滴下する。反 応混合物を（特に断らない限り）４０〜５０°Ｃに昇温し、３〜４時間撹拌する 。反応は完結し、出発物質のニトロスチレン型化合物よりも極性の小さい生成物 が生成される。この様にして得られたフェニルビロール類は、クロマトグラフィ ーのプレート上に、バニリン／濃塩酸混合液をスプレーすることによりピンク色 に顕色化される。溶媒を蒸発させ、生成物を直接シリカカラム（溶離液：ＣＨ２ Ｃｌ２／ヘキづン、４：１）で分離する。

注：イソシアノ酢酸エチルをイソシアノ酢酸メチルに置き換えると、同じ収率で メチルエステルが得られる。

合成は、−船方法Ｈに従って、１−フェニル−２−二トロー１−プロペンを出発 物質として行われる。得られるエチル　４−メチル−３−フェニル−２−ビロー ルカルボキシレートを、シリカカラムで精製し、白色粉末を得る（３．　９ｇ　 ；収率＝８５％）。

２９４０．１６７５，１４９０゜ λｍａｘ：２７６．４　２２０．３　２０７．２　ｎｍε　：１３９００　１１ ７００　１２８００計算値　％　：Ｃ７３ｊ４　Ｈ６，５９Ｎ６．１０実測値　 ％　：　７２．８５　６ｊ８　６．０６２　（３Ｈ，ｓ　ＣＨ３） ４、　０５　（２Ｈ，ｑ　Ｊ　＝７Ｈｚ、ＣＨ２ＣＨ３）６．７　（ＬＨ，ｄ　 ビロール　Ｈ） ７、　１５−７．４　（５Ｈ，ｍ　Ｐｈ）９、　１５　（ＬＨ，ｂｒ、　ＮＨ） 実施例２ メチル　４−メチル−３−（３−ｍ＝トロフェニル）−２−ピロールカルボキシ レートこれは、方法Ｈに従って１−（１−ニトロフェニル）−２−二トロー１− プロペンから得られる。４．２ｇの化合物（２）が得られ（収率：８０％）、こ れは酢酸エチル／ヘキサン混合液中で再結晶できる。

１５４０．１３６０，１１６０゜ 。−１ ・ＵＶ（無水エタノール）： λｍａｘ：２７０．２　２０５．５　ｎｍε　：１６７００　１３７００ ｍｏｌｅ　Ｘ　１−ＩＸｃｍ−１ ・ＭＳ　：ｍ／ｚ　：　２６０（Ｍｌ　、２２８，１５３゜計算値　％　：　Ｃ ５９，９９Ｈ４，６５Ｎ１０．７７０２４．５９実測値　％　：　６０．０７　 ４．８４　１０．８２　２４．８２争　’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１ｓ　、２００ＮＨ ｚ）２．０３　（３Ｈ，ｓ、ＯＣＲ，） ３．７５　（３Ｈ，ｓ、ＣＨ３） ６．９１　（ＩＨ，ｄ　Ｊ−２Ｈｚ、ピロール　Ｈ）７．６３　（ＩＨ，ｔ　Ｊ ＝８Ｈｚ、Ｈｓ’　）７．８　（ＩＨ，ｄ　Ｊ＝８Ｈｚ、Ｈｂ　’　）８．２８ 　（ＩＨ，ｄ　Ｊ＝８Ｈｚ、Ｈａ　’　）８．３３　（ＬＨ，ｓ、Ｈ２’　） ９、　３３　（ＬＨ，ｂｒ、　ＮＨ） 合成は、前述の方法Ｉに従って事前に製造される１−（２”−二トロフェニル） 　−２−ニトロ−１−プロペンを出発物質として数段階で行われる： ａ）　エチル　４−メチル−３−（２−ｍ＝トロフェニル）−２−ビロールカル ボキシレート（３）の合成これはＨに記載された方法に従って１−（２”−二ト ロフェニル）−２−プロペンを出発物質として行われる。

