JPH04506057A - 黒色腫の診断および治療薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 黒色腫の診断および治療薬、そのような薬剤として有用な芳香族ハロゲン化誘導 体並びにそれらの調製本発明は、黒色腫の診断および治療薬、並びにそのような 薬剤として有用な、所望により標識された新規芳香族ハロゲン化誘導体に関する 。

悪性黒色腫は、規則的に増加している発生率を有する最も危険な皮膚の腫瘍の１ 種である。５年間の生存率は、腫瘍の厚さが０．７６ｍｍ未満である場合を除い て１４％を越えない。病変がこの厚さを越える場合には、腫瘍は静かで且つ予想 不可能な様式で転移を起こす、そのため、局部の腫張および腫瘍から離れた位置 での腫張の早期評価を可能にする調査方法が現在捜しめられている。

過去１０年間に、メラニンに対する潜在的親和性のために選ばれた多数の放射性 医薬品が試験されているが、充分な臨床的開発はほとんどなされていない０本発 明者らは、現在は使用されていないヨードキノリンおよびヨードメチルチロシン 、そしてガリウム６７のクエン酸塩に限って言えば、その欠点は周知である。即 ち消化管からの非常に遅い排泄、腫瘍の可視化を困難にし得る肝臓および腎臓に おける遅く過剰な局在化。

更に、標識は感染もしくは炎症部位または発達中の腫瘍組織において非特異的に 起こる。

腫瘍の免疫走査へのモノクローナル抗体の有効性を示すために多くの試みがなさ れている。最初の試みは、ヒト黒色腫の細胞の大部分に存在するｐ９７タンパク 質に対して向けられた１３ＩＩＩｇ識モノクローナル抗体を用いて行われた。動 物実験、次いで臨床研究は、免疫走査行う上で、完全タンパク質に対して向けら れた抗体と比較してｐ９７タンパク質の断片に対して向けられた抗体Ｆ（ａｂ’ ）ｚの使用が優れていることを示した。それらの抗体は１．５　ａｉよりも大き いサイズの黒色腫の検出を可能にするが、感度は腫瘍の解剖部位およびそれらの 抗原含有量により影響を受ける。免疫走査の主な制限は、骨髄、ｉｐ！！臓、肝 臓および腎臓における放射能の非特異的蓄積にある。腎臓または肝臓活性を減少 させるために、抗体の標識および／または抗精型のいずれかを改善することが必 須であると思われる。

より最近になって、＋３１１で標識されたヨードチオウラシルが、移植腫瘍を有 する動物において研究されている。悪性黒色腫の局在化および治療のための有望 な薬剤であるように見えるが、全合成によるこの化合物の標識は１３１Ｉの使用 に未だ適さない、更に、生合成過程中のメラニン前駆体としてのそれの取り込み は、それの用途を制限し得る　Ｉｌｌ　■ｎで標識したポルフィリンを用いて行 った予備研究は、動物の移植腫瘍を検出することを可能にした。最後に、ヒトに おける黒色腫の検出のために”２１−ＩＭＦを用いた　＋１１１ｎで標識した抗 黒色腫モノクローナル抗体を用いた比較研究は、免疫走査の一層高い感度を示し た。

別の観点から、本発明者らは中枢神経系の診査のための核医学において有用であ る、＋１１５７で標識したベンゼン化合物を記載している（Ｅｕｒ、Ｊ、Ｍｅｄ 、Ｃｈｅｍ、Ｃｈｉｍ、Ｔｈｅｒ、　１９８６．２１＋　Ｎｏ。

５、　４２３−３１）。

それらの化合物並びに類似構造の新規化合物が黒色腫のトレーサーとして使用で きることが発見された。

従って、本発明の目的は、悪性黒色腫を診断および治療するための薬剤であり、 該薬剤は次の一般式の化合物：Ｘは水素またはハロゲン原子を表し、 ＹはＺ−ＣＯＮＨ−、Ｚ−０−、Ｚ−Ｓ（０）ｎ＋−（ｎ＋−０，１，２または ３）。

Ｚ−ＳＯ，−ＮＨ−マたはＺ−ＮＨＣＯ−基を表し１．：、：　テｚ　ハ結合、 −ＣＨｚ−ｎは２〜４の整数であり、そして Ｒ，およびＲ２は各々、水素原子、ｃ、−Ｃ，アルキル、アリールまたはＣ−Ｃ ８ｚアラルキル基を表し、ソレラノ化合物ハ、　ＩＺＪ、１２５Ｉ、Ｉ’ｌｌ　 Ｉ、　”Ｂ　ｒ。

？？１３ｒ、ＩＩＦもしくは”Ｃから選択された放射性同位体、または１３Ｃも しくはＩｍＦから選択された安定な同位体により標識されている〕並びにそれら と医薬上許容される酸との付加塩であって、ただしＹがＺ−ＣＯＮＨ−を表し、 Ｚが結合であり、そしてＸがオルト、メタもしくはパラ位のＦ、ＣＩ、Ｂｒまた はオルトもしくはメタ位のＩを表す式■の化合物、ＹがＺ−ＳＯ□−ＮＨ−を表 し、Ｚが結合であり、そしてＸがパラ位のＣＩを表す弐Ｉの化合物、およびＹが Ｚ−ＣＯＮＨ−を表し、Ｚが結合であり、Ｘがパラ位のヨウ素原子を表し、そし てＲ１とＲ２がエチル基を表す式■の化合物を除く。

本発明は、更に特定的には、Ｘが１！３　１．　ＩＺＪまたは１３＋　■を表し 、ＹがＺ−ＣＯＮＨ−またはＺ−３Ｏ１−ＮＨ−を表し、ＺがＲ，およびＲ２が 各々、水素原子またはＣ、Ｃｈアルキル基を表す式Ｉの放射性医薬品に関する。

それらの薬剤（１）の中で、次の一般式■の化合物：Ｘ、はハロゲン原子または それの放射性同位体の１つであり、Ｙ、　はＣＯまたはＳＯｘ基を表し、 ｎは２〜４の整数であり、そして Ｒ９およびＲ２は各々、水素原子またはｃ、−Ｃ，アルキル基を表す〕並びにそ れらと医薬上許容される酸との付加塩でって、ＹｌがＣＯを表し、Ｘｌがオルト 、メタもしくはパラ、位のＦ、ＣＩ、Ｂｒまたはオルトもしくはメタ位のＩを表 す式■の化合物、Ｙ、がＳＯ□を表し、Ｘ、がパラ位のＣＩを表す式■７の化合 物、およびＹｌがＣＯを表し、Ｘ、がパラ位のヨウ素原子を表し、そしてＲ３と Ｒ２がエチル基を表す弐■の化合物を除く一般式Ｈの化合物は新規である。

式■の化合物は、式■のハロゲノ安息香酸クロリドまたはハロゲノベンゼンスル ホン酸クロリド：（上式中、ＸｌとＹ、は式■のものと同じ意味を有する）と、 式■のジアミン： ＮＨ２−（ＣＨｚ）、−ＮＲ，Ｒ２ＩＶ（上式中、ｎ、Ｒ＋およびＲ２は式■の ものと同じ意味を有する）とを縮合せしめ、次いで所望により、得られた構造体 （ｆｆ）をハロゲンＸ、の放射性同位体、特に１２月　＋ｚｓ（。

１３１　［、）’Ｂ　ｒ、　”Ｂ　ｒまたはＩＩＩＦで標識することにより調製 することができる。

（Ｕｌ）と（ＩＶ）との縮合反応は、中性溶媒、例えばテトラヒドロフラン（Ｔ ＨＦ）中で室温において行うことができる。

この反応は、好ましくは過剰のジアミン（■）、特に１モルの（ＩＩ［）に対し て約２モルの（ＩＶ）を用いて行われる。

ｙ、＝ｃｏである式■の化合物は、弐■のエステル：を得るためのハロゲノ安息 香酸クロリド（ＩＩＩ）とパラニトロフェノールとの縮合、次いで化合物（Ｖ） とジアミン（ＩＶ）との反応、そして最後に、ハロゲンＸ、の放射性同位体によ る得られた構造体（ｎ）の任意の標識により調製することもできる。

酸（Ｉ［［）とパラニトロフェノールとの縮合反応は、３０〜５０℃の温度にお いて、中性溶媒、例えばＴＨＦ中で、酸受容体（炭酸塩、アミン）の存在下で行 うことができる。

化合物（Ｖ）と（ｒＶ）との反応は、室温において、中性溶媒、例えばＴＨＦ中 で、好ましくは過剰のジアミン（ＩＶ）、特に１モルの（Ｖ）に対して約２モル の（ＩＶ）を用いて実施することができる。

構造体（ＩＩ）の標識は、酸性媒質中での非放射性ヨウ素化分子と放射性アルカ リ金属ハロゲン化物、例えばＮａ　”’Ｉとの間での交換反応により行われる。

この交換反応は、例えば硫酸銅の存在下での酢酸により酸性化された、化合物（ ｎ）と放射性ハロゲン化物の水溶液を還流させることにより行うことができる。

次の実施例により本発明を説明する９ Ｉ隻斑上： Ｎ−（２−ジエチルアミノエチル）４−ヨードベンズアミドおよびその塩酸塩（ 化合＠ｈＡ） ａ　）　２０ｍＭの市販のＮ、Ｎ−ジエチルエチレンジアミン溶液を、５０ｄの ＴＨＦ中で１０ｍＭのパラヨード安息香酸クロリド（１０ｍＭのパラヨード安息 香酸と１０ｄの塩化チオニルから調製）と−晩反応させた。溶媒を蒸発させ、残 渣を水に取り出し、そしてクロロホルムで抽出した。クロロホルム溶液をＭｇ５ Ｏｓ上で乾燥し、次いでクロマトグラフィーカラム（シリカ；溶離液：　ＣＨＣ ｌ３−５χ〜２０’１．ＥｔＱＨ勾配またはＣＨＣｌ：＋−ＥｔＯＨ−ＥｔｚＮ Ｈ９２χ−６χ−２χν／ｖ）上で精製した。収率：約８０％。