シリカカラムでの精製によって、５．４ｇの黄色粉末（収率＝９８％）が得られ る。ＤＭＳＯ／Ｈ２０混合液で生成物を再結晶することにより黄色結晶が得られ る（ｍ、ｐ、１１６℃）。

ｂ）　３−メチルピロロ［２，３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン：　（４） の合成 メタノール１０ｍ１に、（３）　２７４ｍｇ　（１ｍｍｏｌ）、ＦｅＣｌ３　・ ６Ｈ２０１ｇ　（及び活性化したチャコール５０ｍｇ）を混合する。反応混合液 を１０分間還流し、ヒドラジン１．５当量を滴下する。還流を１２時間続ける。

所望の生成物（４）が、エチル　３−（２−−アミノフェニル）−４−メチルビ ロールカルボキシレート、化合物（旦）と共に現れる。

触媒をセライト（ｃｅｌｉｊｅ）で濾過し、集められた溶液は冷やされ、その溶 液中で環化した生成物は、結晶化する。

８０ｍｇの灰色がかった白（ｏｆｆ−ｗｈｉｔｅ　）の結晶を集める（収率＝４ ０％）。還元生成物を含んでいる溶液を蒸発させ、シリカカラムクロマトグラフ ィーで精製するλｍａｘ　：　３２０　３０６　２５８ｎｍε　：１１１００　 ９７００　８２００２、　５　（３Ｈ，ｓ、　ＣＨ３） ７．１−７．５　（５Ｈ，ｍ、Ｐｈ、ビロール　Ｈ）８．１　（ＬＨ，ｍ、Ｃ０ ＮＨ） １．０６　（３Ｈ，ｔ　Ｊ＝７Ｈｚ、ＣＨ２ＣＨ３）１．９１　（３Ｈ，ｓ、Ｃ Ｈ３） ３、　３８　（２Ｈ，ｂｒ、ＮＨ２） （５Ｈ，ｍ、Ｐｈ、ビロール　Ｈ） 化合物（６）の合成は、実施例３で得た３−（２−−アミノフェニル）−４−メ チル−２−ビロールカルボン酸エチル（５）を用いて行なわれる。

グリシン　Ｎ−ベンジルカルバメート（Ｚ−グリシン）８４３ｍｇ　（４，０５ ｍｍｏ　１）を無水テトラヒドロフラン８０ｍ１に溶解する。Ｎ−メチルモルホ リン５８０ｍｇ（４，０５ｍｍｏ　１）をアルゴン雰囲気下に置かれた該溶液に 添加し、−１５℃に冷却し、続いて、クロロギ酸イソブチル５７０ｍｇを滴下す る。−１５℃で１０分間撹拌した後、５００ｍｇ　（２，２３ｍｍｏ　１）の（ ５）のテトラヒドロフラン５０ｍ１溶液を滴下する。反応媒体の温度を−１５℃ で５時間保持し、次いで該混合物を室温に戻す。

反応は、１時間で完結する。

このＮ−メチルモルホリン塩を濾別し、テトラヒドロフランで洗浄する。テトラ ヒドロフランを蒸発させた後、残渣を酢酸エチルに取り、不溶解部分を濾別し、 有機層を酸性水（０，１Ｎ　ＨＣＩ）、炭酸ナトリウム飽和水、及び塩化ナトリ ウム飽和水で連続的に洗浄する。硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させた後、３− 　［４＝、５”−ジメトキシ−２−−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニルグリシル アミド）フェニルコー４−メチルビロールカルボン酸エチル７００ｍｇが単離さ れる（収率＝７９％）。酢酸エチル／ヘキサン混合物中での再結晶により、淡黄 色結晶が得られる。