塩酸塩の調製 塩基の形で単離された化合物Ａを、最小量のクロロホルムに溶かし、そして沈澱 が完了するまでＨＣＩ／エーテル（約２Ｎ）で処理した。混合物を真空中で蒸発 せしめ、塩酸塩の形態を無水エーテルで洗浄しそして濾過した。ｎ＋、ｐ、　１ ８４−１８５°Ｃ０ＩＲ（ＫＢｒディスク、シｃ＋ｏ−’）　：　３２２０（Ｎ Ｈ）　；　３０３０（芳香族ＣＨ）：　１９７ｏ（ｃ＋＋、）；　２９３０（Ｃ Ｈ，）　；　１６３５（Ｃｏ）　：　工５７ｓ、１ｓ２ｏ＜ｃ−ＮＨ）。

’＋（−ＮＭＲ（溶媒：メタノールＤ４）　：　１．３５（ｔ、６Ｈ，ＣＨｉ） 　；　３．１１０−３−５３（＋６８．ＣＨｚ−Ｎ−（Ｃ旦ｚｃＨ３）ｚ−）　 ；　３．６５−３．９０（ｍ、２Ｈ，Ｃ０ＮＨ−Ｃ！ｉｚ）：　７．４６−７． ９３（ｍ、４Ｈ，芳香族）。

ｂ）　１１１Ｓｌでの標識 方法１：１ｄの水中の化合＠ＩＪＡの溶液（５２μｈ）。酢酸：２５０μ！。硫 酸銅二８０μ門。Ｎａ”５Ｔ。１７０°Ｃで４５分間。加水分解（ＩＮ　Ｎａ０ Ｈ）　、　”Ｅｘｔｒｅｌｕｔ”への通過（クロロホルム溶出）。蒸発。残渣の ＨＣＩ、エーテル処理。生成物Ａは塩酸塩の形で単離。

放射化学収率：９５％。放射化学純度：〉９８％（ＴＬＣ，ＨＰＬＣ＞。

方法２　：　５００　ｕ　ｊ２　ｌ７）０．１Ｍ！￥酸緩衝液、ｐＨ４，６２中 の化合物への溶液（２６μＭ）、硫酸ｍ　：　１．２６μＭ　、　Ｎａ”’ｒ、 　１２０°Ｃで４５分間。混合物のＴＬＣ，ＨＰＬＣ−−一放射化学純度：　＞ ９７．５％（観察された放射能の損失く７％）。

方法３：５００μ２００．０５Ｍクエン酸緩衝液、ｐＨ４中の化合物Ａの溶液（ ２６ｕ　Ｍ）。硫酸ｆＲ：　３　μＭ　、　Ｎａ”５Ｉ。１５０　”Ｃで３５分 間。混合物のＴＬＣ，ＨＰＬＣ−−一放射化学純度：〉９８％（観察された放射 能の損失〈３％）。

１施史ｌ工 Ｎ−（２−エチルアミノエチル）４−ヨードベンズアミドおよびその塩酸塩（化 合物Ｂ） ａ）ｐ−ヨード安息香酸ｐ−ニトロフェニルエステル２０ｔｌ！のＴＨＦ中で２ ｍＭのトリエチルアミンの存在下で２１１ＩＭのｐ−二トロフェノールを２ｍＭ のｐ−ヨード安息香酸クロリドと一晩反応させた。溶媒を蒸発させ、残渣をクロ ロホルム中に取り出し、そしてＩＮ　ＨＣＩ、次に水で洗浄した。この溶液をＭ ｇＳＯ４上で乾燥した。それをクロマトグラフィーカラム（シリカ；溶離液：　 ＣＨＣｌ、−ヘキサン８５／１５　ｖ／ｖ）上で精製した。

収率：９０％。

ｂ）得られたエステル（１ａ＋Ｍ）を２０ｄのＴＨＦ中で市販のＮ−エチルエチ レンジアミン（２ｍＭ）　と室温で２４時間反応させた。

溶媒を蒸発させ、残渣を水中に取り出し、そしてクロロホルムで抽出した。有機 相をＩＮ　ＮａＯＨ、次にＨｚＯで洗浄した。それをＭｇ５Ｏａ上で乾燥した。

クロマトグラフィーカラム（シリカ；溶離液：　ＣＨＣｌｚ−ＥｔＯＨ−ｆ！ｔ ｚＮＨ９２２／６χ／２２　Ｖ／Ｖ）上で精製した６百的化合物の塩酸塩を実施 例１と同様にして調製した。

慣、ｐ、＝　２４２−２４３°Ｃ０ ＩＲ（ＫＢｒディスク、シｃｍ−’）　：　３２８０（ＮＨ）　；　１６３５（ ＣＯ）　；１５７５（Ｃ−ＮＨ）；　１５４０（ＮＨ）。

’Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：　ＤＭＳＯ０＆　＋Ｄ２Ｑ　＋ＣＦ３ＣＯ０Ｈ）　：　１ ．２０（ｔ。

ｃ）１２５■での標識 方法１：化合物Ａについて実施例１に記載したものと同じプロトコルを使用した 。放射化学収率：９０％。放射化学純度：〉９８％（ＴＬＣ，ＨＰＬＣ）　。

方法２：実施例１に記載したものと同じプロトコル。放射化学純度：９７％（Ｔ ＬＣ）。

それらの化合物および同様な方法で調製した式■の他の誘導体を下表に与える。

誘導体　Ｘ　Ｉ　Ｙ　１　ｎ　Ｒ＋　ＲｚＡ＊　パラ−Ｉ　ＣＯ２ＣｔＨｓ　Ｃ ｚＨｓＢ　パラ−Ｉ　ＣＯ２ＨＣｔＨｓ Ｃオルト−Ｉ　Ｃ０２Ｃ，）Ｉｓ　Ｃ２Ｈ３Ｄ　パラ−Ｉ　Ｃｏ　２　ＨＨ Ｅ　パラ−Ｔ　Ｃ０２ＣＬ　ＣＨ３ Ｆ　パラ−Ｉ　Ｃｏ　２　ＨＣＨ。

Ｇ　パラ−Ｉ　Ｃ０２ＣＨ（ＣＨ３ｈ　ＣＨ（ＣＨｉ）ｚＨパラ−Ｉ　Ｃｏ　２ 　ＨＣ０（ＣＨｉｈＪ　パラ−Ｉ　Ｃ０３ＣＨ３ＣＨ２ Ｘ　パラ−Ｉ　Ｃ０３８ＣＨ３ Ｌ　パラ−Ｉ　Ｃｏ　３　Ｃ，Ｈｓ　ｃｚｏｓＭ　パラ−Ｉ　ＳＯ□　２　Ｃｚ Ｈｓ　ＣｚＨ３１前記のＥｕｒ、Ｊ、Ｍｅｄ、Ｃｈｅｍ、のＮｏ、１４において 記載されている。

融点はＫｏｆｌｅｒブロック上で測定した。

’Ｈ−ＮＭＲスペクトルはＪＥＯＬ　Ｃ６０ＨＬ装置上で記録し、内部標準とし て用いたＴＭＳに関するｐｐｍで化学シフトを表示した。

化合物コニ ｍ、ｐ、（’Ｃ）　−１６９−１７０ ＩＨ−ＮＭＲ（溶媒：メタ／　−／Ｌ、Ｄ４）　：　１．４０（ｔ、６Ｈ，ＣＨ ｆｆ）　；　３．４０−４．０（ｍ、８Ｈ，Ｃ０ＮＨ（ＨｊｚＣＨｚ−Ｎ（Ｃｊ ｊｚＣＨ３）ｚ）　；　７．０？−７，６３（＋ｓ、３Ｈ，芳香族）；７．８７ −８．１０（ｍ、ＩＨ，芳香族）。

化合物基： 鞘、ｐ、　（’Ｃ）　＞２５０ 化合物基： 閣、ｐ、　（’Ｃ）　＝２４０−２４１’ｌ（−ＮＭＲ（溶媒：　、）’　夕／ 　−ルＤ４）　：　３．０（Ｓ、６Ｈ，ＣＨ：ｌ）　；　３．２７−３．６０（ ａ＋、　４Ｈ，芳香族）。

化合物基： ｍ、ｐ、　（”Ｃ）　＞２５０ ’Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：　ＤＭＳＯ＋ＤｚＯ）　：　２．６７（ｓ、３）１．Ｃｊ ｊ３）　；　３．０３−３．３３（Ｉｎ、２）１．ＣＨｚ−ＮＨ−ＣＨｉ）　； ３．５０−３．７７（ｍ、２Ｈ，Ｃ０ＮＨＣＨｚ）　；　７．５３−８．０（ｍ 、４１（、芳香族）。

化合物旦ニ ー、ｐ、　（”Ｃ）　−１８５−１８６’Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：メタノールＤ４） 　：　１．３７および１．４７（２ｇ、　１２８゜Ｃ旦ｚ）　；　３．２３〜４ ．０（ｓ＋６Ｈ１ＣＨｚおよびＣＪＩ）　；７．５７−８．０（ｍ、４Ｈ，芳香 化合物且： 錫、ｐ、　（”Ｃ）　＝２１９−２２０’Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：メタノールＤ４） 　：　１．３０および１．４３（２ｓ、６Ｈ。

翔、ｐ、（Ｃ）　−１６５−１６６ ’Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：メタ／　−ルＤ４）　：　１．７７−２．３３（ｍ、２Ｈ ，ＣＨｚ−ＣＨｉ−ＣＨｚ）；　２．９３（Ｓ、６）１．ＣＨ３）　；　３．０ −３．６７（ｍ、４８．Ｃ０ＮＨ，Ｃｆ１ｔＣ且２岨２）；７．４７−７．９７ （ｓ、４Ｈ，芳香族）。

化合物基： 曙、ｐ、（”Ｃ）露２４３−２４４ ’Ｈ−ＮＭＲ（溶媒二メタノールＤ４）　：　１．８７−２．３０（＋ａ、２８ ．ＣＨｚＣＪｌｚ（：Ｈｚ）（＋＊、２１（、Ｃ０ＮＩＣＩｈ）　；　７．５０ −８．０（ｍ、４Ｎ、芳香族）。