・Ｍ、Ｐ、：１２４℃ ・ＩＲ（ＣＨＣＩ３）：３４６０．１６９０．１５９０゜１５１０．１２９０ｃ ｍ’ −ＵＶ　（ＤＭＳＯ）：λｍａｘ　：　２５８ｎｍε：　１１３００　ｍｏｌｅ −１ｘ　１　ｘ　ｃ　ｍ−’（乾燥エタノール）：λｍａｘ：２７６（ショルダ ー）。

２３９．２０７ｎｍ ０微量分析：Ｃ２４Ｈ２５Ｎ３０５ 計算値％：Ｃ６６，１９Ｈ５，７８Ｎ　９．６５　０１８ｊ７測定値％：６５． ９７　５．６３　９．６８　１８．６５・”ＨＮＭＲ（ＣＤ　ＣＩ　３　、　８ ０ＭＨｚ　）０．９５　（３Ｈ，ｔ、Ｊ　＝７Ｈｚ、ＣＨ２ＣＨ３）１．８　（ ３Ｈ，ｓ、ＣＨ３） ３．７２　（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝５Ｈｚ、ＣＨ２ＮＨ）４　（２Ｈ，ｑ、Ｊ＝７Ｈｚ 、ＣＨ２ＣＨ，）５　（２Ｈ，ｓ　、ＣＨ２Ｐ　ｈ） ５．６６　（ＬＨ，ｂ　ｒ、ＣＨ２ＮＨ）６．６１　（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝２Ｈｚ、 ビロール　Ｈ）７−７．２５　（８Ｈ，ｍ、Ｐｈ） ７．８７　（ＬＨ，ｂｒ、ｓ、Ｐｈ　ＮＨ）８．２　（ＬＨ，ｄ、Ｊ＝７Ｈｚ、 Ｈ３−）実施例５ １、４−ジメチル−３−（２−ｍ＝トロフェニル）ヒロールー２−　（Ｎ、Ｎ− −シクロへキシルウレイドカルホキこれは、上記実施例３に記載された方法に従 って得られた４−メチル−３−（２−ｍ＝トロフェニル）−２−ピロールカルボ ン酸エチル（３）から合成される。

１ｇ　（３，６５ｍｍｏｌ）の（３）を無水テトラヒドロフラン２０ｍ１に溶解 する。該混合物を氷冷し、１当量の水素化ナトリウムを添加することにより、ア ニオンが形成される。該混合物を冷却しつつ１５分間撹拌した後、温度を室温に 上げる。次いで、バラ−トルエンスルホン酸メチル１．３当量を添加し、反応混 合物を５０℃に３時間加熱する。反応は定量的である。（３）よりも低極性の生 成物が形成される。該混合物を冷却し、セライトで濾過して、塩化メチレンで洗 浄する。シリカカラム（溶離液：ＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサン　３：２）で精製した 後、生成物が黄色オイルの形態で得られる。０．９５ｇの（７）が得られる（収 率：９０％）。

（７）をメタノール／３０％水酸化ナトリウム（５：　１）混合物中で２時間加 熱状態（６０℃）でケン化する。該溶液を氷冷しつつｐＨ３まで酸性化する。該 酸は沈殿し、塩′化メチレンで抽出される。有機層を塩化ナトリウム飽和水で洗 浄し、硫酸ナトリウムで乾燥する。生成物をシリカカラム（溶離液：　ＣＨ２Ｃ １２／ＭｅＯＨ９５：　５）で精製する。目的物（８）が黄色結晶の形態で単離 され、これをエチルエーテル／ヘキサン混合物で再結晶する。

ｍ、ｐ、２０５℃（１９０ｍｇ　；収率ニア３％）グリシンエチルエステル塩酸 塩７８ｍｇ　（１，５当量）及び無水トリエチルアミン０．０８ｍ１　（１，５ 当量）をアセトニトリル５ｍｌ中に溶解する。１００ｍｇ（０，３８ｍｍｏ　１ ）の（８）を添加し、該溶液を一５℃に冷却する。