化合物基： １１、Ｐ、　（”Ｃ）　−８８−９０ ’Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：メタノールＤ４）　：　１．３３（ｔ、６Ｈ，Ｃ旦り　； 　１．９３−２．４０（ｍ、２Ｈ，Ｃ０ＮＨＣＨｚＣ且ｚＣＩＩｚ）　；　３． ０３−３．７０（１Ｍ、８Ｈ。

Ｃ０ＮＨＣ旦ｚｃＨｚｃＨＪ　（Ｃ且ｚｃｌｈ）ｚ）　；　７．５３〜７．９７ （ａ＋、４Ｈ，芳香族）。

化合物−Ｍ−二 （Ｌ　（”Ｃ）　＝１５４−１５５ ’Ｈ−ＮＭＲ（ｉ媒：　メタ／　−ルＤ４）　：　１．３３（ｔ、６Ｈ，ＣＨ３ ）　；　３．０−３．５３（端、８Ｈ，ＣＨ２）　；　７．５０−８．１３（ｍ 、４Ｈ，芳香族）。

本発明の化合物を薬理学的および生物学的アッセイにかけた。

１、毒性研究 ＫａｒｂｅｒおよびＢｅｈｒｅｎｓにより記載された方法論に従って、分子の静 的（ｉ、ｖ、）注射の後にマウスにおいてＬＤ、。の測定を行った。

一６週齢のＯＦＩ雄マウマ ウス週齢のａｎｕ／ｎｕ　５ＳＣＵＰヌードマウス−ヒト黒色腫の異種移植片を 有するｍｎｕ／ｎｕ　５ＳＣＵＰヌードマウス において実験を行った。

ａ、誘導体へのｉ、ｖ、注射後。

６週齢のＯＦＩ誰マウマ ウス、：　７５■／ｋｇ 旦旦且：　■Ｌ亙Ｚ肱 ＬＤ＋ｏｏ　：　１５０■／ｋｇ ６週齢のｔｉ１ｎｕ／ｎｕ　５ＳＣＬＩＰヌードマウスＬＤ、：　６０■／ｋｇ 上」ｂ［：　」ｌ」Ｌ４冒 ＬＤＩ＠Ｏ：　１５０　ｇ／ｋｇ 異種移植片（Ｂｅｕ黒色腫）を有する雄ｎｕ／ｎｕ　５ＳＣＵＰヌードマウス Ｌ、Ｄ、：　６０■／ｋｇ 、］！；工ｍ　二　−９０ａζＬ二Ｑ≧１ＬＤＩ（Ｉｌ＋　：　１５０［／ｋｇ ｂ、誘導体旦のｉ、ｖ、注射後。

６週齢のＯＦＩ　Ｍマウス ＬＤｏ：　１５０■／ｋｇ ■旦■：　ＨＬ亙Ｚ組 ＬＤＩｏ。＝２００■／ｋｇ ２、オートラジオグラム 次の移植黒色腫を有するマウスにおいてオートラジオグラムを行った： ａ、Ｂ１６７ウス黒色腫を有するＣ５７　ＢＬ６ｂ、メラニン性（Ｂｅｕ）また は非メラニン性（Ｄａｕ）ヒト黒色腫の異種移植片を有するｎｕ／ｎｕ　５ＳＣ ＵＰヌードマウス。このモデルの価値は、それらのヒト腫瘍が生化学的および組 織学的性質を維持するという事実にある。

移植腫瘍を有する動物の尾静脈に、塩溶液中の塩酸塩の形の標識化合物（１０− １５μＣｉ／動物）を投与した。化合物の投与後の種々の時間間隔において（１ ５分〜２４時間）マウスをエーテルで麻酔し、液体窒素中に沈めた。

Ｕｌｌｂｅｒｇにより記載されたプロトコルに従って、凍結ミクロトーム（ＴＳ 　２６０．５ＬＥＥ）中で矢状面に平行な３０ｕｒａ切片を調製した。冷凍中で 脱水した切片を感作フィルムＵ１ｔｒｏｆｉ１１１＋’Ｈ（ＬＫＢ、　２２０Ｂ −１９０）またはＨｙｐｅｒｆｉｌＩＩｌ’Ｈ（Ａ＋＊ｅｒｓｈａｍ、　ＲＰＮ ５３５）に適用した。露出の３週間後、標準現像法に従ってフィルムを暴露した 。

Ｃ８結果 Ｂ１６黒色腫を有するＣ５７　ＢＬ６マウスにおいて１２５■−へのｉ　、　ｖ 　、　注射後１〜４時間目に腫瘍のレベルの所でフィルムの相当な且つ不均質な 暗色化を検出することができた。この不均質性は腫瘍の壊死領域に相当した。

メラニン性ヒト黒色腫の異種移植片（Ｂｅｕ）を有するｎｕ／ｎｕｓｓｃｕｐヌ ードマウスにおいて同時期に同等な像が得られた。

注射２４時間後に８１６黒色腫はまだ目に見えるが、もはやＢｅｕ腫瘍の部位に おいてフィルムの暗色化を認めることができなかった。

８１６黒色腫を有するマウスへの１！５ｉ　１３の注射の１時間後、腫瘍部位に おけるフィルムの暗色化は人の注射後のものと量的に同じくらいの大きさであっ た。より強いｉＩＩ！瘍放射能濃度では、４時間および特に６時間目において速 度論はわずかに異なった。注射の２４時間後に腫瘍はまだ目に見えるが、放射能 は全く生体内に残っていなかった。