次いで、ジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣＩ）１１７ｍｇを加え、反応 混合物を一５℃で４時間撹拌し、次いで室温で１２時間撹拌する。タロマドグラ フプレート上に酸（８）よりも低極性の２種の生成物が現れる。これらは、目的 化合物（１０）及び１，４−ジメチル−３−（２′−二トロフェニル）ビロール −２−（グリシルカルボキサミド　エチレート’）（１１）である。

酸は完全には消費されない。反応溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルに取る。不 溶解部分を濾別し、有機層を炭酸ナトリウム飽和水、ＩＮ塩酸溶液及び塩化ナト リウム飽和水で連続的に洗浄する。硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させた後、２ 種の生成物の粗混合物１６０ｍｇが得られ、これをシリカカラムで分離して、（ １０）：　７０ｍｇを得る。

（収率＝３９％）。

１−１．８７　（２２Ｈ，ｂｒ、シクロヘキシル　Ｈ）１．８　（３Ｈ，ｓ、Ｃ Ｈ３） ３．６　（３Ｈ，ｓ、Ｎ　ＣＨ３） ６．４７　（ＩＨ，ｓ、ビロール　Ｈ）７．２　７．７　（３Ｈ，ｍ、Ｐｈ） ７、８７　（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝７Ｈｚ、　Ｈ３−）実施例に れは実施例５に製造が記載されている１、４−ジ）チＪｖ−３−Ｃ２−一二トロ フェニル）−２−ビロールカルボン酸エチル（７）から得られる。化合物（２２ ）の合成は、以下の工程を必要とする。

２００ｍｇの（７）を無水塩化メチレン３０ｍ１に溶解し、この溶液を浴（アセ トン／ドライアイス）中で、−７８℃に冷却する。ｌＭｄ１ｂａｌのトルエン溶 液２．８ｍｌ　（４当量）を滴下する。−７８℃で２時間撹拌を続け、次いでフ ラスコを冷却媒体から取り出し、炭酸ナトリウム水溶液（１０％）を加える。か なりのエマルジョンが生じ、これをセライトでの濾過により取り除く。捕集した 透明有機層を塩化ナトリウム飽和水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥する。アル コール（１２）をシリカカラムで精製する（１２０ｍｇ　；収率７１％）。

アテンビュロ−（Ａｔ　ｔ　ｅｎｂｕ　ｒ　ｒｏｗ）の方法に従って調製したＭ ｎＯ２１００ｍｇを、５００ｍｇのアルコール（１２）を含有する四塩化炭素／ 塩化メチレン（４：１）混合物中に懸濁させる。反応媒体を室温で１．５時間撹 拌する。次いで酸化剤をセライトで濾過する。

化合物（１３）２３０ｍｇが得られる（収率：４６％）。

この化合物をシリカカラムでのクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／ヘキ サン、１：１）により精製する。これは黄色オイルの外観を有する。

ｃ）１．４−ジメチル−３−（２−ｍ＝トロフェニル）−２−（２−カルボキシ ビニル　エチレート）ビロール（１４）の合成 水素化ナトリウム（粉末、純度９７％）４７０ｍｇ　（３当ｉ）をアルゴン雰囲 気中で無水エチレングリコールジメチル（ＤＭＥ）４０ｍｌ中に懸濁させる。該 混合物を水冷し、５ｍｌのＤＭＥ中で希釈したトリエチルホスホノアセテート３ −９ｍｌ　（３当量）を添加する。気体が発生し、水素化物が完全に消費される まで反応混合物を室温で撹拌する。透明となった反応溶液中に、ＤＭＥ３０ｍｌ に溶解した１、６ｇの（１３）を加える。

室温で６時間撹拌した後、この混合物をセライトで濾過する。ＤＭＥを蒸発させ 、残渣を塩化メチレンに取る。生成したエマルジョンが消失するまで有機層を塩 化ナトリウム水溶液で洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥する。溶媒を蒸発さ せた後、粗生成物４ｇが得られ、これをシリカカラム（溶離液：酢酸エチル／ヘ キサン　２；３）で精製して、化合物（１４）の黄色粉末を得る（２ｇ＝収率９ ７％）。