異種移植片Ｂｅｕは注射後６時間目まで可視でき、この時点では腫瘍の周辺に沿 って一層顕著な暗色化を示した。

Ｂ１６黒色腫細胞のｉ、ν、注射後、卓越的に肺に転移しているコロニーの出現 が認められた。それらの肺コロニーは、旦の注射後１〜７時間目のオートラジオ グラムにおいて容易に可視できる。

３、動物における組織分布 移植黒色腫を有するマウスにおいて＋ｚｓｌ標識化合’ｈ　ｒｖ　ｔｄｌ織分布 の研究を実施した（上記のオートラジオグラムを参照のこと）。

それらの動物の尾静脈に、塩酸塩の形の標識化合物３マイクロモル（５〜８μＣ ｉ）を注射した。注射後１〜２４時間の様々な時間間隔で動物を犠牲にした。血 液を採血し、主要な器官を切除した。アリコートを量り、該試料の放射能をＧａ ｍｍａｔｒａｃ　１１９１カウンター（分析用トレーサー）で測定した。

ヨウ素１２５についての計数収量は６０％であった。

黒色腫を有するマウス。

結果を次のように表示したニ ー組織１ｇあたりに結合した注入線量の％とじて（χｔｏ／ｇ）　；−儒１Ｆｇ 七（ト膜　の比の形で。

この比は、器官に対する分子の選択性を正確に反映する（表２．４，６．８．１ ０および１２）。

ｎＩ左人 メラニン性黒色腫Ｂ１６およびＢｅｕを有するマウスへの人の注射後８時間目ま で、１χＩＤ／ｇより大きい腫瘍白濃度が観察され、Ｂ１６についての数値が常 に高かった。６〜１２時間の腫瘍／血液比は２種の腫瘍について２０のオーダー であった。注射後２４４時間目８１６についての比は３０よりも高かったけれど も、Ｂｅｕについての比はたった６であった（表１〜４を参照のこと）。

最初の４時間の間の比較的顕著な肺結合は、６時間目からはＬｚＩＤ／ｇ未満に なった。

この研究はまた、注射後６時間目にメラニン性黒色腫が最高の結合率および最高 の組織／血液比を示す組織にあることを観察することを可能にする。腫瘍／筋肉 、肺、脳および肝臓比（これらは全て、Ｂ１６またはＢｅｕを有するマウスへの 注射後６〜２４時聞目には１よりかなり大きい）は、転移の検査における走査研 究のために役立つ要素である。

メラニン欠乏性黒色腫（Ｄａｕ）の場合、人の腫瘍白濃度は注射後２時間の間だ けＩＸ　ＩＤ／ｇより大きいやしかしながら、１〜２４時間に１〜２の間で異な る腫瘍／血液比は、画像を得ることを可能にした（下表５〜６を参照のこと）。

遊１生旦 メラニン性黒色腫の場合、予備結果は、注射後４〜８時間目に、Ａを用いて観察 されたものより顕著に高い腫瘍白濃度および比を示す、他方で、２４時間後の濃 度および比はＡのものより低い（表７と８を参照のこと）。

更に、転移の部位になりそうな近隣の筋肉または器官に関するメラニン性腫瘍の 対比「指数」を測定しようと試みるならば、６時間目にそれらの指数の大部分が ＡについてのものよりＢについてのものが高いことが観察できることから、結果 としてこの時点で画像診断するためにはＢの使用が好ましい。

メラニン欠乏性黒色腫を有する動物における結果の分析に関係する限り、４〜６ 時間目の腫瘍白濃度はわずかに高いが、腫瘍／血液比は有意な差がない（下表９ および１０）。

誘導体Ｅ、　Ｇ、ＪおよびＬも研究した。誘導体ＡおよびＢと同様に、それらは 全て８１６マウス黒色腫のマーカーである。

誘導体Ｇは誘導体へのものと同様な排除速度論を示し、一方誘導体Ｅ、Ｊおよび Ｌは一層迅速な排除を示す。誘導体Ｅは、投与後３〜６時間目の走査における利 用可能性を示す。

４、画像診断 移植腫瘍を有するマウスをベントパルビタールナトリウム１１５のｉ、ｐ、注射 により麻酔し、そしてピンホール３−３６０照準器（感度３，２　ｘｌＯ−’） が取り付けられたシンチレーションカメラ（ＧａＩＩＩＩＩｌａｔｏｍｅ　ＩＩ 、　ＣＧＲ）の下に固定した。下記マウスへの６０〜１００μＣ１の＋ＺＳＩお よび１２３■、６．のｉ、ｖ、注射後に画像を得たニ 一種々の発達段階の８１６黒色腫を有するＣ５７　ＢＬ６マウス。