４ｇ　（１２，７ｍｍｏｌ）の（１４）をテトラヒドロフラン／６％ＨＣＩ混合 物（テトラヒドロフラン５０ｍ１／３６％塩酸１０１０ｍ１）６０中に０℃で溶 解する。ブチルアルデヒド１．５ｍｌ　（３当量）を滴下する。反応混合物を冷 却下で７時間撹拌する。該酸性溶液を炭酸ナトリウム飽和水溶液で中和し、次い で、生成物を酢酸エチルで抽出する。有機層を炭酸水（１０％）で洗浄し、その 後硫酸ナトリウムで乾燥する。得られた化合物（１５）をシリカカラム（溶離液 ：酢酸エチル／ヘキサン　１：４）で精製する。赤色結晶が得られる（１．８ｇ ；収率：３８％）。

４ｇの化合物（１５）を３当量の水素化ジイソブチルアルミニウムで還元する。

化合物（１６）が赤色粉末の形態で単離される（３ｇ；収率＝８５％）。

３ｇの（１６）を四塩化炭素６０ｍ１中でアテンビュロ−（Ａｔ　ｔ　ｅｎｂｕ 　ｒ　ｒｏｗ）の方法に従って調製した二酸化マンガン２０ｇを用いて１．５時 間酸化する。セライトで反応混合物を濾過し、生成物をシリカカラムで精製して 、化合物（１７）のオレンジ色−赤色結晶が単離される（２ｇ；収率−６７％） 。

ｇ）５−（１−ブテニル）−１，４−ジメチル−３−２，６ｇ　（８ｍｍｏｌ） の（１７）及びエチレングリコール４．５ｍｌ　（１０当量）並びに触媒量（２ ０ｍｇ）のピリジニウムトシレートをベンゼン６０ｍ１に溶解させる。

この反応混合物を４時間還流させると、緑色に変化する。

（水は、ディーン及びスタークの装置を用いて共沸的に除去する）。アルデヒド よりも極性の低い生成物が生成される。冷却後、ベンゼン相を炭酸ナトリウム水 溶液で３回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥する。蒸発後に得られる粗生成物をア ルミナカラム（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン、２：３）上で精製する；それは 赤色ペーストの外観を有する（我々は、シリカを通過中、該生成物が若干不安定 であることに気付いた）。２．２ｇの化合物（１８）を得る（収率＝７５％）。

ｈ）３−（２−−アミノフェニル）−５−（１−ブテニル）−１，４−ジメチル −２−（１，４−ジオキサ−２−ビニルカルバルデヒド）ビロール、（１９）の 合成化合物（１８）を、ラネーニッケルの存在下でエタノール中ヒドラジンによ り還元する。２ｇの化合物（１８）は、化合物（１９）の黄色ペースト１．７ｇ を生成する（収率＝９３％）。

１．９ｇの化合物（１９）を、パラジウム−チャーコール（１０％）４００ｍｇ の存在下でエタノール４０ｍ１中水素雰囲気下で還元する。１２時間反応後、触 媒をセライト上で濾過し、生成物をアルミナカラム（溶離液：酢酸エチル／ヘキ サン、２：３）上で精製する。化合物（２０）は黄色ペーストの形態で単離され る （１．６ｇ、収率＝８３％）。

１．６ｇの（２０）を無水エチレングリコールジメチルエーテル（ＤＭＥ）１５ ０ｍｌに溶解する。この溶液を水中で冷却し、蒸留したピリジン５．５ｍｌ　（ ２０当量）を加える。次いで、クロル蟻酸ベンジル１．　２ｍｌ　（１，８当量 ）をＤＭＥ２０ｍｌに溶解させた溶液を、２時間を要して滴下する（試薬を徐々 に滴下するとより良好な収率が得られる）。反応媒体を室温で１時間撹拌し、次 いで、生成したピリジニウム塩酸塩を濾過する。ＤＭＥを留去し、残渣を酢酸エ チルに取り、有機層を塩化ナトリウムの飽和水溶液及び炭酸ナトリウムの飽和水 溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させる。化合物（２１）は黄色オ イルの形態で得られ、アルミナカラム（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン、２：３ ）上で精製される（収率＝６７％）。

１．５ｇの（２１）をアルゴン雰囲気下無水ＤＭＥ１００ｍｌに溶解する。該混 合物を一２０℃（氷／塩化ナトリウム）に冷却し、カリウムｔｅｒｔ−ブチレー ト４５３ｍｇ　（１，３当量）を添加することにより、（２１）のアニオンを生 成させる。黄色溶液は、赤褐色に変化し、沈殿が生じる。反応混合物を一２０℃ にて３０分撹拌し、次いで、ヨウ化メチル０．６ｍｌ　（３当量）を滴下する。

撹拌を一２０℃にて１時間続ける。沈殿をセライトでの濾過により除去し、ＤＭ Ｅを留去し、残渣を酢酸エチルに取る。有機層を塩化ナトリウムの食塩溶液で洗 浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させる。得られる生成物をアルミ精製する 。黄色オイルを単離する。こうして得られた化合物（２２）は、ジアステレオマ ー混合物である（１．１ｇ、収率＝７１％）。

（乾燥エタノール）：　ｍａｘ：２０８ｎｍ・ＭＳ　：ｍ／ｚ　：４９０　（Ｍ ’）。

４４７　（Ｍ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）。

３、　０３　（３Ｈ，ｓ　、　Ｎ　ＣＨ３）３．０９　（３Ｈ，ｓ、ＮＣＨ，） ３、４１　（４Ｈ，ｍ、　ＯＣＨ２ＣＨ２０）４．６５　（ＬＨ，ｔ、ＣＨＯＯ ） ６．８５−７．９　（４Ｈ，ｍ、Ｐｈ）実施例７ ５−ブチル−１，４−ジメチル−２−（１，４−ジオキサ−２−エチルカルバル デヒド）−３−［２−−（Ｎ−メチこの化合物は、化合物（２２）のペンジルカ ルノ（メート基を水素化分解することにより得られる。該水素化分解は、水素雰 囲気下パラジウムーチャーコール（１０％Ｐｄ）の存在下で酢酸エチル中で行わ れる。１５時間撹拌後、触媒をセライトで濾去し、生成物を次いでアルミナカラ ム（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン、３ニア）上で精製する。

１ｇの化合物（２２）は、脱保護の後、赤褐色油状の化合物（２３）５００ｍｇ を生成する（収率＝７０％）。

φ土足（Ｃ６Ｈ６）二３３５０（ブロードシグナル）。

２９００．２８５０，１６８０゜ １６００．１３６０．１１２０ ゜ｍ−１ ０，８７（３Ｈ，ｔ、Ｊ＝７Ｈｚ、ＣＨ２ＣＨ，）１．３３　（４Ｈ，ｍ、ＣＨ ２ＣＨ２ＣＨ３）１．９５　（２Ｈ，ｍ、ＣＨ２ＣＨＯＯ）２、　０３　’（３ Ｈ，ｓ　、ＣＨ３）２．４５　（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝５Ｈｚ、ＣＨ，ＮＨ）２．４７ 　（２Ｈ，ｔ、Ｊ＝７Ｈｚ。

ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３） ２．７８　（２Ｈ，ｍ、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨＯＯ）３．１６　（３Ｈ，ｓ、ＮＣＨ ３） ３、　３９　（４Ｈ，ｍ、ＯＣＨ２ＣＨ２０）４．０３　（ＬＨｌＱ、Ｊ＝５Ｈ ｚ、ＣＨ３ＮＨ）４．６４　（ＩＨ，ｔ、Ｊ＝５Ｈｚ、ＣＨ２見００）６．７４ 　（ＩＨ，ｄ、Ｊ”８Ｈｚ、Ｈ６’　）６．９５　（ＩＨ，ｔ、Ｊ＝８Ｈｚ、Ｈ ４’　）７．３６　（２Ｈ，ｍ、Ｈ，’　、Ｈ，’　）生物学的研究 合成された化合物の生物学的活性の評価を、幾つかの生物学的試験を用いて行な った。即ち、これら化合物とチューブリンとの相互作用（重合又は解重合の阻害 ）を研究し、それらの有糸分裂紡錘体の毒としての活性をこうして検証した後、 細胞毒性の研究を行なった。

該細胞毒性研究は、Ｖｅｒｏライン（正常猿腎臓細胞）、表１１およびＫＢライ ン（鼻咽頭のヒトカルシノーマ）、表Ｈについて、下記の方法に従い行なった。

材料と方法 生成物を、７２時間維持される培養時に導入する。生成物は、１００．８０．４ ０．２０および１０μｍにて試験される。これら濃度において、化合物を溶解す るのに用いたＤＭＳＯは、培養物中１％を越えず、無毒性である。細胞増殖の阻 害についての百分率値を、ＤＭＳＯ（≦１％）を含有する対照の培養物と比較し て、クリスタルバイオレットを用いる比色定量法により測定した。

表■ 表■ 糀ｇ 本発明化合物、特に実施例４．６、殊に２３の化合物番ヨ特に有利である。これ ら化合物は、ＫＢラインにつ（１てＣよ、低濃度において若干の選択性を示す。

本発明は、活性成分として一般式ｌの化合物の少なくとも１種を、該化合物の投 与、特に経口および非経口投与を可能とする慣用的な薬学的担体乃至希釈剤と共 に含有する薬理組成物に関するものでもある。