−８１６黒色腫の肺転移を有するＣ５７　ＢＬ６マウス。実際、Ｂ１６細胞のｉ 、ｖ、注射後、動物は転移に似たメラニン性肺「コロニー」を発生する。

−ヒト黒色腫ＢｅｕおよびＤａｕを有するｎｕ／ｎｕ　５ＳＣＵＰヌードマウス 。

−ＦＯＳＳ　（ＯＲＩＳ）メラニン性ヒト黒色腫を有するｎｕ／ｎｕ　５ＳＣＵ Ｐヌードマウス。

それらのヒトおよびマウスモデルの全てにおいて、良好な腫瘍の鮮明度が観察さ れた。初期の像は、相当な腹腔内（消化管、腎臓および尿）および肺の放射能の 理由で判断することが一層困難である。他方、４時間の時点から１．腫瘍像は良 質である。腫瘍内環死領域は可視化されないことに注目すべきである。本発明者 らは５閣未溝のヒト黒色腫の像を得ることができた。

特異性の研究に関する限りでは、次のマウスへのＡの注射後に全く像が得られな かったニ ーＥＭＴ６腫瘍（マウスの自発性乳癌）を有するＢＡＬＢマウス。

−異種移植片ＳＷ　９４８　（結腸の腺癌）およびＡ　４３１　（外陰の腫瘍） を有するｎｕ／ｎｕ　５ＳＣＵＰヌードマウス。

１！Ｊ−Ａを用いて行った研究は、１２ｓ■−Ａの注射後に画像診断することに より得られたデータを確証することを可　−能にした。実際に、本発明者らは、 Ｂ１６黒色腫を有するマウスおよびＢｅｕメラニン性異種移植片を有するマウス における同一の像並びにＥ？ＩＴ６腫瘍を有する動物における像の不在を観察す ることができた。

下記のマウス中へのＢの注入後の走査観察も実施したニー８１６黒色腫を有する Ｃ５７　ＢＬ６マウス。

−Ｂ　ｅ　ｕ異種移植片を有するｎｕ／ｎｕ　５ＳＣＵＰヌードマウス。

それらの２種の腫瘍モデルを有する動物中への注射後３〜１７時間目に非常に良 好な腫瘍鮮明度を観察することができた。

この生物学的研究は、次の点で本発明の誘導体が黒色腫の有用なマーカーである ことを証明する。

−それらの毒性が比較的低いこと。

−オートラジオグラムが永続する対比画像を与えること。

−８１６黒色腫を有するＣ５７　ＢＬ６マウスにおける体内分布の比較が、画像 診断のためのそれらの使用を支持すること、実際、腫瘍の部位において、結合し た割合および組織／血液比は注射後８時間まで高い。

従って、本発明の標識化合物は、特に悪性黒色腫を診断するための放射性医薬品 として有用であるが、　＋３１１での標識後にそれらの黒色腫の治療薬として使 用することも可能である。

更に、安定な同位体、例え番ｆ１９Ｆまたは＋３０を有する式Ｉの誘導体は、核 磁気共鳴（Ｍ、Ｒ，１，）において画像診断するために使用することができる。

補正書の翻訳文提出書 （特許法第１８４条の８） 平成３年８月ノ４．８

Claims (11)

【特許請求の範囲】
1. １．悪性黒色腫を診断および治療するための薬剤であって、次の一般式Ｉの化合 物： ▲数式、化学式、表等があります▼Ｉ 〔上式中、 Ｘは水素またはハロゲン原子を表し、 ＹはＺ−ＣＯＮＨ−，Ｚ−Ｏ−，Ｚ−Ｓ（Ｏ）ｎ１−（ｎ１＝０，１，２または ３），Ｚ−ＳＯ２−ＮＨ−またはＺ−ＮＨＣＯ−基を表し、ここでＺは結合、− ＣＨ２−または▲数式、化学式、表等があります▼であり、ｎは２〜４の整数で あり、そして Ｒ１およびＲ２は各々、水素原子、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリールまたはＣ６− Ｃ１２アラルキル基を表し、それらの化合物は、１２３Ｉ，１２５Ｉ，１３１Ｉ ，７５Ｂｒ，７７Ｂｒ，１８Ｆもしくは１１Ｃから選択された放射性同位体、ま たは１３Ｃもしくは１９Ｆから選択された安定な同位体により標識されている〕 並びにそれらと医薬上許容される酸との付加塩であって、ただしＹがＺ−ＣＯＮ Ｈ−を表し、Ｚが結合であり、そしてＸがオルト、メタもしくはバラ位のＦ，Ｃ ｌ，Ｂｒまたはオルトもしくはメタ位のＩを表す式Ｉの化合物、ＹがＺ−ＳＯ２ −ＮＨ−を表し、Ｚが結合であり、そしてＸがパラ位のＣｌを表す式Ｉの化合物 、およびＹがＺ−ＣＯＮＨ−を表し、Ｚが結合であり、Ｘがパラ位のヨウ素原子 を表し、そしてＲ１とＲ２がエチル基を表す式Ｉの化合物を除く前記薬剤。
2. ２．Ｘが１２３Ｉ，１２５Ｉまたは１３１Ｉを表し、ＹがＺ−ＣＯＮＨ−または Ｚ−ＳＯ２−ＮＨ−を表し、Ｚが結合、−ＣＨ２−または▲数式、化学式、表等 があります▼であり、 Ｒ２およびＲ２が各々、水素原子またはＣ１−Ｃ６アルキル基を表す式Ｉに相当 する、請求項１に記載の薬剤。
3. ３．次の一般式ＩＩの化合物： ▲数式、化学式、表等があります▼ＩＩ〔上式中、 Ｘ１はハロゲン原子またはそれの放射性同位体の１つであり、Ｙ１はＣＯまたは ＳＯ２基を表し、 ｎは２〜４の整数であり、そして Ｒ１およびＲ２は各々、水素原子またはＣ１−Ｃ６アルキル基を表す〕並びにそ れらと医薬上許容される酸との付加塩でって、ただしＹ１がＣＯを表し、Ｘ１が オルト、メタもしくはパラ位のＦ，Ｃ１，Ｂｒまたはオルトもしくはメタ位のＩ を表す式ＩＩの化合物、Ｙ１がＳＯ２を表し、Ｘ１がバラ位のＣ１を表す式ＩＩ の化合物、およびＹ１がＣＯを表し、Ｘ１がパラ位のヨウ素原子を表し、そして Ｒ１およびＲ２がエチル基を表す式ＩＩの化合物を除く化合物。
4. ４．次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （上式中、＊Ｉは１２５Ｉ，１２３Ｉ，１３１Ｉである）に相当する化合物。
5. ５．請求項３に記載の化合物の調製方法であって、式ＩＩＩのハロゲノ安息香酸 クロリドまたはハロゲノベンゼンスルホン酸クロリド： ▲数式、化学式、表等があります▼ＩＩＩ（上式中、Ｘ１とＹ１は式ＩＩのもの と同じ意味を有する）を式ＩＶのジアミン： ＮＨ２−（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ１Ｒ２ＩＶ（上式中、ｎ，Ｒ１およびＲ２は式ＩＩ のものと同じ意味を有する）と縮合せしめ、次いで所望により、得られた構造体 （ＩＩ）をハロゲンＸ１の放射性同位体で標識することを含んで成る方法。
6. ６．Ｙ１＝ＣＯである請求項３に記載の式ＩＩの化合物の調製方法であって、式 ＩＩＩのハロゲノ安息香酸クロリド：▲数式、化学式、表等があります▼ＩＩＩ （上式中、Ｘ１とＹ１は式ＩＩＩのものと同じ意味を有する）をバラニトロフェ ノールと縮合させて式Ｖのエステル：▲数式、化学式、表等があります▼Ｖ を生成せしめ、次いで化合物Ｖを式ＩＶのジアミン：ＮＨ２−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ Ｒ１Ｒ２ＩＶ（上式中、ｎ，Ｒ１およびＲ２は式ＩＩのものと同じ意味を有する ）と反応させ、次いで所望により得られた構造体をＸ１の放射性同位体で標識す ることを含んで成る方法。
7. ７．核磁気共鳴画像診断において使用される１９Ｆまたは１３Ｃで標識された請 求項１に記載の薬剤。
8. ８．悪性黒色腫の診断および／または治療薬の調製のための、次の一般式Ｉ： ▲数式、化学式、表等があります▼Ｉ 〔上式中、 Ｘは水素またはハロゲン原子を表し、 ＹはＺ−ＣＯＮＨ−，Ｚ−Ｏ−，Ｚ−Ｓ（Ｏ）ｎ１−（ｎ１＝０，１，２または ３），Ｚ−ＳＯ２−ＮＨ−またはＺ−ＮＨＣＯ−基を表し、ここでＺは結合、− ＣＨ２−または▲数式、化学式、表等があります▼であり、ｎは２〜４の整数で あり、そして Ｒ１およびＲ２は各々、水素原子、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリールまたはＣ６− Ｃ１２アラルキル基を表し、それらの化合物は、１２３Ｉ，１２５Ｉ，１３１Ｉ ，７５Ｂｒ，７７Ｂｒ，１８Ｆもしくは１１Ｃから選択された放射性同位体、ま たは１３Ｃもしくは１９Ｆから選択された安定な同位体により標識されている〕 並びにそれらと医薬上許容される酸との付加塩の用途。
9. ９．Ｘが１２３Ｉ，１２５Ｉまたは１３１Ｉを表し、ＹがＺ−ＣＯＮＨ−または Ｚ−ＳＯ２−ＮＨ−を表し、Ｚが結合、−ＣＨ２−または▲数式、化学式、表等 があります▼であり、 そしてＲ１およびＲ２が各々、水素原子またはＣ１−Ｃ６アルキル基を表す式Ｉ に相当する化合物の、請求項８に記載の用途。
10. １０．次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （上式中、＊Ｉは１２５Ｉ，１２３Ｉ．１３１Ｉである）に相当する悪性黒色腫 を診断および治療するための放射性医薬品の用途。
11. １１．悪性黒色腫の診断および／または治療薬の調製のための、一般式ＩＩ： ▲数式、化学式、表等があります▼ＩＩ〔上式中、 Ｘ１はハロゲン原子またはそれの放射性同位体の１つを表し、Ｙ１はＣＯまたは ＳＯ２基を表し、 ｎは２〜４の整数であり、そして Ｒ１およびＲ２は各々、水素原子またはＣ１−Ｃ６アルキル基を表す〕に相当す る化合物並びにそれらと医薬上許容される酸との付加塩の用途。