国際調査報告 国際調査報告

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．一般式Ｉで表されることを特徴とする化合物：▲数式、化学式、表等があり ます▼（Ｉ）［式中、 −Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、互いに独立して、（１）−Ｈ （２）−Ｃ１−６アルキル基、 で表され、 −２′−又は３′−位に位置するＲ′は、（１）−Ｈ （２）−ＮＯ２ （３）▲数式、化学式、表等があります▼で表され、更に、Ａ１及びＡ２は互い に独立して、（ａ）−Ｈ （ｂ）−Ｃ１−４アルキル基 （ｃ）−ピロール環の５−位のＣ原子上に環化しているＣ１−６アルキレン又は Ｃ１−６アルケニレン基 （ｄ）−▲数式、化学式、表等があります▼（式中Ｂは、 −フェニル（Ｃ１−４アルコキシ）基 −Ｎ−ベンジルオキシカルボニル− アミノ（Ｃ１−４アルキル）基 −ピロール環の５−位のＣ原子上に 環化しているＣ１−６アルキレン又 はＣ１−６アルケニレン基を示す） で表され， −Ｒ４は、 （１）−５−又は６−員のヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−４アルキル）基、 （２）▲数式、化学式、表等があります▼（式中、Ｙは、 （ａ）−Ｃ１−４アルコキシ基 （ｂ）−Ｎ，Ｎ′−（５−乃至６−員のシクロアルキル）（ウレイド）基 （ｃ）−Ｒ′−位での環化可能なアミノ基を示す） で表される。】。 ２．前記化合物が、 −エチル４−メチル−３−フェニル−２−ピロールカルボキシレート、 −メチル４−メチル−３−（３′−ニトロフェニル）−２−ピロールカルボキシ レート、 −３−メチルピロロ［２、３−ｃ］キノリン−４（５Ｈ）−オン、 −エチル３−〔２′−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニルグリシルアミド）フェニ ル］−４−メチル−２−ピロールカルボキシレート、 −１，４−ジメチル−３−（２′−ニトロフェニル）ピロール−２−（Ｎ，Ｎ′ −シクロヘキシルウレイドカルボキサミド）、 −５−ブチル−１，４−ジメチル−２−（１，４−ジオキサ−２−エチルカルバ ルデヒド）−３−［２′−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｎ−メチルアミノ ）フェニル］ピロール、 −５−ブチル−１，４−ジメチル−２−（１，４−ジオキサ−２−エチルカルバ ルデヒド）−３−［２′−（Ｎ−メチルアミノ）フェニル］ピロールである請求 項１に記載の化合物。 ３．式ＩＩのニトロスチレン類 ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩ）［式中、ＮＯ２基は、２′−又は３ ′−位に位置する］と、式ＩＩＩのアルキルイソシアノアセテートＲ−Ｏ−ＣＯ −ＣＨ２−ＮＣ（ＩＩＩ）［式中、Ｒは、エチル又はメチル基である。］とを反 応させ、 化合物Ｉ′が得られる場合には、 ▲数式、化学式、表等があります▼Ｉ′それが以下の少なくとも一つの転換法： （１）−芳香環のニトロ基とピロール環のエステル官能基の同時還元、及びこの 場合は現化、 （２）−ニトロ基のアミンヘの還元、 （３）−（２）によって得られたアミン官能基のアシル化、 （４）−（３）によって得られたカルバメートのアルキル化、及び必要に応じ、 引き続いて行われる水素化分解、 （５）−ピロール環のエステル官能基のけん化、（６）−（５）に従って得られ た酸官能基とＮ，Ｎ′−シクロヘキシルウレアの縮合、 （７）−（５）に従って得られた酸官能基のアルデヒドヘの還元、 （８）−（６）に従って得られたアルデヒド官能基についてのホーナー−エモン ズ（Ｈｏｒｎｅｒ−Ｅｍｍｏｎｓ）縮合、 （９）−ピロール環上での求電子置換、及び（１０）−ふたつの芳香深間での分 子内現化反応によって、一般式１で表される他の化合物に転換されることを特徴 とする請求項１及び２に言己載の一般式１で表される化合物の製造法。 ４．医薬品としての、請求項１及び２に記載の一般式Ｉで表される化合物。 ５．請求項１及び２のいずれかに記載の一般式Ｉの少なくとも一つの化合物を活 性成分として含有することを特徴とする薬剤組成物。 要約 ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）▲数式、化学式、表等があります▼（ ａ）▲数式、化学式、表等があります▼（ｂ）▲数式、化学式、表等があります ▼（ｃ）一般式Ｉ中、 Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、互いに独立して、Ｈ又はアルキルＣ１−６基を示し、 ２′−又は３′−位に位置するＲ′は、Ｈ、ＮＯ２又は（ａ）［式中Ａ１及びＡ ２は独立して、Ｈ、アルキルＣ１−４基、ピロール環の５−位のＣ原子上に環化 しているＣ１−６アルキレン又はＣ１−６アルケニレン基又は（ｂ）｛式中Ｂは 、フェニルアルコキシＣ１−４基、Ｎ−ベンジルオキシカルボニルアミノアルキ ルＣ１−４基、ピロール環の５−位のＣ原子上に環化しているＣ１−６アルキレ ン又はＣ１−６アルケニレン基を示す）］を示し、Ｒ４は、５−又は６−員を含 むヘテロシクロアルキル−（アルキルＣ１−４）基、又は（ｃ）［式中、Ｙは、 Ｃ１−４アルコキシ基、Ｎ，Ｎ′−（５−乃至６−員を含むシクロアルキル）− （ウレイド）基、又はＲ′−位で環化可能なアミノ基を示す］ である一般式Ｉのフェニルピロール化合物。更に、それらの製造法及び医薬品と しての用途が記載されている。